سوريو سپره هب يگولآ صيشت ر مرس يزاس يثنخ اب...
TRANSCRIPT
9394 پاییز، 33، پیاپی 3، شماره 9دوره شناسی درمانگاهی دامپزشکی آسیب
999
سازي سرم در تشخيص آلودگي به هرپس ويروسمقايسه كيت تجاري اليزا با خنثي
در گاوميش 1-تيپ
3مريم داغري، 3مسعود رضا صيفي آبادشاپوري ،*2محمد رحيم حاجي حاجيکلايي ،1ندا ارجمندي
، اهواز، ایران. ان اهوازچمر شهید هنشگادا ،مپزشکیدا هنشکددا موختهآنشدا -9
، اهواز، ایران.چمران اهواز شهید هنشگادا ،مپزشکیدا هنشکددا ،مانگاهیدر معلو وهرگ استاد -9
چمران اهواز، اهواز، ایران. شهید هنشگادا ،مپزشکیدا هنشکددا ،مانگاهیدر معلو وهگراستاد -3
، اهواز، ایران.اهواز چمران شهید هنشگادا ،مپزشکیدا هنشکددا ،مانگاهیدر معلو وهگر کارشناس -4 [email protected] نویسنده مسئول مکاتبات:* (33/9/94پذیرش نهایی: 94 /93/6)دریافت مقاله:
چکیده ههای در گهاومیش 1-ویهرو تیه ههرس بهه آلودگی تشخیص در سرم سازیخنثی آزمایش با الیزا تجاری کیت مقایسه منظوربه
از سه هها سهرم . گردیهد اخه خهو نمونهه ( مهاده رأ 51 و نر رأ 111) گاومیش رأ 151 از اهواز، کشتارگاه در کشتارشده
ههرس ) BHV-1 بهه آلهودگی نمهود مشهخص جهت ویرو سازیزمایش خنثیآ و الیزا تجاری هایکیت از استفاده با جداسازی،
11درصهد ) 7/51و نمونهه( 11درصهد ) 55رأ گاومیش تحت مطالعهه 151مورد آزمایش قرار گرفتند. از گاوی( 1-تی ویرو
نشها داد کهه اخهت هها دادهآلوده بودند. تحلیل آماری BHV-1 به ویرو سازینمونه( به ترتیب با استفاده از روش الیزا و خنثی
در سرم خو گاومیش وجود ندارد. BHV-1 ضد سادتن شناسایی در ویرو سازیداری بین روش الیزا و خنثییمعن
.1-تی ویرو هرس سازی ویرو ، ، الیزا، خنثیگاومیش :هاواژه کلید
مقدمهكررر ( BHV-1گررر)و 1-ویررر وی ررر هررر
DNAیرر ،شرر ن ررن ن)د رري درر IBR/IPVویرر وی
ویررر وی ا وررر)ن ویررر وی ن ررري و نی رررا
هرر) .ررين یررس ویرر وی ن نرر ا ویرر ویهرر
ی)بري و ي ر س .رو ي ه)ي .رو ي ثي ر در كشي
كيرري كرر شررخ ا و د )ي رر خصرر ن یدرر) درر دش
ندا ارجمندي و همکاران ... بهسازي سرم در تشخیص آلودگی مقایسه کیت تجاري الیزا با خنثی
993
شي).رر رريد ي وي( و گ رر يا ئرر ، همرر ب مرر)ني
(نRobert, 2001كيي آوني و ك س ن یع د فس
IBR ب) ث د گ ن ثر شرث)ت يي ر ب مر)ني ن
ن)بر)نوني، (،گ ر ريد ه)ي همر م)م .ي س، .قط
ون، ر نم ير ن ك)هش ي ي، نم .ت ي ف ج و و
گ ن ديبع صو ي نري ن ي)ي ي د آغاف قض ب و
هر)ي ي).رو ، دير و شح)س ب ير ، شرح)س نري م
ب)شريين ویر وی ن ه)ي آي د د)ی )س ي ي و ب)في
ث م)ی د تق م ا ط یق دد)ني يي و یر) .رته)
ش ن آئ و.ل آي .بب نتشر)ن ي ي ديل و ن بين د
ل يي و نتق)ت دق)نبت .بب نتش)ن شثل ي).و شث
(ن نتقر)ت ویر وی ا Smith, 2009 شر ني ب مر)ني در
ط یق يي ب )ن . یع .ين ن ثر ونو یر ن ی
ني .ر ی ) هر)ي آن م ني، م م آي ب یر م
د) نتق)ت ا ط یق دق)نبت ب )ن آه رت ،ش نيآي د
د)نيي و ر) ص نس ح)دل ب)ق د ي آي ب .ين گ)وه)
كييين ط ف و. ا درل ه) وی وی ن فع د ديس
ه)، . تم چ ي دشت ك، د )ف س و د)نيي )بد)ئ م
ا ش یط نتق)ت و آي گ ن ب شت فر هم دل .ت ی
IBRب) ث فن یش آي گ . د ب ب مر)ني كييي و د
ن(Robert, 2001ش ني د
وی وی گر)ود ش ن بر) ني آيي) ه ن .ت ي ) ن ت
ویررر وی ا DNA .رررتي) ا نوح دحيو .ررر)اي
BoHV-1 دتم)ین كييي و یس نثت ب یس لايي ن ك
( برررر) ویرررر وی BuHV-1ویرررر وی گرررر)ود ش
ي)وس ن ، ن صر ن كر ا ن ر (BoHV-1)گ)وي
هر) ه رتيين گر)ود ش هرم در بط ون بر ونت ث و آنت
ب)شريين نشر)ن در BuHV-1و BoHV-1د ت ي بتا ب
.بب ح ی BoHV-1شي ك و ك ي). ن و
BuHV-1 یمي و كم دح)ف ي و ر ثي ر ویر وی
(نAmoroso et al., 2013گ د
ا كي كش نه)ي ن ر) BoHV-1ه)ي ن)ش ا ي ني
