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Service de BactériologieDépartement des Maladies infectieuses et parasitaires
Faculté de Médecine Vétérinaire
Jacques Mainil
Les souches entérohémorragiques d’Escherichia coli en médecine vétérinaire
Cours de bactériologie2ème doctorat
Cours de bactériologie2ème doctorat
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Acronyms Pathotypes (or virulotypes)EHEC Enterohaemorrhagic E. coliEPEC Enteropathogenic E. coli DHEC Diarrhea-associated Haemolytic E. coliExPEC Extraintestinal E. coli UPEC Uropathogenic E. coliNMEC Neonatal Meningitis E. coli
APEC Avian Pathogenic E. coli
ETEC Enterotoxigenic E. coli
VTEC Verocytotoxigenic E. coli CDEC Cell Detaching E. coli CDTEC Cytolethal Distending E. coliNTEC Necrotoxigenic E. coli
AEEC Attaching-Effacing E. coliEIEC Entero-invasive E. coliEAEC Enteroaggregative E. coli DAEC Diffusely-adherent E. coli
Pathogenic strains of Escherichia coli
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Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) strains producing attaching/effacing lesions (AE)
Verocytotoxigenic Escherichia coli (VTEC) strains producing only Shiga toxins (Stx)
Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) strains producing Stx and AE lesion similar to O157:H7 E. coli causing haemorrhagic enterocolitis
EPEC, VTEC and EHEC
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Production in the intestines Crossing of the epithelium through the enterocytes Reach the blood stream Active in vivo on the endothelial cells of the blood vessels Stop the protein synthesis in the target cells Oedemas and haemorrhages
Shiga toxins
Attachment to the microvilli of the enterocytes Injection of bacterial effectors into the enterocytes Re- and dis-organization of the enterocyte cytoskeleton Effacement of the microvilli of the enterocytes Inflammatory reaction with cell infiltration, oedema of the mucosa and loosening of the tight junctions
Attaching/Effacing lesion
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- hommes• Infection asymptomatique• Entérocolite: diarrhée• Entérocolite hémorragique: diarrhée abondante et hémorragique • Syndrome hémolytique urémique • Syndrome purpura thrombotique thrombocytopénique
- bovins• veaux (jusqu’à 3 mois): diarrhée • adultes: portage asymptomatique
- autres ruminants: portage asymptomatique - autres espèces : de manière anecdotique
Pathologies des EHEC
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Pathologies des EHEC
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young calves humansadult ruminants
EHEC
Epidemiology of EHEC
EHEC ??
?
? ?
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Ruminants Humans
Meat, milk
Direct contacts
Intestinal content, faeces Dung, manure
Soils Waters
Vegetables, fruits Faeces
Swimming waters
Drinking water
? ?
Epidemiology of EHEC
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Enterohemorrhagic [EHEC] /Verotoxigenic [VTEC]
Escherichia colien production primaire
Dr Hein Imberechts
Laboratoire Nationale de Référence pour les E. coli zoonotiques, santé animale
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Contenu
• Définitions• Clinique• Virulence des VTEC• VTEC chez les ruminants• Le diagnostic• Programmes officiels, monitoring• Mesures• Portage de VTEC en Belgique et en
Europe
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Définitions
• VTEC: produisent vérocytotoxines (VT), ou « Shiga toxins » (Stx) [voir Shigella dysenteriae]
• EHEC– VTEC considéré très pathogène pour
l’homme– Mais: pas toujours HUS, HC (maladie grave)
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Définitions
• E. coli O157– Non-O157: e.a. O26, O91, O103, O111, O145
• Typique – atypique: réfère à la production des lésions A/E et (ou) la présence du plasmide EHEC
• E. coli zoonotiques - autres VTEC– Problème de diagnostic
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Clinique
• UE: 1.2 cas par 100.000 habitants (EFSA, 2005)
• Infection– Aliments contaminés– Eaux– Contact direct & indirect: ruminants infectés– Contact avec personnes infectées
• Clinique– HUS, HC, BD– Diarrhée, mal de ventre, sans symptômes
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Virulence
