˘ˇ ˆ streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · pdf filephysical stability and antimicrobial...

156
Streptococcus mutans 2552

Upload: ledung

Post on 06-Mar-2018

230 views

Category:

Documents


3 download

TRANSCRIPT

Page 1: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

���������������� �������������������� Streptococcus mutans ������������������

�!��"#���$%����&��!�'&�

�#

���(��)�!��*��+ '�,����

���������+��$'�-�(���&�.������!)./����&��(0�!�!�**�����)�(�!�&�"�12��

(������������!���'�(��)�(�!+

"�12�������� �&�������)����!

�3�!)./� 2552

���(��������"�12�������� �&�������)����!

Page 2: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

���������������� �������������������� Streptococcus mutans ������������������

�!��"#���$%����&��!�'&

�#

���(��)�!��*��+ '�,����

���������+��$'�-�(���&�.������!)./����&��(0�!�!�**�����)�(�!�&�"�12��

(������������!���'�(��)�(�!+

"�12�������� �&�������)����!

�3�!)./� 2552

���(��������"�12�������� �&�������)����!

Page 3: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

PHYSICAL STABILITY AND ANTIMICROBIAL ACTIVITY AGAINST

STREPTOCOCCUS MUTANS OF NANOEMULSIONS CONTAINING VOLATILE OILS

By

Sirikarn Pengon

A Thesis Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree

MASTER OF SCIENCE

Program of Pharmaceutical Science�

Graduate School

SILPAKORN UNIVERSITY

2009

Page 4: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

����������� � ����������� �������� ���������������� ������������!�

"�#$���%���&��'(��)� Streptococcus mutans *���+������'���(���#���,���-.��� ���#� /

�0��+, ��0������1&�� ��2���� ��3�0)�� �4��*�����4�5�� ���06�����11����0��

� ������ 0*��'��������!0�'�0���

77...........................................................

(����0��&�� ,�.����'� '��#����6�)

���,(�����������

����(�..........�,���.................... �.�...........

�&���(���4�5���������

1. �!0�'�� ����0��&�� ,�.0�� ��-�����!�����%

2. �!0�'�� 1�� ����0��&�� ,�.'���� ��-�����!�����%

.......................................................... ��#��������

(�!0�'�� 1�� =6�')��0��&�� ,�.&��(� �&��1�(��6���)

............/......................../..............

.................................................... ������

(�!0�'�� ����0��&�� ,�.��(0��� 0��*����&(�)

............/......................../..............

.................................................... ������

(�!0�'�� ����0��&�� ,�.�����,�% ��(������,�%)

............/......................../..............

.................................................... ������

(�!0�'�� ����0��&�� ,�.0�� ��-�����!�����%)

............/......................../..............

.................................................... ������

(�!0�'�� 1�� ����0��&�� ,�.'���� ��-�����!�����%)

............/......................../..............

Page 5: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

51361208 : 0*��'��������!0�'�0���

�.0.��1 : �+������'��/ �-.��� ���#� / ������'�-�&������(�

�����1&�� ��2���� : �����������!�"�#$���%���&��'(��)� Streptococcus mutans *��

�+������'���(���#���,���-.��� ���#� . �&���(���4�5��������� : !�.��.,�.0�� ��-�����!�����%

"�# !1.��.,�.'���� ��-�����!�����%. 134 ��.

0�0��,&�0���F����'��,+,�G�#�-.��� ���#� &���' "0,����0��H�������

�'�-�&������(��(��)0��& �)�F��2���-.��� ���#� �(*��&.��,�����'� ������&�F�)�*�����-."�#�*����F�)F,�

���*��� �����)�� ���4�5���-��(-�(���H���#0��������"���I1 +,�����(��"����-.��� ���#� � ��6)

���6��+������'��'��,�-.������-.�(��(����*����F,�,(����-. +,F,��.���4�5+,�'��-.��� ���#� F,�"�)

�-.�������6 �-.���0��J����� �-.���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#�-.����(��( "�#

�4�5�I&&��(��(=��)����0��������!�*���+������'�� F,�"�) '��,"�#�����*���-.��� ���#� "�#

0��,"���4�=�� (polyoxyethylene sorbitan monostearate (POS), PEG-40 hydrogenated castor oil (PGO),

sodium lauryl sulphate (SLS) "�# poloxamer (PLX)) �����(��+������'���.F,�+,���IR�=0�0)��*��

�-.������0)��*���-. "����.F���#����=�,������,*�,���!� ��#&�����-�=��*�����!� ,�-.��� "�#

���0����������������!����� ���&���-��.06���(�� �#0�F���#�������0��H�������

�'�-�&������(� &����4�5"0,�� �� 2��) '��,"�#�����*��0��,"���4�=��"�#�-.��� �(=��)���������

���!�*�������'�� 06���(��(0)��=0�*�� PGO F,������'���(��(�����������!�,( "�#�(*�, ,

�-.����6)��')���+����� *�,���!��,��&� 2.163 F�+��������3� 114 �+����� ���������������*��

PGO &� 1 ��3�����# 10 +,�-. ��� 06���.����(��(0)��=0�*���-.��� ���#� F,�"�) �-.���0��J������� �-.

���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�# �-.����(��(�(�����������!�,( "�#�(*�,

,�-.����6)��')���+�������������(��)������-.���H���� ������0�,0)�� 1:1 0)��06���.����(��(0)��=0�*��

�-.�������6"0,���"�'�-� (cracking) *�������'�� �������2� =����,���"0,�� �� 2��)������#���

�����("�#����(*�-�*���-.��� ���#� �(=��)������������!�*�������'�� ���4�5�)��F,��.

�����'��06���(�� �#0�F���#����=���T)�'�-� Streptococcus mutans 104B ,�����(���&��&���� �� ��

V4�����)�+������'��"0,�=���T)�'�-�F,� 100 ������V2��� +,0������4�5���-��(-F,�"0,�� �� 2��I&&��(��(

���0.��1�)����0�����*���+������'�� ����6��(�F,�&����4�50��H�.F��'���3�"����������W�

06���.����+������'���(��($���%���&������(��������)�F�

0*��'��������!0�'�0��� ������������ ����������� �J���4�5 2552

����'�������4�5 .....................................................................

����'����&���(���4�5��������� 1......................................... 2.........................................

Page 6: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

&

51361208 : MAJOR : PHARMACEUTICAL SCIENCES

KEY WORDS : NANOEMULSIONS/ VOLATILE OILS/ ANTIMICROBIAL ACTIVITY

SIRIKARN PENGON : PHYSICAL STABILITY AND ANTIMICROBIAL ACTIVITY

AGAINST STREPTOCOCCUS MUTANS OF NANOEMULSIONS CONTAINING VOLATILE

OILS. THESIS ADVISORS : ASSOC. PROF. SONTAYA LIMMATVAPIRAT, Ph.D., AND ASSOC.

PROF. CHUTIMA LIMMATVAPIRAT, Ph.D. 134 pp.

Some herbal extracts, especially volatile oils from plants, demonstrated interesting

antimicrobial activity. However, most of them have a limited application due to water immiscibility

and incompatibility with body fluids. The purpose of the study was to solve the problems by

conversion volatile oils into biocompatible oils in water (o/w) nanoemulsions. The volatile oils

used in the study were clove oil, spearmint oil, peppermint oil, optamint oil, eucalyptus oil and tea

tree oil. Factors affecting physical stability of nanoemulsions containing volatile oils such as types

and amounts of volatile oils and surfactants (polyoxyethylene sorbitan monostearate (POS),

PEG-40 hydrogenated castor oil (PGO), sodium lauryl sulphate (SLS) and poloxamer (PLX))

were investigated. The nanoemulsions were prepared by blending oil components with water

phase and then evaluated for particle sizes, particle charges of oil droplets and other physical

stabilities. The optimized formula was also tested for the antimicrobial activity. The results

demonstrated that types and amounts of surfactants and volatile oils affected the physical

stability. Formula containing PGO showed good physical stability and the droplet size was in

nanometer range. The droplet size was decreased from 2.163 µm to 114 nm as increasing

amount of PGO from 1 to 10 %w/w. Formula containing volatile oils such as spearmint oil,

peppermint oil, optamint oil, eucalyptus oil and tea tree oil showed good physical stability and the

droplet size was in nanometer range when combined with soybean oil at a ratio 1:1. However,

formula containing clove oil showed cracking after storage. The result suggested that chemical

components and polarity of clove oil affected physical stability of emulsion. The selected formula

was determined for antimicrobial activity against Streptococcus mutans 104B using broth dilution

method. The nanoemulsions demonstrated 100% inhibition. The possible mechanism might be

involved with the disruption of bacterial cell wall. In conclusion, the study demonstrated the crucial

variables that determined the properties of nanoemulsions. The knowledge gain in this study

could support the formulation of stable and effective antimicrobial nanoemulsions in the near

future.

Program of Pharmaceutical Sciences Graduate School, Silpakorn University Academic year 2009

Student’s signature ………………..………..…

Thesis Advisors’ signature 1…………..…...…………....… 2…………..………….….……..

Page 7: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

G

��������������

�����.��������������� �����������!�"�#$���%���&��'(��)� Streptococcus

mutans *���+������'���(���#���,���-.��� ���#� 0.��2&�������H���#0���F,���3��)�,(

,���������"�#���')�� ���&��!0�'�� ����0��&�� ,�.0�� ��-�����!�����% "�#

�!0�'�� 1�� ����0��&�� ,�.'���� ��-�����!�����% �(�� ��.��4�5 �."�#�.�)�Y ���H4���

���&"��F*&����������G����(-0.��2&��F,��)�0��6��� =6��*(�*�*����#�����3��)�06�F�� �

+��0�(-

*�*����#����!0�'�� 1�� =6�')��0��&�� ,�.&��(� �&��1�(��6���, �!0�'��

����0��&�� ,�.�����,�% ��(������,�% "�#�!0�'�� ����0��&�� ,�.��(0��� 0��*����&(��(�� �

���������3���#�� "�#��#������0�������-��(-

*�*����#���������0���0�������&� �����&�� ������ 0��. 0*����0���"�#

���+�+�( !���+������'����+�!���=����������&� ��� 0��.-���0 �����(�0���0���

������������.����&�'�-��(-� �0.��2&���)��F�F,�,��,(

*�*����#�������0��&�� ����"��� &����� �6��W�0�'�� !���'&��'(����

��#����"���0��� � �����&�Z������ "�#=6�')��0��&�� ,�. ��'� ��+'���� !���'

&��'(���� ��#����0��� � ����������� �(����-��.���'�-�"���(��(������&�'�-��(-

*�*����#����&�� ��#�!0�'�0��� � ����������� ����)��(�� �����6� � �

0H��(������.����&� "�#� ��.��4�5�)�,(�0���

*�*�����������Y 0*��������!0�'�0��� (��.�.) "�#������Y �(�Y �(����

�[����������+�+�(�!0�'��������)� �(�� ��.����& �)����-��.�����0#,�������'�����������

"�#������������.��&���3��)�,(

*�*������������� �)� "�) "�#����0� �(���� ��.��4�5 "�#"�#�.���������)�Y

�����-���3��.����&�(�,(�0���

Page 8: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

'

����

��

����,)�!5F� .................................................................................................................... �

����,)�!5����$5 ............................................................................................................... &

�����������#�� ..................................................................................................................... G

0���1��� ............................................................................................................................ 1

0���1!� ............................................................................................................................... \

���(�

1 ���. .......................................................................................................................... 1

�����3��"�#���0.��1*���I1 ................................................................. 1

�����)� �"�#���H���#0���*�����4�5 ....................................................... 5

0����\�*�����4�5 ........................................................................................ 5

*���*�*�����4�5 ............................................................................................ 5

2 ������������� ....................................................................................................... 7

+��^I�=� ................................................................................................................. 7

���&������(� .............................................................................................. 7

0)����#���*�����&������(� .................................................................. 7

'��,*�����&������(� ................................................................................ 9

��0������&������(� ................................................................................ 9

���#�*��������^I�"�#���-�^I� ........................................................... 12

���5�#*��^I��(��(0�*!�,("�#^I�=� .......................................................... 13

�I&&��������,^I�=� .................................................................................... 16

����6���-�\�*��"���(��( ........................................................................ 16

�'�-�"���(��(��')���� .............................................................................. 19

"���(��(�(���3�0� ��*��+��^I�=� ............................................................. 22

���)�+��*�� Streptococcus mutans ......................................................... 26

�����'�� ................................................................................................................... 32

'��,*�������'�� ........................................................................................... 32

0)����#���*�������'�� ............................................................................ 35

��F������,�����'�� .................................................................................... 36

Page 9: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

V

���(� ��

0�����*�������'�����������0.�� ............................................................. 37

���F�)��������!�*�������'�� ........................................................ 40

�+������'�� ......................................................................................................... 41

����#�����'��+������'�� ....................................................................... 42

���0���������T)�'�-�&��'(�*���+������'�� .......................................... 42

�-.��� ���#� .................................................................................................... 47

�-.�������6 (Clove oil) ............................................................................. 49

�-.���0��J������� (Spearmint oil) ................................................................ 49

�-.���������������� (Peppermint oil) .......................................................... 50

�-.���6������0 (Eucalyptus oil) ................................................................. 50

�-.����(��( (Tea tree oil)............................................................................... 51

�-.���H���� ���� (Soybean oil) ................................................................................ 51

�-.������ (Mouth Wash) ................................................................................ 52

3 ���(,.��������&� ........................................................................................................... 56

0����(�(��'�������&� ........................................................................................... 56

�����������(��'�������&� ........................................................................................ 57

���(,.��������&�.................................................................................................... 58

�����(������'�� ......................................................................................... 58

����#�������!�*�������'�� ........................................................... 62

���,0��$���%���-��'�-��)�+������������*�������'�� ...................... 64

4 =�"�#�!���=�*�����4�5 ................................................................................... 65

���4�5�I&&��(��(=��)����0��������!�*�������'�� ................................. 65

=�*��0��,"���4�=���)������,�����'�� .................................................. 65

=�*��'��,0��,"���4�=���)����0�����*�������'�� ...................... 66

=�*�������0��,"���4�=���)����0�����*�������'�� .................. 74

=�*���-.����)������,�����'�� ................................................................... 83

=�*��'��,�-.��� ���#� �)����0�����*�������'�� ..................... 83

=�*��0�,0)���-.���H���� �����)����0�����*�������'��*���#���(�

��#���,���-.���������������� ............................................ 91

Page 10: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

w

���(� ��

=�*���-.���H���� �����)����0�����*�������'��*���#���(���#���

,���-.��� ���#� '��,�)���� ............................................. 100

���4�5���0��H*�������'���������-��'�-�&������(��)�+������������

(S. mutans) ................................................................................................... 108

=�*���-.��� ���#� '��,�)�Y ���+������'���)����0��H��

�����-��'�-� S. mutans ...................................................................... 108

=�*���+������'��&��-.���H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y

�)����0��H�������-��'�-� S. mutans .................................... 110

5 0���=�*�����4�5��&� .............................................................................................. 112

���0������� ............................................................................................................................ 113

!�=��� .................................................................................................................................. 121

��#����=6���&� .............................................................................................................................. 134

Page 11: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

1

���� ����� ����(� ��

1 ����#&���*��"���(��(�(����������V��&����." �)��)�Y *��

')���� ................................................................. 20

2 '��,*��"���(��(�(�F�)���������V��&� ....................................... 21

3 ����#&���*��"���(��(�(�F�)���������V��&����." �)��)� Y

��')���� ............................................................................................. 22

4 ���5�#!����(����� 2�*�������'��"�#*�, ,���!�*����[!�

!�� ..................................................................................................... 32

5 =���T)�'�-�"���(��("������'��,�)�Y ,���+������'�� ���&���

=0��(���� 10 "�# 30 ��( .................................................................... 43

6 =���T)�'�-�"���(��("�����'��,�)�Y ,���+������'�� ���&���

=0��(���� 10 "�# 30 ��( .................................................................... 44

7 "0,�=���T)�'�-��'��,�)�Y ,���+������'�� ���&���=0��(� 10 "�#

30 ��( .................................................................................................. 46

8 06�������(������'��������4�5=�*��'��,0��,"���4�=�� .......................... 59

9 06�������(������'��������4�5=�*�������0��,"���4�=�� ...................... 59

10 06�������(������'��������4�5=�*��'��,�-.��� ���#� ......................... 61

11 06�������(������'��������4�5=�*���-.���H���� �����)����0�����*��

�����'�� ................................................................................................... 61

12 06�������(������'��������4�5=�*�����'��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)������0�,0)�� 50:50 �)����0�����*��

�����'�� ................................................................................................... 62

13 "0,�=���������*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,�)�Y........... 122

14 "0,�=���������*�������'���(����(�&�0��,"���4�=�����)� PGO

������)���� ........................................................................................ 122

15 "0,�=���������*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,�)�Y ......... 122

16 "0,�=���������*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.������������������0�,0)���)�Y ..................................................... 123

Page 12: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

z

����(� ��

17 "0,�=���������*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y ................................................................... 123

18 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,�)�Y ...... 124

19 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&� PGO ������)�Y .................. 124

20 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,�)�Y ..... 124

21 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.������������������0�,0)���)�Y ..................................................... 125

22 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y ................................................................... 125

23 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&�

0��,"���4�=��'��,�)�Y ..................................................................... 126

24 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&�

PGO ������)�Y ................................................................................. 126

25 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���

���#� '��,�)�Y ............................................................................. 127

26 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���H���� ����

�)������-.������������������0�,0)���)�Y ......................................... 127

27 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���H���� ����

�)������-.��� ���#� '��,�)�Y ........................................................ 128

28 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,�)�Y . 128

29 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&� PGO ������)�Y ............ 128

30 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,�)�Y 129

31 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)�����

�-.������������������0�,0)���)�Y ..................................................... 129

32 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y ................................................................... 130

33 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

���#� '��,�)���� (1x) ................................................................... 131

Page 13: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

[

����(� ��

34 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

���#� '��,�)���� (10x) ................................................................. 131

35 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

���#� '��,�)���� (100x) ............................................................... 132

36 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (1x) ................................. 132

37 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (10x) ............................... 133

38 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (100x) ............................. 133

Page 14: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

\

���� ��� !��(� ��

1 ����#*��+���(����=��^I�+,�("���V(���3�0#�� ............................... 8

2 ����#*��"���(��(�������G�^I� ............................................................... 10

3 '��,*��^I�=� ................................................................................................... 12

4 Structure of Healthy Tooth .............................................................................. 13

5 White Spots ................................................................................................... 14

6 Enamel Decay .................................................................................................. 14

7 Dentin Decay ................................................................................................... 15

8 Pulp Involvement ............................................................................................. 15

9 +���0���*��"���(��(+,0���*� ................................................................. 17

10 =��� ����V���*��"���(��('��,"������"�#"����� ................................. 19

11 "���(��("������ �6��)���� ����(�)������3�00�-� ����

(Streptococci) ........................................................................................ 23

12 +�+��(*�� Streptococcus mutans ................................................................... 24

13 +�+��(*�� Streptococcus sobrinus ................................................................. 24

14 "���(��("������ �6��)���3�"�)� �&��3�"�)�0�-� ����

(Lactobacillus) ...................................................................................... 26

15 +���0��������������6"���(��#��-. ........................................................... 28

16 +���0��������������6"���(�F�)�#��-. ...................................................... 28

17 �[����������(��F��6�����3�"�����+,���FV�� LDH ............................. 29

18 ���0��H����0�����,*�� streptococci 0�������)� Y

��0!�#�(���3���� (�(��' 7.0) ........................................................... 30

19 ���0��H����0�����,*�� streptococci 0�������)� Y

��0!�#�(���3���, (�(��' 5.0) ............................................................ 30

20 water-in-oil emulsion "�# oil-in-water emulsion ........................................... 33

21 ���5�#�+������'��*�� aceclofenac �(�H)!�,�� TEM (Transmission

Electron Microscope) ............................................................................ 42

Page 15: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

!��(� ��

22 ��^"0,�=���T)�'�-�F���0*���+������'�� (BCTP) +,�(�����*��*��

10% "�# 1% ���[=���T)�'�-� vaccinia, influenza A "�# Herpes

simplex virus F,� 100% ����� 15 ��( ............................................... 45

23 !�H)&������ Electron microscopy *���'�-� influenza A �(�=0�����+�

�����'�� .................................................................................................. 45

24 Kinetics *����T)�'�-� Candida albicans ,���+������'������*��*��

1% "�# 10% �(�����)�Y +,�( BHI medium ��3���������� ............. 46

25 !�H)&������ Electron microscopy *�� Candida albicans �(�=0����

�+������'�� ......................................................................................... 47

26 "=�!�*�-���������(������'��+,�4�5=�*��0��,"���4�=�� ............ 58

27 "=�!�*�-���������(������'��+,�4�5=�*���-.��� ���#� .......... 60

28 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=���)�'��,���

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ��������(�"�#

��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� ...................................... 67

29 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=���)�'��,���

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ��������(�"�#

��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 1 0��, �....................................... 67

30 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=���)�'��,���

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ��������(�"�#

��2�F���(�0!�#��)� ................................................................................. 68

31 ��^"0,����0��������# �)�'��,*��0��,"���4�=�� (S1 : POS,

S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) �)���������*�������'�� .......... 68

32 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4 '��,

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�"�#

��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���*

= 100x) .................................................................................................. 70

Page 16: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

W

!��(� ��

33 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4 '��,

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�

"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�#

1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� .................................................. 71

34 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�F,�&�0�

�,"���4�=�� 4 '��, (S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX)

! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3����

24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� .......................... 73

35 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4 '��,

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�"�#

��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �

"�# �������2��(�0!�#��)� ................................................................. 74

36 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO

������)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10%

+,�-. ���) ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3����

24 '���+�� ............................................................................................... 76

37 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO

������)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10%

+,�-. ���) ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3����

1 0��, � ............................................................................................... 76

38 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO

������)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10%

+,�-. ���) ��������(�"�#��2�F���(�0!�#��)� .............................. 77

39 ��^"0,����0��������# �)������*�� PGO (C1 : 1%, C2 : 2.5%,

C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) �)���������*��

�����'�� .................................................................................................. 77

Page 17: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

!��(� ��

40 !�H)+,�����&�������� *�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)�

PGO ������)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�#

C5 : 10 %+,�-. ���) ��������(�"�#��2�F���(���� !6��

25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* = 100x) ................... 79

41 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&����'� PGO ������)����

(C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���)

! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24

'���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� ............................... 80

42 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�F,�&����'�

PGO ������)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�#

C5 : 10 %+,�-. ���) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+�� "�# 1 0��, �"�# �������2��(�

0!�#��)� .............................................................................................. 81

43 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&����'� PGO �����

�)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %

+,�-. ���) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0

��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� ........... 82

44 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� ....... 84

45 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 1 0��, � ........ 85

46 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

��������(�"�#��2�F���(�0!�#��)� ................................................... 85

Page 18: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

,

!��(� ��

47 ��^"0,����0��������# �)��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

�)���������*�������'�� ..................................................................... 86

48 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,

�)�Y (V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 :

�-.����������������, V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0

"�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* = 100x) ........................ 87

49 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��

"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� .......................................... 88

50 "0,��)��� ��,*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() . 89

51 "0,��)V(��+�����'(�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������,

V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3����

24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� .......................... 90

52 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#�

'��,�)�Y (V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 :

�-.����������������, V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0

"�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2�

�(�0!�#��)� ............................................................................................ 91

Page 19: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

!��(� ��

53 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)��

����-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ���

50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�#P6 ��� 10:90)

��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3����

24 '���+�� ............................................................................................... 93

54 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ���

40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�#P6 ��� 10:90) ��������(�

"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 1 0��, � .................. 94

55 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ���

40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ��������(�

"�#��2�F���(�0!�#��)�........................................................................... 94

56 ��^"0,����0��������# �)������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)��

����-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50,

P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) �)����

�����*�������'��................................................................................... 95

57 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)��

����-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50,

P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ! ���

�����(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��

(�.���* = 100x) ............................................................................... 96

58 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ���

40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ! ��������(�

"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �

"�# �������2��(�0!�#��)� ................................................................. 97

Page 20: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

H

!��(� ��

59 "0,��)V(��+�����'(�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)��

����-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ���

50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90)

��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24

'���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� ............................... 98

60 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50,

P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90)

��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3����

24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)� .......................... 99

61 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������,

F3 : �-.����������������, F4 : optamint oil, F5 : �-.���6������0 "�#

F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 1 0��, � .......................................................... 101

62 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������,

F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0

"�# F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3�

��� 1 0��, � ....................................................................................... 102

63 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������,

F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0

"�# F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(�0!�#��)� ................ 102

64 ��^"0,����0��������# �)������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������,

F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0

"�# F6 : �-.����(��() �)���������*�������'�� .................................. 103

Page 21: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

!��(� ��

65 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� ����

�)������-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 :

�-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������,

F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F��

�(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* = 100x) .. 104

66 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 :

�-.����������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0 "�#

F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0

��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, � "�# �������2��(�0!�#��)� .......... 105

67 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 :

�-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������,

F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ! ��������(�"�#��2�F��

�(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�#

�������2��(�0!�#��)� ........................................................................ 106

68 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������,

F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0

"�# F6 : �-.����(��() ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ���

�V��V(0��3���� 24 '���+�� "�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#

��)� .......................................................................................................... 107

69 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,��

�-.��� ���#� '��,�)���� (V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������,

V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0,

V6 : �-.����(��(, positive control : 0.2%CPC "�# negative control :

�����'���(����(�F,�&��-.���H���� ����) �(�����*��*���)�Y ................ 109

Page 22: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

!��(� ��

70 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(����(�F,�&�

�-.���H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6,

F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 : optamint oil,

F5 : �-.���6������0, F6 : �-.����(��(, positive control : 0.2%CPC

"�# negative control : �����'���(����(�F,�&��-.���H���� ����)

�(�����*��*���)�Y ............................................................................... 111

71 ��^���\��'�-� Streptococcus mutans 104B ............................................. 130

Page 23: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

1

����� 1

�����

��������������������� ����� ��

+��^I�=���3�+����')�����(���F,���-�"�)���,2�&�H4���=6�� 1) H����3��I1

0���0�*�(���F,�����F��� �!6��!�����#���F� 0� ��*��+��^I�=���-����,&����

&������(� (microbial plaque) �(��(�6)��')����+,����F� ���#�*��^I� ��� hydroxyapatite

�.� �^I����R�"�# ��,��� ���,��3�+���^I�=� ���#��(-&#�(��,4���"���V(����

(chelation) ,�� lactate V4�����(�(-F�)&.��3��������0!�#�(���3���, "�#���#�^I�+,

���FV��*��"���(��(�.�0������(��(�"����6)�# �)� hydroxyapatite �.� � hydroxyapatite

��,���F��) ���"���(��(�(���FV���(�0��H,4���^�0�^����F�&� hydroxyapatite �.

� ��(��0�*��^I� (�����2'� �,'#��#������ 2536 : 9-17) "�)�2��F�)�(=�����&��(�0���0���

��(��� &4������'����$5z(�(��)��,�����(��(�"���(��(0���*4-��#� hydroxyapatite � ��=��(�

0���0����$5z(�(-��� ����������&������(�������(�-.�� &#�( pH �����&������(���.��) 5.5

�6)�## �4�� ��0.��& pH ���Y ������^I�=�&#�( pH ��.��)�������(�F�)=� "�#��0.��&

"���(��(��')�������) �����(��(���������,^I�=�06��( Streptococcus mutans "�#

Lactobacilli 06���)���(��(���������,^I�=���. "�#"���(��(��-� 2 '��,�(-0��H=�����,F,���

�)���,��2� (��( �H(�F��� 2550 : 99)

�'�-��(���3�0� �� ���*��+��^I�=� ����'�-� S. mutans V4��"���(��('��,�(-0��H

���(���-.��V6+��0"�#���+�F��,��F���3���,"����� (lactic acid) �(�0��H)�0�"�)

���������=��^I�F,� (demineralization) +,��F����)�+��*���'�-� S. mutans ��-���#���,��

��F� ��� 3 ��#����� ���0��H����4,��#���=��^I� ���0��H����0�����,"�#

���0��H��������, V4����F���-� 3 �(- &#0)��0���� ��'�-� S. mutans 0��H�&��1�6)��')��

��F,� "��0!�#��')����&#�(�����3���,��. ��*�#�(���0!�#��,��-�&#�(�����3���5�)�

�V���*���'�-����� (��( �H(�F��� 2550 : 97-104)

Page 24: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

2

�����'�� (emulsions) &�,��3��#���(�F�)�(���������������+�F,����0�

(thermodynamically unstable system) ��#���,��*��� ���)����0��'��,V4��F�)=0���3����-�

�,(���� (immiscible liquid) +,*��� ��'��, �4����3� ,*��*��� ���(���#&�6)��

*��� ���(�'��, �4�� ��(�*��� ���(���#&�����3� ,��2�Y �) ���[!�!��/ (dispersed

phase ��� discontinuous phase ��� internal phase) 0)��*��� ���(��(���5�#�)���������-���(��)

���[!�!���/ (continuous phase ��� external phase) (��5� &��������� 2551 ; Wright 1996 : 6-

8 ; Hamouda et al. 2001 : 1-7) ����.�����'��0)��� 1)�����3�0��,"���4�=�� (surfactant) V4��

+��������#���,��0)���(�'���-. (hydrophilic ��� oleophobic) "�#0)���(�F�)'���-.

(hydrophobic ��� oleophilic) �#�������'���(��'��(�6) 2 �#����� �#���-.���-.��� (w/o

emulsion) "�#�#���-.������-. (o/w emulsion) "�)�#���(�����'�&#��3�'��,�-.������-.

������&��*�F,�,(����-.0��H������F,��) "�#0��H�'������.0)�F,� �'��, (Shah,

Bhalodia and Shelat 2010 : 24-32) ���&��(-"����#�������'�����(����)0��&�����.��'�

������&��(�����(��������.�#�������'����'���#+'������T)�'�-�F,� �'��, �')�

Candida albicans, Candida tropicalis, Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes,

Trichophyton rubrum, Aspergillus fumigates, Bacillus subtillis "�# Pseudomonas aeruginosa

��3���� +,�����'��&#�*�F�������������� ����V���*���'�-� "����.����� ����V����.� ��V���

"�� (Shah et al. 2010 : 24-32) �(���-������(�0��(��($���%����T)�'�-�� ��6)���6������'����-�

��')��,�����3���5"�#����#�������)�=�� ���"�#���������� �������(�,�� (Myc et al.

