0 hhp hhp bc 3& / )* )- & c d! ,!# i s 5€¦ · 2r k2 < #' < 5 # e. coli...

13
) ! "# HHP ( 1 &#’& ( )*#+ ! ,#+ #- ./! 0 #- )- 1 HHP .2 "# 3 & HHP #45 ) 678 / )- 9: .<& HHP 3=> ?! @A #- )&+ ( BC 3& / )* )- & C D! ,!# HHP # E ?)694 ( .3 ,/ )6! HHP F& ) #- 3* G#8 < # ( )- H#- )I < ....... J#! K#& L&>9! ?#3IK L’2 ?9- K#K! #+# ?.2 < #- M& )> < ?)K3 N91 .2 FO& & <! 3 #K 2 HHP M& 5# P3 E.coli ! (K> Q5 & )3< & )- ! RC ?2 FO& #+# )- C ?(3=> .2 F< )6! # HHP I S5 < , # )- )&+ ) 2 80 T RI& HHP C ?K&K U4! ?P& .& HHP .& 87 . ) & V7 #+ W2 X/3 ) /9 ) ) ! "# HHP #Y& ZA: #+# 0 (#P < K 3[ ) 3- ( ./! # 2 )#+ ?>6 .#+ #C .A! @\] < < 6 #- < 200 600 MPa ( < 33- X6# .33- ! HI&+#K 32 # & 3"# ( * . X\] #>[ X8 3 ?2 #1 X= ^#2 .3 ! < #- F#+ 0 ) 7I& 5 H68 ?_& ?‘ #>- >6 @\] 1 High hydrostatic pressure

Upload: others

Post on 24-Jan-2021

5 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

����� ��� � � ���� � �� � �� �� ��� �� ���� � � ������

) � � � � �!��� � � �� ���"#�HHP(1 �&#'& (� )*#+ �! ,� �#+ ���� � ��#- ./����! � 0�� ��

�� �#�- � ��� �� )- ��� ��1�HHP � .�2 ���"#� � �� ���� � � � 3� �&�� ��HHP �� #45 )� �

�6 78 ��� �� �/ � )- �9 : �� .�<�&HHP �� � 3=>� ?�! @� A�� �� �#�- � � � )&�+ ( � � � � ��

��� �� BC� �� �3&�� �� ����� ��� � � ���� � �/ � )* � )- �& � �� �C � D! � ���� ,!#�HHP �

� �#� ��E ��� � ?)69 4� (� �� .�3�� ,�/� ��� �� � )6!�HHP � � F & )� �#�- � �3* � � �� �

G�#8 < #� (� )- H��#- )I� �� � �� �<� .......� J��#! K�#�& L&�>9 ! ?�#3IK�� L' 2 ?�9�- K�#K!

�# +#� ?.�2 �� �<� �� �#�- � � ��M& � )>� � � < ?)K3� N9 1 .�2 F O& �� ��& �< ! �3� �#K��� ��� ��

���2HHP � ��M& �5#� �� P3�E.coli �! (K>� Q 5 � �&� )3 �< �� ��� �� � �& )- �! �� � R� C

