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ANUARIO 2014 ESPA

ÑO

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CENTRO DE INGENIERÍA GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA

PALABRASDEL DIRECTOR GENERAL

MISIÓN

PUBLICACIONES


DIRECCIONES

ANUARIO 2014CENTRO DE INGENIERÍA GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA

ÍNDICE

ÍNDICE

ÍNDICE

Jefe de proyecto: Raúl Alejandro Valdés PavónEdición, redacción y corrección: Marta Elizabet Ferrer Cutié, Ernesto Galbán RodríguezCompilación de textos: Berna Eva Molinet, Nayade Beltrán MatosDiseño: Raúl Rojas PérezFotografía: Raúl Rojas Pérez, Jesús Seoane Herrera© Consejo de Dirección CIGB, 2015© Elfos Scientiae, 2015

PRESENTACIÓN

MISIÓN

PUBLICACIONES

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05

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DIRECCIONESINVESTIGACIONES BIOMÉDICAS

DESARROLLO TECNOLÓGICO

PRODUCCIÓN

BIOTERIO

INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS

INFORMÁTICA

CONTROL DE LA CALIDAD

ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

RECURSOS HUMANOS

HEBER BIOTEC S.A.

PROPIEDAD INTELECTUAL

NEGOCIOS Y DESARROLLO DE PROYECTOS

INVESTIGACIONES CLÍNICAS

CIGB DE CAMAGÜEY

CIGB DE SANCTI SPÍRITUS

GESTIÓN Y SERVICIOS DE INFORMACIÓN

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SEGURIDAD Y PROTECCIÓN 103

DEPARTAMENTO DE REGISTROS Y REGULACIONES 104

PALABRAS DEL DIRECTOR GENERAL




DIRECTOR

Dr. Luis Herrera MartínezTeléfono: (537) 273 1410

Fax: (537) 273 [email protected]

Estimados lectores:

El desarrollo científico de Cuba es hoy en día la concreción de la voluntad, los esfuerzos y la dedicación de todo nuestro pueblo por hacer realidad el hecho de convertir a la ciencia cubana en una importante fuerza productiva. La biotecnología cubana como expresión de ese esfuerzo se concreta en la existencia de decenas de centros de investigación-producción, basados en el principio de la integración y el ciclo cerrado.

El Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) es la institución científica insignia de la biotecnología cubana, con más de 1300 trabajadores, se orienta a la obtención de proteínas recombinantes y otros productos novedosos, su desarrollo tecnológico, producción y comercialización. El positivo impacto en la salud, la agricultura y el medio ambiente es la cuestión esencial de nuestro trabajo. Unido a los productos más tradicionales ya obtenidos y comercializados, como la vacuna recombinante contra la hepatitis B (Heberbiovac®), los interferones recombinantes (Heberón alfa y gamma), la estreptoquinasa recombinante (Heberkinasa®), el factor de transferencia (Hebertrans®), la vacuna contra la garrapata del bovino (Gavac®) y otros, también se han desarrollado productos novedosos como la vacuna obtenida por síntesis química QuimiHib contra el Haemophilus influenzae tipo b, las vacunas combinadas tetravalente y pentavalente (Heberpenta®), un bioproducto contra los nemátodos (Hebernem), un estimulador de crecimiento no hormonal (Acuabio 1) para la cría y cultivo de camarones y peces; todos estos productos se utilizan en Cuba y se venden a mas de 40 países.




En el 2006 se logró obtener el registro sanitario en Cuba, en el 2008 en Argelia y en el 2009 en Argentina, de un nuevo medicamento único en el mundo, denominado Heberprot-P®. En Venezuela fue aprobado como medicamento de servicio en el 2008, empleado para el tratamiento de úlceras profundas y complejas resistentes a todo tipo de tratamiento convencional en personas con el denominado pie diabético. Su administración en pacientes seriamente afectados permitió disminuir los riesgos de amputación en un 80 por ciento. Entre Cuba y Venezuela se han tratado más de 2000 pacientes con resultados muy positivos.

Un personal de excelencia respalda los resultados del CIGB, y su formación científico técnico y productiva garantiza la confiabilidad de los mismos, su entrenamiento en base a las buenas prácticas y a las regulaciones existentes definen la obtención de productos de alta calidad y seguridad.

En el presente anuario presentamos un resumen de las características de las principales áreas de nuestra Institución, las líneas fundamentales de investigación desarrollo, y los resultados obtenidos por el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología en 2014.

Muchas gracias.

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MISIÓN

MISIÓN


MISIÓN

El Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología tiene un papel integrador en la esfera de la biotecnología cubana, con alta capacidad científico-técnica.

Asume la responsabilidad de contribuir directamente en el desarrollo económico y social de nuestro país.

Su desempeño se proyecta en las investigaciones, generando conocimientos para el desarrollo de nuevos productos, servicios y la actividad comercial, basado en un sistema de calidad que garantiza la satisfacción de nuestros clientes y teniendo en cuenta la dimensión ambiental.

Su impacto está destinado a la salud humana, las producciones agropecuarias, acuícola, la industria y el medio ambiente.

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DIRECCIÓN DE INVESTIGACIONES BIOMÉDICAS


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Dr. Gerardo Guillén [email protected]

Teléfono: (53) 7250-4495

DIRECCIÓNDE INVESTIGACIONES BIOMÉDICAS

En la Dirección de Investigaciones Biomédicas (IBM) del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) se trabaja en 27 proyectos encaminados a la obtención y

desarrollo de productos biomédicos, útiles para la prevención y la terapia del cáncer, las inflamaciones, las enfermedades infecciosas, cardiovasculares, neurodegenerativas y autoinmunes, la cicatrización y la citoprotección.

Está compuesta por los departamentos de Vacunas, Productos Farmacéuticos, Inmunodiagnóstico y Genómica, Química-Física y Control de la Actividad Científico-Técnica y Administrativa. Cuenta con 200 trabajadores: el 25 % de los investigadores ostenta el grado de Doctor en Ciencias y el 22 % el de Máster en Ciencias.

PRINCIPALES EJECUTIVOS

SubdirectoraDra. Lidia Inés NovoaJefa del departamento de Inmunodiagnóstico y Genómica, Auditora [email protected]éfono: (53) 7208-7421

DEPARTAMENTO DE VACUNAS

Jefe del DepartamentoDr. Lisset Hermida Cruz [email protected]éfono: (53) 7250-4525

El Departamento de Vacunas se dedica a la obtención de formulaciones vacunales profilácticas y terapéuticas contra enfermedades bacterianas y virales mediante técnicas de ingeniería genética. También desarrolla vacunas combinadas. Los proyectos en curso son:• Vacuna terapéutica contra el virus de la hepatitis B



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• Vacuna contra el virus de la hepatitis C• Vacuna contra el virus del dengue• Vacuna contra el virus de inmunodeficiencia humana y el sida• Vacuna acelular contra Pertusis

VACUNA TERAPÉUTICA CONTRA EL VIRUS DE LA HEPATITIS B

Líder del proyectoDr. Julio César [email protected]éfono: (53) 7250-4541

El proyecto se ocupa del desarrollo de una vacuna terapéutica contra la infección crónica por el virus de la hepatitis B (VHB) cuyo nombre comercial es HeberNasvac®. Este candidato vacunal terapéutico tiene como novedad la inclusión de la combinación de los antígenos de la superficie y de la nucleocápsida del VHB y la aplicación del producto por la ruta intranasal (Aguilar JC, et al. Immunol Cell Biol. 2004;82(5):539-46) en adición a la ruta parenteral subcutánea, para favorecer un máximo alcance en su respuesta inmunológica.

Previamente se demostró la reversión de la tolerancia en un modelo de ratón transgénico que expresa constitutivamente el HBsAg. Del mismo modo se han obtenido resultados similares en el modelo de ratón transgénico con haplotipo humanizado desarrollado en el Instituto Pasteur. En este último modelo animal transgénico (tg) se logró caracterizar la intensidad y especificidad de la respuesta T CD4 y CD8 en el contexto del HLA de clases I y II (Mancini-Bourgine M, et al. Euroasian Journal of Hepato-Gastroenterology. 2014;4(1):36-44). Los estudios histopatológicos en ratones tg inmunizados con la formulación terapéutica evidenciaron la reversión de la tolerancia en los compartimientos humoral y celular contra el HBsAg y la no asociación de esta respuesta a daño histopatológico o alteraciones hemoquímicas. Este y otros resultados del proyecto como los estudios toxicológicos de rigor y un expediente de siete estudios toxicológicos e igual número de estudios farmacológicos desarrollados desde 1998, permitieron la evaluación del candidato vacunal terapéutico en pacientes enfermos crónicos por el VHB en Cuba (fase I) y en Bangladesh, fase I-II (Al-Mahtab M, et al. Hepatol Int. 2013;7:981-9) y fase III, en colaboración con la Fundación del Hígado, y de conjunto con colaboradores de la Universidad de Ehime en Matsuyama, Japón, quienes estuvieron a cargo de la evaluación inmunológica del producto.

El ensayo clínico en enfermos crónicos de hepatitis B permitió evidenciar la seguridad del candidato vacunal administrado por la vía nasal en un primer ciclo de cinco inmunizaciones y en un segundo ciclo de cinco inmunizaciones adicionales cuando se administró por las vías nasal y subcutánea, simultáneamente. Además, se detectó una respuesta inmunitaria de citoquinas de naturaleza Th1 en el suero de pacientes vacunados y en el sobrenadante de células mononucleares de sangre periférica, estimuladas con los antígenos HBsAg y HBcAg de esta formulación (Al-Mahtab M, et al. J Hepatol. 2013;58:S229-S40).

Asociado con la respuesta inmunitaria, se pudo apreciar una disminución de la carga viral a niveles indetectables en el 50 % de los pacientes tratados de forma sostenida. En el año 2014 se concluyó el Reporte Final del Estudio Clínico fase III y se presentó a la Autoridad Reguladora de Cuba (Cecmed), que mostró su conformidad con este Reporte. Los resultados del Estudio Clínico fase III han corroborado los resultados de seguridad y eficacia de los Estudio Clínico de fase I y I-II. Este estudio fue auditado por la entidad reguladora cubana que constató el cumplimiento satisfactorio de las buenas prácticas clínicas. Los resultados evidenciaron una respuesta sostenida de mayor duración en el grupo inmunizado con HeberNasvac® cuando se compara con el grupo tratado con el interferón pegilado, tanto a nivel de la proporción de respuesta virológica como de seroconversión al HBeAg y una diferencia muy significativa a favor del grupo tratado con HeberNasvac® respecto a la frecuencia, intensidad y duración de los eventos adversos. Al final del año 2014 se solicitó al Cecmed el registro de este producto para su empleo en pacientes con hepatitis B crónica. Varios estudios clínicos se encuentran en varios países para evaluar diferentes combinaciones terapéuticas y nichos de aplicación.

Contrapartes internacionales: CRO, Bangladesh; Abivax, Francia; Generium, Rusia.

Colaboradores internacionales: Universidad de Ehime, Japon; Instituto Pasteur, Francia; IVIC, Venezuela; Hanover Medical School, Alemania.

VACUNA CONTRA EL VIRUS DE LA HEPATITIS C

Líder del proyectoDr. Gillian Martínez [email protected]éfono: (53) 7250-4550



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De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud, existen aproximadamente 185 millones de personas infectadas con el virus de la hepatitis C (VHC). En más del 80 % de los individuos infectados, el virus evoluciona y se convierte en una enfermedad crónica que con frecuencia ocasiona cirrosis hepática y cáncer de hígado. Actualmente no se dispone de una vacuna profiláctica contra este agente patógeno y el tratamiento más extendido está basado en interferón pegilado (IFN-PEG) más ribavirina. Sin embargo, los nuevos antivirales de acción directa (DAA) han demostrado una alta eficacia en las terapias combinadas con IFN-PEG más ribavirina (DAA + IFN-PEG + ribavirina). Producto de los efectos adversos relacionados con el IFN y que hay pacientes que son no elegibles o no respondedores a la terapia con IFN, varios estudios que demuestran la eficacia de los DAA en terapias libres de IFN. Sin embargo, las terapias con DAA son extremadamente costosas por lo que actualmente solo se tratan menos del 20 % de los pacientes infectados. Aún se reportan la ocurrencia de efectos adversos graves, ya que a pesar de ser terapias libres de interferón, se mantiene la ribavirina que provoca hemolisis de los glóbulos rojos.

En el CIGB se clonó la región estructural del genotipo 1b de la cepa principal del VHC circulante en Cuba, y es la base de los candidatos vacunales en desarrollo. El enfoque vacunal más avanzado del proyecto es una formulación de proteína-ADN, basada en un plasmidio que contiene los genes de los tres antígenos estructurales del virus, mezclada con la proteína Core del VHC como adyuvante molecular. Este candidato de vacuna de ADN, denominado CIGB-250, induce respuestas humoral y celular específicas y sostenidas en varios modelos animales, con significativa protección en ratones que fueron retados con un virus vaccinia recombinante, que expresa los genes de Core, E1 y E2, como evidencia de la respuesta inmunitaria funcional. La fase preclínica con esta formulación vacunal concluyó satisfactoriamente, y se demostró su baja toxicidad en roedores y la estabilidad de sus componentes. En un estudio clínico fase II con el candidato vacunal CIGB-250 en combinación con interferón y ribavirina en individuos con hepatitis C crónica, vírgenes a tratamientos con antivirales, se estudió la influencia del número de inyecciones y del momento en que comienza su administración, con relación al tratamiento con interferón más ribavirina. Se demostró que la administración tardía de seis dosis del candidato vacunal CIGB-250 incrementó significativamente la respuesta de anticuerpos neutralizantes e indujo una respuesta de secreción de IFN-gamma de novo contra el antígeno de la cápsida viral, elementos no observados en el grupo tratado solo con IFN + ribavirina (Amador-Cañizares Y. et al. World J Gastroenterol. 2014;20(1):148-162).

Actualmente está en curso un estudio clínico fase I-II con el candidato vacunal CIGB-250, con un enfoque preventivo, en individuos con insuficiencia renal crónica en riesgo de contraer el VHC. El objetivo del estudio es evaluar la seguridad e inmunogenicidad del candidato vacunal en estos pacientes en tres niveles de dosis, así como la capacidad para contribuir a evitar la infección por el VHC, una vez que los pacientes necesiten hemodiálisis.

Otro candidato vacunal basado en la mezcla de las proteínas recombinantes: Core, E1, E2 y NS3 del VHC, mezcladas en una cantidad y proporción específicas, formuladas en alúmina (MixprotHC), ha demostrado su eficacia en modelos animales. La racionalidad de esta preparación está basada en la inducción de una respuesta humoral y celular contra un amplio espectro de proteínas del VHC, teniendo en cuenta la jerarquía



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inmunogénica entre las proteínas virales. Los ratones inmunizados con MixprotHC desarrollaron una respuesta de anticuerpos de neutralización cruzada, de proliferación de células T CD4+ y CD8+ así como secretora de IFN-γ contra Core, E1, E2 y NS3. Adicionalmente, los ratones vacunados con MixprotHC mostraron una marcada reducción del título viral después de haber sido retados con virus vaccinia recombinante para la región estructural del VHC, comparados con los animales retados con el virus salvaje (WR) y los grupos inmunizados con alúmina (Figura 1).

0

2

4

6

8

p= 0.0028

**

Log

títul

o vi

ral e

n ov

ario

s

Alum(WR)

Alum(vvRE)

Mixprot(WR)

Mixprot(vvRE)

Grupos

La inmunogenicidad de MixprotHC se evaluó también en monos verde africanos y se demostró su capacidad de inducir anticuerpos de neutralización cruzada usando el ensayo de neutralización VHCcc (Figura 2). Igualmente se detectó una respuesta de proliferación de células T así como secretora de IFN-γ contra Core, E1, E2 y NS3 en los monos después de cinco inmunizaciones con MixprotHC (Martínez-Donato G. et al. Vaccine. 2014;32(15):1720-6).

Figura 1Control de la viremia de la hepatitis C (VHC) en ratones Balb/c después del reto con virus vaccinia recombinante (vvRE), o virus vaccinia salvaje (WR). Se inmunizaron cuatro grupos de ratones Balb/c (n = 5) por vía intramuscular, con MixprotHC (mezcla de proteínas de la cápsida, E1, E2 y NS3 del VHC; formuladas en alúmina) o Alum en las semanas 0, 2, 4, 8 y 12. El reto se administró por vía intraperitoneal en la semana 14 con 106 unidades formadoras de focos (uff) de vvRE o WR. Los ovarios se colectaron cinco días después del reto. La figura muestra el logaritmo 10 de la media del título viral. ** Diferencias estadísticas altamente significativas con relación a los otros tres grupos y a los ratones retados con WR; ** p < 0.01, Kruskal-Wallis, prueba de comparaciones múltiples de Dunn.

Figura 2

150

100

50

0

MixprotHC Alum Ab-

% d

e In

fect

ivid

ad

Grupos

Actividad neutralizante de anticuerpos IgG purificados de suero de monos verde africanos vacunados con MixprotHC (mezcla de proteínas de la cápsida, E1, E2 y NS3 del VHC; formuladas en alúmina). Los anticuepos IgG se purificaron por separado y se evaluaron en un ensayo de neutralización contra VHCcc (quimera VHC genotipo 1a-2a). Las muestras en ausencia se anticuerpos se utilizaron como controles negativos (Ab-). Los resultados se consideraron positivos cuando la infectividad fue menor o igual al 50 % (línea discontinua). Estos se expresaron en porcentaje de unidades formadoras de focos (uff) de las VHCcc (uff en presencia de anticuerpos/uff en ausencia de anticuerpos x 100).



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Figura 3

Otro candidato vacunal basado en proteínas quiméricas que comprenden epitopos conservados de antígenos estructurales y no estructurales del VHC está siendo evaluado en modelos animales. La proteína quimérica Eq1 (que comprenden epitopos de antígenos estructurales del VHC mezclado con la proteína NS3) demostró inducir en ratones una respuesta inmune humoral y celular multiespecífica y funcional (Figura 3) (Aguilar Noriega D. et al. Biotechnol Appl Biochem. 2014;61(6):627-36).

Grupos Inmunógenos Frecuencia Inmunización (semanas)

Grupo 1 Eq1+NS3+Alúmina 13, 15, 17Grupo 2 Eq1+NS3+Alúmina 0, 3, 6, 11, 17Grupo 3 Eq1+NS3+Alúmina 5, 8, 11, 17Grupo 4 Eq1+NS3+Alúmina 7, 9 , 11, 17Grupo 5 Eq1+NS3+Alúmina 4, 6, 8, 11, 17Grupo 6 Alúmina 0, 3, 6, 11, 17

8

7

6

5

4

3

2

1

0

G1 G2 G3 G4 G5 G6

GRUPOS

80% 90% 20% 60% 40% 0%

Log1

0(tít

ulo)

Control de la viremia de la hepatitis C (VHC) en ratones Balb/c después del reto con virus vaccinia recombinante (vvRE). Se inmunizaron seis grupos de ratones Balb/c (n = 5) por vía intramuscular, con la proteína quimérica Eq1 mezclada con NS3, formuladas en alúmina) o Alúmina como control negativo. El número y la frecuencia de inmunización se describen en la tabla. El reto se administró por vía intraperitoneal con 106 unidades formadoras de focos (uff) de vvRE. La figura muestra el logaritmo 10 de la media del título viral. * p < 0.05, Kruskal-Wallis, prueba de comparaciones múltiples de Dunn. Encima de las barras se muestra el porcentaje de animales que disminuyeron el titulo viral en más de 1 Log.



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VACUNA CONTRA EL VIRUS DEL DENGUE

Líder del proyectoDr. Gerardo Guillé[email protected]éfono: (53) 7250-4496

Cada año se reporta que de 50 a 100 millones de personas padecen fiebre por dengue, y entre 250 000 y 500 000 sufren fiebre hemorrágica por dengue. Actualmente no hay una vacuna contra esta enfermedad. En Cuba se han reportado varias epidemias, y existe el riesgo constante de nuevos eventos, mientras el vector no se elimine. No existe droga antiviral o vacuna preventiva contra esta enfermedad.

El objetivo de este proyecto es la obtención de una vacuna preventiva contra los cuatro serotipos del virus del dengue (DEN-1, DEN-2, DEN-3, DEN-4), causantes de la enfermedad. Se ejecuta entre el Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí y el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología.