2002 : 195-201 ; Chepurnov et al. 2003 : 315-320 ; Allaker and Douglas 2009 : 8-13 ; Kentish et

al. 2008 : 170-175)

�����'���(�0��H�'�����T)�'�-�+��F,��)��(��#0����!���-� �����3������'���(��(

*�,���!���2���)�#,��F�+������ ����(*�, ,*��*��� ���6)��')�� 200-600 �+�����

������&�&#�����+��0����0��=�0����'�-�� ���*4-� �+������'����3������'��*�,��2���)

�#,��F�+������ �������(��+������'����-�&.��3������ ��������*�F����#��"�#����

��������������(��(���0������G�# F,�"�) homogenizer, ultrasonic vibration "�# high-pressure

homogenizer (Wright 1996 : 6-8 ; Myc et al. 2002 : 195-201 ; Kentish et al. 2008 : 170-175 ;

Jafari et al. 2008 : 1191-1202) ������ ����,����#&���!�*��� ��'��, �4�� �')� �-.��� ��

*��� ���(�'��, �4�� �')� �-. "�#�����'������0��,"���4�=���(������������(� (Liedtke

et al. 2000 : 183�185) +,0��,"���4�=��"�)�F,���3� ����)� *4-��6)�����#&�F^^���0)�� ��

Page 25: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

3

�(��#��-.F,�,( (hydrophilic head) 0. ���0)�� �&#F�)�������-."�)0��H�#����-.���F,�

,( (hydrophobic tail) 0��H"�)�0��,"���4�=�������3� 4 ��#�!� F,�"�)

1. Anionic surfactant ��3�0��,"���4�=���(���#&�F^^��� hydrophilic head � ���#&�

�� 0)����"0,��6)���6� carboxylate, sulfate ��� phosphate 0��,"���4�=����#�!�

=�V��^�� =���!�����.���0#�, �-.���'� ��3����

2. Cationic surfactant ��3�0��,"���4�=���(���#&�F^^��� hydrophilic head � ���#&�

��� 0)�������&#��3���� quaternary 0��,"���4�=����#�!��(-F�)0��H�.��F,���0!�#

�(���3�,)�06� (pH 10-11) ������&������"��+���(�(��061�0(��#&���� �.� ����,�����#���

F,� 0��,"���4�=����#�!��(-&#�.� ����,���#����������)0��,"���4�=����#�!�"��

����'�������-.����=���)� ��(���,=� "�#=���!����&�,"�)����=� ��3����

3. Nonionic surfactant ��3�0��,"���4�=���(�F�)�(��#&� +,�(��� polyether ���

polyhydroxyl ��3����)��(�"0,����0������������(��(��#&� �'�����=�V��^�� �-.���H��'�

=���!�����.���0#�,��-�=�� ��3����

4. Amphoteric surfactant ��� Zwitterions ��3�0��,"���4�=���(��(��#&�F^^���

hydrophilic head 0��H� �F,���-���#&����"�#��#&��� +,&#"0,����0�������#�!��,

*4-����0!������3���,-,)�*��0!�#"�,���� H�0!�#"�,������3�,)� (pH>7) ��#&�F^^�

�� hydrophilic head &#� ���#&��� H�0!�#"�,������3���, (pH<7) ��#&�F^^���

hydrophilic head &#� ���#&���� "�#��0!�#�(���3����&#F�)���,��� ���#&�F^^���

hydrophilic head 0��,"���4�=����#�!��(-����'���=���!������(�����=�� ���=� �I&&�������(

���.��'������������(���(����0��,"���4�=����#�!����� (Holmberg et al. 2003 : 8-22)

0��,"���4�=���(�����.��'������!0�'������(�����=���!������')����"�#

=�� ��� F,�"�) 0��,"���4�=�������)� nonionic surfactant +,�G�#0������)���������*��

polyoxyethylene castor oil �')� Cremophor®RH40 V4����3�0��,"���4�=���(�F�)�(�0*� 0��H�'�

�����#������� ����-.��� ���#� F,�,( �(���-���F�)��3���5"�#F�)�)�� ����,���"���)�

0����('(����(�,�� (Rowe, Sheskey, and Owen 2006 : 572-579)

�+������'����3��#���(��(���!������.��'����!0�'���� �')� �'���3��#��

�.0)� (drug delivery system) +,�G�#�(��(���#���. ������&����)�+������'��&#')�

��������#�*��"�#�����'(���#0����=� (bioavailability) *�� �')� etoposide methotrexate

"�# fluorocarbon V4��F,��(���.�+������'����'����(��(��'���� ��=�� ��� �����3�

�����#�� �')� �,���,��+� �� (antihypertensive drugs) "�#�������0� (anti-

Page 26: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

4

inflammatory drugs) ��3���� (��5� &��������� 2551 ; Chepurnov et al. 2003 : 315-320 ; Hibbard

2005 : 194-207 ; Allaker and Douglas 2009 : 8-13) ���&��(-���(����)�+������'��

0��H�.����� ����V���*��"���(��(�)�+�� (pathogen) F,� �� �0������ +,�(

���0���������������.��G�#��-� ����V���*���V���+�����+�� "�#F���0 "�)F�)�(=�����

�.��V���6���+��V4����3��V������-�����*�����5� (Chepurnov et al. 2003 : 315-320)

0�0��,&�0���F����'��,+,�G�#�-.��� ���#� &���'0���F��"0,�

���0��H�������&������(��)�+�� �I&&�����(-�(���.0�0��,&���'��'���3�0����

�'�-�&������(���3�&.����� V4��0��(�0��,F,�&���'��-�&#��3�0�����#+����� �'��,

0)����&#��3�0�&.���^J��� "�#��������*��^J��� V4��0���-� �,��-���3���"���F���

����!6�� (secondary metabolites) 0�=���!��������'���(�F,�&���'"�#�($���%���&������(�

(antimicrobial activity) F,�"�) phenol "�# phenolic acids, quinines, flavonoids, tannins "�#

coumarins, terpenoids, alkaloids "�# lectins F,��(���.0�0��,&���'��'���=���!����,6"�

')����+,�G�#�-.�������,"�����'�0����(�(��($���%���&������(� 0����(� �)��-�

F,�"�) povidone iodine, chlorhexidine "�# cetylpyridinium chloride ����)���' ���0�0��,

(extract) &���'�(��($���%���&������(� F,�"�) ��0�� (miswak) V4����3�����F��&���� Salvadora

persica V4��'���0�������'��.���0#�,^I� �-.����(��( (tea tree oil) ��3��-.��� ���#�

(essential oil) �(�0��,F,�&���*����� Melaleuca alternifolia �-.���������������� (peppermint

oil) ��3��-.��� ���#� �(�0��,F,�&���*�����0#�#" �) Mentha piperita ( ����6�&�������'���

M. balsamea Willd.) 0�0��,&���'�*(� (green tea) Camellia sinensis "�#�-.=4-���6��

(manuka honey) ��3��-.=4-��(�F,�&���� Melaleuca spp. ��3���� ���I&&��������.�-.��� ���#�

���0�0��,� �)�(-��'���3�0)����#������-.����������������$���%���&������(� +,�G�#

�'�-��)�+��^I�=�"�#+��� ��������0� (Allaker and Douglas 2009 : 8-13) �(����)���'��-.���

���#� �)����� �'��,&#')��0���$���%��� "�#�,���*����(�&����#������

=�� ���F,� ���&��(-���(�����3���5��.�)�=�� ���"�#')���� (Price 1998 : 144-147)

&�����������������(�=)��"0,�� �� 2��)�#���+������'����-� ��3��#��

�(��(��#0����!��������&������(� �(���-�����3��#���(��)��*�����,!� �(=�*����(��)�

���-�����*�����5���. &4���3��#���(��)0��& �)�F��2���#���+������'������3��#���(��(

����������� ��F�)�)�F,��������W� "�#��F�)�(���.��'��)�"��) ���������.�

���(���3��-.T)�'�-�"�#�-.������ ���&��(-���I&&�������(����&�&.������(�

�.���4�5H4�0�0��,&���'�(��($���%���-����&��1����+�*���'�-� S. mutans ����&��(-&4�0��&

Page 27: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

5

�4�5H4��I&&��(��(=��)���������*���-.��� ���#� ���6��+������'��+,�4�5H4��I&&���

,���)� Y �')� '��,*���-.��� '��,"�#�����*��0��,"���4�=�� �����-��4�5$���%����T)

�'�-�*���-.��� ���#� ���6��+������'�� �������3���#+'���������(�"�#��W��+�

�����'���(��(��������"�#�($���%����'�-��)�+�� �(���-����'���3���������������"���-.T)

�'�-�"�#�-.������������'���#+'����,���!0�'����!����#����)�F�

�����!"����#������$!�����%������&�'�

1. ���4�5=�*��0��,"���4�=�� (polyoxyethylene sorbitan monostearate (POS),

PEG-40 hydrogenated castor oil (PGO), sodium lauryl sulphate (SLS) "�# poloxamer (PLX) �)�

��������*���#�������'��'��,�-.������-.

2. ���4�5'��,*���-.��� ���#� F,�"�) �-.���0��J�������, �-.����������������,

�-.������������ �-.���6������0 "�#�-.����(��(�)���������*���#�������'��

3. �4�5$���%�����-��'�-� S. mutans *�������'��

����(��������&�'�

1. �I&&��)�Y F,�"�) '��,*���-.��� (�-.���H���� ����, �-.�������6 "�#�-.��� ��

�#� '��,�)�Y F,�"�) �-.���0��J������� �-.���������������� �-.������������ �-.���6������0

"�#�-.����(��() '��,"�#�����*��0��,"���4�=�� (POS, PGO, SLS "�# PLX) �(=��)����

�����*���#�������'��"�#0��H���(������'���(��(��������F,�

2. �����'���(����(�F,��($���%���-��'�-� Streptococcus mutans

������������&�'�

1. �-.����(��'��������(������'��

�-.���H���� ���� �-.�������6 "�#�-.��� ���#� F,�"�) �-.���0��J�������

�-.���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#�-.����(��(

2. 0��,"���4�=���(��'��������(������'��

POS, PGO, SLS "�# PLX

3. �4�5��������*�������'���(���� !6�� 25 ����V��V(0 "�#0!�#��)�+,0���

��� !6�� 4 ����V��V(0 ��� 45 ����V��V(0 6 ���

Page 28: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

6

4. �4�5���5�#���!�F,�"�) *�,���!�*�� ,�-.��� �)����)�����F^^�

�(���-�=�����!� ��� ��, "�#�)�����3���,-,)�*�������'�� +,���(�)�F��(-

4.1 *�,���!�*�� ,�-.�����,+,�'����������,*�,���!�

4.2 �)��� ��,+,�'�������� Brookfield Digital Viscometer

4.3 �)����)�����F^^��(���-�=�����!���,+,�'�������� Zeta plus

4.4 �)�����3���,-,)���,+,�'�������� pH meter

5. �4�5���0��H�������-��'�-�"���(��(+,�'�-�"���(��(�(��,0����� �'�-�

Streptococcus mutans 104B (S. mutans) ,�����(�&��&���� �� �� (broth dilution) +,�,0��

�����'���(�F�)�&��&� �&��&� 10 "�# 100 ��)���.,��

Page 29: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

7

����� 2

��������)����

*��+��,!

+��^I�=���3�+����')�����(���F,���-�"�)���,2�&�H4���=6�� 1) 0� ��*��+��^I�=�

��-����,&����&������(� (microbial plaque) +,&������(�0)��� 1)��3�"���(��( V4��"���(��(�(�

�6)�����&������(���-��2�����3�&������(�������')�����������

����-!������#%

���&������(� �H4�"=)�����(��(&������(���3�0)����#����(�0.��1 ���&���-��2

&#��3�0���������(� "�#0�������(� ���&������(����,*4-�F,����" )���')���� �������

0)���(�"*2� F�)�)��������F � ��-���,F�F�)H4� "�#�.���0#�,F,�F�)��(��� V4��������

^I� V��^I� ^I����� "�#����0,���,^I� ���&������(����������)� Y ��#���,��"���(��(

�)�'��,���F� "�#������&����&������(���#���,��"���(��(��3�0)��� 1) �����-����&

��(��) ���"���(��( ������^I� (dental plaque)

���&������(��(���5�#��)� ��, 4,��,���=��������^I� �����������^I� +,���

&������(��(����,� �)&# ��,���F,�H�"���^I�H6����("�#����H4� V4����"���^I�"������,����F�

&#F�)0��H*&�,���&������(���)���F,� ���&������(�&#�(0(*�*�)�&�H4�0(� �����)�� *4-��6)

��������)*�����&������(�

"���������������-!������#%

���&������(��(0)����#���0.��1 ���

1. ����G�^I� (acquired pellicle)

2. &������(� (microbial)

3. 0�4,�V��� (intercellular matrix)

4. 0����� Y �')� 0������(� "�#0�������(�

Page 30: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

8

�#/��0��+�� (acquired pellicle) �(���5�#���0G����^I� ���,&�+���(� (protein)

"�#F��+�+���(� (glycoprotein) ���-.� +,=��^I�&#,6,V��+���(�&��-.� ��,6,V����-�

���,&��z�0�������F^^�0H�� (electrostatic interaction) =��^I��(�" ��0#�,�(��#&��� +���(��(�

�6)��=����V���*��"���(��(�2�(��#&����')���� ,����-������,���������&#�����(F�������

��3�0#�� "�#F������-��2���"���V(� (!��(� 1) ����G�^I��(-���,��,��2��� ���,F,�!��

F�)�(���( ���"���^I� ����G�^I�&#�. ���(��������^I�&������*��0��(��6)��� I� �')�

����,��)��&���,�(�"���(��(=���*4-����� "�#�������F�)� �"���(��(��#���������^I� "�)

"���(��(��'��,�2&#��#����G�^I�F,�,( "�#�(��"�)����������G�^I� &4���3�����������*��

�����,���&������(�

!��(� 1 ����#*��+���(����=��^I�+,�("���V(���3�0#��

�(�� : �����2'� �,'#��#������, 0����^I�=�"�#0��,���&������(� (�������� : +�������

&�Z������� �����, 2536), 12.

-!������#% (microbial) &������(������&������(�0)��� 1)�����3�"���(��( +,

"���(��(�(�0.��1F,�"�) Streptococcus, Actinomyces, Neisseria "�# Bacteroids ���&������(�

��#���,��"���(��(��#�� 70-80% ���&�"���(��("����2���(�'�-�� (fungi) +��+�V��

(protozoa) "�#F���0 (virus) ��2����

"���(��(0��H4,���^I�+,���F,� ���(������� ���"�#�)��^I� "�)0)��� 1)&#

��#�������G�^I� ���##��������,���&������(� "���(��(�(���F,����(�0�, ��� Streptococcus

+, Streptococcus �0������0��H=�����,�����&������(�F,�

��#&3�4��% (intercellular matrix) �����"���(��(��#������G�^I� &#���,��"�)����

"���(��(�(���#������G�^I�F,��) F,�"�) Streptococcus +,�G�# Streptococcus mutans V4��

��3�"���(��(0.��1����0���0�4,�V�&��-.��V6+��0 ��� dextrans ��� glucans V4���(���

=�� +���(�

Page 31: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

9

� �(�"�#&#�. ���(������4,� ����&������(���,�6)���=��^I� "�#4,�V���"���(��(F��

,�����"�#����3��(���#*��"���(��(�����*4-�

���/�� 5 F,�"�) �V�����=�� (epithelium) �(� ��,������� 0������(��)� Y �(�F,�&�

�-.� "�#&����.�*��"���(��( 0�������(��)�Y �')� calcium, phosphate "�#

hydroxyapatite

6��3�������-!������#%

���&������(�"�)������3� 2 '��, ���." �)��(����,*4-� F,�"�) ���&������(��(��6)

� ���� ���� (supragingival plaque) "�#���&������(��(��6)���� ���� (subgingival plaque) ��

�&��1*�����&������(��(��6)���� ������-�&#'���)���&������(��(��6)� ���� ����

����7������-!������#%

��0������&������(� +,����F����&������(�&#��#���,�� ����G�^I�

"���(��("�#� � +,�G�#+���(�"�#���+�F��,�� 0��H"�)������,���&������(�

�����3� 3 �##���

1. ����#4,*��"���(��(���^I� �������G�^I�

2. ��"�)�����)���,��2�*��"���(��(

3. ��*�����3����&������(���^I�

����#*��"���(��(������G�^I� &#����4,� ����(��6)"�#�(��"�)���� +,���

2 ���( ��� ���("��&#� ���������&��*��+���(����=��*��^I� ���=��*������G�^I�&#�(��#&���

=��*��"���(��(�2�(��#&��� ��4,&#=)�0#��F����*��"���V(� V4���(��#&����*�� (!�

�(� 2.�) ,��� ���(-&#�("����,��� ����&���� "���(��(&#����')�,�������0)��*���V���

(appendages) F�&���(�"�� �4�������� ��6)"�)� ���(�(� 2 ��� ��=��*������G�^I� &#�(���5�#����5

��� �#�����&������(�V������ (receptor) V4��&#0��F,���� �#���+���(��(��6)��=��*��

�V���"���(��( ���"��"�)��1"&����6���1"& (!��(� 2.*)

Page 32: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

10

!��(� 2 ����#*��"���(��(�������G�^I� �. +,�("���V(���3�0#�� *. +,���( receptor

�(�� : �����2'� �,'#��#������, 0����^I�=�"�#0��,���&������(� (�������� : +�������

&�Z������� �����, 2536), 13.

�##"���(�"���(��(�����"�)���� &#*�)���(������3��V���'�-��,(� ��(��V����)�

�V��� ,����-�&#��3���*����������)�� � ����(��"�)������3����)���2� Y V4����

"�)�����(-&#���,*4-�F,������ 2-3 '���+�� "���(��( S. mutans &#�&��1����+�F,�,(�)���,��2�

"���(��('��,�(-�(���0������(��)0��&��� �(���FV���(�0��H)��-.��V6+��0 "�#�'�����)�

�-.��� ���3� dextrans ��� glucans "�# levans V4�� dextrans ��� glucans �#��-.F,���� �(

���5�#� �(�&#�. ���(���3���4,���&������(�� ���,���^I� "�#4,�V���"���(��(F��,�����

"�#��3��(� ��#*��"���(��(�(���( ��� "�#����3�0)����#���0.��1*�����&������(�

(��#�� 20 ������V2���) 0)���(��#��-.F,�����2&#�'���3�� �"�#������*��"���(��(

levans �#��-.F,� "�#��3�" �)�� �� �"�#�������(�0.��1*��"���(��( ���� ���&�

� ��(�F,�&�!���

"���(��(�����&������(�"�)����F,��)���,��2� !����� 12-24 '���+�� &#�(*�,

� 1)���(�&#���� 2�F,� "���(��(�(��&��1���##"��&#��3���� cocci �(��&��1�����F,�

(aerobic-cocci) "�#&#"�)����*�������������)��� � "�#�)���2&#�(����������

��,����� �,�� 0)�=�� �'�-���*�����&������(��(���V��&���� "�#�("���(��(�(�F�)

���������V��&� (anaerobic bacteria) �&��1����+��6)*����� �.� �0�,0)��*��"���(��(�����

&������(����(��"���F�

����G� I�

"���(��( "���(��(

*

Page 33: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

11

����-!������#%���+��,!

��-�"�)�����0�������5�(� 19 F,��(=6����H4�������^I�=��) ���,&���,�����(���,

��)��"���V(�^�0�^���������^I� &�H4��I&&�����2���'����$5z(*����,�)��3�����.� ����,^I�

=�

���I&&������3��(���������"����) ^I�=������&����&������(� "���(��(�����

&������(�&#0�����,�����(� �'��, ��,�(�0.��1�����,"����� (lactic acid) ��,'��,�(-&#

�.�=��������^I�"�#���-�^I� H����.���-��(��061�0(���-�^I�F��� &#��(��) ^I�=�

������^I���3�0)���(��("�)������(�0�,*���)�� "�)�����-�F,�"�)�����"���V(� "�#

�����^�0�^� �6�������(�0.��1��� hydroxyapatite ������^I�"��&#"*2��� ,6��(�"�#"�)� "�)�(�

=��*��������^I�&#�(�6 ��2� Y ��� �(���� �F�����(��(*�,��2� �')� +V�,(�F����

"���V(�F���� "�#^�6��F�,�F���� �*�F�F,� hydroxyapatite �#�F,��)����, ���#�

&#*4-��6)��������3���,,)� (pH) ��� !6�� "�#F�����(��6)+,���

"���(��( �0�����������&������(�0��H0�����,&����+�F��,��F,�

"���(��(�(�F,�������0��&"�#�(����������&��� ��� S. mutans "�# Lactobacillus spp.

0. ��� Streptococcus ��-����) 0��H=�����,&��-.��F,��)���,��2� "�#0��H0���0�

4,�V���F,��(�,�� 0�4,�V����.� �"���(��(�6)�)����� ��3�" �)�� �"�#������*��

"���(��( &�������4�5�����3���,*�����&������(����)���&������(��)��

�����#��� �&#�(�����3���,,)���#�� 6.5-7 "�)! ����������#��� �&#�(

�����3���,�����*4-��)���,��2� "�#�(�## �4���(��(�����3���,��.��) 5.5 V4��H���)��3�

������)�������^I� �����3���,��')����&#�� ������&#*4-��6)���� ��(������#��

H���3�� �����-.�� +,�G�#�-.��V6+��0�����3���,&#�����*4-��)���,��2� 0)�=�� ��(

���#�*�� hydroxyapatite �(�������^I� ������^I�&#�)����� "�#0�����F,��) �.� ��(

��"=�*��������^I� "�#�����"=�����"�#�4���*4-��2&#����3�^I�=�������)��

"���(��(�����&������(� 0��H0�����,F,���2�'�"���)���� Streptococci,

Lactobacilli, Actinomyces "�#(0�� ��3�&������(��(�0��H0�����,F,��� +, Streptococcus

&#0�����,F,���"�#��,��2���)&������(�'��,���� �����(��(���������,^I�=�06�&#�������

*�� S. mutans ���-.�"�#�����&������(�06���)�����(��(����^I�=���. ,����-� �F�)�(

"���(��(�(�0��H=�����,F,��������&������(� ^I��2&#F�)=�

�)�F��2��+��^I�=������5���-�F�)F,����,&�"���(��(��(�'��,�,(� "�)���,&�

���.���)�����*��"���(��( �'��, ���##"�������F,�����-.�� "���(��(�(�0��H0���

Page 34: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

12

��,������&#0�����,&��-.�� �����&.�����,�����&������(��������*4-�&�H4��#,�� �4��

"���(��( �0�������2&# �,�&��1����+� ���#���,!�#�(�F�)� �#�)����&��1����+� ���

�����&.��� "�) S. mutans ����0��H�&��1�)�F�F,���!�#�(���3���,

+,����F������^I�=����." �)��(�=�F,� 2 '��, ��� ^I�=��(����,��=����(� (smooth

surface caries) (!��(� 3 �) "�# ^I�=��(� ���"�#�)��^I� (pit and fissure caries) (!��(� 3 *) ���

&������(���"�)�#�." �)�&#�("���(��("���)���� ���&������(���=����(� &#�( S. mutans

(������&��(��0�����6"���.� ���#F,�,() "�# S. salivaris �� ���5�#*��"=�=�����������3�&�,

0. ������&������(��(� ���"�#�)��^I�&#�� S. sanguis, S. mutans "�# Lactobacilli ��

���5�#"=�=��(����,�� ���"�#�)��^I� ���'��F�*����������-�^I� �(�������*���������)�(�

���� 2� ����#*��"���(��(�(� ���"�#�)��^I��(- �&��#F,�+,���F�)&.��3������������G�

^I� ��=��(� ���"�#�)��^I��(������=�06��(�0�,

!��(� 3 '��,*��^I�=� : �) smooth surface caries *) pit and fissure caries

�(�� : Maple Tech International LLC, Tooth Decay [Online], accessed 1 September 2009.

Available from http://www.dentistdig.com/g/tooth-decay.html

�������#������/��+�������/8�+��

�����,^I�=���-� ���,&����#�*��^I� ��� hydroxyapatite �.� �^I����R�"�#

��,��� ���,��3�+���^I�=� ���#��(-���,*4-�&���,4�"���V(����,��0��,0� �4��+,

�����,�(��'�� (chelation) �')� lactate 0��H,4���"���V(��������^I�F,�"�#��,4���

"���V(����(�(-F�)&.��3��������0!�#�(���3���, ����(����( �4�����#�^I�+,���FV��*��

"���(��(V4��&#�.�0������(��(�"����6)�# �)� hydroxyapatite �.� � hydroxyapatite ��,

���F��) ���"���(��(�(���FV���(�0��H,4���^�0�^����F�&� hydroxyapatite �.� ��(

��0�*��^I� "�)�2��F�)�(=�����&��(�0���0�����(��� &4������'����$5z(�(��)��,�����(��(�

"���(��(0���*4-��#� hydroxyapatite � ��=��(�0���0����$5z(�(-��� ����������&������(�

�. �.

Page 35: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

13

������(�-.�� &#�(�����3���,��.��) 5.5 �6)�## �4�� &���0.��&�����3���,,)����)��

��������� Y I�=�&#�(�����3���,06���)�������(�F�)=� "�#��0.��&"���(��(��')����

���)�����(��(���������,^I�=�06� &#�( S. mutans "�# Lactobacilli 06���)���(��(���������,

^I�=���. "�#"���(��(��-� 2 '��,�(-0��H=�����,F,���"�#��,��2�

���')����+�������!����3����+��,!

1. Healthy Tooth (!��(� 4)

^I�0�*!�,(��-��(0)����#���0.��1 3 0)�� ���

1. Enamel ���=��^I� ��3�'�-��(��(���5�#"*2������� crystal

2. Dentin ������-�^I� ��3�'�-��(��6)H�,&�=��^I� �(���5�#�)����)���)

3. Pulp chamber �����#0�^I� �������(-&#�(�0����#0�"�#�0������,

&.�����

!��(� 4 Structure of Healthy Tooth

�(�� : Columbia University College of Dental Medicine, Illustrations: How a Tooth Decays

[Online], accessed 22 March 2010. Available from

http://www.simplestepsdental.com/SS/ihtSS/r.WSIHW000/st.31843/t.31886/pr.3.html

2. White Spots (!��(� 5)

"���(��(&#=�����,+,����-.��V6+��0"�#���+�F��,�� ���&���-���,&#

��,��)��������=��^I�'�-������(��) �[����� demineralization ���5�#�(�0������ 2�F,���� ���,

��3�&�,0(*����'����

Page 36: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

14

!��(� 5 White Spots

�(�� : Columbia University College of Dental Medicine, Illustrations: How a Tooth Decays

[Online], accessed 22 March 2010. Available from

http://www.simplestepsdental.com/SS/ihtSS/r.WSIHW000/st.31843/t.31886/pr.3.html

3. Enamel Decay (!��(� 6)

�[����� demineralization ���,*4-��)��)������� 0)�=�� �=��^I�������0( "�#"��

!��(� 6 Enamel Decay

�(�� : Columbia University College of Dental Medicine, Illustrations: How a Tooth Decays

[Online], accessed 22 March 2010. Available from

http://www.simplestepsdental.com/SS/ihtSS/r.WSIHW000/st.31843/t.31886/pr.3.html

Page 37: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

15

4. Dentin Decay (!��(� 7)

��=�������*�F�H4����-�^I��.� ����,��"��)��#&"�#���,��3�+������=��^I�*4-�

!��(� 7 Dentin Decay

�(�� : Columbia University College of Dental Medicine, Illustrations: How a Tooth Decays

[Online], accessed 22 March 2010. Available from

http://www.simplestepsdental.com/SS/ihtSS/r.WSIHW000/st.31843/t.31886/pr.3.html

5. Pulp Involvement (!��(� 8)

���,��=�H4���#0�^I� V4����3��������(��(�0����#0�"�#�0������,�6)�� �.� �

���-�������� Y I���� ������,��3�"=��.� �=��*��� �������,F,�

!��(� 8 Pulp Involvement

�(�� : Columbia University College of Dental Medicine, Illustrations: How a Tooth Decays

[Online], accessed 22 March 2010. Available from

http://www.simplestepsdental.com/SS/ihtSS/r.WSIHW000/st.31843/t.31886/pr.3.html

Page 38: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

16

��--�#<�������3+��,!

���&������(���3�0� ��*��^I�=� "�#���(�^I�&#=���-�"���(��(�����&������(�

&#����=�����,���� &��.� ������3���,06�H4��#,���(���3�������)�^I� G#��-��I&&�*��

�����,^I�=�&#������#���,�� "���(��( � �(�-.��) ^I� "�#����(���(����(�"���(��(&#

0�����,"�#�.�^I��)���(�&#H6��.&�,���F� ��"��� I��)� Y "�#F�)�����#���-.��

&#���,^I�=�F,����

�-.� "��&#�("���(��( "�#� �*��"���(��(��� "�)�2�(���0����� ��)�

�����������^I� �-.�&# �)�����')����"�#^I� ')�'#"���(��(&�^I�"�#��������&��(

��*���-.�"�#�(���������,��� ���&���-��-.�����#���,��+���(��(�&#F�0�������

G�^I� �(0�!6��������� "�#�(0����&��'(� V4���.� ������&�+����-� Y �(��(&������(����

���&���-����(0�������(� ��)� V4���6)��0!���3�F��������(�0.��1�2��� "���V(�

"�#^�0�^� "�#���( hydroxyapatite ,�� ������(���#�*�� hydroxyapatite &� I� �20��H

�( hydroxyapatite ��=�4�������^I� &�"���V(�"�#^�0�^��(��(���-.� "�#&#���[�����

�)��(-�������,��� "�#�(0�,����� �(��)�(��'��3����&#���,�[������(-��� "�)H��(�)�(��'

��3���,&#��=�4�F,���2���) ��-��(-�����("���V(�"�#^�0�^���(���

�����=7�/8�(�������������#

�=��"��������3 (Shape and size)

"���(��(&."�������5�#�6��)�F,� 3 '��, F,�"�) �6��)���� ����( ��(����F�

(cocci) �6��)���3�"�)� ��(�"�V��F� (bacilli) "�#�6��)���3����(���(�0F�+��(� (spirochaetes)

"���(��(��0�������&�(�6��)�F,� ��6�"���')� ��-����"�#��3�"�)���(���(+�����^��

(pleomorphic)

"���(��(�(*�,F,���-�"�) 0.2 F�+������ H4� 5 F�+������ *�,*��"���(��(�(���2�

�(�0�,��)���F���0�(��(*�,� 1)�(�0�, ����(����*��"���(��( �4��Y �(���5�#�(�"�)��� ���&#

��3���������(�"���(��("�)���������&.��� "���(��(�(��(����(������3��6)��(�,��+�����F�

(diplococcic) ��3��0�����(�0����+����F� (streptococci) �����(����&�������3����)���(�

0"�^^�+����F� (staphylococci)

Page 39: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

17

*���7�� (Structure)

"���(��(��3�&��'(��V����,(� �(��(=��� ����V��� (cell wall) �(�"*2�"�#�(�6��)��(�'�,�&�

')� )� ���*��� ����FV+���0V4� "�#�(=��� ���FV+���0V4� (cytoplasmic membrane)

���5�#+���0���*��"���(��(+,��-�\� (!��(� 9) �(��#��(,,���(-

!��(� 9 +���0���*��"���(��(+,0���*�

�(�� : Encyclopædia Britannica, bacteria [Online], accessed 20 May. 2010. Available from

http://www.britannica.com/EBchecked/topic/48203/bacteria

�+���-��� (Flagella)

�(���5�#� ����"0��Y ��#���&�+���(�"^���&���� (flagellin) �( ���(�

')������������F �*��"���(��( ����� " �)�� � "^���&���( ��6�"�� �"^��

�&���6)�(� �. " �)��,�." �)� �4� �*��"���( ��( �( ��(��0���,(���(�+�+�F����0

(monotrichous) ��("^���&�� ��0����(� +�+^F����0 (lophotrichous) "�# ��( �

�0��"�#�6)��� Y ���"���(��(��(� �����F����0 (peritrichous)

"���(��(�6�"�)� ���&#�("^���&��')������������F � ��*�#�(�"���(��(

�6����F�)�("^���&��&4�F�)0��H�������F �F,�

Page 40: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

18

��@� (Pilli)

��3��0��*��+���(����"^���&���� "�)�(*�,0�-���)"^���&���� �(

���5�#���*� �0��*��+���(���-��(+���(������ (pilin) ��3�0)����#��� �( ���(�')�����

��#��,*��"���(��(�)�+�0������Y "�#�&�( ���(�����H)��,&(+��*��"���(��(V4�����"�#

��� (Marklund et al. 2006 : 2225 � 2242)

���4=� (Capsule)

��3�'�-�*��+��("V��F�,��(� )� ���"���(��( V4���&�(+���(��)��,�� '��,*��

�-.����+��("V��F�,� �(������#���"���)���� V4���.��'��#��'��,*��0������)���

"���(��(��'��,F,� "��V6��(���0.��1���

1. ')�����4,��#*��"���(��(�)�+�0��

2. ')��������-���#�����^+�FV+�0�0*����2,����,*� ���("��V6�&4�

��3���')�� �"���(��(�(���0��H�����)�+�������*4-�

,����!7��4��% (Cell wall)

��3�0)���(��(���"*2� �.� �"���(��(�(�6��)��(�'�,�&� =��� ����V�����3�=���

�'�-� ���!����)�&�'�-�=��� ���FV+���0V4� (cytoplasm membrane) �(���5�#��3��6��2�

Y � �0�+��������2�=)��*����F,� '�-���0�,*��=��� ����V��� (inner layer) ��#���,��'�-�*��

�����+,F��"�� (peptidoglycan) ���,��=���'�-���� (outer membrane) ,��"0,���!��(� 10

0��H��'�-������+,F��"��F,� ��-���"���(��("������"�#"���(��("����� "�)"���(��(

"�������('�-������+,F��"���(� ����)"���(��("����� &4���3�0� ���.� �����,0("���

�)���� �)�F��2��=��� ����V���*��"���(��("����� �(0)����#����(�"���(��("������F�)

�(���F�+�+��("V��F�,�V4����#���,��F�+�+���(�"�#^�0+^F���, �����������3��6��2� Y

� �+�������)� Y =)�F,�

,����!7�@4*����4&� (Cytoplasmic membrane)

��3�'�-��(��6),�����)�&�'�-������+,F��"�� ��3�6���������� (unit

membrane) �')��,(�����V���6���+����(�"�)F�)�(0��������3�������#��� �( ���(�����

1. ��3�=���� �0�"�#+�������)� Y V4�=)�

2. ��3�" �)=���������

3. ��3��(�0������H�,��0. ���=��� ����V���

4. ��3��(� �������FV�� "�#�2��V���(�"���(��(=���*4-��

Page 41: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

19

!��(� 10 =��� ����V���*��"���(��('��,"������"�#"�����

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 4.

@4*����4&� (Cytplasm)

��3�*��� ��!���V���"���(��( V4�����&�������(0 ��������(��,�"�#��

����������Y �')� F�+�+V� F�+�����,�( 0�� �"�#������)�Y

�������# ��/���������#3% (Nucleus or Nucleoil)

��3�'�-�0)��*��,(��2��� �(���5�#��3������ 1 '�, �((���#�� 2,000 (� �(

��"�)������3�'�,*�#�V���"�)����

�6/8���������#<�6"�����

"���(��(��')�����( �0������ �(��-�'��,�(��)�+��"�#F�)F,��)�+����')����

0��H"�)����)�"���(��(��')���������3� 2 ���)�� 1)Y ��0!�#�����&��1����+� F,�"�)

1. ��������#����7��������4��-� (Aerobic bacteria)

"���(��(�(����������V��&� (aerobic bacteria) ��� "���(��(�(�0��H�&��1����+�

F,���0!�#�(��(���V��&� "�)���3� 3 ���)� ���

1.1 Strict aerobes ��3�"���(��(�(����������V��&������&��1����+���)��-�

�*,���V��&�&#F�)0��H�&��1����+�F,� ������&�����#������&��1����+��������

���V��&��������,�[��������V��,'�� (oxidation reaction)

Page 42: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

20

1.2 Facultative anaerobes ��3�"���(��(�(�0��H�&��1����+�F,���-���0!�#�(�

�(���V��&�"�#*,���V��&� +,��!�#�(��(���V��&����&��1����+�&#��3�"�� oxidation "�#

��!�#�(�*,���V��&�&#��3�"�� fermentation

1.3 Capnophilic aerobes ��3�"���(��(�(��&��1F,���0!�#�(��(���V��&� "�) �

�(������F,���FV,�����# 5-10 &#�&��1F,�,(��)

������-�#�����������#����7��������4��-�<�6"�����

���##"��')����*�����&#���&��'�-�"�#&#F,�����'�-����-�"��+,��

���������'�-�&�"�)*�#�(����, �)��F,�����'�-������&�� � �� "�#�-. &��'�-��(�F,�����

��� �'��,��-� ���)�(�'�-���'��,��)��-��(�0��H,.���6)"�#�&��1����+�F,� �'�-����

"���(�0��H,.��'(����6)F,���(�F�+���(�� (pioneer bacteria) �'�-�� �)�(-&#�(���������F,�,(

���)��'�-��(���F,��)���� streptococci +,�G�#0������ Streptococcus salivarius ����#&���

*���'�-��(���"���)�������." �)���')������0���F,�,������(� 1

����(� 1 ����#&���*��"���(��(�(����������V��&����." �)��)� Y *��')����

'��,*��"���(��(�(�

���������V��&� ����J��/��,� ��#����"��� ��-� �-.� ^I�

Staphylococci +++ + + + -

Micrococci +++ + ++ + -

Neisseria + + +++ +++ +

Streptococci + +++ +++ +++ +++

Haemophili + +++ +++ ++ ++

Anaerobes - + + + ++

Spirochaetes - + + + +

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 39.

