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Estudio Histológico de Médula Ósea Toma de muestra, Procesamiento y
Parámetros de Evaluación.Médula ósea normal, Fibrosis,
Necrosis, Granulomas , Relación Mieloide-Eritroíde
BIOPSIA DE HUESO
• Util en el diagnóstico y control evolutivo de numerosas enfermedades hematológicas.
• Aporta información de gran valor para determinar o completar el diagnóstico de otras enfermedades no hematológicas.
• Esencial para el diagnóstico, cuando el AMO es seco (como consecuencia de fibrosis medular o de una densa infiltración celular)
BIOPSIA DE HUESO
• Estudio de la arquitectura medular, presencia de granulomas o de lesiones vasculares, y el patrón de distribución de cualquier infiltrado anormal.
• Valora cuantitativamente la celularidad en pacientes con citopenias, para investigar la infiltración en linfomas, y en el estudio de los neoplasias mieloides.
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE AMO Y BIOPSIA DE HUESO
PROCESAMIENTO HISTOLOGICO• Es recomendable una biopsia de al menos 1 cm de largo, se
coloca en formol tamponado a una concentración de 4%. El tiempo de fijación puede ser de 2 a 4 horas.
• Descalcificación usando ácido nítrico con EDTA por 2 a 3 horas.
• Proceso histotecnólogico, hasta obtener la biopsia incluida en un taco de parafina, lista para los cortes histológicos.
• Los cortes histológicos, son a un grosor de 3 a 4 um.• Se adhieren a una lámina portaobjetos, luego se
desparafinan.• Se lleva a colorear en una batería de Hematoxilina de Harris-
eosina.• Montaje con bálsamo de Cánada, y etiquetado.
PARAMETROS DE EVALUACION• Determinar la presencia de megacariocitos o evaluar
depósitos de hierro.
• Determinar la presencia de artefactos que puedan dificultar una correcta interpretación (hemorragia, tejido hematopoyético desplazado y distorsionado por las trabéculas óseas).
• Una biopsia de 0,5 cm de largo puede ser insuficiente para excluir una infiltración linfomatosa o metastásica.
Observación a 40x
• Evaluación de la arquitectura medular,• Las trabéculas óseas, la relación celularidad/grasa
(expresada como porcentaje entre tejido hematopoyético y grasa).Según la edad varía desde un 90% en niños hasta un 40 - 50% en mayores de 60 años.
• La presencia de estructuras anormales, como: nódulos linfoides, áreas infiltradas o fibrosadas, granulomas, entre otras.
Arquitectura Medular
BIOPSIA NORMAL
BIOPSIAS DE HUESO
BIOPSIA DE HUESO
NODULOS LINFOIDES EN MO
AREAS CON INFILTRACION O FIBROSIS
Observación a 100x
• Valorar la presencia, cantidad y maduración de las tres series hematopoyéticas.
• Presencia y situación de los megacariocitos, la presencia de acúmulos de linfocitos (teniendo en cuenta que aproximadamente un 10% de las biopsias de adultos mayores de 40 años tienen agregados linfoides de carácter benigno), e identificación de las células plasmáticas, de los histiocitos principalmente.
Observación superior a 400x• El tipo de alteración observada en los cortes de médula es fundamental para el
diagnóstico de algunas enfermedades hematológicas, especialmente aplasia medular y Enfermedades Mieloproliferativas.
• Empleado en la extensión de la Enfermedad de Hodgkin, y pronóstico de otras, como la Leucemia Linfática Crónica.
• En granulomas, metástasis, leucemias, linfomas, mielomas, etc, determinan la extensión y características de la infiltración (difusa, nodular, intersticial).
• En la pancitopenia o síndrome febril de etiología desconocida puede permitir el diagnóstico de linfoma o carcinomatosis con invasión medular.
• Adicionalmente, pueden realizarse técnicas histoquímicas e inmunohistoquímicas. Las cuales serán detalladas en la presente unidad.
ASPIRADO DE MEDULA OSEA• Evaluación de finos detalles morfológicos.
• El aspirado es útil en el estudio de pacientes con sospecha de anemia de enfermedad crónica, anemia megaloblástica, control de leucemias agudas, búsqueda de hemoparásitos, agranulocitosis, etc.
• El estudio morfológico de la sangre periférica es más representativo que el de la médula ósea, de manera particular en algunos síndromes linfoproliferativos y mieloproliferativos.
ESPICULAS
VALORACION MACROSCOPICA
• La abundancia, escasez o ausencia de espículas, nos orienta sobre la representatividad del material analizado.
• Presencia de espículas, el aspecto citológico que se estudia suele ser representativo de la médula ósea.
• En el caso de un aspirado seco o sin espículas, se establece la sospecha de una mielofibrosis o de médula ósea hipercelular "empaquetada", siendo en estos casos recomendable efectuar una biopsia medular.
HIPOCELULAR
HIPERCELULAR
VALORACION MICROSCOPICA A MENOR AUMENTO
• Permite valoración semicuantitativa de la celularidad (muy escasa, disminuida, normal o aumentada)
Confirmar la presencia de células de estroma medular, en condiciones normales la celularidad es representativa, así como observar la presencia de megacariocitos.
• Permite identificar otros elementos celulares: células metastásicas, histiocitos, acúmulos de células plasmáticas, osteoblastos, osteoclastos, mastocitos, necrosis celular, células de Reed-Sternberg, entre otras.
VALORACION MICROSCOPICA CON OBJETIVO DE INMERSION
• Se efectúa un recuento diferencial de al menos 300 - 500 células para determinar los siguientes parámetros:
La relación mielo/eritroideRecuento celular diferencial (Mielograma)
• El examen morfológico evalúa los rasgos de maduración de las series hematopoyéticas: detención madurativa mieloide o eritroide (agranulocitosis, eritroblastopenia), o alteraciones madurativas (anemia megaloblástica, anemia hemolítica, síndrome mielodisplásico, infecciones graves, etc.).
• La observación citológica cuidadosa permite identificar células atípicas de leucemias, linfomas, histiocitosis, mieloma, metástasis, etc., así como la presencia de hemoparásitos ante un cuadro clínico sospechoso.
RESULTADOS DEL MIELOGRAMA