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INTRODUCCIÓN A LA BIOPSIA RENAL
Lucía M. González LópezServicio Anatomía
PatológicaHospital General Universitario Ciudad Real
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Objetivos• Conocer el procesamiento rutinario de
muestras renales en AP: MO, IFD, ME• Evaluación histológica de la biopsia renal:
-Identificar compartimentos del riñón-Reconocer patrones de lesión glomerular y términos histológicos-Reconocer patrones de IFD
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Procesamiento rutinario de la biopsia renal
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1. Envío de la muestra2. Manejo en AP3. Muestra en congelación4. Muestra en parafina
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Envío a AP
• Manipular con mucho cuidado, evitando comprimirlo o fragmentarlo
• Enviar en fresco lo antes posible• Poner el cilindro sobre papel filtro, u otro papel que no se
deshaga (no papel higiénico ni toallas absorbentes), y luego envolver este papel con la muestra en gasa empapada abundantemente en solución salina: la muestra no se debe dejar secar.
• Si la muestra tardará más de 30 minutos en llegar al laboratorio : refrigerar poniendo el recipiente con la biopsia en otro con cubos de hielo/nieve carbónica
Nunca poner la muestra en el congelador.4
Procesamiento rutinario de las biopsias renales
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Papel de filtro/gasa/suero salino
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Caja con hielo seco/nieve carbónica
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Manejo en AP
• Microscopio de disección : Seleccionar tejido con glomérulos para I.F.D. , M.E. y M.O.
• La médula muestra estructuras paralelas que corresponden a los conductos colectores y a los vasos rectos.
• La corteza contiene glomérulos visibles como pequeños acúmulos de capilares o como puntos gruesos rojos.
• En casos de extensa destrucción glomerular o semilunas difusas y circunferenciales puede ser más difícil identificarlos.
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Manejo en AP-congelación
• Para IFD :Fragmento con varios glomérulos(no uno sólo). Congelación rápida y cortes en criostato Antisueros: IgG, IgA, IgM, albúmina, C3, C4, C1q, Kappa, lambda y fibrinógeno.
• Para ME dos pequeños fragmentos, de 1 - 2 mm, con glomérulos. Glutaraldehído. En casos necesarios, el tejido incluido en parafina puede recuperarse para ME, pero la calidad de las imágenes disminuye marcadamente
• El tejido restante se procesa para inclusión en parafina y cortes para microscopio óptico.
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Manejo en AP-Parafina
• Cortes (2 - 3 micras de espesor) teñidos con :-H-E. Núcleos azules(basófilos) .Citoplasma rosa(eosinófilo)-PAS: Colágeno IV-Plata-metenamina : Colágeno IV-Tricrómico de Masson: Colágeno I-Rojo congo .9 micras. Amiloide
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Evaluación histológica de la biopsia renal
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1. Número glomérulos2. Compartimentos del riñón3. Glomérulos: Estructura histológica, composición,
evaluación, patrones histológicos y términos.4. Túbulos5. Intersticio6. Vasos7. Patrones de IFD
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Evaluación histológica de la biopsia renal. Número glomérulos
• La correlación entre los hallazgos histológicos y clínicos es de gran importancia para llegar a un diagnóstico definitivo. No se debe nunca hacer un diagnóstico final sin la información clínica relevante en cada caso
• El diagnóstico en patología renal depende en gran parte de la cantidad de tejido adecuado para diagnóstico.
• Número glomérulos necesarios: según patología.-Lesiones difusas 1 puede ser diagnóstico.-Más de 10/12 glomérulos.
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Compartimentos del riñón
1.Glomérulos2.Intersticio3.Vasos4.Túbulos
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¿Cuál es el más afectado?EVALUACIÓN
SISTEMÁTICA DE LOS 4
Evaluación histológica de la biopsia renal
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Glomérulos: estructura
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Evaluación histológica de la biopsia renal
Estructura formada por el penacho, el espacio y la cápsula de Bowman.
• El penacho está formado por lóbulos de capilares.
• La arteriola aferente da origen a 4 - 8 capilares, cada uno de los cuales se subdivide para formar un lóbulo.
• En cada lóbulo hay varias áreas mesangiales
• Área mesangial: Porción del mesangio que sostiene varias luces capilares en los cortes histológicos
• Normal: 2-3 núcleos /área mesangial
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Glomérulos
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Glomérulo. Composición
• Los principales componentes de la MB: colágeno tipo IV, heparán sulfato, laminina, proteoglicanos, entactina y fibronectina
• La matriz mesangial está formada por diferentes tipos de colágeno (III, IV, V y VI), proteínas microfibrilares, glucoproteínas, proteoglicanos y otros componentes
Técnicas. -H-E: Núcleos azules(basófilos) .Citoplasma rosa(eosinófilo)-PAS: Colágeno IV : Mesangio y MB-Plata-metenamina : Colágeno IV. Mesangio y MB-Tricrómico de Masson: Colágeno (I). Mesangio, MB e intersticio
+ Comportamiento de los depósitos 19
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Glomérulo -HE
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Glomérulo- Plata
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Glomérulo- PAS
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Glomérulo- T. Masson: Azul o verde
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Evaluación de glomérulos1. Grado de celularidad. No debe haber más de tres células por área mesangial•Falsa hipercelularidad en corte grueso: falsa hipercelularidad.•No evaluar la celularidad en las aréas mesangiales adyacentes al polo vascular porque en ellas hay, normalmente, más células.2. Tipo de hipercelularidad:•Mesangial : Diferenciar matriz o celularidad mesangial•Endocapilar: Hipercelularidad dentro del penacho. Las células que proliferan son mesangiales, endoteliales y células inflamatorias circulantes •Extracapilar(semiluna): Proliferación de células en el espacio de Bowman.