2. ��������#���@�"�7��������4��-� (Anaerobic bacteria)

"���(��(�(�F�)���������V��&� ��� "���(��(�(� �&��1����+���0!�#�(�F�)�(

���V��&�F,�,(��)��0!�#�(��(���V��&� ���&��(-���&��1����+�F,���� ���#��(-��'�-��(��(

�����(,��'�� (redox potential) ��. �����3��� �(���� � �4��*��"���(��(�(�F�)������

Page 43: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

21

���V��&������[������� �H4� "���(��(�(�H6��.�F,�������6)��0!�#�(��(���V��&� F�)

0��H�&��1����+�F,���� ���(-��'�-��(���#��(-�F����������(��(���V��&� "�#��

������(��(�����������F,���FV,�����# 5-10 0��H"�)�"���(��(�(�F�)������

���V��&������0��H�����&��1����+���������(��(��������V��&�"���)����F,�

��3� 3 '��, (����(� 2) ,���(-

2.1 Aerotolerant anaerobes ��3�"���(��(�(�F�)0��H�'����V��&�F,� ���#F�)

�(0���-��������#����� �& (respiration) "�)���V��&��2F�)�.� �"���(��(���)��(-�F,�

"���(��(���)��(-&4��&��1����+���0!�#F�)�(���V��&�F,�,(��)��0!�#�(��(���V��&� "�)0��H

�&��1����+�F,���� ���(-��'�-��(�,(�� ��'��'�-�&.����� 0��H�6)�����������,F,�

��H4� 72 '���+�� "�#�&��1����+�F,���2������������(��(������F,���FV,�����# 10

2.2 Obligate anaerobes �H4� "���(��(�(�F�)0��H�&��1����+�F,���

���������F� "��&#�'�� ��(�,(��"�#�'��'�-�&.������2�� �'�-������)��(-0��H�('(����6)

F,������������,��3���� 10 ��( H4� 48 '���+�� �&��1����+�F,���0!�#�(��(���V��&����

�# 2-8 +,*4-��6)���'��,*��"���(��( "���(��(���)��(-�( �� �0������ "�#��3�0� ��*��

+����,�'�-����� +,�G�#����,�'�-���')����

2.3 Extreme oxygen sensitive ��� strict anaerobes �H4� "���(��(�(�F�)

0��H�&��1����+�F,���0!�#�(��(���V��&���������# 0.5 �6)�������F,�F�)���� 10 ��(

����(� 2 '��,*��"���(��(�(�F�)���������V��&�

'��,*��"���(��(�(�F�)

���������V��&�

��������V��&�

�(�0��H�&��1����+�F,� 0��H�����V��&�F,���

Aerotolerant anaerobes �(��(��V CO2 ����# 10 72 '�.

Obligate anaerobes ����# 2-8 10 ��( � 48 '�.

Strict anaerobes �����)����# 0.5 F�)���� 10 ��(

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 65.

������-�#�����������#���@�"�7��������4��-�<�6"�����

"���(��(�(�F�)���������V��&�0)��� 1)��3��'�-���#&.H��� (normal flora) V4��0��H

���&��F,� �" )����)�� �')� =�� ��� ')���� ���,��� � "�#')�����, ��3����

�������(���"���(��(�(�F�)���������V��&����(�0�, ��� �������)��� ���� (gingival crevice)

Page 44: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

22

"�#�.F0�� 1) (colon) &#��"���(��(�(�F�)���������V��&�����)"���(��(�(�������

���V��&���0�,0)����#�� 100-1000 �)� 1 0)������������ Y "���(��(�(�F�)���������V��&�

&#�(��#�� 10 ��)*��"���(��(�(����������V��&� �')� ��')�����,&#��"���(��(�(�F�)

���������V��&��)�"���(��(�(����������V��&���0�,0)����#�� 5-10 �)� 1 ���-.�

0�,0)����#�� 3-10 �)� 1 "�#�(�=�� ���0�,0)����#�� 10 �)� 1

��')���� "���(��(�(�F�)���������V��&�0)��� 1)&�,��3�'��, obligate anaerobes

0��H���&��F,��������)��� ���� ��-� ��#����"��� ���&������(� "�#�-.� +,'��,"�#

�����*��"���(��(�(�F�)���������V��&�&#"���)����F� ���-.�"�#�(���-�&#�("���(��(�(�

F�)���������V��&���3�0)��� 1)"�#��3�"���(��("������(��(�6��)������,0(",� (gram

negative cocci) ��3��'�-���&(��0 Veillonella �����&������(����� ���� (subgingival plague) ���

��"���(��(�(�F�)���������V��&�"�#��3�"���(��("������(��(�6��)���3�"�)���,0(",� (gram

negative bacilli) ,������(� 3

����(� 3 ����#&���*��"���(��(�(�F�)���������V��&����." �)��)� Y ��')����

'��,*��"���(��(

anaerobes ��-� �-.�

���&������(�� ���� ����

(supragingival plague)

���&������(����� ����

(subgingival plague)

Gram negative cocci ++++ ++++ + +

Gram negative bacilli + + ++ ++++

Gram positive cocci + ++ ++++ ++

Gram positive bacilli ++ + +++ +++

Black-pigmented anaerobes + + ++ ++++

Spirochaetes + + + ++++

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 66.

��������#�����������!���*��+��,!

"���(��(�(���3�0� ��*��+��^I�=���-� 0)������3�"���(��(�(�F�)���������V��&�

�6��)���� �����,0("������ (aerobic gram-positive cocci) +,�G�#"���(��(���)� mutans

group F,�"�) Streptococcus mutans "�# Streptococcus sobrinus "�#"���(��(�����)� Lactobacilli

V4����3��'�-�"���(��(�(��(�6��)���3�"�)�

Page 45: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

23

1. Mutans group (mutans streptococci)

Streptococci ��3�"���(��("������ �6��)���� ����( �)������3�00�-� ����

(!��(� 11) �(���5�#+�+��(�6� (convex) �4�"0� (opaque) 0��H0���+��("V��F�,�!���

�V��� (extracellular polysaccharide) &��-.��V6+��0F,� "�#��0������0��H�&��1����+�

��� ���(-��'�-��(�=0��[�'(��#��V���V�� (bacitracin) ,����-���V���V��&4�H6��.�=0���

� � mitis salivarius agar (MSA) ��(� mitis salivarius bacitracin (MSB) ������'���3� selective

media 0. ��� mutans group ��0������ �')� Streptococcus mutans "�# Streptococcus sobrinus

��3����

!��(� 11 "���(��("������ �6��)���� ����( �)������3�00�-� ���� (Streptococci)

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 126.

S. mutans ��3�"���(��(���0.��1�����)��(- ��F,���=��^I� "�#��3�0� ��*��+��

^I�=� �(���������"���(��('��,�(-��3����-�"�����J �.�. 1924 +�+��(*�� S. mutans

0��H0���+��("V��F�,�!����V������ � MSB �.� �� 2�+�+��(�(���5�#� �����(

*��� ���0��-��6)���Y +�+��(�(���5�#*�)� �4� *��*�#F�)��(� (!��(� 12)

Page 46: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

24

!��(� 12 +�+��(*�� Streptococcus mutans

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 127.

S. sobrinus ��3�"���(��(�(�0������ �4���(�0��H�&��1����+���� ���(-��'�-�

MSB F,��')��,(���� S. mutans "�)���5�#+�+��(*�� S. sobrinus ����(�6��)���3�"G� "�#�(��

*�)�������� (!��(� 13) "�)F�)�')���5�#�(�"�)���

!��(� 13 +�+��(*�� Streptococcus sobrinus

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 127.

�'�-������)� mutans streptococci 0��H0���+��("V��F�,�!����V���F,���-�"��

�#��-. (soluble) "�#F�)�#��-. (insoluble) &����'��-.��V6+��0 0��(-�(���0.��1��

�����,���&������(� (plaque formation) "�#��3�0� ���(��.� ����,^I�=���� ���&��(-�'�-�

���)��(-���(���0��H����0�����,F,���&����'��-.�� "�#�(���0��H��������

�6)��,��!�#�(���3���,F,�,�� &�� ��=�,����)��.� ��'�-����)��(-��3�0� ��0.��1*��+��^I�=�

Page 47: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

25

V4��&.����'�-��(������*4-���-�&#�(���0���������������,+��^I�=� ���&��(-�����) ����#&

*���'�-������)��(-�(���0������������ �'�-�'�� "�#0!�!6���0����(�,�� (Marsh and Martin

2001 : 17-33)

2. Lactobacilli <�6"����� (Oral lactobacilli)

Lactobacillus ��3�"���(��("������ �(���5�#��3��6��)���H4�0�-� (!��(� 14)

"���(��(���)��(-F,������')���� ��#������# 1 *���'�-����� Y "�)&#��F,������-.� ��

0)�=)��'�-������)��(-�(���)�'(-�) ��H)��,�&=)�&�')�����,*��"�)06)�6����# �)���

���, +,�'�-�&#�,����')���,���"��*������� "�#&#�������*4-��(�������)��+,F,����

�'�-������&�0���"�,����!��� (Matsumiya et al. 2002 : 43-49)

Lactobacillus spp. ��')���� 0)��� 1)��3�"���(��(�(�F�)���������V��&� '��,

microaerophilic ��'��,��3� obligate anaerobe ��#��(-�F,���0!�#�(��(��V

������F,���FV,� ����(�0!�#�(�F�)�(���V��&� "�#� ���(-��'�-��(��(�����3���, 0��H

�'����+�F��,����3�" �)�� � "���(��(���)��(-0��H=�����,F,�&.����� 0��H����,

F,�,( ����#��(-�"���(��(�����)��(-&4�0��H�'� Rogosa media ��3� selective media �������,

�����'�-�F,� V4��� ���(-��'�-�'��,�(-&#�(��,��3�0)����#���&4��.� ��(0!�#��3���, V4��

"���(��('��,���� Y &#F�)0��H�&��1����+���� ���(-��'�-�'��,�(-F,� "���(��(���)��(-�(���F,�

�)���')����F,�"�) L. fermentum, L. cacei, L. rhamnosus "�# L. paracacei ���&��(-���(

L. plantarum, L. acidiphilus "�# L. salivarius (Teanpaisan and Dahlen 2006 : 79-83)

Lactobacillus spp. �������3��'�-���#&.H�����')���� "�#&#��F,���*4-�������(��

�����*��^I�=� V4����3��������(��(�����3���,�� &����(����'�-�'��,�(-�)��������^I�=� &4�

�,�) lactobacilli �&��3�0� ��*��+��^I�=� &4��'�"���(��(�(-��3�����)�'�-����0(���������,

+��^I�=� ����)�("���(��('��,�(-����) 105 +�+��(/��������� �������) 100 +�+��(/1.5

����V�������*����-��(���� "0,��)�(����0(���)�+��^I�=�06� (Barsamian-Wunsch et al. 2004

: 231-239)

Page 48: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

26

!��(� 14 "���(��("������ �6��)���3�"�)� �&��3�"�)�0�-� ���� (Lactobacillus)

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 126.

F,��(��������4�5'��,*���'�-�����+��^I�=�+,��2�����)����&&����-�

^I��(�=� (carious dentine) +,��� "���(�&#��2�&����&������(� ����-.� "�#�'����(��

'(�+�����������4�5�.,�������(+�F�,�*��(� 16S rRNA ���)'��,*��&(��0�(���F,�����

��+��^I�=��(����& ��� Lactobacillus spp. V4��0�J'(0��(���F,�"�) L. fermentum, L. cacei, L. panis,

L. rhamnosus, L.reuteri, L. gasseri, L. crispatus, L. salivariu "�# L. delbrueckii (Munson et al.

2004 : 3023-3029 ; Chhour et al. 2005 : 843-849) ���&�&#�� Lactobacillus spp. �����-�^I��(�=�

"��� ���(����)���'�-�'��,�(-��������^I��(�=)������5�"���,�� +,��F,�H4�����#

36 V4��&#���'�-����)��(-F,����(�0�,��������(���(�����'�-�'��,���� Y �(���F,�"�) L. paracacei,

L. cacei, L. delbrueckii, L. crispatus "�# L. rhamnosus (Chavez 2003: 500-508)

����"�*����� Streptococcus mutans

��-�"�)�J �.�. 1924 Clarke F,�"�"���(��(&��." �)�*��V(�^I��(�=� �)��� �

"���(��(��-��('����) S. mutans �(*���6����0�������*�� S. mutans "�#^I�=���-����4�5"��

��,*��"�#�##�F,�H6����F�� "�#�'����) S. mutans ��3�0� ��*��^I�=� (Hamada and

Slade 1980 : 331-384 ; Loesche 1986 : 353-380)

��F������)�+��*�� S. mutans �( 3 ��#�� ���

1. ���0��H����4,��# (adhesion)

2. ���0��H����0�����, (acidogenecity)

3. ���0��H��������, (aciduricity)

Page 49: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

27

��������$<����#&3���� (Adhesion)

���0��H����4,��#*�� S. mutans �����&������(� *4-�����I&&� ��� 3

��#�����

1. ���#&3�������@�"�&8�����8�����4=*�� (Sucrose-independent adhesion)

+���(�0.��1�(���(��*�������4,��#+,F�)*4-�����-.��V6+��0��(��) antigen

I/II �(*�, 185 kDa +���(��(-0��H��F,��� streptococcus ��')����0����������,�� (Ma

1991 : 2686-2694 ) "�#�(��� �'���+���(��(-�)� Y ��� �')� P1, Spa P, Sr, Pac "�# antigen B

+���(������)� antigen I/II *���'�-�"���(��(� �)�(- "��&#�(+���0�����0)���(�� ������� "�)�(

��0)���(��)���� &4��.� ����0��H����4,��#���+���(��)� Y ���-.�"���)����F�

"���"�)'��,*���'�-� (Whittaker, Klier, and Kolenbrander 1996 : 513-552 ; Petersen et al. 2002 :

249-256) 0)��0.��1*��+���(� antigen I/II �(�F�4,���+���(����� Y ���-.� ��� �#��(�

(alanine) "�#+���(� (proline) +���(�� �)�(-�(���0.��1����4,��#�������=��'�-����0�,*��

���� ����V��� (pellicle) �(���3�0)��0.��1�����)������3����&������(���=��^I� �( ���\����)

�'�-��������� (mutant) P1 �(�F�)0��H0���+���(� antigen I/II �(���0��H����4,��#

���F�,���V(�#�F��� (hydroxyapatite) �(��������-.�F,��,�� (Ohta et al. 1989 : 981-988 ;

Lee et al. 1989 : 3306-3313) "0,�� �� 2��) ��'�-�"���(��(*,+���(� antigen I/II �'�-�&#��#

���+���(����-.��(���������=��F�,���V(�#�F��� V4����3�0)����#���*��^I�F,��,��

���&��(-�����)��*,+���(� P1 &#�.� ����)��6�+���0���*�� biofilm �� ��,�,���

=�,F�

2. ���#&3��������&8�����8�����4=*�� (Sucrose-dependent adhesion)

��F�0.��1*����4,��#�(�*4-�����-.��V6+��0 ���,&����.��*�����FV��

��6+�V�����0�^�����0 (glucosyltransferase, GTFs) ����0�����# �0���6"�� (glucans) +,

GTFs �(���0��H����)�V6+��0F,���3���6+�0"�#^���+�0 (Monchois, Willemot, and

Monsan 1999 : 131-151) ��6+�0&#�'�����)������3����������*����6"��

S. mutans �(���FV�� GTFs 3 '��,H6�0���+,(� gtf B gtf C "�# gtfD �)�&�

S. sobrinus �(��((������(� 4 (� ������������0�����6"�� GTFs �&���� streptococci '��,

������')����F,�

GTFs 0��H0��������������6"���(��#��-. (soluble glucans) "�#F�)�#��-.

(insoluble glucans) ��6"���(��#��-.&#�(+���0���0)��� 1)��3��0�����*�� α1, 6 glycosidic

Page 50: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

28

(!��(� 15) ��*�#�(���6"���(�F�)�#��-.�(+���0�����3�������� (branching) *�� α1, 3

glycosidic ���������*4-� (!��(� 16) &4��#��-.F,��

!��(� 15 +���0��������������6"���(��#��-.

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 98.

!��(� 16 +���0��������������6"���(�F�)�#��-.

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 98.

��6"����-�0���(���0.��1����4,��#*�� S. mutans �(=��.� �"���(��('��,�(-

���,��4,���� (colonization) "�#���,^I�=�+,��F�����0�����,"�#����, +,�G�#

��6"���(�F�)�#��-.�(���0.��1�����)�+��^I�=�'��,��=����(� (Munro, Michalek, and

Macrina 1995 : 327-332.) �(����&�&.������(�"0,�� �� 2��) ��(�����-�(� gtf F�)� ��(��

�.�� &#�(=��.� ����0��H�����)�+��^I�=���0�����,����,��

3. *��������#&3���������=��� (Glucan binding protein, GBPs)

+���(�� �)�(-F�)�')���FV�� (non-enzyme) "�)��3�+���(��(�4,��#�����6"��

+���(��(�����3�'��,"�������)��(-��� GBP A (Russell 1979 : 197-201) �)��F,��� GBPB

(Smith et al. 1994 : 2545-2552) "�# GBP D (Shah and Russell 2002) ���.,�� +���(�� �)�(-�(

���0.��1����0��� biofilm *���'�-�"�#�(0)���)�������)�+��^I�=� (Hazlett, Michalek and

Banas 1998 : 2180-2185 ; Hazlett, Mazurkiewicz, and Banas 1999 : 3909-3914 ; Matsumoto et

al., 2003 : 213-215)

Page 51: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

29

��������$<�����7����3 (Acidogenecity)

S. mutans �(���0��H����0���������&��-.��+,=)���H(F��+�F����

(glycolytic pathway) "�#�� ��� (fermentation) F,���,'��,�)� Y F,�"�) ��,"����� (lactic

acid) ��,^������ (formic acid) "�#��,�#V(��� (acetic acid) �����-������� (ethanol) ��

������(�"���)����*4-��6)���0!�#������#��(-� (Johnson, Gross and Hillman 1980 : 707-

713) �')� ��(��6+�0&.�����&#F,���,"�������3�0)��� 1) (Dashper and Reynolds 1996 :

33-39) S. mutans �(��(���FV��"�����,(F�+,�&(��0 (lactate dehydrogenase; LDH) �,�� &#�(

���0��H�����)�+��^I�=� (cariogenicity) �,�� (Johnson et al. 1980 : 707-713) "�# �

*,���FV�� LDH �)�0�-��'�� S. mutans &#����(�0�, (Hillman, Chen and Snoep 1996 : 4319-

4323) &�!��(� 17 ��3������(��F��6��� (pyruvate) F���3���,"�����"�#F,�����������

+,������.��*�����FV�� LDH ����)�� ���*,���FV��'��,�(- &4��(=���#���)���

0�����,"�#����6)��,*�� S. mutans &4��,�)&#0��H�.0�������(�H6�,�,"���(�� �*,

���FV�� LDH ��'����5"�#�������+��^I�=� (Hillman et al. 2000 : 543-549 , 2002 : 361-366)

!��(� 17 �[����������(��F��6�����3�"�����+,���FV�� LDH

�(�� : ��( �H(�F���, "���(��(��')���� (0�*� : +��������.=�, 2550), 99.

���0��H����0�����,*��"���(��( streptococci ��')�����(����)

streptococci ����F� +,�G�# S. mutans "�# S. sorbinus �(���0��H����0�����,F,���

��-���0!�#�(���3���� (�(��' 7) (!��(� 18) ���"��"�)��0!�#�(���3���, (�(��' 5) ��-�

S. mutans "�# S. sorbinus �������0��H����0�����,F,� ��*�#�(�"���(��( streptococci

'��,����&#0�����,F,��,�� (!��(� 19) (Soet, Nyvad, and Kilian 2000 : 486-490)

Page 52: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

30

!��(� 18 ���0��H����0�����,*�� streptococci 0�������)� Y ��0!�#�(���3����

(�(��' 7.0)

�(�� : J.J. de Soet, B. Nyvad and M. Kilian, �Strain-related acid production by oral streptococci,/

Caries Res 6, 34 (2000) : 486-490.

!��(� 19 ���0��H����0�����,*�� streptococci 0�������)� Y ��0!�#�(���3���,

(�(��' 5.0)

�(�� : J.J. de Soet, B. Nyvad and M. Kilian, �Strain-related acid production by oral streptococci,/

Caries Res 6, 34 (2000) : 486-490.

Page 53: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

31

��0�����,�.� �0!�#"�,���������&������(���3���,��*4-� &4��.� �������

��-�� �#0. ������&��1����+�*�� S. mutans "�#�'�-�'��,�����(�0�����,"�#����,F,� �.� �

���(�&#�������06)0!�#�(���3���������'������*4-� (Graf 1970 : 426-435 ; Loesche 1986 :

353-380) "�# �0!������3���,�����&������(��(�)�(��'��.��) 5.5 )���.� ����,

��#�����061�0("�)��� (demineralization) &4��(=��.� ����,^I�=�*4-�

��������$<��������3 (Aciduricity ��/� acid-tolerance)

S. mutans �(���0��H��������,"�#��0��H�&��1����+��)�F�F,� "����

0!�#��,�(��(�)�(��'��.H4� 4.0 �2�� (McNeill and Hamilton 2003 : 25-30) S. mutans &4��(���

�)�&� streptococci ��')����'��,���� ����(��-����0��H����0�����,"�#����,

���0��H��������,*4-������F�0.��1,���(-

1. ������'������33"��<��4��%

���0��H����0�����,*�� S. mutans ��3�=��&���*����,���&��V���

*�� S.mutans +,=)�=��� ����V��� ������&�0!�#��,�(�����3���5�)����.��*���V���

���FV��0.��1�(��. ���(��������50!������3���,,)����V��� ��� ATPase ��� F-ATPase

V4��&#�. ���(��������50!�#�����3���,,)�=)����� ����V��� �(����) ���0��H��

������,*4-��6)����#,�����FV�� F-ATPase V4���(���"���)������ streptococci ��')����

0�������)� Y ��-��(-���) �0!�#�����3���,,)��,��.�� &#���,�������*4-�*�����FV�� F-

ATPase *�� S.mutans (Hamilton and Buckey 2007 : 65-71 ; Belli and Marquis 1991 : 1134-

1138) �.� � S.mutans 0��H���50!������3���,,)�F,� "�#�(�����(��"����(����� ���

�V��� �.� ��,���.�*�*����#&���� "�#�(��*����,���06)!��������*4-�

2. ��������#����������������3���Q����������7��*�����

��0!�#��,&#�(��� �(���.���.��*��(������"�#�(=��)����.��*��

���FV�� (Quivey 2001 : 301-304) �')� ���FV���(�0�����,F�+�F�+V��� (lipoteichoic acid

synthesis) �(=��)����FV���(���������+���(� (protein translocation) ���FV��� �)�(-�(����

0.��1����0������� ����V��� �.� ��(=��)�+���0���*������ ����V���*��"���(��( ����)��')�

�0!�#�����3���,�,����.��) 5.0 &#�.� ���#0����!�������������)� D-alanine esters �(�

=���F�+�F�+'����,�� �(=��.� �+���0���*������ ����V������(��"��� "�#�(��0)����*��

��#&�����������*4-� (Boyd et al. 2000 : 6055-6065)

Page 54: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

32

�����6�� (Emulsion)

�����'�� �H4�=���!�����6�"�� �4���(���#���,��*��� ���)���� 2 '��, �(�F�)

�*���� ���F�)�#�V4�����"�#��� �')� �-."�#�-.��� �(�H6��.�=0�,����������5�#�(�

=0�=0��*���3����-��,(����F,�+,�������.�����'�� (emulsifier) "�)H�0)��,6,�������

&��������&#� 2���3� 2 ��[!� ��� ,��2�Y *��*��� ��'��, �4��V4����(��) ��[!�!��

(internal or dispersed phase) ��#&���"����6)��*��� ���(�'��, �4�� V4����(��) ��[!�

!��� (external or continuous phase) +,����F� ,*����[!�!���&�.� ��(*�,�)� Y

���F,���-�"�)*�,��2���) 0.05 F�+������ &�H4� 25 F�+������ V4��*�, ,���!�*����[!�

!���(-�(=��)�����#&"0�F,��)���� &4��.� ������'���(���5�#!����(����� 2�F,�"���)�

��� ,��"0,�������(� 4

����(� 4 ���5�#!����(����� 2�*�������'��"�#*�, ,���!�*����[!�!��

*�, ,���!���[!�!��

(F�+������) ���5�#�����'���(����� 2�

��2���) 0.05 +��)��0 (transparent)

0.05 - 0.10 *�)� ���+��)�"0� (transparent)

0.10 - 1.00 0(*���^�

� 1)��) 1.00 *�)�*��4�

�(�� : ����� �(�����0�\, �����'�����������0.�� (�'(�� �) : ��#�!0�'�0���

� ������'(�� �), 2544) 1.

6��3��������6��

'��,*�������'���(���F,�+,����F�����(���5�#*�)�*�����-.�� ����(���5�#

+��)��0 0��H"�)�'��,*�������'��F,� ,���(-

1. '��,*�������'���(�"�)������5�#!����(����� 2� �( 2 '��, ���

1.1 "��+�������'�� (macroemulsion) ��� �����'���(��(���5�#*�)�*�V4����F,�

+,����F� ���!�*����[!�!���(*�,��-�"�) 0.25 � 10 F�+������ (+,����F�� 1)��) 1

F�+������) &4��.� ����,���"���)����),�'�(�� ��� "0�*����[!���-�0�� "�#���,��

��#&"0��.� ����,6*�)�*� �����'��'��,�(-�&"�)�)�F,��(���3������'�����-� � (coarse

emulsion) V4���(*�,���!��)��*��� 1)"�#�����'�����-��#��(, (fine emulsion) V4���(*�,

Page 55: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

33

���!��)��*����2� �����2���) 5 F�+��������F� "��+�������'����3������'���(������(�0�,��-�

�����0 ����� � "�#�������0.�� ����)�=���!����*�������'��'��,�(- �')� F����(�

��(����5+��=�� ��� ��(����",, "�#+�'����=�� ��3����

1.2 F�+�������'�� (microemulsions) �(���5�#+��)��0 ������&����!�*��

��[!�!���(*�,��2��� (��#�� 10-75 �+�����) V4���(�)�����) 1 �� 4 *������

�����"0��(����� 2�F,� (visible light) &4�F�) ��� "0� "0��#��=)�F,� �.� ����,6+��)��0 ,

*����z!�!���(���5�#���H6��������,��^����*����������'�� �(��-�'��,�-.������-. (o/w)

"�#'��,�-.���-.��� (w/o)

1.3 �+������'�� (nanoemulsions) ��� mini-emulsion �(*�,���!� 50-200

�+����� V4�����!�*�,��2����.� ����,���,"��+���H)�� "�#�(����������(�"��F�������

�������������(�"�������(� (Brownian movement) V4���&��3�0� ���.� ��+������'��F�)

���,��"�'�-�

2. '��,*�������'���(�"�)���'��,*��*��� ���(���3���[!�!��"�#��[!�

!���F,���3� 3 '��, ���

2.1 �����'��'��,�-.���-.��� (w/o emulsion) �����'��'��,�(-�(��[!�!����3�

�-. ��[!�!�����3��-.��� �������'��'��,�(-F,������=���!�����������0.�� �')� ��(���� ��

(cleansing cream) ��(������� (night cream) ��(���, �� (massage cream) "�#��(�����+��

(hormone cream) ��3���� ������&������'��'��,�(-�(���� ��# �#"�#����-.���� &4�F�)��3�

�(����

!��(� 20 water-in-oil emulsion "�# oil-in-water emulsion

�(�� : Cargill, Incorporated, Emulsifiers [online], accessed 15 May 2010. Available from

http://www.cargilltexturizing.com/products/functional/emulsifier/cts_prod_fun_emul_fun.shtml

Page 56: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

34

2.2 �����'��'��,�-.������-. (o/w emulsion) �����'��'��,�(-�������'��,"�����

�(��[!�!����3��-.��� ��[!�!�����3��-. &4��(���� ��# �#��� �"�����#&���F,�

,( ����-.����) ��3��(��������=���!�����������0.�� �')� ��(�"�#+�'����=�� (body cream

and lotion) ��(�� �� (vanishing cream) ��(�����",, (sunscreen cream) "�#��(������-�

(foundation cream) ��3����

2.3 �����'���'��V��� (multiple emulsion) ��3������'���(��(��[!�!��V������

�6) V4����3�*��� ���)�'��,��� �')� w/o/w ��� o/w/o �����'���'��V����(-0��H��������3�

�����'������,F,� �')� w/o/w V4���(�-.��3���[!�!��� "�)��[!�!��V4����3��-.���&#�( ,

��2�Y *���-.V)���6)�(��( �������������3������'������, &#����3�'��, o/w �������'��

'��,�(-�����=���!�����������0.�� �')� cold cream V4����3�'��, o/w/o ��3����

3. '��,*�������'���(�"�)������ ��,*�������'��F,���3� 2 '��,���

3.1 +�'��� (lotion) ��3������'���(��(��� ��,��. ���#�(��[!�!�����

������(�06� ��[!�!�����F�)���� 35% +�'����&��3���-�'��, o/w ��� w/o V4���&�('�����(�

�)�������F� �-.�� (milky ��� milky lotion) ��3��6�"���(������(�0�,��=���!�����(��'��=��

+,�G�#=�� ����(��(���������� ���#�"���'�)�'�-� F�)� ��# �# ,6,V4�,( � �����6�04�0�

"�#����-.����) ����)��')� +�'����=�� +�'����������"0�",, ��3���� +�'���'��, w/o �(��

�'����"�)F�)������#�"���� ��# �#=�� �')� +�'����������"0�",, �����(�(��'��=���)��

���)�-.�����3�+�'���'��, w/o ���#&#����-.F,�,(��)'��, o/w ��-��(-�&����0��������� ��,

(thickening agent) ������[!��-.������ �+�'��� ��,*4-� "�)������3�*��� ���(�F �F,�

3.2 ��(� (cream) ��3������'���(��(��� ��,06� (���5�#�4��"*2�) ���#�(

0)����#���*��F*"*2� (wax) "�#��,F*��� (fatty acid) ���F*���'��,"�������� (fatty

alcohol) ')��������� ��,"�#')�� ����-���(�=0�����-.�������[!��-.���F,� ��(��(��-�'��,

o/w "�# w/o �(��� ��,����)+�'��� ���#�(�������[!�!��06���)�����#�� 35-75%

"���"�)��� ��,*�����-���(��(������� +,�(���'�0���������-���(� (bodying ��� stiffening

agent) �')� F*���"�#F*"*2�,���(���)�F��*����� ���&��(-���(*����(�'��, o/w �&�(������

0��������� ��,�)��,�����.��� �')� acacia, veegum "�# methylcellulose ��3���� V4��')������

��� ��,� �"�)��[!��-. =���!�����������0.���(���3���(�'��, o/w F,�"�) ��(��=�� ��(��.���

H���=�� ��(�"�)�=� ��(�+�� ��, ��(�����",, ��(��#���� ����"�#*&�,�������� ��(��"��

0�� "�#��(��"���� ��3���� ��(�'��, w/o F,�"�) ��(�����+�� ��(���� �� ��(���, �� "�#

��(�"�)�=� ��3����

Page 57: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

35

���&��(-���(�����'��'��,����5 ��� anhydrous emulsion V4��F�)�(�-.�6)��

��#���,�� �-.���"�#0� polyols �')� glycerin, propylene, glycol "�# PEG 400 ��3����

�����'���(�F,��&�(���5�#�0 ���*�*�)�

"����������������6��

=���!�����6�"�������'�� �(0)����#��� ����(�0.��1 3 0)�� ���

1. ��[!��-. (water phase) F,�"�) �-."�#0��)� Y V4���&��3�*��"*2� ���*��� ���(�

�#�F,����-. �&��3�0��������� ��, �')� veegum, acacia, tragacanth, methylcellulose "�#

carbopol 0�,6,���'�-� ���������"�� (humectant) �')� glycerin, propylene ���0������)�

glycols 0�����0( (preservative) �')� methylparaben "�# sodium benzoate 0��,"���4�=��

(surfactant) �')� tween "�# Sodium Lauryl Sulphate 0(�(��#��-.F,� �')� amaranth "�#

tartrazine 0�������V��,'�� (antioxidant) �')� sodium metabisulfite ���&��(- �&��3�0����

$���%�����(��#��-.F,� �')� cetylpyridinium chloride "�# benzalkonium chloride ��3���� 0�

�)�Y � �)�(-0��H����������[!��-.F,� *4-��6)���0)����#���*��06����=���!����"�)�#

��#�!�

2. ��[!��-.��� (oil phase) F,�"�) �-.���'��,�)� Y �')� �-.����#��� (olive oil)

�-.���"�) (mineral oil) �-.����# �)� (castor oil) 0������)�F*��� �')� stearyl alcohol, stearic acid,

cetyl alcohol "�# lanolin F*"*2� �')� permaceti, beeswax, carnauba wax "�# paraffin wax 0(�(�

�#����-.��� �')� D&C Red No. 21 "�# D&C Orange No.5 �-. �� �')� �-.����������������,

orange oil "�# perfume oil '��,�)� Y 0���� �� �')� butyrated hydroxyanisol (BHA) "�#

butyrated hydroxytoluene (BHT) 0��,"���4�=�� (surfactant) �')� span "�# Emulgin C 1000

���H4�0����$���%'��,�)� Y �')� ����+�� "�# ������ ��3���� *4-��6)���0)����#�����06��

�.���*��=���!����"�)�#��#�!�

3. ����.�����'�� (Emulsifier) F,�"�) 0��,"���4�=�� �')� tween, span "�# Sodium

Lauryl Sulphate �����,��(�'���-. �')� acacia "�# gelatin *��"*2����!��#��(, �')�

bentonite "�# colloidal magnesium aluminium silicate ��3���� ����.�����'����3� ���&0.��1��

��=0�=0�� ���[!��-."�#�-.����*���3����-��,(����F,�

Page 58: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

36

��@�������3�����6�� (Sjoblom 2006 : 314)

+,����F�*��� ��0��'��,V4��F�)�*���� ������.�������&#"���������3� 2 '�-�

������&�"���4��# �)�=�� "�)������.���*)V4����3��������������"�#�������-��(�=��0��=�0

�# �)�*��� ����-�0�� &#�.� �*��� ����-���#&�����3� ,��2� Y �����"�#���F,� "�#�(

���5�#*�������'�����,*4-� "�)��3���(�� �������(� ���,*4-�'������ V4�� ������������+�

F,����0�����F,��) ���*)��3����������������0�#�(���-�=�� (surface free energy) �.� �

*��� ���*����F,�'������ 0!�#�(-&#F�)����� ���#����� �,�*) ,*��� ��� �)��-�&#

����������������"�#"�'�-�� �����,�� ������&��(������0!�#� ��*�06)&�,��0!�

+,���,��-��(�=����0��=�0�# �)����� �����(�0�, � ������,����)��(-0��H�.� ����,*4-�F,�

�)�H�� +,�.� ����,����#&�����3� ,��2� Y V4�����"�#����# �)�*��� ����-�0��'��,

+,�(�����0!��6) "�#&#F�)����F�"�'�-�� �����,��+,����������.�����'����F��)���.

