RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS (Leucocitos )• Objetivo:Aprender , realizar y aplicar la metodología para un recuentode GB por mm cúbico en sangre é interpretar el resultado.

Materiales:Muestra : Sangre con EDTADiluyente : Solución de TurkMateriales : Hemocitómetro Pipeta para GB Boquilla Microscopio

Procedimiento1.- Realizar la punción y recibir la muestra(sangre) en tubos con EDTA.

2.- Una vez obtenida la muestra , colocar la boquilla en la pipeta y aspirar sangre hasta la marca de 0.5

3.-Limpiar bien la punta con una gasa y luego aspirar la solución de TurK hasta la marca de 1.

4.-Homogenizar y agitar la pipeta. Eliminar las tres primeras gotas y cargar el hemocitómetro.

5. Hacer la lectura en el microscopio en 10X.

6. Hacer los cálculos. N* de Leucocitos pmmc = altura x dilución x área N* de leucocitos pmmc = 1/10 x 1/20 x 4 N* de leucocitos pmmc = Leuc. Contado Nota:

INTERPRETACIÓNVR : 5,000 a 11,000 PMMCValores debajo de 5,000 PMMC Leucopenia Valores por encima de 11,000 PMMC Leucocitosis

La exactitud del recuento leucocitario manual puede evaluarse mediante la estimación del número de leucocitos en el extendido de sangre periférica a gran aumento.El promedio de leucocitos en 10 campos (100X) se multiplica por 2,000 Y se obtiene un valor aproximado del recuento de leucocitosSi cuento en 8 a 10 campos y tengo un promedio 4 a 5 leucocitos, la estimación del recuento será de 8,000 a 10,000 leucocitos pmmc.

También se puede hacer el recuento por la sgte estimación.

GB en 100X Estimación 2 a 4 4,000 a 7,000 pmmc4 a 6 7,000 a 10,000 pmmc6 a 10 10,000 a 13,000 pmmc10 a 20 13,000 a 18,000 pmmc

Causas de error en el recuento de GR y GB

1.-Volumen de sangre no medido exactamente.2.- Dilución inexacta por defectos de técnica.3.- Lentitud en la manipulaciones lo que origina formación de pequeños coágulos.4.- Falta de exactitud de la cámara de recuento por su profundidad debido a cubreobjetos irregulares5.- Presencia de grumos o de partículas en suspensión y 6.- Distribución irregular del los glóbulos.

RECUENTO DE PLAQUETAS

Es un examen para medir la cantidad de plaquetas que ud tiene en la sangre.Las plaquetas son mas pequeñas que los GR y GB.Este examen se realiza para controlar o diagnosticar enfermedades de la hemostasia .Principio.El recuento directo de las plaquetas mediante el hemocitómetro, se mezcla con un diluyente que causa hemolisis de los GR.

Equipos de Lab.

Muestra : Sangre con EDTA Diluyente : Oxalato de amonio al 1 % (Tambien se puede usar Azul Brillante de Cresilo ) Materiales : Hemocitómetro Pipeta de Thoma ( GR ) Boquilla Microscopio Contómetro.

• PROCEDIMIENTO1.-Muestra obtenida por punción venosa o capilar y recogida con EDTA.

2.- Antes de comenzar el procedimiento mezclar la sangre varias veces.

3.- Con la pipeta de toma aspirar sangre hasta la marca de 1

4.- Limpiar la punta de la pipeta y luego aspirar con el diluyente hasta la marca de 101

5.-Colocar la pipeta en un agitador por 10 a 15 minutos

6.- Eliminar las primeras gotas y luego cargar la cámara

7.-Cubrir el hemocitómetro en una placa Petri por 10 a 20 minutos (cámara húmeda) para que sedimenten las plaquetas.

8.-Llevar la cámara al microscopio de contraste de fases y contar las plaquetas en la cuadricula central (40X) osea los 25 cuadrantes .

Cálculos:No de plaquetas =Rcto plaquetas x el factor de dilución x factor de corrección

No de plaquetas = Rcto de plaquetas x 100 x 10

No de plaquetas = Rcto de plaquetas x 1,000

VR: 150,000 a 450,000 pmmc

INTERPRETACIÓNValores menos de 150,000 pmmc TrombopeniaValores mayores de 450,000 pmmc Trombocitosis

• Recuento de plaqueta por métodos indirectos.• No promedio de plaquetas en 10 campos (100X) x 20,000• No de plaquetas en 10 campos (100X) x 2,000.Una estimación mas grosera :Si hay de 7 a 25 plaquetas por campo es un recuento adecuado

En pacientes anémicos o con eritrocitosis se aplica la sgte fórmula. No promedio de plaquetas x el Rcto de GR--------------------------------------------------------------------- 200200 Es el promedio de GR por campo.

Recuento de eosinófilos

Es un examen de sangre que se mide el numero de eosinófilos pmmc.

