aeromonas, vibrio y plesiomonas dr carlos a. vay - profesor regular adjunto. dpto. de bioquímica...
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Aeromonas, Vibrio y
PlesiomonasDr Carlos A. Vay
- Profesor Regular Adjunto. Dpto. de Bioquímica Clínica. Area Bacteriología.
- Facultad de Farmacia y Bioquímica. UBA.
- Jefe Asistencial. Laboratorio Bacteriología. Hospital de Clínicas. UBA.
- Director Carrera de Especialización en Bacteriología Clínica. UBA.
- Jefe Laboratorio de Microbiología. Sanatorio Mater Dei.
Bacilos gram-negativos aerobios (BGN)Bacilos gram-negativos aerobios (BGN)
Sin cambio (Alcalino / Neutro)
BGNNF
Sin cambio (Alcalino / Neutro)
BGNNF
Fermentación de glucosa (TSI)Fermentación de glucosa (TSI)
Acido / Acido ó Alcalino / Acido
- Enterobacteriaceae- Vibrionaceae / Aeromonadaceae- Pasteurellaceae
Requerimientos nutricionales complejos (exigentes)
Acido / Acido ó Alcalino / Acido
- Enterobacteriaceae- Vibrionaceae / Aeromonadaceae- Pasteurellaceae
Requerimientos nutricionales complejos (exigentes)
+Pasteurellaceae
(inmóviles)
+Pasteurellaceae
(inmóviles)
-
Oxidasa
-
Oxidasa
+Vibrionaceae / Aeromonadaceae/Plesiomonas
(móviles)
+Vibrionaceae / Aeromonadaceae/Plesiomonas
(móviles)
-Enterobacteriaceae*
-Enterobacteriaceae*
Bacilos gram-negativos no fermentadoresBacilos gram-negativos no fermentadores
Bacilos gram-negativos
TSI
Bacilos gram-negativos
TSI
Pico alcalino / fondo neutro
Bacilo Gram Negativo
No Fermentador
Pico alcalino / fondo neutro
Bacilo Gram Negativo
No Fermentador
Fondo ácido
- Enterobacteriaceae- Aeromonadaceae- Vibrionaceae- Otros bacilos gram negativos fermentadores
Fondo ácido
- Enterobacteriaceae- Aeromonadaceae- Vibrionaceae- Otros bacilos gram negativos fermentadores
Enterobacteriaceae
75%
Otros1%
Haemophilus9%
BNFG15%
Distribución de bacilos gram negativosDistribución de bacilos gram negativos
aerobios en materiales clínicosaerobios en materiales clínicos
Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas
• Bacilos gram-negativos pleomórficos
• Fermentadores de Glucosa
• Móviles
• Oxidasa Positiva ( sólo una excepción)
• Flagelación polar
• No crecen en EMB de Levine
• A menudo Beta-hemolícos ( No Plesiomonas)
Vibrionaceae-AeromonadaceaeVibrionaceae-AeromonadaceaeDiferenciación con otros Bacilos gam-negativos Diferenciación con otros Bacilos gam-negativos
Fermentadores.Fermentadores.
Vibrio-AeromonasVibrio-Aeromonas EnterobacteriaceaeEnterobacteriaceae
OxidasaOxidasa +*+* -*-*
FlagelosFlagelos PolarPolar PerítricosPerítricos
EMB LevineEMB Levine -- ++
TaxonomíaManual de Bergey, 2006
• Aeromonadaceae: Aeromonas ( 1986, Colwell et al, IJSB )
• Vibrionaceae: Vibrio, Photobacterium, Salinivibrio
• Enterobacteriaceae: Plesiomonas
Características fenotípicas diferenciales deCaracterísticas fenotípicas diferenciales de Vibrio, Vibrio,
Photobacterium, Aeromonas, Plaesiomonas.Photobacterium, Aeromonas, Plaesiomonas.
