األحياء الدقيقة

تركيب وصبغ الخلية البكتيرية

د يوسف الشريك

تركيب الخلية البكتيريةBacterial cell structure

الميكروسدكوبا مثد الخلية البكتيرية متناهية في الصغر ولكن بتقدد وتودور اهزةد •

الضددوةية واكلكترونيددة والسلورسددنتية والوددري البيوكيمياةيددة فقددد جمكددن دراسددة جز اةةددا المختلسة

خلية البكتيرية من الوبقة السوحية والبروتوبالس ، وتشم الوبقدة السدوحية تتركب • وزدار الخلية ( الكبسو )السالزال والبللي والوبقة الل زة

البروتوبالس فإنه يقد بدداخ الزددار الخلدوت ويتكدون مدن الغشداو السديتوبال مي جما •

والسددديتوبال والمددداد النوويدددة والمدددواد المخ ندددة والريبوسدددوما والسزدددوا وكددد لك . الزراثي الداخلية في البكتيريا المتزرثمة

من و نةدا بينمدا % 85-70والمحتوت الماةي للخلية يصـ إلى •مدن و ن الخليدة وتد داد % 30-15تتراوح المدواد الصدلبة مدن

ه ه النسدبة ب يداد المدواد المخ ندة فدي الخليدة مثد البدولي بيتدا هيدروكسددددي بيددددوترا والبددددولي سددددكريا والبددددولي فوسددددسا

.والكبري

، % 50وتتكون الماد الصلبة في الخلية جساسا مدن البدروتين •، RNA 10-20 % ،DNA 3-4%، % 20-10زـدار خلدـوت

% 10اللبيدا

جما العناصر العشر الكبرى الداخلة في تركيب الخلية فإن نسبتةا •% 14جكسدزين ، % 20كربدون ، % 50المةوية في المتوسدو

لكددد مدددن % 1فوسدددسور ، % 3ايددددروزين ، % 8نيتدددروزين ، لكددددددد مدددددددن % 0.5الكبريددددددد والكالسددددددديو والبوتاسددددددديو ،

. الماغنسيو والحديد

Bacterial surfaceالوبقة السوحية : جوك Flagellaالسالزال . 1

هي جعضاو الحركة في الكثير من البكتريا ، وهدي عبدار عدن جسدواو خيويدة

، *Flagellinوويلددة مكونددة مددن بددروتين مددن نددوال خددا يسددمي فالزلددين

وتنشددا السالزددال مددن زسدد ناعددـدت منغددرا فددي الزدددار الخلددوت والغشدداو . السيتوبال مي وتمر في الزدار ليمتد السـوو الخيوي وويـال خـارج الخلية

Flagellin* is a globular protein that arranges itself in a hollow cylinder to form the filament in bacterial flagellum It has a mass of about 30,000 to 60,000 .daltons Flagellin is the principal substituent of bacterial flagellum, and is present in large amounts on nearly all.

البكتيرية جسواو صبغ• -:يلي ما اهسواو صبغ جهداف جه من•

.اهسواو مشاهد 1.

.ومونعةا اهسواو ترتيب2.

.البكتيريا جنواال على للتعرف اهسواو تستعم 3.

-:التالية البكتيرية جسواو صبغ جساسيا جه ومن4.

صبغةا يمكن ك الكسر، وسريعة زدا، رفيعة اهسواو تعتبر5.

.العادية بالصباغا

.نورها من لت يد معينة، وصبغة تقنية إلى اهسواو تحتاج 6.

جو المعلقة، القور وريقة عن البكتيريا، حركة مالحظة يمكن7. .اهسواو، صبغ وريق عن

:وريقة العم •

، بتنظيف اهسواويزب جخ الحيوة والعناية الساةقة؛ لمن فقد • .الشراةح زيدا، م تداو البيةة البكتيرية بعناية كبير

، حيث تنمو البكتيريا، الصلبة اآلزارتؤخ نوعة من وسو بيةة • .م عد لما الم رعة باليد

برفق على الشريحة بحيث تكون موازةة اآلزارتوض نوعة • .الوبقللنمو، ترف تلك القوعة وتعاد إلى

.تترك البكتيريا الملتصقة بالشريحة•

.تزسف بالةواو، دون استعما الحرار •

المثب لمد Tannic acid التانيكتغمر الشريحة بحامض • .عشر دناةق

.تغس الصبغة برفق بالماو المقور•

، Carbolfuchsin كاربولسوكسينتغمر الشريحة بصبغة •

.لمد خمسة دناةق

.تغس برفق بالماو المقور•

بالةواو تترك اللوخة تزف •

المالحظا تسح الشريحة تح المزةر وتسز •

Piliالبيلي . 2، وهي عبار عن واةد خيوية تنشا جيضا من الغشداو Fimbriaeوتسمي جيضا السمبريا •

