1er p. gp-histo modificada

Universidad Nacional San Luis Gonzagade Ica Facultad de Medicina Humana

Universidad Nacional San Luis Gonzaga Facultad de Medicina HumanaDaniel Alcides Carrin

Universidad Nacional San Luis Gonzaga Ica

Facultad de Medicina Humana

Daniel Alcides Carrin

HISTOLOGIA HUMANA

GUIA DE PRCTICAS

PROFESORES

DR. ROLANDO URIA LOPEZ DR. DANIEL LEON ARANDA DR. JOSE JIMENEZ APARCANA DR. MANUEL INJANTE INJANTE ALUMNO : _______________________________________

GRUPO :________

ICA-PERU

____________________________________________________________________

Lamina No. 1

Titulo : Corte Histolgico con artefactosColoracin : Hematoxilina Eosina

Los estudiantes traern a la prctica: 1 paquete de algodn de 25 gramos, un huevo cocido, una naranja, una hoja de bistur No. 21 o 22, 15 cm. de ligadura de jebe

Procedimiento:

1.-Se fija con formol al 10% por un lapso mnimo de 6 horas y luego se le somete a un lavado en agua corriente.

2.-Formacin del bloque en parafina: a.-Deshidratar el tejido en una batera de alcoholes de concentracin creciente de 70 hasta 100 grados,6 horas en cada uno. b.-Pasar el tejido por una batera de xilol, el que ocupara los espacios dejados por el agua ,unos 3 baos. c.-Con la ayuda de la estufa a 55 grados ,se consigue que la parafina, con el xilol primero y luego la parafina sola penetren en el tejido, en el lapso de unas 3 horas. d.- Formacin del bloque: en un molde metlico o de papel se vierte parafina licuada. En el fondo se coloca el tejido ya procesado, que la solidifica y esta listo para ser cortado.

3.-Con la ayuda de un micrtomo con cuchilla de excelente filo, se procede a cortar el tejido a 5 micras de grosor.

4.-Obtenido el corte se extiende en agua tibia, se le recoge en portaobjeto impregnado en albmina de Meyer y se coloca en una estufa a 45 grados por 20 minutos.

5.-Coloracin con Hematoxilina-Eosina: a.-Desparafinizacion con dos baos de xilol. b.-Hidratacin del tejido en una batera de alcoholes descendentes, durante unos 3 minutos y luego sumergirlo en agua. c.-Coloracin con Hematoxilina: colorea el ncleo de color azul rojizo, en lapso de unos 8 minutos, el agua amoniacal y el acido clorhdrico al 1 % ,por espacio de unos segundos, hacen virar la hematoxilina a un azul mas estable. Lavar el exceso con agua corriente. d.-Coloracin con Eosina al 1% :Colorea el citoplasma y el nucleolo de un color rosado en el lapso de 1 minuto .Lavar de inmediato con agua corriente. e.-Deshidratar en una batera de alcoholes ascendentes, medio minuto cada uno. f.-Aclarar y diafanizar el tejido con dos baos de xilol. g.- Montaje: Cubrir el tejido con una laminilla con blsamo de Canad, sumergir en xilol y limpiar el excedente y la lamina quedara lista para ser observada al Microscopio.

Cuando todos los pasos indicados no se siguen con el suficiente cuidado o el tcnico no tiene la suficiente experiencia, los cortes histolgicos saldrn quemados, crudos, gruesos, arrugados, doblados, plegados ,rasgados, con grumos de colorante, con polvo, con pelos, con burbujas, etc. Todos estos errores de tcnicas histolgicas reciben el nombre de ARTEFACTOS.

Esquematice todos los pasos de la Tcnica Histolgica Estndar

Enfoque con el menor aumento y recorra metdicamente el preparado y observara que en esta lamina a propsito se han producido artefactos. As por defecto de extendido observara arrugas en cualquier zona ,dobleces en los bordes libres del tejido, pliegues por superposicin de dos o mas dobleces. Por defecto en la cuchilla del micrtomo pueden producirse desgarros ,que se reconocen fcilmente por sus bordes irregulares.Los dientes o melladuras de la cuchilla dejan en el tejido una huella clara e inconfundible que hay que aprender a reconocer.Es posible encontrar zonas mal coloreadas, algunas fallas en el proceso de fijacin o por error en el proceso de coloracin, pudiendo encontrarse adems grumos o precipitados de colorantes.Algunas laminas se encuentran contaminadas con materiales extraos entre los que se pueden reconocer fibras vegetales, pelos de animales de laboratorio, partculas de polvo, etc. Es fcil identificar estos elementos extraos porque generalmente se encuentran superpuestos en el preparado y moviendo el micromtrico aparecen en otro plano de enfoque.Cuando el montaje ha sido defectuoso se observan burbujas de diferentes tamaos ,que se les identifica por su contorno, generalmente doble y brillante(birrefringentes).