Al menos dos capas de células tapizando la cápsula de Bowman más del 25% de la circunferencia del glomérulo.
Las células que proliferan son podocitos parietales y células inflamatorias, principalmente monocitos
Puede ser circunscrita o circunferencial.
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Hipercelularidad mesangial. HE
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Expansión matriz mesangial. PAS
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Hipercelularidad mesangial-endocapilar
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Hipercelularidad endocapilar-inflamatorias
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Proliferación extracapilar(semiluna). Plata
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Patrones histológicosHipercelularidad•Mesangial•Mesangial y endotelial•Celularidad inflamatoria•Celularidad epitelial(semilunas)Engrosamiento de la membrana basal•Subepitelial•SubendotelialHialinización y esclerosis
Endocapilar
Extracapilar
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Términos
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Evaluación histológica de la biopsia renal
•Global: Que compromete todo el glomérulo.•Segmentario: Compromete sólo una parte del glomérulo.•Difuso: Que compromete todos, o casi todos, los glomérulos.•Focal: Que compromete sólo algunos glomérulos. No está definido o porcentaje exacto y aceptado por todos. •Hialinosis: Depósitos glomerulares homogéneos, amorfos, compuestos principalmente de material proteináceo. Debe diferenciarse de la necrosis fibrinoide, que presenta similares características tintoriales, pero, es un material más granular, menos homogéneo y se acompaña de detritus celulares y/o células inflamatorias.• Esclerosis: Lesión glomerular cicatricial producida con proliferación de colágeno tipo IV (colágeno glomerular).•Fibrosis: Cicatrización producida, principalmente, con colágeno tipo I (colágeno de tipo intersticial).
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Hialinosis-esclerosis
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Esclerosis
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Colágeno I. PAS -
Colágeno IV. PAS +
Colágeno I. Plata -
Colágeno IV. Plata +
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Túbulos
• Los túbulos corresponden al 90% de la corteza renal• Estructura con la mayor demanda energética del
riñón.• El sistema tubular de la nefrona se divide en varios
segmentos: túbulos proximales, porción delgada del asa de Henle, porción gruesa del asa de Henle, túbulo contorneado distal y conductos colectores.
• Afectación túbulo-intersticial: Importante marcador pronóstico en glomerulonefritis primarias
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Túbulos HE
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Evaluación histológica de la biopsia renal
TCP
TCD Y COLECTORES. HALO
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Túbulos PAS. MB
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Túbulos. Plata. MB
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Túbulos –T. Masson
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Patología tubular
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NTA. Masson
Atrofia tubular. PAS
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Intersticio
• Es el tejido de sostén. • Espacio entre glomérulos, túbulos, vasos y
nervios. • Composición: células (fibroblastos e
inflamatorias) y colágeno I, proteoglicanos, glucoproteínas y líquido.
• 7-9% de corteza renal.• Mayor en medular que cortical• Afectación túbulo-intersticial: Importante
marcador pronóstico en glomerulonefritis primarias
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Intersticio. HE
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Intersticio-PlataEvaluación histológica de la biopsia renal
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Intersticio-PAS
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Vasos
• Las arterias y arteriolas renales tienen la misma estructura histológica que en otros sitios del organismo.
• Capas: Endotelio, íntima, lámina elástica interna (difícil de identificar, con tinciones rutinarias, en las arterias pequeñas), capa muscular y adventicia
• Las arteriolas aferentes son los principales vasos de resistencia en el riñón y regulan el flujo sanguíneo renal por contracción o relajación de sus una a tres capas de músculo liso.
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Evaluación histológica de la biopsia renal
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Vasos. HE
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Vasos. Masson
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Vasos-hialinosis
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IFD- Tipos de depósitos
• Lineales: Parietales(pared capilares glomerulares)
• Granulares: -Mesangiales-Parietales ( subendoteliales o
subepiteliales)-Mesangiales y parietales
Lupus: Combinación de patrones
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Evaluación de glomérulos. Términos
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•Subendotelial: Región situada entre las células endoteliales y la MBG.•Subepitelial: Región ubicada entre los podocitos viscerales y la membrana basal glomerular (MBG).
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Lineal
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Mesangial
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Parietal Granular subepitelial
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Evaluación histológica de la biopsia renal
Entre los podocitos viscerales y MBG. Contorno externo irregular
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Spikes-membranosa
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Parietal granular subepitelial(humps)+ mesangio
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Parietal granular subendotelial
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Entre las células endoteliales y la MBG(contorno externo liso).
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Dobles contornos
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La proliferación de células dentro del espacio urinario glomerular se denomina:
a)Proliferación mesangialb) Proliferación endocapilarc)Proliferación extracapilard)Proliferación vascular
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La proliferación de células dentro del espacio urinario glomerular se denomina:a)Proliferación mesangialb) Proliferación endocapilarc)Proliferación extracapilard)Proliferación vascular
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El incremento de la celularidad mesangial se define como:a)Presencia de más de 2 células por área mesangialb)Más de 1 célula por área mesangialc)Más de 3-4 células por área mesangiald)Incremento de la matriz y la celularidad
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Las tinciones histológicas que mejor definen las membranas basales en patología renal son :
a)HE y Platab)PAS y Platac)Masson y PASd)Plata y Masson
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Los depósitos subendoteliales se definen como :a)Situados entre los podocitos y la MBGb)Situados entre el mesangio y la MBGc)Situados entre las células endoteliales y la MBG.d)Entre el mesangio y los podocitos viscerales
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MUCHAS GRACIAS
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