En este proyecto se emprenden dos estrategias vacunales: obtención de una vacuna basada únicamente en proteínas recombinantes y la estrategia prime-boost que combina proteínas recombinantes y virus vivos atenuados. Entre las construcciones recombinantes más avanzadas están las proteínas basadas en la cápsida y el dominio III (DIIIC) de la envoltura de los virus del dengue. Estas construcciones se han expresado de forma recombinante en Escherichia coli y se han obtenido con alto grado de pureza (Marcos E, et al. Arch Virol. 2013;158:225-30; Suzarte, et al. Arch Virol. 2014;159:1629-40). A su vez, la variante correspondiente al serotipo 2 se ha evaluado en ratones, donde se obtuvieron evidencias de inducción de una respuesta funcional contra el virus infectivo, incluso en un modelo murino en el que se produce una infección sistémica similar a la que se reporta en seres humanos (Figura 4) (Valdés I et al. Virology. 2009;394:249-58; Izquierdo A et al. Antivir Res. 2012;95(1):1-8; Zust et al. J Virol. 2014;88(13):7276-85).

Figura 4

1

2

3

4

5 **

Log

(ufp

/mL)

A

0 2 4 6 8 100

20

40

60

80

100

39M-DIIIC-2Placebo

**

Días posteriores al reto

Porc

enta

je d

e so

brev

ida

B

Placebo39M-DIIIC-2

Gráficos que representan los niveles de protección tras la inoculación de VD2 en ratones CD11c-Cre+/-ifnar1fl/fl. A) Carga viral en el suero de los animales tres días después del reto viral. La línea discontinua indica el límite de detección de la técnica de aislamiento viral. Los datos representan la media ± el error estándar de la media. La significación estadística se evaluó a través de la prueba no paramétrica de Mann-Whitney (** p < 0.01), N=7. B) Porcentajes de sobrevida durante 10 días posteriores al reto letal. La significación estadística se evaluó a través de la prueba de Log-rank (** p < 0.01), N=7.



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Adicionalmente, después de haber establecido los modelos animales de primates no humanos (macacos, verdes africanos y babuinos) para la infección por DENV (Martín J, et al. Microbiol Inmunol. 2009;53:216-23; Valdés I et al. Int J Infect Dis. 2013;17(12):e1176-81), se evidenció el efecto prime-boost en combinación con el virus dengue infectivo (Valdés I, et al. Int J Infect Dis. 2010;14:e377-83; Valdés I et al. Clin Vaccine Immunol. 2011;18(3):455-9). En la fase preclínica de evaluación, el candidato vacunal monovalente basado en la cápsida del DENV-2 (DIIIC-2), administrado en primates no humanos, indujo una respuesta inmune funcional en términos de anticuerpos neutralizantes e inmunidad mediada por células, así como protección contra la infección viral (Figura 5) (Gil et al. Immunol Cell Biol. 2015;93:57-66).

Figura 5

0

10

20

30

100

200

300

400 M2018

M2122

M2151

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

A

0

10

20

30

100

200

300

400M2096

M2140

M2156

B

Días posteriores al retoDías posteriores al reto

Vire

mia

(ufp

/mL)

Vire

mia

(ufp

/mL)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Gráfico que representa los niveles de viremia tras el reto viral. A) Monos inmunizados con la formulación placebo. B) Monos inmunizados con la formulación 39M-DIIIC-2. C) Monos inmunizados con la formulación 39M-C-2. La viremia se determinó por aislamiento directo en células Vero.

A su vez, la formulación tetravalente incluyendo las cuatro variantes de proteínas (DIIIC 1-4) indujo una respuesta inmune funcional contra los cuatro virus en ratones. Su evaluación en primates no humanos vírgenes a dengue está prevista en 2015.

VACUNA CONTRA EL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA Y EL SIDA

Líder del proyectoDr. Enrique [email protected]éfono: (53) 7250-4541

Desde que en 1981 se identificó el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (sida), han muerto más de 39 millones de personas infectadas. Es una de las epidemias más devastadoras en la historia de la humanidad. La organización encargada de coordinar los esfuerzos de la lucha contra el sida (Onusida), considera que van disminuyendo los infectados en los últimos años, pero aún hay naciones donde la epidemia sigue creciendo. Se estimó que a fines de 2013 vivían entre 33.2-37.8 millones de personas con el virus de la inmunodeficiencia humana de tipo 1 (VIH-1). Ese mismo año, los infectados a escala mundial eran entre 1.9 y 2.4 millones y fallecieron entre 1.4 y 1.7 millones de seropositivos (adultos y niños). Los tratamientos antirretrovíricos (TAR) genéricos, llegaron a aproximadamente el 37 % de los necesitados. Sin embargo, los niveles de retención de los TAR dos años después, están por debajo del 50 % en algunos



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países de la región subsahariana. Por todo ello, se considera que el financiamiento a las terapias debe incrementarse y se debe ir previendo la necesidad de pasar de los compuestos genéricos, actualmente en uso, a tratamientos de segunda y tercera línea en los próximos años, debido a la diseminación de aislamientos resistentes. En tal contexto, los científicos esperan desarrollar una vacuna efectiva o parcialmente efectiva para brindar protección a los seronegativos, y sustituir totalmente o en parte las terapias existentes para los seropositivos. Estas no eliminan la infección, y a largo plazo provocan efectos secundarios indeseables e incompatibles con la salud de los pacientes.

Este proyecto está encaminado al desarrollo de candidatos vacunales contra el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1). Persiguiendo tal objetivo se obtuvo la formulación multiantigénica Teravac que contiene la proteína multiepitópica CR3 en combinación con los antígenos de la superficie y la nucleocápsida del virus de la hepatitis B para inducir una respuesta celular de tipo Th1 anti-VIH-1 en compartimentos sistémicos y mucosales. La proteína recombinante CR3, cuyo peso molecular aproximado es de 52 kDa, no existe de forma natural en ningún hospedero. Está conformada por fragmentos de proteínas presentes en el VIH-1, como la glicoproteína de la envoltura (gp 160), proteína vpr (p15), pol (p66), nef (p27) y gag (p24). Estas regiones antigénicas son ricas en epitopos para células T de tipos auxiliadoras y citotóxicas, y además se encuentran epitopos para células B. Ello garantiza un número elevado de epitopos restringidos por una amplia gama de haplotipos HLA de las clases I y II. Sin embargo, según los estudios en ratones, se ha evidenciado que la proteína CR3 por sí sola no induce una respuesta de tipo Th1 ni estimula linfocitos T CD8+. Pese a ello, cuando se inmuniza la proteína CR3 formulada junto con los antígenos estructurales del VHB, se obtienen respuestas humorales y celulares del tipo Th1 en el compartimiento mucosal gastrointestinal (Figura 6) y en el sistémico, con la estimulación de linfocitos T CD8+ anti-VIH (Figura 7).

Figura 6

CR3 RPMI Con A

Placebo (sc+in)

C+S (sc+in)

CR3+C+S (sc+in)

Detección de células secretoras de IFN-γ en linfonodos mesentéricos de ratones contra la proteína CR3. A) Diez días después de la última administración se extrajeron los inmunocitos de los linfonodos yeyunal y colónico. Luego, estos se estimularon ex vivo con la proteína CR3 y controles. Finalmente, las placas de ELISPOT fueron procesadas y se muestran resultados representativos de pocillos duplicados. B) CR3, células estimuladas con la proteína CR3; RPMI, células incubadas con medio completo; Con A, células estimuladas con Concanavalina A (Con A). i.n.: ruta intranasal. s.c.: ruta subcutánea. C: HBcAg. S: HBsAg.



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También se ha verificado la capacidad de Teravac para provocar respuesta de tipo Th1 anti-VIH-1 en presencia de una respuesta de tipo Th2. Este resultado sugiere un beneficio terapéutico para restaurar la respuesta celular de tipo Th1 anti-VIH en pacientes seropositivos. Por último, se ha comprobado la inducción de respuesta celular y humoral anti-VHB, por lo que este candidato vacunal podría considerarse bivalente: anti-VIH y anti-VHB. Durante 2009 y 2010 se realizaron las pruebas preclínicas de inocuidad, toxicología local y otras, cuyos resultados fueron satisfactorios. Luego se conformó el expediente para solicitar la aprobación de un estudio clínico fase I en seropositivos con este candidato vacunal, a la autoridad reguladora cubana, el Centro Estatal para el Control de Medicamentos (Cecmed). A mediados de 2010 se obtuvo la autorización requerida. Durante los años 2011-2014 se terminó el reclutamiento previo, y se concluyó el esquema de inmunización y seguimiento del primer grupo de 9 pacientes. Para fines de 2014 se comenzó la inmunización de otros 9 pacientes.

Figura 7

1000

100

10

1

0.10.1 1 10 100 1000

1000

100

10

1

0.10.1 1 10 100 1000

1000

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0.10.1 1 10 100 1000

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1

0.10.1 1 10 100 1000

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100

10

1

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1000

100

10

1

0.10.1 1 10 100 1000

Sin estímulo Con A CR3

CD

8APC

C+S (sc+in)

CR3+C+S (sc+in)

C+S (sc+in)

CR3+C+S (sc+in)

C+S (sc+in)

CR3+C+S (sc+in)

Respuesta proliferativa de linfocitos T CD8+. Mezclas homogéneas de células del bazo de los ratones fueron teñidas con CFSE y cultivadas durante cinco días con medio de cultivo, concanavalina A (Con A) y CR3. Diez mil linfocitos viables y blastos (R1) se seleccionaron para el análisis. La frecuencia de células T CD8+ CR3-específi-cas que se dividieron en cada grupo luego de la estimulación ex vivo se determinó sustrayendo el porcentaje de células CD8+ CFSElow (Q1) tomado de los cultivos no estimulados al porcentaje de CD8+ CFSElow de los esplenocitos estimulados con el antígeno CR3. i.n.: ruta intranasal. s.c.: ruta subcutánea. C: HBcAg. S: HBsAg.



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VACUNA ACELULAR DE PERTUSIS

Líder del proyectoMSc. Anabel Á[email protected]éfono: (53) 7250-4547

La tos ferina, cuyo agente causal es la Bordetella pertussis, es la enfermedad prevenible por vacuna, de más prevalencia en el mundo. La frecuencia de infección calculada por títulos de anticuerpos antitoxina pertussis se reportó con valores entre 1 y 6 % (Cherry, JD. Clin Infect Dis. 2010;51(6):663-7). Sus características esenciales son:

•Brotes cíclicos cada 2 o 5 años en poblaciones donde la cobertura de vacunación es mayor de 80-90 %.•Alta incidencia en niños menores de 1 año y en niños de 10 años.•Incremento de las tasas de infección en poblaciones de adolescentes entre 11 y 18 años, y en adultos.

La causa principal asociada con el comportamiento epidemiológico de B. pertussis es que ni las vacunas ni la infección natural confieren una protección vitalicia, a diferencia de otras enfermedades. El microorganismo circula y evoluciona en las poblaciones vacunadas. La duración de la inmunidad conferida por las vacunas es de 4 a 12 años, y la de la infección natural, entre los 4 a 20 años (Wendelboe AM. Pediatr Infect Dis J. 2005;24(5):S58). En los últimos 10 años, es notoria la cantidad de publicaciones que describen un incremento de la incidencia de Pertusis. Entre las posibles causas de los rebrotes y del aumento de la incidencia están:

•Mayor conciencia del personal facultativo acerca de la enfermedad. Hoy se reporta un número cada vez mayor de enfermos. Adicionalmente, la introducción de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa en el diagnóstico y su amplio uso en países desarrollados, ha contribuido a la detección de más personas afectadas (Cherry JD, N Engl J Med. 2012;367(9):785-7).•Aumento del uso de las vacunas acelulares. La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha planteado que las mejores vacunas acelulares (con al menos 3 componentes) pueden ser menos eficaces (85-88 %) que las mejores vacunas celulares (96 %) (OMS. Weekl Epidemiol Record. 2010;85(40):385-400).•La evolución del microorganismo hacia variantes más virulentas (Advani, et al. Vaccine. 2011;29(18):3438-42; Octavia, et al. J Infect Dis. 2012;205(8):1220-4).

Un aspecto muy importante son los estudios de incidencia. Estos sugieren que los esquemas de vacunación deben reevaluarse, pues son ineficaces para disminuir la incidencia o erradicar la enfermedad; y deberían comenzar más cerca del nacimiento de las personas (0-1 mes). Los centros para el control de enfermedades (CDC) recomiendan implementar las dosis de refuerzo a las madres gestantes (20 semanas) y practicar la estrategia del capullo (Gall SA. Clin Obstet Gynecol. 2012;55(2):498-509). En los últimos 5 años han aumentado las personas infectadas en Europa (Suecia, Holanda) y Australia, con cepas que contienen el promotor ptxP3 y la proteína pertactina 2 (Prn2) (King, et al. BMC Genomics 2008;9:311; Advani, et al. J Microbiol Methods. 2009;78(3):297-301; Advani, et al. Vaccine 2011;29(18):3438-42; van Gent, et al. PLoS ONE. 2011;6(5):e20340; Octavia, et al. J Infect Dis. 2012;205(8):1220-4). En países como Japón ha aumentado el número de cepas que no expresan la proteína Prn1 (Otsuka, et al. PLoS ONE. 2012;7(2):e31985). Los estudios sugieren que las cepas de ptxP3 y Prn2 son más virulentas porque expresan mayores niveles de toxina de Pertusis y escapan más fácilmente a la inmunidad de las vacunas actuales (contienen antígeno Prn1) durante la declinación de la inmunidad. Este comportamiento de la evolución del microorganismo sugiere que las vacunas actuales deben actualizarse y mejorarse tecnológicamente. La estrategia del proyecto se basa en el desarrollo de una vacuna acelular de tres componentes: PTg, FHA y Prn2. Los genes de la toxina de Pertusis y la pertactina presentes en la cepa vacunal son ptxA2 y Prn2, los cuales aparecen con mayor frecuencia en las cepas circulantes. Adicionalmente, la cepa vacunal contiene el gen ptxA2 mutado (9K/129G) genéticamente, que afecta la actividad ADP-ribosiltranferasa de la toxina. Esta mutación inactiva 100 % a la toxina de Pertusis sin afectar las propiedades inmunológicas y adyuvantes de la proteína (Del Giudice, Rappuoli. Vaccine. 1999;17Suppl 2: S44-52).

El proyecto dispone de un proceso de fermentación en el que se emplea un medio químicamente definido y se logran altos niveles de expresión de los tres antígenos, PTg, FHA y Prn, mediante el empleo de una cepa genéticamente detoxificada. Los tres antígenos se purifican con altos niveles de pureza y bajos niveles de endotoxina.

Empleando los antígenos purificados con la metodología desarrollada, se demostró la protección en el modelo de ratón MICA (reto intracraneal modificado-OMS) con una formulación acelular. La actividad funcional fue altamente significativa y superior a los controles no inmunizados.



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El proceso de obtención de los antígenos acelulares es reproducible en los perfiles de purificación, la pureza específica mayor que 95 % y el recobrado mayor que 95 % por ELISA.

DEPARTAMENTO FARMACÉUTICOS

Jefa del departamentoDra. Marta Ayala Á[email protected]éfono: (53) 7250-4494

En el año 2014 continuó la investigación, la acumulación de evidencias de mecanismos de acción y el desarrollo de nuevos productos farmacéuticos para el tratamiento del cáncer, las enfermedades cardiovasculares, la degeneración macular, las neurodegenerativas, la cicatrización, la citoprotección y las enfermedades autoinmunes, así como en el desarrollo de candidatos terapéuticos contra el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Las investigaciones clínicas para la evaluación de nuevos candidatos para el tratamiento de tumores sólidos y hematológicos avanzaron hacia etapas superiores. Se identifican e investigan otros blancos terapéuticos de interés. Los proyectos y productos en curso son:

•CIGB-300: péptido inhibidor de la fosforilación mediada por CK2;•CIGB550-E7: vacuna terapéutica basada en la fusión de un péptido penetrador y la E7;•CIGB-552: péptido inhibidor del factor transcripcional NF-kB;•CIGB-247: vacuna terapéutica basada en el VEGF-A humano como antígeno;•CIGB-166: fragmento de anticuerpo que reconoce un epitopo novedoso en el VEGF-A;•Heberprot-P®: estudio de expresión diferencial en pacientes tratados con Heberprot-P®;•Neuropatía diabética: moléculas con capacidad neuroprotectora;•CIGB-500: péptido con capacidad cardioprotectora;•CIGB-530: péptido con capacidad antifibrótica;•CIGB-540: péptido para el tratamiento de heridas hipertróficas;•CIGB-845: combinación terapéutica para neuroprotección;•CIGB-50: vacuna terapéutica basada en la IL-15 humana como antígeno;•CIGB-55: péptido antagonista de la IL-15 humana;•CIGB-210: péptido con acción antiviral.

CIGB-300: PÉPTIDO INHIBIDOR DE LA FOSFORILACIÓN MEDIADA POR CK2

Líder del proyectoDr. Silvio [email protected]éfono: (53) 7250-4486

El proyecto CIGB-300 (péptido inhibidor de la fosforilación mediada por CK2) centra su atención en la búsqueda de fármacos con acción terapéutica para el cáncer, y en el desarrollo de inhibidores peptídicos de acción intracelular contra la fosforilación



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mediada por la proteína quinasa 2 (caseína quinasa 2 o CK2). Esta enzima es del tipo serina-treonina y es frecuentemente desregulada en varios tumores humanos. Las investigaciones de este proyecto se han encaminado siguiendo como hipótesis que la abrogación de la fosforilación de la CK2 puede provocar un efecto antitumoral en diversas localizaciones. El CIGB-300 induce apoptosis en varias líneas celulares tumorales, como virus del papiloma humano (VPH+), pulmón, mama y otros. La figura 8 ilustra los resultados de su empleo en la inhibición in vitro de la fosforilación de CK2 y la activación de la caspasa, así como el efecto antitumoral en un modelo animal. Perea y colaboradores (2004) discutieron tales resultados con detalle en un artículo publicado en Cancer Research (Perea SE et al. Cancer Res. 2004;64(19):7127-9).

Figura 8

0

0.5

1.5

1.5

2.0

CIGB-300

Niv

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(mm

3 )

Control negativo CIGB-300 Péptido NR

Efecto del CIGB-300 en células tumorales. A) Efecto antitumoral en modelo animal. Péptido NR: péptido no relacionado. B) Inhibición in vitro de la fosforilación de CK2. C) Activación de caspasa (apoptosis).

A

BC



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El trabajo está dirigido a la obtención de un péptido inhibidor del sitio de fosforilación de la oncoproteína E7 del VPH, presente en el 99.7 % de las pacientes con cáncer cervicouterino. Para este propósito se han ensayado bibliotecas de péptidos en fagos filamentosos, con el objetivo de encontrar ligandos de unión a E7, cuyas secuencias se sintetizan químicamente y los péptidos evaluados en modelos celulares de transformación por VPH (células CaSki) y en modelos animales con tumores humanos en ratones atímicos. Como la oncoproteína E7 se expresa mayormente en el núcleo, se prevé el empleo de un sistema que suministre péptidos de acción intracelular. Se han descrito péptidos que logran entrar al interior de la célula, los cuales se han usado para el transporte de macromoléculas y péptidos hacia compartimentos como el núcleo, el citoplasma, el retículo endotelial y la mitocondria.

Desde el punto de vista mecanístico se conoce que la proteína B23/nucleofosmina constituye uno de los sustratos de CK2 mayoritariamente inhibidos por la acción del CIGB-300. Esta inhibición lleva al desensamblaje nucleolar y la consiguiente apoptosis de la célula tumoral. El CIGB-300 ha mostrado mayor efectividad in vitro sobre células tumorales de origen leucémico, lo cual, aparentemente se debe a la inhibición de la fosforilación de varios sustratos de CK2, además de la B23 nucleofosmina.

El CIGB-300 ha vencido las etapas de prueba de concepto farmacológico, toxicológico y ya ha alcanzado el terreno clínico para su evaluación. En el 2006 se efectuó el primer ensayo clínico de fase I con este péptido en pacientes con lesiones cervicales de alto grado, mediante su administración intralesional. Los resultados indicaron buena tolerancia y seguridad, y algunos signos de eficacia. Posteriormente, ha continuado su evaluación en estudios clínicos en pacientes con cáncer. Se ha podido conocer su perfil de farmacocinética y biodistribución, y confirmar su seguridad y tolerancia después de administrado por la ruta intravenosa.

CIGB550-E7: VACUNA CONTRA EL VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO

Líder del proyectoDra. Isis [email protected]éfono: (53) 7250-4470

El cáncer cervicouterino continúa siendo un importante problema de salud a escala mundial. Según reportes de la Organización Mundial de la Salud, cada año afecta a cerca de 500 000 mujeres. En algunas regiones de Latinoamérica figura como el tumor de mayor frecuencia, seguido por el cáncer de mama. En Cuba, a pesar de haber un programa nacional encaminado a su detección precoz, cada año mueren alrededor de 370 mujeres por esta causa. Su desarrollo se ha asociado con la infección por varios tipos de virus del papiloma humano (VPH), en la categoría de alto riesgo. Entre los más frecuentes destacan el VPH-16 y el VPH-18. Sobre la base de estos antecedentes, la búsqueda de alternativas terapéuticas, que emerjan del conocimiento científico para el tratamiento del cáncer cervicouterino, constituye una prioridad en los programas de salud de muchos países.