.السيتوبال مي ، وهي جنصر في الوو من السالزال وليا لةا عالنة بالحركة . Pilinمكونة من بروتين خا يسمي وهي • . نوعين من تلك ال واةد ويوزد •

العادت وهو يساعد البكتريا المتوسلة على اكلتصاي بسوح النبدا جو زلدد الحيدوان النوال •

.العاة

والندوال . تساعد البكتريا الةواةيدة علدى تكدوين غشداو علدى جسدوح اهوسداو السداةلة كما • conjugationويلعدب دورا فدي التد اوج الزنسدي فدي البكتريدا Pili – Fالزنسدي ويسدمي

مدن خليددة البكتريددا –مدن خددال التزويددف الدداخلي لةدد ه ال واةدد –بانتقدا المدداد النوويدة

. الم كر إلى المؤنثة

Electron Micrograph

of Escherichia coli

with Pili

Electron Micrograph of

Escherichia coli with a

Conjugation Pilus

Slime layer or capsule جو العلبة الوبقة الل زة. 3•

تحدداو الخليددة البكتيريددة بوبقددة هالميددة ل زددة يختلددف سددمكةا بددإختالف النددوال فقددد تكددون •

غشداو رنيقدا فدي بعددض اهندواال وندد تكددون غشداو سدميكا فدي جنددواال جخدرت وتسدمي علبددة Capsule كان تركيبةا متماسك ا ا

يص سمكةا إلى جكثر من ضعف الخلية وتحيو العلبة بالخليدة المنسدرد جو بالسلسدلة وند • . من الخاليا إ ا كان التزم في سالس

وإ ا كددان تركيبةددا صددلب Slimeمسكددك فتسددمى هددال جو وبقددة ل زددة تركيبةددا كددان وإ ا •

Shethتسمى الغمد

تصبغ علبة البكتريدا فدي التحضديرا المصدبوغة بدالوري العاديدة حيدث تظةدر الخليدة وك •

محاوة بمنوقة غير مصبوغة هي الغالف ل لك يستعم لصبغ العلبة وري خاصة وتتركب

ماد العلبة في معظ الحاك من مواد كربوهيدراتية معقدد عديدد السدكريا وفدي بعدض . اهنواال تدخ اهحماض اهمينية في تركيبةا

تظةر الخلية محاوة بمنوقة غير مصبوغة هي الغالف

جهمية العلبة•مدددن جمثلدددة الميكروبدددا التدددى تكدددون العلبدددة •

Leuconostoc mesenteroides و Streptococcus pneumoniaميكروب

وجهميددددة العلبددددة للخليددددة جنةددددا تحميةددددا مددددن •الظددروف البيةيددة السدديةة خصوصددا الزسدداف

وتلصق الخاليا بعضةا ببعض

ووزود الغالف لده تداثير واضدح علدى مظةدر • الم ارال البكتيرية ،

وللعلبددة جهميددة كبيددر فددي حالددة الميكروبددا •المرضية حيث تدرتبو القددر المرضدية لةد ه الميكروبددا بوزددود العلبددة ويرزدد لددك إلددى جن العلبة تحمي الميكدروب مدن هزدو كدرا الددددد البيضدددداو واهزسددددا المضدددداد بزسدددد العاةددد وبددد لك يسدددتمر فدددي تكددداثره وإحدددداث

المرض

. كما تسيد في التميي بين اهنواال وبعضةا •

•Leuconostoc mesenteroides. 1. (Leuconostoc mesenteroides is a

coccus 2. participating in the fermentation

of sauerkraut. 3. If it invaded older sugar factories,

it caused problems by producing exocellular polysaccharides in sugar

•Streptococcus pneumonia • Various diseases are caused by bacteria’s that can be

prevented easily. .1 Strep pneumoniae is a bacterium that causes numerous

infections in the body affecting the major body organs such as the heart.

.2Causes swelling of the lining surrounding the heart posing a great danger to the infected person.

.3It also causes inflammation of the lungs from the inside

Streptococcus pneumonia

Capsule Stain الكبسوك صبغ• يكون عندما ) الكبسولة لتوضيح السالب، الصبغ استخدا يمكن•

جو بيضاويا بسوحةا، يلتصق وال ت البكتيرية، الخلية حو (داةريا الكبسولة كون حالة في مخاوية وبقة وتعوي ل زة، وبقة مكونا .الشك منتظمة غير

-:يلي ما البكتيرية الكبسوك لصبغ جساسيا جه من • عديد من تتكون هنةا البكتيرية، الكبسوك صبغ الصعب من1.

.البيبتيدا وعديد السكريا ، كةرباةية، شحنا تحم وك الماو، في ت وب ك الكبسوك معظ 2.

.معةا ترتبو ك البسيوة الصبغا ه ه فإن ل لك وبسبب تصبغ الكبسولة؛ عن الكشف في تستعم التي الصبغ وري جغلبية3.