Los eosinofilos se vuelven activos cuando la persona tiene ciertas infecciones alérgicas o parasitarias.

Este examen se solicita cuando en el recuento diferencial los eosinófilos se encuentran elevados.

• Procedimiento:

• Materiales a usar:1. Sangre obtenida por punción capilar o venosa y recepcionada en tubos con EDTA .2.- hemocitómetro3.- Pipeta para GB4.- Boquilla5.- Contómetro6.- Microscopio7.-Diluyente: Sol. De eosina al 2% 10 mL Acetona 10 mL A.D 80 mL

Técnica:1.- Colocar la boquilla en la pipeta de GB.

2.- Aspirar sangre hasta la marca de 1 y con el diluyente hasta 11 (dil.1/10)

3.- Dejar en reposo la pipeta unos minutos.

4.-Luego ponerlo en un agitador la pipeta

5.- Eliminar la tres primeras gotas y luego cargar el hemocitómetro.

6.- Dejar en reposo por 5 minutos y luego se lleva al microscopio y hacer la lectura en 10X.

7.-Contar los cuatro cuadrantes de las esquinas y la del centro.

8. Hacer los cálculos. Se efectúa multiplicando el número de eosinófilos contados en los 10 mm2

x 10, para referirlos a 1mm3.

Los eosinófilos se reconocen por su color anaranjado

InterpretaciónVR : 50 a 400 pmmc.

Eosinopenia es provocado por la hormona ACTH , ciertos esteroides de la corteza suprarrenal y la adrenalina.Eosinofilia se observa en procesos alérgicos (asma, dermatitis), infecciones parasitarias, bacterianas y micóticas.

RECUENTO DE RETICULOCITOS

Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros y se originan en la MO. Paraluego salir al torrente sanguíneo en donde circulan 1 a 2 días para luego transformarse en GR maduros.

El recuento de reticulocitos se realiza para evaluar el grado de anemia de un paciente.

Tambien sirve para evaluar el grado de destrucción como se da en las anemias hemolíticas.

Se usa para evaluar el tratamiento de la anemia

Procedimiento:Materiales: 1. Sangre con EDTA 2.-Tubos de ensayo 3.-Láminas portaobjetos 4.-Microscopio 5.- Contómetro 6.- Diluyente: Azul brillante de cresilo 1 g, disuelto en 100 mL. de solución salina citratada . (una parte de citrato trisódico al 3% , mas cuatro partes de solución fisiológica al 0.9 %)

Técnica:1. En un tubo de ensayo 13 x 75 colocar 0.1 mL. de sangre con EDTA y 0.1 mL del colorante.

2. Mezclar é incubar a 37oC por 15 min. Ó a temperatura ambiente por 30 min.

3.- Después de la incubación mezclar y tomar 10 uL y depositarlo en el cubrebjeto y hacer el extendido

4. Dejar secar el extendido y llevar al microscopio (100X) con aceite de inmersión para la observación y el cálculo.

5. El cálculo se efectúa contando en cuatro puntos del extendido

6.- Si se observan 20 reticulocitos en 1,000 GR , habrá 2%.Si se quiere expresar el número total de reticulocitos pmmc de sangre se debe efectuar un recuento de GR.Ejemplo: No de GR pmmc = 4,000,000 Reticulocitos 2 %

Si en 100 GR hay 2 reticulocitos 4,000,000 habrá X donde X : 80,000 pmmc.VR: 0.5 a 2.0 % 20,0 a 120,0 pmmc. O (109 / L )

Recuento de reticulocitos corregidos

En las muestras con un Hto bajo, el porcentaje de reticulocitos puede presentar una elevación artificial por que la sangre contiene menos GR.Se usa un factor de corrección,que considera que el Hto. Promedio normal es de 45 %.Cálculo: Hto ( paciente) RRC = reticulocitos (%) x ----------------------- Hto ( normal )VR: Un paciente con un Hto de 35% tenga un RRC del 2 al 3 %. En pacientes con un Hto, de 25% el RRC puede aumentar del 3 al 5 %

Índice de producción de reticulocitosLos reticulocitos que se liberan de la MO en forma prematura de denominan DESPLAZADOS. Ëstosse desplazan de la MO a la sangre periférica para compensar la anemia.Cuando se evalúa la eritropoyesis, debe hacerse una corrección para la presencia de reticulocitosdesplazados, por que la cantidad de reticulocitos en sangre periférica puede aumentar sin que haya un incremento de la eritropoyesis en la MO.

Origen del error en el recuento de reticulocito.

1.-Puede producirse un error si la sangre y el colorante no se mezclan antes de hacer el extendido.2.-La humedad del ambiente o secado deficiente del portaobjeto tenga refracción y puede confundirse con los reticulocitos3.-Otras inclusiones de los GR que se tiñen con colorantes supravitales. Cuerpos de Heinz y los corpúsculos de howell – jolly.