ه)ي وي ن ه كشر ني نحگن نح شي و مي ) گن
ب)شرين بر همر س دبتي ب آاد)یشر)س .ر وي وی در
هر)ي د )ي )س . وي وي ك ن گ)وه) و گ)ود ش ، .)ی
ه ا ص نس گ فت حث)یي ا آي گ ب یس ویر وی
ين ب ي س آي گ ن گ)وهر) كييه) د ن ب س یس م
هر) ا ش ا نوح ي ن و ب ي ر س آير گ ن گر)ود
.ررتي) شرري .رري (VN.رر)اي .رر م نوح وييرر
و 1831، آب) شرر) ني و صرر ي ی حرر) حرر) ثا
كر نوح ي رن نوشر آ.ر)ن و (ن ب) ب یرس 1831
بر و ادر)ن وی وی .)ايب)شي و نوح ويي . یع د
ن )ا ب كشي .و ت و دث)ن)س و ده رن س دتي).رب بر)
ن د )ي در)د و ،یه ا ط ف ب)شي،كشي .و ت د
نش)ن شي ك آادر)یش ي رن 1831 ن .)ت همث)ن ن
.ر)اي ویر وی قر) ن بر ن دق)ی بر) آادر)یش ويير
دشخا نمر ن حضر ن ر) س وري ویر وی .ره)ت
در)د و ب)شيوی و. گ)و ن . م و ن گ)ود ش نم
ندر)م یرس د )ي ر هيف ا بي)ب یس، (ن1831همث)ن ن،
.ر)اي ند)م آاد)یش ي ن و ويي یس و نوح دق)ی
ن گر)ود ش بر BHV-1 ن س آي گ بر (. م
.ين
هامواد و روش گیرینمونه
هر)ي ي هي ند)م د )ي ح)و ، ن حي ف)صل د)
ب) د ر بر كشرت)نگ) شه .رت)ن 1838 ) .ييي .)ت
11و ن ی نر 111ن ی گ)ود ش 111 ه ا، ا ي
9394 پاییز، 33، پیاپی 3، شماره 9دوره شناسی درمانگاهی دامپزشکی آسیب
999
ن یرس مرل آدرين گ ي ب ن ی د) ( ب ي ا ذبح و ن
ب ن. .س م ب .)ی ف د ت نري ن ر س گ یري
FAO, 1977 (ن ب) ب ف د ت نري ن ثي)یر)ی فر
مر)م .ر)ت 1/2گر و ، ایر 1هر) ن )ی س، گر)ود ش
ی يي ني ن ئم(، .)ت 1/2-1/8، (ه) ش ي ني ن
.ر)ت 1/1-1/1 و يي نري ن ئرم( و .)ت 1/1-1/8
هر) .)ت م)م ني ن 1/1 . يي ني ن ئم( و ب)لاي
ئم( ق م شينين
جداسازی سرم
آوني شي بر د ث و ر ه هر)ي ه) ب ي ا مع. م
گذ ني شري ( نتقر)ت و ر) ادر)ن ي ت ي شم)ن د و 1/1
-21ن.ر)اي .ر م ن ف یرن ند)م آاد)یش ي ن و ويير
ني شينينگ نه .)نت ن
آزمایش الیزا
شر كي .ر)وي ي رن در)ني ن یس د )ي ا ك ي
ID.vet هر)ي ویر ب) يشي).)ی آنت ب دي ن، ف ن
BHV-1 ن ن یس ك ي م)د حي س .ي .تي) شي
ن نري و)يا ش ي شي BHV-1 و ي ي ن ب) وی وی
ه)ي وذ شي ا ه)ي آاد)یش . م ن ا فنو ن نم
هرر)( و كيترر ت ديبرري و دييرر ( برر حيرر س گرر)ود ش
ب) ي و ر ویر وی د ث و و ي، ن ص نس و آنت
BoHV-1 بر) ي شرث ل در آنتر -ون، كمپوث آنت-
IgG و رررر گرررر ن رررر ا ش تشرررر ، كي وگرررر
ه)ي ب) ينشخ نكيييگ)ن ب حي س و)ف شي ) ب آنت
دتصل شري بر ویر وی صر)ت ی)فتر و .ربب . د
كي وگر گر ن –بر) ي آنت –ون شث ل كمپوث آنت
كمرر ش تشرر ي ورر)ف برر رر ا حررذف كي وگرر
-TMB ك ودرر ون -د ث و و رري، دحورر ت . ب ررت
H2O2) ذی ي ظه ن ننگ آب ( نت د ننگ .شي و)ف
ب) ي وتص)ص د ر ن نم نر ب ته ب دقي ن آنت
ب) ي دحور ت آبر ر ا آاد)یش ن ن ن حض ن آنت
ننرگ و)ف ك ن دحو ت دت قف كييي ، بر ان ي ر
ب) ي ي ننهر ی)بي و ن ص نس يم حض ن آنت د
111ه) ن طر ت در ج دش)هي نخ هي شين د ث و و ي
ن)ن دت ق ئي و نت)یج ي گ یين
ك ري، گر دقري ن طبق .ت ن ي مل ش كي .ر)اني
ب شرت ا (ODpc دت .ط رذه نر ني كيتر ت ديبري
و ن ن ن بي ب س دق) ی ذه ن ني نم ن ش)هي 811/1
ب)شري، آادر)یش ندر)م 8ديبي ب ش)هي ديي ب شرت ا
گ نگ فت د تب وق د
هر)ي یر ا نم نر ك كري م هي ب ن. و ب )ن یس
BHV-1یر وی بر) ي وري و گ فت شري حر)وي آنتر
هرر) برر نوح ایرر دح).ررب نم نرر S/Pه ررتيي، نصرري
گ یي:
ي)ول د ن ن ذه ن ني ه نم نر و د رن ن رذه
ن ني نم ن ش)هي ديي ق م ب ي)ول د رن ن رذه
ن111ن ني نم ن ش)هي ديبي و ديي ، و بين
%S/P=
ير وقر ب دي %11آنه) كمت ا S/Pه)ی ك نم ن
و %11آنه) ب شرت یر) د ر)وي S/Pه)ی ك شينين نم ن
هر)ی كر ب دشث ك وق شينين نم نر %11كمت ا
S/P ب ديبي وق شينين %11آنه) ب شت ی) د )وي
سازی ویرو آزمایش خنثی