Na+ requerimientoNa+ requerimiento
O129O129
DNAsaDNAsa
AsociaciónAsociación
Infección humana Infección humana
LipasaLipasa
ManitolManitol
VibrioVibrio
++
S*S*
+/-+/-
++
++
++
PhotobacteriumPhotobacterium
+ +
SS
NDND
--
VV
--
AeromonasAeromonas
--
RR
++
++
++
++
PlesiomonasPlesiomonas
--
SS
--
++
--
--
Vibrio-AeromonasVibrio-AeromonasDiferenciación FenotípicaDiferenciación Fenotípica
ClNa 0%ClNa 0% ClNa 6%ClNa 6% O129(150 ug)O129(150 ug)
Vibrio Vibrio HALOFILICOHALOFILICO -- ++ S*S*
Vibrio Vibrio NO HALOFILICONO HALOFILICO ++ VV S*S*
AeromonasAeromonas ++ -- RR
Vibrio Vibrio No HalofílicoNo Halofílico y Aeromonas y AeromonasDiferenciación FenotípicaDiferenciación Fenotípica
ODCODC Gas GluGas Glu O129(150 ug)O129(150 ug)
Vibrio Vibrio NONO HALOFILICOHALOFILICO ++ -- S*S*
Aeromonas Aeromonas spp spp ( excluida( excluida A veroni A veroni biovarbiovar
veroniiveronii))
-- VV RR
Aeromonas veronii Aeromonas veronii biovar biovar veroniiveronii ++ ++ RR
Género Aeromonas
Complejo Aeromonas hydrophilaComplejo Aeromonas caviaeAeromonas veronii ( bv veronii y bv sobria)Aeromonas jandaeiAeromonas trotaAeromonas schubertiiAeromonas encheleiaAeromonas allosacharophilaAeromonas sobriaAeromonas popoffii
Complejo Aeromonas hydrophila
Aeromonas hydrophila HG1 Aeromonas bestiarum HG2Aeromonas salmonicida HG3 Aeromonas salmonicida ss salmonicida Aeromonas salmonicida ss masoucida Aeromonas salmonicida ss achromogenes Aeromonas salmonicida ss smithia Aeromonas salmonicida ss pectinolytica Aeromonas salmonicida (Humana)FENOTIPO A. hydrophila
Complejo Aeromonas caviae
Aeromonas caviae HG 4
Aeromonas media HG5
Aeromonas eucrenophila HG6
FENOTIPO A. caviae
Aeromonas Aeromonas sppsppDiferenciación de Fenotipos o fenoespeciesDiferenciación de Fenotipos o fenoespecies
Complejo Complejo
A. hydrophilaA. hydrophila
Complejo Complejo
A. caviaeA. caviae
ComplejoComplejo
A. sobriaA. sobria
A.A. veronii veronii
bvbv veronii veronii
Gas GluGas Glu ++ -- ++ ++
ODCODC -- -- -- ++
EsculinaEsculina ++ ++ -- ++
VPVP ++ -- VV ++
LarabinosaLarabinosa ++ ++ -- --
Aeromonas Aeromonas sppspp Fenotipos de Resistencia Fenotipos de Resistencia
Complejo Complejo
A. hydrophilaA. hydrophila
Complejo Complejo
A. caviaeA. caviae
ComplejoComplejo
A. sobriaA. sobria
A.A. veronii veronii
bvbv veronii veronii
CefalotinaCefalotina RR RR S/RS/R SS
Complejo Aeromonas sobriaComplejo Aeromonas sobriaDiferenciación fenotipica de especiesDiferenciación fenotipica de especies
A. jandaeiA. jandaei
A. schubertiiA. schubertiiA. trotaA. trota
A.A. veronii veronii
bvbv sobria sobria
Gas GluGas Glu ++ -- VV ++
IndolIndol ++ -- ++ ++
sacarosasacarosa -- -- VV ++
ManitolManitol ++ -- ++ ++
CefalotinaCefalotina RR SS RR SS
Aeromonas
• Habitat: Agua dulce, agua servida. Agua clorada, incluida la de suministro hospitalario.
Infecciones:
• Gastrointestinales
• Extraintestinales
AeromonasInfecciones intestinales: Pruebas que
respaldan su participación en la enfermedad diarreica
• Mayor porcentaje de portadores en personas sintomáticas que asintomáticas.
• Ausencia de otros patógenos en los individuos portadores de Aeromonas.
• Enterotoxinas• Mejoría de la diarrea con tratamiento ATB activos y
empeoramiento clínico con ATB ineficaces.• Respuesta inmune específica.
Infecciones Intestinales por Aeromonas
• Especie más frecuente A caviae.• Especies varían con el área geográfica. • Recocidas en todo el mundo.• Más común en niños < 2 años• Más común en verano: Mayor cc en agua. • Casos esporádicos.• Creciente de diarrea del viajero• Un caso de SUH (Bognanovic et al, Pedriatr Nephrol, 1991)
• Factores de riesgo en adultos: Enf. GI o hepatobiliar, hipo o acloridria, ATB reciente.