Aumento :_________________

Coloracin:________________ 1.-___________________________

2.-___________________________

3.-___________________________ 4.-___________________________

5.-___________________________ 6.-___________________________

7.-___________________________

8.-___________________________

Lamina No. 2

Titulo : Observacin de clulas aisladas. Clulas de descamacin de la mucosa oralColoracin : Hematoxilina-Eosina (H. E)

Procedimiento:Esta preparacin deber ser realizada por cada uno de los alumnos de la manera siguiente:1.-Recoleccin de clulas por raspado suave de la mucosa gingival. Para esta operacin puede usarse el borde de un portaobjeto con el que se recoge una porcin de clulas mezcladas con saliva y se procede inmediatamente a la extensin en el centro de otra lmina portaobjeto bien limpia.2.-Se deja secar unos segundos y se coloca la lamina en el fijador que en este caso es el alcohol ter (alcohol de 95 grados y ter en partes iguales),donde debe permanecer aproximadamente 5 3.-Hidratar gradualmente: a.-Alcohol absoluto por 30 segundos b.-Alcohol de 95 grados por 30 segundos c.-Agua destilada, de 30 a 1 minuto4.-Colorear el ncleo con Hematoxilina 1 minuto5.-Virar el color con agua corriente en 1-5 minutos6.-Colorear el citoplasma con Eosina 1 minuto (Eosina nueva) o 2 minutos (Eosina vieja)7.-Deshidratar gradualmente: a.-Alcohol de 95 grados por 30 segundos b.-Alcohol absoluto por 30 segundos.8,.Aclarar con xilol ( xiloles I-II-III ,1 minuto en cada uno)9.-Montar con blsamo de Canad.

DIBUJE TODOS LOS PASOS INDICADOS:

Observacin:Con objetivo de pequeo aumento se aprecian las clulas aisladas o en grupos. Examine su forma y tamao y elija el grupo mejor extendido y coloreado para observar con el siguiente aumento.Es fcil identificar el ncleo de las clulas por su color azul(basofilo).Trate de ver la estructura nuclear diferente de un ncleo a otro. En algunos se aprecian grnulos de cromatina de diferente tamao, otros presentan la cromatina densa y homognea (ncleos picnoticos).El citoplasma adquiere un color rosa plido con la Eosina(Eosinofilo o Acidofilo),su aspecto es homogneo, pero no es raro apreciar algunas partculas puntiformes de color azul que corresponden a restos de cromatina de otros ncleos destruidos o grmenes que abundan en la boca. Generalmente estas partculas se encuentran en otro plano de enfoque.

Titulo : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ Organo : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ Coloracion : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ Aumento : _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

Lamina No. 3

Titulo : Tamao y Forma celular de los TejidosPreparacin : Embrin de CerdoColoracin : H E.

Recorra la preparacin e identifique los distintos tipos celulares, teniendo en cuenta las diferencias de tamao, intensidad de coloracin, forma, relaciones de vecindad tanto del ncleo como del citoplasma.Observe que algunos tejidos estn formados por clulas muy juntas entre si, en cambio otras tienen pocas clulas ,separadas por zonas claras ocupadas por sustancias intercelulares. Los espacios vacos corresponden a cavidades del cuerpo y a conductos o vasos. En la luz de algunos se encuentran unas clulas ovaladas o discoidales de citoplasma rosado y ncleo pequeo. Algunas se hallan agrupadas, otras aisladas .estas clulas son glbulos rojos que en el embrin son nucleadas

Estructura: Plexo Coroideo Aumento: _____________________

Estructura: Cartlago de Meckel Aumento: _____________________

Estructura: Hgado Aumento: _____________________

Lamina 4

Titulo : Aparato de Golgirgano : Epiddimo de RataColoracin : Impregnacin Argntica (Mtodo de Aoyama)

Coloracin en bloque:

1.-Fijacin: con el Liquido de Aoyama(Cloruro de Cadmio al 1% + formol neutro+Agua destilada).Los cortes a la temperatura de fusin del hielo, se sumergen en el fijador durante 12-3 horas.2.-Lavar con agua destilada muy fra.3.-Impregnacin con Hidrato de plata en oscuridad y en fro (0 C) durante 24-36 horas4.-Lavar durante tres horas con agua destilada renovada con frecuencia5.-Reducir durante algunas horas con el reductor formol (formol+hidroxiquinona+sulfito sodico+agua destilada)6.-Lavar con agua corriente7.-Pasar durante algunos minutos en hiposulfito sodico8.-Lavar con agua corriente y luego con agua destilada.9.-Hidratar e incluir en parafina10.-Cortar11.-Extender12.-Montar con blsamo de Canad