• Facteurs de virulence– Toxines Stx1, Stx2– Adhésines Eae– Locus of Enterocyte Effacement– Plasmide, Ehx (marqueur de virulence)– Autres
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LEE locus
Nataro and Kaper 1998
Virulence
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Virulence
• Stx: encodé par phage, donc pas stable
• Variants
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Virulence
• Séropathotype: combination de sérotype, stx subtypes, présence des facteurs de virulence et association avec maladie chez l’homme– Seropathotype A strains (VTEC O157) have a high relative
incidence, commonly cause outbreaks and are associated with HUS
– Seropathotype B strains (O26:H11, O103:H2/NM, O111:NM, O145:NM, O121:H19) have a moderate incidence and are uncommon in outbreaks, but were associated with HUS
– Seropathotype C strains (O91, O104 and O113 all of H-type 21) are associated with HUS, but these strains were of low incidence and rarely caused outbreaks
– Seropathotypes D and E are not HUS-associated and are uncommon in man or found only in non-human sources
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Virulence
• « Deux lignées » de VTEC O157; une plus associée avec maladie chez l’homme
• Variants de Stx & pathologie
• Conclusion: à l’heure actuelle, on ne peut pas identifier une souche pathogène pour l’homme
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VTEC chez les ruminants
• VTEC et diarrhée– Souvent stx1
• VTEC sans signes cliniques
• Implications pour le diagnostic et le monitoring
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Le diagnostic
• Isolement E. coli O157– mTSB+novobiocine; IMS (DynaBeads); CT-
SMAC; agglutination• Cefixime Tellurite Sorbitol MacConkey• Méthode normalisée et validée
(ISO 16654)
• Autres – En développement– Détection moléculaire: gènes appartenant à
plusieurs souches
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Le diagnostic
• Confirmation par sérotypie – Antigène O: LPS, sucres– Antigène H: flagelles, protéines– Agglutination
• Confirmation par biochimie (O157) -glucoronidase (négative)– Sorbitol (fermentation lente)
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Le diagnostic
• Confirmation par PCR– Gènes: facteurs de virulence – Polymorphismes
• Vérotoxines Stx1, Stx2• Adhésine Eae (, , , …)• Protéines du LEE
• Typage (tracing)– PFGE: génome– Stx1, Stx2– Phage
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Le diagnostic
• Tests sérologiques (ELISA)– Anti-O157– Anti-Stx– Anti-Eae
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Programme …
• … officiel en production primaire– Il n’y en a plus depuis 2005
• Avant 2005– Détection à l’abattoir– Tracing back de la ferme d’origine (Sanitel)– Echantillonnage
• 20% entre 6 mois et 2 ans, aliment, poussière• PCR
– Mesures d’hygiène sur la ferme
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Programme
• Site de colonisation ?– Echantillonnage spécifique ?
• En fonction de – la nourriture– la saison– …
• Plusieurs souches sur une exploitation
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Monitoring
• Données comparables ? Evolution ?• Infections chez l’homme & détection de VTEC
pathogènes:– la population animale– les carcasses et viande à l’abattoir– les échantillons environnementaux qui peuvent être
contaminés par matière fécale et eaux– ready to eat foods qui peuvent être contaminés par
matières fécales
• Sérotypes: E. coli O157, O26, O91, O103, O111 et O145
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Monitoring
• Recommandation EFSA– Caractériser toute VTEC (animaux, aliments,
environnement), par méthodes harmonisées• Sérotypage • Lysotypie (VTEC O157)• Typage gènes vtx et eae
– Typage moléculaire• PFGE
– Collection centralisée et comparaison des résultats
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Monitoring chez les animaux
• L’isolement de VTEC indique la présence ubiquitaire dans l’environnement
• Bovins > moutons & chèvres > animaux de compagnie, faune sauvage, … >>> porc, volaille, …
• Tenir compte des différences locales– La population– Les pratiques agricoles– La consommation alimentaire, …