.الكبسولة تصبغ وك بةا، المحيو والوسو البكتيريا فقدان تسبب الحرار هن لتثبيتةا، بالحرار اللوخة تعام ك4.

.الكبسولة

:العم وريقة• جحد من ، تمسك ث بالةواو، وتزسف بموةر الشريحة تنظف1.

. واياها ، K. pneumoniae بكتيرية بيةة من عينة تؤخ 2.

لتزةي الشريحة سوح على وتض النان ، عقد بواسو .اللوخة

.الحرار استعما بدون بالةواو، لتزف اللوخة تترك3.

.دناةق 10 – 5 لمد crystal violet بصبغة اللوخة تغمر4.

، CuSO4النحاا كبريتا بمحلو بلوف اللوخة تغس 5. . ال اةد crystal violet الصبغة من للتخل

.الشريحة محتويا تزسف6.

بنسسزي، لونةا الخاليا وتالحظ المزةر، تح الشريحة تسح 7. لون ويكون اللون، عديمة جو اللون، باهتة رناو بةالة محاوة ل لك بنسسزي (اهرضية )الخلسية (التالي جنظرالشك ) جيضا

الداخلية( السبورا ) اهبواغصبغ •

، داخ خلية اهبواغ، لتحديد موان السبورا الصبغ يستخد •الداخلية هي لألبواغالبكتيرية، ومن جكثر اهنواال المكونة

-:التالية، لألسباب والباسيليا، كلوستيريديو بكتيريا

الداخلية غير نشوة، ومقاومة للظروف غير مناسبة اهبواغ•، جو جت ظروف بيةة الكيماويا للبكتيريا، سواو من الحرار جو

.جخرى

ليس وسيلة للتكاثر، وتبقى البكتيريا في حالة سكون، اهبواغ• .مواتيةوالما استمر الظروف غير

.في عملية تصنيف البكتيريا اهبواغتستخد •

.الصبغا غير منس لمعظ اهبواغ•

.تستعم الحرار لتثبي الصباغا •

ويظةر البوغ داخ الخلية الخضرية. محاو بغالف البوغ DNA كحظ ( 53)شك

وسوف تسقد الخلية ز و الخضرت منةا م مرور الون

العم وريقة•

. زازيتان شريحتان تنظف1.

،سابتيلا لباسيليا بكتيريتين، بيةتين من لوخه زة 2. ساعة،72 واهخرى ساعة، 24 – 18 جحدها عمر

.بالحرار وتثب بالةواو، تزسف3.

اللوخة، على الترشيح وري من صغير نوعة توض 4.

الكام التبخر لمن ،مالكاي جخضر صبغة إضافة نب

في وعليه ،اهبواغ إلى تسربةا نب وزسافةا للصبغة،

غشاو تمدد على التسخين يساعد اهحوا ، زمي

وتبقى الداخ ، إلى الصبغة بدخو ويسمح ، اهبواغ .بالتبريد البوغ داخ الصبغة

.MALACHITE GREEN مالكاي تغمر اللوخة بصبغة جخضر •

، ويضاف م يد من الصبغة، دناةق 5تسخن على البخار لمد •

.كلما جحتاج اهمر ل لك

، وتغس اللوخة بالماو المقور مناسب ترمى الورنة في مكان •

.زيدا

.لمد نصف دنيقة السسرانينتضاف صبغة •

.تغس الشريحة بالماو المقور وتزسف•

(.جنظر الشك التالي) تسح الشراةح تح المزةر•

اهبواغتقارن النتاةج م شراةح الزاه ، ويالحظ موان •

( .55)في الخاليا المختلسة شك

وريقة صبغ السبورا ، ومثا على موان المختلسة للسبورا كما ( 54)شك

.الشك هو موضحه في الداةر جسس

• Some G+ bacteria form resistant structures called SPORES under adverse conditions.

• Spores are the most RESISTANT life form known.

• They are able to survive boiling in water at 100oC for long periods.

• Spores are resistant to UV-light, to drying and many harmful chemicals.

• We know spores can live for 100s of yr. and recently spores several million yr. old have been revived from insects trapped in amber

: Cell Wallزدار الخليـــة . 4• Rigidللبكتيريا الحقيقية زدار خلوت عبار عن غشاو صلب 1.مددن % 20نددانوميتر ويمثدد حددوالي 20-10ويتددراوح سددمكه مددا بددين 2.

. الو ن الزاف للخلية الزدار الخلوت للصبغ بالوري العادية نليلة وب لك فإنه ك يشداهد ونابلية 3.