.)اي وی وی ن )ا ب ثي ر ب ي ند)م آاد)یش ويي
ب ي یس دي ر ن .ي ك BHV-1و ت . ن وی وی
بر ير ن دحر ط كشري .رتي) RBK ا .و ي
111/1 نقرري ا ي ترر د ورر 1/1 ،گ یررين برريیس دي رر ن
RPMI كشري نق ق شري ن دحر ط BHV-1وی وی
نصي . م گ .ر)ي ( ن یر فا.ر كشري 2ح)وي
ندا ارجمندي و همکاران ... بهسازي سرم در تشخیص آلودگی مقایسه کیت تجاري الیزا با خنثی
999
ك ن نوا قبرل بر) RBK.و ي ح)وي لای .و ي
ديتقل گ یين ب ري ا ، ب ند)م ديیي كشي ه شي
.يد ( وی وی كشي و ثي وی وی، ت . ن )ن
ه)ي ه ر شري ، هري دي ن آگ)ه ا )ن وی ویب
بريیس .)اي وی وی ند)م گ فرين ند)م آاد)یش ويي
ن 83 ق ق ن نث ب) ن 81ه) ب ديس . م ،دي ن
وم)ن( قر ن ف )ت ك ن كمپگ ب دي ن غ .)نت
11برر) د ث وي ترر ا هرر .رر م همرر 11شررينين بترري
ن TCID 11150حر)وي BoHV-1ي تر ویر وی د ث و
.ر) ي ن 13-21ه حي فنو شي و و ي ب ديس
قر ن شرين ر ا یرس و ر ی ن ه 83 د)ي
111 ن RBKهن ن ي .رو ت 11د حو ن ه حي
نصي . م 2ح)وي RPMI ط كشي د ث وي ت ن دح
نوا ن 1دريس گ .)ي ( فنو شي و ن )ی)ن و ي بر
ن رر 83 ن درر)ي CO2 نصرري 2 نث برر) ن حرر)وي
-گذ ني شين ن ط یس ديس و يو)ن گ گ م.)نت
و ن ( CPE خ یررب .ررو ي هرر) نوا نرر ا ن رر آثرر)ن
و ش)هي ه)ي ش)هي .و ت ف)قي وی وی( دق)ی ب) حي
ه)ی ك ق) ن بر ن . مييوی وی د ن نای)ب ق ن گ فت
شريني و ك ن وی وی نب ني، ديي دح ه د ويي
،ه)ی ك ا ثي وی وی ور گ ي كر ب نري . م
ديبي ن ن گ فت شينين
هادادهآماری تحلیل
بر) .رتي) ا نر م فرن ن ،آوني شري ه)ي مرع
SPSS بر) ف)صرو ط ن صر ي و حو ور ب 11ن خ
هر) ا دي ر ن حو رل ب ن. شينين ب %31 طم ي)ن
نم)ن و آد)ن ك) ) .تي) آاد)یش د بع ك)ي، آاد)یش د
گ یين
هایافته
ایع ف و ن در ن ديبري و ديير بر 1 ن يوت
.)اي وی وی ن ئر گ یري .رين نوح ي ن و ويي
آي گ بر هر هي ك یس يوت نش)ن د ب ن.
هرر)ي حرري ب ن.رر برر گرر)ود ش ن 1ویرر وی رر
.)اي وی وی ب رب ط نكو ن نوح ي ن و ويي
نمر)ن یرس در د نآا ن نصي ب .ين 3/13و 11
نبر 33/1ب بر بر) ن ن آد)ن ك) ) نب ن ن ي)وس د ي
.ر)اي بي ب ويير ح ). ي و وی گ آاد)یش ي ن ن
نصي ب )ن شري 1/33 نصي و 3/31 ب وی وی ب
.ين
سازی ویروسهای تحت بررسی به روش الیزا و خنثیدر گاومیش 1آلودگی به هرپس ویروس تیپاز نظر توزیع فراوانی موارد مثبت و منفی -1جدول
سازي ويروسخنثي
اليزا جمع منفي مثبت
31 1 31 ديبي
13 11 3 ديي
111 12 33 مع كل
آي گ ب ه وی وی ایع ف و ن 2 ن يوت
برر يث رر .ررس و برر) نوح ن گرر)ود ش 1 رر
.)اي وی وی ن ئر گ یري .رين یرس ريوت ويي
رب كمتر یس و ب شرت یس در ن هي ك بر نش)ن د
9394 پاییز، 33، پیاپی 3، شماره 9دوره شناسی درمانگاهی دامپزشکی آسیب
993
1.ر)ت و ب شرت ا 1/2ديبي د ب ط ب دي .ي ایر
1/2-1/8.)ت ب) ن .ري 1/2.)ت .ين ن .ي ای
شرري ن د يرر .رر)ت وررتاف 1.رر)ت و برر)لاي
111/1>p)، ه)ي .ري وت و .ر م، وم بر) د) ب س ن
ني دش)هي نشين . م و . م ب) چه)نم وتاف د ي
سازی های تحت بررسی به تفکیک سن )سال( با آزمایش خنثیدر گاومیش 1توزیع فراوانی مطلق و نسبی آلودگی به هرپس ویروس تیپ -2جدول
ویروس
آلودگي
سن
جمع كل مثبت منفي
نسبي مطلق نسبي مطلق نسبي مطلق
1/2> 83 1/13 23 b1/12 11 11
1/8-1/2 3 8/23 21 a3/32 88 22
1/1-1/8 3 1/83 18 3/11 21 11
<1 3 8/28 28 a3/31 81 21
111 111 3/13 33 8/11 12 مع كل .(p<11/1 باشدمیخدار یدهنده تفاوت معنت در ستون نشانحروف کوچک متفاو*
ایع ف و ن آي گ ب ه وی وی 8 ن يوت
ه)ي حي ب ن. ب يث .رس و ن گ)ود ش 1
ب) نوح ي رن ن ئر گ یري .رين یرس ريوت نشر)ن
.ر)اي اد)یش ويي ك ن آاد)یش ي ن ، هم)نيي آ هيد
ن ن د يرر ویرر وی، ن .رري برر) آيرر گ ن برر)ط
111/1>pت ب) ن 1/2ن .ي كمت ا ،چي س(ن هم(.