Observacin:

Se observan cortes transversales y oblicuos, de conductos revestidos por clulas cilndricas que presentan en el polo basal un ncleo redondeado basofilo plido y en el polo apical (polo vecino a la luz, del conducto) se aprecia una red de color pardo negruzco (por impregnacin con el nitrato de plata)que corresponde al Aparato de Golgi.Haga un esquema con el mayor aumento, de una clula en la que se observe ntidamente el Aparato de Golgi, el ncleo y el citoplasma.


Lamina No. 5

Titulo : Ergastoplasmargano : PncreasColoracin : H. E.

Con el objetivo de menor aumento se observa un rgano dividido en lbulos ,constituidos en su mayor parte por clulas dispuestas en grupos, alrededor de un conducto excretor. Con mayor aumento trate de individualizar cada una de las clulas que constituyen un acino. El ncleo se encuentra situado en el polo basal de la clula (zona periferia del acino).El polo apical (opuesto al anterior)se tie de color rosa plido.Como se podr apreciar en su lamina, el citoplasma en el polo basal de la clula toma una dbil coloracin azul, por encontrarse a ese nivel gran cantidad de acido ribonucleico(ARN),constituyendo el Ergastoplasma o Sustancia Cromidial o Retculo Endoplasmatico Rugoso.


Lamina No. 6

Titulo : Condriomargano : HgadoColoracin : Hematoxilina Fosfotungstica (Fucsina de Altmann)

Procedimiento:

El hgado debe fijarse de inmediato con bicromato de potasio al 1-2% o fijadores compuestos que los contengan. Puede usarse tambin tetraoxido de osmio.

Fases de la coloracin:

La fucsina de Altmann es la fucsina acida+solucin acuosa de anilina al 1.5%.Los cortes deben tratarse previamente con un mordiente ,el Bicromato de Potasio. Luego de desparafinizados e hidratados los cortes, se tratan con la Fucsina de Altmann en caliente (el porta se coloca sobre una lamina de platino calentado a 55 grados)hasta la emisin de vapores Esto se repite tres veces. La Fucsina debe colorear de rojo a las mitocondrias, pero si esto no sucede se empleara un diferenciador de toluidina.

Observacin:

Con objetivo de mayor aumento, enfoque la zona perifrica del preparado, que es donde se supone el bicromato de potasio fijo las mitocondrias, ya que su escaso poder de penetracin impide fijar las mitocondrias ubicadas mas profundamente.Con objetivo de inmersin observe la zona elegida y visualizara agrupaciones de puntos diminutos de color rojo prpura ubicados en el citoplasma de los hepatocitos.


PREGUNTAS:

1- A que se llama condriosoma?

2- A que se llama condriocontus?

3- A que se llama condriomito?

4- Qu funciones tiene la mitocondria?

5- De que depende que aumenten o disminuyan el numero de mitocondrias en una clula?

6- Qu compuestos qumicos abundan en la mitocondria?

Lamina No. 77

Titulo : Miofibrillasrgano : Msculo EstriadoColoracin : H. E.

Con menor aumento es posible distinguir ,cortes transversales y longitudinales de clulas musculares llamadas fibras musculares que agrupadas en paquetes o haces musculares forman el msculo. Con mayor aumento y bajando el condensador, observe una fibra en corte longitudinal.

En ella podr apreciar una fina estriacion transversal, constituida por la sucesin de bandas claras y oscuras. En la periferia de la fibra se aprecian los ncleos de un color azul plido.

Observando con objetivo de inmersin ,esta misma fibra exagera la estriacion transversal y aparece una fina estriacion longitudinal que se encuentra dentro de la fibra muscular, constituyendo las miofibrillas.

A las clulas musculares se les llama fibras musculares debido a su forma alargada y a la gran dimensin de la misma. Es tambin debido a la gran longitud y que en cada clula se encuentran muchos ncleos.


Lamina No. 8

Titulo : Ciliosrgano : Epiddimo de RataColoracin : H. E.

Con objetivo de mediano aumento se observan cortes longitudinales y transversales de conductos de luz amplia .La mayora de ellos presentan en su luz, un material fibrilar

Que no debe ser confundido con cilios. Estos se visualizan a manera de flecos que parten del borde libre de la clula.


Lamina No. 9

Titulo : Glucogenorgano : HgadoColoracin : P. A. S.