��� �� ?�2 F O& �# +#� )- ��C� ?( 3=>� .�2 � F<� ��� �� )6!�� �#�HHP �� ��� � � I� � S 5 ��

< , � �#� )- � )&�+ )� ��280 T � �� RI&HHP � �C � ��� �� ?�K & K� U4! �� ?�� P& �� .�&HHP

.���& �8 7�� ��� �� � .���� )� � ���& V 7�� �� �#+ W�2 � � �� X/3� )� �/9

)����

) � � � � �!��� � � �� ����"#�HHP #Y& �� � ZA: �� �#+# � � � 0�� (�#�P� < �K� ��3[ )� ��3- (

./����! � �#� � ��2 �� )��#+ �� �� ?��>6� .�# + �� �#C .� A�! ��� ��� @��\]� < �� �< ��6� ��#-

<200 �600MPa �� (� < �33- X 6�# � � .�33- �! � � � HI & +��#K � � ��� � � ���� � � �32 � ��

� ���# � � �� �� �&�� �� �3�"#� (� ��* .��� �� � � X�\]� #>[ X�8 � � 3� ?��2 #1 X =�� ^�#2 ��

.�3�� �� �!� < ��#- F#+ 0�� )� �7I& � ��5 �� � � H68 ?_&� ?�`� ��� #�>- ��>6� @��\]�

1 High hydrostatic pressure

Page 2: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

��� 3� #���� � �# + .#P�HHP .�2 � �� � HI & +��#K � #� � �� # a � < #� G >[ W�� �3�< & � �63S ��

)� ?F��6� & R��� )� ?�� � (� �� )� �� 7& � � �#�- � � ! I: )- �!� �� #Y&HHP � � )&�+ � � ��

�#C F '3� )� ?( 3=>� .�2 � # `�� � ! I: (� �! (K>� / & � )&�+ ���� ��: � �! @� A�� �����

0<�#� b#6� �� (��#+HHP ����� � ��M& � � �� �< I9 6�# � �� cL�5 ?)� ��Listeria

monocytogene � Escherichia coli ��� #� @ 69 4� (�#� .�L[ .��� ��1�Listeria monocytogene

�Escherichia coli ��� �� )- �� � �&HHP ?��� (��� .��2 )��#+#� �&�� �� )- �! �+M�� ��

) �� K>� � J/�� -13-15 )� F� �� � � )�� � ,P1 (HHP <monocytogene Scott A ,�� < �

W�2 �� .�& � .�&< � P9��! < �K*�-HHP �400MPa �� ���5 )���5 � � )�� � ,P1 (� .�&�#- � �

#+ H Y3�CrsR e�& ���#: W�2 � � ( f��#� )- �&��� .�2 ��� &3 � P&� ��O� ��#6� � �3- �� T�-#! �

� ! H� &CtsR-null ��� ��HHP ��monocytogene X >[ � ��A1 �#K� R 9� )� )K3� N9 1 .�33- ��

�� ��� � &CtsR � � )�� � ,P1 )- �2 g��� ?ctsR ��- �� � ��1�� R7C < �[#� � 6>1 �� BC� ��

�� a < � � �monocytogene < h� � ��5 �< !�1 � �2 � �� ��:� e�& �#�- � < �2 & )- �& .�#- � O�

�#A3� W�2HHP � �� U i�� #�#� �� F� �� � � )�� � ,P1 �< !�1 � .�#+ ?R� �� �� .��HHP e�&E.

coli � � W�2 � .< ! � � )5#* J !#� �� ��& �< ! �3� �#K��� �8 �� �HHP � T� 3�� � : � ���2

��� �� U4! )- �9 : �� .��� �� � �& .�& � �C � � 6>1 � )O �&HHP 1 < , � �� �< �: � P&" ,P

� � )�� �monocytogene ctsR � � )�� � ,P1 (� .�2 � ��E. Coli < ���6� ���-#! )� �� @��S )�

���2 ��� �� (� � �&� � 37� ?)& A! �� .�3�� �� � �& � ���#: W�2 � � ��HHP ��E.coli R: <�3�

,P1 < ���6� )- �#- �3 � , � ��� �� )*#+ �! .�& � �C � .��& � �3�I� < & ���� ����� � � )�� �

� 6>1 �� R7C < �6 78 @��S )� )�!� � @��S )� #j 3�� � � )�� � ,P1E.coli .�&��& ��k: ��:� e�&

Page 3: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

X��11

� 0�� � ���

�2� ^�#2 � �� �#�- � � ��M& X��1 �� � - (� �� .� A�! ���� ����� � � �#�- � .1 .�& .�2 �!#P�

E.coli 536 F#I3�) ��� &� ��� ^!��U722 � )�� � ,P1 )- �9 : �� ?()I&#� ?h�� � ?E.coli

MG1655A7 ) �" #j 3�� ��� � �M& �E.coli MG21@#7>�Il�- �9 � & ^!�� (- ?�#7[ . '�&�) � �� �

.(R l#! ?H �2��

� �<�� �2� ^!�� �� a < � � � ��- ?�#'�� � � )�A+ cL5#�) ��� � K� 200rpm �#� (23 �� �[ !

