البكتريا للتعرفعلى الكيموحيوية اإلختبارات

Biochemical tests of bacteria

بالنشاط عالقة له يكون وذلك تنوعا" الحية الكائنات أكثر من البكتريا أن معلوم هو كماالبكتريا تلك تحتويها التى اإلنزيمات باألساسبنوعية مرتبط هو والذى منها لكل الكيموحيوى

البيئة بداخلها فى تفرزها التى .والنشاط بتتبع التعرفعليها يمكننا فإننا لدينا مجهوله بكتيرة التعرفعلى أردنا ما إذا ولذلك

. لها والتىصممت الكيموحيوية بعضاإلختبارات بعمل وذلك البكتيرة تلك به تقوم التى الحيوىتلك يبعضالب من عدد شرح يلىسيتم وفيما ، البكتريا فى التفاعالت تلك تتبع لتسهيل ئات

إجرائها وكيفية .اإلختبارات

ريد -1 الميثيل بروسكاور – إختبار فوجسMethyl Red and Voges-Proskauer Tests (MR-VP)

تسمى التى المعوية البكتريا من عدد بين للتفرقة يستخدما التخمريين اإلختبارين هذين. Coliformsالكوليفورم

ال بيئة هى اإلختبار هذا فى المستخدمة تحتوى Dextrose phosphate brothالبيئة وهىللكربون . وحيد كمصدر الدكستروز على

تسبب والتى حامضية نواتج إلى الدكستروز تخمير تستطيع بكتيريا بعضالكوليفورمأقلمن pHإنخفاضال مختلط pH= 5لنقطة حامضى تخمر يسمى mixed acidوهذاfermentation.

وهذا وتحضينها تلقيحها بعد للبيئة ريد الميثيل دليل إضافة يتم ريد الميثيل إختبار فىتحت لألحمر لونه يتحول التخمرالذىحدث .pH = 4.4الدليل نوع على يدلل والذى

أقل أخرى لنواتج وتحويله الدكستروز تخمير تستطيع الكوليفورم من أخرى أفراد هناكالبيوتانديول أو اإليثانول مثل الميثيل butandiolحامضية إلختبار سالبة تكون البكتريا تلك

. الفوجسبروسكاور إختبار يجرى النوع هذا وللكشفعن ، ريدال : الكشفعن يتم الفوجسبروسكاور إختبار عنطريق butandiol fermentationفى

ال ال acetoin (acetyl methyl carbinol)الكشفعن هو للبيوتان precursorوالذى ول.ديللوكال ريد الميثيل إختبار فى المستخدمة نفسها هى اإلختبار هذا فى المستخدمة البيئة

. تسمى يضافجواهر األختبار هذا وفى نفسالوقت فى يجريا قد barritt'sاإلختبارينreagents ) نافثول ) –ألفا مزرعة إلى يضافا الجوهرين وهذين بوتاسيوم هيدروكسيدبعد 48عمرها أحمر إلى بنفسجى لون وظهور جيدة تهوية لحدوث األنابيب ترج ثم ساعة

البيوتانديول ألنتاج موجب التفاعل أن على يدلل .الرج

العمل :خطواتعلى- 1 تحتوى إختبار أنبوبة بواسطة 10لقح بروث فوسفات الدكستروز بيئة من مل

إختبارها . المراد البكتريالمدة- 2 على 48حضن ).37ساعة تلقيح ( بدون كنترول إنبوبة يجبعمل مئوية درجة

ريد :** الميثيل انقل إختبار التحضين مدة إنتهاء نظيفة 1بعد إختبار أنبوبة إلى البيئة من مل . ألنبوبة ريد الميثل دليل النقاطمن من أضفعدد ثم الفوجسبروسكاور إختبار إلجراء

. النتائج المكوناتوسجل أخلط ثم األصلية المزرعةبروسكاور** الفوجس ثم 0.5أضف : إختبار األنبوبة إلى نافثول األلفا جوهر من ملمن 0.5مل

لحين تقريبا" ساعة لمدة وذلك جيدة تهوية لعمل جيدا" وأخلط البوتاسيوم هيدروكسيد. بنفسجى او أحمر لون ظهور