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Monitoring chez les animaux
• Problème: l’excrétion de VTEC O157 – Transitoire– Différences quantitatives– Influencée par l’âge et l’alimentation
• Monitoring est lourd et cher
• Utile en cas de risque, p.ex. ferme ouverte au grand public
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Mesures
• GHP à l’abattoir et à l’atelier de découpe, monitoring pour indicateurs comme Enterobacteriaceae et E. coli
• Procédures HACCP pour aliments susceptibles à être contaminés
• Monitoring des bovins, de la ferme, de l’aliment en cas d’études spécifiques
• Recommandation: d’abord E. coli O157, puis d’autres sérotypes, avec des méthodes harmonisées
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Portage de VTEC
• EFSA: zoonoses, BIOHAZ• http://www.efsa.europa.eu/EFSA/
• Enternet• http://www.hpa.org.uk/hpa/inter/enter-net_menu.ht
m
• PubMed• http://www.promedmail.org/
• AFSCA, Zoonotic agents in BE• http://www.favv.be/home/pub/doc07/Report_TS_2
005_S.pdf
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Portage de VTEC
• Belgique– Peu de données, sauf aux abattoirs
• Europe– Chiffres sont confus
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Escherichia colientéro-hémorragique
chez l’homme
Christiane Duchesnes Janvier 2008
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Escherichia coliPathotype: EHECSérotypes: O157:H7; le plus fréquent
O26, O103, O111, 0145, …
Facteurs de virulenceadhésion aux entérocytes et effacement des microvillositéssécrétion de toxines: Stx1 et Stx2
RéservoirTube digestif de l’homme et de l’animal (ruminants)
ContaminationIngestion: aliments contaminés par MF, crus ou peu cuits
(hamburgers, produits à base de lait cru, légumes, …)
IncidenceVarie selon le pays; <2 cas/100 000 hab/an
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Physiopathologie
EHEC
Toxine
www.cdc.gov/ncidod/eid/vol8no5/01-0385.htm.
Microangiopathies(surtout rénales)
Diarrhée
Tube digestif
séro-sanglante
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Tableau clinique Tableau cliniqueDiarrhée sérosanglanteColite hémorragiqueDouleurs abdominalesPeu de fièvreCas groupés souvent liés à la restauration rapide
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Traitement
Risques ++: enfants <3ans; adultes de >65 ans10% Syndrome Hémolyse-Urémie (SHU)
(incidence: 0,5 cas/100000 enfants<15ans /an)Rare Purpura thrombotique thrombocytopénique (PTT)
RéhydratationAntibiotiques à éviter
Complications
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MICROANGIOPATHIE (lésions endothéliales) INFLAMMATION Fragmentation des GR dans les lésions: anémie
hémolytiqueHb basse, réticulocytes et schizocytesPâleur, (sub)ictère
MICROTHROMBIThrombopénie par consommation, pétéchies,
purpura INSUFFISANCE RENALE AIGUË
Oligo-anurie, oedèmes, prise de poids, hypertension artérielle, urémie
SHU (= HUS)
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¾ cas évoluent vers la guérison< 5% mortalitéSéquelles possibles:
IRCHTA
SHU traitement
SHU évolution
Symptomatique:Dialyse péritonéale
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Evaluation du risque lié aux VTEC et E. coli O157
entérohémorragiquesdans les aliments en Belgique
Georges DaubeUniversité de Liège
Faculté de Médecine Vétérinaire
Microbiologie des Denrées Alimentaires
Sart-Tilman, bât. B43bis
4000 Liège
tél. 04-366.40.15 fax 04-366.40.44
http://www.mdaoa.ulg.ac.be/
Avec l’aide de :
Katelijne Dierick, ISP
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Plan de l’exposé• Introduction
– Evaluation des risques
– Méthodes de recherche dans les aliments
• Appréciation du risque dans la filière « viande »– Identification du danger
– Evaluation de l’exposition
– Caractérisation du danger
– Caractérisation du risque
• Mesures de prévention dans la filière « viande »
• Problématique des critères microbiologiques
• Conclusions
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Evaluation des risques partie intégrante de l’analyse des risques
• Analyse des risques
• Evaluation des risques Evaluation scientifique de la probabilité
d’occurrence et de la gravité d’effets néfastes pour la santé résultant de
l’exposition de l’homme à des dangers présents dans les aliments.