1/8-1/1(، ن .رري p<111/1 .رر)ت 1/2-1/8.رري
11/1>p ت 1( و ن .رري برر)لا ا(111/1.رر>p )
ني شين وتاف د ي
های تحت بررسی به تفکیک سن )سال( با آزمایش الیزادر گاومیش 1نسبی آلودگی به هرپس ویروس تیپتوزیع فراوانی مطلق و -3جدول
آلودگي
سن
جمع كل مثبت منفي
نسبي مطلق نسبي مطلق نسبي مطلق
1/2> 11 2/13 21 c3/81 11 11
1/8-1/2 11 8/81 28 ab3/13 88 22
1/1-1/8 3 1/83 18 b3/11 21 11
<1 1 21 21 a31 81 21
111 111 11 31 11 13 مع كل .(p<11/1 باشددهنده تفاوت معنادار میحروف کوچک متفاوت در ستون نشان*
ایع ف و ن آير گ بر هر 1و 1 وت ن ي
هرر)ي حرري ب ن.رر برر ن گرر)ود ش 1 ویرر وی رر
.ر)اي ویر وی و ي رن يث ي ن آاد)یش ويي
هري ه) نش)ن در .ين ب ن. یس يوت ن ئ گ یي
ك ف ون ن ب در ن ديبري ن ري نر و در) ن
نصري و ن 12و 12.ر)اي بر رب آاد)یش ويي
ندا ارجمندي و همکاران ... بهسازي سرم در تشخیص آلودگی مقایسه کیت تجاري الیزا با خنثی
994
نصري .ري كر 11و 13آاد)یش ي ن ن ن بر رب
ني ب س یس و گ و .ي بر) .رتي) ا ي وتاف د
ه و نوح و ني ن ن
سازی های تحت بررسی به تفکیک جنس در آزمایش خنثیدر گاومیش 1یع فراوانی مطلق و نسبی آلودگی به هرپس ویروس تیپتوز -4جدول
ویروس
آلودگي
جنس
جمع كل مثبت منفي
نسبي مطلق نسبي مطلق نسبي مطلق
3/11 111 12 12 83 83 ن
8/88 11 12 21 13 21 د)
111 111 3/13 33 8/11 12 مع كل
های تحت بررسی به تفکیک جنس در آزمایش الیزادر گاومیش 1توزیع فراوانی مطلق و نسبی آلودگی به هرپس ویروس تیپ -5جدول
گیریبحث و نتیجه
.رر)اي هرر)ي دختويرر د)نيرري آادرر)یش وييرر ا نوح
وی وی، ي ن و یم ن فو ن.يي هي دشخا نمر ن
ن . م و ن گ)و و BHV-1حض ن ) س وي وی وی
ویر وی .ر)اي ش ن آاد)یش ويي گ)ود ش .تي) د
هر) بر) یرس ی آاد)یش .ت)ني ن .ري و .ر)ی نوح
.)اي ویر وی ش نين آاد)یش ويي د آاد)یش .يد ي
ب)شرين ا ح ). ي و وی گ ب )ن ب)لای ب و ن ن در
گ چ نوش .خي ب و ن )اديي ير ام آاد)یشره)ه
1 ير 1ط ن د م ت ب)شي و ب د ب د و ه و ف ب)
در) ،طر ن ك)درل ندر)م گ ر كشري ر) بر نوا ط ت د
آادر)یش طایر بر ي ي ن ی ب شت یس ك)نب آن ب
ب)شرين آادر)یش هر) در .يدش و نایر)ب .ر)ی نوح
طرر ن كمرر ثرر س دهرر)ني .رر)اي ویرر وی، برر وييرر
هرر)ي وتص)صرر ن نوي ثي رر ویرر وی ن رر) س
كيري و كر)نب آن دحريو بر .رو ت ر س در كشي
شي).ر .رين دحققر س دختورف ه)ي ویر وی آاد)یش
ن شرخ ا ویر وی .ر)اي ح ). ي آاد)یش ويير
نصرري و وی گرر یررس 31-33ن برر س BHV-1.رر د
Lucas نري نصي ب آون نم 31آاد)یش ن حيو
et al., 1986، ) ك یس نق)م هي ی آاد)یش .ر د
كر هري آیيي، د) ا آند)ی ح )ه د نق)م د و ب ب
ن )ا ب .ر ح انري وی وی .)اي ند)م آاد)یش ويي
و ا ط فرر فرر هم آون ن دث)نرر)س ب)شرري ویر وی درر
آاد)یشه)ه و)ص د ن ن )ا .ري، دثر)ن ندر)م یرس
ندر)م ، .ين يذ دقيونآاد)یش ن كمت )ی ا ی ن
آلودگي
جنس
جمع كل مثبت منفي
نسبي مطلق نسبي مطلق نسبي مطلق
3/11 111 13 13 12 12 ن
8/88 11 11 28 11 23 د)
111 111 11 31 11 13 مع كل
9394 پاییز، 33، پیاپی 3، شماره 9دوره شناسی درمانگاهی دامپزشکی آسیب
993
دي ر ن شرخ ا .ر یع یس آاد)یش ن . ح كش ن ب
ب م)ني ب) دشثاس ب )ن ف و ن د .رين ن یرس
)نيري ي رن در ن ر د ه)ي .) گ ي آاد)یشك)ند )ن ب
نين ق ن گ فت
ن رن دي ري .ري و IgM ي ن بر ي شرخ ا ر) س