إك باسددتعما وددري صددبغ خاصددة تددتلخ فددي معاملددة الخاليددا بحمددض

التانيددك الدد ت باتحدداده مدد المددواد المكونددة للزدددار ي يددد مددن سددمكه ومددن نابليته للصبغ

الخلوت في البكتريا الحقيقة صلب نادر على تحم اكختالف في والزدار 4. . الضغو اهسمو ت بين محتوت الخلية والوسو ال ت يعيش فيه

الزددددار الخلدددوت ترزددد جساسدددا لوزدددود تركيدددب معقدددد مدددرتبو مددد وندددو 5.وهدددو مركدددب مدددن عددددد مدددن Peptidoglycanمركبدددا جخدددرت يسدددمي

بعضدددددةا كربوهيدراتيدددددة Heteropolymerوحددددددا متعددددددد معقدددددد

. والبعض اآلخر جحماض جمينية

والكربوهيدددرا الداخلددة فددي تركيبدده عبددار عددن مددركبين همددا 6.-N واآلخدر هدو N-acetyl glucose amineالسكر اهميندي

acetyl muramic acid موزودين في تتداب تبدادلي مرتبودة . زليكوسيدية 4-1ببعضةا بروابو بيتا

ويزدددب جن نالحدددظ جن المركدددب الثددداني ك يوزدددد فدددي التركيدددب 7.الزدددارت للخاليددا اهرنددي جت جندده يوزددد فقددو فددي تركيددب الزدددار

ومدن حيدث اهحمداض اهمينيدة Procaryotic cellالخلوت للدـ الداخلة في تركيب الزدار فةدو يحتدوت علدى اهند علدى الدثالث

alanine, glutamic, diaminopimellicجحماض اهمينيدة diaminopimelicوالحامض اهميني

ك يوزددددد اجبدددددا فددددي تركيددددب البددددروتين ممددددا يميدددد الكاةنددددا 8.Procaryotes عدن غيرهدا مدن الكاةندا وهدي صدسة تقسديميه

. هامة

: جهمية زدار الخليـــــة يحسددظ الزدددار للخليددة البكتيريددة شددكلةا المميدد كمددا جندده نظددرا 1.

لصددالبته يحمددي الخليددة مددن الظددروف الخارزيددة ومددن اكنتسددا

. التركي اكسمو ى عندما تنمو فى المحالي الغ اةية المنخسضة

يتحك في نوال الز يةا التدي تمدر خدال ثقوبده تبعدا لحزومةدا 2.

ولكددددن لدددديا لدددده خاصددددية النسا يددددة اكختياريددددة مثدددد الغشدددداو

. السيتوبال مي

مسةو مباشر عن إيزابية جو سلبية الصبغ بزرا وهي صدسة •

تقسددديميه هامدددة جخدددرت حيدددث ك يسدددتوي الكحدددو إ الدددة معقدددد

اليددود فددي الخاليددا الموزبددة فتظدد محتسظددة بلونةددا –الزنسدديان

البنسسزي

ي يدد الكحددو المعقددد مددن الخاليددا السددالبة وبالتددالي تاخدد بينمددا •

السوكسين اللون اهحمر عند صبغةا بالصسرانين جو

ومما يؤكد مسةولية الزدار عن نتيزة الصبغ بزرا فإن الخاليدا •

الموزبددة تسقددد اللددون البنسسددزي عنددد معاملتةددا بواسددوة إندد ي Lysozyme (ه ا اكن ي يحل الزدار الخلوت للبكتريا . )

كما ند تحتوت وبقا الخلية السوحية فدي بعدض البكتريدا علدى 3. ر 90حمددددض دهنددددي بدددده ) Mycolicحددددامض المايكوليددددك

.وهو المسةو عن الصبغ الصامد لألحماض ( كربون

,Spirochaetesيزدددر بالدد كر جن البكتيريددا التابعددة هنسددا 4.Myxobacteriales وتسدددمى لددديا لةدددا زددددار خلدددوت صدددلب

Archeabacteria .

Peptidoglycan

من الببتيدوزلوكان

صبغ البكتريا بصبغة زرا • جن كحظ عندما ،1884 في زرا هانا الوريقة ه ه اكتشف •

وتستعم .منةا ال اةد من التخل عند ،الصبغة لون تسقد البكتيريا ،البكتيريا وتصنيف تشخي في الوريقة ه ه

.الزرا لصبغة وموزبة ، سالبة مزموعتين، إلى وتقسيمةا• الزدار لمكونا والسالبة، الموزبة الصستين بين السري ويرز .البكتيرت الخلوت

-:هي خووا جربعة على الوريقة ه ه وتعتمد• البكتيريا زمي لصبغ ،(Crystal violet ) الرةيسية الصبغة استخدا 1.

.البنسسزي باللون الرةيسية الصبغة بين اهيونية الروابو ل ياد ،Iodine اهيودين يستخد 2.