Evaluation des risques
Gestion des risques
Communication des risques
1. Identification du danger
2. Evaluation de l’exposition
3. Caractérisation du danger
4. Caractérisation du risque
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43
Principes des méthodes de recherche
Pas de méthodes simples, standardisées et validées pour la recherche de VTEC non-O157 dans les aliments d’où pas de statistiques exploitables
Aucune méthode disponible pour les dénombrements
Pistes envisagées (recherches en cours)- séparation immuno-magnétique basée sur le sérotype- Besoin de milieux d’isolements spécifiques- Besoin de confirmer la virulence
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44
Principes des méthodes de recherche
Propriétés biochimiques des E. coli O157:H7 semblables aux autres E. coli excepté:
- Résiste au tellurite et au céfixime- Ne fermente pas le sorbitol en 24 h- Ne produit pas de β-glucuronidase
La sélection et la différentiation biochimique sont basées sur ces caractéristiques
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45
Méthode-type de recherche de VTEC O157 dans les aliments• Préenrichissement • Enrichissement • (Détection immunologique)• Immuno-concentration (VIDAS ICE ou IMS-
Dynal)• Isolement• Identification biochimique• Agglutination• Confirmation des facteurs de virulence par PCR
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46
Prˇenrichissement : 25g ou 25ml ˇchantillon 225 ml mTSB-N 6 - 7 h 42C 1C
Enrichissement : CT Mac Conkey Tube de 9 ml 17 - 19 h 37C 1C
Traitement thermique 15 min 100C
Barrette VIDAS ECO Test VIDAS ECO
- +
Fin VIDAS ICE
1ml ml
1ml ml
500µl µl
500 µl
Schéma - Méthode Vidas ECO (1)
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47
Isolement CT-SMAC 18 Š 24 h 37C 1C
sorbitol - sorbitol + (incolores) (rouges) 5 col
Identification Agglutination fin Latex O15
- +
Schéma - Méthode Vidas ECO (2)
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48
Concentration d’E. coli O157 par capture par des billes
immunomagnétiques
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49
GN 24h 37C
Latex O157
Fluorocult
Ou autre milieu spˇcifique
API ID 32E
CR VUB
Schéma - Méthode Vidas ECO (3)Confirmation
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50
Centre de référence: UZ-BrusselsDr. Denis Pierard
• Détection des gènes codants pour les facteurs de virulence- Vérocytotoxines (shigatoxines stx1 et 2)
- Entérohémolysine
- eaeA (intimine)
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51
EVALUATION EVALUATION QUANTITATIVE DU QUANTITATIVE DU
RISQUE DANS LA FILIERE RISQUE DANS LA FILIERE VIANDEVIANDE
![Page 52: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/52.jpg)
52
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53
1. Identification du danger 1.1. EHEC O157 terminologie
• Escherichia coli : espèce type du genre Escherichia appartenant à la
famille des entérobactériacées.
• VTEC-STEC : E.coli vérocytotoxinogène ou producteurs de toxine « Shiga »
– souches produisant des toxines actives sur les cellules Véro (toxines VT ou stx).
• EHEC : E.coli entérohémorragique.
– E.coli vérocytotoxinogène qui possède les mêmes propriétés cliniques (SHU,
entérocolite hémorragique), épidémiologiques et pathogéniques (propriétés
attachantes/effaçantes, plasmide 60 MDa) que le clone épidémique O157:H7.
• EHEC O157 : E.coli entérohémorragique de sérotype O157. A l’origine de la
définition du groupe EHEC et manifestant la plus forte vitulence et le plus fort
potentiel épidémique.
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54
1.2. Physiologie (1)
• Température:– Tmin : 6-7°C; Topt : 40°C; Tmax : 45,5°C– D55°C : 20; D60°C : 3; D65°C : 0,36; (recommandation 70°C 2’)– Pas ou peu d’effet de la congélation
• pH:– pHmin : 4,2 (HCl) - 5,5 (Ac. acétique); pHopt : 6,9;
pHmax : 9,4– Résistance/tolérance à l’acidité (adaptation)
• Activité de l’eau (NaCl):– aWmin : 0,953; aWopt : 0,995
• Conditionnement:– Peu ou pas d’effet du sous-vide ou de l’atmosphère modifiée
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55
1.2. Physiologie (2)
• Additifs:– Nitrites: efficace à pH < 5,5– Acides organiques– Bactériocines– Phosphates
• Rayonnements:– ionisation– RX– UV
• Hautes pressions• Ozone
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56
1.4. Symptomatologie
Guˇrison sans sˇquelleen moins de 10 jours
(90 95%)
Asymptomatiqueou
diarrhˇe
Guˇrisonsans sˇquelle
Insuffisance rˇnalechronique ...