-BHV ي ن ب ي شخ ا ي ني )ا ب) آاد)یش د ث و
شرر ن ن یرر دق)ی رر هرر) .ررتي) درر ن گ .رر)ي 1
و ویر وی .ر)اي آاد)یشه)ه ن نو )، آاد)یش ويير
ي ن وی گ و ح ). ي بر)لای ن ن دق)ی ر بر) .ر)ی
-(ن بر Rodostits et al., 2007 ني ه) نش)ن آاد)یش
ن . م، ن ع BHV-1دي ن س ) س وي وی وی
ه)ي در)ني ي رن و ر ننرين نوح دختوي ا ك ي
ا ك ب ي نایر)ب ري ب ر )ن ایر) ي ي ل آن ي ن ب
.رو ت ن ر)ا ه)ي . د دي).رب .ري، بر كشري نم ن
.ي ني ن ، ن ديس اد)ن كم نت)یج ب )ن و ب ن ب
-در آون و ب ن بي ك)نب ي ك ن نا ن ق ميد
.ر)اي ب)شي، ب) ث شي .ي ) ن بي ب آاد)یش ويي
ير ن نوح وی وی دنیي ب شت ي ك رب كر و بر
,.Riegel et al)گ ر )یهنیس آن د ن .تي) قر ن
نترر)یج ح)صررل ا یررس د )ي رر نشرر)ن كرر ا ن 1987
د )ي رر ، ن هرر)ي حرريی گرر)ود ش ن 111ددمرر ع
3/13 رب .ر)اي ویر وی و ي رن بر آاد)یش ويير
BHV-1 نصي ن ي ) س وري ویر وی 11 نصي و
.)اي وی وی و ي رن ب نين دق)ی نت)یج آاد)یش ويي
ك ب س یس و نوح ا ن دشرخا نمر ن نش)ن
ني ورتاف د ير BHV-1وی وی حض ن ) س وي
نبر .ري 33/1و نري ن و آدر)ن ك) ر) ب بر بر)
.ر)اي ح ). ي و وی گ آاد)یش ي ن ن بي ب ويير
نصي ب ر)ن شري، 1/33 نصي و 3/31 ب وی وی ب
نمر ن ر ن هري دشرخا يذ ا آاد)یش ي رن در
ن .رر م ورر ن BHV-1حضرر ن رر) س ورريوی وی
گ)ود ش .تي) نم ن
ا كي كشر نه)ي ن ر) BHV-1ه)ي ن)ش ا ي ني
هر)ي وي ر هر گن نح شري .ري و مري ) گرن نح
ب)شرين ن شي). در ه)ي . مكش ني دبتي ب آاد)یش
ه)ي گذشرت ن یر ن ه)ي دحيو ي ك ط .)تب ن.
ت .ي، ن ن ب)ط ب) حضر ن یرس ویر وی ص نس گ ف
ه)ی ام شي). گن نحه)ي . مب) .تي) ا آاد)یش
ن ب م)ني . تم IBRشي .ين ا آند)ی ك ب م)ني
نيي، يذ وق ع یس ب م)ني گ)و ني دينن و صي ت د
ي ا ير ن هيیر ن كش نه)ي آ. )ی ی) آف یقر)ی بر
هر)ي ن ا ط ف وي س گرن نح گ ه)ن غ ه وق د
ن)ش ا وق ع ب م)ني ن ن ن آد یث) ب .رين )يرب
ه)ي ح)ك ا حض ن ب مر)ني آن .ي ك وي س گن نح
ویرر ن ن ررن برر) ونو گ)وهرر)ي صرر ل ورر)ن برر
چهررل دصرر) ف هرر)ي طرر ف هرر ن ن هرر گرر)و ني
(ن Karshoek et al., 1996؛ 1811ب)شي حض ، د
د رن ن 1831 ن .ر)ت ن ب ن. كر)نگ و همثر)ن ن
.ر)اي ن ب) .تي) ا نوح ويير BHV-1آي گ ب
1/1ه)ي د رتق ن د كرن ه ر .رپ م نود ر گ)ود ش
(ن ن 1831، كرر)نگ و همثرر)ن ن .رري آدرري نصرري برر
ن د )ي ح) حر) ثای و صر ي آبر) شر) ني
ن ر) بر در ش ن ی گر)و 821كر نوي 1831.)ت
كشررت)نگ) هرر ا ندرر)م گ فرري، برر) .ررتي) ا نوح
نصري ا 31/11.)اي وی وی نشر)ن نري كر ويي
ویر وی ه)ي حري د )ي ر ن ي ر) س وري گ)ود ش
BHV-1 حرر) حرر) ثای و صرر ي آبرر) ب نرري
هرر)ي صرر نس گ فترر ن ن ب ن.رر (1831، شرر) ني
ندا ارجمندي و همکاران ... بهسازي سرم در تشخیص آلودگی مقایسه کیت تجاري الیزا با خنثی
996
د كشرر نه)ي یهرر ن ررن حث)یرري ا آيرر گ .رر
ك د ن ن آي گ ط نيه)ي آن كش نه) ن ، ب د شگ)و
و 1/12د ش و گ)و، ن . ی)يي هيي ب رب ن گ)و
(ن ن Tautz et al., 1998 نصي گرن نح گ یري 3/11
نوي 2113و همثرر)ن ن كرر ن .رر)ت .رر ثو ن) د )ي رر
ادر)یش آگو ب) .رتي) ا 111ن ی گ)ود ش ا 1313
هرر) ا ن رر نصري ا گرر)ود ش 12م گ فرري، ي رن ندرر)
BuHV-1 نصي ا ن 1/81و BOHV-1 ديبي ب ني
Scicluna et al., 2007) ن ف و ن آير گ برBHV-1