La vacuna terapéutica contra VPH además de ser una alternativa para el tratamiento de pacientes con cáncer cervicouterino con posibilidades de aumentar la supervivencia



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Figura 9

y calidad de vida; también pudiera ser un posible tratamiento de las neoplasias intraepiteliales cervicales de alto grado (estadio previo al cáncer), que actualmente se tratan con facilidad por una escisión local o destrucción, pero que trae consigo algunos eventos adversos tras la cirugía, problemas reproductivos y posibles recidivas de la enfermedad.

El proyecto CIGB550-E7 se focaliza en la búsqueda de alternativas terapéuticas para el cáncer cervicouterino y enfermedades asociadas al VPH con un enfoque vacunal. La vacuna CIGB550-E7 está compuesta por la unión covalente de la proteína E7 del VPH 16 al péptido CIGB550 y el uso de un adyuvante. Esta fusión se expresa eficientemente en Escherichia coli y con un alto estado de agregación. El CIGB550 fue recientemente descrito como un péptido penetrador en células, con propiedades inmunoestimuladoras. Fusionado con la proteína E7 del VPH-16, tiene la propiedad de transportar la proteína E7 al interior de las células (Figura 9), favorecer la generación de una respuesta inmune celular específica potente, y ejercer su función sobre tumores que expresan el antígeno E7 del VPH-16 (Figura 10).

Evaluación de la capacidad penetradora a células de la proteína de fusión CIGB 550-E7 por microscopía óptica de inmunofluorescencia y microscopía confocal. A- células mononucleraes de sangre periférica y B- esplenocitos murinos se incubaron con: A) 1,66 μM del péptido CIGB-550 biotinilado; B) 1,66 μM de la proteína de fusión CIGB-550-E7; C) 1,66 μM de la proteína E7; y D) con tampón fosfato salino (PBS).

Figura 10

E 7 CIGB550 CIGB550+E 7 CIGB550-E 7 PBS0

2 50

5 00

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1 00 0

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)

La inmunoterapia específica con CIGB550-E7 induce una potente respuesta antitumoral contra tumores que expresan el antígeno E7 de VPH 16.

A

B

CIGB550 CIGB550-E7 E7 PBS



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Las etapas de prueba de concepto de la vacuna terapéutica CIGB550-E7 finalizaron y está concluyendo su desarrollo productivo. Su desarrollo clínico debe comenzar en el año 2016.

NUEVOS PÉPTIDOS ANTITUMORALES E INMUNOMODULADORES DERIVADOS DE LA PROTEÍNA LIMULUS ANTI-LPS FACTOR

Líder del proyectoDra. Maribel Guerra Vallespí[email protected]éfono: (53) 7250-4491

A pesar de los progresos de la medicina, el cáncer se convirtió en la primera causa de muerte en Cuba. Cada año fallecen unas 19 000 personas por tumores malignos y se diagnostican 29 000 nuevos pacientes como promedio. Las terapias contra blancos moleculares importantes para la supervivencia, proliferación y diseminación de la célula tumoral, están revolucionando el paradigma del tratamiento del cáncer y probablemente serán usadas en la mayoría de los pacientes en los próximos 10 años.

Nuestro proyecto de investigación y desarrollo se orienta a la obtención de nuevos fármacos para tratar el cáncer, basado en la identificación de nuevos péptidos antitumorales, derivados de mutantes secuenciales de Alanina de la región 32-51 de la proteína factor anti-LPS de Limulus. El producto líder del proyecto, CIGB-552, es un péptido sintético de acción intracelular que inhibe el factor de transcripción NFkB; elemento importante que activa genes involucrados en la resistencia a la apoptosis en la célula de cáncer, y estimula la proliferación celular.

Además, el péptido CIGB-552 protege a los ratones en experimento de doble reto (los animales inicialmente protegidos del primer reto con la célula tumoral reciben un segundo reto), la efectividad de esta molécula al proporcionar un efecto antitumoral sostenido. Ello es muestra del desarrollo de una respuesta inmunitaria adaptativa específica y la actividad inmunomoduladora de este nuevo péptido. La figura 11 muestra el efecto citotóxico del CIGB-552 en varias líneas tumorales, así como la inhibición de la subunidad RelA(p65) del factor NFkB y la inducción de apoptosis en la célula cancerígena.

Figura 11

Efecto citotóxico del CIGB-552. A) Citotoxicidad en diferentes líneas tumorales, en ausencia de toxicidad en células normales. B) Inhibición de la subunidad RelA(p65) del factor NF-kB en la línea tumoral de cáncer de colon HT-29 tratada con el CIGB-552. NT: células no tratadas. C) Apoptosis mediada por el CIGB-552 en células de cáncer de mama (MCF-7) evaluada por microscopía confocal. PBMC: células mononucleares de sangre periférica no tumorales.

0

50

100

150

200

250

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H-82 H-125 HT-29 LS174T MCA-231 MCF-7 PBMC

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CIGB-552 (150μM)

Sh 12h 24hReLA (p65)NFkB

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CIGB-552Célula confragmentaciónnuclear(Apoptosis)

C



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El CIGB-552 ha demostrado eficacia en diversos modelos de tumor en ratones inmunocompetentes: modelo TC-1 (células epiteliales de pulmón), melanoma B16, carcinoma de Lewis (modelo de metástasis en pulmón), mieloma X-63, en un modelo de carcinoma de colon en ratones Balb/c y en un modelo de xenotrasplante de cáncer humano de colon HT-29 (Figura 12). Su acción se basa en la combinación de un efecto citotóxico directo sobre la célula cancerígena y de mecanismos inmunológicos que conduzcan a revertir la tolerancia del huésped al tumor.

Figura 12

Administración sistémica del CIGB-552 en un modelo de implante de tumor de colon HT-29 humano. A) Eficacia antitumoral del CIGB-552. Las flechas indican la administración subcutánea del CIGB-552. B) El CIGB-552 demuestra un significativo efecto antiangiogénico en un modelo de implante de tumor de colon humano, según el cálculo del número de microvasos en el tumor.

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CIGB-552 (0,72 mg/kg) 78,5

CIGB-552 (1,44 mg/kg) 80,5

Salino 82,2

Días posimplantación de HT-29

A

Nuestras investigaciones se han encaminado al desarrollo de moléculas anticáncer, tomando como hipótesis el hallazgo de un nuevo mecanismo para regular la actividad antiapoptótica del factor NF-kB en la célula tumoral, estimular la inmunidad del huésped y controlar la inflamación.

LABORATORIO DE INMUNOTERAPIA DE CÁNCER. PROYECTOS CIGB-247 Y CIGB-166A

Líder del proyectoDr. Jorge V. Gavilondo [email protected]éfono: (53) 7250-4480

El Laboratorio de Inmunoterapia de Cáncer del Departamento de Farmacéuticos trabaja en el desarrollo de anticuerpos y vacunas terapéuticos. Fundamentalmente orientados contra el cáncer, pero también potencialmente útiles para el tratamiento de otras enfermedades crónicas del hombre en cuya patogenia o sintomatología están implicados el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) y otras moléculas proangiogénicas. El trabajo se estructura en forma de dos proyectos:

Grupo salino CIGB-5520,7 mg/kg

CIGB-5521,4 mg/kg

Número de microvasos en el tumor

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píxe

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Proyecto CIGB-247. Inmunoterapia activa (vacunas terapéuticas) del cáncer y otras enfermedades empleando antígenos relacionados con el estroma tumoral

En los últimos 10 años ha ido creciendo la información experimental y clínica que destaca la función especial que tienen los componentes del estroma de los tumores malignos en su origen, crecimiento y diseminación. Las moléculas producidas por los tumores y por los varios elementos celulares del estroma que estimulan el crecimiento de los vasos sanguíneos y linfáticos son ejemplos de nuevas dianas terapéuticas en cáncer. Las vacunas terapéuticas que se desarrollan en este proyecto han sido diseñadas para promover su efecto a través del desarrollo de anticuerpos que bloquean la acción de promoción tumoral de las moléculas relacionadas a los antígenos que empleamos, así como de respuestas celulares citotóxicas contra células del estroma tumoral o del tumor en sí. Además, es posible la aparición de otras respuestas inmunes relacionadas con la dispersión epitópica tumoral por el uso de potentes adyuvantes en nuestras preparaciones.

Estas vacunas terapéuticas están concebidas como tratamientos adicionales y complementarios a tratamientos aprobados para el cáncer, como la quimioterapia, la radioterapia e incluso los antiangiogénicos convencionales. El objetivo principal de estas vacunas es contribuir a largo plazo al control del tumor en los pacientes. De acuerdo con la naturaleza de los mecanismos efectores que estas despiertan, potencialmente las vacunas terapéuticas tienen menos efectos colaterales indeseados, lo que es consistente con la estrategia de su uso crónico.

El primer antígeno vacunal candidato propuesto por nosotros fue el VEGF humano en su isoforma 121. Nuestros estudios demostraron que la inmunización con ADN desnudo que codifica para la isoforma 121 del VEGF humano tuvo efectos antitumorales en ratones C57Bl/6 portadores del melanoma B16-F10 (Bequet-Romero et al., Angiogenesis. 2007;10:23-34).

Tras estos estudios iniciales, se expresó un antígeno recombinante representativo de la isoforma 121 del VEGF humano, en Escherichia coli, como proteína de fusión con la proteína P64K de Neisseria meningitidis (Nm), cuyo valor como transportador y estimulante de la respuesta inmune se ha documentado. Este antígeno, denominado P64-VEGFKDR-, se combinó con varios adyuvantes (alúmina, VSSP y DDA/TDB) y administró de forma subcutánea

en esquemas de inmunización profiláctico-terapéuticos. La vacunación prolongó el tiempo necesario para el prendimiento del melanoma B16-F10 en ratones C57Bl/6, redujo la tasa de crecimiento de los tumores e incrementó la sobrevida de los ratones (Morera Y, et al., Angiogenesis. 2008;11:381-93).

Estas investigaciones demostraron que la inmunización produce una respuesta de anticuerpos IgG contra el antígeno humano y contra el VEGF murino. Además, el suero de los animales inmunizados bloqueó la proliferación celular de células endoteliales humanas de cordón umbilical (HuVEC), estimuladas in vitro con VEGF humano, e inhibió la interacción entre el VEGF humano y el receptor KDR. Adicionalmente demostramos que las células del bazo de los ratones inmunizados eran específicamente citotóxicas para distintas líneas celulares tumorales de origen C57Bl/6 que producían VEGF. El tratamiento de los ratones con anticuerpos monoclonales de rata anti-CD8 de ratón redujo el efecto antitumoral final de la vacunación, indicando que tanto mecanismos humorales como celulares estaban en la base del efecto de la vacuna.

De estos estudios seleccionamos la combinación del antígeno P64-VEGFKDR- y el adyuvante VSSP para desarrollar nuestro primer candidato vacunal, denominado CIGB-247-V. En los estudios preclínicos adicionales en ratones Balb/c portadores de tumores experimentales, se emplearon esquemas de inmunización profiláctico-terapéuticos. Se demostró que la vacuna CIGB-247V redujo el volumen tumoral e incrementó la sobrevida de los ratones portadores del tumor de colon CT-26 y del tumor mamario F3-II. La vacunación también redujo el número de metástasis artificiales en los pulmones cuando se inyectaron por vía intravenosa las células CT-26 o 3LL-D122, así como la cantidad de metástasis pulmonares producidas de forma espontánea por los tumores 3LL-D122 y F3II (Bequet-Romero M, et al. Vaccine 2012;30(10):1790-9).

En los ratones Balb/c demostramos, al igual que para la cepa C57Bl/6, la existencia de una respuesta de anticuerpos IgG tanto contra el VEGF humano como contra su homólogo murino. El suero de los animales inmunizados inhibió la interacción entre el VEGF y su receptor KDR. Las células de bazo de los ratones inmunizados, previamente incubadas con el antígeno, fueron citotóxicas para líneas de células tumorales de origen Balb/c que producen VEGF.

También estudiamos al candidato vacunal CIGB-247-V en otras especies animales: ratas, conejos y primates no



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humanos. En ellos se generó una respuesta de anticuerpos IgG que bloqueó la interacción entre el VEGF y su receptor KDR. Si bien los títulos de anticuerpos presentaron una disminución progresiva luego del final de la fase de inducción (8 inmunizaciones en 8 semanas), el suministro de inyecciones de reactivación (boosters) llevó a un incremento y recuperación de los títulos de anticuerpos anti-VEGF en ratones, ratas, conejos y primates no humanos. Esto sugirió la existencia de memoria inmunológica.

Luego de administrar la vacuna a estas especies, no se registraron efectos hematológicos adversos ni alteraciones en los parámetros de bioquímica sanguínea. Tampoco se observaron afectaciones histológicas en órganos críticos, ni alteraciones importantes en la capacidad para sanar heridas profundas en la piel de las ratas y los primates no humanos (Morera Y, et al. Vaccine. 2010;28:3453-61; Morera Y, et al. Vaccine. 2012;30:368-77).

El candidato vacunal CIGB-247V se produjo según los estándares de buenas prácticas de fabricación (GMP) y resultó satisfactorio luego de otros estudios toxicológicos preclínicos. Por ello, en 2011 recibió la aprobación del Centro Estatal para el Control de Medicamentos (Cecmed, organismo regulador cubano) para el desarrollo de un estudio clínico fase I en pacientes con cáncer avanzado, denominado Centauro. En ese estudio multicéntrico se administró el candidato vacunal por vía subcutánea a tres grupos de 10 pacientes cada uno, a tres dosis diferentes de antígeno, durante ocho semanas, con una dosis de refuerzo en la semana 12. El estudio culminó a mediados de 2012, y demostró que la vacuna fue segura e inmunogénica. Se observó que a las 16 semanas, a mayores dosis de antígeno (400 μg) más pacientes mostraron un aumento en los títulos de anticuerpos IgG anti-VEGF, de la capacidad del suero para bloquear la interacción entre VEGF y su receptor KDR, y sus células T periféricas se activaron para producir interferón gamma luego de un estímulo externo con VEGF humano mutado.

El seguimiento a los pacientes sobrevivientes del ensayo clínico Centauro ha continuado por al menos tres años. Se ha mantenido su vacunación mensual. El perfil de seguridad sigue siendo excelente y hay cuatro pacientes con respuesta completa, uno con respuesta parcial y tres con enfermedad estables. Todos con más de tres años de sobrevida a partir del comienzo de la inmunización y sin haber recibido otro medicamento oncoespecífico. Los resultados de este ensayo a los dos años se incluyen

en una reciente publicación (Gavilondo J, et al. Vaccine. 2014;32:2241-50).

También se probó la combinación del antígeno recombinante con el adyuvante fosfato de aluminio (CIGB-247-A), con resultados antitumorales en ratón semejantes a los demostrados para la variante CIGB-247-V, así como un buen perfil de Inmunogenicidad en conejos y monos. Además se verificó que, a pesar de que los títulos de anticuerpos se elevaron decenas de veces con esta variante vacunal y aumentó la neutralización, la seguridad se mantuvo adecuada.

Teniendo en cuenta tales resultados y aquellos del ensayo Centauro, en 2013 se inició un nuevo ensayo clínico fase Ib, denominado Centauro-2. En este se exploraron nuevas dosis de antígeno y del adyuvante VSSP en la vacuna, así como la prueba de fosfato de aluminio como adyuvante, en pacientes con tumores avanzados y sin posibilidad de otro tratamiento oncoespecífico convencional. Este ensayo reiteró la capacidad de las vacunas CIGB-247-V y CIGB-247-A para romper la tolerancia al VEGF, con la producción de anticuerpos tipo IgG neutralizantes del VEGF y la detección de células periféricas específicas secretoras de IFN gamma. De nuevo se comprobó el excelente perfil de seguridad de la inmunización.

A las 16 semanas, de todos los grupos ensayados, se observó que la combinación del antígeno (400 y 800 μg), con la dosis de VSSP empleada en el estudio clínico Centauro, aumentó el título de anticuerpos IgG anti-VEGF, de manera más rápida e incrementaron la capacidad del suero para bloquear la interacción entre VEGF y su receptor KDR. El ensayo demostró que las vacunas activaron sus células T periféricas para producir interferón gamma luego de un estímulo externo con VEGF humano mutado, en todas las cohortes.

El seguimiento a los pacientes del ensayo clínico Centauro 2 continuó. Estos se han sometido a la vacunación mensual, pero con CIGB-247-V en todos los grupos. El perfil de seguridad sigue siendo excelente y hay pacientes con beneficio clínico objetivo, sin haber recibido ningún otro medicamento oncoespecífico.

El concepto en el que se basa la vacuna CIGB-247 es potencialmente aplicable a otras enfermedades que coinciden con angiogénesis excesiva y patológica, debido al incremento en el VEGF, tales como la degeneración macular asociada a la edad (DMAE) y la artritis reumatoide.



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Por tales razones, se investigó en un modelo experimental en conejo, en el cual se inyecta VEGF de forma intravítrea. A los 7 días de este procedimiento ocurre un crecimiento exagerado y anómalo de los vasos sanguíneos superiores de la retina, con permeabilización y derrame de líquido. En este modelo se demostró que si los conejos se vacunaban con CIGB-247-V antes de la inyección del VEGF, el efecto de este último se reducía o se controlaba, con respecto al grupo de conejos sin vacunar (Morera Y, et al. Exp. Eye Res. 2014;25(122C):102-9).

Estos y otros experimentos llevaron a la preparación de un protocolo clínico que proponía vacunar pacientes que padecían DMAE, comenzando simultáneamente con la aplicación intravítrea de Bevacizumab (anticuerpo humanizado anti-VEGF de Genentech-Roche). Este último procedimiento es el estándar para el tratamiento de la DMAE y requiere la aplicación del producto de forma mensual, durante toda la vida. Se conoce que las tres primeras inyecciones son imprescindibles para detener y comenzar la posible recuperación de una parte de los daños causados por la enfermedad en algunos pacientes. En la DMAE, la sobreproducción de VEGF local por las células del epitelio retiniano, en respuesta a la hipoxia parcial producida por el envejecimiento, lleva a un desarrollo anómalo de la vasculatura retiniana coroidea y sangrados que provocan la destrucción de la arquitectura de la mácula y la pérdida progresiva de la visión.

En el protocolo propuesto, aprobado por el CECMED y que comienza en 2015, la hipótesis principal es que la vacunación llevará a la reducción o eliminación de la necesidad de inyecciones intravítreas de Bevacizumab®, más allá de las tres primeras.

CIGB-166a: Inmunoterapia pasiva con anticuerpos recombinantes que reconocen específicamente el VEGF

La estrategia inmunoterapéutica en este proyecto se basa en la administración de anticuerpos recombinantes a los pacientes. En estos momentos estos anticuerpos constituyen las moléculas derivadas de la biotecnología con mayor mercado y aplicación, y abarcan un amplio espectro de enfermedades agudas y crónicas del hombre.

En este proyecto se partió de una plataforma tecnológica que permite obtener anticuerpos de origen humano, que eviten reacciones potenciales de rechazo en una futura aplicación

terapéutica en el humano. Esta plataforma se basa en una biblioteca de fragmentos de anticuerpos humanos tipo Fv de cadena simple (scFv), desplegados en fagos filamentosos, que construimos a partir de células linfoides humanas de distinta procedencia (Rojas, et al. Biochem Biophys Res Commun. 2005; 336:1207-13). A partir de esta biblioteca es posible seleccionar sitios de unión de anticuerpos humanos (en forma de fragmentos scFv) contra muchos antígenos diferentes, sin necesidad de inmunizaciones o muestreos de material linfoide humano. Como parte de esta plataforma para la generación de moléculas terapéuticas, también hemos desarrollado vectores bacterianos y de células de mamíferos para producir fragmentos de anticuerpos scFv, o moléculas tipo anticuerpo completo con funciones efectoras, respectivamente.

La segunda parte de esta plataforma es una biblioteca universal de nanoanticuerpos de origen camélido, que han sido humanizados. Esta biblioteca se construyó en el laboratorio en 2013.

Los nanoanticuerpos, también llamados nanobodies, anticuerpos de dominio simple o anticuerpos VHH, son proteínas relativamente sencillas con un tamaño aproximado de un décimo del tamaño del correspondiente en los humanos y de apenas unos nanómetros de longitud. Derivadas de anticuerpos especiales que aparecen en los camélidos y los tiburones, que poseen anticuerpos enteramente funcionales que carecen de cadenas ligeras, se desarrolló la tecnología de los nanoanticuerpos para explotar estas estructuras. Estas proteínas son más versátiles químicamente hablando, capaces de unirse a sus dianas, incluyendo los lugares activos de las enzimas y las hendiduras de las membranas celulares, que son demasiado pequeñas como para admitir un anticuerpo completo.