Mortalitˇ(3 5 % des enfants)
Syndrome hˇmolytique urˇmique(5 10%)
(enfants < 5 ans, personnes ‰gˇes)
Entˇrocolitehˇmorragique
Ingestion d' EHEC O157
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57
Résultat des surveillance VTEC en Belgique chez l’homme (2000-02)
Serotype Freq %
O157 4,018 65.3
O26 358 5.8
O103 347 5.6
O91 208 3.4
O145 109 1.8
O111 76 1.2
Serotype Freq
%
O146 60 1.0
O128 56 0.9
O113 39 0.6
O8 27
0.4
Other 859 14.0
Total 6,157 100.0
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58
1.5. Mode de transmission
• Indirect– Consommation d’aliments contaminés :
- denrées alimentaires d’origine animale (bovine) :
« hamburgers » insuffisamment cuits (USA), salami, lait cru,
produits laitiers non pasteurisés …
- denrées alimentaires d’origine végétale
– Consommation d’eau de boisson contaminée.
– Baignade, pâture contaminée.
• Direct– Transmission directe de l’homme à l’homme ou de
l’animal à l’homme.
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59AFSSA 2003
Modes de transmission
![Page 60: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/60.jpg)
60AFSSA 2003
Aliments associés
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61
Prévalence EHEC O157 en Belgique (source ULg, RUG, AZ-VUB et IEV)
Coprocultures humainesCoprocultures humaines: : 1% EHEC et 0,2 % EHEC O157; lysotypes variés.1% EHEC et 0,2 % EHEC O157; lysotypes variés.
Coprocultures bovines à l’abattoir Coprocultures bovines à l’abattoir : : 6% EHEC O157 (1998-99).6% EHEC O157 (1998-99).
Carcasses de boeufCarcasses de boeuf: : en 1997 (400 cmen 1997 (400 cm22): 9/6010 (0,15 %); ): 9/6010 (0,15 %); en 1999 (1.600 cmen 1999 (1.600 cm22 ): 16/1620 (1 %); en 2002 (1.600 cm ): 16/1620 (1 %); en 2002 (1.600 cm22): 13/1215 (1,1%)): 13/1215 (1,1%) en 2000 (1.600 cmen 2000 (1.600 cm22): 7/1501 (0,5%); ): 7/1501 (0,5%); en 2003 (1.600 cmen 2003 (1.600 cm22): 10/1479 ): 10/1479
(0,7%)(0,7%) en 2001 (1.600 cmen 2001 (1.600 cm22): 13/1388 (0,9%); en 2004 (1.600 cm): 13/1388 (0,9%); en 2004 (1.600 cm22): 18/1319 (1,4%)): 18/1319 (1,4%)
Découpe de boeuf (25g)Découpe de boeuf (25g) : : en 2002: 0/222 (0%); en 2003: 2/285 (0,7%); en en 2002: 0/222 (0%); en 2003: 2/285 (0,7%); en 2004: 2/244 (0,8%)2004: 2/244 (0,8%)
Viande hachée de boeuf (25g)Viande hachée de boeuf (25g) : : en 1999: 1 / 984 (0,1%); en 2000: 1/487 en 1999: 1 / 984 (0,1%); en 2000: 1/487 (0,2%); en 2001: 0/298 (0%); en 2002 : 0/297 (0%); en 2003 : 5/298 (1,7%); en (0,2%); en 2001: 0/298 (0%); en 2002 : 0/297 (0%); en 2003 : 5/298 (1,7%); en 2004 : 1/332 (0,3%)2004 : 1/332 (0,3%)
Autres viandes (veau, porc, volailles, lapins) Autres viandes (veau, porc, volailles, lapins) : : 0 EHEC0 EHEC O157 /1.500 O157 /1.500
Lait cru :Lait cru : 0/123 (2006);0/123 (2006); Fromage au lait cru de vache :Fromage au lait cru de vache : 5/271 (1,8%) 5/271 (1,8%) (2006)(2006)
![Page 62: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/62.jpg)
62
Evaluations internationales
![Page 63: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/63.jpg)
63USDA 2001
Evaluation du risque « viande hachée de bœuf »
![Page 64: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/64.jpg)
64
2. Evaluation de l’exposition Principales étapes à envisager
8 . C o n s o m m a tio n
7 . S to c k a g e , c o n d it io n n e m e n t e t d is tr ib u t io n
6 . H a c h a g e
5 . S to ck ag e a p rès d éco u p e
4 . D é c o u p e e t c o n d it io n n e m e n t
3 . R efro id issem en t e t s to ck ag e d es carcasse s
2 . A b a tta g e
1 . E le v a g e
Contamination
Contamination croisée
Multiplication
Dilution
Destruction
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65
2.1. Elevage
• La prévalence d’exploitations positives est très
variable
• La prévalence intra-exploitations est aussi très
variable
• Le type de bétail (veaux, taurillons, vaches)
• La dynamique temporelle dans les exploitations (effet
alimentation, saison, etc.)
