analiza
DESCRIPTION
biokemijaTRANSCRIPT
Sadržaj
1. Uvod..............................................................................................................................1
2. Medicinska laboratorijska dijagnostika.........................................................................1
3. Urin................................................................................................................................6
3.1. Tvari koje se mogu naći u mokraći........................................................................7
4. Razrada teme.................................................................................................................8
4. 1. Sakupljanje 24-satnog urina..................................................................................9
5. Zaključak.....................................................................................................................11
Literatura.........................................................................................................................13
1. Uvod
2. Medicinska laboratorijska dijagnostika
Medicinska laboratorijska dijagnostika (laboratorijska medicina)- je zdravstveno i
znanstveno podrucje vezano za medicinske laboratorije razlicitih specijalnosti i profila u
zdravstvenim institucijama i institucijama koje nisu u sustavu zdravstva, a povezane su
s medicinskom laboratorijskom dijagnostikom.
Brojna znanstvena otkrica kroz stoljeca, ubrzani razvoj znanosti i tehnoloski
napredak, omogucili su razvoj medicine od empirijske do eksperimentalne znanosti.
Medicinska laboratorijska dijagnostika novijeg je datuma, cesto se vezuje za napredak
tehnologije, premda su jos stari Grci u svrhu lijecenja svojih pacijenata promatrali
promjene tjelesnih tekucina, povezivali izgled mokrace s nekim bolestima. Hipokrat (4.
stoljece p.n.e.) je u dijagnosticki protokol ukljucio i pregled mokrace. Već oko 50.
godine nase ere opisuje se hematurija, a o mokraci se raspravlja i u Galenovo vrijeme.
Analize koje se rade u laboratoriju su :
Hematoloske analize:
-Sedimentacija eritrocita
-Kompletna krvna slika sa leukocitnom formulom
-Leukociti - mikroskopski
-Trombociti-mikroskopski
-Retikulociti
-Methomoglobin
-Leukocitna formula-mikroskopska
1
-Bazofilno pinktirani eritrociti
-Heinzova tjelasca
-Osmotska rezistencija eritrocita
Biokemijske analize:
Glukoza
Test oralnog opterecenja glukozom
-Hemoglobin A1c
-Holesterol
-Trigliceridi
-Lipidski status
-Urea
-Kreatinin
-Mokracna kiselina
-Ukupan bilirubin
-Direktni bilirubin
-Alkalna fosfataza
-Ukupni proteini
2
-Zeljezo
-Alfa-amilaza
-Natrijum
-Kalijum
-Hloridi
-Кalcijum
Analize hemostaze:
-Vrijeme krvarenja
-Fibrinogen
-Protombinsko vrijeme
-Vrijeme koagulacije
-KKS (kompletna krvna slika)
-SE (sedimentacija)
-GUK (glukoza u krvi)
-OGTT (test opterećenja glukozom)
-Urati (mokraćna kiselina)
-Urea
-Kreatinin
-Proteini
3
-Albumin
-CPK
-LDH
-Amilaza
Jetrene probe: bilirubin, ALT, AST, GGT, AP, AFP.
Anemija: željezo (Fe), TIBC, UIBC, feritin.
Masnoce: ukupni holesterol, HDL i LDL kolesterol, trigliceridi.
Elektroliti: kalij, natrij, kalcij, fosfati, kloridi.
Testovi zgrusavanja krvi: PV (protrombinsko vrijeme), APTT, fibrinogen.
Tumorski markeri: PSA, fPSA, CEA, AFP, CA 125, CA 19-9, CA 15-3, CYFRA
21-1.
Hormoni stitnjace: T3, T4, TSH, fT3, fT4, antitijela stitnjace.
Spolni hormoni: LH, FSH, estradiol (E2), progesteron, prolaktin, testosteron,
HCG, ß
HCG, DHEA-S.
Serologija i disni test na Helicobaster pylori.
Imunoloske pretrage: CRP (C-reaktivni protein), RF (reuma faktor), ASO
(antistreptolizinski titar), Waaler Rose, IM (infektivna mononukleoza).
Pretrage na A, B i C virus hepatitisa te virus HIV-a te na sifilis.
Pretrage mokrace stolice i ejakulata.
4
Pretrage mokrace: kompletan urin, sediment urina, urinokultura s antibiogramom.