TBS � �� �� (���m�#� � ��! T")30) )1��pseudomonas aerugiosa ?Aeromonas Hydrophila ?

Yersinia enterocolitica ?Listeria innocua �� � (37) )1��E.coli ?Salmonella enterica

serovars Typhimurium �Enteritidis �Shigella felxneri .( � �� P& �Y�� �� ?@��#i F '3� )�

100��/�� ��1� �#� T ��& �#�pAA212 �� � )� �� � �#1 � .�3�� n ��� ��#- ���-) �2 .� A�!

�� �� �#+ W�2dnaK X��1) /7! �3!���� ( f��#� �� <1 .(

Page 4: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

0<�#� T � ��) �9 �#! � � X ��& �8 ��HHP < � � � ��- ?( �� �#K� @��S )� �� aTSB F#+ , � <

�&�2 G C� .�21/10000 ) �&�2 .�� �2� )& 72 @��S )� �24 �2� )- �& �< � ��" �!�� �� a < � � (�[ !

� � RI& �#� �9���ca.80 .�2 RS :

� 0<�#�HHP) �&�2 �2�#� �� �#�& ! ^!�� �� a < � ��- � P9��! .4000*g; 5min HO: �� �� � (

< �� I�0.85%KCl ?)O �& �� .�&�2 G�6�200 (� � ��� � - �� �� �� T 7: o�#5 < h� G �6� < X��

@�� )� hm! � �2 F#+ )�I��� @��S )� R�#�!15 � �� c#j �� )� C�8ml �� � � �� b#6� ��

) � � �!��� �HHP) ��#+ �#C (100 �800 MPa � �� �� � (201�� )� R\�� �1� 5 ���" �� .#>� )� )

) � �� � )�I�" ,�/� )- � 2 � )�2� )1�� A49 .�2 ���P'& @ �!��#-100 MPa/min � ( �1� 5 ���"

,�/� � .�3�� � �& P3� )& �#+ )Y� ]� � � ( >�� � �33- �� G C� � �� � O� �� � � � � ��" ,� �#+

I�#�>- � )&�>& � �� �� ��C�� ��13 � �� �� )1��800MPa )� 7�#�� � �� ,� - ?�� P& �� .�3�I�

0<�#� < h� .��� �� p� ���5 )���5 @��SHHP �8 �� .�2 .� A�! �#�� �I�< ( 6� �#� ��- (� ?

��� �� � � )�� � ,P1 �#� T ��& � )���HHP � .�2 0<�#� ��- �� ?HHP ���� / &TSB < � .< �

�2 ()���") ���- )� � .�2 F#+ , �1/100 @�� )� �23 N! 3� � �� �� ?� �� � O� F�� ��� < , � �[ !

) �2 .�� �2� ��O�30 � )1��37.()1��

�#�� �I�< ( 6� . �� )&�>& N! 3� � � �< ! G C�0.85 KCl �0.1% peptone �>&) �&�2 .� �"

] ���m� ����9��/ �PPS hm! � ([) ���m�#� � ��! t� C ��� #�TSA ���& � )4�& � .�#�I+ @��S )� (

< h� .�&�224 � �&�2 .�#>2 ����& (� ?#j 3�� � � �#�- � �#� )3 P� �2� � �� �� �� ! ��K& < �[ !

��3[ )� �>��� '9 ,� - R� [ log (N0/N) �" �� )- �2 )7! ]�N0 �N �� � )�� � @ O& ��6�CFU )�

�<ml 0<�#� < h� � , �HHP �� ! 32 � .���]� )- � 2 � )�2� )1�� .�3�� �� � �& �10 �200

CFU/ml .��� � )4�& � .�#�I+ � .�2 ���& � � )&�>& �#�

Page 5: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

�2� � � �3]3� �� ! 32� � ��M& � � �� �2� � � �3]3� � )I� �� ��Y3� )� . �� �>�* H-#� ?����

600nm(OD600) )]AS H�I ! � � �< �8 �� �2� X : �� � � ��- < - (�#K!� � ��52C �# + .<�&

(�#K!� � H�I ! �� .�2 F O& ,� �<" #� �#� .�2C � S�� � � �� )- ��4& >� �� a < � � � ��- , � ?