Aeromonas Aeromonas
Infecciones GastrointestinalesInfecciones GastrointestinalesTipo de DiarreaTipo de Diarrea CaracterísticasCaracterísticas FrecuenciaFrecuencia ComentariosComentarios
SecretoraSecretora Acuosa, vómitosAcuosa, vómitos Muy comúnMuy común > 40ºC, dolor epigastrio, > 40ºC, dolor epigastrio,
vómitos (niños)vómitos (niños)
DisenteríaDisentería Sangre,leucocitos, mucus,Sangre,leucocitos, mucus, Muy común,Muy común, a menudo requieren a menudo requieren
hospitalización y ATBhospitalización y ATB
CrónicaCrónica Diarrea > 10 dDiarrea > 10 d ComúnComún Aumento de GB, pérdida Aumento de GB, pérdida
de peso dolor abdominalde peso dolor abdominal
ColéricaColérica Agua de arrozAgua de arroz RaraRara Toxina coléricaToxina colérica
Del ViajeroDel Viajero Distintas Distintas
presentacionespresentaciones
DesconocidoDesconocido
AeromonasInfecciones Extraintestinales
• Heridas: Celulitis, Mionecrosis, Ectima.
• Bacteriemia/sepsis
• I de la vía biliar
• Otras
AeromonasInfecciones Heridas
• Traumatismo y luego contacto con el medio ambiente en particular agua.
• Injurias, accidentes, espinas de pescados, mordedura de reptiles, quemaduras.
• Accidente automovilisticos. Aplastamiento de tejidos.
• Rugby australiano: barro preparado con agua de río.
• Sanguijuelas medicinales: intestino colonizado con Aeromonas. Hoy se
recomienda profilaxis ATB antes de aplicarlas! 7-20 % de los pacientes desarrollan
Inf por Aeromonas.
Aeromonas Aeromonas
Infecciones HeridasInfecciones Heridas
TipoTipo PatologíaPatología FrecuenciaFrecuencia Recuperación del pacienteRecuperación del paciente
CelulitisCelulitis Inflamación de Inflamación de
TCS TCS ~ ~ EEßßHH
ComúnComún A menudo completa.A menudo completa.
MionecrosisMionecrosis Necrosis, hemorragia, Necrosis, hemorragia,
licuefación de tejido, GASlicuefación de tejido, GAS
RaraRara A menudo requieren A menudo requieren
amputación. Alta amputación. Alta
mortalidad cuando el HC+. mortalidad cuando el HC+.
Debridamiento y ATB.Debridamiento y ATB.
Ectima Ectima
gangrenosogangrenoso
Asociado con sepsis, ectima Asociado con sepsis, ectima
con borde eritematoso y con borde eritematoso y
centro necrótico.centro necrótico.
Menos Menos
comúncomún
A menudo fatal.A menudo fatal.
• Paciente Inmunocomprometido:Paciente Inmunocomprometido:
• Cirrosis 50% ( peritonitis espóntánea)Cirrosis 50% ( peritonitis espóntánea)
• Neoplasias ( sólidas y oncohematológicasNeoplasias ( sólidas y oncohematológicas))
• Disfunción hepatobiliar.Disfunción hepatobiliar.
• NormoinmuneNormoinmune
Mayoría Mayoría monomicrobianasmonomicrobianasAeromonas hydrophila:Aeromonas hydrophila:
es la más frecuentees la más frecuente• • 1/3 Nosocomiales1/3 Nosocomiales
Flora endógenaFlora endógena
HeridasHeridas
Vía biliarVía biliar
AeromonasAeromonas: Bacteriemia: Bacteriemia
AeromonasOtras Infecciones Extraintestinales
• Vía biliar.
• Tracto respiratorio
• Ocular
• Osteomielitis
• Otras: epididimitis, endocarditis,etc.
Aeromonas hydrophila Brote Nosocomial
• Cirugía de la vía biliar
• 3 laparoscopía y drenaje percutáneo.
• Endoscopio GI fue la fuente de la infección.
• Problema: incompleta inmersión en glutaraldehido, inadecuado cepillado de los canales internos e inapropiado secado.
Marin et al.1999.SHEA Congress.
AeromonasResistencia a ß lactámicos
Tres ß lactamasas cromosómicas inducibles.