.والبكتيريا

يستخد الكحو اهثيلي، جو اهسيتون كماد م يلة للصبغة من بعض 3. .، بينما تحتسظ البعض منةا بلونةاالبكتيريا

، في صبغ البكتيريا التي فقد صبغتةا Safranin السسرانينتستخد ماد 4. .بالكحو جو اهسيتون، باللون اهحمر

تسددمى البكتيريددا التددي فقددد لددون الصددبغة الرةيسددية بكتيريددا •سدددالبة لصدددبغة الزدددرا ، جمدددا التدددي احتسظددد بلدددون الصدددبغة

.الرةيسية تعرف باس بكتيريا الموزبة لصبغة الزرا

:الزرا نظرية آلية صبغة • -:التاليةتعتمد ه ه النظرية على النقاو •

تختلف البكتيريا لتقبلةا الصبغة الرةيسية والصبغة 1. .الثانوية

زدار الخلية الموزبة لصبغة الزرا ؛ جكثر سمكا 2.، الزرا من زدار خلية البكتيريا السالبة لصبغة

.من حيث التركيب الكيمياةي

،على وبقة الزرا يحتوت زدار البكتيريا الموزبة لصبغة •

، جكثر سماكة من زدار البكتيريا بيبتدوزلوكان سميكة من (.47)الشك جنظر السالبة لصبغة الزرا

جو السالبة الصبغة آلية تسسير يمكن النظرية، على وبناو• -:كالتالي الزرا لصبغة الموزبة

وبقة على الزرا ، لصبغة الموزبة البكتيريا زدار يحتوت• م مرتبوة السكريا متعدد ) بيبتيدوزلوكان من سميكة

زدارها، وانكماش إ الة الكحو لةا يسبب التي ،(البيبتيدا تصبغ ث ومن الرةيسية، الصبغة فقد معد من يخسض بحيث .البنسسزي اهساسي باللون

الزرا ، لصبغة السالبة بكتيريا لزدار الخارزي، الغشاو يحتوت• ودهون السكريا ومتعدد البروتين، على محتوية وبقا على

من سميكة غير ووبقة السكريا ، بعديد مرتبوة الكحو يقو ت ومن خارزي، بغشاو محاوة ،بيبتيدوزلوكان

، اهساسية الصبغة فقد من ي يد مما الدهون، إ ابة جو بإ الة، .(اهحمر) الثانوية الصبغة بلون زدارها ويتلون

العم وريقة•

24 من جن عمرها حديثة بيةة من البكتيرية اللوخة تحضير يزب•

.ساعة

.زيدا تنظيسا شراةح ثالث تنظف–

الشراةح من شريحة ك على السسلي، السوح على داةر يرس – .منةا ك على البيةا جسماو كتابة ،م الثالثة

.شرحةا سبق التي بالوريقة البيةا ، من لك لوخة تحضر–

-:كاآلتي وهي الصبغ وريقة•

نصف لمد وتتركةا ،Crystal violet بصبغة اللوخة تغمر1.

.دنيقة

غير بوريقة ثانية، 2 لمد المقور، بالماو بعناية الشريحة تغس 2. .(اللوخة على مباشر الماو تسليو عد ) اللوخة فوي المباشر

لمد اليود بمحلو اللوخة تغمر الشريحة، تزسيف بدون3. .دنيقة

إلى إثيلي كحو %95 يضاف الشريحة، غسي بدون4. بين ما لمد اللوخة، على لينساب ويترك الشريحة،

من كبير كميا خروج تونف حين إلى ثانية، 20 -10 إ الة مد وتعتمد ،(ثوان بض بعد غالبا) اهساسية الصبغة والخبر اللوخة، سمك جهمةا كثير ، العوام على الكحو .وصبغةا اللوخة تحضير في العملية

.دنيقتينالشريحة مباشر بالماو المقور، لمد تغس 5.

.ثانية 20 لمد وتترك ،السسرانين الثانوية الصبغة تضاف6.

وتزسف ثانية، 2 لمد المقور، بالماو ال اةد الصبغة تغس 7. .نشاف بوري

.لتزف تترك 8.

تسح الشريحة بالمزةر تح العدسا المختلسة، وتسز • (.48الشك )المالحظا

صلبة شبه النمو جوساو في البكتيريا حركة• من نليلة كميا على المحتوية صلبة، شبه النمو اهوساو تستخد •

حركتةا، اختبار المراد بالبكتيريا النمو الوسو ويحقن اآلزار ماد نةايتةا في عقد بدون)حقن إبر بواسوة النمو، الوسو داخ معينة، منية لمد اهنابيب وتحضن ، النمو جنابيب في (57شك

حصل التي التغيرا المالحظة بمزرد مباشر المالحظا وتؤخ . الغ اةي الوسو في

داةرية حلقة نةايته في توزد ك جنه كحظ الحقن إبر (57)شك

الغ اةي، الوسو في اآلزار من القليلة التركي ا تسمح •

الوعن، منوقة خال من محدود بحركة البكتيريا بتحرك

منوقة في النمو تسرال حدوث نتيزة الحركة وتحدد

جمالح مث معينــــة صبغة إضافة ويمكن الوعن، تسرال لمالحظة ،Tetrazolium salt (TTC) تترا يوليو