�����*) ,����-������,�����'��&4����������#����� 2 *�-���� ���

1. ���.� �*��� ���(���3���[!�!��"����#&��3� ,��2� Y +,������ �

������ V4���&�'����6�*��������� (heat) ���� ����*) (mechanical agitation) ��

0���0#�����+,������0(� (ultrasonic vibration) ���F^^� (electricity) ��3����

2. ���.� � ,��2�Y �(���#&����6)��-���0!��6)F,� +,�������.�����'��V4��F,�

���(��������F����.��*������.�����'��F��,���(-

2.1 �,"���4��# �)�=��*��*��� ����-�0�� ��3����,��������0�#�(���-�=��

�.� �+��0�(� ,��[!�V4����#&����6)��-� �(�����������F,������ "�#��3�������������

����������+�F,����0�

2.2 ���,^�����(�"*2�"��"�#�, �)�+,��� ,��[!�!�� ���"*2�"��"�#

���5�#����(����*��+������*��^�����(-"���)�������F� "���"�)'��,"�#����*��*��*�����

�.�����'���(��'� ^�����&�(����(������3�+�������,(�� (monomolecular film) +, ��,���(��#&�

�*� ��[!��-. "�#,���(�F�)�(��#&� ���*� ��[!��-.��� ^����'��,�(-������,&����'�0��,

"���4�=����3�����.�����'�� ����(����(����V������*��+������ (multimolecular film) ���,&�

���'������,��(�'���-.��3�����.�����'�� ����(����(����*�����!���2��#��(,*��*��"*2�

(solid particle film) V4�����,&����'�*��"*2���2��#��(,��'��,V4��,6,V���(�=��*����[!���-�0��

^�����(����,*4-���� ,��[!�!���(-�. ���(���3����'� (mechanical barrier) ���������0��=�0

���+,���*�� ,��[!�!�� V4����F��(-H���)0.��1�(�0�, ���#����,�(����'��(-�����6)&#

F�)�.� � ,��[!�!�����������F,� ���"*2�"��*�����'��(-��*4-���������*������.

Page 59: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

37

�����'���(��0)��F�,�� H��(��������� ����(����*��+��������^�����2&#��(�������

�"�)��.� ������'���(����������*4-� F,��(���4�5��(��������0����� ����$������*��

^�����(����,*4-��# �)�=��&��,(��&�H4��I&&���� +,�(0�����\�� �)�����) �����'���(������

�&���,&��('�-�*��=�4�*��� �� �6)�# �)�=��*�� ,��[!�!�������[!�!���+,�(

+���0�����3�0����� V4��0��H�.F������[������# �)����*�� ,��[!�!�� V4����3�

0� ���.� ������'�����,�����������"�#"�'�-�F,� ���&��(-���.F�������F����.��

*������.�����'���(���3�0��,"���4�=��'��,F�)�(��#&� (nonionic emulsifiers) +���(� (preteins)

"�#0�&.�������(��(*�,+������� 1) (macromolecular gums) V4���.� ������'����0!�F,�,��

2.3 ���,'�-��6)*��F^^�0H����3����'���F^^� (electrical double layer) V4�����

'���F^^����,&����)�+�������(��(��#&� (electrically charged groups) V4���6)���=��*�� ,

��[!�!�� ��F��(-�'����������'��'��, o/w F,���3��)�,( ����)��(�� 2�'�, ��� ���'�

sodium soap ��3�����.�����'�� +�������(���(������3�^���� )� ��� ,��[!�!��&# ��,�� ���(�

��3�F�����*� ��[!��-. "�# �� �V4����3�F�+,��������*� ��[!��-.��� F�����(��(

��#&���V4�����,&� carboxylate group ��� ,��[!�!��&#H6��������,����#&�����(�'�-�

����)�����F^^��(����,&�F������#&����(-&#=������ �.� � ,�-.���F�)�(+��0�*��������

H4�"���)����.�����'��"�)�#'��,V4���. ���(������.� ����,�����'��"�#���5��������*��

=���!����F��F,���-��&���������F��)��,�)� �4�� �������) 1 ��F� "�#�&�(��F���

�.���)����F���� "�)*��0.��1 ��� ������3�0��(�0��HH6�,6,V���6)�(�=����#&���# �)�

��[!���-�0��F,� "�#0���^�������5�#�,�2F,� +,�����*������.�����'�����������(�&#���,

^����"*2�"�� �"�)���� ,��[!�!�� &4�&#H���)����.�����'���. ���(�F,��)�0��6���

�������������6��������/��������

1. ���')���#�����������=7&� (appearance and feel)

���5�#!���*�������'���(,����� �"�� *4-��6)������ ��, �����)

���������&�*�, ��� � ����#��(,*�����-������'�� �����3���� ��� ������� "�#

����4�"0� �3���� ����6�04�������'������'��&#"���)����*4-��6)��������� ���� ��# �#

�����J����� ����#� "�#���0�������"=)��#&��=�� ���,&��##�������" �����

������'���=�� "�#�������2���-�F���� ���0�����,����)��(-�����-�'��,"�#��������*�������'��

H6�������+,�I&&��)� Y �')� ���0����������(�!�*����[!��-."�#�-.��� ����0)��

*����[!��-."�#�-.��� '��,"�#����*��*��*������.�����'�� �.,����=0� ��� !6������

Page 60: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

38

���,�����'�� '��,*�������������(��'�=0� "�#���������2������.� ������'���2������

���&��(-*�,���!�*����[!�!���2�(=��)����5�#�����'���(�F,� ���� �������������,&�

stearic acid, cetyl alcohol, stearyl alcohol "�#��������*����� V4��������� �������&#���,��2�

���'�*4-��6)����������.� ������'���2������ "�#���������,=�4�*��0�� �)�(-

���0�����������'�*4-��6)���0��(��'���3�0)����#�����06��"�#'��,*�������'��

�����'���(��(������-.���06�&#���,^���������=�� "�#H��(F*���'��,"���������(���3�*��"*2�

��,F*��� ��0����� "�#F*"*2� ���&#�.� ����,^����" ����=�� =���!�����(��( paraffin �����06�

&#�6�04������������=�� 0���� polyols �������06��.� ����,���'�)�'�-� �����'��'��, o/w ���&#

��3���������)'��, w/o

2. ���#����%���@�� (Rheology)

���0�������F ��(���(��*���������!�"�#��������*�������'�� F,�"�) ���

��, (viscosity) ����, �)� (plasticity) "�#����)������ (elasticity) �����'��0)��� 1)�(��

F �"�� non-newtonian �&��3�"�� pseudoplastic (�)��� ��,&#���(��"��������������(

"����#�.�)���F � V4������������"����#�.� ����,��F ���� ��,&#�,��) "�� plastic (����

�����"��&�H4�&�, �4��&4�&#�(��F ����,*4-�) V4�����,��������'���(��(��� ��,06� �')� ��(� ���

"�� thixotropic (����������"��� �+,���*)&#� �� "�)�������-���-�F��&# ��,) V4�����,������+�'���

��� ��,��3����0������(�0.��1*�������'�� ���#�����(��"������ ��,*��

�����'��������&�0� ���,�2�� &#0)�=��)����!�"�#��������,�� "�#���(=��)�����6�04�

*��=6��'�=���!������-� �')� ����)�'���H�� ��3���� H������'���(��� ��,�,�� "0,��) ,

���!�!���(*�,+�*4-� ������&����,����������� (coalescence) "�#�����'��&#�(��0�-���

�I&&��(��(=��)���� ��,*�������'���(,���(-

2.1 �������[!�!��

2.2 ��� ��,*����[!�!���

2.3 *�,"�#����#&*�����!���[!�!�� H��(*�,��2������'��&#

��,

2.4 ����*��*��*������.�����'��

2.5 +���0��������(*������.�����'��

2.6 ���0��������!�*��^�����(� ������ ,�-.��� (��[!�!��)

2.7 ���(���(������'�� H��'������������(��( shear rate 06� �����'���(�F,�&# ��, ��

�������� ��,� ���������'����3���������������� ���#H��(��� ��,��&#�����F �F,�,(

Page 61: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

39

�������-�F���������'��&#F�)���(��"��� �&�.F,�+,�'�0��������� ��,����[!�!���

�')� gum ����'�0��,"���4�=����������(���������

3. ���3��!��� (Particle size)

*�,���!�*�������'���(=��)����5�#�����'���(�F,� (,������(� 4) ���0�������

F �"�#��������*�������'�� �����'���(��(*�,���!���2����&# ��, ���-���(� "�#����� �I&&�

�(��(��������)�*�,*�����!������'�� ��� '��,"�#����*��*��*������.�����'�� ���(��=���

�')� ������������(�� �"�#�.,����=0� ����,*�,���!��'����(���&0��,�������

&�������� �'����(��#&"0� (light scattering technique) �����&.������!�,��������� coulter

counter ������.���+,�'� stoke�s law

4. ���������\��� (Phase inversion)

����0!�#�����'���&���,��������[!�F���# �)�'��, o/w "�#'��, w/o

F,� V4����������[!��(-�(��-�=�,("�#=��0( H���3���������[!������F,������'��'��,�#��(,+,

�'���������������[!�H���)��3�=�,( "�)H���3���������[!�"��������'���0(��������H���)

��3�=��0( ����)��')� ���(�(��(��[!�!������) 74% V4���.� ������'�����(��&�'��, o/w

��3�'��, w/o "�#F�)��0!�H���)��3�=��0( ��������[!�*�������'���&���,F,������(�(�

�(��[!�!�������) 74% V4��*4-�����I&&� ,���(-

4.1 ����*��*��*������.�����'�� ����.�����'��������*��*��06�&#�.� �

0��H�'���[!�!��F,�����)�)��&#���,��������[!�

4.2 '��,*������.�����'�� �����'��'��, o/w ��-� H�����.�����'���(�)

hydrophilic lipophilic balance (HLB) ��. �')� sorbitan monoester �����������*��*��&#�.� �

�'���[!�!��F,�������)��������[!� ���������������.�����'���(��(�) HLB 06� �')� 0�

���)� polyoxyethylenes �����������*��*��&#�.� ��'���[!�!��F,�06�*4-��)��������[!�

4.3 '��,"�#�����������#����)� Y ���.��� ����������2�+��F���&#�(=�

�)����#� �����������*������.�����'�����.��� ����)��')� ���� calcium chloride ����

�����'��'��, o/w V4���'� sodium soap ��3�����.�����'�� &#�.� ����,��������[!���3�'��, w/o

+,�( calcium soap ��3�����.�����'��"�� ��3����

4.4 �����(����� !6�� ��������[!��&���,�# �)������(������'����

*�#�(������'���2������06)��� !6�� ��� ��(���� !6�� � &�,������[!��(-�) phase inversion

temperature (PIT) ��3����[�����(����,*4-��������(������'���(��'�����.�����'��'��,F�)�(��#&�

+,�G�#���)� polyoxyethylenes +, PIT ��3���� !6���(����0���������'���-."�#'���-.���

Page 62: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

40

*������.�����'���(���0�,����� �(��061�0(�-.�.� ����,��*�)� �&��(��)�(-�) HLB

temperature �����(��"������ !6��*�������'��&� � �(�06���)�) PIT F� � �(���.��)�) PIT

�.� ����#�*������.�����'�����(��F� &4��.� ������'��������[!�F,� �(���.���0�����

,����)��(-F��'���#+'���������(������'��'��, o/w �(��(*�,���!���2��#��(,"�#�����

+,�'���������������[!� +,�����(������'�� � ��� !6��06���)�) PIT ���&��(-���.�)

PIT F��'���3�"�����������������.�����'���(�� �#0�,�� ��)���� ������������.�����'���(�

�(�) PIT 06���)��� !6���(��'�������2����5�����'�� &4�&#�.� ������'�������+,F�)������[!�

4.5 �������� (stability) =���!�����������0.�� ���&������(���5�#0���

�)�')"�#�(���!�,("��� �����������,�##����(���* ����)��H4�=6����+!��2��3�0���0.��1

�(������.�4�H4��)���� ����������������&�.F,�+,������0�������V��,'�� 0�����0(

��������'��-. ��"�#0(�(� �*�F,�,(���0)����#�����06���.��� ���&��(-�����������

0)����#���*����[!��-. �-.��� "�#����.�����'���(�� �#0������� �F,�=���!�����(��(�����

������!�

����@�"����������#�����������6��

���F�)��������!�*�������'��������,&���������*�� ,��[!�!��

"���"����&���[!�!��� V4�����,F,� 3 ���5�# ���

1. Creaming ��3����5�#�(���[!�!��"����F����������6)'�-��� ���������

!'�# �.� �� 2�"���3�'�-���(� "�#'�-������'���(��&��&� ������,��������'���(��(��� ��,��. �')�

+�'��� ��3����F�)������(����,*4-�F�)H�� ������*)0��H�.� �'�-��(�"��(-=0����F,�,���,�� ��

������������, creaming �&�.F,�+,�,*�, ,*����[!�!�� �')� �'� homogenizer ���

�.� ���[!���-�0���(��� �"�)���)��� ����������� ��,� ������[!�!���+,�'�0�

�������� ��,

2. Flocculation ��3����F�)�����'��,F�)H���')���� "�)���"����) creaming ���#

,���!�!���(�"������������(- ���,"����#����)��)�� Y V4��&#�.F�06)�����,

coalescence V4����3����F�)������)�H��F,� flocculation �(-�&���,�)�� ��� ����# �)���

���, creaming F,� ���*)� �����06)0!��,��&#*4-����"����#����# �)����!� V4����&��F,�

&����0����������(*������.�����'�� ����0)����[!�!�������[!�!��� ����*��"*2�

*��0�����2�+��F��� "�#����.�����'���(��(��#&� ��������������, flocculation �&�.F,�+,

�.� ��("��=����# �)� electrical double layer 06��� +,�'�����.�����'���(��(��#&��(�,6,V��F,�,(�(�

Page 63: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

41

=����#&�� �.� ����,^����"*2�"���(���(��������'�, �"�)� ���H���3�����.�����'��'��,F�)�(

��#&� ����'�����*��*��06����(�&#���,^���� � ������ ,��[!�!��

3. Coalescence ��3����F�)�����'��,H�� +, ,���!�!�����, ���������

�����3� ,�(�+�*4-�&�"������3�'�-��-."�#�-.����)�'�,�&� ������&�^�����(� ������ ,��[

!�!��F�)"*2�"�� ������������� !6��V4���.� �����.�����'����'��,���#��� ���������

coalescence �&�.F,�+,�����'��,"�#�����*������.�����'���)�� �#0� �&�'�����.

�����'���)�� ����������� ��,*����[!�!���

��*������6�� (Nanoemulsion)

�+������'��0)��� 1)����6)���6�*�������'��'��, o/w �(*�,���!��6)�(���#��

50-1000 �+����� "�)+,����F���*�,���!��(� 100-500 �+����� ���!��(�����-�&#����-�

�(���3���[!��-.���-.��� "�#��[!��-.������-. +,�(������-��&�(����(��+������'���) sub-

micron emulsion (SME) ��� mini-emulsion

�+������'�� �(0)����#��� ��� ��� �-.��� �-."�#0��,"���4�=�� +,0��H��

�6��6)F,�&�=��^����*��0��,"���4�=�� 0��H���(�F,�&�0��,"���4�=�� �'��,"�)����

�.�4�H4������3���5*��0��')���� "�)+,����F�"���&.��3������'�0��,"���4�=���������06�

������������������*��*��� �� (Tcholakova, Denkov, and Danner 2004 : 7444�7458) +,����F�

*�-�������.�+������'��&#��3���=0���[!�!��"�#!���+,�'�"���'�����(�06� V4��

��#+'��*���+������'���(,���(- (��!��� &����#�0��\2552 : 117-118)

1. �+������'���(��-��(�=��0��=�0����)"��+�������'�� ,����-�&4��.� ��+�

�����'���(��#0����!�����0)�=)�0�0.��1F,�,(��)

2. �+������'���(+��0���, creaming, flocculation "�# coalescenceF,���.��)

"��+�������'��

3. 0��H���(��+������'��F,� ��6�"�� �')� ��(� +�'��� 0���� "�#+^�

4. �+������'��F�)�)�� ����,����#�������)�=�� ��� ������-������)�Y *��

�)�� �����-����V���*��0���� ,����-�&4�0��H�.�+������'����'�F,������"�#0����

Page 64: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

42

!��(� 21 ���5�#�+������'��*�� aceclofenac �(�H)!�,�� TEM (Transmission Electron

Microscope)

�(�� : Faiyaz Shakeel et al. �Nanoemulsions as Vehicles for Transdermal Delivery of

Aceclofenac,/ AAPS PharmSciTech 4, 8 (December 2007) : Article 104.

������#!��%<67��*������6�� (Application of nanoemulsion)

�����������0.��F,��(���.�+������'����'��.�0�0.��1���������0.��� �

V4��*�06)=�� ���+,�G�#����-.��� �+������'����3������'���(�� �#0�0. ������'���3�

�����������.�0�0.��1����-.���F,�,(��)���F�+�+V� (liposomes) +,*��,(*���+�

�����'���(�� �������F�+�+V� ��� 0��H')�����������V4�=)�*��0�0.��1�*�06)=�� ���*��

���5�F,�,( �.� ��(�����0�0.��1&.������(�V4��*�06)=�� ��� "�#,�����(��(��-��(�=��0��=�0

06�&4��.� ��+������'��0��H��3�0�����������0)�=)�0��)� Y F,�,( "�#��')������

��#�������'(�!��)� Y � ����=�� ��� �')� ��')��.� �=�� ����,��061�0(�-. +,

�+������'��&#')���������"*2�"��� ����=�� (��!��� &����#�0��\2552 : 117-121)

�!)�����<����]"��6/8�-!�6�������*������6��

�(=6��.���4�5���0���������T)�'�-�&��'(�*���+������'�� +,�+������'���(

���0��H����T)�'�-�&��'(� �'��,F,�"�) �'�-�"���(��("������"�#"����� �'�-�F���0

"�#�'�-�� +,�(=6��.���4�5=���T)�'�-�*���#���+������'��+,�(�����(�+,�'�0��,

"���4�=��'��,�)�Y ,�� (Myc et al. 2002 : 195-201)

Page 65: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

43

F,��(������,0���'�-�"���(��("������"�#"�����,���+������'�� +,

��=0��+������'��06�� GMO/CPC ���"���(��("������"�#"�������3���� 10 "�# 30

��( ���) �+������'���(��'��(��#0����!�����T)�'�-�"���(��(F,�06���) 95% ,��"0,���

����(� 5 "�# 6 (Wright 1996 ; Hamouda et al. 2001 : 1-7)

���&��(���4�5���0���������T)�'�-�"���(��("��� ��F,��(�����

���0��H����T)�'�-�F���0F,��(�,�� +,�'�-�F���0�(�F,��(���4�5F,�"�) �'�-� vaccinia virus,

�'�-� Influenza A virus "�#�'�-� Herpes simplex virus (Wright 1996 ; Hamouda et al. 2001 : 1-7)

,��"0,���!��(� 22-23

����(� 5 =���T)�'�-�"���(��("������'��,�)�Y ,���+������'�� ���&���=0��(����

10 "�# 30 ��(

Bacteria Innoculum

(CFU)

%Inactive after 10

minutes incubation

%Inactive after 30

minutes incubation

Staphylococcus aureus (type 8)

Staphylococcus aureus (type 5)

Staphylococcus epidermidis

(strain 977)

Group B

Streptococcus (capsular type III)

Group A

Streptococcus (beta-hemolytic)

Listeria monocytogenes

Streptococcus pneumoniae

(type 5 ATCC 6305)

Propionibacterium acnus

(ATCC 6919)

Gardnerella vaginalis

(ATCC 14018)

2 x 107

9 x 106

8 x 105

2.9 x 107

3.3 x 107

1.3 x 108

6.4 x 107

1.2 x 108

5.5 x 107

99.99

100

100

99.99

99.99

99.99

100

100

100

99.99

99.99

100

100

99.99

99.99

100

100

100

�(�� : D.C. Wright, �Antimicrobial oil-in-water emulsions,/ United States Patent, 1996 : 5-6.

Page 66: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

44

����(� 6 =���T)�'�-�"���(��("�����'��,�)�Y ,���+������'�� ���&���=0��(���� 10

"�# 30 ��(

Bacteria Innoculum

(CFU)

%Inactive after 10

minutes incubation

%Inactive after 30

minutes incubation

Escherichia coli

Type 018:K1

Escherichia coli

Type 018:K

Escherichia coli 35

(epimerase deficient)

Pseudomonas aeruginosa

Type FD-1

Pseudomonas aeruginosa

MEP strain 2192

Haemophilus influenzae

capsular type b

Neisseria neningitidis

type b (ATPP 13090)

Neisseria gonorrhoeae

(ATCC 9793)

2.1 x 107

3.2 x 107

3 x 107

3.8 x 107

8 x 107

1 x 107

1.6 x 108

1.2 x 106

97.1

89.7

94

99

99.1

99.99

100

100

96.7

99.6

85

99

97.5

99.99

100

100

�(�� : D.C. Wright, �Antimicrobial oil-in-water emulsions,/ United States Patent, 1996 : 6.

Page 67: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

45

!��(� 22 ��^"0,�=���T)�'�-�F���0*���+������'�� (BCTP) +,�(�����*��*�� 10% "�#

1% ���z=���T)�'�-� vaccinia, influenza A "�# Herpes simplex virus F,� 100% ��

��� 15 ��(

�(�� : Tarek Hamouda et al., �A novel surfactant nanoemulsion with a unique non-irritant topical

antimicrobial activity against bacteria, enveloped viruses and fungi,/ Microbiology Research, no.

156, 1 (2001) : 1-7.

!��(� 23 !�H)&������ Electron microscopy *���'�-� influenza A �(�=0�����+������'��

A. influenza A virus �(���F�)=)���=0�����+������'��,

B. influenza A virus �(�=0�����+������'����3���� 15 ��(���) F�)���[��-� ���

*��F���0� �� 2�

�(�� : Tarek Hamouda et al., �A novel surfactant nanoemulsion with a unique non-irritant topical

antimicrobial activity against bacteria, enveloped viruses and fungi,/ Microbiology Research, no.

156, 1 (2001) : 1-7.

Page 68: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

46

���&��(-"������(������0���������T)�'�-��,���+������'���(�,�� +,�'�-�

��(��(���.��4�5��� Candida albicans "�#�'�-� Candida tropicalis (Myc et al. 2002 : 195-

201) ,��"0,�������(� 7 "�#!��(� 24-25

����(� 7 "0,�=���T)�'�-��'��,�)�Y ,���+������'�� ���&���=0��(� 10 "�# 30 ��(

Yeast Innoculum

(CFU)

%Inactive after 10

minutes incubation

%Inactive after 30

minutes incubation

Candida albicans

Candida tropicalis

3.2 x 105

5.4 x 105

62.5

100

62.5

100

�(�� : A. Myc et al., �The fungicidal activity of novel nanoemulsion (X8W60PC) against

clinically important yeast and filamentous fungi,/ Mycopathologia 4, 155 (2002) : 195-201.

!��(� 24 Kinetics *����T)�'�-� Candida albicans ,���+������'������*��*�� 1% "�# 10%

�(�����)�Y +,�( BHI medium ��3����������

�(�� : A. Myc et al. �The fungicidal activity of novel nanoemulsion (X8W60PC) against

clinically important yeast and filamentous fungi,/ Mycopathologia 4, 155 (2002) : 195-201.

Page 69: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

47

!��(� 25 !�H)&������ Electron microscopy *�� Candida albicans �(�=0�����+������'��

!� a "0,�!��'�-�(0������ !� b, c, d "0,�!� *���'�-�(0���(�=0�����+�

�����'������*��*�� 1% �(�����)�Y (�6���'(-��3� ,*���+������'��) �.���* =

12,000x

�(�� : A. Myc et al. �The fungicidal activity of novel nanoemulsion (X8W60PC) against

clinically important yeast and filamentous fungi,/ Mycopathologia 4, 155 (2002) : 195-201.

�8������������#

��0��,�-.��� ���#� (essential oil) �.F,� ����( �')� ���(��2� (cold

pressing) �������,��F��-. (steam distillation) ��0��,,������.�#� (solvent extraction)

0��,0�+,�'�*��F �� ������$� (supercritical fluid extraction) "�#��0��,,���^0*��"*2�

(solid phase extraction) ���4�5������#���*���-.��� ���#� ,�������� gas

Page 70: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

48

chromatography (GC), liquid chromatography (LC) "�#������� (distillation) �.� �����)

0�0.��1�(���3�������#���*���-.��� ���#� �($���%��'(�!� (biological activity) �(�

�� � �')� �����"�� (antiallergic) ���-����FV�� (enzyme inhibitory) �������0� (anti-

inflammatory) ������)��������� (antimutagenic) ���0��)��#��2� (anticarcinogenic) ���

F���0 (antiviral) F�)"��� (insect repellent) $���%T) � (molluscicidal) "�#���&��'(�

(antimicrobial) ��3���� (Nakatsu et al. 2000 : 571-631 ; Bakkali et al. 2008 : 446-475) 0�0.��1

���-.��� ���#� �(��($���%��'(�!�"�#�(���!������.���#�����'����!0�'���� F,�"�)

eudesmol derivative ��3���������'��,� �)�(��(+���0��������(��3� sesquiterpenens �($���%���

���)��������� acyclic terpene alcohols ��3�0�&.��� polyphenol �(��($���%���-����FV��

tyrosinase �.���F,���������������.��'���3�0)����#������������0.��'��,�)� Y totarol

&�,��3� diterpene phenol �(�����.��'��)������[�'(��# (antibiotics) ������.&�,�'�-��)�+���(�,�-�

(methicillin resistant Staphylococcus aureus strain) perillaldehyde "�# polygodial ��3�

0�0.��1�(�F,�&���'0���F��*��1(���¡�0��H���$���%�0�������������&��'(� (synergistic

antimicrobial activity) &��(���)��&#� 2�F,��)�("��+��������.�-.��� ���#� ��'����(�

=���!�����)� Y ��������������"�#,6"�0�*!� �')� ���5+�� �������0.�� =���!���������

0�*!���"�#^I� (oral care products) "�#0�����0(��� � ��3���� (Nakatsu et al. 2000 :

571-631)

=���!���������0�*!���"�# I��(��($���%���&��'(�����(�-.��� ���#� ��3�

0)����#���0.��1 +,�G�#�-.������ (mouthwash) �(��($���%���"���(��( (antibacterial

activity) V4�����,"�����'�"��������,���-.��� ���#� �(-&#')��,�����,���&������(�

(antiplaque) "�#�.&�,��� ���6� (anticalculus) F,�,( ���&��(-��')��.� ��� �& ��0,

'���"�#�,�����,+��� ��������0� (gingivitis) F,�,�� �-.�������(��($���%���&��'(����

��#���,�� thymol "�# eugenol V4��0�0.��1��-�0��'��,�(-��3�������#������-.��� ��

�#� �(��($���%���-����&��1����+�*�� Actinomyces viscosus �� ��,�,��� �(��#,�����

�*��*�� 25 0)�������0)�� (ppm) �(����)��������,���-.�������(���#���,��

thymol "�# eugenol ��3��##����� 4 ��� &#0��H�,���&������(�F,������ 60 ������V2���

���&��(-���(����)��=���!�����-.�������(���#���,���-.��� ���#� &#�($���%�,

�����,���&������(�F,���� (longer lasting) ����)=���!�����-.�������(���#���,��

triclosan V4����3�0�0�����# ��(��($���%���"���(��("�#����'���3�0����$���%0.��1���-.

�������(��(&. �)����F� (Nakatsu et al. 2000 : 571-631) ���&�&#�(���.�-.��� ���#�

Page 71: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

49

��'���3�0)����#������-.������"��� ���(���.��'���3�0)����#�����0(^I��(�,��

���#�-.��� ���#� �($���%���&��'(�"�#�,������0� ��-��(-�(����) cineole, menthone

"�# menthol 0��H')��������V4�=)���=�� ���F,�,�� (Nakatsu et al. 2000 : 571-631) �(

����) eugenol "�# geraniol ��3�0�0.��1���-.��� ���#� �(��($���%���-��������&.���

*���V����#��2�')���������5� (human mouth epidermal carcinoma cell line) (Bakkali et al.

2008 : 446-475) &4��,�)&#0��H�.�-.��� ���#� ���#�����'���=���!���������0�*!�

��"�#^I�F,�����*����*4-� +,�-.��� ���#� �(��.��'������4�5��&�F,�"�)

1. �8����������= (Clove oil)

�-.�������6 (clove oil) 0��,F,�&�,���6�" ��*���������6 Eugenia

caryophyllata L. Merr. & Perry �-.�������6��#���,��0������)� phenylpropanoids �')�

carvacrol, thymol, eugenol "�# cinnamaldehyde �-.�������6�($���%���-�"���(��(�)�+��F,�

�'��, �')� Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium "�#

Staphyllococcus aureus +,�G�# multi-resistant Staphylococcus epidermidis ���&��(-���($���%

���F���0�)�+������ (herpes simplex virus) ���F���0�)�+���������0�V( (hepatitis C virus) ���

�'�-�� (antifungal) �������0� F�)"��� "�#��3���5�)��V��� (cytotoxic) ��3���� (Chaieb et al.

2007 : 501-506) eugenol V4����3�������#���0.��1���-.�������6�($���%�������,

(analgesic) '�G�#�(� (local anesthetic) �������0� "�#���"���(��( &4�F,��(���.�-.���

����6��'�����������,^I� +,�(��#0����!�������(�����&��(���#���,�� benzocaine

�*��*�� 20 ������V2��� ���'��-.�������6�)����� zinc oxide ��')��,�������0�&���H��

^I�F,��(�,�� �(�����"�� eugenol ���-.�������6 �')� �.� ����,=���",���')����"�#���

�J�� (Price 1998 : 144-147)

2. �8�������^#�%����% (Spearmint oil)

�-.���0��J������� (spearmint oil) 0��,F,�&����0��J������� (Mentha spicata L.)

������#���0.��1���-.���0��J������� F,�"�) α-pinene, b-pinene, carvone, 1,8-cineole, linalool,

limonene, myrcene, caryophyllene "�# menthol �-.���0��J��������($���%���-�"���(��("������

"�#"�����F,� �'��, �')� Bacillus subtilis, S. aureus, Micrococcus luteus, S. mutans "�#

E. coli �����-� Candida albicans "�# Saccharomyces cerevisiae ��3���� �-.���0��J��������($���%

���&��'(� T)�'�-� (antiseptic) �������� ,���2�*���������-���(� (antispasmodic) "�#*��

�� (carminative) ��3���� �-.���0��J�������F�)�(��5"�#F�)�.� ����,����#������ ��.��'�

Page 72: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

50

���#,������*��*���(�� �#0� ������&��-.���0��J���������#��� menthol ���������. &4�

�)��*�����,!������.��'�����,2�

3. �8������������%����% (Peppermint oil)

�-.���������������� (peppermint oil) 0��,F,�&�0��,F,�&���*�����0#�#" �)

Mentha piperita ( ����6�&�������'��� M. balsamea Willd.) ������#���0.��1���-.���

�������������F,�"�) menthol, menthone, 1,8-cineole, methyl acetate, methofuran, isomenthone,

limonene, β-pinene, a-pinene, germacrene, trans-sabinene hydrate "�# pulegone (H.-G.

Grigoleit, and P. Grigoleit 2005 : 612-616) �-.�����������������($���%���-��'�-��)�+��F,� �

'��, �')� Salmonella typhimurium, Enterobacter aerogenes, E. coli, Klebsiella pneumoniae,

Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi B, Proteus mirabilis, P.

vulgaris, Shigella dysentriae "�# Yersinia enterocolitica ��3���� (Saeed, Naim, and Tariq 2006 :

869-872) �-.�����������������($���%���&��'(� ���F���0 (antiviral) �������, (analgesic) ���

����0� "����� (antipruritic) T)�'�-� "�#�������� ,���2�*���������-���(� ��3����

�-.����������������F�)�(��5"�#F�)�.� ����,����#������ ��.��'���*�,�(�� �#0�

�)�F��2������#��,�#������.F��'���0��(�(���!���')��F���0"�� (Bakkali et al. 2008 :

446-475 ; Burt 2004 : 223-253 ; Saeed et al. 2006 : 869-872) Optamint®

���0�0��,&�

0#�#" �) (peppermint extract) &�,��3��-.��� ���#� ���0���#����(�� �������0��� �

(food flavoring compound) �(��#�������.��'���-�!��"�#!����)���� ������

� �"�# (FDA) &�,� ��-.�����������������6)��0H�# �generally recognized as safe/

(GRAS) status &4�����)�(������,!������.F���#�����'���3�=���!�����)� Y F,��)�

���,!� (Grigoleit and Grigoleit 2005 : 612-616)

4. �8�����#=������� (Eucalyptus oil)

�-.���6������0 (eucalyptus oil) 0��,F,�&�����"�#��*����'��&(��0 (genus)

Eucalyptus ������#��������(*���-.���6������0 F,�"�) cineol, pinene, limonene, cymene,

phellandrene, terpinene "�# aromadendrene ��3���� (Li, Madden, and Potts 1995 : 299-318)

�-.���6������0�($���%���0�� �������, ���"���(��( ����'�-�� �������0� ��������

,���2�*���������-���(� "�#T)"��� ��3���� (Batish et al. 2008 : 2166-2174) �(����)�����

�.�-.���6������0��'�!���&#F�)��3���5"�#F�)�#������ "�)������.�-.���6������0��'�

!���������)�-.���6������0�(�*�, 3.5 ��������� &#�.� ��0('(���F,� ��)��F,����

Page 73: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

51

�-.���6������0����*�,&#�.� ��������-��)��"�� �����F0� "�#��&(� (Batish et al. 2008 :

2166-2174)

5. �8���������� (Tea tree oil)

�-.����(��( (tea tree oil) ��3��-.��� ���#� �(�0��,F,�&���� Melaleuca

alternifolia &4��('�����(��(��)� �4���) melaleuca oil ������#��������(*���-.����(��( F,�"�)

terpinen-4-ol, γ-terpinene, α-terpinene, 1,8-cineole, α-terpinolene, α-terpineol, α-pinene "�#

p-cymene �-.����(��(�($���%���-� Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

"�# Pseudomonas aeruginosa ���&��(-���($���%����'�-�� �������0� "�#����#��2� (Hammer

et al. 2006 : 616-625 ; Faoagali, George, and Leditschke 1997 : 349-351) �)�F��2���(���

�)�-.����(��(�(�����3���5�)�F^+����0�� (human fibroblast) "�#�V���������=�� epithelial

cell) *�����5� &4���3�*��&.��,�����.�-.����(��(F���#�����'������!0�'���� ���.�-.���

�(��(��'��!��� (topical use) &#�)��*�����,!� �.� ����,���F�)�4���#0���F,������

"�#�������-� ����,���F�)�4���#0���*4-��2&# F,���� �(����)�������#���-.���

�(��(�������06�&#���,�����3���5�)��)�� "�#���#,������*��*��06�&#�.� ����,���

�#�������)�=�� ���F,� ,����-�&4�F�)������(��-.����(��(���6�"��*��=���!����0. �����

�����#�� "�# ��'����6�"��*��=���!����0. ����!��������'����#,������*��*��

��. �)�F��2��������#��������(*���-.����(��(�2F�)��3���5�)�(� (genotoxic) (Hammer et

al. 2006 : 616-625)

�8�����$������/�� (Soybean oil)

�-.���H���� ���� (soybean oil) 0��,F,�&����2,H���� ���� (soybean) &���� Glycine

max �-.���H���� ������#���,��0������)�^J��� (phenolic compounds) ��3�&.�����

���&��(-�����2,H���� ��������#���,�� phytic acid, α-linolenic acid, oleic acid "�#0���

���)� isoflavones �')� genistein "�# daidzein (Naito et al. 2000 : 811-816 ; Ruth, Shaker, and

Morrissey 2001 : 177-184) V4��0�� �)�(-�($���%������V��,'�� (antioxidant) &4��($���%���������

���, lipid oxidation 0��H�,�#,��+���0����������#"0+� �� ������������,+�� ���&"�#

��,����, �������+���� �� "�#�������0� ��3���� �(����)H���� �����($���%���-���

0����0����� �) (antiangiogenic effect) &4��($���%����#��2�,�� (Naito et al. 2000 : 811-816) �(

��������3���5*���-.���H���� �����) �6�,��������( (female Sprague-Dawley rat) �(����

�-.���H���� �������,���-�����(������ (mammary tumor) (Kritchevsky, Weber and Klurfeld 1992 :

Page 74: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

52

175-179) �)�F��2���(����)�������#���-.���H���� ������3�� ���������(�

� �#0� �(������,!�"�#')��������+�����)������5�F,� (Hammond et al. 2008 : 311-

323) �')� ������������,!�#+���0������ ���F����(�V�F�,�����#"0+� ��06� "�#�������

�����,+�� ���&"�# ��,����, ��3����

�8��#��7����� (Mouth Wash)

�(����)�-.������ (mouth rinse) �(���#���,�� cetylpyridinium chloride

(CPC) 0��H�,���&������(��� ���� ���� (supragingival plaque) "�#+��� ��������0�

(gingivitis) F,��)��(��#0����!� �)��F,��(���4�5��#0����!������.&�,���&������(�

(plaque) �(����,&�"���(��(�(�F�)���������V��&������&��1����+� (anaerobic bacteria) +,

���(���(��# �)��-.�������(���#���,�� CPC �*��*�� 0.05 ������V2��� ����-.�������(�

��#���,��^�6��F�,� (fluoride) ���)�($���%���&������(� (antimicrobial activity) �)����

&������(��� ���� ���� V4�������������3�^���� (biofilm) �(����,*4-�! �����"���^I� ������.