��- (� �" < h� )- �&�#- � � �2� N2 �8 �� ?�&�2 7�#�� )� �10 ��� )�5 CFU/ml �&��I 9 T" ��

hm! .�&�2 G C� .�2 F#+ , � <300 �� #j 3�� G �6� < X�� @�� )� � �2 .�� �#C ��7&< )&� ��24

� �� �� �[ !37 #� �� � �2 �� ! ��K& )1��10 ��& K� � � -��5 � � �# + .<�& )� C�OD600 F O&

< #�>- �� 6� c#]& � �&�2 )��#+ ( '& � ��#K� ��- )! �� �2� � � �3]3� .�3��#+8.5% .�&���

��>& �# + .<�&Pdnak-gfp � ��M& .E.coli � ���pAA212 ��#- ���-)Pdnak-gfp ^!�� (

�! ! ��>& �# + .<�& �#� .�&���#+ �< ! g9 5 hm! � �&�2 R��7� (������#�K9Pdnak-gfp � � ��- ?

�� �� a < � �#� #j 3�� � ��M&LB Ap100 � �� ��37 h3!���� R �]� < , � )1��GFP .�� �2�

�� a � � ��- ?�� �#+ W�2 ^!�� n �9 �# + .<�& �#� .�&�21/100 ��LB Ap100 F#+ , � < .< �

� �� �� � �&�2 G C� .�237) �&�2 �� ! ��K& ?�� >& < � #5� � )1��OD600=0.6 .() � � �7I&1ml < (

< � IK� HO: �� .� ��� � �&��"�� Q#C @��S )� �� A�#�& ! ^!�� � ��- (�LB .�2 F#+ , � < .< �

) )&�>& �� �" < h� )- �&�2 G�6�500 � �� �� T" �� �� (X��50 @�� )� )1��15 .�2 .�� �#C )� C�

� �� �� .��& 0<�#� � �� �#+ W�2 � � ��-37 @�� )� )1��5 h3!���� �# + .<�& < , � �[ !

GFP .�&�2 ���P'&

h3!���� �# + .<�& �#�GFP& ? � � )&�>200)]AS�#K � c�#j )� �9��3 �� �� � .�#- � � X ��&

(K!����Ascent FL �� h3!���� �" < h� )- �&�2 .�� X ��&520 nm x P� o�� X�8 < .� A�! �

480nm ^!�� .��" �!�� h3!���� #�� �� .�2 �# + .<�&OD600 )� � �&�2 H I�� � IK� � )&�>& �� <

� ��3[ .�&���#+ )l� �7I& h3!���� � ��:

2 Bioscreen C plate-reader system

3 Microplate

Page 6: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

RK21

( � ! �m�" � �>l� #I- ( 6� . � @�#+ �� ^!�� )- ��4& >� 0�� (� ?F� �� � � X��! #I- ( 6� �#�

) �� K>�6(4 �� a < � � � ��- ?)SL5 ��8 )� .���#+ E �� ?�2 .�� U i��1/100 ��4 X��LB < � .< �

�� : )- �&�2 G C� .�2 F#+ , �100 � ��- .�2 � �� ( � ! �m�" X�� � �� ��37 )� ��� � K� � )1��

@��5 �� �9 �#! @��S )� � )&�>& �" < h� )- �&�2 �� ! ��K& �[ !PPS � +" ��� #� � �&�2 G C�LB

.�&�2 g��� � .�& � �C � � �&���#+ ���&

4 De Groote et al

Page 7: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

x� �&

��� �� � )6!��HHP �<� ����� � � ���� � �� ��� �� R� K� ��Y3� )� ��E � � �� &�� �� �<� �#� .

�#z-�:HHP )�>1 <) ����� � � ���� � ?E.coli ?S.flexneri ?S. Typhimurium ?S. Enteritidis ?