Fases de coloracin:El P.A.S. es una combinacin de dos elementos: el acido peridico y el reactivo de Schiff. El Acido peridico es oxidante y transforma los hidroxilos del glucogeno en carboxilos, los que son coloreados de rojo por la fucsina bsica que contiene el reactivo de Schiff.1.-Desparafinizar e hidratar2.-Tratar con Acido Peridico3.-Lavar con agua corriente (10 minutos).Enjuagar con agua destilada4.-Tratar con reactivo de Schiff en borrel tapado durante 10 minutos.5.-Enjuagar con agua destilada, luego con agua corriente.Observacin:Con objetivo de mediano aumento se visualiza el citoplasma de las clulas hepticas, donde se aprecian finos grnulos de color rojo magenta que es el glucogeno (PAS +).Algunas clulas tienen mas glucogeno que otras.


PREGUNTA:1- Cmo diferencia glucogeno de mitocondria?

Lamina No. 10

Titulo : Grasa (Imagen positiva)Coloracin : Sudan III

Preparacin del colorante:Se disuelve el sudan rojo, en polvo, en alcohol de 70 grados (en caliente)a saturacin y se filtra despus de enfriarse.

Pasos de la coloracin:1.-Se corta el tejido adiposo por congelacin y los cortes se reciben en agua destilada.2.-Alcohol de 50 grados durante 2 minutos3.-Sudan III durante 20 o 30 minutos mas.4.-Alcohol de 50 grados, lavado rpido5.-Lavado con abundante agua destilada6.-Hematoxilina por 1 minuto7.-Lavado en agua corriente8.-Montar en glicerina

Observacin:La grasa intracelular se colorea de rojo. Observe el contorno celular y las relaciones de vecindad de las clulas. Los ncleos de las clulas adiposas se encuentran cerca de la membrana plasmtica y tienen forma alargada.


Lamina No. 11

Titulo : Grasa (Imagen Negativa)rgano : Piel y Tejido Celular SubcutneoColoracin : H. E.

En la zona profunda de la piel(hipodermis)se encuentra gran cantidad de espacios claros separados por finos tabiques ,en algunos de los cuales se observan ncleos alargados.Los espacios claros corresponden a la imagen negativa de la grasa, disuelta durante el proceso de inclusin corriente, que simula anillos de sello.

Los ncleos descritos corresponden a las clulas adiposas. En algunos sectores, entre las imgenes negativas se observan ncleos redondeados y alargados pertenecientes a clulas del tejido conectivo.


Lamina No. 12

Titulo : Pigmento de Melaninargano : PielColoracin : H. E.

La epidermis esta constituida por clulas en su mayor parte, polidricas, aplanadas, con la caracterstica de encontrarse unidas sin sustancia intercelular evidente. En la capa mas profunda de la epidermis ,o sea la capa basal que asienta sobre la membrana basal, se observan finos grnulos, pardo amarillentos, que corresponden a la melanina.

No confundir este pigmento con los grnulos que se encuentran en las clulas superficiales de la Epidermis (Grnulos de Queratohialina)


Lamina No. 13

Titulo : Mitosis en Clulas Tumoralesrgano : CarcinomaColoracin : H. E.

Con menor aumento se observan conglomerados celulares con las siguientes caractersticas: ncleos ovalados o redondeados, citoplasma de color rosado plido sin sustancia intercelular evidente (tejido epitelial).

Enfoque con inmersin a nivel de las zonas descritas tratando de encontrar ncleos sin membrana, los que pertenecen a clulas en mitosis .Por la disposicin de los filamentos cromticos se puede determinar la fase de cariocinesis (profase, metafase, anafase, telofase).


Lamina No. 13-A

Titulo : Mitosis en Clulas Vegetalesrgano : Raz de CebollaColoracin : Hematoxilina Ferrica de Heindenhain

Fases de la coloracin:

1.-Sumergir los portas con los cortes, durante 2-12 horas en el mordiente alumbre de Fierro.2.-Lavar con agua destilada rpidamente3.-Colorear con la hematoxilina en solucin alcohlica, durante 30 minutos a 24 horas en fro o 15 minutos a 5 horas a 50 C4.-Lavar rpidamente con agua destilada5.-Diferenciar usando alumbre de Fierro bien diluido6.-Lavar con agua destilada, deshidratar y montar.

Observacin:

Se aprovecho el desarrollo de algunas races de vegetales (haba, maz, cebolla)para observar en ellas la presencia de clulas vegetales y la frecuente ocurrencia de mitosis ,las cuales buscndolas cuidadosamente, puede observarse en cualquiera de las cuatro fases.Enfocarlas con mayor aumento y hacer el correspondiente esquema.