و ن 21/33، ن ب ایررل 1/31 ك رر هرر)ي ن گرر)ود ش
,.Albayrak et al نصي گن نح شي .ري 18دص
2012; Carvalho et al., 2015; Yossef, 1997 ن)
ش ف و نر آير گ ن بر س ط ن ك داح د هم)ن
وري طب ري ب)شرين بر كش نه)ي دختوف دتي)وس د
بر)ي ي آن، ريم و)ص یس ب م)ني و يه)ن ب ن چه
هرر)ي برر)ي ي )يررب رر ن ب ن.رر برر وا ائررم
هرر)ي شررخ ا آاد)یشرره)ه ، ند)نهرر)ه و د رريگ
ت شرر م ، یررس ب مرر)ني ه ررت ) ي وی و یم ن ه
گ ررت ح و.رر ن كشرر نه)ي دختوررف ن ن نثرر)
ي كر ویر وی ن طر ون ه)ي آي د)نيي و م
ه)ي نم)یيي، و مب م)ني ب .)ی ح ن)س ديتقل د
ب)ي ي ب م)ني دبتا ب ي ني نهيت و نم)ی)ن شين ائم
یررق دحررب برر وا .ررت ی، حتمرر)ت آيرر گ ا ط برر
شرري)وت ب ي ویرر ( ديررل هرر)ي ای رري فرر آون
ه)ي اني و نتق)ت ا ط یق .رپ م آير ، نري ا و ك س
ندرر)م نرري ن قرري د)س كيت يرر برر ي ب مرر)ني و ،گورر
گ ر ي طب ر ن ر ورتاف ا ن ر د رن ن يي
آيرر گ برر س كشرر نه)ي دختوررف درر ن رر قرر ن
,.McDermott et al., 1997; Motha et al نري گ فتر
1998; Yossef et al., 1997; Rodostits et al., 2007;
Tekes et al., 1999 كر صر لا ب ن)در ب) بر آن (ن
ديون هي و ك ي). ن و یرس ب مر)ني ن .ر ح
كش ن و ني ن ، يذ دش)هي ه گ ن )ن .ر د ن
ب و ب) و هي BHV-1و ن گ)وه) نش)ن ا آي گ ب)
-هر ب طب ي ب م)ني ك ا يهر ي ب مر)ني
نبر)ت آير گ ح ر ن، كيري، بر ه) ب ري در وی وی
BHV-1 د)نري و ن چي)ن ن .رته) صرب بر)ق هم
شثل ف )ت نم)ی)ن و هيري هيه)م ب وا .ت ی ددي ب
شرثل بر IBRط ني ك هي شخ ا ب م)ني شي، ب
- و ن رر برر) ننیررق ك ن ثرر دخيرر ن گ)وهرر)ي نرر
ر ن گ)وهر)ي نر ه) ن ط ون ن ق ن ي د .ت وئ ي
شثل دخي ب م)ني ن ك ف)قي )ن .ر د ن رن دبتا ب
بر)ي ي شرخ ا نيي ب)شيي( ا ظهر ن ائرم د
و ددن نم ن نثت ح)ئن هم ري ن یيدر) حضر ن
ير بر ن بر نغرم آ ي ي ا گ)وه) .ري كر ور
ویررر وی، ف)قررري هررر گ نررر ررر)ن .ررر د ه رررتيي
Ferankenak, 1997; Karshoek et al., 1996)ن
هر)ي ن ر) ا آند)ی ك یس د )ي نوي گ)ود ش
ب كشت)نگ) ه ا ص نس گ فت .ي، طا )س ق قر
ب)شين ه چيي ه) ن .ت ی نم ني آن ا وو ي نه
ني گر)ود ش ه)ي نه يگ)ن ب دحلك ب) د نه)نن
ر ن ه)ي ب م)ن در ن شه ه ا هي ند)ن گ)ود ش
ني ب یس د أك ي نم ك . رتم ونشر و نهر
ي نوي آنه) ق یب) یث )ن بر و ر)ث ق)برل داح ر
گرذ ن ن وتاف ن ف و ن آي گ ب س یس دي)طق نمر
گ فت ن .)ی كش نه) ص نس )سد )ي ، ا ط ف یه
ن نيد ش ن ن ب یس د و ع نپ وت نوي گ)و
هر)ي ير ن كر لاام ب أك ي .ي كر ن ب مر)ني
شر ني، بر در ا س ط ن د تق م د ب د گ م نم ب
9394 پاییز، 33، پیاپی 3، شماره 9دوره شناسی درمانگاهی دامپزشکی آسیب
992
ي ل حتمر)ت فرن یش ب ور ن بر) )درل فن یش .س ب
ا حتم)ت وق ع آي گ ن ح ن)س ن رن ایر) ب م)ني
ن و ديبت بر س .رس و آير گ ن ب)ط د ي و ش د
؛ 1831، همررررري ا و همثررررر)ن ن ن و ررررر
McDermott et al., 1997; Riegel et al., 1987) ن ن
ني ب س .س و آير گ ب ض ا د )ي )س ن ب)ط د ي
و يم ن ب)ط ب س .س و آي گ ن ب ب)لا شت و ني
ب یس ب مر)ني ن دق)ی ر بر) ر)ی س ب ن ف و ن بتا
ط ني ك ني، ب ن بي آنب ن د گ و د ن)ش ا
111 ني د رن ن و گ ر ي بر دمثس .ري ن یر م
نصي ب .ي ك ن یس ش یط ن ب)ط ب س .س و آي گ
و ی، حر) حر) ثا Kampa, 2006نو ا ب س د