• L’excrétion à l’abattoir et sa dynamique temporelle
sont similaires à celles observées dans les élevages
![Page 66: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/66.jpg)
66
2.1. Elevage: données belges
• Informations manquantes
- Collecter des informations concernant le type
d’élevage et d’alimentation, l’âge des animaux,
les saisons, les probiotiques, les
immunisations et à partir de celles-ci en
évaluer le risque différentiel.
- Réaliser des études concernant le nombre de
EHEC O157 / gr de matières fécales.
![Page 67: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/67.jpg)
67
2.2. Abattoir: données belges
• Prévalence de carcasses contaminées sur 1.600 cm2 par EHEC O157 :
1,01 % (n = 8.522)
• Prévalence de carcasses contaminées sur 400 cm2 par EHEC O157 :
0.15 % (n = 6.010)
• Nombre de EHEC O157 :
- 1 ufc/cm2 et 200 ufc/cm2.
- 82% des + avec < 1 ufc/400 cm2.
• Nombre d’E. coli /cm2 :
95% < 100 ufc / cm2.
90% < 10 ufc / cm2.
70% < 1 ufc / cm2.
45% < 1 ufc / 10 cm2.
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68
2.2. Abattoir: données belges
• Informations manquantes
- Préciser les niveaux de contamination
- Investiguer les facteurs de contamination croisée
en fonction du type d’abattoir.
- Tenir compte de l’influence des fortes
contaminations fécales accidentelles à l’abattoir.
![Page 69: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/69.jpg)
69
2.3. Découpe et hachage: données belges
• La prévalence des morceaux de découpe contaminés par EHEC O157 est faible : 0,5% (n = 751).
• La prévalence de EHEC O157 dans la viande hachée de bœuf est de 0,3% (n = 2696).
• 75 % des viandes
hachées de boeuf
contiennent
< 100 cfu/g
![Page 70: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/70.jpg)
70
2.3. Découpe et Hachage: données belges
• Informations manquantes
- Préciser l’importance relative des filières belges de
production.
- Déterminer en termes d’augmentation, de stabilisation ou de
diminution de EHEC O157 l’influence des pratiques
suivantes :
– L’utilisation ou non de la congélation
avant le hachage.
![Page 71: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/71.jpg)
71
2.3. Découpe et Hachage: données belges
– Le travail à partir de petits ou
gros morceaux de découpe.
– Le nombre d’animaux différents intervenant
au sein d’un même lot de hachage.
– L’utilisation ou non de chutes
de découpe en boucherie.
– La possibilité de contamination d’origine
humaine différente d’une filière à l’autre.
![Page 72: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/72.jpg)
72
2.4. Stockage, Conditionnement et Distribution: données belges
• Température moyenne / filet américain / supermarchés : 5 °C. • Température / comptoirs réfrigérés : 70% supermarchés :
t° 7°C.• DLC : 48 heures.• Conditionnement : barquette en frigolite ou en plastique avec
film perméable à l’air.• Taille du conditionnement : 150 - 200 grs, 500grs.• pH du filet américain préparé : 5 - 5.35.
![Page 73: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/73.jpg)
73
2.5. Consommation: données belges
• Le % de conditionnements de viande hachée contaminés : 0 EHEC O157 sur 194 échantillons.