Lamina No. 14

Titulo : Epitelio Plano simplergano : Epidermis de Sapo Rin (Capsula de Bowman)Coloracin : Fucsina Acida (Sapo) H. E. (Rin)

Epidermis de Sapo:

Esta preparacin ha sido lograda fijando en formal al 10% , la epidermis de sapo en muda, luego de lo cual se extiende sobre un portaobjeto. Se deja secar al medio ambiente y se colorea con fucsina acida al 1% durante 10 minutos. Enseguida se deshidrata, se aclara y se monta.

La fucsina impregna el cemento intercelular, por lo que en la lamina se aprecian finos tractos tortuosos de color violeta que delimitan los bordes celulares.

Rin:

Se determina la ubicacin del glomrulo renal. Bordeando a este se encuentran de manera intima la capa visceral .luego es espacio de Bowman y mas afuera la capa parietal de la Capsula de Bowman.

Estas capa visceral y parietal presentan un epitelio constituido por clulas aplanadas en una sola fila, lo que da lugar al Epitelio Plano simple que describimos.

DIBUJO DE LA ESTRUCTURA EPITELIO PLANO

Estructura: Rin (Capsula de Bowman)

Aumento: _____________________

Lamina No. 15

Titulo : Epitelio Cilndrico Simplergano : Intestino DelgadoColoracin : H. E.

Con menor aumento se observa que la preparacin corresponde a un rgano hueco que presenta su pared formada por varias capas concntricas. La mas interna, se caracteriza por la abundancia de ncleos, formaciones glandulares, prolongaciones, a manera de dedos de guante (vellosidades cortadas longitudinalmente)o islotes ovalados o circulares(cortes oblicuos o transversales de las vellosidades).Con mayor aumento enfocar una vellosidad. En ella se puede apreciar un revestimiento externo formado por clulas agrupadas en una sola fila. Este ordenamiento es mas evidente a nivel de los ncleos ,que se encuentran ubicados en el polo basal de las clulas con el eje mayor perpendicular a la membrana basal PAS +.

En este caso, estamos frente a un epitelio cilndrico simple.

En el borde libre de las clulas (zona apical)se observa una lnea ondulada birrefringente que corresponde a la chapa estriada del epitelio intestinal.


Lamina No. 16

Titulo : Epitelio Cbico Simplergano : Rin Coloracin : H. E.

Con menor aumento se observa una zona perifrica de estructura mas o menos compacta (zona cortical).En ella se aprecian:

1.-Formaciones tubulares con luz reducida o ausente

2.-Formaciones redondeadas con abundantes ncleos y glbulos rojos, todas ellas rodeadas por un campo claro .Las primeras corresponden a tubulos contorneados revestidos por epitelio cbico simple. Las segundas corresponden a glomrulos.

En la zona central el aspecto es diferente (zona medular) observndose nicamente formaciones tubulares en cortes transversales, oblicuos o longitudinales.

A este nivel tambin se visualizan perfectamente el epitelio cbico simple que reviste los tubulos.

Con mayor aumento enfoque un tubulo ,al que se aprecia revestido por clulas bien delimitadas de superficies mas o menos cuadradas, dispuestas en una sola capa con ncleo redondeado y central.


Lamina No. 17

Titulo : Epitelio Pseudoestratificado Cilndrico Ciliadorgano : TraqueaColoracin : H. E.

Enfoque el epitelio de mediano aumento y observe los ncleos dispuestos aparentemente en dos a mas capas .A mayor aumento se aprecia que estos ncleos corresponden a clulas alargadas de diferente forma y tamao con la caracterstica comn de que todas estn en contacto con la membrana basal. Tambin se visualiza en el polo apical de las clulas mayores un ribete compuesto por finos cilios.Entre estas clulas se ven imgenes claras fusiformes o redondeadas que corresponden a clulas mucosas (clulas caliciformes)


Lamina No. 18

Titulo : Epitelio Poliestratificado Plano Cornificadorgano : Piel de Pulpejo de DedoColoracin : H. E.

En el epitelio se observan 5 o mas capas de clulas con las caractersticas siguientes:1.- Las profundas o sea las que estn en contacto con la membrana basal, son de forma cbica o cilndrica.2.-Las intermedias son de forma poligonal3.-Las superficiales, aplanadas ,presentando algunas de ellas finos grnulos oscuros de ________________________Exteriormente se aprecia un material eosinofilo de variable espesor, dispuestas en laminas superpuestas.

En esta capa no se encuentran ncleos y recibe el nombre de capa cornea.