Por la diferencia de tamaño y que no son hidrófobos (al igual que los anticuerpos humanos normales), son más resistentes al calor y al pH, y pueden conservar su actividad cuando pasan por el tubo digestivo, se pudieron fabricar píldoras para uso oral en el tratamiento de la inflamación intestinal, cáncer color rectal y otras afecciones del aparato digestivo. Las principales aplicaciones en las que se estudia a los nanoanticuerpos son el tratamiento de enfermedades en humanos por medio de la interacción con enzimas tóxicas específicas o el bloqueo de interacciones moleculares.

Los nanoanticuerpos bivalentes son asociaciones de dos moléculas de nanoanticuerpos que en este tipo de



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terapias han revelado ser diez veces más potentes que nanoanticuerpos monovalentes.

El proyecto que se realiza en el CIGB se enfoca hacia el desarrollo de anticuerpos terapéuticos basados en scFv o nanoanticuerpos que bloqueen los efectos proangiogénicos del VEGF. Todas estas moléculas tienen aplicación potencial para el tratamiento de enfermedades cuya patogenia o sintomatología están asociadas a una producción excesiva de VEGF, tales como el cáncer o la DMAE.

Las moléculas más avanzadas en el proyecto son un fragmento tipo scFv denominado CIGB-166a, y su forma divalente, donde los dos sitios scFv están asociados al Fc de una inmunoglobulina IgG1 humana, denominada CIGB-598a. La primera se produce en bacterias y la segunda en células CHO. Para el aislamiento del sitio de unión que les dio origen (llamado 2H1) desde la biblioteca en fagos empleamos una estrategia de selección basada en un VEGF modificado como antígeno, como forma de aumentar las posibilidades de obtener anticuerpos contra nuevos epitopos del VEGF (Lamdan H, et al. Journal Biotechnol. 2011;151(2):166-74). Posteriormente modificamos el sitio de unión 2H1 a través de mutaciones dirigidas a los dominios CDR3 de ambas cadenas variables del scFv, como forma de incrementar la afinidad por el VEGF. Las moléculas CIGB-166a y CIGB-598a se construyeron a partir de este nuevo sitio de unión y tienen un incremento en la afinidad por el VEGF humano (Lamdan H, et al. Molecular Biosystems. 2013;9:2097).

Estas moléculas reconocen un nuevo epitopo en el VEGF humano, no reportado antes. La interacción de estos anticuerpos y el VEGF bloquea la unión del VEGF a los receptores VEGFR2 y VEGFR1. Identifican varias isoformas del VEGF humano, neutralizan los efectos proliferativos y promotores de la migración del VEGF sobre células endoteliales humanas de cordón umbilical (HuVEC) y afectan el crecimiento de células tumorales.

El fragmento de anticuerpo denominado CIGB-166a está en fase de desarrollo productivo y formulación, con vistas a futuras pruebas de efecto en distintos modelos animales. Para la construcción divalente, se construyó un banco certificado de la línea celular del transfectoma productor.

Respecto a los nanoanticuerpos humanizados, en 2014 se seleccionaron dos de estas moléculas, que reconocen y bloquean factores proangiogénicos humanos, las cuales fueron expresadas y cracaterizadas.

CICATRIZACIÓN Y CITOPROTECCIÓN

Líder del proyecto Dr. Jorge Berlanga Acosta Doctor en Ciencias Farmacéuticas. Investigador [email protected]éfono: (53) 7250-4479

Heberprot-P®

El proyecto de cicatrización y citoprotección ha conducido un estudio comparativo de la expresión cinética diferencial de las proteínas en el tejido de granulación de úlceras del pie diabético, isquémicas y neuropáticas, de grados III y IV, antes y después de recibir tratamiento con Heberprot-P®. Se demostró que favorece la expresión local de otros factores de crecimiento, la expresión de proteínas de la matriz extracelular y de marcadores relacionados con la competencia replicativa de las células. Hipotéticamente algunos de estos hallazgos pueden relacionarse con el bajo índice de recidivas en las lesiones tratadas. Estos estudios se han extendido a fibroblastos en cultivos obtenidos de las úlceras de estos pacientes. La expresión de genes relacionados con la cicatrización se compara con aquellos expresados en el tejido de granulación de otros tipos de heridas como quemaduras. También se estudia el impacto de las condiciones de hiperglucemia simulada en cultivo sobre la expresión genética de fibroblastos cutáneos.

Se estableció un modelo animal de úlcera tórpida, comparable con lesiones neuropáticas del pie diabético y se demostró su reversibilidad con el tratamiento con factor de crecimiento epidérmico infiltrado (FCE) en los bordes y fondos de la herida. Con este modelo se pudo conocer que el efecto del tratamiento se relaciona con la inducción del mecanismo de sobrevida y la proliferación de los fibroblastos dañados en estas úlceras. Se progresó en la generación de líneas de fibroblastos de tejido de granulación de úlceras de decúbito, quemaduras, lesiones isquémicas y neuropáticas en pacientes diabéticos. Se están realizando estudios en los que se trata de reproducir episodios típicos de la cicatrización de pacientes diabéticos en ratas sanas de laboratorio en virtud de la memoria metabólica. Estos pudieran conducir a la identificación de nuevos y desconocidos elementos patogénicos de la enfermedad y la implantación de sus complicaciones. Ha finalizado un estudio encaminado a evaluar el impacto del tratamiento con Heberprot-P® sobre los principales indicadores del estrés oxidativo y las reservas antioxidantes, con respecto a pacientes diabéticos sin úlceras y a pacientes con el mismo



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grado de ulceración y que recibieron tratamiento hiperbárico. Los resultados demuestran que 9 a 12 sesiones de infiltración reducen el estrés oxidativo y se restauran algunos marcadores de reserva antioxidante.

CIGB-500

El CIGB-500 es un potencial candidato como cardioprotector capaz de rescatar masa ventricular isquémica y disquinética. Los estudios preclínicos de seguridad toxicológica para la formulación del CIGB-500 han concluido exitosamente. La formulación ha resultado estable por más de 12 meses y garantiza la preservación de las propiedades físicas, químicas y farmacológicas del péptido en modelos ex vivo e in vivo. Adicionalmente se ha demostrado la compatibilidad de la composición experimental del CIGB-500 y un número de medicamentos, cuya indicación farmacológica son las enfermedades isquémicas agudas del corazón. Este candidato fue sometido a un ensayo de seguridad en voluntarios sanos, mediante un escalado de dosis ascendentes hasta los 400 μg/kg. Resultó bien tolerado, aunque los efectos adversos fueron severos. Estudios in vitro con cardiomiocitos fetales H9C2 retados con el quimioterapéutico Doxorubicina (DOX) han demostrado la capacidad del CIGB-500 en favorecer su sobrevida en forma dosis-dependiente. Paralelamente, estudios de proteómica con las fracciones citoplasmática y mitocondrial han evidenciado el mecanismo por el cual se promueven los efectos citoprotectores. Actualmente se desarrolla el ensayo clínico fase Ib en pacientes aquejados de infarto agudo del miocardio, en el Instituto de Cardiología de La Habana y en el Cardiocentro de Santa Clara.

CIGB-540

Se logró un modelo de cicatrización hipertrófica y reacción queloidea reproducible, que ha permitido evaluar un nuevo candidato, denominado CIGB-540. Los resultados de dos años de trabajo sugieren que este nuevo candidato puede mejorar la calidad estética de la cicatrización, pues reduce la expresión de genes profibrogénicos. Recientemente la autoridad reguladora cubana autorizó una prueba de concepto en voluntarios humanos con antecedentes personales de cicatrización exuberante, para efectuarla en el Centro de Investigaciones Médico-Quirúrgicas, de La Habana.

CIGB-530

El CIGB-530 mostró un potente efecto antifibrótico en un modelo animal de cirrosis hepática en esquemas de

prevención y regresión. Los análisis moleculares de las muestras de tejido hepático de animales tratados con el CIGB-530 indican su capacidad para reducir la expresión de citocinas profibrogénicas y de material colágeno. Además se observó un incremento en la expresión del PPAR-gamma y la decorina en el parénquima hepático.

CIGB-845: COMBINACIÓN TERAPÉUTICA PARA NEUROPROTECCIÓN

Líder del proyectoDra. Diana García del [email protected]éfono: (53) 7250-4397

Los objetivos del proyecto se centran en la búsqueda de alternativas terapéuticas que faciliten o promuevan eventos de regeneración de tejidos del sistema nervioso después de un daño o una lesión.

El CIGB-845 es una combinación farmacológica de un péptido sintético y una proteína recombinante, que tienen efectos neuroprotectores comunes y exclusivos. Posee un amplio expediente de pruebas preclínicas y de seguridad, entre las que se destacan estudios experimentales in vivo (encefalitis autoinmune experimental, axonopatía inducida con 1,2 DAB e isquemia cerebral global) (Del Barco DG et al. Neurotox Res. 2011;19(1):195-209; Del Barco DG et al. Restor Neurol Neurosci. 2011;29(4):243-52). Las evidencias experimentales in vitro muestran que esta combinación ejerce protección y previene la muerte a motoneuronas expuestas a agentes proapoptóticos y en condiciones de carencia de factores tróficos. El uso profiláctico o terapéutico de la combinación farmacológica CIGB-845 induce efectos terapéuticos significativos al comparar con grupos testigos o controles de medicamentos existentes.

La generación y caracterización clínica, electrofisiológica y ultraestructural de un modelo experimental alternativo de esclerosis lateral amiotrófica, permitió evaluar el CIGB-845 con resultados satisfactorios (Del Barco DG et al. Neurotox Res. 2011;19(1):195-209).

Recientemente se demostró su potente efecto neuroprotector en la reducción del infarto cerebral y en el rescate de células cerebrales en un modelo animal de isquemia cerebral global. Estos resultados se han reproducido de manera estable y se asocian con la reducción de las manifestaciones clínicas (Figuras 13 y 14). El efecto



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Figura 13

Falso operado Vehículo EGF 100 ug/Kg +GHRP6600 ug/Kg

0

5

10

1520

Volu

men

del

in

farto

(mm

3 ) EGF

GHRP

EGF + GHRP

vehículo

6

6

A) Volumen de infarto en los animales del modelo de isquemia cerebral global. Prueba de Kruskal-Wallis seguida de la prueba de Dunn. El asterisco indica diferencia significativa. B) Cortes coronales del encéfalo, teñidos con cloruro de 2,3,5 trifeniltetrazolio (TTC).

Figura 14

1000

800

600

400

200

0

Corteza cerebral

Den

sidad

neu

rona

l (n

euro

nas/

mm

2)

Falso operado

Control de vehículoEGFGHRP6EGF+GHRP6

1000

800

600

400

200

0

Hipocampo

Den

sidad

neu

rona

l (n

euro

nas/

mm

2)

800

600

400

200

0

Caudado putamen

Densidad neuronal en corteza, núcleo caudado putamen y núcleo ventral del tálamo. Imágenes representativas de las regiones corteza cerebral, caudadoputamen y tálamo, de los grupos experimentales control falso operado, control de vehículo y CIGB-845. La barra negra en el extremo inferior derecho equivale a 50 μm.

neuroprotector del CIGB-845 es similar al efecto inducido por la hipotermia y superior al efecto inducido por el

precondicionamiento isquémico (Garcia Del Barco-Herrera D et al. Restor Neurol Neurosci.2013;31(2):213-23).

HipocampoCaudado putamenCorteza cerebral

Control

Control de vehículo

EGF+GHRP6

EGF

GHRP6



28


Figura 15

Falso lesionado

Infartado + CIGB845

Infartado

Balonamiento mitocondrialPérdida de las crestasde la membrana interna

N: núcleo m: mitocondrias

Falso lesionado Infartado+

CIGB845

Infartado

DesmielinizaciónPérdida de la continuidad de las vainas de mielina Vaciamiento axonal

Resultados del tratamiento con EGF+GHRP6 en el modelo de isquemia cerebral focal. Se demuestra reducción del volumen de infarto y preservación de las ultraestructuras neuronales y axonales.

Estos resultados se han confirmado también en el modelo de isquemia cerebral focal. (Figura 15).

Las investigaciones preclínicas con CIGB-845 en modelos experimentales de esclerosis múltiple, esclerosis lateral amiotrófica y enfermedad isquémica del sistema nervioso, mereció el Premio Anual de la Salud de Cuba en 2013 en la categoría de investigación básica y el Premio de la Academia de Ciencias de Cuba en los años 2013 y 2014 (Garcia Del Barco-Herrera D et al. Anales de la Academia de Ciencias de Cuba. 2014;4(2):1-11).

Infartado + PBS

EGF + GHRP6 (50 μg/kg + 300 μg/kg)

EGF + GHRP6 (100 μg/kg + 600 μg/kg)

**

0

10

20

30

40

50VehículoEGF + GHRP6 (50 μg/kg + 300 μg/kg)EGF + GHRP6 (100 μg/kg + 600 μg/kg)

Volu

men

de

infa

rto

(mm

3)



29


Figura 16

Concentración del péptido (µM)

P8 péptido + IL-15

D.O

576

Bnm

1.0

0,2

0,4

0,6

0,8

TNFα

(pg/

mL)

Células Células + péptido Células + péptido + IL-15

180

140160

20406080

100120

Figura 17

Efecto del péptido antagonista P8 sobre la proliferación de la línea KiT225 inducida por IL-15. Las células KiT225 fueron cultivadas en presencia de 300 pg/mL de IL-15 (), 300 pg/mL de IL-15 en combinación con concentraciones incrementadas de P8 (), medio (). La proliferación celular fue evaluada por tinción con MTT.

La secreción de TNFα es inhibida por el péptido antagonista de IL-15. Células del fluido sinovial fueron incubadas con péptido o péptido más IL-15 en placas de 24 pocillos y cultivadas por 24h. Los niveles de TNFa fueron medidos mediante un ELISA específico.

INTERLEUCINA-15

Líder del proyectoDra. Alicia Santos [email protected]éfono: (53) 7250-4486

El proyecto de investigación está enfocado en el desarrollo de nuevas estrategias para inhibir la actividad proinflamatoria de la interleucina-15 (IL-15). Esta citocina se expresa de forma descontrolada en varias enfermedades autoinmunes e inflamatorias como la artritis reumatoide (AR), en enfermedades inflamatorias intestinales, sarcoidosis, esclerosis multiple y soriasis. En ese contexto, inhibir la señalización inducida por IL-15 puede ser clínicamente beneficioso. Esta interleucina señaliza mediante un receptor trimérico IL-15Rαβγ y puede encontrarse en forma soluble en fluidos biológicos o en la membrana celular. Nuestro

grupo ha desarrollado dos estrategias para su inhibición que constituyen dos proyectos de investigación. El desarrollo de un péptido antagonista de la IL-15 (proyecto CIGB-55) y el desarrollo de una vacuna terapéutica anti-IL-15 (proyecto CIGB-50).

El CIGB-55 es un péptido de 10 aminoácidos que se une a la subunidad alfa del receptor e inhibe la actividad biológica de la IL-15 en dos líneas celulares dependientes de esta citocina, CTLL-2 y KiT225 (Figura 16). Además, inhibe la secreción del factor de necrosis tumoral alfa (TNFα) en células sinoviales de pacientes con AR (Figura 17) y la inducción de citocinas inflamatorias IL-6 e IL-8, estimuladas por el mecanismo de señalización inversa a través de la IL-15 de membrana. Actualmente se evalúa la efectividad del CIGB-55 en modelos animales, y se trabaja en modificaciones y nuevas formulaciones que mejoren la estabilidad del péptido.



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La otra estrategia consiste en la inmunización activa con la IL-15 estructuralmente modificada, y en una muteína de IL-15 no activa, con hidróxido de aluminio como adyuvante. Los resultados experimentales de la inmunización en primates no humanos mostraron la generación de altos títulos de anticuerpos neutralizantes contra la IL-15 humana no modificada (Figura 18). Una vacuna terapéutica anticitocina puede ser ventajosa con respecto al uso de anticuerpos monoclonales contra la IL-15, porque ello implica menos frecuencia de inyecciones al paciente (de 2 a 4 por año), ausencia de respuesta anti-anticuerpos, que es uno de los motivos de pérdida de respuesta a la terapia con anticuerpos y su bajo costo.

Figura 18

Diluciones del suero

Suero preinmune

Medio

D.O

576

nm

IL-15

2.0

2.5

1.5

1.0

0,5

01 100

Suero de monos inmunizados con L-15

10 000 1 000 000

Efecto del suero de los animales inmunizados sobre la proliferación de la línea CTLL-2 inducida por IL-15. CTLL-2 fueron cultivadas en presencia de 300 pg/mL de IL-15 (), 300 pg/mL de IL-15 más di-luciones seriadas del suero (), medio (). La proliferación celular fue evaluada por tinción con MTT.

El proyecto CIGB-50 se encuentra en fase de desarrollo para el escalado de producción de la proteína y se continúan experimentos en fase preclínica.

Paralelamente se efectúan estudios básicos para caracterizar el patrón de citocinas proinflamatorias, y la presentación de la IL-15 y su receptor en fluido sinovial de pacientes con AR.

IDENTIFICACIÓN DE BLANCOS CELULARES DE INHIBICIÓN DEL VIH-1

Líder del proyectoDra. Celia Fernández [email protected]éfono: (53) 7250-4396

El extracto dializable de leucocitos (EDL) es un material de bajo peso molecular, proveniente de la ruptura de leucocitos humanos periféricos. Está compuesto por varias entidades moleculares, entre las que se encuentra el factor de transferencia (FT), la entidad responsable de transferir hipersensibilidad retardada específica de antígeno. En un ensayo clínico en Cuba, en el que se utilizó nuestra preparación de EDL, se evidenció un retardo significativo en la aparición de los síntomas en individuos con VIH-1 seropositivos asintomáticos, con respecto a los individuos no tratados.



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La terapia antirretroviral (TAR) contra el VIH ha sido muy efectiva en el control de la viremia y la prolongación de la vida de los pacientes de sida. Sin embargo, este procedimiento terapéutico no elimina totalmente el VIH-1, que está asociado con una elevada toxicidad y debe enfrentar la aparición de cepas virales resistentes al tratamiento. Otros de los obstáculos para la extensión de la TAR son su elevado costo y la escasez de recursos que hay en muchos de los países con las mayores tasas de infección. Las desventajas asociadas con la TAR han estimulado la búsqueda constante de nuevos agentes terapéuticos para el tratamiento del VIH-1.

Las investigaciones recientes exploran las vías para inhibir la replicación del VIH-1, mediante el uso de factores celulares involucrados en el ciclo replicativo del virus como blanco. Entre estos se encuentran las moléculas receptoras y correceptoras, así como los factores de transcripción y de ensamblaje. Se plantea que una estrategia terapéutica contra alguno de los factores celulares involucrados en el ciclo replicativo viral tendría múltiples ventajas, especialmente la posibilidad de minimizar la aparición de la resistencia viral.

Este proyecto ha encaminado sus investigaciones a dilucidar el efecto del EDL sobre la replicación del VIH y los mecanismos del hospedero que influyen en su replicación. En un sistema de estudio in vitro en la línea celular humana MT4, se demostró un efecto inhibidor dependiente de la dosis sobre la replicación del VIH en células tratadas con EDL antes y después del reto viral, durante 24 horas o más (Figura 19).

Figura 19

A

0

20

40

60

80

100

0,15 0,3 0,6 1,25 2,5

EDL (U/mL)

Porc

enta

je d

e in

hibi

ción

(p24

)

B

0

20

40

60

80

100

0,15 0,3 0,6 1,25 2,5

EDL (U/mL)

Porc

enta

je d

e in

hibi

ción

(p24

)

Efecto del extracto dializable de leucocitos humanos (EDL) sobre la replicación in vitro del VIH-1. RT: transcripción reversa.

En busca de factores endógenos desconocidos que participen en el proceso replicativo, el proyecto desarrolló un estudio de proteómica comparada e identificó varias proteínas que son moduladas tras el tratamiento con EDL en células MT4. A partir del estudio de estos blancos se logró identificar un péptido capaz de inhibir la replicación del VIH en células MT4 en el rango nanomolar. Actualmente el proyecto investiga el mecanismo de acción de este compuesto y de su proteína blanco en el ciclo replicativo del VIH. Las evidencias apuntan a que el péptido ejerce su acción mediante un mecanismo no reportado para otros inhibidores del VIH, lo cual lo convertiría en un compuesto



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antiviral de nueva clase. También se trabaja en el diseño de otras moléculas químicas pequeñas que puedan desplegar un efecto sobre la replicación del VIH.