���0#�,��')���� "�������&#�(������0*���-.����#�(���-�=��^I� &���-�&������(���

')����&#�����#���H����&�����3�" �)����*��&������(� �'��, �(�#���)�0)��-.

"�#� �F���&������(� �(���-�0)�0���5"�#��,���!���"=)����&������(� �����4�5

�(-�00����&.��� 117 �� (' 55 �� �(���G�(� 30.41 �J 1�� 62 �� ���G�(� 28.70 �J) &#

����������# 2 ���-� ��3���� 14 ��� ,���-.������,����)�&.��� 20 ��������� ��3�

����� 30 ����( ���&��(-��� ��00����"���^I�,��^I�=0�^�6��F�,�,�� &����.

���&������(�������# ���&��'(����!����� 12 '���+�� ���&��������� ���)�-.

�������(���#���,�� CPC 0��H�,&.���&������(��(�F�)���������V��&������&������(��

� ���� ����F,��)��(��0.��1��������(���(�����-.�������(���#���,��^�6��F�,�

���&��(-��F�)�(�00�������,���F�&����,������#���,���F�)�4���#0���&���

�'��-.������ (Hu et al. 2009 : 2540-2548)

The Federal Drug and Cosmetics Act ��3��z ��(���(��*�������������0.��

(cosmetic) V4���.�)�������0.����-� �H4�0����.�.��'�����)�����5� ��������.���0#�,

���0��� "�#���������),4�,6, (promoting attractiveness) ������(��"���!����5��

(appearance) +,���&�=���#���)�+���0���"�# ���(�*���)�� ���.0��)� Y ��'�

��3�0)����#������-.������ (mouth rinse) ������#���������� �2&�,��3��������0.�� ���.

�')� chlorhexidine ��'���3�0)����#������-.��������������&������(�&#&�,�-.����

Page 75: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

53

����-���3� (drug) ,����-��-.������'��,�(-&4��(*���)��'� (indication) 0. ��������5

0�*������')���� ��=6��¡��(��(����,^I�,����, (intermaxillary fixation) ��=6��¡��(�0��

����������&�,^I�'��,H�,F,� (removable orthodontic appliance) �������������&�,^I�'��,��,"�)�

(fixed orthodontic appliance) ��0�� I����� ���^I���(� =6��¡�,��+��^I�=� ���"=�������

(apthous ulceration) =6��¡��(�������5�����+�������,�)������3��##����� "�#�,����,

�'�-�"���(��(��')���� ���&���=)��, ���'��-.������&4��(���H���#0���������, ����.&�,

������ �2����� (oral malodor) ���&��(-�������5�������-�������,���# ��.0(*� ���0(

'��6 (tongue flora) V4����F,�����(�+,�G�#��-�&#H6��.&�,���F�,����"�����-�"�#�'��-.

������

&����4�5�����-�&������(��(�F�)���������V��&������&��1����+��(�����6)

��=����-���-� ���)&������(�� �)�(-0��H0�����# ���"���F��� (metabolite) F,�"�) indol,

skatol "�# volatile sulfur components (�')� hydrogen sulfide, metil mercaptan, dimetil sulfide

"�# dimetil disulfide) V4����3�0� ��*��������� (oral malodor) ,����-����'��-.������&4�

')��,&.���&������(��(���3�0� ��*���������F,� �-.�������(���#���,�� chlorhexidine,

sanguinarine, listerine antiseptic ��� cetylpyridinium chloride 0��H')��,&.���&������(��(�

�������-� (cultivable tongue flora) F,� �)�F��2��F�)�(�����������H4���#0����!���

���,�������*�� chlorine dioxide ���&��(-���(����) zinc chloride �(��#0����!���

���,�������F,���H4� 3 '���+�� ! ������'��-.�������(���#���,�� zinc chloride

�)��F,��(���.����� sodium chloride ��'�"�� zinc chloride ������,������� +,�. ���(���3�

0�����, (masking agent) ���&��(-���(����) Listerine �($���%����,F,���� (longer-

lasting masking effect) ������($���%���&������(� (antimicrobial effect) �)��,�� 0. ���

cetylpyridinium chloride 0��H�, organoleptic score F,���H4� 8 '���+�� ! �����������

�(����)�-.�������(���#���,�� triclosancopolymer-sodium fluoride �(��#0����!�

,(��)�-.�������(���#���,�� cetylpyridinium chloride ��� phenolic flavor �)��(��0.��1

(Hu et al. 2009 : 2540-2548)

�-.�������(���#���,�� chlorhexidine 0��H�,&.���"���(��("�#�,

�##���*�������,��0#0�*��"���(��(��������F,� ���'�0������0��� (adjunctive use) �')�

oxidizing agent ��� prexyborate +,�.��'��)����� chlorhexidine &#�.$���%���-�"���(��(�(��.

� � ���,���&������(� ���� ��������0�,(*4-�����)���'� chlorhexidine ��(��)��,(�

���&��(- oxidizing agent ���.� ����,�������� (stain) &� chlorhexidine F,��,���(�,�� =6��¡�

Page 76: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

54

�(��'��-.�������(���#���,�� chlorhexidine �(��(����*��*�� 0.2 ������V2��� ��3������ 1

0��, � &#�.� ����,���F�)�4���#0��� �')� ^I����(��0( ������6��0� ����(��F� "�#�6�04�

"0������(�����-� ��3���� (Hu et al. 2009 : 2540-2548)

Delmopinol (decapinol) &�,��3� surface-active agent �(��($���%���"���(��(�)��)��

+,�. ���(������������#��,"�#�������&.���*��"���(��(��=��^I� ,����-�0�'��,�(-&4�

0��H�,�����,���&������(�"�#�����,+��� ��������0� (gingivitis) F,�

���'��-.������ (mouth rinse ��� gargle) "�#0����0. ���')���� (oral

spray) ��3���#&.&#')��������������0����������� � (oropharyngeal inflammation) F,�

�(������4�5��(��������. methylene blue dye ��'���3�������� � (marker) *����

"��)��#& (distribution) *���(��'���������+����-� ����." �)��(��'�����)��# �)�')����

"�#')���� (oropharynx)

F,��(���.�-.�������(���#���,�� ����� +V, (soda) chlorhexidine, lidocaine,

Benadryl "�# Maalox mixture ��'����5������')��������0�&������5,�����(�.��,

(chemotherapy-induced mucositis) F,��)��(��#0����!� GM-CSF mouth rinse (0.5

microgram/ml) ��3��-.�������(��&')��,')������(����,���������')��������0�&���

���5,�����(�.��,F,�

���&��(-��F�)�(���.�0��H4����0��������# �)�+���������� (periodontitis) ���

+�� ���&"�# ��,����, (cardiovascular disease) V4���,�)"���(��(��')�� 2 '��, ���

Streptococcus sanguis "�# Porphyromonas gingivalis 0��H'���.� ����,����#���*�����2,

����, (platelet aggregation) �� ��,�,���F,� V4���-.�������(���#���,���-.��� ���#�

(essential-oil mouth rinse) 0��H�*�F���������.��*������ ����V���*��"���(��(,����)�

F,� �-.�������(���#���,���-.��� ���#� (essential oil) �(��($���%T)�'�-�+�� (antiseptic)

�')� Listerine 0��H�,&.����'�-� Streptococcus mutans �����&������(�"�#�-.�F,�

cetyltrimethylammonium naproxenate ��3�0��(����$���%T) Streptococcus sanguis F,���,��2�

�� 0��H�.&�, S. pyogenes, S. dysgalactiae "�# S. mutans F,���,��2� "�#���($���%���-�

Moraxella catarrhalis �(�,�� cetyltrimethylammonium naproxenate ���,*4-�&���&�������3�

������# �)��������0��(�F�)�')0��(��,� (nonsteroidal antiinflamatory drug) ��� quaternary

ammonium compound �-.�������(���#���,�� benzalkonium 0��H���-������,���

&������(�F,� sanguinaria ��3�0�=���!��������'�������)� alkaloid �(�F,�&���' 0��H�,

���&������(��(� ��3�0� ��*��+��^I�=�"�#+����������F,� �)���(����) sanguinaria �(

Page 77: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

55

���0���������������,��*� ������-����&��V���*���)���(��(���=�,���� (leukoplakia)

�)�F��2��&����4�5�����3���5"�#���.� �����)��*��0�����,���=�,��������

���)������,�'��,�(-F�)�(��5�)��V�����#��(-�"�#0�����,���"�)�)��, ,����-�&4��,�)��

�'� sanguinaria F�)�)&#�.� ����,���-����&��V���*���)���(��(���=�,����*4-�F,� sanguinaria

0��H�,��0#0�*��&������(� �. ���(�T)�'�-�+����')���� V4��&#���$���%+,�������

�,��#��������V��,'��*�����-�����

Page 78: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

56

����� 3

��_�3�����������-�#

���������<67<������-�#

1. Glycerol monooleate (Lot No. 1-6297, Imperial Industrial Chemicals (Thailand)

Co.,Ltd.)

2. �-.���H���� ���� (���5�� �-.�����'F� &.��, (� '�))

3. �-.�������6 (Lot No. 6168, H.E.DANIEL LTD.)

4. �-.������������ (Batch No. RO 0250, Greater Pharma Co., LTD)

5. �-.���6������0 (Batch No. RO 0245, Greater Pharma Co., LTD)

6. �-.���0��J������� (Batch No. RO 0249, Greater Pharma Co., LTD)

7. �-.���������������� (Batch No. RO 0068, Greater Pharma Co., LTD)

8. �-.����(��( (Batch No. RO 0364, Greater Pharma Co., LTD)

9. Phytosterol (Batch No. UI8B040005, Cognis Corporation)

10. Polyoxyethylene sorbitan monostearate (Lot No.59630, P.C. DRUG CENTER

CO.,LTD)

11. PEG-40 Hydrogenated Castor Oil (Lot No. 98-2394, BASF)

12. Sodium Lauryl Sulphate (Lot No. 000148, VIDHYASOM CO., LTD)

13. Poloxamer (Lot No. 9205-1395, BASF)

14. �-.����� (General Hospital Products Public Co.,Ltd)

15. Brain Heart Infusion Broth (Batch No. VM008293, Merck KGaA)

16. Brain Heart Infusion Agar (Batch No. VM006625, Merck KGaA)

17. Mitis Salivarius Agar (Lot No. 1402063, Sigma-Aldrich Co.)

18. VIAL TTC Solution 1% (Batch No. 9167462, Becton Dickinson Co.)

Page 79: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

57

���/����/����<67<������-�#

1. Beaker (50, 100, 250 ���������)

2. Cylinder (100 ���������)

3. Stirring rod

4. Thermometer

5. Magnetic stirrer "�# magnetic bar

6. Homogenizer (��)� X1020, Ystral GmbH, Germany)

7. �����&�������� (��)� CX41RF, OLYMPUS, Japan)

8. �����,�&���� (Dinolite, AM423X)

9. Particle size analyzer (Horiba, LA-950, Japan)

10. pH meter (Mettler-Toledo GmbH, China)

11. Viscometer (Brook field Digital Viscometer, RVTD, USA)

12. Zeta potential analyzer (Zeta plus, Brookhaven, USA)

13. UV-VIS Spectrophotometer (��)� 1100series, Agilent, USA)

14. Laminar air flow (��)� S2010, Holten, Denmark)

15. Petri dish (*�, 100x15 ���������)

16. Glass tube (*�, 16x160 ���������)

17. *�, Schott DURAN *�, 250, 500, 1000 ���������

18. Bacterial Incubator (Contherm Digital Series, New Zealand)

19. Shaking Incubator (��)� SI4-2, SL SHEL LAB, USA)

20. Automatic autoclave (Model : LS-2D ; SCIENTIFIC PROMOTION CO.,LTD)

21. Micropipette 20-100 µl,100-1000 µl ,1-5 ml, 1-10 ml (masterpette ; Bio-Active

Co.,Ltd.)

22. Micropipette tip

23. Centrifuge tubes-Sterile 15 ml, 50 ml (BIOLOGIX RESEARCH COMPANY)

24. Eppendrof tubes

25. Anaerobic Container (Batch No. 72930, Merck KGaA)

26. Anaerocult® A for mibrobiology (Batch No. 83012, Merck KGaA)

27. Anaerotest® for microbiology (Batch No. HC816543, Merck KGaA)

Page 80: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

58

��_�3�����������-�#

1. �������#������6�� (Wright 1996 : 4)

��#��������(������'��&#�'����(��� ��������"�)��-�0)����[!��-.���"�#�-.

+,�����&����.��[!�F*��� ���)��(���#�� 60 ����V��V(0 &��#� �, ��� ��*����

"�#�.0)����z!��-. ���)��(���#�� 65 ����V��V(0 �.0)����[!��-.�����=0�������[!�

�-."�#�IR�=0�+,�'�������� homogenizer �����2������#�� 2350 ����)���( ��#�� 5

��( ��-�F��� ��2��(���� !6�� ��� &���-��.�����'���(�F,����0)!'�#���&� �����������#����=�

�)�F� +,��0)����[!��-."�#�-.���&#�(������#����(�"���)����*4-��6)������H���#0�����

���4�5�)�F��(-

1.1 ���4�5=�*��0��,"���4�=��

��)��(���#�� ��)��(���#��

60 ����V��V(0 65 ����V��V(0

�IR�=0�+,�'�������� homogenizer

�����2������#�� 2350 ����)���(

��#�� 5 ��(

��-�F��� ��2��(���� !6�� ���

!��(� 26 "=�!�*�-���������(������'��+,�4�5=�*��0��,"���4�=��

��[!��-.��� (0)�� A) ��[!��-. (0)�� B)

����[!��-.���=0�������[!��-.

�����'��

��#����=�

Page 81: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

59

1.1.1 ������#���*��06���.���������4�5=�*��'��,0��,"���4�=��

����(� 8 06�������(������'��������4�5=�*��'��,0��,"���4�=��

Part Material Amount (% w/w)

S1 S2 S3 S4

A

Glycerol monooleate 5.5 5.5 5.5 5.5

Soybean oil 17.5 17.5 17.5 17.5

Phytosterol 1.5 1.5 1.5 1.5

POS 5.0 - - -

PGO - 5.0 - -

SLS - - 5.0 -

PLX - - - 5.0

B Water qs to 100 100 100 100

1.1.2 ������#���*��06���.���������4�5=�*�������0��,"���4�=��

����(� 9 06�������(������'��������4�5=�*�������0��,"���4�=��

Part Material Amount (% w/w)

C1 C2 C3 C4 C5

A

Glycerol monooleate 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5

Soybean oil 17.5 17.5 17.5 17.5 17.5

Phytosterol 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5

PGO 1.0 2.5 5.0 7.5 10.0

B Water qs to 100 100 100 100 100

Page 82: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

60

1.2 ���4�5=�*���-.��� ���#�

��)��(���#��

60 ����V��V(0 ��)��(���#��

&�0� �����3����-��,(���� 65 ����V��V(0

�IR�=0�+,�'�������� homogenizer

�����2������#�� 2350 ����)���(

��#�� 5 ��(

��-�F��� ��2��(���� !6�� ���

!��(� 27 "=�!�*�-���������(������'��+,�4�5=�*���-.��� ���#�

��[!��-.��� (0)�� A) ��[!��-. (0)�� C)

����z!��-.���=0�������[!��-.

�����'��

��#����=�

����0)�� B

Page 83: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

61

1.2.1 ������#���*��06���.���������4�5=�*��'��,�-.��� ���#�

����(� 10 06�������(������'��������4�5=�*��'��,�-.��� ���#�

Part Material Amount (% w/w)

V1 V2 V3 V4 V5 V6

A

Glycerol monooleate 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5

Phytosterol 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5

PGO 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0

B

Clove oil 17.5 - - - - -

Spearmint oil - 17.5 - - - -

Peppermint oil - - 17.5 - -

Optamint oil - - - 17.5 - -

Eucalyptus oil - - - - 17.5 -

Tea tree oil - - - - - 17.5

C Water qs to 100 100 100 100 100 100

1.2.2 ������#���*��06���.���������4�5=�*���-.���H���� �����)����0�����

*�������'��

����(� 11 06�������(������'��������4�5=�*���-.���H���� �����)����0�����*�������'��

Part Material Amount (% w/w)

P1 P2 P3 P4 P5 P6

A

Glycerol monooleate 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5

Phytosterol 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5

PGO 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0

Soybean oil 13.125 8.75 7 5.25 3.5 1.75

B Peppermint oil 4.375 8.75 10.5 12.25 14 15.75

C Water qs to 100 100 100 100 100 100

Page 84: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

62

1.2.3 ������#���*��06���.���������4�5=�*�����'��-.��� ���#�

�)������-.���H���� ������0�,0)���)����

����(� 12 06�������(������'��������4�5=�*�����'��-. ���H���� �����)������-. ���

���#� '��,�)������0�,0)�� 50:50 �)����0�����*�������'��

Part Material Amount (% w/w)

F1 F2 F3 F4 F5 F6

A

Glycerol monooleate 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5

Phytosterol 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5

PGO 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0

Soybean oil 8.75 8.75 8.75 8.75 8.75 8.75

B

Clove oil 8.75 - - - - -

Spearmint oil - 8.75 - - - -

Peppermint oil - - 8.75 - -

Optamint oil - - - 8.75 - -

Eucalyptus oil - - - - 8.75 -

Tea tree oil - - - - - 8.75

C Water qs to 100 100 100 100 100 100

2. ���������������#�����������6��

2.1 �����&0�����5�#���!� (physical appearance)

�.�����&0�����5�#!���*�������'��+,�.�����&0�������,��

"�'�-���(� (creaming) "�������4�=���3� % creaming "�#��"�'�-�*��0)����#���*��

�����'�������3�0)���-.���"�#0)���-. (cracking)

2.2 �����&0��,�������&��������"�#�����&������������2�����

�.�����'���(����(�"�)������3� 3 '�, "���0�)�����)�"�)�#'�,������ 200

F�+������ �&��&�,���-.������ 200 F�+������ �.�,6���5�#���!� ,�-.���=)������

&�������� (��)� CX41RF, OLYMPUS, Japan) "�#H)!�+,�'������,�&���� (Dinolite,

AM423X)

Page 85: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

63

2.3 �����&��,*�,���!�*�������'��

�.�����'���(����(�F,��.�����'���(����(�"�)������3� 3 '�, "���0�)�����)�"�)�#

'�,������ 300 F�+������ F��&��&�,���-.����������� ���3� 3 ��������� ���&���-��.

����)��(����(�F,���������#�� 100 F�+������ F����&��,*�,���!�*�� ,�-.���,��

���������,*�,���!� (Horiba, LA-950, Japan) '��, fraction cells +,�'� �������,����#&

"0�*�����!��(��6)����(��������'�� �.����,V-. 3 ���-�

2.4 �����&��,��� ��,*�������'��

�.�����'���(����(�F,��.�����'���(����(�"�)������3� 3 '�, "���0�)�����)�"�)�#

'�,������16 ��������� F����&��,��� ��,,�����������,��� ��, (Brookfield Digital

Viscometer, RVTD, USA) +,�'� �� UL (ultra low adapter) ������, �.����,V-. 3 ���-�

2.5 ����,�)V(��+�����'(� (zeta potential)

�.�����'���(����(�F,��.�����'���(����(�"�)������3� 3 '�, "���0�)�����)�"�)�#

'�,������ 200 F�+������ F��&��&�,���-.����������� ���3� 5 ��������� ���&���-��.

����)��(����(�F,���������#�� 3 ��������� F,�F����&��,�)V(��+�����'(� ,��������� zeta

potential analyzer (Zeta plus, Brookhaven, USA) ��,&.��� 30 ��� �.����,V-. 3 ���-�

2.6 �����&��,�)�����3���,,)�*�������'��

�.�����'���(����(�F,��.�����'���(����(�"�)������3� 3 '�, "����.����)�"�)�#

'�,F����&��,�)�����3���,,)�+,�'�������� pH meter (Mettler-Toledo GmbH, China) �.��

��,V-. 3 ���-�

2.7 �����&0�������0!����!�,�����(����)�

�.�����'����-� �,�(�F,�"�)��0)*�,"���*�, 50 ��������� &.��� 3 *�, "�#

�.F���-���-�F���(���� !6�� ��� (��#�� 25 ����V��V(0) ����4���������*�������'��! ���

�����(� 24 '���+�� "�# �����2�F����3���� 7 ��� "�#�.�����'��F���2���0!�#��)�+,�.�*�

�6����(���� !6�� 45 ����V��V(0 0�������6��2��(���� !6�� 4 ����V��V(0 ��3���� 12 ���

(&.��� 6 ���) "�������4�=��(����-��� ��*����#�����(� 2.1-2.6

Page 86: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

64

3. ����3��`�_�k#��#�8��6/8��"�*���������������������6��

3.1 �����(��'�-��)�+������������

�.�'�-� S. mutans 104B ���#��(-��� Brain Heart Infusion Broth "����)���

anaerobic jar (Batch No. 72930, Merck KGaA) �(� 37 ����V��V(0 �� 48 '���+�� �. stock �'�-�

�(�F,����,�)��,6,����"0��(� 540 �+����� ����� ����*��*��*���'�-� (CFU/ml)

3.2 ���(�����(��'�-�"�#�,0�����0��H�������-��'�-�

�.�'�-� stock ��&��&�� �F,�����*��*����#�� 105 CFU/ml ,�� Brain Heart

Infusion Broth ���&���-��.��,0�����0��H�������-��'�-�+,�'����( broth dilution

,�,"����&����(*�� Wright (1996 : 4) +,�.��=0���������'���(����(�F,��(�����*��*���)�Y

(F�)�&��&�, �&��&� 10 ��) "�#�&��&� 100 ��)) ������0)���'�-��)������'����3� 9:1 �.F��*�

������� shaking incubator (��)� SI4-2, SL SHEL LAB, USA) ��� !6�� 37 ����V��V(0 200 ���

�)���( ��3���� 10 ��( "����.���&��&� 50 ��) (n=3) +,�(���'� cetyl pyridinium chloride

(CPC) 0. �����3� positive control "�#�(���'������'���(����(�F,�&��-.���H���� ������3�

negative control �����4�5���-��(-

3.3 ����#����=������-��'�-�

�.����#����=� +,���.�����'���(�=0�����'�-���������� 100 F�+������

F���#&�� Brain Heart Infusion Agar � ����� &���-��.�*�������� bacterial incubator

(Contherm Digital Series, New Zealand) ��� !6�� 37 ����V��V(0 ��3���� 18-24 '���+�� ���

&.���+�+��( ����4�=������-��'�-� S. mutans 104B +,�.���&�06��

Page 87: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

65

����� 4

,����������#,�������&�'�

1. ���&�'���--�#�����,��"��!)����������#�����������6��

&������(������'��+,� �������������[!��-.��� 60 ����V��V(0 &�

0)����#����-.�����-� �,�#���3����-��,(���� "�#� �������������[!��-. 65 ���

�V��V(0 "����.��[!��-.�����=0�������[!��-. +,�.���IR�=0�,��������� homogenizer

�����2������#�� 2350 ����)���( ��#�� 5 ��( �.� �F,������'���(��(���5�#*�*�)� +,

�(���"���)����*4-��6)���������#�����06���.����(��'� ������&����-��(-F�)F,��������4�5

�I&&��(���(��*������0!�#�)�Y *����#��������(� +,�.�������0!�#�����(�&�

���4�5���-������(�0��H���(������'����06���)�YF,� "�)�)�F��2��������&����-��(-&#����

�4�50)���(���(��*������������#���*���.��������'���(��(=��)����0��������!��)�

'�,�&� �')� '��,"�#�����*��0��,"���4�=�� '��,"�#�����*���-.��� ���#� "�#

�-.��������(��'� ��3���� V4��F,�"0,���#��(,���.,���)�F�

1.1 ,�������3����&�,���"�������3�����6��

'��,"�#�����0��,"���4�=��&#��3����"���(�0.��1�����. �,���0�����

*�������'�� ���&��(-"���������W����-��(-�(�����)� ������.�����'���(�F,�F���3�

0)����#���*��=���!����0�*!�0. ���')����&4�F,��.��������'�0��,"���4�=���(��(���

���,!�"�#�(�0'���(�,(+,�����G�#0��(��(���'���=���!����,����)� F,�"�) POS, PGO,

SLS "�# PLX ���3�0)����#����������(������'�� (Niazi 2004 : 153)+,�.����#����

���(���(����0�����*�������'���(����(�F,� ��-�,�������&0��,������)���F�H4����'�

����������'��,�)�Y �����,0�� �')� *�,*�� ,�-.��� ��#&��(���-�=�� ���V(��+�����'(�

��"�'�-� (cracking) �����,��(� (creaming) ��� ��, �)�����3���,,)���3���� +,�(��

�,0������(�(����(�"�#��#����=� �����2�F���(�0!�#��)�

Page 88: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

66

1.1.1 ,����6��3���3����&�,���"��!)�������������6��

1.1.1.1 ,����6��3���3����&�,���"����')������#��� (physical

appearance) ��������6��

!��(� 28 "0,�=����(���(����5�#���!�*�������'��

�)���.F��,0����������+,�(�����(���(����'�0��,"���4�=�������)��)����F,�"�)

POS (06�� S1), PGO (06�� S2), SLS (06�� S3) "�# PLX (06�� S4) V4�����)���'�0��,"���4�

=�������)� POS "�# SLS���,��"�*��0)�������'���(��(0(*��*��"�#*��)���)�'�,�&� (���,

creaming) ��*�#�(����'�0��,"���4�=�� 2 ���)��(�� ������ PGO "�# PLX F,������'���(��(

���5�#��3����-��,(�������,"0,�� �� 2�H4�"��+���*�����������(�,(��)*��0������)��(-

�������3����4�5�����������(���(���������� &4�F,��.����2�

����)������'��F����-��(���� !6�� ���"�#����2���0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45

����V��V(0 ,��"0,���!��(� 29-30 =����4�5���)'��,0��,"���4�=���(�)���������

*�������'����)���� ������'�0��,"���4�=�������)� POS, SLS "�# PLX F,��.��������'���(��(���

�����F�),( 0�����F,�&���"�*��'�-���(� +,�("��+����)������V2�����(��,�� ������4�5

�������� ��*�#�(��.��������'���(���#���,��0��,"���4�=�������)� PGO F�)���,��"�

*����(�+,�(������V2�����(���)��� 100 ��-� ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3����

24 '���+��"�# 1 0��, � "�# ���&���2�F���(�0!�#��)�����(���� !6�� 4 ����V��V(00������

��� !6�� 45 ����V��V(0 &.��� 6 ��� ,��"0,���!��(� 31 V4����3�������=����������(�

,(��)*��0������)� ����(- ���&��(-�����) PGO �(���*��(������)0��,"���4�=�������)�

���� (Rowe et al. 2006 : 572-579) ,����-������4�5�)�F�&4��.������� PGO ������'������4�5

�I&&������)�F�

+,����F�"���0��,"���4�=���(0)��')��������,�����'��+,

���[���"����6)�(�������=����#&�� (interface) �# �)�'�-�*��F*���"�#�-. (Baret et al. 2009 :

6088�6093) 0��,"���4�=���(�,(0��H )� ��� ,�-.���F��F,��)�0��6���"�#�������F�)� ����,

��������*�� ,�-.��� +,0��,"���4�=����-�&# )� ����)�0��6��� ���F�)*4-��6)���

���0����� ���#�����F�H4����0�����*��'�-��-.���,�� (McClements and Dungan 1993 :

7304-7308) �����(�(-��3�F�F,��)0������)� PGO �(+���0����(�� �#0�"�#�*����F,�,(�����[

!��-.����(��'�&4��.� ����,�� )� ��� ,�-.���"�#���������������*�� ,�-.���F,�,(��) V4��

=��(�F,�0�,�����������4�5+, Fernandez "�#��# (2004) �������3����4�5��0)����F�

Page 89: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

67

�����,��������*�������'�� &4�F,��.���,0��+,����#����=����0������)� Y *��

�����'������������)�F�

!��(� 28 ���5�#���!�*�������'���(� ���(�F,�&�0��,"���4�=���) �'��,���

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ��������(�"�#��2�F���(� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+��

!��(� 29 ���5�#���!�*�������'���(� ���(�F,�&�0��,"���4�=���) �'��,���

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ��������(�"�#��2�F���(� 25

����V��V(0��3���� 1 0��, �

S1 S2 S3 S4

S1 S2 S3 S4

Page 90: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

68

!��(� 30 ���5�#���!�*�������'���(� ���(�F,�&�0��,"���4�=���) �'��,���

(S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ��������(�"�#��2�F���(�0!�#��)�

0

20

40

60

80

100

120

S1 S2 S3 S4

Formula

% C

ream

ing

initial 7 days temperature cycling

!��(� 31 ��^"0,����0��������# �)�'��,*��0��,"���4�=�� (S1 : POS, S2 : PGO, S3 :

SLS "�# S4 : PLX) �)���������*�������'��

S1 S2 S3 S4

Page 91: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

69

1.1.1.2 ,����6��3���3����&�,���"����3����#3�8�����

*�,*�� ,�-.����(=�+,����)����0�����*�������'�� �')�

���5�#���!� ����)�'� ��������*�������'�� ��3���� (Kim and Kim 2003 : 2295 �

2301) ���&��(-"�������#�����'�0. ������.F��'���3�=���!����0. ���')���� *�,*��

,�-.���&#�(=�+,����)���T)�'�-�,�� *�,*�� ,�-.����(���2���+,�G�#��')���+�

�����(=��������-��(�=��*�� ,�-.����)����(�0)�=��)���T)�'�-�+,��� (Pal, Tak and Song

2007 : 1712�1720) ,����-����4�5=�*���I&&��)�Y�(��(=��)�*�,*�� ,�-.���&4��(

���0.��1 ������&����-��(-F,��(���4�5=�*��'��,*��0��,"���4�=���)�*�,*�� ,

�-.���,��"0,���!��(� 32-33

=����4�5���)������'�0��,"���4�=�������)� POS, SLS "�#

PLX 0)�=�� ������'���(����(�F,��(*�,�)��*��� 1)�6)��')��F�����"�#0��H� 2����!�

*�� ,�-.���F,��)�'�,�&�+,�����&�������� +,�(*�,�G�(��(���,+,���������,*�,���!�

��)��� 1.766, 2.699 "�# 1.779 F�+������ ���.,�� ��*�#�(�0��,"���4�=�������)� PGO

0��H���(������'���(��(*�,���!���2������#,���+����� (!�H),�������&��������

� 2����!�*�� ,�-.���F�)'�,�&� ������&��(*�,���!��(���2�����*(,&.��,*��������(��'�

��#�������(���������F ����!��)���,��2�&����������F �"�������(��.� ���)�

��H)!�) ������.F���,*�,+,�'����������,*�,���!�&#�(*�,�6)��')�� 151 H4� 196

�+����� V4��"0,�� �� 2��) PGO ��3�0��,"���4�=���(�� �#0��(�0�,�������(��+�

�����'��0. ����#���(���#���,��06���.���,����)�

Page 92: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

70

S1 S2

S3 S4

!��(� 32 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4 '��, (S1 :

POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* = 100x)

