microbiologie lucrare practica 3 sem i

♦ ETAPELE DIAGNOSTICULUI DE LABORATOR

♦ RECOLTAREA, TRANSPORTUL SI PRELUCRAREA PRODUSELOR PATOLOGICE

ETAPELE DIAGNOSTICULUI DE LABORATORA. DIAGNOSTIC BACTERIOLOGIC DIRECT

1. PRELEVAREA SI TRANSPORTUL PROBELOR DE LABORATOR

2. EXAMEN MICROSCOPIC DIRECT (FROTIU/ PREPARAT PROASPAT) DIN PRODUS BIOLOGIC

3. INSAMANTARE PE MEDII DE CULTURA4. IZOLAREA SI IDENTIFICAREA AGENTULUI

PATOGEN5. ANTIBIOGRAMA

ETAPELE DIAGNOSTICULUI DE LABORATOR

B. DIAGNOSTIC IMUNOLOGIC (INDIRECT)

1. EVIDENTIEREA RASPUNSULUI IMUN UMORAL:- IN VITRO – DIAGNOSTIC SEROLOGIC,- IN VIVO – DIAGNOSTIC IMUNOBIOLOGIC (IDR Schick)2. EVIDENTIEREA RASPUNSULUI IMUN CELULAR:- IN VITRO – TTL, TIM.- IN VIVO – DIAGNOSTIC IMUNOBIOLOGIC (IDR tuberculina)

A. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC - DIRECT

RECOLTARE/ PRELEVARE DE PRODUS PATOLOGIC (tipuri de prelevate)

CONSERVARE SI TRANSPORTEXAMINARE MACROSCOPICAEXAMEN MICROSCOPIC DIRECTPreparat proaspat (produs):- Sediment urinar, - Sediment LCR/ tus China,- Secretie vaginala/ Trichomonas vaginalis,- Materii fecale (examen coproparazitologic).- Ex. micologic KOH 20%

A. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC - DIRECT

Frotiuri colorate (produs):- Coloratia Gram,- Coloratia albastru metilen/ Giemsa,- Coloratia Ziehl- Neelsen- INSAMANTARE (tipuri de medii de cultura):- lichide,- solide,

A. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC - DIRECT

Conditii de incubare:- temperatura,- atmosfera,- umiditate,- timp de incubare,

A. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC - DIRECT

IZOLARE AGENT ETIOLOGIC (in cultura pura)IDENTIFICARE AGENT PATOGEN (BACTERII,

LEVURI)- Caractere:- culturale (caractere macroscopice),- morfologice (caractere microscopice- Frotiu

Gram),- biochimice,- antigenice,- de patogenitate (in vivo/ in vitro)- lizotipie (sensibilitate la bacteriofag),- genetice

A. DIAGNOSTICUL BACTERIOLOGIC - DIRECT

ANTIBIOGRAMA:- metoda difuzimetrica/ CLSI,- metode cantitative: - CMI,- CMB,- NEI,- NEB

B. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR INDIRECT, IMUNOLOGIC

Evidentierea raspunsului imun umoral:- “in vivo”: IDR Schick,- “in vitro”: diagnostic serologic, (ELISA)Evidentierea raspunsului imun celular:- “in vivo”: IDR la tuberculina,- “in vitro”: TIM, TTL

REGULI DE RECOLTARE, TRANSPORT SI PRELUCRARE A PRELEVATELOR PATOLOGICE

REGULI GENERALE:- Recoltarea de catre medic sau asistent,

sub supravegherea medicului,- In conditii de asepsie,- Prelevatul obtinut direct din leziune,- Inaintea inceperii tratamentului cu

antibiotic,

REGULI DE RECOLTARE, TRANSPORT SI PRELUCRARE A PRELEVATELOR PATOLOGICE

Cantitate suficienta de produs,Recipiente sterile, unica utilizare sau

sticlarie fara urme de dezinfectant,Un recipient contine un singur produs, de

la un singur pacient,Recipientul corect etichetat,Buletin de trimitere

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

HEMOCULTURA:

- recoltare sange venos din plica cotului,- antiseptizarea tegumentului cu alcool 70%,

apoi tinctura de iod,- cu aprox 1 ora inainte de frison, instalarea

febrei,- volum sange: 10 – 15 mL la adult,

1 - 5 mL la copil < 5 ani,

- sisteme automate de incubare.