VACUNA TERAPÉUTICA CONTRA CÁNCER DE PRÓSTATA (HEBERPROVAC®)

Líder del proyectoMSc. Jesús Junco Barranco jesú[email protected]éfono: 7750-2566

El cáncer de próstata es la segunda causa de muerte por cáncer en los hombres, en el hemisferio occidental, donde se reportan alrededor de 2500 muertes anuales. La supresión androgénica es una de las terapias más eficaces. Sin embargo, el uso de vacunas con base de gonadotropinas (GnRH) es una alternativa terapéutica promisoria que permite al sistema inmune combatir el tumor. Suele ser menos costosa que una intervención quirúrgica, por lo que representa una ventaja. Estas vacunas se han evaluado solo en unos pocos ensayos clínicos en el mundo con modestos resultados, por la baja inmunogenicidad de los preparados vacunales.

Nuestro proyecto desarrolla una vacuna terapéutica contra el cáncer de próstata (Heberprovac®) que tiene como principio activo fundamental un péptido mimético derivado de la hormona liberadora de la gonadotropina (GnRH), modificada químicamente para aumentar la rigidez estructural. Además se le ha incorporado un epitopo T cooperador del toxoide tetánico en el mismo proceso de síntesis, con el fin de aumentar su reconocimiento por el sistema inmune (PCT WO 98/27111). Este péptido se prepara como una emulsión oleosa, que incluye en sus componentes el inmunopotenciador (VSSP), y el adyuvante Oleoso Montanide ISA 51 VG.

Como resultado de la evaluación preclínica en animales con este candidato vacunal, se han obtenido niveles significativos de anticuerpos neutralizantes de la hormona GnRH natural que se produce en estos animales. Ello redunda en la reducción significativa de la testosterona (hormona masculina que estimula el desarrollo del cáncer de la próstata) y de la próstata, en cerdos, perros, monos y ratas utilizados como modelos (p < 0.01). En este último modelo, la inmunización con el inmunógeno mencionado demostró una inhibición del crecimiento tumoral prostático y un aumento en dos veces de la sobrevida de los animales inmunizados con respecto a los controles castrados.

Se ha evaluado la estabilidad y toxicología de los componentes del candidato vacunal Heberprovac®, y ha resultado un producto inocuo y estable. En el año 2006 se solicitó al Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed), el permiso para evaluar la toxicidad de este candidato vacunal en pacientes con cáncer de próstata avanzado.

El primer ensayo clínico con este producto en 6 pacientes demostró la inocuidad del candidato vacunal Heberprovac® en seres humanos. Además mostró indicios de su eficacia terapéutica al disminuir las concentraciones de testosterona hasta cifras de castración, la normalización del antígeno prostático específico (PSA), principal marcador bioquímico utilizado por los urólogos para seguir la enfermedad, y la reducción del tumor de próstata en los pacientes evaluados, mediante examen físico



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y ultrasonido). El seguimiento médico a los pacientes involucrados en el estudio, tres años después de iniciado el tratamiento, mostró que los pacientes que finalizaron la terapia estaban asintomáticos y con variables normales de PSA. Después de 7 años de seguimiento médico a los pacientes, cuatro de ellos están vivos, uno de los cuales nunca ha requerido tratamiento adicional para controlar la enfermedad. Dos pacientes han fallecido, uno por causas relacionadas con la diseminación de la enfermedad y el otro por causas no relacionadas (Figura 20).

Figura 20

0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000

Days

0

2000

4000

6000

8000

10000

12000

14000

16000

PSA (ng/ml) Testosterona (nmol/L) x 10

Nivel de castración (1.7 nmol/L) x 10 Títulos Anti-GnRH

Ensayo Clínico Fase I con el candidato vacunal Heberprovac® en pacientes portadores de cáncer de próstata avanzado. En la figura se correlacionan las medias de los niveles de anticuerpos anti GnRH con los valores de testosterona y las cifras de PSA hasta 5 años después de concluido el ensayo clínico. Como puede apreciarse, inmediatamente después de comenzado el esquema de inmunización, se generan altos títulos de anticuerpos anti GnRH, los cuales redundan en la ablación de Testosterona hasta niveles de castración alrededor de los 150 días después de comenzado el tratamiento (triángulo rojo), así como una reducción de los niveles de PSA hasta valores de 0 en todos los pacientes. Alrededor de los 3 años, cuando algunos de los pacientes comenzaron a mostrar elevación de los niveles de Testosterona y del PSA, el uso de terapias antihormonales permitió reducir de nuevo los niveles de PSA hasta 0, mostrando la hormono-sensibilidad de los pacientes.

En el año 2011 se comenzó un ensayo clínico en 56 pacientes afectados con cáncer de próstata avanzado, que tuvo como objetivo evaluar la seguridad de la vacuna en un mayor número de pacientes, y las dosis que se debían emplear. Se determinó que el perfil de seguridad de Heberprovac® es adecuado puesto que en todos los grupos se satisfizo la hipótesis de seguridad planteada. Se observó una correlación significativa entre el aumento de los títulos de anticuerpos y la disminución de los niveles de testosterona y PSA en todas las dosis vacunales usadas, así como la mejoría de los parámetros clínicos del 80 % de los pacientes tratados. Actualmente, continúa el seguimiento evolutivo a estos pacientes. Aunque una parte de ellos han requerido tratamiento adicional, ninguno ha mostrado síntomas de resistencia a la castración, de los más temidos de la recurrencia del cáncer de próstata.

En estos momentos se trabaja en la elaboración de un protocolo clínico para un ensayo clínico fase II/III de comparación del candidato vacunal con la mejor terapia existente hasta el momento (Zoladex®) (Figura 21).



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Figura 21

Ex_0Inm1Inm2Inm3Inm4

Inm5Inm6

Inm7

40

35

30

25

20

15

10

5

01 2 3 4

Grupo de Dosis

Núm

ero

de s

ínto

mas

obs

truc

tivos

*

*

*

*

*

**

*

Ensayo clínico fase II con el candidato vacunal Heberprovac®. Cinetica de disminución de los síntomas obstructivos en los pacientes inmunizados con diferentes dosis del candidato vacunal Heberprovac®. A medida que se van administrando más dosis, disminuyen los síntomas obstructivos urinarios (nicturia, polaquiuria, retención, dolor miccional).

PROYECTO IFN BETA/FICOCIANOBILINA EN ESCLEROSIS MÚLTIPLE

Líder del proyectoDr. Giselle Pentón [email protected]éfono: (53) 7250-4545

La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad autoinmune, inflamatoria crónica desmielinizante y neurodegenerativa del sistema nervioso central, que afecta a cerca de 2.5 millones de personas. Es la causa más frecuente de alto grado de invalidez neurológica en adultos jóvenes, especialmente en países desarrollados del hemisferio norte.

Las terapias aprobadas contra la EM son altamente costosas (entre 20 mil y 60 mil dólares anuales por paciente), y tienen un efecto terapéutico relativamente moderado, por lo que la búsqueda de nuevos tratamientos es un área de investigación de fuerte competitividad.

Se evidenció el potencial terapéutico de la combinación del IFN beta (IFN-b)/C-Ficocianina (C-Fc) contra la EM.

Datos experimentales de esta combinación terapéutica demostraron que modula procesos comunes y específicos relacionados con el sistema inmune y el neurológico, con la apoptosis y el estrés oxidativo. Bloquea o reduce los signos clínicos en un modelo crónico de encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) progresiva en ratones C57BL6, induce una respuesta de células T reguladoras en bazo, disminuye los niveles



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de IL-17 en cerebro y suero, y protege de la desmielinización y el daño axonal en los animales tratados (Figura 22).

Figura 22

Efecto de la combinación IFNbeta/C-Ficocianina y sus principios activos independientes en un modelo de EAE crónico progresivo en ratones C57BL6. I. Análisis morfométrico que muestra: el índice inflamatorio (A), índice de desmielinización (B), densidad de células T en lesiones en materia blanca (C), densidad de macrófagos/microglia activada en lesiones en materia blanca (D), densidad axonal E), daño axonal (F). II. Imágenes representativas de un animal/grupo para los parámetro: índice inflamatorio (H/E), índice de desmielinización (LFB/PAS), densidad axonal (Bielchowsky)

HEEAE IFN-beta C-Pc Índice de inflamación

LFB/PASEAE IFN-beta C-Pc Índice de inflamación

BielchowskyEAE IFN-beta C-Pc Índice de inflamación

200x (Barra 100 μm)

Índice inflamatorio (H/E)A

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Densidad células T (CD3)C

40

20

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0

2

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4

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Densidad macrófagos (MAC3)D

0

50

100#60

Densidad axonal (Bielchowsky)E

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20

100Daño axonal (APP)

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0

15

5

20

EAE + salina

EAE + IFNb (2000 U)

EAE + C-Fc (4mg/Kg)

EAE + IFNb/C-Fc



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El proyecto también ha evaluado la ficocianobilina (FCB), cromóforo de la C-Fc, debido a que la mayoría de las propiedades biológicas de la C-Fc radican en su cromóforo más que en las cadenas polipeptídicas.

Por otra parte, tiene menor complejidad estructural, lo que reduce la probabilidad de modificaciones como la agregación y la degradación. Otra ventaja es que podría ser mejor absorbida cuando se administra por vía oral, debido a que es menos polar que la C-Fc. Ello armoniza con las nuevas tendencias del mercado de fármacos para la EM que va hacia el desarrollo de fármacos orales.

PROYECTO FICOCIANOBILINA EN ISQUEMIA CEREBRAL

Líder del proyectoDr. Giselle Pentón [email protected]éfono: (53) 7250-4545

Los accidentes cerebrovasculares (ACV) constituyen la tercera causa de muerte en Cuba y el mundo industrializado. Es la primera causa de invalidez y demencia vascular asociada con un alto costo socioeconómico. Entre los ACV, el ictus isquémico, causado por la rápida disrupción del flujo sanguíneo, debido a la oclusión de alguna arteria cerebral, afecta a alrededor de 85 % de las personas afectadas. La

estrategia para el tratamiento de la isquemia cerebral en su fase aguda tiene dos objetivos principales: la restauración del flujo sanguíneo cerebral (trombolisis) y la limitación de la pérdida neuronal (neuroprotección). La terapia trombolítica con el factor activador del plasminógeno tisular (t-PA) es el único tratamiento farmacológico aprobado en seres humanos para las primeras horas después del daño isquémico, pero solamente se logra la intervención a tiempo en el 10 % de los pacientes. Ello se debe, entre otras causas, por la relativamente corta ventana terapéutica (4,5 h), y a que su aplicación se asocia con el riesgo de hemorragia intracerebral. A pesar del conocimiento cada vez mayor de los procesos bioquímicos, genéticos y moleculares que tienen lugar durante el proceso isquémico cerebral, el desarrollo de nuevas estrategias neuroprotectoras eficaces ha sido largamente infructuoso.

Este proyecto ha demostrado las propiedades neuroprotectoras de la ficocianobilina (FCB), cromóforo de la C-Fc, que actúa sobre las etapas de la cascada isquémica: excitotoxicidad, apoptosis e inflamación y neurodegeneración.

Este efecto neuroprotector se ha identificado en modelos animales de isquemia/reperfusión (I/R) global en jerbos de Mongolia, modelos de I/R focal en retina y en un modelo de hipoperfusión cerebral aguda que remeda penumbra isquémica en ratas Wistar (Figura 23).

Figura 23

Efecto dosis respuesta de la Ficocianobilina en un modelo de isquemia/reperfusión focal en la retina de ratas Wistar. A. Porciento del conteo de células viables (capa nuclear interna) respecto al control. Números diferentes representan diferencias estadísticamente significativas. B. Imágenes representativas de un animal/grupo para cada dosis de FCB y para los controles.

a

bc

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a a

Control Vehículo

Ficocianobilina 1 (µM)

25 50 75 1000

50

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Cont

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cont

rol

Normal Isquemia/reperfusión (I/R)

I/R +FCB 25 μM I/R +FCB 50 μM I/R +FCB 75 μM I/R +FCB 100 μM

A

B



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DEPARTAMENTO DE DIAGNÓSTICO Y GENÓMICA

Jefa del DepartamentoDra. Lidia Inés NovoaAuditora [email protected]éfono: (53) 7208-4035

El Departamento de Diagnóstico y Genómica está orientado a estudios de farmacogenómica que emplean las ventajas de la mezcla étnica y la organización del Sistema Nacional de Salud de Cuba, junto con el potencial de nuevos productos en desarrollo y en etapa de estudios clínicos en los proyectos contra cáncer, enfermedades autoinmunes y enfermedades infecciosas. Este departamento se dedica además a estudios de haplotipos relacionados con enfermedades autoinmunes, crónicas e infecciosas.

El CIGB cuenta con una plataforma tecnológica de microarreglos (microarray) proveniente de la empresa china Capital BIO (Figura 24). Esta plataforma tecnológica ostenta las certificaciones ISO 9001, ISO 13485 y de la Administración de Alimentos y Drogas (FDA, Food and Drugs Administration), la Comunidad Europea y las autoridades reguladoras de China.

Figura 24

Plataforma completa de microarreglos de doble fluorescencia

RT-Cycler

Nano drop

Extractor 36Biomixer II

Slidewasher

SmartArrayer 48

Lux Scan 10K-A

FARMACOGENÓMICA

Líder del proyectoMSc. Daniel [email protected]éfono: (53) 7208-7421

El trabajo del Grupo de Farmacogenómica se enfoca en proyectos de generación de nuevos productos biofarmacéuticos o de vacunas y en los estudios clínicos de esos productos contra cáncer, enfermedades autoinmunes y enfermedades infecciosas. Sus objetivos son:

• Estudio del mecanismo de acción del Heberprot-P®, tanto en animales, células de cultivo como en seres humanos.• Identificación de nuevos blancos terapéuticos en el tratamiento de la úlcera del pie diabético.• Estudio de marcadores de respuesta para el HeberPag®, tanto en líneas celulares como en muestras de pacientes.• Estudio de marcadores moleculares para la tipificación de las fases de glioblastoma.• Estudio del mecanismo de acción y de los marcadores de respuesta del CIGB-300 en varias enfermedades.• Estudio de marcadores moleculares que permitan diferenciar la colitis ulcerativa del cáncer de colon y evaluar



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la respuesta a fármacos en desarrollo mediante el uso de esos marcadores.

Identificación de nuevos biomarcadores y blancos terapéuticos en la UPD

El análisis de datos de expresión de 49 genes, determinados por la técnica de PCR cuantitativa (qPCR), se complementó con una metodología para el análisis de cada una de las réplicas biológicas. Este procedimiento permite la aplicación de métodos multivariados de análisis, como agrupamientos

IsqR

esp

T0 3

8Is

qRes

p T0

39

IsqR

esp

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0Is

qRes

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esp

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2

0 -0.017030612 0.9122645

0.05

9525

31

0.44

0406

2

0.94

0337

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bidimensionales (Figura 25) para la visualización del comportamiento global de los perfiles de las muestras y de los genes estudiados, análisis de componentes principales para la determinación de genes y eventos biológicos más relevantes, y el uso de otros métodos que confirman la expresión diferencial de estos genes que culminaron con la evaluación de su capacidad predictiva, como etapa preliminar para su posterior validación. Como resultado, se identificaron conjuntos de genes que pueden servir como predictores de respuesta al tratamiento con Heberprot-P®, según los grupos de pacientes isquémicos, neuropáticos y ambos.

Figura 25

Agrupamientos bidimensionales para la visualización del comportamiento global de los perfiles de las muestras y de los genes estudiados.



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Además, se están realizando estudios por secuenciación profunda. Los resultados del análisis bioinformático permitirán identificar blancos para nuevos productos.

Estudio de marcadores de respuesta para el HeberPag en líneas celulares

El Heberferon® se ha utilizado en los carcinomas de piel no melanoma. Sin embargo, los resultados preliminares indican que también podría tener un efecto sobre otros tipos de cánceres, como glioblastoma multiforme (GBM). Este producto ha mostrado un efecto antiproliferativo sobre líneas de células GBM derivadas in vitro y en ratones desnudos xenotrasplantados, aumentando su supervivencia.Los objetivos del proyecto han sido investigar el efecto inhibidor de este producto en cultivos primarios de células de glioblastoma con varios perfiles moleculares, y la relación entre la respuesta a este producto (en términos de efecto inhibidor del crecimiento) y los perfiles moleculares de los cultivos celulares de GBM. El inhibidor muestra una respuesta diferenciada en cultivos celulares de glioma primario. Se han identificado tres niveles de respuestas proliferativas independientes de las clasificaciones del TCGA (Clasificación molecular propuesta por Verhaak et al., 2010).

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA-FÍSICA

Jefe del DepartamentoDr. Luis Javier Gonzá[email protected]éfono: (53) 7250-4140

La identificación de moléculas involucradas en enfermedades específicas y en la resistencia a drogas, mediante la bioinformática y la proteómica; la ingeniería y la modelación de proteínas para el desarrollo de nuevas drogas, son los temas a los que se dirige la investigación en el Departamento de Química-Física. Este departamento tiene experiencia en la purificación de proteínas, la caracterización de proteínas glicosiladas, la síntesis de péptidos y oligonucleótidos, la cromatografía de gases, el estudio de interacción proteína-proteína, el análisis ultraestructural mediante microscopia electrónica, la espectrometría de masas, el análisis de aminoácidos y el análisis de imágenes obtenidas mediante resonancia magnética nuclear. Los proyectos en curso son:

•Proteómica,•Bioinformática,•Screening virtual,

•Modificaciones químicas de proteínas,•Desarrollo de péptidos modificados (APL) con potenciales aplicaciones en el tratamiento de la artritis reumatoide y otras enfermedades autoinmunes,•Desarrollo de moléculas con actividad antiviral contra el virus del dengue,•Diseño de moléculas antivirales contra el VIH-1.

AUTOINMUNIDAD

Líder del proyectoDra. María del Carmen Domí[email protected]éfono: (53) 7250-4387

El proyecto de autoinmunidad está enfocado en el estudio y la búsqueda de tratamientos para enfermedades autoinmunes, específicamente de la artritis reumatoide (AR). Esta es una enfermedad autoinmune sistémica, cuya manifestación clínica primaria es la inflamación de las articulaciones periféricas. Afecta al 1 % de la población mundial, con un índice mujer/hombre de 3:1. En la patogénesis de la AR participan varias poblaciones celulares que la potencian y perpetúan: linfocitos T y B, macrófagos, neutrófilos y sus productos. El impacto social y financiero de esta afección es sustancial, tanto para los países como para los individuos que la padecen: el tratamiento médico y quirúrgico, y la discapacidad que genera en personas en edad laboral, ocasionan gastos de millones de dólares.

Tradicionalmente, la AR se ha tratado con fármacos que tienden a mejorar los síntomas, o con el uso de potentes inmunosupresores no específicos, que no constituyen una terapia eficiente. Sin embargo, los avances en el conocimiento de la fisiopatología de esta enfermedad y en la biotecnología han llevado al surgimiento de una nueva era para su tratamiento, conocida como terapia biológica, mediante la cual se ha intentado bloquear varios elementos claves de su patogénesis. Hay varios fármacos anti-TNFα, aprobados por la Administración de Alimentos y Drogas (FDA, Food and Drug Administration), que constituyen la alternativa de mayor éxito en estos momentos. Aunque son buenos los resultados tras su uso, cerca de 50 % de los pacientes no mejoran con esta terapia. Debido a que estos fármacos ocasionan la supresión de los mecanismos efectores de la respuesta inmunitaria a nivel sistémico, muchos pacientes presentan una alta susceptibilidad a contraer infecciones, otras enfermedades autoinmunes y neoplasias, por lo que no constituyen terapias eficaces para esta enfermedad.



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El desarrollo de variantes terapéuticas que puedan eliminar específicamente las células patogénicas sin provocar una inmunosupresión generalizada, es un reto en la actualidad. Esto ha llevado en los últimos años a algunos investigadores a retomar el uso de estrategias antígeno-específicas para el tratamiento de las enfermedades autoinmunes, tratando de regular la respuesta inmune, no de suprimirla. Se han empleado péptidos derivados de autoantígenos o ligandos peptídicos alterados (APL, del inglés altered peptide ligand) administrados en condiciones que permitan la inducción de mecanismos reguladores que median la inducción de tolerancia periférica (anergia, apoptosis e inducción de células T reguladoras).

Este proyecto de investigación está focalizado en el desarrollo de estrategias antígeno-específicas para el tratamiento de la AR, con el objetivo de obtener fármacos eficaces para su tratamiento.

