13 optica curs biochimie

8/17/2019 13 OPTICA CURS BIOCHIMIE

1/82

OPTICA


2/82


3/82


4/82


5/82


6/82


7/82


8/82


9/82


10/82


11/82


12/82


13/82


14/82


15/82


16/82


17/82


18/82


19/82


20/82


21/82


22/82


23/82


24/82


25/82


26/82


27/82


28/82


29/82


30/82


31/82


32/82


33/82


34/82


35/82


36/82


37/82


38/82


39/82


40/82


41/82

Metode spectrometrice

de analiza


42/82

• Radiaţia electromagnetică

E – energia (J)h – constanta lui Planck (6,625 x 10-34 J – !rec"en#a ($%)& – lungi'ea e un (')c – "ite%a lu'inii

− nu'r e une (c'−1)*

chhchE ⋅υ⋅=λ

=υ=

υ


43/82

Domeniile şi subdomeniile spectrului electromagnetic

Domeniuspectral

Subdomeniispectrale

Interval delungime de

undă (λ)

Interval defrecvenţă, ν (Hz)

ip detranziţie energetică

!aze gama < 0,05 Å > 6,0·1019 Nucleară

!aze " 0,05–100 Å 3,0·1016 –6,0·1019 Electronică (electroni interiori)

#ltraviolet$i vizibil

#ltraviolet %ndepărtat

(de vacuum)

10–180 nm 1,·1015 –3,0·1016Electronică (electroni !in "traturileinterne mi#locii)

#ltravioletapropiat

180–360 nm 8,6·101$ –1,·1015 Electronică (electroni !e %alen&ă)

&izibil 360–80 nm 3,9·101$ –8,6·101$ Electronică (electroni !e %alen&ă)

Infraro$u

Infraro$u apropiat 0,8–',5 m 1,'·101$ –3,9·101$ i*ra&ia +i rota&ia moleculelor

Infraro$ufundamental

',5–50 m 6,0·101' –1,'·101$ i*ra&ia +i rota&ia moleculelor

Infraro$u %ndepărtat

50–1000 m 3,0·1011 –6,0·101' i*ra&ia +i rota&ia moleculelor

'icrounde 1–300 mm 1,0·109 –3,0·1011ota&ia moleculelor-./in electronic n cm/ ma2netic

#nderadio

> 300 mm < 1,0·109 ./in nuclear n cm/ ma2netic


44/82

+oalit#ile e o#inere a in!or'a#ieisectrochi'ice se ot clasi.ca /n atru

categorii• absorbţie,

• emisie,

• luminiscenţă• metode neabsorbtive


45/82

Schema de principiu a metodelor de a) absorbţie, b) emisie şic) luminiscenţă

Po PT

a!ia&ieinci!entă

a!ia&ieemer2entă

Proba

2

1

0

E1 = h 1

E2 = h 2

E21 = h 21

2

1

0

E2 = h 2

h

E1 = h 1

E2 = h 2

E21 = h 212

1

0

a)

b)

c)Radiaţie de

excitare

uminiscenţă

!adiaţie

transmisă

Proba

Ener2ietermică

h

h

h

Proba

E1 = h 1


46/82

Sistem demăsurareşi afşaj

Fotodetector

Sursade

radiaţie

Compartiment probă

Selector deln!ime de

undă

Fluorescenţă Fos!orescenţă

Di!u"ie #mprăştiere

Sistem demăsurareşi afşaj

Fotodetector Sursă şiprobă

Selector deln!ime de

undă

$misieC%emiluminiscenţă

Sursăde

radiaţie

ProbăSelector

de lungimede undă

Fotodetector Sistem demăsurareşi afşaj

Absorbţie


47/82

Legea Lambert-Beer

"

l

PO PT

lc A ε =

1003

34

5

46 =

4

5

3

3lo24lo27 =−=


48/82

Schema bloc a unuispectrofotometru mono-fascicul

obturator

Sursa deradiaţii

Sursa deradiaţii

Monocromator sau filtru

Monocromator sau filtru

Soluţia deanalizat

Soluţia deanalizat

Sistem dedetecţie şi măsură

Sistem dedetecţie şi măsură

Afişaj Afişaj

Soluţia dereferinţă

Soluţia dereferinţă


49/82

Schema bloc a unuispectrofotometru dublu-fascicul

disc

selector Sursa deradiaţii

Sursa deradiaţii

Monocromator Monocromator

ProbaProba

Sistem de detecţieşi măsurăSistem de detecţieşi măsură

Afişaj Afişaj

ReferinţaReferinţa


50/82

licatii

• ro'o!or

• ruare auxocro'a

• o%are gluco%a, roteine totale

• tuii cinetice en%i'atice

• *


51/82

789:;+E89E


52/82


53/82


54/82


55/82


56/82


57/82


58/82


59/82


60/82


61/82


62/82


63/82


64/82


65/82


66/82


67/82


68/82


69/82


70/82


71/82


72/82


73/82


74/82


75/82


76/82


77/82


78/82


79/82


80/82


81/82


82/82

13 optica curs biochimie

Documents