• La quantité de filet américain consommé / an : 2 kg 320.• La consommation de hamburgers insuffisamment cuits est
ignorée• Le nombre estimé de consommateurs de filet américain:
5.329.485.• La quantité estimée de filet américain consommé / repas : 150
g.• Le nombre moyen de repas de filet américain par an : 15.
![Page 74: 1 Service de Bactériologie Département des Maladies infectieuses et parasitaires Faculté de Médecine Vétérinaire Jacques Mainil Les souches entérohémorragiques](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062312/551d9da7497959293b8d84e0/html5/thumbnails/74.jpg)
74
3. Caractérisation du dangerRelation dose-réponse
• Dose infectieuse faible +/-50 cellules ingérées
4. Caractérisation du risque: données belges
Viande hachée de bœuf 0.30 % EHEC O157 +
Nombre de repas / an 15
Population globale 10.192.264
42 cas de SHU (=1996)
4 cas mortels
Carcasses de bœuf 1,01 % EHEC O157 +
- 0,82 % < 1 ufc/400 cm2
- 0,18 % > 1 ufc/400 cm2
Taille de la portion consommée par repas
150 g
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4. Caractérisation du risque: données belges
Classes Population %consom- mateurs
Nbre consommateurs
Nbre exposés
Nbre shu
Nbre décès
< 5 ans 584.946 14% 81.892 245 24 2 5-65 ans
7.928.727 52% 4.122.938 12.368 ? ?
>65 ans
1.678.591 67% 1.124.655 3.374 ? ?
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PREVENTION DU RISQUE PREVENTION DU RISQUE DANS LA FILIERE VIANDEDANS LA FILIERE VIANDE
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Points essentiels à maîtriser• Elevage : portage, niveau de portage.
• Abattage : prévalence de carcasses contaminées, niveau de contamination.
• Découpe, hachage : prévalence et niveau de
contamination en jouant sur congélation, quantité et
origine de la viande de découpe.
• Stockage, conditionnement et distribution : respect
strict de la chaîne du froid.
• Consommation : adopter le mode de consommation,
respect de la chaîne du froid.
• Communication : stratégies de prévention : conseils
pour acteurs de la filière et populations à risque.
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Points essentiels à maîtriser• Traitement des carcasses avec fortes
contaminations fécales:– Parage des contaminations visibles– Déclassement des « accidents d’éviscération »– Perte d’agrément pour « mauvais » abattoirs
• Tests systématique de carcasses pour « filet américain »
Réduction du niveau de contamination Réduction du niveau de contamination par EHEC O157 en début de filièrepar EHEC O157 en début de filière
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Points essentiels à maîtriser• Elevage : portage, niveau de portage.
• Abattage : prévalence de carcasses contaminées, niveau de contamination.
• Découpe, hachage : prévalence et niveau de
contamination en jouant sur congélation, quantité et
origine de la viande de découpe.
• Stockage, conditionnement et distribution : respect
strict de la chaîne du froid.
• Consommation : adopter le mode de consommation,
respect de la chaîne du froid.
• Communication : stratégies de prévention : conseils
pour acteurs de la filière et populations à risque.
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Points essentiels à maîtriser
• Absence de consommation de viande crue de bœuf par les populations à risque:
– Enfants moins de 15 ans
– Personnes âgées
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Critères microbiologiques
Pas de critères dans le règlement (CE) N°2073/2005
Limites d’actions de l’AFSCA pour contrôles officiels:
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Critères microbiologiques
Avant de fixer des critères européens (DG SANCO)
Avis 2007 de l’European Food Safety Authority (EFSA):- Priorité = VTEC O157- Surveillance abattoir- Surveillance chute de
découpe- Méthodes à développer pour
VTEC non-O157
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Conclusion• Bonne connaissance de la prévalence, du niveau de
contamination d’ E.coli O157 à tous les niveaux de production du filet
américain. • Comment établir un lien entre ces différentes étapes ?
- Modélisation mathématique probabiliste.- Manque d’experts indispensable pour définir les données adéquates à introduire dans le modèle. - Besoin de données quantitatives.
• Prévention de EHEC au sein d’un aliment cru est difficile.- Mise en place de programmes d’assurance de sécurité alimentaire à chaque étape de production dont surtout l’abattoir: BPH - HACCP- Information du consommateur.
• Besoin de critères uniformes européens