La estrategia que se ha desarrollado se basa en la inducción de la tolerancia periférica, mediante el uso de un péptido modificado tipo APL, derivado de un autoantígeno involucrado en la patogénesis de la AR. El autoantígeno seleccionado es la proteína de estrés térmico de 60 kDa (HSP60).

En general, las HSP60 tienen propiedades inmunorreguladoras que ayudan a la restauración de la tolerancia. Por ello, son blancos estratégicos en el desarrollo de terapias para el tratamiento de varios desórdenes inflamatorios como la

AR. Mediante herramientas de bioinformática, se identificó un nuevo fragmento peptídico como un posible epitopo de células T en la secuencia de la HSP60 humana. Este epitopo sirvió de base para el diseño de un péptido tipo APL. Los APL son análogos de péptidos inmunogénicos con una o varias sustituciones en las posiciones esenciales de contacto con el TcR o con el complejo principal de histocompatibilidad (MHC), lo cual interfiere o modifica la cascada de eventos necesarios para la completa activación de las células T (Bielekova B, Martin R. J Mol Med. 2001;79:552-65). Manipular experimentalmente las propiedades intrínsecas de ligandos peptídicos conocidos, permite alterar apropiadamente la naturaleza, el curso y la potencia de la respuesta celular inmune.

El péptido tipo APL diseñado por nuestro grupo mediante herramientas de bioinformática se modificó en un residuo aminoacídico en relación con el epitopo original de la HSP60 (E18-3), para incrementar la afinidad y probabilidad de ser presentado por las moléculas HLA (human leukocyte antigen) clase II que con más frecuencia expresan los pacientes con AR. Este péptido se denominó CIGB-814.

El péptido CIGB-814 ejerce un potente efecto terapéutico en dos modelos animales para la AR: artritis inducida por adyuvante (AA) (Figura 26) y artritis inducida por colágeno. Además induce células reguladoras con un fenotipo CD4+CD25highFoxP3+ en ensayos ex vivo con células mononucleares aisladas de sangre periférica y del líquido sinovial de pacientes con AR (Figura 27).

Figura 26 Evaluación de los signos clínicos en las ratas con artritis inducida por adyuvante y tratadas con los péptidos: original (E18-3) y CIGB-814 (APL1). Al décimo día de la inducción de la enfermedad, las ratas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos de tratamiento: grupo 1: ratas inoculadas con el péptido E18-3 por vía intradérmica; grupo 2: ratas inoculadas con el APL1 por vía intradérmica; grupo 3: ratas inoculadas con el APL1 por vía subcutánea; y grupo 4: grupo placebo. Grupo 5: ratas sanas. Los valores graficados para los signos clínicos correspondientes a cada día representan el promedio por grupo de estudio más la desviación estándar. El gráfico representa los resultados de uno de los tres experimentos realizados. El análisis estadístico entre grupos se realizó con la prueba paramétrica ANOVA y las medias se compararon con la prueba a posteriori de Tukey. Letras diferentes significan diferencias estadísticamente significativas para p < 0.0001.

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Figura 27

Estos resultados avalan las características terapéuticas de este nuevo candidato terapéutico para la AR, capaz de potenciar mecanismos de restauración de la tolerancia, que se pierden durante la enfermedad.

DESARROLLO DE MOLÉCULAS CON ACTIVIDAD ANTIVIRAL CONTRA EL VIRUS DEL DENGUE

Líder del proyectoLic. Glay [email protected]éfono: (53) 7250-4364

El virus dengue (VD) es un flavivirus trasmitido por mosquito, que constituye un agente patógeno humano de impacto global en la salud pública y en la economía. Las infecciones por este virus causan un amplio espectro de manifestaciones clínicas, desde asintomáticas y benignas como la fiebre por dengue, caracterizada por una fiebre indiferenciada, y otras manifestaciones severas como la fiebre hemorrágica por dengue (FHD) y el potencialmente letal síndrome de choque por dengue (SCD). Durante las últimas seis décadas, el VD ha incrementado gradualmente su distribución geográfica y el número de pacientes infectados. Actualmente es pandémico en áreas tropicales: se estima que ocurren de 50 a 100 millones de infecciones anuales y 2500 millones de personas viven en áreas con

riesgo de ser infectadas. El promedio anual de pacientes con FHD reportados a la Organización Mundial de la Salud es de 500 000 por año; de ellas, más de 20 000 son fatales. No obstante, se considera que la carga real de la enfermedad es varias veces superior. A pesar de esto, en la actualidad no se comercializan vacunas ni tratamientos antivirales específicos.

El proyecto del CIGB para el desarrollo de agentes antivirales contra el VD, estudia varias etapas del ciclo de replicación del virus, atractivas para la identificación de principios novedosos para la inhibición de la infección. Una estrategia fundamental del proyecto está enfocada en la inhibición de la entrada del virus a las células dianas, un proceso que involucra eventos tempranos de la infección como la adhesión del virus a las células del hospedero, la internalización o endocitosis y la fusión de membranas en endosomas tempranos. Otra diana atractiva es el procesamiento de la poliproteína viral por la proteasa NS3. En este caso se diseñan moléculas que interfieran con la formación del complejo enzimático de máxima actividad proteolítica NS3/NS2B.

Actualmente disponemos de varias moléculas (de naturaleza proteica, peptídica y tipo droga), que muestran actividad antiviral in vitro y también in vivo en el modelo de encefalitis inducida por inoculación intracraneal del VD en ratón. Estas moléculas implican principios novedosos de inhibición.

Análisis de la inducción de Treg con fenotipo CD4+CD25highFoxp3+ por el APL1 en los cultivos de las PBMC aisladas de los pacientes con artritis reumatoide, en comparación con los cultivos estimulados con el péptido original y sin estímulo peptídico. Las PBMC se estimularon durante cinco días con 40 mg/mL del péptido CIGB-814 (APL1) o el péptido original (E18-3). PBMC sin estímulo peptídico se usaron como control de los niveles basales en cada paciente (C-). Se representa la media de cada grupo más la desviación estándar. El análisis estadístico entre grupos se efectuó con la prueba paramétrica ANOVA y las medias se compararon con la prueba a posteriori de Tukey. Letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas p < 0.0001.

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Tratamientos



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Identificación de LRP1 como receptor endocítico propuesto del virus del dengue: una estrategia novedosa para el desarrollo de terapias antivirales

El VD penetra en las células de mamíferos por endocitosis mediada por receptor. Otros grupos de investigación han mostrado que varias moléculas de la superficie de las células unen el virus, tales como GAGs, DC-SIGN, HSP 70, HSP90, el receptor de laminina y el receptor de macrófago. También los receptores de FC gamma unen el VD en forma de inmunocomplejos. Previamente se ha propuesto que estas moléculas constituyen receptores del virus. Sin embargo, ninguno de ellos se comporta como receptor endocítico del VD, y sus roles parecen estar más relacionados con los eventos de adhesión previos a la internalización del virus.

Al respecto, hemos aislado e identificado el receptor LRP1 como receptor endocítico propuesto del VD. Nuestros estudios se han enfocado en la caracterización de la unión del LRP1 al virus y a la proteína de la envoltura (proteína E), la determinación de la función del LRP1 en la internación del virus, así como en ensayos de inhibición de la infección in vitro e in vivo de preparaciones de LRP1 y de sus ligandos.

El bloqueo del LRP1 como diana potencial para el desarrollo de agentes antivirales haría posible inhibir la entrada del virus que conduce a una infección viral productiva, independientemente de que ocurra la unión del virus a otros receptores de adhesión.

También hemos expresado fragmentos recombinantes de LRP1, con el objetivo de establecer ensayos de unión para la identificación de moléculas tipo drogas mediante cribado in vitro de colecciones de compuestos. Además hemos realizado estudios de cribado in silico de bibliotecas virtuales de compuestos químicos. Un número de moléculas seleccionadas por esta vía muestran actividad antiviral in vitro e inhiben la unión del virus a los dominios de unión del dominio III a de la proteína de la envoltura del virus a LRP1.

DISEÑO DE MOLÉCULAS INHIBIDORAS DE LA ENTRADA DEL VIRUS A LAS CÉLULAS

Descubrimiento de HIT

Basado en la estructura del dominio III, hemos diseñado péptidos constreñidos estructuralmente que mimetizan un epitopo topográfico de la superficie. Estos péptidos sintéticos muestran actividad antiviral contra el virus dengue. Uno de

ellos inhibe la infección viral in vitro por los virus DV1-4 con una IC50 de 15-50 μM y un índice de selectividad de 20-67. Este péptido muestra protección significativa en el modelo de encefalitis de ratón causada por inoculación intracraneal. Además hemos demostrado que el péptido se une a fragmentos del receptor LRP1 utilizando la metodología de resonancia plasmónica de superficie (BIACORE).

Optimización HIT2LEAD

Partiendo de la estructura del péptido HIT hemos diseñado y sintetizado péptidos que exploran el espacio secuencia/estructura. Aplicamos una estrategia de diseño racional basado en estructura para lograr una optimización simultánea de la interacción péptido-receptor, la estabilidad estructural y la estructura supramolecular. Este proceso condujo al descubrimiento de un péptido guía que muestra una alta avidez por el receptor LRP1 y exhibe potencias en el rango nanomolar. El péptido se ensambla en nanopartículas cuyo tamaño y morfología puede modificarse en dependencia de las condiciones de agregación. Por otra parte, partir de los resultados in silico de nuestros estudios de cribado in silico de bibliotecas virtuales de compuestos químicos contra el receptor LRP1 hemos obtenido una colección de compuestos unidores potenciales los cuales se ensayaron con respecto a la unión a fragmentos del receptor utilizando BIACORE. Varios compuestos seleccionados muestran actividad antiviral in vitro e inhiben la unión del virus a los dominios de unión del dominio III a de la proteína de la envoltura del virus a LRP.

Proteína E como diana para el desarrollo de agentes antivirales

Por la importancia funcional de la proteína E, también se seleccionó esta proteína como diana para el desarrollo de ligandos capaces de bloquear los sitios involucrados en interacciones proteína-proteína, proteína-membrana, y que interfieran con cambios conformacionales de la proteína. Un agente antiviral que se está desarrollando es un fragmento de anticuerpo de cadena simple recombinante con capacidad neutralizante contra los cuatro serotipos del virus. También se han identificado moléculas tipo drogas contra esta diana, utilizando métodos de cribado virtual.

Con el objetivo de identificar las regiones de interacción de la proteína de la envoltura (en particular el dominio III) con anticuerpos monoclonales, sueros de pacientes y receptores celulares, el grupo ha desarrollado una biblioteca de



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mutantes de alanina de los residuos expuestos del dominio III. Esta herramienta ha permitido identificar epitopos inmunodominantes de la respuesta humoral humana y los residuos esenciales en la interacción con proteínas receptoras.

En el proyecto se emplea una combinación de herramientas metodológicas entre las que se incluyen el diseño computacional de moléculas basado en estructura y cribado virtual, la selección de ligandos contra las proteínas dianas utilizando métodos combinatorios (bibliotecas combinatorias de fagos), metodologías de proteómica, métodos de análisis de interacciones de biomoléculas, entre otras. Además, se realizan ensayos in vitro e in vivo de la actividad antiviral para la evaluación de las moléculas candidatas y la validación del receptor viral propuesto.

Se solucionó la estructura cristalográfica del anticuerpo monoclonal 4G2. Estudios de modelación sobre la región de reconocimiento llevaron a la comprensión de los determinantes estructurales de la amplia reactividad cruzada del anticuerpo contra flavivirus, así como de su mecanismo de neutralización y generación de mutantes de escape.

DESARROLLO DE METODOLOGÍAS PARA EL ESTUDIO DE PROTEOMAS

Líder del proyectoDr. Vladimir [email protected]éfono: (53) 7250-4148

El desarrollo de metodologías para el estudio de proteomas tiene por objetivo la caracterización más completa de los proteomas en estudio. En años precedentes hemos implementado varios métodos de aislamiento selectivo de péptidos que permiten la simplificación de las mezclas complejas para efectuar proteómica cuantitativa, sin el empleo de la electroforesis bidimensional, y al utilizar el marcaje isotópico cuantificar la expresión diferencial de las proteínas. El método propuesto se basa en una triada de estrategias originales, conocidos como captura selectiva de péptidos (SCAPE). Este método permite el aislamiento de péptidos con diferentes estados de carga: neutros, con una o dos cargas, descritos como RH0, RH1 y RH2, respectivamente. El recobrado de los péptidos aislados selectivamente es superior al 70 %, con una selectividad mayor del 95 %, y se puede lograr una cobertura amplia (mayor del 95 %) de los proteomas conocidos. El fraccionamiento que se logra

por intercambio iónico a partir del uso de determinados reactivos bloqueadores de los grupos amino, permite la identificación de un mayor número de proteínas. Hemos demostrado que con una única metodología es posible aislar los tres grupos de péptidos de interés. Un método alternativo es el conocido como electroforesis en geles de poliacrilamida de fraccionamiento dual (DF-PAGE), y se basa en el fraccionamiento electroforético a nivel de proteínas en una primera dimensión, y luego a nivel de péptidos como segunda dimensión. Estos métodos se utilizan en la cuantificación relativa de proteínas desde dos y hasta cuatro condiciones, de manera simultánea. Se han empleado en varios de los proyectos del área de investigaciones biomédicas con resultados superiores a los obtenidos por la vía convencional de la electroforesis bidimensional. Entre sus aplicaciones está la dilucidación de mecanismos de acción de varias moléculas proapoptóticas, el estudio de mecanismos de resistencia a drogas en distintas líneas de células tumorales, el estudio de biomodelos de artritis reumatoide, el estudio del efecto sinérgico de drogas anticancerígenas y la identificación de proteínas en mezclas complejas de proteínas.

Hemos iniciado trabajos de validación de blancos a partir de resultados de proyectos anteriores, que posibilitaron mediante la técnica de monitoreo de reacción simple (single reaction monitoring) realizar experimentos de proteómica con hipótesis dirigida.

Adicionalmente, en nuestro departamento se hace el control de la calidad de las proteínas recombinantes y los péptidos sintéticos producidos en el CIGB y en otras instituciones científicas cubanas, mediante las técnicas de espectrometría de masas, electroforesis de proteínas, cromatografía líquida y de gases, y análisis de aminoácidos. Estas técnicas también han posibilitado estudios de estabilidad y una caracterización más completa de algunos productos.

CROMATOGRAFÍA DE GASES

Líder del proyectoMSc. Yanet Tá[email protected]éfono:

La cromatografía de gases es una técnica analítica para la detección y cuantificación de sustancias volátiles, de volatilidad media o que puedan convertirse en derivados volátiles. En el campo biotecnológico puede utilizarse en



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la verificación de la pureza de solventes volátiles utilizados en la producción, en la cuantificación de preservos y sus productos de degradación en formulaciones líquidas, en la cuantificación de solventes utilizados en la obtención y purificación de péptidos y proteínas recombinantes, por ejemplo por RP-HPLC a niveles de ppm y otras aplicaciones. También puede emplearse para el análisis de aminoácidos, técnica empleada para la cuantificación absoluta de proteínas.

CARACTERIZACIÓN DE GLICANOS N- Y O-ENLAZADOS A GLICOPROTEÍNAS

Líder del LaboratorioLic. Gleysin Cabrera [email protected]éfono: (53) 7250-4366

La glicobiología es el área de la biología que se encarga del estudio de los carbohidratos y la influencia de estos en las funciones de las células. Involucra estudios de bioquímica, biología celular y molecular, histología e inmunología, entre otros. Estas moléculas poseen gran diversidad estructural y están en todas las células. Durante décadas se les vio como moléculas proveedoras de energía (glucosa y glucógeno) y como elementos estructurales; sin embargo, se conoce que sus estructuras contienen información que modula varios procesos celulares. Los carbohidratos se pueden usar como moléculas de información directa, que transmiten mensajes entre las células o dentro de ellas. El intercambio de moléculas de carbohidratos puede afectar las transformaciones estructurales o propiedades de unión celular e influir en el funcionamiento del sistema inmune, en la capacidad operativa de varios agentes infecciosos y en la progresión del cáncer (Gabius, 1997).

Variaciones de la N-glicosilación de proteínas séricas de pacientes con cáncer de próstata

Las selectinas en cáncer provocan interacciones lectina-carbohidratos durante el reconocimiento biológico. También hay indicios de que pueden actuar en la diseminación de células cancerígenas, desde un tumor inicial a otros sitios del organismo, y que el bloqueo de los sitios de unión puede prevenir la formación de metástasis. Además, se considera que las galectinas (lectinas solubles con afinidad para galactósidos) actúan como moduladores de interacciones células-substrato y que son esenciales para la diferenciación normal y el crecimiento de los animales pluricelulares, inducen la proliferación celular, el paro celular o la apoptosis.

También se ha identificado su participación en la morfogénesis de órganos, la metástasis de células tumorales, el tráfico de leucocitos, la respuesta inmune y la inflamación, así como en el reconocimiento de la matriz extracelular (Sharon y Lis, 2004).

Estos hallazgos en el campo de la glicobiología han abierto un camino de investigación en la búsqueda de glicomarcadores que permitan diagnosticar y evaluar la progresión de los pacientes que padecen enfermedades carcinogénicas como el cáncer de próstata. Esta enfermedad ocupa el segundo lugar en el tipo de neoplasia maligna más frecuente en hombres. Cada año se diagnostican más de 650 000 nuevos casos en el mundo. En Cuba, en el año 2012, el cáncer de próstata provocó 2703 muertes (Minsap. Anuario estadístico, 2012). La medición del antígeno prostático específico (PSA) es uno de los mejores marcadores bioquímicos (Stamey, et al., 1987). Sin embargo, las pruebas de PSA tienen una elevada tasa de falsos positivos, lo que puede significar la necesidad de repetir biopsias y cirugías innecesarias (Laguna y Alivizatos, 2000; Stamey, et al., 2002; Bonn, 2002).

La mayoría de estos estudios han analizado suero humano, que contiene una diversidad de glicoproteínas, por lo que requieren metodologías analíticas de alta sensibilidad, que permitan establecer las diferencias entre los patrones de glicosilación de individuos sanos y enfermos.

En 2014 se demostró la relación entre la disminución de las estructuras glicosídicas vinculadas con la progresión de esta enfermedad y el estado clínico de los 44 pacientes con cáncer de próstata incluidos en un estudio clínico fase II, para evaluar un candidato vacunal terapéutico. Ello fue resultado de la combinación de métodos analíticos que incluían la separación de los N-glicanos marcados con 2-aminobenzamina en columna de fase normal Amida-80, digestión con exoglicosidasas, análisis de monosacáridos y espectrometría de masas.

Variaciones de la N-glicosilación de proteínas séricas de pacientes con artritis reumatoide

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune sistémica de naturaleza crónica, inflamatoria, que afecta al 1 % de la población mundial (Pratt, et al., 2009). Tiene un índice mujer/hombre de 3:1 (Vandenbroucke, et al., 1984) y su manifestación clínica primaria es la inflamación de las articulaciones periféricas (Pratt, et al., 2009), lo que provoca su deformidad en más del 50 % de los pacientes y la pérdida



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de la capacidad funcional. El dolor en las articulaciones es la consecuencia que más afecta a los pacientes artríticos (Prada, et al., 2011); aunque también la astenia es un síntoma que afecta la calidad de vida de los pacientes con AR (Strand, et al., 1993).

Las variaciones de la N-glicosilación de las IgG provocan cambios importantes en su función biológica, debido a la influencia de los N-glicanos en la conformación de esta glicoproteína, específicamente en la región Fc, en la cual se ubica el sitio conservado de N-glicosilación (Krapp, et al., 2003).

El patrón de N-glicosilación de las IgG de pacientes artríticos se caracteriza por un predominio de estructuras oligosacarídicas diantenadas, agalactosilada, fucosiladas (G0F) enlazadas al sitio conservado de N-glicosilación en la Asn297, en comparación con los individuos sanos (Arnold, et al., 2006; Arnold, et al., 2007). El incremento de las estructuras G0F ocurren fundamentalmente a partir de la disminución de las estructuras oligosacarídicas diantenadas, monogalactosilada, fucosiladas (G1F) (Cremata, et al., 2003).

Los niveles de las moléculas de las IgG que contienen la estructura oligosacarídica G0F (IgG-G0F) se correlacionan con la severidad de la enfermedad (Carson, et al., 1987), y son consideradas como patogénicas en la AR (Dwek, et al., 1995). La ausencia de residuos terminales de galactosa (Gal) en estas estructuras provoca que los residuos de N-acetilglucosamina (GlcNAc) queden expuestos, lo cual aumenta la flexibilidad conformacional de los N-glicanos (Mizuochi, et al., 1982; Parekh, et al., 1985). Estos cambios en la estructura de las IgG favorecen su reconocimiento por moléculas como FR y las lectinas de unión a manosa (MBL, mannose binding lectin) del suero, los receptores de la región Fc (FcγRs) y C1q, que ejercen un efecto importante en la activación del sistema de complemento, lo que en la AR tributa al desarrollo de un proceso inflamatorio (Robbins, et al., 1986a; Malhotra, et al., 1995; Cuchacovich, et al., 1996; Raju, 2008).