2-:( التريبتوفان ( تحلل اإلندول إختبار

نهائىمحدد ناتج وإنتاج لبعضاألحماضاألمينية مائى تحلل عمل على الميكروبات قدرة. البكتيريا للتعرفعلى كوسيلة تستخدم

إنزيم بواسطة وامونيا أسيد وبيروفيك إندول إلى مائيا" يتحلل كمثال التربتوفان . tryptophanase التريبتوفانيز

تستخدم . واألمونيا الطاقة من كبيرة كمية عنه وينتج ذلك بعد غذائيا" يمثل قد البيروفيك. األحماضاألمينية تخليق عمليات فى

جوهر بواسطة وجوده الكشفعن ممكن أمينو ( ehrlichأو kovacاألندول ميثيل داى بارا. ( األندول وجود فى أحمر لون يعطى الذى كحول فى مذاب بنزالدهيد

: التجربة خطوات

بيئة -1 على تحتوى أنبوبة .tryptone broth(1%) لقح المختبر الميكروب بواسطةلمدة- 2 على 48حضن م .37oساعةجوهر 10أضف- 3 )kovacنقاطمن العليا . ( الطبقة الكحول طبقة فى أحمر لون ظهور

. األندول ألنتاج موجب المختبر الميكروب أن عن يعبر

3-: السترات من األستفادة إختبار

السكريات غير األخرى العضوية المركبات إستخدام على قادرة تكون قد بعضالبكتريا . فى مفيد يكون كمثال السترات من األستفادة على القدرة البيئة فى للكربون وحيد كمصدر

ال بين . Enterobacteriaceaeالتفرقةال وأمالح simmons citrate agarبيئة للكربون وحيد كمصدر السترات على تحتوى بيئة هى

السترات . من األستفادة تستطيع التى الميكروبات للنيتروجين وحيد كمصدر األمونياال رفع فى تتسبب والتى البيئة فى األمونيا تنتج األمونيوم تكون . pHوأمالح البيئة وهذه

. ويكون أخضر لونه يكون التعادل عند الدليل هذا كدليل بلو البروموثايمول دليل على محتويةعند داكن ازرق األزرق. 7.6أعلىمن pHلونه إلى األخضر من البيئة لون تغير لو وبالتالى

وحيد كمصدر السترات من األستفادة على المختبر الميكروب قدرة على دليل هذا يكونللكربون.

: األختبار خطوات

فى -1 المحضرة البيئة علىسطح المختبر الميكروب خطط معقمة تلقيح أبرة بإستخداممائل أجار .صورة

على -2 لمدة 37حضن مئوية .48درجة ساعة ال؟ . -3 ام والدليل البيئة لون فى تغير هناك وهل النمو أختبر

ال- 5 غاز إنتاج : H2S إختبار

كبريتيد لغاز إنطالق عنه ينتج عادة" الكبريتية األحماضاألمينية على بعضالبكتيريا نشاطتعرضورقة. عند اللون الرصاصسوداء أمالح بتكوينه يختبر ما عادة" الغاز وهذا الهيدروجين

. للتعرف الوسائل إحدى أيضا" الغاز هذا إنتاج على والقدرة الغاز الرصاصلهذا بخالت مشبعة. بينها والتفرقة البكتيريا على

: األختبار خطوان

ب ( -1 مدعمة ببتون ماء بيئة األساسية البيئة ) 0.01لقح بواسطة% سستين او سستئين. األختبار موضع المزرعة

الدليل -2 ورق والسدادة INDICATOR PAPERأدخلشريطمن األختبار أنبوبة زجاج بين ) . الدليلهىشريط ورقة البيئة مستوى فوق الورقه طرف يكون أن مراعاة مع القطنية

( يعقم يجففثم الرصاصثم خالت محلول بواسطة المشبع الترشيح ورق منعلى -3 لمدة 37حضن أيام 5-2درجة

ورقة -4 على الرصاصالسوداء أمالح تكون يسبب الهيدروجين كبريتيد غاز وإنطالق أنتاج. الرصاص خالت