• Cefalosporinasa de clase C
• Penicilinasa de clase D
• Metalo ß lactamasa de clase B ( sólo detectada por CIM con inóculo
elevado): A hydrophila, A veronii bv sobria, A veronii bv veronii y A
jandaei)
AeromonasATMs
• Ciprofloxacina ( 2-3 % de R en Asia; mutaciones en gen gyrAR a ác. nalidíxico)
• Cef 3ª Generación: sensible, pero Hiper producción o BLEE.
• Aminoglucósidos.
• TMS
• Tetraciclinas
• Cloranfenicol
Vibrio
• Habitat: Agua salada y dulce, superficie de moluscos bivalvos.
Infecciones:
• Gastrointestinales
• Extraintestinales
Vibrios Gastrointestinales
• V cholerae O1 y No O1
• V parahaemolyticus, V fluvialis, V furnisii, V mimicus, G hollisae.
Vibrios Extraintestinales
• V cholerae No O1
• V vulnificus
• V alginolyticus
• P damsela
Esquema diferencial de los seis grupos de Vibrios que infectan Esquema diferencial de los seis grupos de Vibrios que infectan al hombre.al hombre.
PruebaPrueba Grupo 1Grupo 1
V cholerae/V cholerae/
V mimicusV mimicus
Grupo 2Grupo 2
V V metschnikoviimetschnikovii
Grupo 3Grupo 3
V V cincinatcincinatiencisiencis
Grupo 4Grupo 4
V V hollisaehollisae
Grupo 5Grupo 5
V V damsela/ damsela/ V fluvialisV fluvialis
Grupo 6Grupo 6
V alginolyticus/ V V alginolyticus/ V parahaemolyticus/parahaemolyticus/V vulnificusV vulnificus
ClNa 0%ClNa 0% ++ -- -- -- -- --
OxidasaOxidasa ++ -- ++ ++ ++ ++
NitratoNitrato ++ -- ++ ++ ++ ++
InositolInositol -- VV ++ -- -- --
ADHADH -- -- -- ++ --
LDCLDC ++ -- -- ++
ODCODC ++ -- --
Vibrio Identificación
• No confundir con aeromonas• Vibrio fluvialis~Aeromonas caviae: Error
frecuente, inclusive de sistemas automatizados o miniaturizados de identificación.
• V cholerae~Aeromonas veronii bv veronii• V metschnikovii OXIDASA NEGATIVA• Agregar 1% más de ClNa a las pruebas!
Cólera
• “Flujo de bilis”
• 7 pandemias.
• Seis primeras: 1817-1923 (Biotipo Clásico) origen Asia –
India-• 7ma pandemia: El Tor. Islas Célebes(Indonesia) en 1961.• La última expansión 1991 América Latina.• Esta pandemia continúa: 58 naciones 184.311 casos en
2001 OMS.• Octubre 1992: Mandrás, India, luego Golfo de Bengala.
Vibrio O139 (octava pandemia) Ahora ha quedado confinada a Bangladesh e India.
• Hoy coexisten ambos
Cólera Epidemiología• Vive en el agua: Reservorio natural
• O1 y No O1 coexisten y predominan en este ambiente las cepas
no toxigénicas.
• En el ambiente natural vive unido a un tipo particular de algas,
adherido a la superficie de crustáceos y a copépodos en forma
simbiótica. • Temperatura, salinidad, y disponibilidad de nutrientes permiten
que se multiplique sin intervención del ser humano.• Si las condiciones no son adecuadas pasa a estado latente y no
se puede cultivar.• A partir del medio acuático se introduce en seres humanos.• El ciclo de cierra cuando los seres humanos infectados liberan la
bacteria al ambiente y contaminan suministros de agua y los alimentos.
Vibrio choleraeVibrio cholerae
Período de incubación:Período de incubación: 12 a 72 horas 12 a 72 horas
Transmisión:Transmisión: a través de productos marinos (ostras, almejas, a través de productos marinos (ostras, almejas,
cangrejos, camarones) o agua contaminada o alimentos cangrejos, camarones) o agua contaminada o alimentos
contaminados por las deposiciones de los enfermoscontaminados por las deposiciones de los enfermos
Hábitat:Hábitat: mar, estuarios, ríos de agua dulce con o sin materia mar, estuarios, ríos de agua dulce con o sin materia
orgánica. Es endémico en áreas de Asia y en América en la orgánica. Es endémico en áreas de Asia y en América en la
zona de la cuenca del amazonas y en Brasil. Atención con zona de la cuenca del amazonas y en Brasil. Atención con
pacientes que refieren viajes a áreas endémicaspacientes que refieren viajes a áreas endémicas
Dosis infectante:Dosis infectante: 10 1088 UFC/ml UFC/ml
Vibrio choleraeVibrio cholerae
Mecanismo patogénico:Mecanismo patogénico: enterotoxina citotónica enterotoxina citotónica secreción secreción
de agua y electrolitos sin daño de la mucosa de agua y electrolitos sin daño de la mucosa diarrea diarrea
secretorasecretora
Infección sistémica:Infección sistémica: V. choleraeV. cholerae O1 O1 circunscripto al circunscripto al
intestino. intestino.
