141 - Άλλη μια απομόνωση dna
TRANSCRIPT
Γουρζής Στάθης – Φυσικός ΥΣΕΦΕ 2012 - 2013 Εργαστήρια Φυσικών Επιστημών Νυδριού Λευκάδος
141 - Άλλη μια απομόνωση DNA.
Το να « βγάλουμε » DNA από φυτικά κύτταρα, και μάλιστα σε ελάχιστο χρόνο,
είναι κάτι που έχουμε ξαναπροσπαθήσει στο παρελθόν …
Στο σημερινό πείραμα θα προσπαθήσουμε
με κάποια καινούργια υλικά αλλά και νέες διαδικασίες …
Παίρνουμε λοιπόν ένα πορτοκάλι και το νυστέρι …
… τον μαγνητικό αναδευτήρα και έναν αποχυμωτή …
… οινόπνευμα μπλε, οινόπνευμα 93 % - 95 % περιεκτικότητα σε αιθανόλη και ισοπροπανόλη …
… υγρό απορρυπαντικό και αλάτι …
… νεράκι …
… καθώς και μερικά ποτήρια ζέσης, και μερικούς δοκιμαστικούς σωλήνες.
Ξεκινάμε, γεμίζοντας με νερό, ένα μεγάλο ποτήρι ζέσης …
… περίπου μέχρι τα 400 ml …
… και το τοποθετούμε στον μαγνητικό αναδευτήρα, τοποθετώντας ένα μεγάλο μαγνήτη μέσα του …
Προσθέτουμε μια ποσότητα υγρού σαπουνιού …
… με προσοχή, για να μην αφρίσει …
… και αρχίζουμε την περιστροφή του μαγνήτη …
… πάλι με προσοχή, για να μην αφρίσει το διάλυμα …
… που σημαίνει σε « χαμηλές » στροφές, περίπου στις 300 …
Κάτοψη του διαλύματος, ενώ ο μαγνήτης περιστρέφεται ...
… και πλάγια όψη του διαλύματος, ενώ η ανάδευση συνεχίζεται …
Προσθέτουμε, τώρα, μια κουταλιά αλάτι …
… ενώ το μίγμα αναδεύεται διαρκώς …
… και άλλη μια κουταλιά αλάτι …
… συνεχίζοντας την ανάδευση …
… και προσθέτοντας και λίγη θέρμανση, εδώ στους 150ο C, « ανεβάζοντας », προσεκτικά, και τις στροφές στις 500 …
Αφήνουμε το μείγμα να προετοιμάζεται …
… και κόβουμε το πορτοκάλι …
… με τέτοιο τρόπο, ώστε …
… να πάρουμε τη φλούδα …
… σε μερικά κομμάτια …
… για να τη προσθέσουμε στον αποχυμωτή …
… και να πάρουμε πολύ γρήγορα …
… το δείγμα που θα χρησιμοποιήσουμε.
Προσθέτουμε το πορτοκάλι στο μείγμα που έχουμε προετοιμάσει …
… και αναδεύουμε έντονα …
… για μερικά λεπτά της ώρας, ( 2 – 3 ) .
Μοιράζουμε πρώτα στα μεγάλα ποτήρια ζέσης …
… και κατόπιν μοιράζουμε στα μικρά ποτήρια ζέσης …
… ενώ κάνουμε το ίδιο και στους μεγάλους δοκιμαστικούς σωλήνες .
Βγάζουμε από την κατάψυξη τις τέσσερεις αλκοόλες μας …
… και προσθέτουμε με προσοχή στους δοκιμαστικούς σωλήνες, ώστε να μην έχουμε ομογενές μείγμα …
Μόλις 20 λεπτά μετά την έναρξη του πειράματος,
και αμέσως μετά την προσθήκη της αλκοόλης,
παρατηρούμε το DNA της φλούδας του
πορτοκαλιού να ανέρχεται μέσα από το στρώμα
της αιθυλικής αλκοόλης με περιεκτικότητα 93 % … Οινόπνευμα
93 %
… όπως παρατηρούμε αμέσως, και μέσα από το στρώμα της αιθυλικής αλκοόλης
με περιεκτικότητα 95 % …
Οινόπνευμα 95 %
… αλλά και αμέσως μετά την προσθήκη της ισοπροπανόλης …
Ισοπροπανόλη
Το μπλε οινόπνευμα μας δίνει τα πιο ωραία αποτελέσματα …
Μπλε Οινόπνευμα
Μετά από 45 λεπτά περίπου …
Ισοπροπανόλη
Οινόπνευμα 95 % Οινόπνευμα
93 %
Μπλε Οινόπνευμα
… τα αποτελέσματα είναι, πλέον, πολύ διακριτά …
Ισοπροπανόλη Οινόπνευμα
93 % Οινόπνευμα
95 % Μπλε
Οινόπνευμα
Μπλε Οινόπνευμα
Το νέφος του DNA έχει ξεχωρίσει …
… και μας δίνει πολύ ωραίες εικόνες …
… όπως αυτή …
Προσθέτουμε, στη συνέχεια, μπλε οινόπνευμα και στα δύο ποτήρια ζέσης …
… και παρατηρούμε την διαδικασία …
… και βλέπουμε τον διαχωρισμό των φάσεων του μείγματος …
Κάνουμε το ίδιο και με το οινόπνευμα περιεκτικότητας 93 % …
… και παρατηρούμε την « άνοδο » …
… και τη συμπύκνωση του DNA …
Κάνουμε το ίδιο και με το οινόπνευμα περιεκτικότητας 95 % …
… και παρατηρούμε τον διαχωρισμό …
Την επόμενη μέρα …
… ελέγχουμε πάλι τα δείγματά μας …
Ισοπροπανόλη
Οινόπνευμα 95 %
Οινόπνευμα 93 %
Μπλε Οινόπνευμα
Οινόπνευμα 93 %
Οινόπνευμα 95 %
Ισοπροπανόλη
Μπλε Οινόπνευμα
Ισοπροπανόλη
Ισοπροπανόλη
Οινόπνευμα 93 %
Οινόπνευμα 93 %
Οινόπνευμα 95 %
Οινόπνευμα 95 %
… τέλος παρουσίασης.