La presencia en el Fc de N-glicanos con ácido siálico (NeuAc) terminal reduce diez veces la afinidad de la IgG por los FcγRs, lo cual no depende del enlace que tenga el NeuAc con la galactosa (Scallon, et al., 2007). Se ha detectado una reducción de los niveles de las IgG sialiladas durante la inflamación, incluyendo estados inflamatorios como la AR y glomerulonefritis de Wegener (GW) (Kaneko, et al., 2006; Espy, et al., 2011; Van de Geijn, et al., 2009). Además, se

conoce que la actividad antinflamatoria de las IgG requiere la presencia de NeuAc con enlace α(2,6) para que la supresión de la artritis inducida sea efectiva. El ácido siálico con enlace α(2,3) no ejerce esta actividad supresora (Anthony, et al., 2008).

En 2014 comenzaron los análisis de las variaciones de los patrones de N-glicanos de pacientes artríticos incluidos en un ensayo clínico fase I con el candidato vacunal CIGB-814. El seguimiento a los pacientes fue mediante el método tradicional de perfil cromatográfico de los N-glicanos totales de las IgG séricas y con una nueva herramienta desarrollada por el grupo, basada en la determinación de monosacáridos de las estructuras oligosacarídicas enlazadas a las IgG.

Servicios a otras áreas e instituciones

• Procedimiento analítico para la caracterización de la N-glicosilación de la E2 de HepC expresada en P. pastoris (Investigaciones Biomédicas). • Caracterización e informe del contenido de carbohidratos de ENERPLANT para su registro en Cuba (Investigaciones Agropecuarias). • Estudio del perfil de N-glicosilación de eritropoyetina humana recombinante (rhEPO) expresada en células epiteliales de la glándula mamaria de ratón y chiva (Investigaciones Agropecuarias).• Caracterización de la N-glicosilación de la glicoproteína E2 expresada en células de riñón de cerdo (PK-15) y en leche de cabra (Investigaciones Agropecuarias).• Caracterización de la N-glicosilación del anticuerpo monoclonal antihepatitis B (CB.Hep1) expresado en hojas de tabaco (Investigaciones Agropecuarias).• Estudios de consistencia de lotes del anticuerpo monoclonal hR3. Se estudió la variación del patrón de glicosilación durante cambios en el volumen de fermentación y del tiempo de cosecha hasta 150 días de cultivo (Centro de Inmunología Molecular). • Estudios del patrón de N-glicosilación de anticuerpos monoclonales “Biosimilares” (Centro de Inmunología Molecular). • Caracterización de la N-glicosilación del anticuerpo monoclonal antihepatitis B (T525) expresado en hojas de tabaco (Investigaciones Agropecuarias).• Análisis de la presencia de glicoproteínas en muestras de filtrado libre de células, obtenido a partir de tejidos de granulación de úlceras de pie diabético de pacientes isquémicos y neuropáticos y muestras de controles de individuos no diabéticos (Investigaciones Biomédicas).



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• Caracterización de la N-glicosilación asociados a las proteínas hemaglutinina de la influenza aviar (HA) expresada en semillas de tabaco (Investigaciones Agropecuarias).• Uso de glicomarcadores para evaluar la progresión de pacientes con cáncer de próstata en el marco del ensayo clínico fase I con Heberprovac® (Investigaciones Biomédicas).• Caracterización de N-glicanos asociados a la enzima 1FSST recombinante expresada en P. pastoris (Investigaciones Agropecuarias).• Caracterización de la N-glicosilación de cuatro lotes del candidato vacunal de la peste porcina clásica (PPC) (Investigaciones Agropecuarias).

PESQUISA DE COMPUESTOS QUÍMICOS EN BIBLIOTECAS VIRTUALES PARA EL DESARROLLO DE NUEVOS FÁRMACOS

Líder del proyectoMSc. Osmany [email protected]éfono: (53) 7250-4150

El uso de procedimientos computacionales para el diseño de fármacos (estudios in silico) se ha impuesto como una necesidad para acelerar y hacer más eficiente el desarrollo de nuevos medicamentos. El éxito de este enfoque depende de la vinculación estrecha entre los grupos de biología que conocen con profundidad el blanco y la función

sobre la que se pretende influir, el grupo de bioinformática, que ejecuta el diseño racional de drogas, y los grupos de síntesis química.

La pesquisa en bibliotecas virtuales es un procedimiento computacional que evalúa la posibilidad de interacción específica de una molécula orgánica relativamente pequeña con el sitio de la proteína deseado. Se comparan las posibilidades de interacción de todos los compuestos que aparecen en bases de datos de compuestos químicos, que en general pueden ser de algunos millones de compuestos. Una alternativa o una posible combinación son los métodos de diseño de novo, que no parten de una base de datos de compuestos químicos conocidos, sino que tratan de explorar el extremadamente amplio espacio químico (que se considera de 1060 a 10 100 compuestos) que pudiera constituir un fármaco.

Se están efectuando estudios para la obtención de productos contra el virus dengue. Existen dos estrategias: una dirigida a la inhibición de la fusión del virus con la membrana celular, y otra dirigida a bloquear la interacción del virus con su receptor celular. De estos estudios in silico se han obtenido moléculas capaces de inhibir el proceso de infección por virus dengue. Estos compuestos presentan actividad en el orden de las decenas de micromolares y están en la categoría de lead-like, lo que los hace candidatos atractivos para continuar el proceso de optimización (Figura 28).

Figura 28

Efecto de los SMs (50μM) en la infección por DENV2 en células Vero.

100

90

80

70

60

50

40

30

20

10

0

Inhi

bici

ón d

e In

fecc

ión

(%)

1.6 1.7 1.8

Log10C (μM)



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Figura 29

La aplicación de la bioinformática no se limita al área de las Investigaciones Biomédicas, también trabajamos de conjunto con la subdirección de Investigaciones Agropecuarias en el diseño de moléculas capaces de estimular el sistema inmune innato de las plantas. Este trabajo ha permitido la identificación de moléculas con actividad potenciadora del sistema de defensa de las plantas, lo que las convierte en candidatos para combatir plagas como el Huanglongbing, que es una enfermedad que afecta a los cítricos y se ha descrito como la más devastadora del género. Afecta las principales regiones citricultoras (Figura 29).

Ensayo de actividad biológica de la molécula 68660 frente a Phytaphthora parasítica.

68660 Control

También se trabaja en la aplicación de herramientas de modelación de estructura 3D y simulaciones de dinámica molecular para ingeniería de proteínas in silico. En particular, el diseño in silico de variantes de enzimas de la familia glicosil-hidrolasas potencialmente termoestables, mediante la inserción de sitios artificiales de glicosilación, la reducción del tamaño de los lazos y la sustitución de residuos del sitio activo. PÉPTIDOS SINTÉTICOS

Líder del LaboratorioDra. Hilda Elisa [email protected]éfono: (53) 7250-4530

El trabajo del grupo de Péptidos Sintéticos está orientado al diseño y obtención de péptidos sintéticos para varias aplicaciones. También se dedica al diseño y obtención de bibliotecas combinatorias de péptidos para la búsqueda de aquellos con propiedades terapéuticas, y al estudio de la estabilidad metabólica de algunas de estas moléculas en fluidos biológicos, como base para la selección u optimización de candidatos terapéuticos de naturaleza peptídica.

La capacidad actual del grupo incluye la síntesis desde pocos miligramos hasta decenas de gramos de cualquier secuencia aminoacídica. Además se introducen varias



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modificaciones químicas a los péptidos, como la ciclación por puentes disulfuro y lactama, las modificaciones de los grupos aminos con biotina, fluoresceína, rodamina y ácidos grasos, la conjugación a macromoléculas (proteínas y polímeros) y la obtención de estructuras complejas como los péptidos multiantigénicos (MAP).

El desarrollo de posibles candidatos terapéuticos basados en péptidos sintéticos, así como el estudio y diseño de procesos para el escalado de la producción de estas moléculas, también forma parte del objetivo de este grupo.

SÍNTESIS DE OLIGONUCLEÓTIDOS

Líder del LaboratorioMSc. José Angel [email protected]éfono: (53) 7250-4399

El grupo de Síntesis de Oligonucleótidos, único de su tipo en Cuba, está orientado a la síntesis y purificación de oligonucleótidos y oligonucleótidos modificados con fluoróforos y otros tipos de moléculas. Satisface las demandas que estas moléculas tienen en varias técnicas de biología molecular del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) y otros centros de investigación cubanos. Además brinda servicios ante contingencias médicas y epidemiológicas que lo requieran.

MICROSCOPIA ELECTRÓNICA

Líder del LaboratorioDra. Viviana Falcó[email protected]éfono: (53) 7250-4145

La microscopia electrónica de transmisión es una herramienta analítica para la detección de partículas virales o de otra afección in vitro e in vivo, tanto en estudios preclínicos como en ensayos clínicos. Las nanopartículas obtenidas por medio de la tecnología de ADN recombinante, se han usado extensamente para el desarrollo de candidatos vacunales contra enfermedades virales. Estas mimetizan estructuras supramoleculares de los virus e inducen una respuesta inmunitaria antiviral, basada en anticuerpos neutralizantes y una respuesta celular protectora. El paradigma de estas nanopartículas recombinantes es la vacuna contra la hepatitis B, cuyo uso ha sido amplio en seres humanos. El antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (AgsHB) se ensambla en una proteolipopartícula nanométrica, que genera una respuesta inmune protectora de larga duración. Entre las nanopartículas desarrolladas por el CIGB y actualmente en estudios clínicos y preclínicos se incluyen otros candidatos vacunales contra la hepatitis C, el dengue, la hepatitis A y la enfermedad hemorrágica del conejo (Figura 30). Las nanopartículas pueden estar formadas solo por proteínas o por complejos proteína-lípidos y proteínas-ADN. Los sistemas de expresión empleados son la bacteria Escherichia coli, la levadura Pichia pastoris y las hojas de plantas de tabaco. La mayoría de las nanopartículas constituyen cápsidas virales o mimetizan la envoltura lipoproteica de virus envueltos. Mediante esta valiosa herramienta se efectúa el control de la calidad de los diferentes procesos productivos. Esta técnica se utiliza, además, en la detección de



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enfermedades virales en la industria agropecuaria, la pesquera y en la veterinaria. Sigue siendo esencial en la determinación del mecanismo de acción o actividad biológica de las proteínas o péptidos en su diana.

Figura 30

Nanopartículas subvirales obtenidas por medio de la tecnología de ADN recombinante. A) Se detecta la presencia de nanopartículas del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg) de 20 a 30 nm de diámetro. B) Se detecta la presencia de nanopartículas del antígeno de la cápsida (HBcAg) de 20 a 30 nm. C) Se detecta la presencia de nanopartículas del HBsAg + HBcAg de 20 a 30 nm de diámetro. D) Se detecta la presencia de nanopartículas de 50 nm del antígeno de de la cápsida del virus de la hepatitis C (HCcAg). E) Se detecta la presencia de las nanopartículas del VP60 de calicivirus de 35 a 40nm. F) Se detecta la presencia del DIIIC VHAADN con 27 nm de diámetro. G) Se detecta la presencia de las nanopartículas de 50 nm del dengue-2/ADN. H) Se detecta la presencia de las nanopartículas de 50 nm del DomIII-cápsida del dengue/ADN. Barra = 100 nm.

GRUPO DE IMÁGENES

Líder del LaboratorioDr. Carlos Cabal [email protected]éfono: (537) 7250-4620

El Grupo de Imágenes se dedica a la aplicación de los diversos métodos de imágenes en los estudios moleculares, preclínicos, clínicos y de farmacovigilancia. En particular, desarrolla procedimientos de imágenes y espectros de resonancia magnética (RM) para la evaluación cuantitativa de la biodistribución, de la efectividad de fármacos y sus nuevas formulaciones. Utiliza las imágenes clásicas de RM sopesadas en T1, T2 y densidad, así como imágenes sopesadas de difusión, perfusión y la espectroscopía de RM (ERM) in vivo.

La respuesta clínica al tratamiento con Heberprot-P® en pacientes con úlceras del pie diabético (UPD), se estudió cuantitativamente in vivo, a través de biomarcadores de RM. Se investigó la cinética de curación de las UPD en pacientes bajo tratamiento del Heberprot-P®, y se determinó la variación de las áreas y volúmenes de las lesiones, los cambios del volumen del edema, la evolución cuantitativa de la textura de los tejidos y la actividad metabólica en la zona de la lesión, antes y durante el tratamiento hasta el cierre de la lesión. Estos parámetros constituyen biomarcadores que caracterizan la evolución de las lesiones en las UPD y la efectividad de su tratamiento, en particular con Heberprot-P®.



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Entre los resultados relevantes del grupo están el desarrollo y validación de un método de determinación de la farmacocinética y la biodistribución in vivo de biomoléculas marcadas magnéticamente a partir de imágenes de RM en modelos animales. Se trata de un nuevo método de determinación cuantitativa de la farmacocinética y la biodistribución in vivo con métodos de imágenes de resonancia magnética de biomoléculas marcadas magnéticamente. El método es válido para nanopartículas magnéticas funcionalizadas con péptidos, proteínas, anticuerpos monoclonales u otras biomoléculas. Se determinaron 1) las concentraciones por compartimentos, 2) los tiempos de residencia, y 3) las velocidades de absorción y excreción. El método permite el seguimiento de un modelo animal sin sacrificarlo y se compara su evolución, lo cual hace que los estudios sean más rápidos y económicos. Ha sido presentado en eventos y publicado en revistas de alta visibilidad.

Además, el establecimiento y la validación de nuevos biomarcadores y protocolos de imágenes de RM para evaluar la respuesta de tumores sólidos ante la acción terapéutica de fármacos. Se estableció un protocolo para el estudio in vivo, cuantitativo y evolutivo de tumores sólidos a partir de imágenes de RM en modelos animales y en seres humanos, que permite evaluar la evolución de los volúmenes del tumor, los cambios de su morfología, las texturas internas de las microzonas del tumor, los cambios de la densidad celular y la actividad metabólica bajo la acción medicamentosa. En particular se estudiaron 35 pacientes pediátricos durante 3 años con tratamiento de nimotuzumab y con el tratamiento suspendido. También se estudiaron los parámetros y magnitudes en ratones. Se ha presentado en eventos y publicado en revistas de alta visibilidad.

LABORATORIO DE ANÁLISIS DE INTERACCIONES EN BIACORE

Responsable del LaboratorioLic. Vivian [email protected]éfono: (53) 7250-4364

El Biacore es un sensor óptico que emplea la resonancia de plasmón de superficie (SPR) y permite monitorear la interacción entre dos macromoléculas en tiempo real. Algunas aplicaciones potenciales incluyen las mediciones de afinidad de interacción y cinética de unión, la determinación de la concentración de analitos y el mapeo de epitopos.

El principio de detección basado en la SPR es una técnica óptica que mide las variaciones en el índice de refracción en la superficie del sensor, causadas por las diferencias en la concentración del analito. Por tanto, la técnica no requiere el marcaje de las moléculas por analizar y la respuesta es esencialmente independiente de la naturaleza de la biomolécula.

Esta tecnología se puede emplear en el estudio de las interacciones de proteínas, ácidos nucleicos, micelas lipídicas, virus y células completas. Las áreas de aplicación van desde la ciencia básica en bioquímica y biología molecular, el diseño de drogas, la producción de anticuerpos monoclonales y la investigación de enfermedades infecciosas.

PREMIOS Y DISTINCIONES

PREMIOS ANUALES DE LA ACADEMIA DE CIENCIAS DE CUBA CORRESPONDIENTES AL AÑO 2013

Ciencias biomédicas

• Isis Belkis Yera Alos, Pedro A. López-Saura, et al. Confirmación de la efectividad y seguridad del factor de crecimiento humano recombinante en el tratamiento de la úlcera de pie diabético durante la poscomercialización en Cuba.

• Diana García del Barco, Nelvys Subirós, et al. Evidencias preclínicas del efecto neuroprotector de la coadministración del Factor de crecimiento epidérmico y el péptido 6 secretagogo de hormona de crecimiento en infarto cerebral.

• Maribel Guerra Vallespi, Julio Raúl Fernández Massó, et al. Diseño racional de un péptido antitumoral mediante el uso de una librería química generada de la región 32-51 de la proteína factor anti-LPS de Limulus.

• Liz Álvarez-Lajonchere, Yalena Amador-Cañizares, Santiago Dueñas-Carrera, Eddy E Gonzalez-Horta, et al. Relación de la respuesta de anticuerpos y la especificidad de la respuesta celular frente al virus de la hepatitis C con el daño hepático y el resultado del tratamiento antiviral.

• Ana Aguilera Barreto, Eduardo Martínez Díaz, Yilian Bermúdez Álvarez, Karelia Cosme Díaz, Francisco Hernández Bernal, Luciano Hernández Marrero, Carmen Valenzuela Silva, Georgina Castellanos Sierra, Pedro López



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Saura, Luis Herrera Martínez, et al. Proctokinasa®, nuevo medicamento para el tratamiento de las hemorroides agudas.• Humberto Lamdán, Jorge V. Gavilondo, et al. Obtención, maduración in vitro de la afinidad y mapeo epitópico funcional de un fragmento recombinante de anticuerpo humano tipo scFv que bloquea el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF).

Ciencias agrarias

• Jannel Acosta, Mario P. Estrada, Yamila Carpio, et al. Péptidos antimicrobianos aislados de tilapia (Oreochromis niloticus) como agentes terapéuticos y adyuvantes moleculares para peces y mamíferos.

• Ingrid Hernández Estévez, Roxana Portieles Álvarez, Yussuan Silva, Merardo Pujol Ferrer, Osvaldo Oliva Barbón, Orlando Borrás Hidalgo, et al. Desarrollo de una alta protección frente a hongos y oomycetes en plantas mediante genes involucrados en la inhibición de patrones moleculares asociados a patógenos.

• Marieta Marín, et al. Determinación de la capacidad promotora del crecimiento vegetal de Tsukamurella paurometabola C-924 y caracterización de los principales mecanismos involucrados en el proceso.

Ciencias naturales y exactas

Carmen Menéndez, Duniesky Martínez, Lázaro Hernández, Enrique Pérez Cruz, et al. Desarrollo de biocatalizadores termoestables basados en la invertasa de thermotoga marítima para la hidrólisis total del azúcar de caña.

PREMIOS DE LA ACADEMIA DE CIENCIAS DE CUBA EN COAUTORÍA CON OTROS CENTROS

Daniel Limonta, Viviana Falcón, Gerardo Guillén. Implicaciones de la apoptosis en el dengue grave y no grave: nuevas evidencias en sangre y tejidos. IPK, 2013.

PREMIOS Y RECONOCIMIENTOS NACIONALES

• Dr. Yanelys Morera. Premio a la mejor Tesis de doctorado. • Dr. Lázaro Gil. Premio Anual 2013 en la categoría de Jóvenes Investigadores, Academia de Ciencias de Cuba.• Dr. Diana García del Barco. Designación como representante de la Sociedad de Neurociencias de

Cuba y miembro asesor de la Federación de Sociedades Latinoamericanas de Neurociencias (FALAN).• Dr. Celia Fernández Ortega. Presidenta de la Sección de Inmunoterapia de la Sociedad Cubana de Inmunología.• Dr. Yanelys Morera Díaz. Tesorera de la Sección de Inmunoterapia de la Sociedad Cubana de Inmunología.• MSc. Darién García Díaz. Secretario de la Sección de Vacunas y Adyuvantes de la Sociedad Cubana de Inmunología.

PREMIOS Y RECONOCIMIENTOS INTERNACIONALES

• Dra. Giselle Pentón Rol. Premio metálico de la Sociedad Internacional de Inmunología por la publicación: Boraschi D, Pentón-Rol G. Perspectives in immunopharmacology: The future of immunosuppression. Immunology Letters 2014.• Dra. Gisselle Penton: Miembro del Comité Editorial de la revista Recent Patents on Inflammation & Allergy Drug Discovery.• Laura Lazo: revisora de artículo para la Indian Journal of Medical Research, India.• Dr. Carlos Cabal. Conferencia en la Universidad Nacional de La Plata, Facultad de Ciencias Exactas, Argentina, sobre la biología en relación con la física y la química.• Dr. Gabriel Padrón. Miembro de la Junta Directiva de la Human Proteome Organization (HUPO) para el periodo 2014-2016.