La separacin entre el epitelio que emite los clavos epidrmicos y el tejido conectivo es ntida, mejor dicho el epitelio reposa sobre un conectivo (dermis),con prolongaciones a manera de digitaciones (papilas),de tal manera que la lnea de separacin entre epitelio y conectivo es ondulada.


Lamina No. 19

Titulo : Epitelio Poliestratificado Plano No Cornificadorgano : EsfagoColoracin : H. E.

Observe las diferencias entre el Epitelio de este tejido y el de la lamina anteriorLa caracterstica fundamental es la de no poseer capa cornea .Adems presenta ntidamente 3 capas superficial con clulas planas, intermedia con clulas polidricas y basales con clulas cbicas o cilndricas.

La membrana basal la separa del conectivo que en este caso se llama corion. No existen las denominadas papilas de la piel.


Lamina No. 20

Titulo : Epitelio Poliestratificado Cbicorgano : OvarioColoracin : H. E

Con pequeo aumento recorra la preparacin y enfoque un folculo en crecimiento. En el centro se observa una formacin redondeada de color rosa plido que corresponde al Ovocito II (con su oolema, ooplasma y pronucleo) rodeada por 3 o mas capas de clulas epiteliales cbicas dispuestas ordenadamente, que constituyen el epitelio de la referencia.

As mismo en la superficie del ovario se aprecian clulas cbicas en una sola fila formando un Epitelio Cbico simple.


Lamina No. 21

Titulo : Epitelio Estratificado Cilndricorgano : Uretra Esponjosa del PeneColoracin : H. E.

Con menor aumento enfoque una luz festoneada que corresponde a la luz de la uretra englobada en el cuerpo esponjoso. Con mayor aumento, observe la constitucin del epitelio .Los ncleos tienen una altura creciente de la profundidad a la superficie y estn dispuestos en varias capas.


Lamina No. 22

Titulo : Epitelio de Transicinrgano : UrterColoracin : H. E.

Se observa un rgano hueco de paredes gruesas. Su luz esta ocupada por un epitelio con las siguientes caractersticas:Numero de capas: ________________________________________________________Forma de las clulas desde la profundidad a la superficie:_________________________________________________________________________________________________Tamao de las clulas:_____________________________________________________En que capa se encuentran las clulas mas voluminosas?__________________________


Lamina No. 23

Titulo : Transicin de Epiteliosrgano : CardiasColoracin : H. E.

Enfoque la zona del cardias que se encuentra ubicado entre el epitelio poliestratificado plano no queratinizado del esfago y el epitelio cilndrico simple del estomago. Aqu se vera que en forma paulatina el epitelio poliestratificado plano se va transformando en epitelio cilndrico simple.


Lamina No. 24

Titulo : Epitelio Glandular (Glndula de Secrecin Interna)rgano : HipfisisColoracin : H. E.

Recorra la lamina y podr apreciar un tejido plido con cierta disposicin fibrilar con ncleos pequeos y escasos. Esta zona corresponde a la Pars Nervosa de la Hipfisis (lbulo posterior).En oposicin se encuentra una zona rica en clulas ,de ncleo redondeado y de citoplasma evidente y delimitado que corresponde al tejido glandular del lbulo anterior de la hipfisis .Observe la disposicin de estas clulas en acumulos o en racimos, rodeados de capilares. En el limite con la neurohipofisis (Pars intermedia) se ven cavidades llenas de sustancia homognea acidofila, revestida por una capa de clulas cbicas (disposicin folicular).No se observan conductos excretores por tratarse de una glndula endocrina.


Lamina No. 24-A

Titulo : Epitelio Glandular (Glndula de Secrecin Externa)Organo : PncreasColoracin : H. E.

Por las disposicin de las clulas corresponde a una glndula de tipo:__ ______________Presenta islotes de Langerhans con clulas alfa (perifricas) y beta y delta (centrales)que representan la parte endocrina. As mismo presentan los acinos pancreticos de tipo seroso con clulas centroacinosas. Estos acinos constituyen la parte exocrina de la glndula.


Lamina No. 85

Titulo : Glndulas Unicelulares Tubulosas y Tubuloacinosasrgano : DuodenoColoracin : H. E.

Observe con mediano aumento el epitelio que corresponde al duodeno. Por debajo de este observe una zona clara que corresponde a la submucosa y en ella encontrara acinos con clulas de citoplasma plido que da lugar a glndulas muy ramificadas ,que incluso invaden la mucosa. Estos son los acinos mucosos de las glndulas de Brunner.Igualmente en la mucosa se aprecian acinos con clulas de citoplasma mas oscuro(basofilo)Son los acinos serosos de la Glndula de Lieberkuhn


Lamina No. 76

Titulo : Glndulas Sudorparas y Sebceasrgano : Cuero CabelludoColoracin : H. E.