.(اللون فزلي) الساتح اهحمر بلون النمو

بنسا وتسحب مستقيمة، بوريقة اإلبر حقن يزب •

.(التالي شك جنظر) زيد نتاةج على للحصو الوريقة،

الحركة على البكتيريا ندر اختبار••Motility Determination

على للتعرف الحركة، على البكتيريا ندر اختبار وريقة تستخد • لك، على اختبار لةا يزرى حيث ،(الزنا ) النوال مزةولة بكتيريا

من نوعان وهناك المزةرت، الحق خال حركتةا مدى مالحظة ويت :وهما الحركة

.(آخر إلى مكان من الحركة ) فعلية حقيقة حركة–

.(ونية برا حركة) ارتزاج جو اهت ا ا شك على كا بة حركة–

وهي الحركة على البكتيريا ندر معرفة بةا يمكن وري عد توزد• -:كاآلتي

Wet-Mount الروبة الوريقة•

Hanging Drop المعلقة النقوة وريقة•

Culture Method الم رعية الوريقة•

المعلقة النقوة ووريقة المبتلة جو الروبة وريقة شرح سبق لقد •

الوسو في اآلزار من القليلة التركي ا تسمح•

خال من محدود بحركة البكتيريا بتحرك الغ اةي،

الوعن، منوقة

منوقة في النمو تسرال حدوث نتيزة الحركة وتحدد •

جمالح مث معينــــة صبغة إضافة ويمكن الوعن، لمالحظة ،Tetrazolium salt (TTC) تترا يوليو

.(اللون فزلي) الساتح اهحمر بلون النمو تسرال

بنسا وتسحب مستقيمة، بوريقة اإلبر حقن يزب • .(58شك ) زيد نتاةج على للحصو الوريقة،

Isolation Techniquesالبكتيريا ع تقنية• Streak Plate Method اهوباي بتخويو الع وريقة •

of Isolation

-:اهوباي بتخويو البكتيريا ع من الةدف •

من نقية، مستعمرا على للحصو الوريقة ه ه تستخد • لألسباب و لك اهخرى، اهنواال من عديد على محتوية بيةة

-:التالية

اكنتشار واسعة الوريقة ه ه تعتبر1.

البيةة، في الدنيقة اهحياو وكثافة جعداد لخسض تستخد 2. .المرغوبة غير اهنواال من ع لةا سةولة ث ومن

المعروف من ) نقية مستعمر مع ولة مستعمر ك تعتبر3. .(فقو واحد نوال من بخلية تبدج مستعمر ك بان نظريا

:العم وريقة•

:المتعامد التخويو وريقة•

عند ،بيترت جوباي في المغ ت اآلزار بيةة تصب1.

.وتتصلب لتبرد وتترك ، 45º درزة

بكترية بيةة في المعق ، المعدني النان عقد تغمر2.

.منةا الع المراد الماد معلق من جو ، مختلوة

حافة عند ،اآلزار سوح على صغير مساحة تخوو3.

المزسسة، النان بعقد السوح بلما ،بيترت وبق

اآلزار سوح يخرج ك حتى ضغو بدون

.(1المساحة )

.ثواني 5 لمد لتبرد وتترك النان حلقة تعق 4.

، بيترتيحرك الوبق م فتح الغواو ال زازي لوبق 5.

، ويرس على جخرى وتعاد عملية التخويو مر

بواسوة النان Sخووو على شك حرف اآلزارسوح

بعرض الوب 2على المساحة

.يعق النان مباشر ويترك ليبرد6.

، بحيث (خووو 7 – 6) تخويوا اآلزاريخوو سوح 7.

تكون عمودية

.يعق النان ويترك ليبرد8.

(.59شك ) .4و 3تكرر عملية التخويو في اكتزاه 9.

Radiant Streak Method المتشع وريقة التخويو •

.ثواني 5تعق حلقة النان ، وتبرد لمد 1.

(.60)شك خووو كما موضح في 8– 7ترس بواسوة النان 2.

.ليبرد ويترك جخرى مر النان يعق 3.

متقاوعة الخووو تكون بحث ،اآلزار سوح يخوو4.

.السابق في تخويوةا سبق التي الخووو م

.ليبرد ويترك جخرى، مر النان يعق 5.

درزة عند الحضانة في مقلوبة اهوباي توض 6.37º ساعة 48 – 24 ،لمد.

المزةر تح الشراةح فح • - :المزةر تح الشراةح فح من الةدف•

:حزمةا لضآلة المزرد بالعين ترت ك التي الميكروبا عن للكشف •

بحيث prokaryotic الخلية وحيد نوال من البكتيريا خلية تعتبر1. .Eukaryotic الخاليا متعدد نوال من جصغر جنةا

-.التالية بالوري الضوةي المزةر تح البكتيرية الخاليا عن للكشف2.