Spolno prenesene infekcije: Klamidija, Ureaplazma, Mikoplazma.
Bakterioloska analiza kulture urina i ejakulata.
Pretraga stolice na krv, bakterije i parazite.
Sedimentacija eritrocita:
Sedimentacija eritrocita je jednostavan, varijabilan, ali i realan laboratorijski test
koji se odnosi na brzinu taloženja eritrocita in vitro, uzetih iz pune venozne ili kapilarne
krvi i pomjesane sa rastvorom antikoagulansa u odnosu 4:1, izazvanu djelovanjem sile
Zemljine teže.
Karboksilne grupe iz sijalinske kiseline prisutne u eritrocitima stvaraju
elektromagnetni naboj na njihovoj povrsini, koji odrzava stabilnost suspenzije eritrocita
u plazmi. Brzina sedimentacije eritrocita (SE) zavisi od plazmatskih faktora proteina,
fibrinogena i glikoproteina, i to od njihovog medusobnog odnosa, od povrsinskog
napona krvi, koncentracije jona, volumen-procenta krvnih celija, od veličine i oblika
samih eritrocita, od količine lipida, od pH vrijednosti...
Sa porastom koncentracije plazmatskih proteina, fibrinogena, imunoproteina i
drugih proteina, u akutnoj fazi, smanjuje se elektronegativni naboj na membrani
eritrocita i kao posljedica toga nastaje njihovo ubrzano talozenje. Nakon pojave akutne
inflamatorne reakcije, dolazi do porasta sedimantacije eritrocita i to u periodu sa
latencijom od 24-48 h i u prosjeku traje 100-150 h (4-6 dana).
Glukoza u krvi:
Glukoza se u krvi stvara od hrane koju uzimamo u obliku različitih vrsta ugljenih
hidrata, belancevina i masti. Glavni potrosac glukoze u krvi je mozak (2/3 glukoze),
dok se ostala glukoza pohranjuje kao rezerva energije u druga tkiva u obliku glikogena
( jetra i misicno tkivo). Glukoza je potrebna za misicni rad i za sve procese u
organizmu, ukljucujuci i rad mozga, pa je tako i najznacajniji izvor energije.
5
Normalna vrijednost: 3,5-6,1 mmol/l
Pad glukoze u krvi se manifestuje kao hipoglikemija i karakterise je mišićna
slabost, nedostatak koordinacije i konfuznost. Dalji pad glukoze u krvi (približno 2,5
mmol/L) dovodi do hipoglikemijske kome. Snizena koncentracija glukoze –
hipoglikemija – hiperplazija, adenom i karcinom pankreasa, manjak hormona koji su
antagonisti adrenalina, kod poremecaja u metabolizmu glikogena i ponekad kod bolesti
jetre.
Povišena koncentracija glukoze - hiperglikemija – diabetes mellitus,
feohromocitom, teske opekotine, sok, stanja organizma kada je povišen adrenalin.
Određuje se :
Secerna bolest se potvrduje na osnovu povišene vrijednosti glukoze u krvi
( vadenje krvi - iz pune kapilarne krvi uzete iz prsta, ako su vrijednosti veće od 6.7
mmol/L) ili u bilo koje doba dana (iz pune kapilarne krvi uzete iz prsta, ako su
vrijednosti vece od 11.1 mmol/L).
Nužno je da se povišene vrijednosti dokazu u najmanje dva nezavisna
određivanja. Klinicka slika, odredivanje glukoze i acetona u mokraci dodatni su
pokazatelji dijagnostike.
3. Urin
Urin ili mokraća svjetložuta je tekućina putem koje se iz organizma izlučuje
većina štetnih tvari uz istovremeno rješavanje suvišne tekućine. Tvari koje su unesene u
organizam i ne uspiju se apsorbirati izlučuju se, kruti otpad putem crijeva, tekući preko
bubrega i mokraćovoda, jedan dio tekućine iz organizma izađe putem perspiracije.
6
Uz analizu krvi, pri dijagnostici najčešća je analiza urina (sedimentacija) i stolice,
jer se na taj način mogu otkriti bilo poremećaji metabolizma ili prehrane. Urin zdravog
čovjeka svjetložute je boje, tamna boja ili krv u urinu već vizualno govori o postojanju
poremećaja.