Y. enterocolitica ?A. hydrophila ?P. aeroginusa � ?L. innocua )5#* b#6� �� �#A3� @��S )� (

� � W�2 ��#K� � �HHP � � �� .�3��#+ �#C � .�& � �C � ��� 3�� �2� .#>� )� ���2200MPa �2 < �"

� )5#* #� �� �25MPa < h� #'�� �� �#�- � �2� )- �& �< � �2 ZA: T ��& F Y& (� � �#- � � ,�/�

0<�#�HHP � )3 � � � �� �) ��& .�� �� @/ PO�800 MPa ��- � P* ?.�2 �� �<� �M& #� �#� .(

�" < h� )- ?�3��#+�#C � � � )��� �]� R��I�10 @��S )� )�� � R� K� ��- #� < .�2 g9 5 � )�!�

��� �� �#� �#A3�HHP �< I9 6�# � ? � )�� � ,P1 (� < .�3��#+ �#C �� �<� ����HHP @ ���� N��

RK2) �2 )I� �� P&" #j 3�� ��� � �M& � F� ��1 .(

T ��&E.coli MG1655 #�#� �� ���2 @� �� �>! )�HHP ��3[ )� �M& (� � ��� .�2 .�� � �& / & L7C

)� ��� ���/ � �� � {�4! ?��7C � � )�� � � �&��>� �� .�! .�2 .�& O3+ )69 4� (� �� �7z� X#�3- ��

@��S < h� #���#K�25 0<�#� �9��� � )5#*HHP RK2) �&�2 RS :1 ��� � �M& � �� )- �9 : �� .(

E.coli MG1655 �� �� ! 32 � .���]� #�< �� L7C700 MPa ��� �� (�#�� � ?���HHP �� �" G���

P3� )69 4� (�2.8 log �� � )5#*800 MPa .�� ,� -

Page 8: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

RK22

��� �� � )6!�� � ?)O �& ��HHP �� �E. coli o157:H7 < � #'�� �<� � � ���� � �5#� �

Enterobacteriaceae �3& � H��#- �� �<� ^7�#�S. flexneri, ?S. Typhimurium ?S. Enteritidis ?

Y. enterocolitica RK2)1 ? ��M& (� � � < ?)K3� N9 1 .(E.coli O157:H7 #�#� �� ��� �� �[#! )�

HHP � )� �� �/ � )� �E.coli MG1655 )� # '>�* @��S )� ��S ��� � �M& )*#+ �� ,�/�HHP

��:� e�& �M& ?( 3=>� .��� #� J I:S.flexneri < �� �: �� )- )&�+ �� ?E.coli �I & �\��� R� C

)11 #�#� �� � �# '>�* ��� �� ?T ��& F Y& X >[ < , � ?(HHP )� ��� �� (� )*#+ �� � �& ��5 <

�/ �E.coli MG1655 �O157:H7 6�# � )� #O3� � �#K& � � 0#�I+ � )5#* �< I96.4 log ��800

MPa R� K� )� �� � � ��3�#4! ?R� �� �� .(� A! � � ���! ?�� RK2) �2S. Typhimurium ?S.

Enteritidis ?Y. enterocolitica )� �� !� < , � �3�I&��& .�2 X >[ T ��& F Y& R� �� �� �3�I&��&

800MPa .�&��" F�� ��]� ��� �� P3� ?��� (��� �HHP F� �� @ ���� N�� �� �&�� ��S.

Typhimurium ?S. Enteritidis )- �9 : �� ��#� � � ?Y. enterocolitica � �P1�� R� C ��� �� �I&��&

< , � � �� �� ��400MPa .�3- � O�

��� �� � )6!��HHP ����� � ��M& ��E.coli

��� �� �# +#� �#� ��� ��*HHP )� ���]� ��3- � )3 � �E.coli MG1655 and O157:H7 RK2)

1 #'�� � ��M& � H ��#+ H >\� � ?�! .��� (E.coli � � �� �� &�� (� �" )- H 3 7� � H 3- �� �<� �

��� �� � )6!�� ?��� (��� .# 5 � �! �& P1 )&�+ (� �/O� � ��M&HHP ��E.coli 536 and

ATCC11775 RK2)2 ��� �� ��:� )� �9� ���� )- �9 : �� ?)K3� N9 1 .�2 �� �<� (HHP �� ,�/� �

� )5#* �< I9 6�# �)4.2 log ��800 MPa � )&�+ ?(ATCC11775 (� )- ��� F O& � � - (� �I&��&

� )>� )- �! N�4� (� � .�3�� � �& #�E.coli #�#� �� �HHP�/ � �� )� .�&�2 �>& F� ��

��� �� � )\ \5 ���� � � � �HHP .