��0)��=����,0����������! �������2��(���� !6�� ���

"�#0!�#��)��)�*�,*�� ,�-.���F,�"0,�F����!��(� 33 &����4�5���)*�,*�� ,

�-.���*�������'���("��+���F�)"���)��)�'�,�&��������2� �����06���(��'� SLS *�,*�� ,

�-.����("��+����(��������*4-���2���� 0�,��������=����5�#���!���!��(� 31 V4���(

������V2�����(��,���)�'�,�&� �������2�V4���)&#���,&�*�, ,�-.����(�+�*4-��.� ����,��

"�*��'�-���(��������*4-� 0. ������'� PGO ��3�0�')��,"���4�=����-���=��(��)0��&���

*�,*�� ,�-.��������6)��')���+�����H4�"���)H6���2��(�0!�#��)�

+,����"����#�������'����3��#���(�F�)�(����������

��� ����� (thermodynamic stable) ��)������3��#���(�F�)����� ,�-.���*�,��2��("��+���

���,�����������������,��������-�=�� (Sadurní et al. 2005 : 438-445) 0��,"���4�=����3�

Page 93: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

71

������#����(�0.��1�(�')��������������*���#��,����)�������&�0�'��,�(-�(+���0���*��

+�������(���#���,����-�0)���(��#����-."�#��F*���F,�,( �.� �0��H�*�F��6)�# �)�

��-�=��*���-.���"�#�-. ������,"���4�=��"�#��������-�=�� ���H4����,��3�'�-��(� ��� ��[!�!��

�������F�)� ����,��������*�� ,�-.��� +,0��,"���4�=����'��,�(��#&��(�')��0���"��

=���V4��0)�=�� ���������*���#�������'��,(*4-� (Corrigan and Healy 2002 : 2639-2653 ;

Gullapalli and Sheth 1999 : 233-238) �����4�5���-��(-�(���'�0��,"���4�=����-������)��(�F�)�(

��#&�F,�"�) POS, PGO "�# PLX "�#�(���'� SLS V4����3�0��,"���4�=���(��(��#&� ���4�5

���) SLS �(���������)��*�������-�Y�(��(��#&�V4������������������&� electrostatic

repulsion (Quan, Khoe and Bagster 2001 : 478-484) �)�F��2�������4�5���-��(-���)���'�

0��,"���4�=�������)�F�)�(��#&�+,�G�#���'�0�����)� PGO ����F,�=����������(�,(��)

�����(�(-��3�F�F,��) sodium laury sulfate �&�(+���0����(��*����F,�F�),(�����z!��-.����.� �

4,��#�(�=��*�� ,�-.���F,�F�),(���0)�=�� �F�)0��H��������������� ,�-.���F,� ��*�#

�(� PGO �)&#�(+���0����(��*����F,�,(�����z��-.����(��'�����) ��#�������(+���0����(���3�

0+V)�(����������3�������� steric hindrance ')��������F�)� ����,�����������*�� ,

�-.���0)�=�� ��(*�, ,�-.����(���2�"�#���������(����(�0�,,����)�

2.699

0.193

1.780

1.766

2.583

0.151

1.237

1.009

0.196

2.732

4.026

2.828

0.000

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

3.000

3.500

4.000

4.500

5.000

5.500

6.000

S1 S2 S3 S4Formula

Dro

ple

t si

ze (

mic

ron

)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 33 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4 '��, (S1 : POS,

S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)�

Page 94: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

72

1.1.1.3 ,����6��3���3����&�,���"��"�4��7�*�����6�#�����#3�8�����

�)V(��+�����'(� �������F^^��(�"���)��# �)�'�-��(���,���=��

*�����!� (stationary layer) ����������(��'� (dispersion medium) ��3����'(-��,�(���(��*������

��������*�����!�+,�G�#���!��(��(*�,��2����#,���+����� ���!��(��(�)V(��+����

�'(�06���*4-��(=��.� ����,��=������*�����!��(��(��#&��,(���� �.� �+��0�(����!��'�

"�#����������("��+������,F,����*4-� (Jeong, Oh and Kim 2001 : 247-253) �����'��

+,�G�#�+������'���(���#���,�� ,�-.����(��(*�,��2� ,����-�����,�)V(��+�����'(�&4�

')������������[��������-�=�� ���H4����.F��'�������(�������������������F,�

=����,0���)V(��+�����'(�*�������'���(����(�F,�+,�'�0��,"���4�=���)����F,�"0,�

F����!��(� 34 &����4�5���) ���'�0��,"���4�=��������)�� ��)V(��+�����'(���3���

��-� �, +,���'� SLS �(�)�����3������(�0�,V4��0�,��������+���0���*�� SLS�(��(��#&�

��&� �6) sulfate ,����-� �� )� ��� ,�-.���,�� SLS&4�0)�=�� �� ��(�)��3������(�0�,

,����)� "�)�)�F��2��=��(�F,�F�)F,�0�,�������������������!�,���(�"0,��� ��*��

1.1.1.1 ,���(�F,���)��"����)V(��+�����'(��(���*4-� ���!�*�� ,�-.����������������F,�

�*4-� �����������!��)&#,(��) �����(�(-��3�F�F,��)�&�(�I&&������(��(=��)������

�������)��#&��(���-�=���(��.� ����!�=������ +,�I&&��(���3�F�F,��&��(��*���������

0��6��� ������"*2�"��*��'�-�*��0��,"���4�=���(� ��� ,�-.���F��,���(�F,���)�F��"��� ��

���(�(-0��,"���4�=�������)�F�)�(��#&� �)&#���,�� )� ��� ,�-.���F,�0��6���"�#"*2�"��

����) ���&��(-"�����������(���(������������!�*��0��,"���4�=�������)�F�)�(

��#&���-� 3 ����(��'�&#� 2�F,��)�)V(��+�����'(��(�)��(����.,��,���(- PGO > PLX > POS V4��

0�,�������������������!�,�� =��(�F,�"0,�� �� 2��) PGO �(�� )� ��� ,�-.���F,�

���(�0�, ( ,�-.�����#���,���-.���H���� ����V4���(��#&���3��� ,����-��� )� ���,��0��,

"���4�=���(=��.� � ,�-.���"0,������3��������)

Page 95: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

73

-90

-80

-70

-60

-50

-40

-30

-20

-10

0

S1 S2 S3 S4Formula

Zet

a p

ote

nti

al (

mV

)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 34 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4

'��, (S1 : POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�"�#��2�F���(�

��� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#

��)�

1.1.1.4 ,����6��3���3����&�,���"��"�����������3-3"����������6��

�)�����3���,-,)� ��3����'(-��,�(���(��*���������.�����'��F�

�'���=6����+!� +,�G�#���.F��'������T)�'�-����������� +,�����.�4�H4��)�����3�

��,-,)�!��')���� V4���(�) pH �6)��')�� 6.2-7.4 (Aframian, Davidowitz and Benoliel 2006 :

420-423) *�#�(��'�-� S. mutans �(���3��'�-��)�+��^I�=�0��H�&��1����+�F,�,(��0!�#��3���,

(��( �H(�F��� 2550 : 97-104) ,����-� �����'���(����(�F,�����(�)�����3���,-,)��(���3�����6)

��')�� 6.2-7.4 =����,0���)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�+,�'�0��,"���4�=��

�)����F,�"0,�F����!��(� 35 &����4�5���) ���'�0��,"���4�=�������)� PGO, SLS "�#

PLX � ��)�����3���,-,)���3� 6.30, 7.12 "�# 6.85 ���.,�� V4����3��)�����3���,-,)��(�

� �#0��)����.��'���')����,���(���)�*����� ��*�#�(�0��,"���4�=�������)� POS � �

�)�����3���,-,)���3� 3.58 V4����3�0!�#�(���3���,�� &4��&0)�=��)����&��1*���'�-�

S. mutans F,� "�#������.���4�5�)�+,��,�)�����3���,-,)�! �������2��(���� !6�� ���

"�#0!�#��)� ���) �)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=��������)��(

�)���(� F�)���,�����(��"��� ,����-�������.=�*����������"�#*�,*�� ,�-.���*��

�����'�����&���)��,�� ���) 0��,"���4�=�������)� PGO ��3�0�')��,"���4�=���(�

Page 96: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

74

�)0��& ��� � ��)�����3���,-,)��(�� �#0��)������(������'��������'�����T)�'�-��)�+��

�����������)�F�

0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

7.00

8.00

S1 S2 S3 S4

Formula

pH

initial 7 days temperature cycling

!��(� 35 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�� 4 '��, (S1 :

POS, S2 : PGO, S3 : SLS "�# S4 : PLX) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)�

1.1.2 ,���������)���3����&�,���"��!)�������������6��

&����4�5�(�=)�� ���) 0��,"���4�=���(�� �#0������.��'�

���(������'����� PGO ������&�0��H���(������'���(��(�������� �(*�,���!���2���')��

�+�����"�#*�,������(�������,����2����5 ���H4��(�)�����3���,,)��6)��')�� 6.2-

7.4 &4�������. PGO ��4�5�)���������=�*�������0��,"���4�=���(��(�)����0������)�Y *��

�����'��+,�'� PGO ���������-�"�) 1, 2.5, 5, 7.5 "�# 10 % +,�-. ���

1.1.2.1 ,���������)���3����&�,���"����')������#���

!��(� 36 "0,�=����(���(����5�#���!�*�������'��

�)���.F��,0����������+,�(�����(���(����'�0��,"���4�=�������)� PGO �����

�)�Y F,�"�) 1, 2.5, 5, 7.5 "�# 10 %+,�-. ��� ���)���'�0��,"���4�=�����)� PGO F,�

�����'���(��(���5�#���!��(�,( +,�(���5�#*�)�*���3����-��,(�������,�����'���(����(� F�)

Page 97: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

75

�("��+��������,"�'�-� ���"���(� H4�"���)&#�'�0��,"���4�=����������(��)��*�����H4�

�#,�� 1% +,�-. ��� "0,�� �� 2�H4�"��+���*�����������(�,(*��0������)� PGO

�������3����4�5�����������(���(���������� &4�F,��.����2�

����)������'��F����-��(���� !6�� ���"�#����2���0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45

����V��V(0 ,��"0,���!��(� 37-38 =����4�5���)���5�#���!�*�������'���(�

���(�F,�&����'�0��,"���4�=�������)� PGO ������)���� F�)�(���"���)����'�,�&� +,

F�)���,��"�*����(�"�#�(������V2�����(���)��� 100 ��-� ��������(�"�#��2�F���(� 25 ���

�V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, � "�# ���&���2�F���(�0!�#��)�����(���� !6�� 4 ���

�V��V(00��������� !6�� 45 ����V��V(0 &.��� 6 ��� ,��"0,���!��(� 39 V4����3�������

=����������(�,(*��0������)��(-

,���(���)��*������)0��,"���4�=��&#')��������,�����'��

+,���[���"����6)�(�������=����#&�� (interface) �# �)�'�-�*��F*���"�#�-. �����0��,

"���4�=���(�����&#')� )� ��� ,�-.���F��F,��)�0��6���"�#�������F�)� ����,��������*��

,�-.��� (Baret et al. 2009 : 6088�6093) �����(�(-��3�F�F,��)0������)� PGO �)&#�(

+���0����(�� �#0�"�#�*����F,�,(�����[!��-.����(��'�&4��.� ����,�� )� ��� ,�-.���"�#

���������������*�� ,�-.���F,�,("��&#�'���������(��)��*����.V4��=��(�F,�0�,��������

���4�5�� ��*�� 1.1.1.1

Page 98: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

76

!��(� 36 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO �����

�)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) �����

���(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��

!��(� 37 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO �����

�)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) �����

���(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 1 0��, �

C1 C2 C3 C4 C5

C1 C2 C3 C4 C5

Page 99: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

77

!��(� 38 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO �����

�)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) �����

���(�"�#��2�F���(�0!�#��)�

0

20

40

60

80

100

120

C1 C2 C3 C4 C5

Formula

% C

ream

ing

initial 7 days temperature cycling

!��(� 39 ��^"0,����0��������# �)������*�� PGO (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 :

7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) �)���������*�������'��

C1 C2 C3 C4 C5

Page 100: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

78

1.1.2.2 ,���������)���3����&�,���"����3����#3�8�����

&��(���)��*������)*�,*�� ,�-.����(=�+,����)�

���0�����*��"�#�(=�+,����)���T)�'�-��)��,�� ���&��(-"���H4�"���)���5�#���!�

!���&#�(���5�#� ������� "�)���0������������F�H4�*�,*�� ,�-.����&�(���"���)�

���F,� ������&����-��(-&4�F,��(���4�5=�*�������*��0��,"���4�=���)�*�,*�� ,

�-.����)��,��,��"0,���!��(� 40-41

=����4�5���)������'�0��,"���4�=�������)� PGO ����� 1

"�# 2.5 %+,�-. ��� 0)�=�� ������'���(����(�F,��(*�, ,�-.����)��*��� 1)�6)��')��

F�����"�#0��H� 2����!�*�� ,�-.���F,��)�'�,�&�+,�����&�������� +,�(*�,

�G�(��(���,+,���������,*�,���!���)��� 2.163 "�# 0.795 F�+������ ���.,�� ��*�#�(�

����� 5, 7.5 "�# 10 %+,�-. ��� 0��H���(������'���(��(*�,���!���2������#,���

+����� (!�H),�������&��������� 2����!�*�� ,�-.���F�)'�,�&� ������&��(*�,

���!��(���2�����*(,&.��,*��������(��'���#�������(���������F ����!��)���,��2�&���

�������F �"�������(��.� ���)���H)!�) ������.F���,*�,+,�'����������,*�,

���!�&#�(*�,�6)��')�� 111 H4� 233 �+����� =����,0��,����)�"0,�� �� 2��)�����

0��,"���4�=���(=��)�*�,*�� ,�-.����)�'�,�&� �#,��0��,"���4�=������������

��) 5% +,�-. ��� �����0��,"���4�=��&#F�)����(����)��� ��� ,�-.������#,���

+�����V4���(��-��(�=��&.�����F,� V4��=����,���&#0�,�����������*�� Tchlakova "�#

��# (2004) V4�����)������������0��,"���4�=��&#')� )� ��� ,�-.���F��F,��)�0��6���

"�#�������F�)� ����,��������*�� ,�-.���0)�=�� �*�, ,�-.���*�������'���("��+���

�,�� ������.���4�5�)�+,��2�����)������'��F����-��(���� !6�� ���"�#����2���0!�#��)�

+,��0������ !6���(� 4 "�# 45 ����V��V(0 ,��"0,���!��(� 41 =����4�5���) *�,

*�� ,�-.����(*�,F�)���(��"�������� 06���(��( PGO ���#,����-�"�) 2.5% +,�-. ������(

*�,*�� ,�-.����6)��')���+�����"�#F�)�("��+����������*4-�*��*�, ,�-.���'�,�&�

(�����(*�� PGO �#,�� 10% +,�-. ��� �����2��(�0!�#��)����)�(*�,*�����!�� 1)*4-�

�����(�(-*�,���!�F�)F,����,&�*�,*�� ,�-.����(�+�*4-� "�)���,&������������*��

PGO �(���������)�(�&# ��� ,�-.���F,� �, ���,�������������3����!�*�,��2� �.� ���,

*�,*�����!�+,���F,�+�*4-� V4������=�,�������&���������(������5�#�0���*�,��2�

��*�#�(� ,�-.������(*�,��2��6)��')���+�����)

Page 101: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

79

C1 C2

C3 C4

C5

!��(� 40 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=�����)� PGO

������)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���)

��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* =

100x)

Page 102: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

80

2.163

0.795

0.233

0.132

0.114

1.649

0.214

0.136

0.111

1.800

0.665

0.230

0.184

0.434

0.677

0.000

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

3.000

3.500

C1 C2 C3 C4 C5

Formula

Dro

ple

t si

ze (

mic

ron

)initial 7 days temperature cycling

!��(� 41 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&����'� PGO ������)���� (C1 : 1%,

C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) ! ��������(�"�#��2�

F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�

0!�#��)�

&�=����,0��,����)�&4�F,��.�������06���.����(��( PGO

���#,�� 5% +,�-. ��������4�5�I&&������)�F� ������&����'����#,����.�&�.� ���

06���.����(���#���,���-.��� ���0��,"���4�=�������0(��������F,�V4���.� ���)���

���(���(� ���F�H4����'�0��,"���4�=�����#,����.��-�&#�(=��)�*�,*�� ,�-.����(�+�

*4-��)��,�� ���&��(-���'����#,��������F� �.� �� ���0��,"���4�=���(�F�)F,��.F��'���

�� ��� ,�-.��� V4���&���,�����������"�#�.� �=��(�F,����,*��=�,��,F,�

1.1.2.3 ,���������)���3����&�,���"��"�4��7�*�����6�#�����#3

�8�����

,���(�F,�����F���� ��*�� 1.1.1.3 �)V(��+�����'(���3����'(-��,�(�

"0,�H4���#&��(�=��*�� ,�-.��� �����4�5���-��(-�(������������0��,"���4�=��V4���)&#�(

=��)��� )� ����(�=��*�� ,�-.������(��"���F�,�� ������������0��,"���4�=������.� �

,�-.���H���� ����H6� )� �����*4-�V4���)&#�.� ��)V(��+�����'(��(�����3�������� �����

��3����4�5=�*�������0��,"���4�=���)����[������-�=����������� &4�F,��.����,V(��

+�����'(�*���.��������'���(���#���,�� PGO ��������)���� ,��"0,���!��(� 42 &�

Page 103: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

81

���4�5���) ���'�0��,"���4�=�����)� PGO �(�������)�Y � ��)V(��+�����'(���3���

��-� �, ������������0��,"���4�=���("��+����.� ��)V(��+�����'(��(�)�����3���

����� +,�(��#,��0��,"���4�=�� 2.5 % +,�-. ���&#F,�=��(�"���)����F���)�����(�)

V(��+�����'(���3�����*4-��������(���� 1% +,�-. ���

-50

-40

-30

-20

-10

0

C1 C2 C3 C4 C5Formula

Zet

a p

ote

ntia

l (m

V)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 42 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�F,�&����'� PGO �����

�)���� (C1 : 1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) ! ���

�����(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� "�# 1 0��, �"�#

�������2��(�0!�#��)�

+,����F�"����������0��,"���4�=���(=�+,����)��� ����(�=��

,�-.��� ��)�������������������0��,"���4�=����*4-� �.� ����,�������(�=��*�� ,�-.���

V4���)&#�(=��.� ��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���H���� �����(�����3�������� "�)�)�F��2

�������4�5���-��(-&#�(��&�,�(�F,�=�F�)0�,����� V4��"0,�� �� 2��)�)&#�(�I&&������)��,��

�(�0)�=��)������(��"�����#&��(���-�=�� �������&��H4�*�,*�� ,�-.�����#���,�� (!��(�

40) &#� 2�F,��) ������� PGO &#0)�=�� �*�,*�� ,�-.�����2���,�� +,*�,&#�,���)�

'�,�&�����������&� 1% ��3� 2.5% +,�-. ��� ,����-���-��(�=��*�� ,�-.���&#�(�������*4-��)�

��,��2�0)�=�� �0��,"���4�=��F�)0��H����=��*�� ,�-.���F,��)�0��6���0)�=�� ��)V(��

+�����'(��(�����3�����*4-� "�)�)�F��2������������ PGO ���#,������) 2.5% +,

Page 104: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

82

�-. ��� ,�-.���&#�6)��')���+�����"�#F�)�(*�,�(��,���)�'�,�&� &4��.� �� 2�

���0��������# �)������0��,"���4�=�����V(��+�����'(�'�,�&�*4-�

1.1.2.4 ,���������)���3����&�,���"��"�����������3-3"�����

�����6��

=����,0���)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�+,�'�

0��,"���4�=�����)� PGO �(�������)����,��"0,�F����!��(� 43 &����4�5���) ���'�0�

�,"���4�=�����)� PGO ������� 1, 2.5 "�# 5%+,�-. ��� � ��)�����3���,-,)���3� 7.04,

6.67 "�# 6.37 ���.,�� V4����3��)�����3���,-,)��(�� �#0��)����.��'���')����,���(�

��)�*����� ��*�#�(�0��,"���4�=������� 7.5 "�# 10%+,�-. ���� ��)�����3���,-,)�

��3� 5.68 "�# 5.65 ���.,�� V4�� ��3�0!�#�(���3���, &4��&0)�=��)����&��1*���'�-� S. mutans

F,� "�#������.���4�5�)�+,��,�)�����3���,-,)�! �������2��(���� !6�� ���"�#0!�#

��)� ���) �)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=��������)��(�)���(� F�)���,

�����(��"��� ,����-�������.=�*���������� *�,*�� ,�-.���*�������'�� "�#�)V(��

+�����'(����&���)��,�� ���) 0��,"���4�=�����)� PGO �(������ 5% +,�-. �����3�

������(�� �#0� �)������(������'��������'�����T)�'�-��)�+�������������)�F�

0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

7.00

8.00

9.00

C1 C2 C3 C4 C5

Formula

pH

initial 7 days temperature cycling

!��(� 43 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&����'� PGO ������)���� (C1 :

1%, C2 : 2.5%, C3 : 5%, C4 : 7.5% "�# C5 : 10 %+,�-. ���) ! ��������(�"�#

��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�

0!�#��)�

Page 105: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

83

1.2 ,�����8������"�������3�����6��

�����4�5�(�=)���� ��*�� 1.1 ��-�&#��3����,0��=�*��0��,"���4�=��

+,�'��-.���H���� ������(�'��,�,(���3����"��*�����4�5 "�)�)�F��2��'��,"�#�����

*���-.����(0)��0.��1�����. �,���0�����*�������'��"�#��3�����. �,���0���������

���-��'�-�"���(��(�)� Y (Nakatsu et al. 2000 : 571-631 ; Bakkali et al. 2008 : 446-475) ��#���

�������W����-��(-�(�����)� ��(�&#�.�����'���(�F,�F���3�0)����#���*��=���!����0�*!�

0. ���')����&4�F,��.���4�5=�*���-.����)��,�� +,������'��-.��� ���#� 6 '��,�(��(

$���%���-��'�-�"���(��( �(������,!�"�#�(�0'���(�,(+,�����G�#�-.��� ���#� �(��(���'�

��=���!����0. ���')������� �-.�������6 �-.���0��J������� �-.���������������� �-.���

��������� �-.���6������0 "�#�-.����(��(��'��������(������'�� ���&��(-"������(

���4�5=�*�����'��-.��� ���#� ��0�,0)���)����+,�'��)������-.���H���� ���� +,�.

����#�������(���(����0�����*�������'���(����(�F,� ��-�,�������&0��,������)���F�

H4����'�����������'��,�)� Y �����,0�� �')� *�,*�� ,�-.��� V(��+�����'(� ��"�

'�-� (cracking) �����,��(� (creaming) ��� ��, �)�����3���,,)� ��3���� +,�(���,0��

����(�(����(�"�#��#����=� �����2�F���(�0!�#��)�

1.2.1 ,����6��3�8������������#�"��!)�������������6��

1.2.1.1 ,����6��3�8������������#�"����')������#�����������6��

!��(� 44 "0,�=����(���(����5�#���!�*�������'��

�)���.F��,0����������+,�(�����(���(����'��-.��� ���#� �����)��)����F,�"�)

�-.�������6 (V1), �-.���0��J������� (V2), �-.���������������� (V3), �-.������������ (V4),

�-.���6������0 (V5) "�# �-.����(��( (V6) V4�����)���'��-.�������6���,��"�'�-�*��

�-.��� (cracking) ���'��-.��� ���#� ���)� �-.���0��J������� �-.���������������� �-.���

��������� "�#�-.����(��(���,��"�0)�������'���(��(0(*��*��"�#0(*��)���)�'�,�&�

(creaming) ��*�#�(��-.���6������0F,������'���(��(���5�#��3����-��,(�������, "0,�� �� 2��)

���'��-.��� ���#� ��3�������#�������[!��-.����("��+����(�&#F,������'���(��(��������

���!���� +,�-.�������6�("��+������������(�F�),(���(�0�,

�������3����4�5�����������(���(���������� &4�F,��.����2�

����)������'��F����-��(���� !6�� ���"�#����2���0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45

����V��V(0 ,��"0,���!��(� 45-46 =����4�5���)'��,�-.��� ���#� �(=��)������

���*�������'����)���� ������'��-.�������6 �-.���0��J������� �-.���������������� �-.���

Page 106: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

84

��������� "�#�-.����(��(F,��.��������'���(��(��������F�),( 0�����F,�&���"�*��'�-���(�

+,�("��+����)������V2�����(��,�� ������4�5�������� +,�G�#�����(������'��&�

�-.�������6 ���,��"�'�-�*���-.����)�'�,�&� �������2�F���(���� !6�� �����3���� 1 0��, �

"�#�������2���0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45 ����V��V(0 ��*�#�(��.��������'���(�

��#���,���-.���6������0F�)���,��"�*����(�+,�(������V2�����(���)��� 100 ��-� �����

���(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, � "�# ���&���2�F���(�

0!�#��)�����(���� !6�� 4 ����V��V(00��������� !6�� 45 ����V��V(0 &.��� 6 ��� ,��

"0,���!��(� 47 V4����3�������=����������(�,(��)*���-.��� ���#� �����)� ����(-

������&��-.��� ���#� ��3�0�0��,�(�F,�&�����'�� ,����-�

&4��(0)����#��������(�(� �� � +,0�0.��1�(��������-.��� ���#� ��3�0���

���)� terpenes "�# phenols V4���(��� �"�)���. 0��H�#� F,��) ,����-������(������'��

+,�'��-.��� ���#� &4��(�������������)�����(�+,�'��-.���H���� ���� ,��"0,���

��*�� 1.1.1 "�)�)�F��2��������&��-.��� ���#� �(����)0��&�����0�������T)�'�-��(�,(

&4�F,��.���4�5H4��I&&������(��(=��.� ��-.��� ���#� ���6������'���(����������*4-� �')�

+,��=0��)������-.���H���� ����V4��&#��)�����#��(,������)�F�

!��(� 44 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y (V1 : �-.���

����6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 :

�-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0

��3���� 24 '���+��

V1 V2 V3 V4 V5 V6

Page 107: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

85

!��(� 45 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y (V1 : �-.���

����6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 :

�-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0

��3���� 1 0��, �

!��(� 46 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y (V1 : �-.���

����6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 :

�-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(�0!�#��)�

V1 V2 V3 V4 V5 V6

V1 V2 V3 V4 V5 V6

Page 108: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

86

0

20

40

60

80

100

120

V1 V2 V3 V4 V5 V6

Formula

% C

ream

ing

initial 7 days temperature cycling

!��(� 47 ��^"0,����0��������# �)��-.��� ���#� '��,�)�Y (V1 : �-.�������6,

V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 : �-.���

6������0 "�# V6 : �-.����(��() �)���������*�������'��

�� �� * ���,��"�'�-�"�� cracking

1.2.1.2 ,����6��3�8������������#�"����3����#3�8�����

=����4�5���)���'��-.��� ���#� ���'��, F,�"�) �-.���

����6 �-.���0��J������� �-.���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#�-.���

�(��( 0)�=�� ������'���(����(�F,��(*�,�)��*��� 1)�6)��')��F�����"�#0��H� 2����!�

*�� ,�-.���F,��)�'�,�&�+,�����&�������� ,��"0,���!��(� 48 ���5�#*�� ,�-.����(�

���(�F,�&��-.��� ���#� &#�)��*��"���)���� +,��06���(��'��-.�������6�(���5�# ,

�-.������"�#"���������3� ,�,(���(�"����'�,�&� ��*�#�(�06������&#�(���5�#������� �

�����'�� (multiple emulsion) +,*�,�G�(��(���,+,���������,*�,���!���)��� 4.715, 3.581,

4.526, 8.849, 41.273 "�# 3.089 F�+������ 0. ����-.�������6 �-.���0��J������� �-.���

������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#�-.����(��(���.,�� =��(�F,�"0,�� �� 2�

�)���0�����*���-.��� ���#� �(�"���)�����(=��)�F,����5�#"�#*�,*�� ,�-.����)��

,��

*

* *

Page 109: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

87

V1 V2

V3 V4

V5 V6

!��(� 48 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.���

���������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(�

��� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* = 100x)

Page 110: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

88

!��(� 49 "0,�*�,*�� ,�-.���! �����2�����)������'��

F���(���� !6�� ���"�#0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45 ����V��V(0 =����,���

���)*�, ,�-.����("��+���� 1)*4-���06���(��(���'��-.�������6V4���)��*��0�,��������

�����������!��(�"0,�F���� ��*�� 1.2.1.1 ��*�#�(����'��-.��� ���#� �(�� ������

�-.���0��J������� �-.���������������� �-.������������ "�#�-.����(��(�(*�,���!��)��*��

���(��������2�F���(���� !6�� ���"�#����2���0!�#��)�

4.715

3.58

14.

526

8.84

9

3.089

15.6

21

2.24

0 4.65

6 8.64

8

2.630

1.97

0 4.95

55.7

39

41.273

15.243

4.39

1

20.1

34

20.3

65

0.00

4.00

8.00

12.00

16.00

20.00

24.00

28.00

32.00

36.00

40.00

44.00

48.00

52.00

56.00

60.00

64.00

68.00

V1 V2 V3 V4 V5 V6

Formula

Dro

ple

t siz

e (m

icro

n).

initial 7 days temperature cycling

!��(� 49 "0,�*�, ,�-. ���*�������'���(� ���(�F,�&��-. ��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.���

���������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(�

��� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#

��)�

1.2.1.3 ,����6��3�8������������#�"��"�������/3��������6��

�� � ��, ��3 ���� 0 � �� ���(� 0. �� 1*���� �� �'� � ���#��

���(��"������ ��,*�������'��������&�0� ���,�2�� &#0)�=��)����!�"�#��������

,�� "�#���(=��)�����6�04�*��=6��'�=���!������-� �')� ����)�'���H�� ��3���� =����4�5���)

���'��-.��� ���#� F,�"�) �-.���0��J������� �-.���������������� �-.������������ "�#

Page 111: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

89

�-.����(��( F,������'���(��(��� ��,��.�6)��')�� 3.84 H4� 4.37 cps ��*�#�(�06���(��(0)��=0�*��

�-.�������6�(��� ��,��3� 49.92 cps V4���&��3���� ��,*���-.�������6�(�"�����

��-�"�)���V4���(��� ��,����)�-.��� ���#� '��,���� 0)��06���(��(0)��=0�*���-.���

6������0���)�(��� ��,06��(�0�,��3� 503.68 cps ,��"0,���!��(� 50 V4��=�,����)�"0,�� �

� 2��)�����������!��(�,(*��06���.����(���#���,���-.���6������0�(�"0,���!��(�

47 ��-����,&���� ��,�(���������� ��� ��,�(����(=��.� � ,�-.������,�����������F,�

�*4-� (Sjoblom 2006 : 248) 0)�=��.� �06���.���,����)��(�)������V2�����(�06�0�,"�#F�)�)�

���(��"���! �������2� "�)�)�F��2��06���(���#���,���-.���6������0��-�&#��3�06���(�

�(��� ��,������F� ��#���,��*�, ,�-.����(��(*�,� 1) &4�F�)F,������06���(-�����

�.���4�5�)�F�

49.92

3.843.844.373.84

503.68

0.00

50.00

100.00

150.00

200.00

250.00

300.00

350.00

400.00

450.00

500.00

550.00

600.00

V1 V2 V3 V4 V5 V6

Formula

Vis

cosi

ty (

cps)

!��(� 50 "0,��)��� ��,*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y (V1 : �-.���

����6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 :

�-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��()

1.2.1.4 ,����6��3�8������������#�"��"�4��7�*�����6�#�����#3

�8�����

=����,0���)V(��+�����'(�*�������'���(����(�F,�+,�'�

�-.��� ���#� �)����F,�"0,�F����!��(� 51 &����4�5���) �)V(��+�����'(�*���-.���

Page 112: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

90

���#� "�)�#'��,�(�)�)��*��"���)������ H4�"���)���06���.���&#� ��)V(��+����'(�

��3��� "0,�� �� 2��)���0�����*���-.��� ���#� &#�(=��)��*�����)���#&��(���-�=��*��

,�-.��� ������#������-.��� ���#� "�)�#'��,�(��(0���#����(�"���)����F��)&#�(=�

+,����)��)V(��+�����'(�,����)�

0. ���=�*������2��)��)V(��+�����'(���-�&#�(���"���)�

���F�*4-����'��,*���-.��� ���#� �(��'��')��,(���� �������2��(�0!�#��)�06���(��'��-.���

���#� �'��, �')� �-.���0��J������� �-.������������ "�#�-.����(��( �("��+����)V(��

+�����'(��������*4-�V4��0�,�������������������!��(��,�� �����(�(-��3�F�F,��)

���&������'��������0(�������� 0��,"���4�=�� )� ��� ,�-.���F,�0��6���������0)�=�� ��(

�)V(��+�����'(���*4-� "�)�)�F��2���2�(06���.����(���#����-.��� ���#� ��'��,�(�)

V(��+�����'(��,�� �')� �-.���������������� "�# �-.���6������0 �����(�(-�)&#�(�I&&������(�

"���)����F��(��. �,�)V(��+�����'(��)��,�� �(����������4�5�)�F�

-70

-60

-50

-40

-30

-20

-10

0

V1 V2 V3 V4 V5 V6Formula

Zet

a p

ote

nti

al (

mV

)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 51 "0,��)V(��+�����'(�*�������'���(� ���(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.���

���������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ! ��������(�"�#��2�F��

�(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#

��)�

Page 113: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

91

1.2.1.5 ,����6��3�8������������#�"��"�����������3-3"����������6��

=����,0���)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�

�-.��� ���#� �)�'��,��� ,��"0,�F����!��(� 52 &����4�5���) ���'��-.��� ���#�

�)�'��,����������(������'�� � ��)�����3���,-,)��6)��')�� 3.98-7.55 "�#�����

�.���4�5�)�+,��,�)�����3���,-,)�! �������2��(���� !6�� ���"�#0!�#��)� ���) �)

�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�0��,"���4�=��������)��(�)���(� F�)���,��

���(��"���

0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

7.00

8.00

9.00

V1 V2 V3 V4 V5 V6

Formula

pH

initial 7 days temperature cycling

!��(� 52 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

(V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������, V3 : �-.����������������, V4 : �-.���

���������, V5 : �-.���6������0 "�# V6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�F���(�

��� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#

��)�

1.2.2 ,�����3"���8�����$������/���"��!)�������������6������������

������37�#�8������������%����%

&����4�5�� ��*�� 1.2.1 ���) �����(������'���(���[!��-.���

��#���,���-.��� ���#� ��(��)��,(�0)�=�� ������'���(����(�F,��0(�������� �(*�,

���!��)��*��� 1) ��*�#�(������(�+,�'��-.���H���� �����.� �F,������'���(��(���������(�,(

Page 114: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

92

"�#�(*�, ,�-.�����2����#,���+����� ,��"0,��� ��*�� 1.1 ,����-������4�5���-��(-&4�F,�

�.���,0�����'��-.���H���� �����)������-.��� ���#� +,������'��-.������������������3�

���"�������4�5+,�.���4�5=�*�����'�0�,0)���# �)��-.���H���� ����"�#�-.������

�����������(��)�����)����0�����*�������'��,��&#F,���)�����#��(,�)�F�

1.2.2.1 ,�����3"���8�����$������/���"����')������#�����������6��

!��(� 53 "0,�=����(���(����5�#���!�*�������'��

�)���.F��,0����������+,�(�����(���(����'��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y F,�"�) 75:25 (06�� P1), 50:50 (06�� P2), 40:60 (06�� P3), 30:70

(06�� P4), 20:80 (06�� P5) "�# 10:90 (06�� P6) V4�����)���'��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)�� 30:70, 20:80 "�# 10:90 ���,��"�*��0)�������'���(��(0(*��*��"�#

*��)���)�'�,�&� ��*�#�(����'��-.���H���� �����)������-.��� ���#� ���)��-.�����������

�������0�,0)�� 75:25, 50:50 "�# 40:60 F,������'���(��(���5�#��3����-��,(�������,"0,�� �� 2�

H4�"��+���*�����������(�,( ������(0�,0)��*���-.���H���� �����������*4-�

0. ���=������������!�! �������2��(���� !6�� ���

"�# ����4�5��0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45 ����V��V(0 F,�"0,���!��(� 54-

55 ���.,�� =����4�5���)���'��-.���H���� �����)������-.������������������0�,0)���)�Y

�(=��)���������*�������'����)���� ������'��-.���H���� �����)������-.����������������0�,0)��

40:60, 30:70, 20:80 "�# 10:90 F,��.��������'���(��(��������F�),( 0�����F,�&���"�*��'�-�

��(� +,�("��+����)������V2�����(��,�� ������4�5���������(���� !6�� ��� "�#�������2�F��

�(�0!�#��)�����(���� !6�� 4 ����V��V(00��������� !6�� 45 ����V��V(0 &.��� 6 ���

��*�#�(��.��������'���(���#���,���-.���H���� �����)������-.������������������0�,0)�� 75:25

"�# 50:50 F�)���,��"�*����(�+,�(������V2�����(���)��� 100 ��-� ��������(�"�#��2�F���(�

25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, � "�# ���&���2�F���(�0!�#��)�����(���� !6�� 4

����V��V(00��������� !6�� 45 ����V��V(0 &.��� 6 ��� ,��"0,���!��(� 56 V4����3���

����=����������(�,(��)�����0�,0)���-.���H���� ������*4-�

&�=����!�,����)�"0,�� �� 2��) �-.���H���� �����(0)��

')������������������F,� +,�#,����.0�,�(�&#�.� ������������!��6)������������

F,�����(������-.���H���� �����)���� 50% +,�-. ��� ������������������!��)&#

���,������&��-.���H���� ������3��-.����(�0��H�*����F,� (miscible) ����-.����������������+,

0��H�#�"�#�6)�)�����F,��)�0��6��������0�,0)�� ��#�������(��� �"�)��(�

Page 115: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

93

�)��*��F�)"���)���� ��*�#�#�������'���(��'��-.���H���� �����(�����������!��(�06�

"�#�*����F,�,(���0��,"���4�=���(��'�,���(�F,�����F������� 1.1 &4�0��H��2�����-.���

��������������(��'��6)!��"�#�������������*���#�������'��+,���F,� H4�"���)&#F�)

0��H���5��������F�����#,���(������) 50 % +,�-. ����2�� V4��0�,�����������4�5

*�� Hsu "�# Nacu (2003) "�)�)�F��2��������&��-.��� ���#� �2�(���0.��1������3�

����. �,���0������������-��'�-�"���(��(�)�Y (Nakatsu et al. 2000 : 571-631 ; Bakkali et al.

