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Muitos fazendeiros e técnicos de inseminação artificial
têm dúvidas sobre o uso do botijão criogênico para
a armazenagem e o transporte de sêmen congelado,
única forma de conservar o material genético
adquirido de uma central de tecnologia de sêmen
bovino. Nesta seção serão respondidas algumas
perguntas que chegaram ao departamento técnico
da ABS Pecplan, demonstrando que os conhecimentos
sobre estocagem e transporte do botijão são poucos
e o sucesso de um programa de inseminação artificial
começa no manuseio adequado do sêmen.
1. Como surgiu o botijão criogênico para conservação
do sêmen congelado?
Na década de 1950 o fundador da ABS, John
Rockefeller Prentice tornou-se interessado no uso do
nitrogênio líquido para a conservação do sêmen
bovino na temperatura de -196ºC, quando vislumbrou
a grande aplicação do sêmen congelado para o
crescimento da inseminação artificial. A mistura do
gelo seco (dióxido de carbono) e o álcool absoluto
na temperatura de -79ºC era a principal forma de
conservar o sêmen congelado naquele tempo. Após
a primeira tentativa feita pela Corning Company para
desenvolver um frasco isotérmico feito de vidro revestido
com metal, para conservar o nitrogênio líquido, “Rock”
Prentice então com seus próprios recursos financeiros,
recrutou a Divisão Linde da Union Carbide para
fabricar um frasco de Dewar feito de aço inoxidável.
Os primeiros modelos, usados por muitos anos, não
precisavam reabastecer com nitrogênio líquido por
até 4 semanas. Graças aos novos sistemas de super
isolamento, uso do alumínio e desenhos melhores, os
recipientes tornaram-se mais leves, com baixo custo
de recarga, podendo permanecer até 4 meses sem
recarga de nitrogênio líquido.
2. Como o botijão criogênico é construído?
Os botijões para armazenagem de sêmen são
recipientes isotérmicos, com duas camadas de metal
(alumínio) como “um botijão dentro de outro botijão”,
com material isolante (folhas de alumínio e lã de vidro)
e vácuo entre as capas internas e externas, semelhante
a uma garrafa térmica. Os botijões para uso no campo
possuem 6 canecos, com capacidade para receber
de 10 a 12 raques. Cada raque tem capacidade
para 10 palhetas médias ou 20 palhetas finas. O
botijão recebe o nitrogênio líquido, que conserva o
sêmen congelado a uma temperatura de -196ºC
(cento e noventa e seis graus centígrados negativos)
por tempo indeterminado, desde que se mantenha
um determinado nível mínimo do líquido refrigerante,
abastecendo-o periodicamente, conforme
recomendação do fabricante do equipamento.
Cuidados no manuseio do botijão de sêmen
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3. Onde e como devo guardar o botijão na minha
propriedade?
O botijão criogênico deve ser guardado em local
ventilado, limpo, seco e ao abrigo do sol, de preferência
sobre uma grade de madeira ou plástico para evitar
possível corrosão devido ao contato do metal com
o cimento. Ele deve ser manuseado com o máximo
cuidado para evitar danos que possam resultar em
amassamento ou furo da capa externa e deslocamento
do gargalo, que pode ocasionar a perda prematura
do nitrogênio líquido. Para diminuir os riscos com o
botijão, é aconselhável a construção de uma caixa
de madeira ou plástico para seu acondicionamento,
evitando que sofra choques ou movimentos muito
bruscos, além de tombamento derramando todo o
seu conteúdo. A caixa deve conter uma camada de
5 cm de isopor no fundo e uma forração nas laterais
para evitar riscos e avarias. A tampa da caixa pode ser
vazada para possibilitar a visualização do botijão.
4. Qual o nível mínimo de nitrogênio líquido no
botijão e por quê?
Os botijões criogênicos estão disponíveis em diversos
tamanhos, com diferentes capacidades para nitrogênio
líquido. Porém, os modelos mais comuns são aqueles
de 20 litros, para armazenar em torno de 600 palhetas
médias ou 1200 palhetas finas. O nível do nitrogênio
líquido é medido com a régua plástica adequada,
onde deve estar com 33 cm quando cheio (20 litros).
A altura mínima é de 15 cm de nitrogênio liquido (em
torno de 9 litros), e é extremamente importante que
neste nível ele seja imediatamente reabastecido. Na
medida em que o nitrogênio líquido evapora, ocorre
uma troca de temperatura do meio ambiente para
dentro da câmara onde estão as doses de sêmen.
Toda a vez que o técnico inseminador ergue o
caneco para retirar o sêmen, mais ar entra na câmara
ocorrendo mais evaporação. No gargalo do botijão
a temperatura fica próxima de -100ºC e na boca do
botijão ela está na temperatura ambiente, crítica para
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o sêmen e onde poderão ocorrer danos irreversíveis se
a dose não for retirada rapidamente.
5. Como devo reabastecer o botijão com nitrogênio
líquido?
Quando o seu botijão estiver com 15 cm de nitrogênio,
deve ser reabastecido imediatamente. Caso baixe
para 10 cm, significa que possui 5,5 litros restantes. Se
a capacidade é de 20 litros, faltam aproximadamente
15 litros para completá-lo. Nesse nível de 10 cm a
evaporação é maior ainda pela troca de ar com o
ambiente toda a vez que removemos a tampa do
botijão para erguer o caneco. Então como regra
geral, abasteça seu botijão o mais rápido possível,
quando atingir 15 cm de nível de nitrogênio líquido.