Page 9: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

���2 ��� �� ���� � � ?( 3=>�HHP � )�fI� (� ��* H��#- �� �<� )�� � R� K� � � )�� � ,P1 �� �

.�! )��#'& �#C �!�#� ���� L7C HP� ��:� e�& |���>[ N! 3� {�4! ?)>� < X�E.coli MG1655 �

#�#� �� �" F� �� � )�� � ,P1HHP )I� �� ���& �! ^�#2 �� ��5 �2� � � �3]3� J !#� )69 4� (� ��

� )�� � ,P1 ?��& .�� �� �2� � � �+M�� �� �# '>�* cL�5 ��* .�&�2E.coli #�#� �� )- .�2 T ��&

HHP & � .�>[ ����9��/ � g�& � *� ^�#2 (� �]� ?�! F� �� �#� / & )� �� x� �& ?(�#� .�L[ .��2 �>

#�#� �� F� �� � � )�� � ,P1HHP <E.coli O157:H7 �536 .�&�2 RS :

��� �� � )\ \5 )- H��#- �!�#� � hm!HHP T � �� �&�� �� )&�'*HHP ?�� ��& ��# & ��3[ )�

��:� e�& ��& >I� ��� �� � ?�� (� < .��2 ZA:MG1655 ��- < h� � �" F� �� � )�� � ,P1 �

�[#�7 � � RI& �#� �M&#� < R��I� � .��ca.80 J#�! )&�+ #� T � ��HHP N9 1 .H��#- ( 6� ?

��� �� �� ���>[ ,� - }[ � #Y& )� �[#� ��- )*#+ ?)K3�HHP ?��2 �� )�� � ,P1 �M& � ��:� e�& ��

/+#� ?F� �� � )�� � ,P1 � � ! I: )�HHP RK2) ��'&< � )&�� �3B � �& � )�� � (� )��� H� ��� .(

���2 ��� �� �# +#� )- �3�� ��HHP � �� T � �� )\ \5 (� � �3- �>& � O� X��! ��� #� �� �

^!�� .�2 � O� �� ��&HHP �[#! )� .��� �>& ( � <

��� �� ( � �9 >�: V 7�� �!�#�HHP �� �� � �E. coli .

� 6>1 ��� �� �� &�� H�� ��[ ?)K3� N9 1E. coli ���2 W�2 #�#� �� �� �#�HHP < , �) .�>[ ��#z- ?

90% � )5#* �1log �3&�� �>& <�3� P9��! < (� �� RK2) �3& >� .�&< ^!��� �7I& � �� �1 �2 � � ���! ?

��� � �K �&� #Y& < .�& � .�&< � P9��! )- ���& ��1� � K� (� )- �2� )1�� �� � ?�� � (� �� .(�K��

� ! I: � �� 6>1 � �33- �� �2� �#A3� @��S )� P&" ��* �32 � @� A�� .�2 X 6�# �HHP ���� � )� ��

� < ( 6� <�� �� � �� ,�/� � �&�� 0L� )K � ��& �< ! �3� @ �� �<" ?( 3=>� .�33- � 9�� ��5 ���

HHP �I&��& �33- T ��& RK2) �&�'� # a � ~ ��3� (� #� �34 W�2 � C� F#1� P9��! � )>� ��* .(

HHP � �3��5 36� ��� @�� �� (� ?�33- �� �� ��� � �& IK� ��� �� � -�< ! )- ��HHP � �! N� �

Page 10: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

�� �#�- � ��� �� � .���� � .�&��"� � ?)\��� (� ��� (��� .�3- �>& � - � )�� � ,P1 � 6>1 #z- ��

