Libro

Fundamentos y Técnicas de Análisis Hematológicos y Citológicos

Ed. Paraninfo: Pág. 473

IES Miguel de Cervantes. MurciaCiclo Laboratorio de Diagnóstico Clínico

Fundamentos y Técnicas de Análisis Hematológicos

José Ángel Pina Alburquerque

54 – Técnicas de Biología Molecular

La llegada de las técnicas de biología molecular ha dado lugar a una mejora radical en la evaluación de los trastornos hematológicos y ofrece interesantes perspectivas de futuro.

  Las técnicas basadas en PCR permiten la identificación de mutaciones genéticas y translocaciones

 El desarrollo de la PCR automatizada en tiempo real ofrece perspectivas interesantes en este campo.  El creciente número de pruebas, la necesidad de un enfoque integrado para el diagnóstico y la necesidad de rentabilidad indican que tales servicios deben ser proporcionados por un laboratorio especializado de hematología.

El diagnóstico molecular moderno y la gestión de las neoplasias malignas hematológicas

http://www2.cbm.uam.es/mkfactory.esdomain/webs/CBMSO/plt_EscuelaTaller.aspx?IdObjeto=1

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Declaraciones al diario La Opinión de Murcia de la Consejera de Sanidad, María Ángeles Palacios el 16 de diciembre de 2009 con

motivo de su visita al Laboratorio de Virología de la Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca:

• “se convertirá en unidad de referencia para el diagnóstico de las infecciones víricas en la Región, y cuenta con los medios disponibles para los estudios virológicos que alcanzará las 10.000 muestras clínicas cada año en la Comunidad… alcanza el nivel 3 de bioseguridad y lo convierte en uno de los pocos laboratorios de Europa con la máxima capacidad de contención en seguridad biológica dentro de un centro hospitalario”…

• Así mismo Palacios afirmó que “el laboratorio de bioseguridad nivel 3 de la Arrixaca se encuentra entre los mejores laboratorios a nivel europeo…se trata de un laboratorio de máxima contención y se ha invertido en equipamiento una cifra cercana a los 360.000 euros y unos 275.000 euros más para infraestructuras”.

La Opinión. 16/12/2009

En el laboratorio de virología de la Arrixaca se utilizan exclusivamente

Técnicas de Biología MolecularTécnicas de Biología Molecularpara realizar estudios de:

• Carga viral de VIH, citomegalovirus, virus Epstein-Barr, hepatitis C y hepatitis B

• Resistencias genotípicas de VIH• Genotipado de Hepatitis C• Estudio y caracterización de virus respiratorios

(gripe estacional y pandémica, N1H1)• Estudios del papiloma humano y virus

respiratorios.

Técnicas de Biología Molecular y Técnicas de Biología Molecular y Diagnóstico ClínicoDiagnóstico Clínico

• Se basan en la replicación del ADN y en la complementariedad de bases.

• Utilizan elementos de virus y bacterias, como polimerasas, enzimas de restricción, transcriptasa inversa, etc.

¿Que son las Técnicas de Biología Molecular?¿Que son las Técnicas de Biología Molecular?

¿Que son las Técnicas de Biología Molecular?¿Que son las Técnicas de Biología Molecular?

• Aislamiento y extracción de ADN en alta pureza.

• Corte de una determinada región con enzimas de restricción (análisis de mutaciones por RFLP = Restriction fragment lengt polymorphism).

• Modificar el ADN, introducir mutaciones, etc. (nacimiento de la Ingeniería genética).

• Amplificar una región en gran cantidad de moléculas (PCR y clonación de fragmentos en bacterias u otros vectores).

• Secuenciar el ADN.

Son técnicas de laboratorio que se basan en:Son técnicas de laboratorio que se basan en:

Técnicas de Biología MolecularTécnicas de Biología Molecular

PRIMER PASO:• EXTRACCIÓN DE

ADN:– Se puede extraer de

diferentes muestras (sangre, saliva, piel, semen, bulbo piloso, biopsias de órganos o tejidos, etc.)

– Se separa el ADN de otras estructuras celulares. Punto 1.3 del libro

Y prácticas LII y LIII (tema 48).

Técnicas de Biología MolecularTécnicas de Biología Molecular

• ALMACENAMIENTO Y CONSERVACIÓN DEL ADN:Ø El ADN purificado se

conserva refrigerado a 4ºC o a – 18ºC.

Ø A – 70ºC para muestras que necesiten conservarse indefinidamente.

Técnicas de Biología MolecularFin de la 1ª parte de tres

Continúa en:

Técnicas de Biología Molecular: 2ª parte de tres