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

LCR:- la patul bolnavului, prin punctie lombara,

subcervicala, fontanela,- de catre medic,- conditii de absoluta sterilitate,- Volum:* 5 - 8 ml / adult,* 2-5 ml / copil, functie de varsta

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

EXUDATE, TRANSUDATE ALE SEROASELOR:

- punctie cu seringa, in conditii riguroase de asepsie,

- volum: 5- 10 mL,- precautii de recolta pentru flora anaeroba

(lipsa contactului cu aerul),- transport rapid, imediat la laborator.

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

SECRETII PURULENTE DIN COLECTII INCHISE:- antiseptizarea tegumentului de

deasupra colectiei,- punctionare cu seringa, trocar,- precautii de recolta pentru flora

anaeroba,- cat mai profund, la baza colectiei,- in recipiente sterile (seringa, fara

contact cu aerul),- transport rapid < 1 ora,

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

SECRETII PURULENTE DIN PLAGI SUPERFICIALE:

- Cel putin 2 tampoane sterile: - 1 pentru efectuare frotiuri,- 1 pentru insamantare,- +/- 1 tampon pentru mediu de imbogatire

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

SECRETIA OCULARA: - recolta cu tampon steril, din fund de sac

conjunctival sau unghi interior al ochiului,- un tampon pentru fiecare ochi,- in caz de orjelet (colectie inchisa) se

punctioneaza,- Tampon umectat cu ser fiziologic steril,- Transport rapid

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

SECRETIA OTICA:- se trage varful pavilionului extern in sus si

posterior,- vizualizarea leziunii cu ochiul liber sau cu

instrumentar,- tamponul orientat tintit spre leziune,

colectie,- cel putin 2 tampoane

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

EXUDAT NAZO- FARIGIAN- dimineata, pe nemancate sau- cel putin la 4 ore dupa ultima masa,- In pozitie sezanda, cu capul aplecat pe

spate, gura larg deschisa, limba afara, spre o sursa de lumina naturala,

- Se apasa limba,- Se recolteaza de pe amigdale, pilieri,

faringele posterior.

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

SPUTA SI ASPIRATUL BRONSIC;- dimineata, la “toaleta bronsiilor’- secretii profunde, nu saliva,- dupa gargara cu ser fiziologic steril,- pentru diagnostic TBC: mai multe spute, in

zile consecutive,- Bronhoscopie pentru aspirat bronho-

alveolar,

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

COPROCULTURA:- scaun emis spontan,- recipiente speciale, cu sau fara mediu

de conservare si transport,- pentru portaj cronic Sh. disenteriae -

sonde Nelaton,- recolta din portiuni mucoase, purulente,

sanghinolente,- purtatorii de S. typhi: recolta in 3 zile

consecutiv, dupa pugativ

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

UROCULTURA:- Prima urina de dimineata,- Toaleta riguroasa locala (organe genito-

urinare externe) cu apa calda si sapun,- Jet mijlociu,- Recipient steril,- Transport rapid la laborator,- TBC renal: urini din 3 zile consecutive

REGULI PARTICULARE DE RECOLTA

SECRETIA VAGINALA, URETRALA:- dimineata, inainte de mictiune,- Se recolteaza in conditii de asepsie, cu

valve, pe masa ginecologica,- Secretia uretrala se etaleaza cu tamponul

direct pe lama,- Cel putin 2 tampoane: frotiuri, culturi,

REGULI DE TRANSPORTRecipiente sterile, specifice,In cel mai scurt timp (max 1 ora),LCR, sange, imediat, la temperatura

corpului: URGENTE MAJORE,Evitarea contactului cu aerul pentru

izolare flora anaeroba,Persoane instruite: medic, asistent,Medii speciale: Stuart, Amies, Cary -

Blair