(ن 1831، آب) ش) ني ص ي
هي كر ف و نر ح)صل ا یس د )ي نش)ن د نت)یج
هر)ي حري ب ن.ر ن ن گ)ود ش BHV-1آي گ ب
و یح) ح) ثادش)ب د )ي )س قبو ه ا ق یب)
( .ري كر نوي یرس م ن 1831، آب) ش) ني ص ي
ك ن د )ي قبو )ی ن ا آن .ي ه ا ص نس گ فت
.ر)اي ویر وی .رتي) فقرط ا نوح آادر)یش ويير
.ر)اي گ یي و ن یس د )ي او ب آادر)یش ويير
هر)ي وی وی ا آاد)یش ي ن هم .تي) شي و ب ن.ر
د)ني نش)ن ك وتاف بر س یرس و نوح ا ن ر آ
و ر BHV-1ه) بر نش)ن ن د ن ن آي گ گ)ود ش
ی) ب ب)نس یهر هر و نوح قر) ن بر بر دا ،ني ن
ن . م و ن BHV-1نم ن و ) س وي وی وی
نوح ب)شيي و ا ط ف یه ب ي ل یيثر گ)ود ش د
ب و ن ر)ا بر كشري .رو ت و اد)ن وی وی .)ايويي
و ب)شري دث)ن)س و ده ن س دتي).ب ب) كشي .و ت د
يررذ ، یرس دث)نر)س ن همر آاد)یشرره)ه) و ر نري ن
كر ي رن آادر)یش آن ا ن ص نم بر ر)ي د
.تي) ش نب)شي نوش آ.)ن و . یع د
منابع ، ب ن.ر .ر و يد ي وي آير گ بر) هر (ن1831 نننمص ي آبر) شر) ني، و نننم ح) ح) ثای
ن28-82 صيح)س: ،2، شم)ن 2 ون ، ن گ)وه)ي ه ان ددو دپنشث ی ن (BHV-1) 1وی وی
ب) ي ب و .ره)ت وی و.ر (ن ف و ن حض ن آنت 1831 مننن ص ي آب) ش) ني، مننن و ) ثای ،ح) ح
ن111ه)ي كشت)ن شي ن كشت)نگ) ه ان ط ح حق ق) شم)ن ن گ)ود ش 1گ)و و ه وی وی
اد)ن حق قر)س 22ه وی وی ه)ي گ)وي و نقش ب م)ني ا ی آنه)ن نش ی شم)ن ن(1811حض ، حن(.
كش)وناي ن ت ت ن اين
هر)ي ه)ي وري ویر وی (ن ب ن. د ن ن ش ع ) س1831 نشث ، م و نبث)ئ ، ی ،نننم ،ك)نگBLV, BH4 ,
BVD, PI3 IBR, وري 2شم)ن ، ن گ)ود ش ه)ي د تق ن د كن ه .پ م ن نود ن وهش و .)انيگ ،
ن11-28 )سصيح ،11
ندا ارجمندي و همکاران ... بهسازي سرم در تشخیص آلودگی مقایسه کیت تجاري الیزا با خنثی
992
دق)ی ك ي د)ني ي رن بر) آادر)یش (ن 1831مننن ص ي آب) ش) ني، مننن و ) ح) ثای ،ح ،د)د ، فن
ويي .)اي وی وی هي س آنت ب) ي وي وی وی .ه)ت وی و. گ)و ن گر)ود شن ددور دپنشرث
ن ی نن ن .ي چ)پ
آي گ بر ویر وی وي وي (ن ب ن. . 1831 نصي ي، ح و ن )ج بخش، ن،دمت)ا، ح ن،ا ، فهميIBR ن
ن83-18 )س:صيح ،11، وي 2شم)ن ،گ)و ني ه)ي .ت)ن چه)نده)ت بخت )نين وهش و .)انيگ Amoroso, M.G., Corrado, F., Carlo, E. De., Lucibelli, M.G., Martucciello, A., Guarino, A., et al.
(2013). Bubaline herpesvirus 1 associated with abortion in a Mediterranean water buffalo.
Research Veterinary Science 94: 813-816.
Castrucci, G., Ferrari, M., Osburn, B.I., Frigeri, F., Barreca, F., Tagliati, S., et al. (1996). Further
investigations on the efficacy of a nonspecific defense inducer evaluated in calves exposed to
infectious bovine-rhinotracheitis virus. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious
Disease, 2(21): 155-163.
Albayrak, H., Ozan, E., Beyhan, Y.M., Kurt, M. and Kilicoglu, Y. (2012). A serological
Investigation of Some Aetiological Agents Associated with Abortion in Domestic Water Buffalo
(Bubalus bubalis Linneaus, 1758) in Samsun Province of Northern. Atatürk Üniversitesi
Veteriner Bilimleri Dergisi, 7(3): 155-160
Carvalho, O.S., Gonzaga, L.N.R., Albuquerque, A.S., Bezerra, D.C. and Chves, N.P. (2015).