3.1. Tvari koje se mogu naći u mokraći
- Neorganske tvari u mokraći: bikarbonati, kloridi, fosfor, sumpor,
brom, fluor, jodidi, kalijum, kalcijum, magnezijum, željezo,
bakar, cink, kobalt, selen, arsen, olovo, živa.
- Azotne tvari u mokraći: azot, urea, kreatin, kreatinin, guanidin,
holin, karnitin, piperidin, spermidin, dopamin, epinefrin,
norepinefrin, serotonin, triptamin, bilirubin, i dr.
- Aminokiseline u mokraći: alanin, karnozin, glicin, histidin,
leucin, lizin, metionin, fenilalanin, serin, tirozin, valin, i dr.
- Proteini u mokraći: albumini, haptoglobini, transferin,
imunoglobulini IgG, IgA, IgM, i dr.
- Enzimi u mokraći: laktadehidrogenaza, gama-glutamil trasferaza,
alfa amilaza, uropepsinogen, lizozim, urokinaza, proteaza, i dr.
- Ugljikohidrati u mokraći: arabinoza, fukoze, ramoza,
ketopentoza, glukoza, galaktoza, manoza, fruktoza, laktoza,
sukroza, rafinoza, i dr.
- Vitamini u mokraći: vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6,
nikotinska kiselina, vitamin B12, biopterin, vitamin C i dr.
- Hormoni u mokraći: gonadotropin, kortikotropin, prolaktin,
oksitocin, vazopresin, tiroksin, epinefrin, norepinefrin, dopamin,
inzulin, eritropoetin, aldosteron, kortikosteron, cortizon,
testosteron, progesteron, estrogen i dr.
- Aglutinini i precipitini
- Allantoin, DHEA, glukuronska kiselina, H-11, HUD, interleukin,
prostaglandin, proteoglobulini...
7
- Bakterije: Zdrava mokraća je normalno sterilna.
- Boja: Normalna boja mokraće je svijetlo žuta zbog prisustva
pigmenta urohroma, ali i od bilirubina i urobilina. Patološke boje
mogu biti providna, bijela, crvena, zelena, siva, crna.
- PH: pH urina se kreće oko 6, ali može varirati između 4.5 i 8.2.
- Gustina: Gustina mokraće je oko 1.003-1.035 (g.cm-3)
4. Razrada teme
Analiza mokraće URIN: preporučljivo je uzimati prvi jutarnji urin na način da
se nakon higijene uhvati srednji mlaz i to u za to odgovarajuću posudu ili postupak
sakupljanja uzorka obaviti u laboratoriju. Ako se radi o jačim akutnim problemima
svaki uzorak se može analizirati.
Urinske pretrage
Izgled Bistar
Boja Zlatno žuta
Test traka
Analiza Rezultat Referentni raspon Jedinice
Bilirubin neg konv.
Urobilinogen norm konv.
Ketoni neg konv.
Askorbinska kiselina konv.
Glukoza neg konv.
Proteini neg konv.
Eritrociti neg konv.
pH 5-7 konv.
Nitriti neg konv.
8
Leukociti neg konv.
Specifična težina 1.015 – 1.025 konv.
Napomena: askorbinska kiselina u urinu interferira sa rezultatima glukoze i
krvi/eritrocita.
Sediment urina Rezultat: U SVAKOM VIDNOM POLJU:
4. 1. Sakupljanje 24-satnog urina
Osoba čija se mokraća sakuplja ujutro potpuno isprazni mjehur i taj se urin baci.
Od tog trenutka mokraća se sakuplja tijekom cijelog dana i noći do drugog dana ujutro,
uključujući i jutarnji urin drugog dana. Da bi se spriječilo djelovanje mikroorganizama i
promjene do kojih na taj način dolazi kada mokraća stoji, treba mokraću, dok se
sakuplja držati na hladnom mjestu. Npr. pacijent isprazni mjehur u 7 sati ujutro i taj se
urin baci. Sav urin tijekom dana i eventualno noći sakupi se u bocu i tome doda još prvi
jutarnji urin u 7 sati drugog jutra.