El corte nos permite apreciar gran cantidad de folculos pilosos en corte transversal y longitudinal. Entre estos se encuentran las glndulas sebceas a quien se les aprecia su conducto excretor terminando en la vaina radicular externa del folculo piloso o saliendo directamente a la superficie. El acino caracterstico presenta clulas basales, y las clulas secretoras que se van destruyendo por ser glndula holocrina. Las glndulas sudorparasSe presentan en corte transversal con su conducto de color mas oscuro con epitelio cbico biseriado y el acino con clulas claras piramidales. Es de resaltar el msculo erector del pelo.


Lamina No. 90

Titulo : Acinos Serosos (Glndula Exocrina)rgano : Glndula ParotidaColoracin : H. E.

Se aprecia a la glndula dividida por tabiques conectivos en lbulos y lobulillos.En cada lobulillo se aprecian acinos de tipo seroso , estando toda la glndula, constituida por ellos.


Lamina No. 92

Titulo : Acinos Mixtos (Glndula Exocrina)rgano : Glndula SublingualColoracin : H. E.

Se aprecia a la glndula dividida por tabiques conectivos en lbulos y lobulillos.En cada lobulillo se aprecian acinos de tipo mixto , que predominan en toda la glndula,A la parte serosa se le denomina Media luna de Gianuzzi.


Lamina No. 25

Titulo : Tejido Celular Subcutneorgano : Bola de EdemaColoracin : Intravital (Se aplica al Celular subcutneo el azul tripan) Para fibras elsticas : Fucsina resorcina Para fibras colgenas : Eosina Para clulas : H. E.

En esta preparacin se han separado los diferentes elementos del tejido conectivo mediante la formacin de un edema artificial. A un animal recin sacrificado se le inyecta en el tejido subcutneo de 2 a 4 cc. De suero fisiolgico, con lo que se logra la formacin de bola de edema artificial.Un trozo pequeo de este tejido gelatinoso se disocia y se extiende sobre una lamina portaobjeto, se deja secar y luego se fija en formol y se colorea con fucsina resorcina y con H. E.

Observe los siguientes elementos:

Histiocitos: son clulas polimorfas redondeadas, fusiformes o asteriformes. Tienen un ncleo relativamente pequeo y redondeado .En el citoplasma se aprecian finos grnulos de color azul que corresponden a partculas fagocitadas del colorante azul tripan.

Fibroblastos: Se aprecian como clulas alargadas o fusiformes. El ncleo generalmente adopta la forma de las clulas, observndose en consecuencia ncleos alargados de cromatina laxa. No es raro encontrar en el citoplasma de alguna de estas clulas, grnulos de colorante fagocitado y finos filamentos que parten de los vrtices para formar las fibras colgenas.

Linfocitos: Se observan como clulas pequeas de ncleo redondeado de cromatina muy densa y con escasa cantidad de citoplasma.

Polinucleares neutrofilos : Son clulas redondeadas de contornos bien definidos. El ncleo tiene forma caracterstica e inconfundible, con lbulos unidos por finos tractos de cromatina.

Fibras Elsticas: Se observan como finos hilos de color azul oscuro que atraviesan el tejido en todas direcciones. Es fcil su reconocimiento porque presentan un dimetro uniforme y por el arreglo espiralar de sus extremos.

Fibras colgenas: Se aprecian como bandas gruesas de color rosado.

Lamina No. 25-A

Titulo : Clulas Cebadas y Fibras del Tejido Conectivorgano : Mesenterio de RanaColoracin : Azul de Toluidina

Pasos de la Coloracin:

1.-Obtencin del material: El mesenterio se extiende introduciendo por el intestino delgado un alambre de estao.2.-Se fija con formol al 10% durante 24 horas3.-Lavar con agua corriente durante 24 horas4.-Cortar y recoger en portaobjetos.5.-Secar a 37 grados 6.-Coloracin con azul de toluidina durante 2-3 minutos7.-Montaje en gelatina

Observacin:

Se observan las fibras elsticas de color azul oscuro. Las clulas cebadas con citoplasma granular de color violceo, los fibroblastos alargados y las clulas epiteliales con ncleo redondeado.


Lamina No. 26

Titulo : Tejido Conjuntivo Mucosorgano : Cordn UmbilicalColoracin : P. A. S.

En este caso la sustancia fundamental se colorea intensamente con la fucsina bsica del reactivo de Schiff.Se aprecia de forma predominante la sustancia fundamental que es PAS + .En esta sustancia fundamental se observan clulas alargadas fusiformes o triangulares con un numero variable de prolongaciones, por lo general cortas.Los ncleos son alargados , triangulares o de forma irregular. En el centro de la preparacin se ven los vasos umbilicales.