Tratamiento:Tratamiento: reposición de agua y electrolitos. El ATB acorta reposición de agua y electrolitos. El ATB acorta
la duración de la enfermedad, el período de excreción y la duración de la enfermedad, el período de excreción y el el
volumen de las hecesvolumen de las heces
Vibrio choleraeVibrio cholerae
No O1No O1 O1O1
BiotiposBiotipos
SerotiposSerotipos
OGAWAOGAWA INABA INABA HIKOJIMAHIKOJIMA
ToxigénicoToxigénico No ToxigénicoNo Toxigénico
Clásico (Clásico (, VP-, PBS), VP-, PBS) El TOR (El TOR ( o o , VP+, PBR), VP+, PBR)
Vibrio choleraeVibrio cholerae
2) Pruebas Bioquímicas2) Pruebas Bioquímicas
TSITSI Ac/Ac sin Ac/Ac sin
gasgas
CitratoCitrato ++
LDCLDC ++
ODCODC ++
ADHADH --
SIMSIM -/+/+-/+/+
VPVP VV
O129 (150 µg/ml) SensibleO129 (150 µg/ml) Sensible
Cto Caldo 0 % ClNaCto Caldo 0 % ClNa ++
Cto Caldo 6.5 ClNaCto Caldo 6.5 ClNa vv
M-inositolM-inositol Negativo Negativo
Vibrio choleraeVibrio cholerae
1) Siembra en agua peptonada alcalina (pH 9.2)1) Siembra en agua peptonada alcalina (pH 9.2)
6 a 8 horas de incubación6 a 8 horas de incubación
Agar sangreAgar sangre TCBSTCBS
Colonias amarillasColonias amarillas
Colonias ßhemolíticasColonias ßhemolíticas Identificación Identificación
BioquímicaBioquímica
Oxidasa-Serología O1Oxidasa-Serología O1
++ ++
Identificación bioquímicaIdentificación bioquímica
Enviar a laboratorio de Referencia para determinarEnviar a laboratorio de Referencia para determinar
Serotipo y toxina coléricaSerotipo y toxina colérica
Antibiograma Vibrio cholerae (CLSI)
• Difusión
• Agar Mueller-Hinton, 35ºC, 16-18 hs.
• Ampicilina
• Tetraciclina ( no usar doxiciclina: no correlaciona con CIM)
• TMS
• Sufonamidas ( sulfisoxazol)
• Cloranfenicol (usar con precaución por error minor)
Vibrio cholerae en ArgentinaPetroni et al AAC, 2002
• 1947(40% de los aislamientos): 28 asilamientos BLEE+
• CTX-M y PER-2
• Resistencia a otros ATMs:
Todos:Gentamicina-TMS- kanamicina,
Amicacina-estreptomicina: 3
TMS, tetra y Clor: 2
Vibrios extraintestinales
• V vulnificus• Es el más virulentos (cápsula
PS: fagocitosis, estimula αFNT)
• Sepsis+inf de tejido blando• No diarrea• Lesiones metastásicas
cutáneas: 1- ampollas/vesículas hemorrágicas 2-úlcera necrótica
• Mortalidad 50 %• Cirrosis, hepatopatía, Ca, VIH,
sobrecarga de hierro.
• Vibrio chloreae No O1• Bacteriemia• Cirrosis,
oncohematológicos.• A menudo fatales.• Otras: peritonitis
espontánea, infección de heridas.
• V alginolyticus• Otitis• Heridas
Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas
• Datos epidemiológicos :
1- Diarrea: tipo de ingesta, agua no potable, viajes.
2- ExtraIntestinal: contacto con medio acuoso.
• Laboratorio:
1- Bacilo gram-negativo ß hemolítico
2- Ausencia o desarrollo pobre en EMB.
3- Oxidasa Positiva/ fermentador.