2008 : 446-475) ��*�#�(��-.���H���� ����F�)�($���%����T)�'�-�+,��� ,����-����4�5&4�����

�.�4�H4���0)�����0��H����T)�'�-��)��,��V4��&#F,���)�������)�F�

!��(� 53 ���5�#���!�*�������'���(� ���(�F,�&��-. ���H��� � �����)������-. ���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70,

P5 ��� 20:80 "�#P6 ��� 10:90) ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0

��3���� 24 '���+��

P1 P2 P3 P4 P5 P6

Page 116: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

94

!��(� 54 ���5�#���!�*�������'���(� ���(�F,�&��-. ���H��� � �����)������-. ���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70,

P5 ��� 20:80 "�#P6 ��� 10:90) ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0

��3���� 1 0��, �

!��(� 55 ���5�#���!�*�������'���(� ���(�F,�&��-. ���H��� � �����)������-. ���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70,

P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ��������(�"�#��2�F���(�0!�#��)�

P1 P2 P3 P4 P5 P6

P1 P2 P3 P4 P5 P6

Page 117: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

95

0

20

40

60

80

100

120

P1 P2 P3 P4 P5 P6

Formula

% C

ream

ing

initial 7 days temperature cycling

!��(� 56 ��^"0,����0��������# �)������'���(� ���(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ���

30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) �)���������*�������'��

1.2.2.2 ,�����3"���8�����$������/���"����3����#3�8�����

&��(���)��*������)*�,*�� ,�-.����(=�+,����)�

���0�����*�������'�� (Kim and Kim 2003 : 2295-2301) "�#�(=�+,����)���T)�'�-��)��,��

(Pal et al. 2007 : 1712�1720) ������&������(������'��+,�'��-.��� ���#� �� ��*�� 1.2.1.2

� �*�,���!�� 1)��')��F�+������ ������&����-��(-F,��(���4�5=�*�����'��-.���H���

� �����)������-.������������������0�,0)�� 75:25, 50:50, 40:60, 30:70, 20:80 "�# 10:90 �)�

*�,*�� ,�-.���,��"0,���!��(� 57-58

= � � � �4 � 5 � � �) � ��� � � '� �-. �� � H�� � � �� � � �) � � �� � �-. �� �

���������������0�,0)�� 40:60, 30:70, 20:80 "�# 10:90 0)�=�� ������'���(����(�F,��(*�,

�)��*��� 1)�6)��')��F�����"�#0��H� 2����!�*�� ,�-.���F,��)�'�,�&�+,�����

&�������� +,�(*�,�G�(��(���,+,���������,*�,���!���)��� 0.678, 1.236, 2.918 "�# 3.056

F�+������ ���.,�� ��*�#�(�������'�0�,0)�� 75:25, 50:50 0��H���(������'���(��(*�,

���!���2������#,���+����� ������.F���,*�,+,�'����������,*�,���!�&#�(*�,�6)

��')�� 193-262 �+�����

Page 118: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

96

P1 P2

P3 P4

P5 P6

!��(� 57 !�H)+,�����&��������*�������'���(� ���(�F,�&��-.���H���� �����)�����

�-.������������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ���

30:70, P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* = 100x)

Page 119: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

97

V4��"0,�� �� 2��)���'��-.���H���� ������0�,0)����-�"�) 50%

+,�-. ���*4-�F�0��H�.� ��#�������'���(*�,�G�(�*�� ,�-.�����')���+�����F,� V4��

=��(�F,��)��*��0�,�����������5�#���!��(�����F���� ��*�� 1.2.2.1

0. ���=���������! �������2��(���� !6�� ���"�#0!�#

��)�F,�"0,������������!��(� 58 ���'��-.���H���� ������0�,0)����-�"�) 50% +,�-. ���*4-�F�

*�,*�����!�F�)�(�����(��"���'�,�&���-��(���� !6�� ���"�#0!�#��)� +,�(��#,�� 40%

+,�-. ����(*�,�����*4-���2���� "�)���#,���(������) 40% +,�-. ����(*�,���!��(�

�����*4-��)�'�,�&� =��(�F,��������������������*���#�������'��+,�'��-.���H���� ����

0.19

3

0.26

20.67

8

2.91

83.05

6

0.19

9

0.25

9 1.19

82.60

03.00

4

0.13

8

0.22

3 0.91

21.23

6 2.08

3

13.908

16.998

4.11

0

0.000

2.000

4.000

6.000

8.000

10.000

12.000

14.000

16.000

18.000

20.000

P1 P2 P3 P4 P5 P6

Formula

Dro

ple

t siz

e (m

icro

n)

.

initial 7 days temperature cycling

!��(� 58 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(� ���(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70,

P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)�

1.2.2.3 ,�����3"���8�����$������/���"��"�4��7�*�����6�#�

�)V(��+�����'(���3����'(-��,�(�"0,�H4���#&��(�=��*�� ,�-.���

,���(�F,�����F���� ��*�� 1.1.1.3 �����4�5���-��(-�(���4�5����0�,0)��*���-.���H���� ����

�)��-.����������������V4���.� �0�,0)��*����[!��-.����� ,�-.������(��"���F� �������3�

Page 120: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

98

���4�5=�,����)��)����[������-�=����������� &4�F,��.����,V(��+�����'(�*���.���

�����'���(���#���,���-.���H���� ����"�#�-.������������������0�,0)���)���� ,��"0,���!�

�(� 59 &����4�5���) ���'��-.���H���� �����)��-.������������������0�,0)���)���� � ��)

V(��+�����'(���3�����-� �, "�)�)�F��2��F�)�)������0��������(�'�,�&��# �)�0�,0)��

*���-.���H���� �����(������*4-��)��)V(��+�����'(� V4���&���,�������&����"���)�*���)V(��

+�����'(�*���-.���H���� ����"�#�-.����������������F�)"���)������ &�=����,�����

��*�� 1.1.1.3 &#���)�)V(��+�����'(�*�����'��-.���H���� ����'��,�,(��(�)��#�� -26

�����+���� ��*�#�(����'��-.����������������'��,�,(��(�)��#�� -20 �����+���� (=���

�,����(� 1.2.1.3) V4���.� �������.�=0����&4��&F�)�(=�'�,�&�����)��)V(��+�����'(� "�)

�)�F��2��=��(�F,������)�(��)��*�������*4-� ����,��F��������(�������'��-.����,(�� V4��

"0,�� �� 2��)�)&#�( ��I&&��)������(�0)�=���#���)��)V(��+�����'(� �����)��')�

*�,*�� ,�-.��� �� )� ���*��0��,"���4�=���(��&���(��"���F���������(��0�,0)��*��

�-.��� ��3����

-60

-50

-40

-30

-20

-10

0

P1 P2 P3 P4 P5 P6

Formula

Zet

a p

ote

nti

al (

mV

)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 59 "0,��)V(��+�����'(�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70,

P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0

��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)�

Page 121: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

99

1.2.2.4 ,�����3"���8�����$������/���"��"�����������3-3"�����

�����6��

=����,0���)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&�

�-.���H���� �����)������-.������������������0�,0)���)���� ,��"0,�F����!��(� 60 &�

���4�5���) �������0�,0)��*���-.����������������� ��)�����3���,-,)��(��,����2����

&� 4.47 ��3� 3.93 "�#������.���4�5�)�+,��,�)�����3���,-,)�! �������2��(�

��� !6�� ���"�#0!�#��)� ���) �)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� ����

�)������-.�������������������0�,0)���(�)���(� F�)���,�����(��"��� ,����-�������.=�*�����

����� *�,*�� ,�-.���*�������'�� "�#�)V(��+�����'(����&���)��,�� ���)0�,0)��

*���-.���H���� �����(�0��H���(������'���(��(���0��������������(�,(&#�����'��-.���H���� ����

�)���� 50 %+,�-. ��� ,����-�&#�.���'�0�,0)���# �)��-.���H���� �����)��-.��� ���#�

��)��� 50:50 �����4�5�)�F� +,&#�,����'��-.��� ���#� '��,����"���-.���

����������������F�H4�������'������4�5=������-��'�-��)�+�������������)�F�

0.00

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

P1 P2 P3 P4 P5 P6

Formula

pH

initial 7 days temperature cycling

!��(� 60 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y (P1 ��� 75:25, P2 ��� 50:50, P3 ��� 40:60, P4 ��� 30:70,

P5 ��� 20:80 "�# P6 ��� 10:90) ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25

����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)�

Page 122: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

100

1.2.3 ,�����8�����$������/���"��!)�������������6������������������37�#

�8������������#6��3�"�����

&����4�5�(�=)�����) ����0)���(�� �#0��������(������'��

�# �)��-.���H���� ����"�#�-.��� ���#� +,�'��-.������������������3����"������

�,0�� ��� 50:50 &4�F,��.���4�5���������+,�'�����0)���(-�������(������'��+,�,0��

����-.��� ���#� '��,�)�����������#����=����(���(��)�F�

1.2.3.1 ,�����8�����$������/���"����')������#�����������6�����

�������������37�#�8������������#6��3�"�����

!��(� 61 "0,�=����(���(����5�#���!�*�������'��

�)���.F��,0����������+,�(�����(���(����'��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

�����)��)����F,�"�) �-.�������6 (06�� F1), �-.���0��J������� (06�� F2), �-.����������������

(06�� F3), �-.������������ (06�� F4), �-.���6������0 (06�� F5) "�# �-.����(��( (06�� S6) V4��

���)���'��-.��� ���#� �����)��-.�������6���,��"�*��0)�������'���(��(0(*��*��"�#

*��)���)�'�,�&� (���, creaming) ��*�#�(����'��-.���H���� �����)������-.��� ���#� ��

���)��(�� ������ �-.���0��J������� �-.���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#

�-.����(��(F,������'���(��(���5�#��3����-��,(�������,"0,�� �� 2�H4�"��+���*�����������(�

,(��)*���-.��� ���#� �����)��(- V4��=��(�F,�&#0�,��������=����,0��+,�'��-.��� ��

�#� �,(���(�F,�"0,�F���� ��*�� 1.2.1 �(�"0,�� �� 2�H4����������(�F�),(*���-.�������6������'�

�#�������'��,����)� ���&��(-"����������&�����(���(����'��-.��� ���#� �)�����

�-.���H���� ����&#��"��+������������(�,(��)���'��-.��� ���#� �)��,(�����) +,

����.���&#�(���5�#���!��(�,(*4-�H4�"���)06���.����(���#���,���-.�������6&#�(

"��+�����"�'�-��2��

Page 123: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

101

!��(� 61 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

'��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 :

�-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�

F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��

�������3����4�5�����������(���(���������� &4�F,��.����2�

����)������'��F����-��(���� !6�� ���"�#����2���0!�#��)�+,��0������ !6���(� 4 "�# 45

����V��V(0 ,��"0,���!��(� 62-63 =����4�5���)���'��-.���H���� �����)������-.���

���#� �(=��)���������*�������'����)���� ������'��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

�����)��-.�������6F,��.��������'���(��(��������F�),( 0�����F,�&���"�*��'�-���(� +,�(

"��+����)������V2�����(��,�� ������4�5���������(���� !6�� ��� "�#���,��"�'�-�

�# �)���[!��-."�#�-.��� (cracking) �������2�F���(�0!�#��)�����(���� !6�� 4 ����V��V(00���

������ !6�� 45 ����V��V(0 &.��� 6 ��� ��*�#�(��.��������'���(���#���,���-.���

H���� �����)������-.��� ���#� �����)��-.���0��J������� �-.���������������� �-.���

��������� �-.���6������0 "�#�-.����(��(F�)���,��"�*����(�+,�(������V2�����(���)���

100 ��-� ��������(�"�#��2�F���(� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, � "�#

���&���2�F���(�0!�#��)�����(���� !6�� 4 ����V��V(00��������� !6�� 45 ����V��V(0

&.��� 6 ��� ,��"0,���!��(� 64 V4����3�������=����������(�,(��)*�����'��-.���

H���� �����)��,�� ,����-������4�5�)�F�&#�.���.�-.���H���� ������'��������(������'��

�)������-.��� ���#� ������'������4�5�I&&������)�F�

F1 F2 F3 F4 F5 F6

Page 124: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

102

!��(� 62 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

'��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 :

�-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�

F���(� 25 ����V��V(0��3���� 1 0��, �

!��(� 63 ���5�#���!�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

'��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 :

�-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ��������(�"�#��2�

F���(�0!�#��)�

F1 F2 F3 F4 F5 F6

F1 F2 F3 F4 F5 F6

Page 125: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

103

0

20

40

60

80

100

120

F1 F2 F3 F4 F5 F6

Formula

% C

ream

ing

.

initial 7 days temperature cycling

!��(� 64 ��^"0,����0��������# �)������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.���

�������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() �)�

��������*�������'��

�� �� * ���,��"�'�-�"�� cracking

1.2.3.2 ,�����8�����$������/���"����3����#3�8�������������6�����

�������������37�#�8������������#6��3�"�����

&��(���)��*������)*�,*�� ,�-.����(=�+,����)�

���0�����*�������'�� (Kim and Kim 2003 : 2295 � 2301) "�#�(=�+,����)���T)�'�-��)��,��

(Pal et al. 2007 : 1712�1720) ������&������(������'��+,�'��-.��� ���#� �� ��*�� 1.2.1

� �*�,���!�� 1)��')��F�+������ ������&����-��(-F,��(���4�5=�*�����'��-.���

H���� �����)������-.��� ���#� �)�*�,*�� ,�-.���,��"0,���!��(� 65-66

*

Page 126: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

104

!��(� 65 !�H)+,�����&��������*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.���

�������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ���

�����(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+�� (�.���* =

100x)

F1 F2

F3 F4

F5 F6

Page 127: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

105

=����4�5���)������'��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

�����)��-.�������60)�=�� ������'���(����(�F,��(*�,�)��*��� 1)�6)��')��F�����"�#� 2�

=�4�*��0��(���3�������#���*���-.�������6F,��)�'�,�&� +,�(*�,�G�(��(���,+,

���������,*�,���!���)��� 6.454 F�+������ ��*�#�(�������'��-.���H���� �����)������-.���

���#� �����)��-.���0��J������� �-.���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#

�-.����(��( 0��H���(������'���(��(*�,���!���2������#,���+����� (!�H),�������

&��������� 2����!�*�� ,�-.���F�)'�,�&� ������&��(*�,���!��(���2�����*(,&.��,*��

������(��'���#�������(���������F ����!��)���,��2�&����������F �"�������(��.

� ���)���H)!�) ������.F���,*�,+,�'����������,*�,���!�&#�(*�,�6)��')�� 169-

262 �+����� V4��"0,�� �� 2��)���'��-.���H���� �����)������-.��� ���#� �������(�

�����'����-��(���� �#0��(�0�,�������(��+������'��0. ����#���(���#���,��06��

�.���,����)�

6.45

4

0.16

9

0.26

2

0.24

4

0.21

3

0.17

3

0.17

0

0.25

9

0.25

0

0.21

1

0.16

6

0.20

0

0.22

3

0.22

1

0.20

0

0.20

5

28.335

30.776

0.000

5.000

10.000

15.000

20.000

25.000

30.000

35.000

40.000

F1 F2 F3 F4 F5 F6

Formula

Dro

ple

t siz

e (m

icro

n)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 66 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(� ���(�F,�&��-.���H���� �����)������-.���

���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.���

�������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ���

�����(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�# 1 0��, �"�#

�������2��(�0!�#��)�

Page 128: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

106

��0)��=����,0����������! �������2��(���� !6�� ���

"�#0!�#��)��)�*�,*�� ,�-.���F,�"0,�F����!��(� 66 &����4�5���)*�,���!�

*�� ,�-.���*�������'���("��+���F�)"���)��)�'�,�&��������2� �����06���(��'��-.�������6

�("��+����(��������*4-��)�'�,�&�&� 6.454 F�+������ ��3� 28.335 F�+������ �����2��(�

��� !6�� ��� "�#�(*�,�����*4-���3� 30.776 F�+������ �����2���0!�#��)� V4��0�,��������=�

���5�#���!���!��(� 64 V4���(������V2�����(��,���)�'�,�&� �������2�V4���)&#���,&�

����=�4���*4-����F�H4�*�,*�� ,�-.����(�� 1)*4-�*���-.�������6 0)�=�� ����,��

"�*��'�-���(��������*4-�&����,��"�'�-���[!��-."�#�-.����)�'�,�&�

1.2.3.3 ,�����8�����$������/���"��"�4��7�*�����6�#���������6�����

�������������37�#�8������������#6��3�"�����

=����,0���)V(��+�����'(�*�������'���(����(�F,�+,�'�

�-.���H���� �����)������-.��� ���#� �����)��-.�������6 �-.���0��J������� �-.�����������

����� �-.������������ �-.���6������0 "�#�-.����(��( "0,�F����!��(� 67

-70

-60

-50

-40

-30

-20

-10

0

F1 F2 F3 F4 F5 F6

Formula

Zet

a p

ote

ntia

l (m

V)

initial 7 days temperature cycling

!��(� 67 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� ����

�)������-.��� ���#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 :

�-.����������������, F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.���

�(��() ! ��������(�"�#��2�F���(���� !6�� 25 ����V��V(0��3���� 24 '���+��"�#

1 0��, �"�# �������2��(�0!�#��)�

Page 129: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

107

&����4�5���) ���'��-.���H���� �����)������-.��� ��

�#� ������)�� ��)V(��+�����'(���3�����-� �, +,�)�(�F,��(���������(����"�#F�)�)�

"���)�������'��-.���H���� �����)��,(� ��*�#���'��-.��� ���#� �,(���(���"���)�

*���)V(��+�����'(��)��*���� (,��"0,���!��(� 51) "0,�� �� 2��)���'��-.��� ��

�#� �)������-.���H���� ������-��)&#�.� �=�*����#&��(�=����3�=��(����,&��-.���H���� ������3�

��� ���&��(-"��������(�(-�)V(��+�����'(�&#F�)�'����'(-��,��������*�� ,�-.���F,�

+,���0�����&��)V(��+�����'(�*�������'���(���#���,���-.�������6�(�)�(�06�"�#F�)

�)����(��"�����-�Y�(���������*���#���0("����2�� =�V(��+�����'(��(���,F,��(-�&��3�

����,�(� ,*���-.���H���� �����(�����#&�6)���6������'����*�#�(��-.�������6F,�"����

������3��-.���"�#=�4�*�,� 1)"���

1.2.3.4 ,�����8�����$������/���"��"��"�����������3-3"����������6�����

�������������37�#�8������������#6��3�"�����

0

1

2

3

4

5

6

7

8

F1 F2 F3 F4 F5 F6

Formula

pH

initial 7 days temperature cycling

!��(� 68 "0,��)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.��� ��

�#� '��,�)�Y (F1 : �-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.����������������,

F4 : �-.������������, F5 : �-.���6������0 "�# F6 : �-.����(��() ! ��������(�

"�#��2�F���(���� !6�� 25����V��V(0��3���� 24 '���+�� "�# 1 0��, �"�# �����

��2��(�0!�#��)�

Page 130: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

108

=����,0��*�������'���(� ���(�F,�+,�'��-.���H���� ����

�)������-.��� ���#� �����)��-.�������6 �-.���0��J������� �-.���������������� �-.���

��������� �-.���6������0 "�#�-.����(��("0,�F����!��(� 68 &����4�5���) ���'�

�-.���H���� �����)������-.��� ���#� ���)��-.�������6 �-.���0��J������� �-.����������������

�-.��� ��������� �-.���6������0 "�#�-.����(��(� ��)�����3���,-,)���3� 6.30, 4.61,

4.29, 4.75, 5.97, 7.04 "�# 5.05 ���.,�� "�#������.���4�5�)�+,��,�)�����3���,-,)�

! �������2��(���� !6�� ���"�#0!�#��)� ���) �)�����3���,-,)�*�������'���(����(�F,�

&��-.��� H���� �����)������-.��� ���#� ������)��(�)���(�F�)���,�����(��"���

2. ���&�'���������$��������6��<����#��#�8��6/8�-!������#%�"�*������������� (S. mutans)

&����4�5�I&&��)�Y �(��(=��)���������*�������'���(���#���,���-.��� ��

�#� &�F,�06���.����(�� �#0��������(������'�� ���4�5�)�F���3����.�����'���(����(�

F,�&��-.��� ���#� ��4�5���0��H�������-��'�-��)�+������������ F,�"�)

S. mutans 104B V4����3��'�-��)�+��^I�=��(������(�0�,��3����,�����Y (��( �H(�F��� 2550 : 97-

104) +,�'����(�&��&���� �� �� (broth dilution) �����,0�� ���,0��&#�'������'���(�

���(�F,� 3 ����*��*�� ��� F�)�&��&� �&��&� 10 ��) "�#�&��&� 100 ��) "��.���4�5��3� 2

0)�� 0)��"���4�5�����-��'�-�+,�'�06���.����(���#���,���-.��� ���#� �)��,(� "�#

��0)���(�0���4�5=������-��'�-�*��06���.����(����(�&��-.��� ���#� �)������-.���

H���� ���� ,�������)��#��(,���.,���)�F�

2.1 ,�����8������������#6��3�"��5 <���*������6���"���������$<����#��#�8�

�6/8� S. mutans

���4�5=�*���-.��� ���#� '��,�)�Y F,�"�) �-.�������6 �-.���0��J��

����� �-.���������������� �-.������������ �-.���6������0 "�#�-.����(��(�)����0��H��

�����-��'�-� S. mutans ���) �����'���(����(�F,�&��-.��� ���#� ������)� �(���0��H��

�����-��'�-� S. mutans F,� 100% ������.��,0��+,�������'�-� (0�,0)���# �)������'���)��'�-�

S. mutans ����*��*�� 105 +�+��(�)���������� �����,0����)��� �����'�� 1 0)���)��'�-� 9

0)��) ������.���&��&������'�� 10 ��) �)���.F��,0�����)�����'���(���#���,�� �-.���

����6 �-.���������������� "�#�-.�������������(���0��H�������-��'�-� S. mutans ��3�

100% ��*�#�(������'���(���#���,���-.���0��J������� �-.���6������0 "�#�-.����(��(�(

Page 131: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

109

���0��H���������'�-��,����3� 87, 73 "�# 83% ���.,�� ���&���-��.���,0��

�)�F�+,�.�����'����&��&��������3� 100 ��) ���)���06���(���0��H�������-��'�-�"�)

�����)�����'���&��&� 10 ��) ,��"0,���!��(� 69 (�����4�5���-��(-F,��'��V���F���,���(����

F�,� (cetylpyridinium chloride) ��3�'�,��������� (positive control) V4�����) �V���F���,���(�

���F�,��(���0��H�������-��'�-� S. mutans F,� 100% ���������*��*���(��,0�� "�#�'�

�����'���(����(�F,�&��-.���H���� ������3�'�,�������� (negative control) V4�����) �����'���(�

���(�F,�&��-.���H���� �����(���0��H�������-��'�-� S. mutans F,� 43% "�#�("��+���

�����-��'�-������������&��&���*4-�

&�=������-��'�-�,����)� �-.�������6 �-.���0��J������� "�#�-.���

��������������("��+����������-��'�-����(�0�,"�)�)�F��2���-.�������6�(����������

�!�F�),(����� ��#�������)��*���(����#����������)�������(�����-.���0��J�������

"�#�-.���������������� ,����-��-.��� 2 '��, ���&4��("��+����(�,(�����.F��'��)�F�

0.00

20.00

40.00

60.00

80.00

100.00

120.00

V1 V2 V3 V4 V5 V6 positivecontrol

negativecontrol

Formula

%In

hib

itio

n .

1x 10x 100x

!��(� 69 "0,�=�*���-.��� ���#� '��,�)���� (V1 : �-.�������6, V2 : �-.���0��J�������,

V3 : �-.����������������, V4 : �-.������������, V5 : �-.���6������0, V6 : �-.���

�(��(, positive control : 0.2%CPC "�# negative control : �����'���(����(�F,�&��-.���

H���� ����) ���+������'���(�����*��*���)�Y �)����0��H�������-��'�-�

S. mutans

Page 132: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

110

2.2 ,������*������6��-���8�����$������/���"������8������������#6��3�"��5 �"�

��������$<����#��#�8��6/8� S. mutans

&����4�5*��������)��06���(���#���,���-.��� ���#� �,(�� �����'���(�

���(�F,�F�)�(�������� ,��"0,��� ��*�� 1.2.1 ,����-�&4�F,����(������'���(���#���,���-.���

���#� +,�(���'��-.���H���� �����)��,�� ���)F,������'���(��(���������(�,(*4-� ,��"0,���

��*�� 1.2.3 "�)�)�F��2���&0)�=�� ������-��'�-��,��,�� ,����-��������3����4�5���������

&4�F,��.�����'���(���#���,���-.���H���� �����)������-.��� ���#� ��0�,0)�� 50:50 �(�"0,�

�����������!��(�,(��)���'��-.��� ���#� �,(�� ��,0�����0��H�������-�

�'�-� S. mutans =����,0�����)�����'���(���#���,���-.��� ���#� �)������-.���

H���� �����("��+��������-��'�-�������������(���������'���(���#���,���-.��� ���#� �)�

�,(� +,�-.��� ���#� �����)��-.�������6 �-.���0��J������� "�#�-.����(��(�(���0��H

�������-��'�-� S. mutans ��3� 100% ������.��,0��+,�������'�-� S. mutans "�#������.��

�&��&������'�� 10 ��)���) ���0��H�������-��'�-��,�������06��+,�(���0��H��

�����-��'�-��6)��')�� 20-35% "�#������.F��&��&��(� 100 ��)���) ���0��H�������-�

�'�-��,�� +,�G�#��06���(���#���,���-.�������6 �-.���0��J������� "�#�-.���6������0

��*�#�(������'���(���#���,���-.�����������������(���0��H����T)�'�-��6)�(� 26% ������.

���&��&��(� 100 ��) ,��"0,���!��(� 70

=����,0��,����)�"0,�� �� 2��) ���'��-.���H���� ������3�0)����#���

*����[!��-.��� �(=��.� ������-��'�-��(����,&��-.��� ���#� �,�� V4���)&#���,�������&�

������-.��� ���#� �(��,�� V4����3�*��&.��,*�����.�-.���H���� ������'����������������

������!� "�)�)�F��2�� ������.���,0�����(���(�=������-��'�-� S. mutans ���'�,

�������� (negative control) V4����3������'��06���(��(�-.���H���� �����,(�� ���) �����'���(�F�)F,�

�&��&��(���0��H�������-��'�-� S. mutans ��3� 43% "0,�� �� 2��)�#���+������'�����

�(���0��H�������-��'�-�F,�,�� +, ,�-.���*�,��2��&F� ������"�#�����

��������-� ����V���*���'�-��)�+���)�Y (Karthikeyan, Amaechi and Lee 2009) ��0)�����.

�-.��� ���#� ����(��)���.� ���#0����!��������-��'�-��(��*4-� V4��"0,�� 2�"��+���

�(�,(*������#�����'��-.��� ���#� ���6��+������'������������-��'�-��)�F�

Page 133: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

111

0.00

20.00

40.00

60.00

80.00

100.00

120.00

F1 F2 F3 F4 F5 F6 positivecontrol

negativecontrol

Formula

% In

hib

itio

n

.

1x 10x 100x

!��(� 70 "0,�=�*���+������'��&��-.���H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)���� (F1 :

�-.�������6, F2 : �-.���0��J�������, F3 : �-.����������������, F4 : �-.������������,

F5 : �-.���6������0, F6 :�-.����(��(, positive control : 0.2%CPC "�# negative control

: �����'���(����(�F,�&��-.���H���� ����) �(�����*��*���)�Y �)����0��H����

���-��'�-� S. mutans

Page 134: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

112

����� 5

�!�,�������&�'���-�#

1. '��,*��0��,"���4�=���(=��)����0�����*�������'�� +, PGO ��3�0��,"��

�4�=���(�� �#0������.����(������'���(�0�,�������(���� POS, SLS "�# PLX ������&�

0��H���(������'���(��(�������� F�)���,��"�'�-���(� �(*�,���!� ,�-.�����2����#,��

�+����� "�#�(�)��� ��,�(�� �#0�

2. �����*��0��,"���4�=���(=��)����0�����*�������'�� +,����������0��,

"���4�=�������)� PGO �����*4-�&� 1 H4� 10 % +,�-. ���*�,���!� ,�-.����("��+���

�,��&� 2.163 F�+������ ��3� 114 �+�����

3. �����(������'��+,�'��-.��� ���#� ��3�������#�����(�'��,�,(���

��[!��-.��� �(=��.� ������'��0)��� 1)061�0(�������� "�#*�,���!� ,�-.���*��

�����'���(*�,� 1)

4. �����(������'��+,�'��-.��� ���#� �)������-.���H���� ���� �.� ������'���(

���������(�,( "�#�(*�,���!� ,�-.�����2������#,���+�����

5. �����'���(����(�F,�&��-.��� ���#� �)������-.���H���� ����0��H���(�F,�

���!��#,���+����� +,�(*�,�6)��')�� 169 H4� 262 �+����� ������'�����0)���# �)�

�-.��� ���#� �)��-.���H���� ������3� 50:50 "�#*�,���!�&#��2�����������*���-.���H���

� ���������*4-�

6. �����'���(��(0)��=0�*���-.��� ���#� �($���%�������-��'�-��)�+���������

��� S. mutans 104B F,� 100% ���06���.���

7. �������0�,0)��*���-.���H���� ��������[!��-.����(=��.� �$���%�������-��'�-�

S. mutans �,��

Page 135: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

113

������7�����

������'��/ ���0���#�����' 550 235 ������������0.�� !���'���+�+�(�!0�'����

��#�!0�'�0��� � �����������, 2551. (��,0.��)

�����2'� �,'#��#������. 0����^I�=�"�#0��,���&������(�. �������� : +�������

&�Z������� �����, 2536.

����� �(�����0�\. �����'�����������0.��. �'(�� �) : ��#�!0�'�0��� � ������'(�� �),

2544.

��( �H(�F���. "���(��(��')����. 0�*� : +��������.=�, 2550.

��!��� &����#�0��\. �+����+�+�(: ���.0)�"�#�������0.����=�� ���. �������� :

���5�� ��#''� &.��,, 2552.

Corrigan, O.I., and A.M. Healy. �Surfactants in pharmaceutical products and system./ in

Encyclopedia of Pharmaceutical Technology. New York : Marcel Dekker, 2002.

Holmberg, Krister et al. Surfactants and Polymers in Aqueous Solution. 2nd ed. Chichester : John

Wiley, 2003.

Niazi, Sarfaraz K. Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations. 6 vols. Boca Raton,

Fla. : CRC Press, 2004. Vol. 3, Liquid products, by Sarfaraz K. Niazi.