Wet mount وريقة•

استعماك، جكثر الوريقة ه ه وتعتبر البكتيرية، اللوخة صبغ• تبين جنةا يمكن عيوبةا ومن المزةر، تح البكتيرية عن للكشف بين بةا التسريق يمكن ممي اتةا جه ومن والميتة، الحية البكتيريا وغيرها،( شك ) وتنظيماتةا كروية جو عصوية البكتيريا جشكا السالبة جو الموزبة، البكتيريا بين التسريق الوريقة بة ه ويمكن الزرا لصبغة

م مكبر عدسة يستعم المزةر تح البكتيرية خاليا على للكشف3. Oil immersion. بالكشف خا ي

النواة غير الحقيقية

• pro·kar·y·ote

• [proh-kar-ee-oht, -ee-uh t] Show IPA

• nounany cellular organism that has no nuclear membrane, no organelles inthe cytoplasm except ribosomes, and has its genetic material in theform of single continuous strands forming coils or loops, characteristicof all organisms in the kingdom Monera, as the bacteria and blue-green algae.

النواة الحقيقية• Eukaryote

• An organism whose cells contain a nucleus surrounded by membrane and whose DNA is bound together by proteins (histones)into chromosomes

• The cells of eukaryotes also contain anendoplasmic reticulum and numerous specialized organelles not present in prokaryotes, especially mitochondria, Golgi bodies, and lysosomes.

• The organelles are enclosed in a threepart membrane(called a unit membrane) consisting of a lipid layer sandwichedbetween two protein layers.

• All organisms except for bacteria andarchaea are eukaryotes. Compare prokaryote.

-:وهما الحية البكتيرية عن الكشف لتزةي وريقتان هناك•

.Wet mount المبتلة جو الروبة وريقة1.

Hanging drop المعلقة النقوة وريقة2.

وترتيب شك لدراسة الوريقة ه ه توبق Wet mount المبتلة جو الروبة وريقة• -:التالية الوري ها ومن الحركة، على البكتيريا ندر واختبار البكتيرية، الخاليا

من التخل م التزربة، إزراو نب جسبوال لمد الماو، من م 600 في التبن ينق 1. .الةواةية السقاني

تكون بحيث ، النسوي الةال من النظيسة، الشريحة منتصف في مرب إوار يعم 2. .الرنيقة ال زازية الشريحة جبعاد نسا جبعاده،

.الرنيقة ال زازية الشريحة منتصف في التبن، نق محلو من واحد ، نور توض 3.

ويلصق ، اإلوار على تحتوت التي ال زازية، الشريحة تقلب4. نور على المحتوية الرنيق، ال زازية الشريحة بغواو اهخير

.بح ر التبن ماو

إلى ال زازية الشريحة غواو يصبح بحيث الشريحة تقلب5. .جعلى

كمية تقلي م لدراستةا، المزةر، تح الشريحة توض 6. .العينية العدسة ،على السانو الضوو

ث ، ( X 10) نوتةا بعدسة العينة في الدنيقة، اهحياو تحديد7. ك عند اإلضاو ، نو تعدي م ، ( X 40) نوتةا بعدسة . العدسة تغيير

عينة في الدنيقة، اهحياو من مختلسة، جنواال وزود يالحظ8. هو كما وغيرها، كروية جو عصوية، بكتيريا وزود :مث التبن، .( 43) وشك ( 3 ) و ( 2) زدو في موضح

وريقة النقوة المعلقة كختبار ندر البكتيريا على الحركة•هدف ومبادئ ه ه الوريقة مث الوريقة الروبة، ومن جه •

-:التاليةممي اتةا

مرانبة حركة البكتيريا في نقوة معلقة داخ تزويف 1. زازي مغلق

.نادرا ما يحدث زساف للشريحة2.

بقاو الخاليا في حالة نشوة لمد جوو من الوريقة 3. .الروبة

العم وريقة

تنظف الشريحة ا التزويف تنظيسا زيدا 1.Depression Slide م غواةةا بالماو الساخن

.والصابون إل الة المواد الدهنية العالقة بةا

النسوي الةال توض جربعة نقو من الماو جو السا لين جو 2.

.على ك اوية من غواو الشريحة بواسوة نان البيةة

نور من البيةة البكترية في وسو غواو الشريحة توض 3.

.ال زازية الرنيقة

، الرنيقة ال زازية الشريحة غواو على الشريحة توض 4.

التزويف، وسو في للقور مقابال التزويف يكون بحيث

.الشريحة م ملتصقا الغواو يكون بحيث

البيةة نقوة وزود على الحساظ م بسرعة الشريحة تقلب5. .التزويف منتصف في البكتيرية

العدسة مستعمال المزةر، تح المعلقة النقوة تسح 6.