LABORATORIJSKI NALAZ
Biokemijske analize u 24h urinu
Analiza Rezultat Referentni
raspon
Jedinice
Tjelesna težina kg
Tjelesna visina cm
Volumen urina u 24
sata
1.0 – 2.0 L
Ukupni proteini 50 - 140 mg/dan
Natrij 30 – 300 mmol/dan
Kalij 25 – 125 mmol/dan
Kalcij 2.50 – 8.00 mmol/dan
Fosfor 13 – 42 mmol/dan
Magnezij 2.5 – 8.5 mmol/dan
9
Klorid 110 – 250 mmol/dan
Kreatinin 5.00 – 18.00 mmol/dan
Kreatinin klirens 1.63 – 2.60 mL/s
Urat 1.2 – 6.0 mmol/dan
Uzorkovanje urina obavlja se na različite načine ovisno o vrsti pretraga.
Kvalitativne analize ne zahtijevaju podatak količine prikupljenog urina ni vrijeme u
kojem je urin prikupljen. Kod kvalitativnih biokemijskih pretraga uzima se prvi jutarnji
urin. Taj uzorak za rutinske pretrage stabilan je bez dodatka konzervansa oko 2 sata.
Ako uzorak nije prvi jutarnji urin, onda se mora približno znati vrijeme kada je urin dat.
Kod mikrobioloških pretraga u urinu treba uzeti tzv. spontani srednji mlaz kako bi se na
što je moguće manju mjeru smanjila kontaminacija uzorka.
Kvantitativna analiza nekog sastojka u urinu zahtijeva propise o načinu
prikupljanja. Za ovu analizu prikuplja se 24-satni urin uz dodatak konzervansa, naročito
ako se zahtijevaju biokemijske i hormonske pretrage. To je obično 10% otopina timola
u izopropilnom alkoholu. Ako se 24-satni urin prikuplja za analizu nivoa kateholamina,
uzorak se zakiseli kloridnom kiselinom do pH 2-3.
Ako se u takvom uzorku želi zaustaviti bakterijski rast, dodaje se 1-2%-tna borna
kiselina. Uzorak 24-satnog urina prikuplja se tako da se prvi jutarnji urin odbaci i da se
sve slijedeće porcije urina u toku dana, noći i prvi jutarnji urin drugoga dana prikupi u
porciju. Za mjerenja separatne funkcije bubrega, kinetskih pokusa eliminacije lijekova
iz organizma na poseban način se prikuplja 24-satni urin i u tom smislu daju se posebna
uputstva.
Kod uzorka urina veliki je problem kontaminacija bakterijama zbog načina
uzimanja uzorka. Zbog toga je važnije da transport bude obavljen kroz što kraće vrijeme
i da se uzorak odmah obrađuje ili se zamrzava pri pohranjivanju.
10
5. Zaključak
Analiza mokraće je sastavni dio rutinske biokemijske analize nužan u
isključivanju i otkrivanju bolesti bubrega i urinarnog trakta. Rutinska analiza mokraće
uključuje: a) makroskopsku analizu (boja, izgled); b) kemijsku analizu koja se izvodi
pomoću test traka kojima se kvantitativno (poz./neg.) i u slučaju pozitivnog nalaza
polukvalitativno određuje koncentracija određivanih analita i broja stanica (glukoze,
proteina, nitrita, bilirubina, urobilinogena, ketona, pH, broj leukocita i eritrocita).
Mikroskopskim pregledom (c) sedimenta mokraće završava svako rutinsko ispitivanje
mokraće. Ono podrazumijeva gledanje nativnog preparata sedimenta urina (dobivenog
standardiziranim postupkom centrifugiranja uzorka urina) pod mikroskopom.
Pregledom mokraćnog sedimenta potvrđuje se pozitivan rezultat dobiven test trakom.
Najveći dijagnostički značaj mikroskopskog ispitivanja sedimenta mokraće je kod
praćenja bolesnika s kroničnom bolešću bubrega i urinarnog trakta. Pod mikroskopom
omogućeno precizno morfološko i kvantitativno opisivanje (broj nađenih elemenata u
sedimentu / vidnom polju) ne samo staničnih elemenata (leukociti, eritrociti, epitelne
stanice) već i ostaloga (cilindri, bakterije, gljivice, kristali, soli i dr.).
11
Literatura
1. L. Stryer, Biokemija (prijevod), Školska knjiga, Zagreb, 1991.
2. Karlson: Biokemija; Školska knjiga, Zagreb 1993.
3. V. Tralić-Kulenović, B. Karaman, L. Fišer-Jakić, Uvod u
organsku kemiju, TTF, Zagreb, 2004.
12