O botijão deve ser reabastecido pelos representantes
da ABS Pecplan, que estão habilitados para lidar com
o nitrogênio líquido. Tome cuidado ao reabastecê-
lo porque o nitrogênio líquido é muito frio e provoca
queimaduras quando em contato com a pele. O
recomendado é utilizar luvas apropriadas e óculos de
proteção durante o seu manuseio. Em caso de estar
em ambiente pouco ventilado, abra a porta para que
o vapor do nitrogênio se dissipe para o meio ambiente.
6. Para que servem as ampolas monitoras?
Os botijões comercializados pela ABS Pecplan são
acompanhados de uma raque com duas ampolas
monitoras (uma azul e outra vermelha), que servem para
monitorar a possível falta de nitrogênio liquido. Quando
a ampola monitora azul estiver descongelada o sêmen
provavelmente está bom, mas é recomendável
avaliá-lo num laboratório. Quando também a
ampola monitora vermelha estiver descongelada,
provavelmente o sêmen está danificado e deve ser
avaliado imediatamente. Nunca retira a raque com as
ampolas monitoras do botijão.
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7. Como devo manusear o sêmen durante a sua
retirada do botijão?
Para evitar manuseios desnecessários, deve ser
feito um inventário detalhado do sêmen, para que
as palhetas possam ser localizadas facilmente e
retiradas rapidamente do botijão, evitando exposição
á temperatura ambiente. Toda a raque contém
o número de identificação do touro na central, o
que facilita a localização do sêmen. O caneco que
contém o sêmen deverá ser levantado até no máximo
5 cm abaixo da boca do botijão para que a dose
seja retirada. Neste manuseio é essencial o uso de
uma boa pinça para remover a palheta. O tempo
máximo para a total retirada do sêmen de seu interior,
não deve ser mais que 5 segundos para qualquer
tipo de embalagem (palheta media ou fina). Caso
não consiga identificar o sêmen e retirá-lo em cinco
segundos, deve-se abaixar a caneca até o fundo do
botijão e 10 segundos depois, recomeçar a operação.
Após retirar o sêmen do botijão nunca o deixe sem a
tampa, para evitar evaporação do nitrogênio líquido.
8. Por que devo evitar a exposição do sêmen à
temperatura ambiente?
Porque as alterações causadas nos espermatozóides
tanto na motilidade com nas membranas
citoplasmáticas, ocorrem acima de -79ºC. Estas lesões
não voltam ao normal depois que o sêmen retorna
para a temperatura do nitrogênio líquido. A palheta
fina é mais sensível e manuseios errados provocam
alterações na temperatura interna da palheta, com
perda na qualidade e redução da fertilidade. O
sêmen sexado é envasado em palhetas finas (0,22
mL), contendo 2,1 milhões de espermatozóides. O
menor diâmetro e a menor concentração a tornam
mais sensível a erros de manuseio. Lembre-se que a
temperatura ambiente afeta o tempo de exposição
do sêmen na boca do botijão. Em temperaturas
ambientes de 36ºC os efeitos são mais prejudiciais do
que em temperaturas ambientes a 18ºC, por exemplo.
Correntes de vento direto na boca do botijão de sêmen
também prejudicam a qualidade do sêmen.
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9. Como devo fazer para transferir as raques ou os
canecos com sêmen de um botijão para outro?
Quando for necessário fazer a troca de raques de um
botijão para outro, coloque os botijões um ao lado
do outro. Para fazer esta operação são necessárias
duas pessoas, sendo que uma levanta o caneco
até o gargalo, o suficiente para apanhar a raque a
transferir, baixando-o imediatamente até o fundo do
botijão, enquanto a outra pessoa levanta o caneco
do outro botijão para introduzir a raque e colocar o
mesmo imediatamente na sua posição. Os canecos
com as raques não devem ser levantados a uma altura
superior a 5 cm abaixo do gargalo do botijão, devendo
ser mantidos a esta altura o mínimo tempo possível.
Sendo necessário tempo adicional, desça o caneco
durante 10 segundos para que volte à temperatura
do nitrogênio líquido. A raque não pode ser exposta à
temperatura ambiente por mais de 10 segundos.
Para a transferência de canecos entre botijões os
procedimentos são muito semelhantes à transferência
de raques. Os botijões devem ser colocados um
ao lado do outro e depois de retiradas as tampas,
deve-se proceder com rapidez a transferência de
cada caneco. O tempo de exposição do caneco a
temperatura ambiente não deve exceder 15 segundos,
porque o caneco não conserva nitrogênio líquido no
seu interior. Devemos tomar cuidado no encaixe dos
canecos no aro separador do fundo do botijão e
também no encaixe da alça do caneco no número
do aro da boca do botijão. Esta mesma operação
deve ser realizada com todos os canecos a transferir,
terminando a operação com rapidez, precisão e
cuidado.
10. Quais os cuidados no transporte do botijão de
sêmen?
Os botijões criogênicos devem ser transportados com
muito cuidado, firmemente amarrados na caçamba
do veículo, para evitar que tombe e derrame o
nitrogênio líquido. De preferência transportá-los na
própria caixa de proteção. Não devemos transportar
botijões em carros de passeio, porque com os vidros
fechados o nitrogênio líquido ao evaporar, torna-se um
gás asfixiante pela remoção do oxigênio do ambiente,
podendo provocar desmaios e morte nos casos mais
graves. Ao movimentá-lo fazer sempre com duas
pessoas para evitar tombamentos e danificar a sua
estrutura interna.
Lembre-se: seu botijão criogênico é o cofre onde
estão guardadas as doses de sêmen dos reprodutores
valiosos que você escolheu para suas vacas. Então
guarde-o com muito cuidado e usufrua dos seus
benefícios.
Mande suas dúvidas para serem respondidas pela
equipe de especialistas da ABS: neimar@absnet.
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