الحزاب ويقس نليال، المكثف يخسض ث ، القو الصغير

.بوضوح العينة رؤية من للتمكن اإلضاو لتقلي ز ةيا

مزا وسو في النقوة حافة لوض الشريحة حافة تعد 7. .المزةرت

بعد ال يتية، إلى ث القو ، كبير إلى الصغير العدسة تغير8.

.الشريحة غواو على ،السيدر ي نقوة وض

م ببوو، الدنيق الضابو تحريك م العينة، حافة تسح 9.

البكتيريا ترى حتى المكثف، بواسوة اإلضاو ، تعدي

.واضح بشك

.المعلقة النقوة حافة عند البكتيريا، حركة كحظ10.

تزمي ووريقة البكتيرية، شك برس المالحظا تدون11. .حركتةا ونوعية البكتيرية الخاليا

Simple Stainوريقة صبغ البسيوة البكتيرية اللوخة تحضير وريقة•

-:اللوخة تحضير من الةدف•

على النامية البكتيريا من متزانا رنيق غشاو تحضير هو1. والكشف لصبغةا معينة صباغا إضافة ث زازية، شريحة .المزةر تح عليةا

نوعية ولتحديد ،اللون عديمة البكتيريا بان المعروف ومن 2. -:التالية الوريقة باحد صبغةا عملية إزراو يزب خالياها،

.البكتيرية اللوخة تحضير3.

ناحية من نوعيتةا لتحديد اللوخة إلى اهصباغ بعض إضافة4. .الزرا لصبغة موزبة جو سالبة

تحضير اللوخة البكتيريةوريقة 1. والصابون، بالماو ، زيدا ال زازية الشريحة تنظف

.وتزسف 2. نورها داةر وترس ورفيةا؛ إحدى من الشريحة تمسك

.الشريحة من اهسس الوزه على س ، 1.5 3. المرسو الشريحة وزه على الماو من نور توض

.بكتيرية لوخه عم لغرض بداخلةا، الداةر عليةا 4. النانلة اإلبر نةاية في ، (اللوبي )الحلقية عقد تعق

لمد اكحمرار،وتبرد درزة ،حتىبن ن موند لةب ،على.ثواني 10

5. .المعقمة اإلبر بعقد البكتيرية، البيةة من كشوة تؤخ 6. .سوح على الداةر داخ بالماو، الكشوة خلو

7. .جخرى مر المعدنية، العقد عق لك بعد

8. شريحة على الساةلة، البيةة من بكتيرية لوخه تعم

إلى مرتين المعدنية العقد حزمةا يكون بحيث جخرى،

،(وسلكةا العقد تعقي يزب مر ك وفي )مرا ثالثة

.زيدا تو يعا فيةا تو يعةا م الداةر ، داخ إلى وتنق

9. .جخرى مر الحلقة تعق

10. نسخ دون الغرفة، حرار درزة عند لتزف، اللوخة تترك.عليةا الةواو إمرار جو

اللوخة بإمرار الشريحة على اللةب مرتين جو ثالثة تثب 11.

.مرا

من بيئة سائلة وبيئة صلبة وريقة تحضير اللوخة البكتيرية على شريحة زازية( 44)شك

: البكتيرية اللوخة صبغ• كيمياةية، مواد البكتيريا تصبغ التي Dyes الصباغا تعتبر •

-: مث حامضية تكون جن جما

.1Fuchsin Acid و Eosin المكونا م تتساع التي

،سيتوبال -:مث الخلية في القاعدية

Crystal البنسسزية البلورا جو سسرانين مث ناعدية جو 2.violet الحامضية الخلية مكونا م تتساع التي.

(44 )الشك في موضح هو كما اللوخة تحضير يت •

1. 45 شك ) الصبغ حام على الشريحة وض .معدني بملقاو تمسك جو ،(

2. ثانية 60 – 30 لمد المثيلين، با ري اللوخة تغمر

3. ال اةد ، الصبغة إل الة بعناية المقور، بالماو الشريحة تغس .المقور الماو ننينة جنبوب بواسوة

4. .لتزف وتترك للرووبة، ما بوري برفق، اللوخة تزسف

كيسية إضافة الصبغة إلى اللوخة البكتيرية( 45)شك

• فح اللوخة تح المزةر

• المصبوغة، اللوخة تسح عدسة بواسوة المزةر تح

10 نوتةا X ، تسح وبعدها نوتةا التي ال يتية بالعدسة

100X.

• الشيةية بالعدسة السح عند ال ي يوض ؛(ال يتية)

دون اللوخة، على مباشر .رنيق زازي غواو

• جو الرس م المالحظا تسز تح يشاهد ما لك التصوير،

6 شك )المزةر 4 ).

.ب لك خاصة باوراي الشيةية، العدسة من ال ي تزسف•

.له المناسب المكان جو صندونه، داخ المزةر يرز •

عليةا، من ال ي الموزود ويتخل زيدا، الشراةح تنظف•

. لحسظةا المخص الصندوي في وتحسظ