,�/� ?� )�!� � 6>1 �� �� �K 9�� �� � ]9 < ��>- � � X��! < �*�- #I- �� �" �� )- �3�I�

� #k� � � J#�! #�#� �� ��� �� .�&�� � �& � � �� � ��&" �3&

��� �� �� ���� � �9 >�: �# +�� �� �<� ��Y3� )�HHP �< I9 6�# � ?HHP � )�� � ,P1 ��E.coli

MG1655 hipA7��� �� � �& ��� � �M& � )I� �� �� � F� �� � P9��! #I- �#�#��/� ,�/� ? RK2)

5A ��6� #� F� �� #I- ,�/� )*#+ .( W�2 #� < h� � )�� � ��HHP F� �� ��6� � R� �� �� .�2�& # a �

� 6>1 �� ��1�� � �E.coli MG1655, O157:H7, 536 #�#� �� F� �� #j 3�� � � )�� � ,P1 �HHP

F� �� � � )�� � ,P1 � � < ?)*#+ .H��#- ( 6� �E.coli P3� ?DVL24 ,�/�1.8 � P9��!�� � �#�#�

RK2) �� � �& ��5 < F� ��5B .(

X��12

RK23

}]�

Page 11: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

0�� )� ��#- ./����! � < .� A�! ,�/�HHP #�#� �� �� �#�- � ��� �� � )6!�� < #�P� W�� ?� �63S ��

��� �� @�2 �/ � ��7C @ 69 4� )- �9 : �� .�! .�#- ���#i � � �� (�HHP ��E.coli �!�#� ���� �

���2 ��� �� ���� � � ������ ���� �� )69 4� (� ?�& .�� �#CHHP 0�/+ �<� ����� � � ���� � ��

.��� ��

��� �� � )6!�� �#� P�#�- � (� �&��� � �#j �� �<� �8 ��HHP )� )\ \5 (� �# +#� )- H �� ��� � ?

�5#� )� ���]� #Y& � ��M& <E.coli �� ���� (� #Y& )� ��* �2 � ��S.flexneri ?S. Typhimurium ?

S. Enteritidis ?Y. enterocolitica ?A. hydrophila ?P. aeroginusa � ?L. innocua .�L[ .��� N� �

� ��M& N�� )- �9 : �� ?(�#�E.coli �� �� �#� #���#K� @��S )�800MPa � � R� K� ���� � ?�&�#-

�3& � )�I�� � HP� � �S. Typhimurium ?S. Enteritidis � � �� �� #�#� �� ���]� ��� �� )� P3�

600MPa ^!�� �� � (� �� )1�� R� C � 3z�! �� .�&�#- � � �!�S.flexneri �2 )l� � .��& 5 H� �� ?

� �K �&��� � #Y& < g ��� R� C# �E.coli #�#� �� ���2 ��� �� �" ��:� e�& �M& )-HHP � �& ��5 <

)- �! #-E )� F<� .��� ��E.coli �Shigella Spp )- �3�� �� 0��#� � HP� � � ���� � < ���6�

#�#� �� P&" ��� �� ,�/�HHP ���"#� � 3� �! (K>� ?HHP .�<�& �� #45 )� � � �63S �� ��

�� �� �: �36� � ���� � (� < �K� < (�� >& /� >�O157:H7 < .�2�1O157:H7 ��� �� �[#! )�

HHP .��� �� ,�/� �

��� �� )- ��C�HHP ��E.coli RC�: �8 �� )& � �/�� �>& H� )� )& �9��! N! 3� ?��2 � O�80 �� RI&

T �HHP�#! ��- )*#+ )K3� N9 1 .�3- �� � � ��+< � ? �#� �9 80 T � �� RI&HHP � ! I:

