anocef, toulouse, mai 2007 amplification du gène de linterleukine-6 et pronostic dans les...
TRANSCRIPT
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Amplification du gène de l’Interleukine-6 et pronostic dans les glioblastomes
A. Tchirkov1, T. Khalil1, E. Chautard1, K. Mokhtari2, L. Veronese1, B. Irthum1, P. Vago1, J.L. Kemeny1,
P. Verrelle1
1 EA3846, Université d'Auvergne, Centre Jean Perrin / CHU, Clermont-Ferrand2 Neuropathologie, Pitié-Salpétrière, Paris
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Récidive à l’intérieur du volume irradié
Optimisation de la radiothérapie
Irradiation (photons, neutrons) à faiblesfaibles dose et débit de dose
Identification puis neutralisation de nouvelles cibles biologiques potentiellement impliquées dans la radiorésistance : la voie de l'Interleukine-6, le couple Télomère/Télomérase
Médiane de survie : Médiane de survie :
inférieure à 1 aninférieure à 1 an
Glioblastome (GBM)Glioblastome (GBM)
Radiosensibilisation des tumeurs gliales : approche cellulaire et moléculaire.
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Pourquoi l'Interleukine-6 ?
Elle est secrétée par les cellules de glioblastome (Van Meir et al., 1990).
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
7p15
28 aa 184 aa
Séquences codant pour la protéine mature
5kb
27kDa
L’IL-6 : rôle dans la progression tumoraleL’IL-6 : rôle dans la progression tumorale
Prolifération cellulaire
MAPK
Immuno-suppression locale
Perte de la fonction de présentation de l’antigène par les cellules dendritiques
Angiogénèse VEGFBlocage de l’apoptose
STAT3 AKT
Mcl-1
(Menetrier-Caux et al., 1998)
(Cohen et al., 1996)
GBM (Goswami et al., 1998)Mélanome (Lu et al., 1996)
Rein (Mizutami et al., 1995)Prostate (Borsellino et al., 1999)Myélome (Puthier et al., 1999)Pancréas (Yoshiharu et al., 2001)Col utérin (Wei et al., 2001)
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
La voie de signalisation IL-6
gp
130 gp
80
IL-6
gp
130
Ras /MAPK
prolifération cellulaire(MM
)pSTAT3
PI-3KpAKT
Inhibition de l ’apoptose
Mcl1-L et BclXL
JAK/STAT
p p
VEGF
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Expression de l ’IL-6 et grade de malignité dans les tumeurs gliales
2-micro
IL-6
165 pb
120 pb
Ech 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Ech 1 2 3 4 5 6 7 8 9
2-micro
IL-6
165 pb
120 pb
glioblastomes
Autres gliomes
P<0,001
Journal of Neurosurgery, 2001
n=51
n=28
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Expression de l ’IL-6 et grade de malignité dans les tumeurs gliales
2-micro
2-micro
IL-6
IL-6
HES RT-PCR IHC anticorps anti-IL6
GBM négatif
GBM positif
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
L’IL-6 est-elle impliquée dans la radiorésistance
des GBM ?
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
• L'irradiation freine la prolifération de la lignée G5 mais n'a pas d'effet sur la fraction IL-6 positive.
• Ces résultats suggèrent un rôle potentiel de la fraction cellulaire IL-6 positive au sein de la lignée G5 dans la radiorésistance.
Journal of Neuro-Oncology, 2002
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
La surexpression de l’IL-6 dans les GBM est-elle
associée à une amplification du gène ?
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Dosage du gène de l’IL-6 :Dosage du gène de l’IL-6 :PCR en temps réel (SYBRGreen I)PCR en temps réel (SYBRGreen I)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
17 19 21 23 25 27
Flu
ore
sce
nc
e
PCR cycle
ADN GBM5
ADN normal
ADN GBM5/-globin
ADN normal/-globin
5,105,10
63 207
12 184
12 933
12 367
IL-6IL-6
-globin-globin
Ratio
1,051,05Ratio
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Amplification du gène de l’IL-6Amplification du gène de l’IL-6dans les glioblastomesdans les glioblastomes
British Journal of Cancer, 2001
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Amplification du gène de l’IL-6Amplification du gène de l’IL-6
• Recherche négative dans les gliomes de grade II (9) et III (8)
• Amplification retrouvée dans 40% des GBM, corrélée à l'expression
recherche par FISH recherche par FISH sur coupes congelées sur coupes congelées
dans 53 gliomesdans 53 gliomes
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Survie médiane : 6 mois vs 22 mois
British Journal of Cancer, 2007
Amplification du gène de l’IL-6Amplification du gène de l’IL-6
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
Perspectives 3 axes de recherche
Confirmation des résultats sur une série plus importante
Étude de l'amplicon incluant le gène de l'IL-6 (7p21)EGFR, Twist, …
Étude génomique et transcriptomique comparative de la population avec versus sans amplification du gène IL-6
Étude des effets de la neutralisation de la voie IL-6 sur la radiosensibilité des GBM.
ANOCEF, Toulouse, Mai 2007
EA 3846 – Université d’Auvergne
Centre Jean Perrin – Clermont Ferrand
Pierre VERRELLE
Andréï TCHIRKOV
Toufic KHALIL
Bernard IRTHUM
Jean-Louis KEMENY
Patrick MERLE
Henri JANICOT
Emmanuel CHAUTARD
UMR CNRS 144
Institut Curie - Paris
Charles DECRAENE
Jean-Paul THIERY
Département d’Immunologie
Centre Jean Perrin – Clermont Ferrand
Jacques CHASSAGNE
Laboratoire de Neuropathologie Pitié-alpétrière, Paris
Karima Mokhtari