Rowe, Raymond C., Paul J. Sheskey, and Siân C. Owen. Handbook of Pharmaceutical

Excipients. 5th ed. London : Pharmaceutical Press, 2006.

Sjoblom, Johann. �Emulsions and emulsion stability./ 2nd ed. Boca Raton : CRC/Taylor &

Francis, 2006.

Aframian, D.J., T. Davidowitz, and R.Benoliel. �The distribution of oral mucosal pH values in

healthy saliva secretors./ Oral Dis 4, 12 (July 2006) : 420-423.

Allaker, Robert P., and C.W. Ian Douglas. �Novel anti-microbial therapies for dental plaque-

related diseases./ International Journal of Antimicrobial Agents 1, 33 (January 2009)

: 8�13.

Bakkali, F. et al. �Biological effects of essential oils-A review./ Food and Chemical Toxicology

2, 46 (2008) : 446-475.

Baret, Jean-Christophe et al. �Kinetic Aspects of Emulsion Stabilization by Surfactants: A

Microfluidic Analysis./ Langmuir 11, 25 (March 2009) : 6088�6093.

Page 136: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

114

Barsamian-Wunsch, P. et al. �Microbiological screening for cariogenic bacteria in children 9 to

36 months of age./ Pediatr Dent 3, 26 (June 2004) : 231-239.

Batish, Daizy R. et al. �Eucalyptus essential oil as a natural pesticide./ Forest Ecology and

Management 12, 256 (2008) : 2166-2174.

Belli, Wesley A., and Robert E. Marquis. �Adaptation of Streptococcus mutans and Enterococcus

hirae to acid stress in continuous culture./ Appl Environ Microbiol 4, 57 (April 1991)

: 1134-1138.

Boyd, David A. et al. �Defects in D-alanyl-lipoteichoic acid synthesis in Streptococcus mutans

result in acid sensitivity./ J Bacteriol 21, 182 (November 2000) : 6055-6065.

Burt, Sara. �Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in foods-a

review./ International Journal of Food Microbiology 3, 94 (2004) : 223-253.

Chaieb, Kamel et al. �The chemical composition and biological activity of clove essential oil,

Eugenia caryophyllata (Syzigium aromaticum L. Myrtaceae)./ Phytotherapy

Research 6, 21 (March 2007) : 501-6.

Chepurnov, A.A. et al. �Inactivation of Ebola virus with a surfactant nanoemulsion./ Acta

Tropica 3, 87 (August 2003) : 315-320.

Chhour, Kim-Ly et al. �Molecular analysis of microbial diversity in advanced caries./ J. Clin

Microbial 2, 43 (February 2005) : 843-849.

Dashper, Stuart G., and Eric C. Reynolds. �Lactic acid excretion by Streptococcus mutans./

Microbiol, no. 142 (1996) : 33-39.

de Soet, J.J., B. Nyvad, and M. Kilian. �Strain-related acid production by oral streptococci./

Caries Res 6, 34 (2000) : 486-490.

Faoagali, J., N. George, and J. F. Leditschke. �Does tea tree oil have a place in the topical

treatment of burns?./ Burns 4, 23 (June 1997) : 349-351.

Fernandez, Patrick et al. �Nano-emulsion formation by emulsion phase inversion./ Colloids and

Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects 1-3, 251 (December 2004) :

53-58.

Page 137: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

115

Graf, H. �The glycolytic activity of plaque and its relation to hard tissue pathology; recent

findings from intraoral pH telemetry research./ Int Den J 3, 20 (September 1970) :

426-435.

Grigoleit, H.-G., and P. Grigoleit. �Pharmacology and preclinical pharmacokinetics of peppermint

oil./ Phytomedicine 8, 12 (2005) : 612-616.

Gullapalli, R.P., and B.B. Sheth. �Influence of an optimized non-ionic emulsifier blend on

properties of oil-in-water emulsions./ Eur J Pharm Biopharm 3, 48 (1999) : 233-238.

Hamada, S., and H.D. Slade. �Biology, immunology, and cariogenicity of Streptococcus mutans./

Microbiol Rev 2, 44 (June 1980) : 331-384.

Hamilton, I.R., and N.D. Buckey. �Adaptation of Streptococcus mutans to acid tolerance./ Oral

Microbiol Immunol 2, 6 (December 2007) : 65-71.

Hammer, K.A. et al. �A review of the toxicity of Melaleuca alternifolia (tea tree) oil./ Food and

Chemical Toxicology 5, 44 (May 2006) : 616-625.

Hammond, Bruce G. et al. �Safety assessment of SDA soybean oil: Results of a 28-day gavage

study and a 90-day/one generation reproduction feeding study in rats./ Regulatory

Toxicology and Pharmacology 3, 52 (December 2008) : 311-323.

Hamouda, Tarek et al. �A novel surfactant nanoemulsion with a unique non-irritant topical

antimicrobial activity against bacteria, enveloped viruses and fungi./ Microbiology

Research, no. 156, 1 (2001) : 1-7.

Hazlett, Karsten R. O., Joseph E. Mazurkiewicz, and Jeffrey A. Banas. �Inactivation of the gbpA

gene of Streptococcus mutans alter structural and functional aspects of plaque biofilm

which are compensated by recombination of the gtfB and gtfC genes./ Infect Immun,

no. 67 (1999) : 3909-3914.

Hazlett, Karsten R. O., Suzanne M. Michalek, and Jeffrey A. Banas. �Inactivation of the gbpA

gene of Streptococcus mutans increases virulence and promotes in vivo accumulation

of recombinations between the glucosyltransferase B and C genes./ Infect Immun, no.

66 (1998) : 2180-2185.

Hibbard, John S. �Analyses comparing the antimicrobial activity and safety of current antiseptic

agents: a review./ Journal of Infusion Nursing 3, 28 (June 2005) : 194-207.

Page 138: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

116

Hillman, J. D. et al. �Construction and characterization of an effector strain of Streptococcus

mutans for replacement therapy of dental caries./ Infect Immun 2, 68 (February 2000)

: 543-549.

Hillman, J.D., A Chen, and JL Snoep. �Genetic and physiological analysis of the lethal effect of

L-(+)-lactate dehydrogenase deficiency in Streptococcus mutans complementation by

alcohol dehydrogenase from Zymomonas mobilis./ Infect Immun 10, 64 (1996) :

4319-4323.

Hillman, Jeffrey D. �Genetically modified Streptococcus mutans for the prevention of dental

caries./ Antonie van Leeuwenhoek 1-4, 82 (August 2002) : 361-366.

Hsu, Jyh-Ping, and Anca Nacu. �Behavior of soybean oil-in-water emulsion stabilized by

nonionic surfactant./ Journal of Colloid and Interface Science, no. 259 (December

2003) : 374�381.

Hu, Deyu et al. �A randomized, double-blind clinical study to assess the antimicrobial effects of a

cetylpyridinium chloride mouth rinse on dental plaque bacteria./ Clinical

Therapeutics 11, 31 (November 2009) : 2540-2548.

Jafari, Seid Mahdi et al. �Re-coalescence of emulsion droplets during high-energy

emulsification./ Food Hydrocolloids 7, 22 (2008) : 1191-1202.

Jeong, M.W., S.G. Oh, and Y.C. Kim. �Effects of amine and amine oxide compounds on the zeta-

potential of emulsion droplets stabilized by phosphatidylcholine./ Colloids and

Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects 1, 181 (June 2001) : 247-253.

Johnson, C.P., S.M. Gross, and J.D. Hillman. �Cariogenic potential in vitro in man and in vivo in

the rat of lactate dehydrogenase mutans of Streptococcus mutans./ Arch Oral Biol 11-

12, 25 (1980) : 707-713.

Karthikeyan, R., B.T. Amaechi, and V.A. Lee. �Antimicrobial effects of nanoemulsion against

Streptococcus mutans./ Paper Presented at IADR/AADR/CADR 87th General

Session and Exhibition, Miami, Florida 2 April 2009.

Kentish, S. et al. �The use of ultrasonics for nanoemulsion preparation./ Innovative Food Science

and Emerging Technologies 2, 9 (April 2008) : 170-175.

Page 139: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

117

Kim, Chang Kee, and Byung Kyu Kim. �IPDI-based polyurethane ionomer dispersions: Effects

of ionic, nonionic hydrophilic segments, and extender on particle size and physical

properties of emulsion cast film./ Journal of Applied Polymer Science 12, 43 (2003) :

2295 � 2301.

Kritchevsky, David, Maxine M. Weber, and David M. Klurfeld. �Influence of different fats

(Soybean oil, palm olein or hydrogenated soybean oil) on chemically-induced

mammary tumors in rats./ Nutrition Research 1, 12 (1992) : S175-S179.

Lee, S.F. et al. �Construction and characterization of isogenic mutans of Streptococcus mutans

deficient in major surface protein antigen P1(I/II)./ Infect Immun 11, 57 (November

1989) : 3306-3313.

Li, H., J. L. Madden, and B. M. Potts. �Variation in volatile leaf oils of the Tasmanian Eucalyptus

species-1. Subgenus Monocalyptus./ Biochemical Systematics and Ecology 3, 23

(1995) : 299-318.

Liedtke, S. et al. �Influence of high pressure homogenization equipment on nanodispersions

characteristics./ International Journal of Pharmaceutics 2, 196 (2000) : 183�185.

Loesche, Walter J. �Role of Streptococcus mutans in human dental decay./ Microbiol Rev 4, 50

(December 1986) : 353-380.

Ma, J.K. et al. �Conservation of the gene encoding streptococci antigen I/II in oral streptocci./

Infect Immun 8, 59 (August 1991) : 2686-2694.

Marklund, Britt-lnger et al. �Horizontal gene transfer of the Escherichia coli pap and prs pili

operons as a mechanism for the development of tissue-specific adhesive properties./

Molecular Microbiology 16, 6 (October 2006) : 2225 � 2242.

Marsh, P.D., and M.V. Martin. �The resident oral microflora./ in Oral microbiology. 4th Wright

2001 : 17-33.

Matsumiya, Y. et al. �Molecular epidemiological study of vertical of vaginal Lactobacillus

species from mothers to newborn infants in Japanese, by arbitrarily primed

polymerase chain reaction./ J. Infect Chemother 1, 8 (March 2002) : 43-49.

Matsumoto, M. et al. �The role of glucan-binding proteins in the cariogenecity of Streptococcus

mutans./ Oral Microbiol Immunol, no. 47 (2003) : 213-215.

Page 140: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

118

McClements, David J., and Stephanie R. Dungan. �Factors that affect the rate of oil exchange

between oil-in-water emulsion droplets stabilized by a nonionic surfactant: droplet

size, surfactant concentration, and ionic strength./ J. Phys. Chem. 28, 97 (July 1993) :

7304�7308.

McNeill, K., and I.R. Hamilton. �Acid tolerance response of biofilm cells of Streptococcus

mutans./ FEMS Microbiol Lett 221 (2003) : 25-30.

Monchois, V., R.M. Willemot, and P.Monsan. �Glucansucrases: mechanism of action and

structure-function relationships./ FEMS Microbiol Rev 2, 23 (April 1999) : 131-151.

Munro, Cindy L., Suzanne M. Michalek, and Francis L. Macrina. �Sucrose-derived exopolymers

have site-dependent roles in Streptococcus mutans-promoted dental decay./ FEMS

Microbial Lett 3, 128 (May 1995) : 327-332.

Munson, M.A. et al. �Molecular analysis of the microflora associated with dental caries./ J. Clin

Microbial 7, 42 (July 2004) : 3023-3029.

Myc, Andrzej. et al. �The fungicidal activity of novel nanoemulsion (X8W60PC) against

clinically important yeast and filamentous fungi./ Mycopathologia 4, 155 (2002) :

195-201.

Naito, Y. et al. �Thirteen-week dietary intake of rapeseed oil or soybean oil as the only dietary fat

in Wistar Kyoto rats¥change in blood pressure./ Food and Chemical Toxicology 9,

38 (September 2000) : 811-816.

Nakatsu, Tetsuo et al. �Biological activity of essential oils and their constituents./ Studies in

Natural Products Chemistry 2, 21 (2000) : 571-631.

Ohta, Hirotaka. et al. �Characterization of a cell-surface protein antigen of hydrophilic

Streptococcus mutans strain GS-5./ J Gen Microbiol, no. 135 (1989) : 981-988.

Pal, Sukdeb, Yu Kyung Tak, and Joon Myong Song. �Does the Antibacterial Activity of Silver

Nanoparticles Depend on the Shape of the Nanoparticle? A Study of the Gram-

Negative Bacterium Escherichia coli./ Appl Environ Microbiol 6, 73 (March 2007) :

1712�1720.

Petersen, F.C. et al. �Functional variation of the antigen I/II surface protein in Streptococcus

mutans./ Infect Immun 1, 70 (January 2002) : 249-256.

Page 141: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

119

Price, Shirley. �Using essential oils in professional practice,/ Complementary Therapies in

Nursing and Midwifery 5, 4 (1998) : 144-147.

Quan, C., G. Khoe, and D. Bagster. �Adsorption of sodium lauryl sulfate onto arsenic-bearing

ferrihydrite./ Water Research 2, 35 (February 2001) : 478-484.

Quivey, Robert G. Jr. �Genetics of acid adaptation in oral streptococci./ Crit Rev Oral Biol Med

4, 12 (2001) : 301-304.

Russell, Roy R.B. �Glucan-binding proteins of Streptococcus mutans serotypec./ J Gen

Microbiol, no. 112 (1979) : 197-201.

Ruth, Saskia M. van, Emad S. Shaker, and Patrick A. Morrissey. �Influence of methanolic

extracts of soybean seeds and soybean oil on lipid oxidation in linseed oil./ Food

Chemistry 2, 75 (November 2001) : 177-184.

Sadurní, Núria et al. �Studies on the formation of O/W nano-emulsions, by low-energy

emulsification methods, suitable for pharmaceutical applications./ Eur J Pharm Sci 5,

26 (December 2005) : 438-445.

Saeed, Sabahat, Asma Naim, and Perween Tariq. �In vitro antibacterial activity of peppermint./

Pakistan Journal of Botany 3, 38 (2006) : 869-872.

Shah, P., D. Bhalodia, and P Shelat. �Nanoemulsion: A pharmaceutical review./ Review Article

1, 1 (2010) : 24-32.

Shah, Deepan S. H., and Roy R. B. Russell. �A novel glucan-binding protein from Streptococcus

mutans./ in Streptococcal genetics 6th Asheville NC 2002.

Shakeel, Faiyaz et al. �Nanoemulsions as Vehicles for Transdermal Delivery of Aceclofenac./

AAPS PharmSciTech 4, 8 (December 2007) : Article 104.

Smith, Daniel J. et al. �Purification and antigenicity of a novel glucan-binding protein of

Streptococcus mutans./ Infect Immun 6, 62 (June 1994) : 2545-2552.

Tcholakova, Slavka, Nikolai D. Denkov, and Thomas Danner. �Role of Surfactant Type and

Concentration for the Mean Drop Size during Emulsification in Turbulent Flow./

Langmuir 18, 20 (2004) : 7444�7458.

Page 142: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

120

Teanpaisan, R., and G. Dahlen. �Use of polymerase chain reaction techniques and sodium

dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis for differentiation of oral

Lactobacillus species./ Oral Microbial Immunol 2, 21 (February 2006) : 79-83.

Whittaker, Catherine J., Christiane M. Klier, and Paul E. Kolenbrander. �Mechanisms of adhesion

by oral bacteria./ Ann Rev Microbiol, no. 50 (1996) : 513-552.

Wright, D. Craig. �Antimicrobial oil-in-water emulsions./ United States Patent, no. 5475667

(1996).

Cargill, Incorporated. Emulsifiers [Online]. Accessed 15 May 2010. Available from

http://www.cargilltexturizing.com/products/functional/emulsifier/

Columbia University College of Dental Medicine. Illustrations: How a Tooth Decays [Online].

Accessed 22 March 2010. Available from http://www.simplestepsdental.com/SS/

Encyclopædia Britannica. bacteria [Online]. Accessed 20 May. 2010. Available from

http://www.britannica.com/EBchecked/topic/48203/bacteria

Maple Tech International LLC. Tooth Decay [Online]. Accessed 1 September 2009. Available

from http://www.dentistdig.com/g/tooth-decay.html

Page 143: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

���,���

Page 144: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

122

����(� 13 "0,�=���������*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,�)�Y

06�� '��,0��,"���4�=��

% creaming

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

S1 POS 30 26 30

S2 PGO 100 100 100

S3 SLS 90 34 34

S4 PLX 100 100 96

����(� 14 "0,�=���������*�������'���(����(�&�0��,"���4�=�����)� PGO ������)����

06�� ����� PGO

(%+,�-. ���)

% creaming

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

C1 1.0 100 100 100

C2 2.5 100 100 100

C3 5.0 100 100 100

C4 7.5 100 100 100

C5 10.0 100 100 100

����(� 15 "0,�=���������*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

% creaming

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

V1 Clove oil 10 26 26

V2 Spearmint oil 28 26 14

V3 Peppermint oil 38 33 22

V4 Optamint oil 76 68 34

V5 Eucalyptus oil 100 100 100

V6 Tea tree oil 24 22 14

�� �� : F1 ���, cracking ���,�##���������2�

Page 145: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

123

����(� 16 "0,�=���������*�������'���(����(�F,�&��-.���H���� �����)������-.�����������

����� ��0�,0)���)�Y

06��

0�,0)���# �)�

�-.���H���� �����)�

�-.����������������

% creaming

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

P1 75 : 25 100 100 100

P2 50 : 50 100 100 100

P3 40 : 60 100 100 15.38

P4 30 : 70 25 22 20

P5 20 : 80 26 23 24

P6 10 : 90 30 28 22

����(� 17 "0,�=���������*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)������-.��� ���#�

'��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

% creaming

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

F1 Clove oil 73.33 70.67 62.5

F2 Spearmint oil 100 100 100

F3 Peppermint oil 100 100 100

F4 Optamint oil 100 100 100

F5 Eucalyptus oil 100 100 100

F6 Tea tree oil 100 100 100

Page 146: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

124

����(� 18 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,�)�Y

06�� '��,0��,"���4�=��

*�, ,�-.��� (µm)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

S1 POS 2.699 ± 0.299 2.583 ± 0.156 2.828 ± 0.464

S2 PGO 0.193 ± 0.050 0.151 ± 0.007 0.196 ± 0.031

S3 SLS 1.780 ± 0.869 1.237 ± 0.902 2.732 ± 0.183

S4 PLX 1.767 ± 0.260 1.009 ± 0.115 4.026 ± 1.323

����(� 19 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&� PGO ������)�Y

06�� ����� PGO

(%+,�-. ���)

*�, ,�-.��� (µm)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

C1 1.0 2.163 ± 0.091 1.649 ± 0.030 1.800 ± 0.143

C2 2.5 0.795 ± 0.314 0.677 ± 0.059 0.665 ± 0.147

C3 5.0 0.233 ± 0.005 0.214 ± 0.005 0.230 ± 0.001

C4 7.5 0.132 ± 0.002 0.136 ± 0.033 0.184 ± 0.002

C5 10.0 0.114 ± 0.001 0.111 ± 0.003 0.434 ± 0.240

����(� 20 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

*�, ,�-.��� (µm)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

V1 Clove oil 4.715 ± 0.147 15.621 ± 0.298 20.365 ± 3.669

V2 Spearmint oil 3.581 ± 0.224 2.240 ± 0.281 1.970 ± 0.345

V3 Peppermint oil 4.526 ± 0.874 4.656 ± 0.586 4.955 ± 0.271

V4 Optamint oil 8.849 ± 0.265 8.648 ± 0.273 5.739 ± 0.659

V5 Eucalyptus oil 41.273 ± 24.929 15.243 ± 2.933 20.134 ± 3.905

V6 Tea tree oil 3.089 ± 0.153 2.630 ± 0.068 4.391 ± 0.455

Page 147: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

125

����(� 21 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�F,�&��-.�����'�)������-.����������������

��0�,0)���)�Y

06��

0�,0)���# �)�

�-.���H���� �����)�

�-.����������������

*�, ,�-.��� (µm)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

P1 75 : 25 0.193 ± 0.032 0.199 ± 0.026 0.138 ± 0.002

P2 50 : 50 0.262 ± 0.011 0.259 ± 0.025 0.223 ± 0.006

P3 40 : 60 0.678 ± 0.125 1.198 ± 0.254 0.912 ± 0.332

P4 30 : 70 1.236 ± 0.332 2.083 ± 0.118 4.110 ± 0.425

P5 20 : 80 2.918 ± 0.244 2.600 ± 0.208 16.998 ± 1.921

P6 10 : 90 3.056 ± 0.242 3.004 ± 0.059 13.908 ± 2.945

����(� 22 "0,�*�, ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)������-.��� ��

�#� '��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

*�, ,�-.��� (µm)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

F1 Clove oil 6.454 ± 0.580 28.335 ± 3.329 30.776 ± 5.395

F2 Spearmint oil 0.169 ± 0.001 0.170 ± 0.002 0.200 ± 0.001

F3 Peppermint oil 0.262 ± 0.011 0.259 ± 0.025 0.223 ± 0.006

F4 Optamint oil 0.244 ± 0.008 0.250 ± 0.001 0.221 ± 0.001

F5 Eucalyptus oil 0.213 ± 0.002 0.211 ± 0.002 0.200 ± 0.002

F6 Tea tree oil 0.173 ± 0.002 0.166 ± 0.004 0.205 ± 0.002

Page 148: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

126

����(� 23 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,

�)�Y

06�� '��,0��,"���4�=��

�)V(��+�����'(� (mV)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

S1 POS -41.71 ± 1.41 -34.94 ± 0.77 -39.69 ± 0.59

S2 PGO -26.18 ± 1.24 -23.15 ± 1.68 -27.56 ± 0.91

S3 SLS -63.53 ± 0.88 -77.69 ± 1.57 -73.27 ± 1.02

S4 PLX -18.48 ± 1.11 -24.19 ± 1.49 -23.27 ± 0.29

����(� 24 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&� PGO ������)�Y

06�� ����� PGO

(%+,�-. ���)

�)V(��+�����'(� (mV)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

C1 1.0 -26.95 ± 1.48 -25.13 ± 1.67 -19.89 ± 2.82

C2 2.5 -35.47 ± 0.66 -26.74 ± 1.04 -29.75 ± 0.48

C3 5.0 -26.18 ± 1.24 -24.72 ± 0.65 -25.34 ± 0.35

C4 7.5 -15.48 ± 1.41 -23.62 ± 1.21 -16.78 ± 1.08

C5 10.0 -19.66 ± 0.86 -24.97 ± 1.03 -20.36 ± 0.88

Page 149: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

127

����(� 25 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,

�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

�)V(��+�����'(� (mV)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

V1 Clove oil -35.77 ± 0.78 -40.76 ± 1.16 -35.57 ± 0.78

V2 Spearmint oil -33.77 ± 1.09 -55.88 ± 3.51 -55.35 ± 2.00

V3 Peppermint oil -20.46 ± 1.70 -10.91 ± 1.11 -14.13 ± 1.44

V4 Optamint oil -9.51 ± 1.91 -24.38 ± 0.49 -33.67 ± 2.01

V5 Eucalyptus oil -53.70 ± 1.98 -3.11 ± 6.79 -37.09 ± 0.80

V6 Tea tree oil -7.75 ± 3.51 -24.65 ± 0.95 -23.59 ± 0.90

����(� 26 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���H���� ����

�)������-.������������������0�,0)���)�Y

06��

0�,0)���# �)�

�-.���H���� �����)�

�-.����������������

�)V(��+�����'(� (mV)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

P1 75 : 25 -18.63 ± 0.56 -6.47 ± 1.85 -11.48 ± 0.65

P2 50 : 50 -36.67 ± 1.01 -41.63 ± 0.68 -38.32 ± 1.09

P3 40 : 60 -8.52 ± 1.51 -20.86 ± 1.39 -14.57 ± 0.59

P4 30 : 70 -32.71 ± 1.96 -15.21 ± 1.63 -28.46 ± 0.91

P5 20 : 80 -11.75 ± 1.70 -21.30 ± 0.60 -25.32 ± 0.49

P6 10 : 90 -27.91 ± 0.78 -22.85 ± 0.84 -21.58 ± 0.62

Page 150: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

128

����(� 27 "0,��)V(��+�����'(�*�� ,�-.���*�������'���(����(�&��-.���H���� ����

�)������-.��� ���#� '��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

�)V(��+�����'(� (mV)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

F1 Clove oil -34.78 ± 0.47 -39.81 ± 1.51 -36.477 ± 2.81

F2 Spearmint oil -43.56 ± 1.12 -38.52 ± 1.21 -39.44 ± 0.92

F3 Peppermint oil -36.67 ± 1.01 -41.63 ± 0.68 -38.32 ± 1.09

F4 Optamint oil -52.75 ± 1.59 -48.44 ± 1.17 -44.61 ± 1.47

F5 Eucalyptus oil -39.51 ± 0.89 -46.86 ± 0.93 -41.04 ± 1.19

F6 Tea tree oil -42.86 ± 1.67 -45.78 ± 0.76 -40.73 ± 0.89

����(� 28 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&�0��,"���4�=��'��,�)�Y

06�� '��,0��,"���4�=��

pH

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

S1 POS 3.58 ± 0.01 3.50 ± 0.01 3.32 ± 0.00

S2 PGO 6.30 ± 0.01 6.41 ± 0.02 5.99 ± 0.01

S3 SLS 7.12 ± 0.01 7.07 ± 0.02 6.85 ± 0.01

S4 PLX 6.85 ± 0.01 6.83 ± 0.01 6.86 ± 0.01

����(� 29 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&� PGO ������)�Y

06�� ����� PGO

(%+,�-. ���)

pH

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

C1 1.0 7.04 ± 0.07 6.97 ± 0.05 6.86 ± 0.01

C2 2.5 6.67 ± 0.04 6.55 ± 0.02 6.31 ± 0.02

C3 5.0 6.37 ± 0.01 6.26 ± 0.02 6.02 ± 0.01

C4 7.5 5.68 ± 0.02 5.63 ± 0.01 5.48 ± 0.01

C5 10.0 5.65 ± 0.02 5.63 ± 0.01 5.49 ± 0.01

Page 151: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

129

����(� 30 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&��-.��� ���#� '��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

pH

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

V1 Clove oil 5.36 ± 0.02 5.26 ± 0.01 5.00 ± 0.01

V2 Spearmint oil 4.20 ± 0.01 4.13 ± 0.00 3.94 ± 0.01

V3 Peppermint oil 3.98 ± 0.02 3.85 ± 0.01 3.63 ± 0.01

V4 Optamint oil 5.48 ± 0.01 5.37 ± 0.01 4.97 ± 0.01

V5 Eucalyptus oil 7.55 ± 0.08 7.29 ± 0.04 6.79 ± 0.02

V6 Tea tree oil 4.48 ± 0.01 4.39 ± 0.01 4.21 ± 0.00

����(� 31 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)������-.���

���������������0�,0)���)�Y

06�� 0�,0)���# �)��-.�����'

�)��-.����������������

pH

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

P1 75 : 25 4.47 ± 0.01 4.49 ± 0.01 4.21 ± 0.01

P2 50 : 50 4.29 ± 0.01 4.25 ± 0.01 4.10 ± 0.01

P3 40 : 60 4.10 ± 0.01 4.13 ± 0.01 3.84 ± 0.01

P4 30 : 70 4.05 ± 0.01 4.10 ± 0.01 3.83 ± 0.01

P5 20 : 80 3.99 ± 0.01 4.02 ± 0.01 3.77 ± 0.00

P6 10 : 90 3.93 ± 0.01 3.97 ± 0.01 3.70 ± 0.00

Page 152: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

130

����(� 32 "0,��)�����3���,,)�*�������'���(����(�&��-.���H���� �����)������-.���

���#� '��,�)�Y

06�� '��,*��

�-.��� ���#�

*�, ,�-.��� (µm)

��������(�

24 '���+��

��������(�

1 0��, �

�����2��(�

0!�#��)�

F1 Clove oil 6.30 ± 0.02 6.04 ± 0.01 5.61 ± 0.01

F2 Spearmint oil 4.61 ± 0.01 4.55 ± 0.01 4.47 ± 0.01

F3 Peppermint oil 4.29 ± 0.01 4.25 ± 0.01 4.10 ± 0.01

F4 Optamint oil 5.97 ± 0.01 5.86 ± 0.01 5.58 ± 0.02

F5 Eucalyptus oil 7.04 ± 0.01 6.91 ± 0.01 6.64 ± 0.01

F6 Tea tree oil 5.05 ± 0.01 4.86 ± 0.01 4.75 ± 0.01

y = 0.0008x - 0.0887

R2 = 0.9942

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0 100 200 300 400 500 600 700 800

Colony (x106 cfu/ml)

OD

540

nm

!��(� 71 ��^���\��'�-� Streptococcus mutans 104B

Page 153: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

131

����(� 33 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

���#� '��,�)���� (1x)

06�� �-.��� ���#� &.��� colony % inhibition

n = 1 n = 2 n = 3 n = 1 n = 2 n = 3 Mean SD

S. mutans 145 142 207

V1 Clove oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V2 Spearmint oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V3 Peppermint oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V4 Optamint oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V5 Eucalyptus oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V6 Tea tree oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Positive control

(CPC 0.2%)

0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Negative control

(C3 : Soybean oil)

86 92 94 40.69 35.21 54.59 43.50 9.99

����(� 34 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

���#� '��,�)���� (10x)

06�� �-.��� ���#� &.��� colony % inhibition

n = 1 n = 2 n = 3 n = 1 n = 2 n = 3 Mean SD

S. mutans 145 142 207

V1 Clove oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V2 Spearmint oil 28 14 22 80.69 90.14 89.37 86.73 5.25

V3 Peppermint oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V4 Optamint oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V5 Eucalyptus oil 39 42 50 73.10 70.42 75.85 73.12 2.71

V6 Tea tree oil 27 27 26 81.38 80.99 87.44 83.27 3.62

Positive control

(CPC 0.2%)

0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Negative control

(C3 : Soybean oil)

120 117 110 17.24 17.61 46.86 27.24 17.00

Page 154: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

132

����(� 35 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(���#���,���-.���

���#� '��,�)���� (100x)

06�� �-.��� ���#� &.��� colony % inhibition

n = 1 n = 2 n = 3 n = 1 n = 2 n = 3 Mean SD

S. mutans 145 142 207

V1 Clove oil 85 74 83 41.38 47.89 59.90 49.72 9.40

V2 Spearmint oil 119 97 86 17.93 31.69 58.45 36.03 20.61

V3 Peppermint oil 115 97 112 20.69 31.69 45.89 32.76 12.64

V4 Optamint oil 114 112 109 21.38 21.13 47.34 29.95 15.06

V5 Eucalyptus oil 120 118 115 17.24 16.90 44.44 26.20 15.80

V6 Tea tree oil 135 105 124 6.90 26.06 40.10 24.35 16.67

Positive control

(CPC 0.2%)

0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Negative control

(C3 : Soybean oil)

136 145 126 6.21 0.00 39.13 15.11 21.03

����(� 36 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(����(�F,�&��-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (1x)

06�� �-.��� ���#� &.��� colony % inhibition

n = 1 n = 2 n = 3 n = 1 n = 2 n = 3 Mean SD

S. mutans 114 134 127

V1 Clove oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

V2 Spearmint oil 0 0 1 100.00 100.00 99.21 99.74 0.45

V3 Peppermint oil 9 3 6 92.11 97.76 95.28 95.05 2.83

V4 Optamint oil 19 10 17 83.33 92.54 86.61 87.49 4.66

V5 Eucalyptus oil 88 74 78 22.81 44.78 38.58 35.39 11.33

V6 Tea tree oil 0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Positive control

(CPC 0.2%)

0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Negative control

(C3 : Soybean oil)

86 92 94 40.69 35.21 54.59 43.50 9.99

Page 155: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

133

����(� 37 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(����(�F,�&��-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (10x)

06�� �-.��� ���#� &.��� colony % inhibition

n = 1 n = 2 n = 3 n = 1 n = 2 n = 3 Mean SD

S. mutans 114 134 127

V1 Clove oil 83 119 98 27.19 11.19 22.83 20.41 8.27

V2 Spearmint oil 93 97 86 18.42 27.61 32.28 26.11 7.05

V3 Peppermint oil 85 83 74 25.44 38.06 41.73 35.08 8.55

V4 Optamint oil 88 92 85 22.81 31.34 33.07 29.07 5.50

V5 Eucalyptus oil 97 80 86 14.91 40.30 32.28 29.16 12.98

V6 Tea tree oil 85 100 97 25.44 25.37 23.62 24.81 1.03

Positive control

(CPC 0.2%)

0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Negative control

(C3 : Soybean oil)

120 117 110 17.24 17.61 46.86 27.24 17.00

����(� 38 "0,����0��H�������-��'�-� S. mutans *�������'���(����(�F,�&��-.���

H���� �����)������-.��� ���#� '��,�)�Y (100x)

06�� �-.��� ���#� &.��� colony % inhibition

n = 1 n = 2 n = 3 n = 1 n = 2 n = 3 Mean SD

S. mutans 114 134 127

V1 Clove oil 124 128 119 0.00 4.48 6.30 3.59 3.24

V2 Spearmint oil 102 135 110 10.53 0.00 13.39 7.97 7.05

V3 Peppermint oil 93 85 98 18.42 36.57 22.83 25.94 9.46

V4 Optamint oil 98 106 100 14.04 20.90 21.26 18.73 4.07

V5 Eucalyptus oil 115 100 108 -0.88 25.37 14.96 13.15 13.22

V6 Tea tree oil 106 108 112 7.02 19.40 11.81 12.74 6.25

Positive control

(CPC 0.2%)

0 0 0 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Negative control

(C3 : Soybean oil)

136 145 126 6.21 0.00 39.13 15.11 21.03

Page 156: ˘ˇ ˆ Streptococcus mutans ˙ ˘ ˇ˚ · PDF filephysical stability and antimicrobial activity against streptococcus mutans of nanoemulsions containing volatile oils by sirikarn

134

�������,=7��-�#

'��� ��0������1&�� ��2����

�(��6) 109 H��0��&����� �.��0��&����� �.�!������ &�� ��,����\�

73000

��#�������4�5

�.�. 2549 0.��2&���4�5���11����0�������� 0*��'���+�+�('(�!�

&�� ����������� ��#�'���0��&����� ����\�

�.�. 2551 �4�5�)��#,�����11� ������ 0*��'��������!0�'�0���

����������� � �����������