HHP #�#� �� F� �� � � )�� � ,P1 � ��:� e�& �� �HHP �� � �M& < , � �#5" �M& � ?��� �� ,�/�

.�& � �C � F� �� �8 �� �K�" X��]� �� ����6� �2� � ?�! F��6� & � 3=>� .�� �� (� (�#�< � -�< ! )*#+

! �#� �9 �#! ��7[ .�! .�2 T ��& (�/'� 1 � �&� �5

Page 12: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

� � )�� � ,P1 � )>� )- �2 .�� �� ( 3=>�E.coli #�#� �� )-HHP �� �5 ! T�-#! �� ?�3�I� F� ��

��� �� �#� (K>� � -�< ! �� ��3[ )� L7C )- �&�� � �& ��5 < �� �#+ W�2 #�#� �� .�2 �3 � , �HHP

) ��� .�2 � P3� �1 .( #�#� �� F� �� � )�� � ,P1 �� ?@�� �� (� R >K� �� ?( 3=>�HHP <E.coli

MG1655 �� # '>�* ,�/� � )- �� � �& ��5 < � �� �#+ W�2 #�#� �� �� �5 ! T�-#!HHP .#>�

��� �� �C�� @��S )� �&�� �� �� �#+ W�2 D! � )- �! .�2 .�� � �& ��* ?��� (��� .��7&HHP �� �

E.coli � � ( f��#� �� �#+ W�2 |�� �5 ! T�-#! ( � ��� \� � )4�� ?�#7� � � ��� �� � )�#8�� �# +#�

HHP .�& � �� �C � g��� &

RK24

RK25

Page 13: 0 HHP HHP BC 3& / )* )- & C D! ,!# I S 5€¦ · 2R K2 < #' < 5 # E. coli o157:H7 HHP )6! ?)O & ?S. Enteritidis ?S. Typhimurium ?S. flexneri, 3& H #- < ^7 # Enterobacteriaceae

)� F� �� � 6>1 �� ���� � P9��! ��#z- ��*HHP ��� �� ^!��� �7I& � �� �� #�#� �� �3&�� �>& <�3�

��� �� �� F��� |g��� �# +�� .M�� @��S )� � H ��#+ H >\� � ?�3& � �� �C � � �� )� J I: 9 � �33-

HHP P9��! W�& ��6� )� � �! ���#K � ��&" � ��� �� .�2 g��� � .���� �� F��� .H 3- �� �<� �

�� ���� < .M�� @��S (� .�33- �� ��� �� #k� � � 0<�#� @# a � #�#� �� )- ��� .� 2 � )�!� � 6>1

� �9��! ���9��/ � �� J#�! < �2 & H Y3� F�[ )- ��� F� �� � P9��! ��C�� � 9�� �� ��>- �� )��� ��� ��

�� � ���� � ��� �� �9�K9�� G C� � -�< ! )*#+ .��� �� ,� - � P9��! ( 3=>� .�! .��& R: <�3� F�

E.coli � �33- �� R>]� � ,P1 (� )-255 � � ?�3�� �� � �& � ( � ! �m�" #�#� �� ���� � ,�/� #�#�

#�#� �� ��� �� ,�/� )&�+HHP � � )�� � ,P1 < F�- � � ?R� �� �� .�&��& � �& ��5 < �E.coli

#�#� �� P&" e O�� �&�� �� )- �&��& � �& � F� �� �[#� � 6>1 �� # '>�* ,�/� ?)69 4� (� �� .�2�1

� ��HHP �? �! � F� �� � )\��� )- � 9�� �� ��>- )- ���& ��1� X >�: (� ?��� (��� .��� � �& �

���#K � ��&" 0<�#� #�#� �� � �< ! �� �� C � P&" � �� �� ?�3& >� .�&<HHP .�2 � )�2� ,�&

���2 ��� �� � )6!�� �#� � �#j ?)69 4� (� �� .�2 �I� � � �#�- � � � ��HHP � � )&�+ )� ���]�

E.coli ��� �� )- ��C� .�&�+ �>& W#�2 )� � )\��� (� �" � � )9�/� � )>� )*#+ ���HHP )��#+#�

�!� �� #Y& )� ?��2 ��� �� ?( 3=>� .��+ �>& �# a � �9��! N! 3� #� � �2 � ��� � �+M�� �� )-HHP

���& V 7�� �� �#+ W�2 D! � T�-#! )� �/9 .