Lamina No. 27

Titulo : Tejido Adiposorgano : PielColoracin : H. E.

Ver las lminas No. 10 y 11

1. Qu forma tiene una clula adiposa aislada?:

2. En este caso por que son polidricas? :

3. Qu localizacin tienen los ncleos? :

4. Por qu no se aprecia el contenido de la vacuola?:


Lamina No. 29

Titulo : Tejido Conectivo Laxorgano : PielColoracin : H. E.

Ver lminas No. 11,17 y 18Enfoque la zona subyacente al epitelio de las lminas 11 y 18 Esta zona representa la dermis papilar de la piel que esta constituida por tejido conectivo laxo. Las fibras colgenas son delgadas.

Los fibroblastos son numerosos y la sustancia fundamental es abundante (aparece teida de color rosa plido por la eosina).Observe los capilares sanguneos que son abundantes.

En la lamina No. 17 enfoque el conectivo subepitelial. Observe la escasez de fibras, abundancia de clulas y de sustancia fundamental .

Los capilares son numerosos, muchos de ellos contienen hemates en su luz. Haga un esquema del tejido conectivo laxo de una de las laminas de piel y de la traquea.

En que otra lamina ha observado predominio de tejido conectivo laxo?____________________________________________________________________


Lamina No. 30

Titulo : Tejido Conectivo Densorgano : PielColoracin : H. E.

Ver la lamina No. 28Enfocar la zona ubicada debajo de la dermis papilar. En este plano se encuentra la dermis reticular de la piel, la que esta constituida por tejido conjuntivo con las siguientes caractersticas: abundancia de fibras colgenas en cortes transversales y longitudinales, agrupados en haces o paquetes de fibras gruesas. Los elementos celulares son escasos.


Lamina No. 30-A

Titulo : Tejido Conectivo Denso Regular Colgeno rgano : Tendn de cola de ratnColoracin : H. E.

Esta preparacin se hizo disociando el tendn Terminal de la cola del ratn. En ella se observara lo siguiente:

1.-Haces de fibras colgenas de color rosado.2.-Ncleos alargados dispuestos en hileras3.-Escasa sustancia fundamental ,la que se encuentra envolviendo haces de fibras


Lamina No. 31

Titulo : Tejido Conectivo Elsticorgano : Arteria AortaColoracin : Orceina

Pasos de la coloracin:

La orceina es un colorante natural que se extrae del liquen Lecanora parella y tie las fibras elsticas usa al 0.5% en solucin alcohlica acidificada con 2.5 cc. De HCl

1.-Sumergir los cortes en esta solucin de orceina durante 1-24 horas

2.-Diferenciar brevemente en alcohol de 95 grados acidificado.

3.-Lavado con alcohol puro, deshidratar, aclarar y montaje.

Observacin:

Las fibras elsticas deben observarse de color prpura oscuro. El tejido conectivo queda casi incoloro. En la parte media de la arteria observar fibras elsticas de color prpura oscuro. Las mismas se presentan sinuosas y onduladas y se encuentran formando membranas.


CUESTIONARIO:

1.- A que clulas corresponden los ncleos observados en la lmina 30-A?

2.- Cmo demostrara la existencia de fibras de reticulina?

3.- Cul es el origen de las fibras colgenas?________________________________________________________________________

4.- Por qu en la lmina 30-A, las fibras tienen una disposicin paralela?

5.-Diferencia entre la composicin qumica de lasa fibras Elsticas y Colgenas Fibras Elsticas Fibras colgenas

Lamina No. 31-A

Titulo : Corte Transversal de Aortargano : Arteria AortaColoracin : H. E,

En la capa media de la arteria se observan fibras elsticas dispuestas en laminas concntricas a la luz de la arteria. En esta preparacin, las fibras elsticas toman una coloracin rosada, son birrefringentes y entre ellas se encuentran fibras colgenas, clulas conjuntivas (fibroblastos) y sustancia fundamental.


Lamina No. 32

Titulo : Fibras de Reticulinargano : HgadoColoracin : Carbonato de Plata Amoniacal de Ro Hortega

Observacin:Recorrer el preparado utilizando el menor aumento y observe la fina red de fibras de color negro, que se entrecruzan profusamente dibujando un encaje de mallas apretadas o laxas. En ciertas zonas estas fibras son abundantes y de dimetro mayor, rodeando conjuntamente con las fibras colgenas los vasos y conductos de los espacios porta.


Guia Practica de Histologia Humana27

1er p. gp-histo modificada

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