Ocuurence of Brucella abortus, Leptospira interrogans and bovine herpesvirus type 1 in buffalo
(Bubalus bubalis) herd under extensive breeding system. African Journal of Microbiology
Research, 9(9): 593-603.
Ferankenak, F.P. (1997). Probability of detecting antibodies to BHV-1 in bulk milk after
production of a positive animal on to negative farm. Journal of Veterinary Record, 140: 90-92ن Karshoek, M.J., Rijsew, J.K. and Vanairschat, J.T. (1996). Persistent of antibodies against BHV-1
and Virus reactivation two to three years after infection. Veterinary Microbiology, 53: 103-110.
Kampa, J. (2006). Epidemiology of Bovine viral diarrhea virus and bovine herpesirus type 1
Infections in dairy cattle herds, evidence of self-clearance and detection of infection with a new
atypical pestivirus. Doctoral thesis Swedish University of Agricultural Sciences Uppsala, pp: 17-
21
Lucas, M.H., Westcott, D.G. and Edwards, S. (1986). Immunofluorescence and cell culture
techniques in the diagnosis of viral infection of abortive fetus. Journal of Veterinary Record, 114:
243-242.
McDermott, J.J., Kadohira, M., Ocallaghan, C.J. and Shoukri, M. (1997). A comparison of
different Models for assessing Variations in the sero-prevalence of infectious bovine
rhinotracheitis by farm, area and district in Kenya. Preventive Veterinary Medicine, 32: 219-234.
Motha, M.X.Y and Hansen, M.F. (1998). Prevalence of IBR (infectious bovine rhinotracheitis),
PI3 (parainfluenza type 3), BRS (bovine respiratory syncytial) and BCV (bovine coronavirus)
infections in the dairy cattle population of New Zealand. New- Zealand Veterinary Journal, 46(6):
239-240.
Riegel, C.A., Ayers, V.K. and Collins, J.K. (1987). Rapid, sensitive, competitive serologic
enzyme-linked immunosorbent assay for detecting serum antibodies to bovine herpesvirus type 1.
Journal of Clinical Microbiology, 25(12): 2418-2421.
Robert, F.K. (2001). Viral Disease of Cattle. Second edition. USA: Iowa State, University Press,
pp: 113-126, 159-170. Rodostits, O.M., Gay, C.C., Hinchcliff, K.W., and Constable, P.D. (2007). Veterinary Medicine.
9th ed., London: W.B. Saunders, pp: 1085-1105.
9394 پاییز، 33، پیاپی 3، شماره 9دوره شناسی درمانگاهی دامپزشکی آسیب
999
Scicluna, M.T., Saralli, G., Bruni, G., Sala, M., Cocumelli, C., Caciolo, D., et al. (2007).
Epidemiological situation of Herpesvirus infections in buffalo herds: Bubaline Herpesvirus1 or
Bovine Herpesvirus1. Italian Journal of Animal Science, 6: 845-849.
Smith, B.P. (2009). Large Animal Internal Medicine. 2nd ed., London: Mosby, 635-636, 809-814.
Tautz, N., Meyers, G. and Thiel, H.J. (1998). Pathogenesis of mucosal disease a deadly disease of
cattle caused by a pestiviruse. Clinical and Diagnostic Virology, 10: 121-127.
Tekes, L., Markos, B., Kecskemeti, S., Meheshalvi, J., Mate, Z. and Kudron, E. (1999).
Prevalence of bovine herpesvirus 1(BHV-1) infection in Hungarian cattle herds. Acta Veterinary
Hungarica, 47(3): 303-309.
Yossef, N.M.A. (1997). Prevalence of antibodres to bovine res piratory syncytial virus, infectious
bovine rhinotracheitis and parainflaenza-3 in Cattle and buffalo calves. Egyptian Journal of
Agriculture Research, 75(4): 1135-1146.
FAO. (1977). Animal Production and Health, the Water Buffalo, 4: 109-111.
ندا ارجمندي و همکاران ... بهسازي سرم در تشخیص آلودگی مقایسه کیت تجاري الیزا با خنثی
933
Veterinary Clinical Pathology, Vol. 9, No 35, Autumn 2015
622
Comparison of commercial ELISA kit with serum neutralization (SN) in
diagnosis of BHV-1 infections in water buffalo (Buballous buballis)
Arjomandi, N.1, Haji Hajikolaei, M.R.2*, Seyfi Abad Shapouri, M.R.3, Dagheri, M.4
1- Graduate of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of Ahvaz, Ahvaz, Iran.
2- Professor, Department of Clinical Science, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran
University of Ahvaz, Ahvaz, Iran.
3- Professor, Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran
University of Ahvaz, Ahvaz, Iran.
4- Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Shahid Chamran University of
Ahvaz, Ahvaz, Iran.
*Corresponding author email: [email protected]
(Received: 2015/9/4 Accepted: 2015/12/21)
Abstract
In order to compare commercial ELISA kit with serum neutralization (SN) in diagnosis of
BHV-1 infection, blood samples were taken from 150 (100 male, 50 female) slaughtered water
buffalo (Buballous buballis) at Ahvaz abattoir. Sera were tested by commercial ELISA kit and
SN to determine antibodies against BHV-1. Out of 150 buffaloes, prevalence of infection with
BHV-1 in ELISA and SN was 54% (81 samples) and 58/7% (88 samples) respectively.
Statistical analysis showed there was no significant difference between ELISA and SN for
detection of antibodies to BHV-1 in sera of water buffalo.
Key Words: Buffalo, ELISA, Serum neutralization, Bovine Herpesvirus-1.