EVENTOS Y CURSOS GERENCIADOS O IMPARTIDOS POR EL ÁREA

I Symposium on Viral Hepatitis, Varadero 2014

• Cuban Biotechnology and the Center for Genetic Engineering and Biotechnology. Dr. Gerardo Guillén Nieto.• Preventive vaccine against hepatitis C virus: still an impossible task? Dr. Santiago Dueñas-Carrera.• Neutralizing antibodies and broad, functional T cell immune response following immunization with hepatitis C virus proteins-based vaccine formulation. Dr. Gillian Martínez Donato.• Targeting HCV immunological challenge by the chimeric vaccine approach. Dr. Yalena Amador Cañizares.• Hepatitis C virus prevalence in hemodialysis units in Havana and Artemisa provinces and anti-HCV humoral immune response. Dr. Liz Alvarez-Lajonchere.• On route toward Nasvac®: how the Cuban HBV therapeutic vaccine candidate was devised. Dr. Eduardo Pentón.



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• In vitro stimulation with HBV therapeutic vaccine candidate Nasvac® activates B and T cells from chronic hepatitis B patients and healthy donors. MSc. Yadira Lobaina Matos.• Genotyping of 100 Cuban patients of Hepatitis B virus. Dr. Jorge Aguiar Santiago. • The CIGB-530, new drug candidate to prevent liver fibrosis. Dra. Ariana García Ojalvo.

OMICS 2014, Varadero

• Cuban Biotechnology and the Center for Genetic Engineering and Biotechnology. Dr. Gerardo Guillen Nieto.• Rs12979860 and rs8099917 polymorphisms of IL28b: simultaneous genotyping in Cuban health donors and HCV genotype 1 patients treated with CIGB230 in combination with INF-α plus ribavirin. MSc. Daniel Palenzuela.• COMMD1 is a target for a cytotoxic peptide CIGB-552. Dr. Julio Raúl Fernández.• BisoGenet 3.0: Building Biological networks in the Big-Data era. Dr. Ricardo Bringas.• Bioinformatics analysis of a Sweet potato RNASeq experiment: from sequences to pathways. Dr. María Elena Ochagavía.• Charge state selective separation of tryptic peptides for enhanced proteomic studies. Dr. Vladimir Besada.• Design of beta-hairpin peptides as entry inhibitors of Dengue virus. MSc.Glay Chinea.• Structural characterization of sulfated N-glycans in a serine protease from the neotropical moth Hylesia metabus (Cramer [1775]) (Lepidoptera, Saturniidae). Lic. Gleysin Cabrera.

• CIGB-300: A novel peptide-based CK2 inhibitor for cancer therapy. Proteomic tools for mechanism elucidation. Dr. Yasser Perera.• Integrating Bioinformatics Tools to Handle Glycosylation. MSc. Yuliet Mazola.• Protium a Platform for Analysis of Mass Spectrometric Data. Lic. Carlos Manuel Aleaga.• SDS-free PAGE: an alternative to OGE for peptide fractionation. Dr. Yassel Ramos.• Interaction of human Inter-alpha Inibitor with dengue virus. Dr. Alexis Yero.• Antitumor peptide CIGB-300 binds to B23/NPM and impairs in vivo Casein Kinase-2 (CK2)-mediated phosphorylation in myeloid leukemia cells. Dr. Yassel Ramos.• Proteomic profile modulated by the cardioprotective peptide CIGB-500 in cardiomyoblast H9c2 cells. Dra. Arielis Rodríguez.• Implementing an IgG purification methodology for analysis of the humoral response memory against domain III of dengue virus. Lic. Dianne Pupo.

VISITANTES EXTRANJEROS

• Dr. Alexei F. Licea Navarro, Jefe de la División de Biología Experimental y Aplicada, del Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada (CICESE), Ensenada, Baja California, México.• PhD. Prof. Djuro Josic, Departmento de Biotecnología, Universidad de Rijeka, Croatia.• Prof. Glenn Ellis- BA, CHE, Yeadon, Pennsylvania, EE.UU.• Dr. Peter White, Novabiochem’s R&D Manager, Merck.

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DIRECCIÓN DE DESARROLLO TECNOLÓGICO

DIRECCIÓN DE DESARROLLO TECNOLÓGICO 53

INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Dr. Rolando Páez [email protected]éfono: (53) 7250-4439

La Dirección de Desarrollo Tecnológico (DDT) del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, tiene la misión de convertir los resultados

científicos en productos terminados, desde el establecimiento de las tecnologías a escala de laboratorio con los parámetros de calidad requeridos, hasta su escalado y producción de lotes pilotos. Trabaja además en la mejora de los productos comerciales. Todos los procesos se rigen por una metodología de dirección integrada de proyectos, que garantiza una correcta planificación de los objetivos y una revisión sistemática de su avance.

En esta Dirección se combinan las normas de buenas prácticas de laboratorio y buenas prácticas de producción, sustentadas en un sistema de gestión de calidad, certificado por la NC-ISO 9001:2008, que garantiza la eficacia y seguridad de los productos y tecnologías que se desarrollan.

La DDT es la organización del CIGB dedicada al diseño y desarrollo de productos biofarmacéuticos, que aspira a alcanzar un alto nivel científico-técnico de elevado estándar internacional en diversos aspectos de la biotecnología moderna. Para ello cuenta con un personal altamente calificado, caracterizado por su apego a los valores éticos y morales de la sociedad cubana.

La DDT del CIGB está constituida por cuatro departamentos que trabajan de manera coordinada: Desarrollo de Fermentación, Desarrollo de Purificación, Desarrollo de Formulación y Envase, y Desarrollo Analítico y Documentación.

DIRECCIÓNDE DESARROLLO TECNOLÓGICO





Jefe del Departamento de Desarrollo de FermentacionesDr. Jorge Valdés Herná[email protected]éfono: (53) 7250-4448

Jefe del Departamento de Desarrollo de PurificaciónDr. Gabriel Márquez [email protected]éfono: (53) 7250-4438

Jefe del Departamento de Desarrollo de Formulaciones y EnvaseMSc. Fidel Raúl Castro [email protected]éfono: (53) 250-4433

Jefa del Departamento de Desarrollo, Analítica – DocumentaciónLic. Ramira Dinorah Torres [email protected]éfono: (53) 7250-4446

RESULTADOS RELEVANTES

Logros institucionales

• Transferencia de la tecnología de producción del antígeno de la nucleocápsida del virus de la hepatitis B a las instalaciones productivas.• Suministro estable de ingrediente farmacéutico activo (IFA) para estudios planificados en los proyectos HCV, SIDA CR3, CIGB-247, CIGB-370, entre otros.• Resultados positivos en el proyecto de transferencia de GCSF-PEG a Chang Heber. Realización del escalado piloto del proceso de obtención del IFA.• Contratación y recepción del proyecto de ingeniería conceptual de la Planta de Bacteria-Nuevas Formulaciones.• Obtención del factor de crecimiento epidérmico humano recombinante intacto (53 aa.) a escala analítica, con fines de ser empleado en estudios de caracterización y no clínicos.• Obtención de los certificados de buenas prácticas de fabricación en Centro Nacional de Biopreparados (Biocen) y Saokim Pharma para la producción del IFA de estreptokinasa utilizado en la producción del supositorio y el producto final. • Demostración de 36 meses de estabilidad real de la vacuna pentavalente ecuatoriana de DPT-HB-Hib.

• Introducción de las buenas prácticas de laboratorio en la fabricación de bancos celulares del proyecto CIGB-370, para su empleo en ensayos de nuevas moléculas contra el cáncer.• Intensa labor de desarrollo de metodologías analíticas y servicio para el control de diferentes procesos y productos con el objetivo de dar respuesta a las exigencias reguladoras.• Intensa actividad docente en la Dirección Desarrollo Tecnológico.• Despliegue del sistema de gestión de informaciones administrativas en las direcciones del CIGB.

Logros científico-técnicos

• Determinación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real del número de copias plasmídico en los bancos de células de la cepa productora del factor de crecimiento epidérmico (FCE).• Obtención de interferón gamma humano recombinante activo, con alto nivel de expresión, a partir de nueva construcción genética.• Simulación de procesos para la obtención de plásmidos para vacunas de ADN.• Desarrollo tecnológico del proceso de obtención del rhG-CSF monopegilado a escala analítica.• Estabilización del FCE en una formulación parenteral para el tratamiento de las úlceras del pie de diabético.• Desarrollo de una formulación en forma de Pellet que contiene FCE humano recombinante para el tratamiento de la colitis ulcerosa.• Diseño y obtención a escala analítica de una variante de eritropoyetina (EPO) con características superiores a las que actualmente están en el mercado.• Validación de un conjunto de técnicas analíticas para el control de la calidad del producto HeberFeron®.


Premio de la Academia de Ciencias de Cuba 2013: Proctokinasa®, nuevo medicamento para el tratamiento de las hemorroides agudas.

Trabajos presentados en el Congreso Internacional “Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas”, Varadero, Cuba, 10 al 12 diciembre, 2014

• Santana H, Ventosa N, Martínez E, Veciana J, Cabrera I, Berlanga JA. (2014) New nano-drug for complex wound therapy. Controlling Diabetes and its Most Severe Complications. Conferencia.




• Elian Cruz, Liurdis Caballero, Raymersy Aldana, Jorge Berlanga, Rolando Páez, Vivian Sáez, Fidel R. Castro, Eduardo Martínez. (2014) Sustained release of biologically active Epidermal Growth Factor (EGF) from Injectable polymeric microspheres promotes wound healing. Conferencia.


1. Curso: Métodos Cromatográficos, como parte de la Maestría de Ingeniería de Procesos Biotecnológicos.

2. Curso: Métodos prácticos de procesos de purificación, como parte de la Maestría de Ingeniería de Procesos Biotecnológicos.

3. Entrenamiento en la tecnología de liofilización, métodos y técnicas analíticas.

4. Participación en la conferencia Ciencia básica de tecnología e innovación de empresas, organizado por la Academia de Ciencias Brasileñas.

5. Participación en el 6to. Simposio de Monolitícos, organizado por BIASeparations, Portoroz, Eslovenia. Conferencia y dos carteles.

6. Participación en el II Encuentro de Ciencias Farmacéuticas y Alimentarias 2014. Cinco carteles.

7. Participación en la 17 Convención Científica de Ingeniería y Arquitectura. Dos conferencias.

TESIS DEFENDIDAS

Tesis de maestría

• Dayana Soler. Ajuste de los parámetros de operación de las etapas de ruptura celular y cromatografía de IMAC del proceso de purificación de la proteína CIGB-550/E7. Tutor: Dra. Miladys Limonta Fernández. Julio 2014.

• Liurdis Caballero. Obtención del factor estimulador de colonias de granulocitos recombinante monopegilado a escala de banco. Tutores: Dr. Rolando Páez y Dr. Carlos Peniche. Noviembre 2014.

Tesis de grado

• Carlos Julio Peniche Silva. Título: Desarrollo de un nuevo sistema de expresión para la obtención del IFN-γ humano recombinante. Tutores: MSc. Yoymí Claro Abreu y Lic. Laura Rodríguez Castro. Junio 2014.

• Aniurka Aulán Panfet. Título: Establecimiento de la etapa de ruptura celular del proceso de obtención de la proteína CIGB-550/E7. Tutor: Ing. Dayana Soler y Dra. Miladys Limonta. Julio 2014.

PUBLICACIONES

Se publicaron 2 artículos científicos y 9 informes técnicos.

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DIRECCIÓN DE PRODUCCIÓN


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Ing. Jorge Luis Vegas Elí[email protected]

Teléfono: (53) 7271-6022, Ext. 2000

La Dirección de Producción del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, es un gran complejo de unidades productivas, que se extiende a

más de 12 000 m2. Posee capacidades industriales para la fabricación de productos biotecnológicos para la salud y la agropecuaria, basados en la expresión en cultivo de proteínas recombinantes y la síntesis química.

Suministra los productos y servicios demandados a la empresa comercializadora Heber Biotec S. A. para Cuba y otros países.

La Dirección de Producción se orienta a fortalecer el catálogo de productos del CIGB y potenciar la innovación, sobre la base de los requisitos establecidos como buenas prácticas de producción por las agencias reguladoras de la industria farmacéutica, con el propósito de introducirlos en el mercado mundial.

La Dirección de Producción se estructura en las plantas de producción de ingredientes farmacéuticos activos; una planta de formulación, llenado y liofilización; una planta de operaciones de acondicionamiento y empaque de productos terminados, la Subdirección de Operaciones y los Departamentos de Transferencia Tecnológica, Gestión Regulatoria, Servicios, Recursos Humanos y Análisis y Organización Empresarial.

Los componentes del sistema productivo (instalaciones, sistemas críticos, equipos, procesos productivos, recursos humanos y operaciones tecnológicas), están certificados por el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed), la autoridad reguladora de Cuba. También han sido evaluados por agencias reguladoras extranjeras de primer nivel como ANVISA (Brasil), MEDSAFE (Nueva Zelanda), Medicines Control Council (MCC, Sudáfrica), Nobelpharma Co., Ltd. (Japón), y las autoridades reguladoras de Ucrania y Rusia. Las plantas de fabricación de vacunas están avaladas por la Organización Mundial de la Salud (OMS).

DIRECCIÓNDE PRODUCCIÓN



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Jefe del Departamento de Anticuerpo MonoclonalesDr. Rodolfo Valdés [email protected]éfonos: (53) 7250-4469; 7271-6022, Ext. 7101

Jefe del Departamento con funciones de Subdirectorde LiofilizadosMSc. Ing. Oscar Cruz Gutié[email protected]éfonos: (53) 7250-4464; 7271-6022, Ext. 6200

Jefa del Departamento de Factor Estimulador de Colonias de Granulocitos (G-CSF)MSc. Natacha Pérez Rodrí[email protected]éfonos: (53-7) 271 6022, Ext. 7200(53-7) 250 4493

Jefe de Departamento de Factor de TransferenciaMSc. Yanieyis Álvarez [email protected]éfonos: (53-7) 271 6022, Ext. 7215(53-7) 250 4533

Jefe de Departamento de Vacuna Sintética Conjugada HIBMSc. Ing. Belinda Díaz [email protected]éfono: (53) 7250-4270, 7271-6022, Ext. 2113

Jefe del Departamento de Ingeniería de ProducciónMSc. Ing. Iriac Bisquet Ramí[email protected]éfonos: (53) 7250-4250; 7271-6022, Ext. 2040

Jefe del Departamento de Control de ProcesosMSc. Caridad Anais Gasmuri Gonzá[email protected]éfono: (53) 7250-4427; 7271-6022, Ext. 5159

Jefe del Departamento de Formulación y EnvasesIng. Carmen Rosa Chuay [email protected]éfonos: (53) 7250-4231; 7271-6022, Ext. 2007

Jefe del Departamento de Recursos HumanosMSc. Ing. Mayra Ponce Guerrero,[email protected]éfonos: (53) 7250-4272; 7271-6022, Ext. 2118

Como parte del Sistema de Gestión de la Calidad del CIGB, fueron certificadas las actividades de transferencia tecnológica, producción de principios activos y productos farmacéuticos y biotecnológicos para uso en seres humanos, conforme con la UNE-EN ISO 9001-2008 por la Asociación Española de Normalización (AENOR) y la Oficina Nacional de Normalización de la República de Cuba (ONN).

La cartera de productos comprende las vacunas Heberbiovac HB® contra la hepatitis B, Quimi-Hib® contra Haemophilus influenzae tipo b y la vacuna combinada Heberpenta®-L. También incluye citoquinas como los interferones humanos alfa 2b: Heberon® alpha y Heberon® gamma, el factor estimulador de colonias de granulocitos: Hebervital® y el factor de crecimiento epidérmico parenteral: Heberprot-P®.


Subdirector de ProducciónIng. José Enrique Brito Leó[email protected]éfonos: (53) 7250-4228; 7271-6022, Ext. 2004

Jefe del Departamento de Gestión ReguladoraLic. Luciano Francisco Hernández [email protected]éfonos: (53) 7250-4230; (53) 7271-6022, Ext. 2006

Subdirector de OperacionesIng. Manuel Enrique Montané Enrí[email protected]éfonos: (53) 7250-4273; (53) 7271-6022, Ext. 2120

Jefe del Departamento de Planta 1Ing. Juan Miguel Rivera Martí[email protected]éfonos: (53) 7250-4276; 7271-6022, Ext. 2123

Jefe del Departamento de Planta 4MSc. Ing. Vivian Pujol Garcí[email protected]éfonos: (53) 7250-4268; 7271-6022, Ext. 2114

Jefe del Departamento de Transferencia de TecnologíaIng. Lilia Luisa Pérez Suá[email protected]éfonos: (53) 7250-4274; 7271-6022, Ext. 2121



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Jefe del Departamento de Servicios a las ProduccionesLic. Yutdelis Roben [email protected]éfonos: (53) 7250-4229; 7271-6022, Ext. 2005

Especialista Principal de Análisis y Organización EmpresarialIng. Susana Cubas Á[email protected]éfonos: (53) 7250-4232; 7271-6022, Ext. 2008



• Incremento significativo y efectiva respuesta analítica y microbiológica del Departamento de Control de Procesos.• Extensión de la fecha de vencimiento de los medios de cultivo preparados por el Departamento de Control de Procesos.• Culminación del proyecto de Transferencia de Tecnología del proceso de producción de vacuna Hib a la Empresa Mixta ChangHeber.• Resultados satisfactorios en la ejecución del proyecto de Transferencia de Tecnología y Suministro de IFN alfa 2b humano rec a BioM/Brasil.• Fortalecimiento y consolidación de los objetivos de trabajo 2014 entre la empresa Changchun Heber Biological Technology Co. Ltd., y el CIGB.• Eficiente desempeño de la Unidad de Servicios de Pesada en el suministro de las materias primas dispensadas a las Plantas 4, 5, 6, 7 en la Planta de Producción y a la Dirección de Desarrollo.• Donación de reactivos químicos, materias primas y componentes vencidos u ociosos, como parte de la actividad preventiva de minimización de residuales correspondiente al plan de manejo de desechos peligrosos del CIGB.• Culminación de estudios de riesgo natural y tecnológico a la unidad productiva Planta 1 e Incinerador.• Significativo incremento del aporte de Planta 10 al plan de facturación anual: incremento del envase de kit de Heberprot-P®.• Cambios en la estrategia de limpieza e higienización de los cuartos limpios en las instalaciones de producción del CIGB.• Sobrecumplimiento del plan de producción del IFA de la vacuna Quimi-Hib® y sus posibles combinaciones.• Sobrecumplimiento del plan de producción de los agentes pegilantes PEG2,48K-NHS y PEG2,40K-NHS.• Intenso trabajo de validación, que mantiene el estatus

de proceso validado para la obtención del IFA de la vacuna Quimi-Hib® y sus posibles combinaciones.• Culminación de la transferencia de tecnología de la producción del PEG2,48K-NHS desde el área de Desarrollo al área de Producción.• Aporte de más de 194 MCUP en el plan de facturación por concepto de entrega del producto Heberprot-P®.• Incremento de la actividad de validación e introducción de mejoras en la garantía de la cadena de frío para el aseguramiento de las exportaciones.• Aprobación por el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cedmed) de una presentación novedosa para la vacuna Heberpenta®-L en jeringas prellenadas, como resultado del proyecto conjunto CIGB-Laboratorios Clausen de Uruguay.• Avances en el tratamiento integral y seguro de los residuales líquidos químicos peligrosos (RLP) generados en CIGB, en la etapa de almacenamiento y disposición final.• Implementación de soluciones técnicas para el aumento de la fiabilidad de los sistemas auxiliares de la Planta de Producción.• Montaje de un subsistema de enfriamiento de 3000 L para los fermentadores de Planta 1.• Soluciones para mantener en alta el equipamiento de las producciones del CIGB.• Se logra una gestión exitosa del sistema de mantenimiento del sistema productivo del CIGB, con una labor destacada en la labor documental.• Aumento del estándar regulatorio del sistema de aire comprimido, por cumplimiento con Norma ISO 8573-1:2010.• Efectivo trabajo de los sistemas de agua farmacéutica de la Planta de Producción.• Sostenido incremento del volumen y efectividad del trabajo de calificación y validación ejecutado en el Departamento de Ingeniería de Producción.• Cableado, instalación, montaje y conexión al Biosonik de los equipos contadores de partículas online en Planta 4.• Alto nivel de desempeño productivo y de cumplimiento de buenas prácticas de producción en Planta 1.• Resultados satisfactorios en la gestión de capital humano en la Dirección de Producción.

LOGROS CIENTÍFICO-TÉCNICOS

• Sustitución de la resina cromatográfica DE-52 celulosa de Whatman (NP 121) por la resina Fractogel EMD TMAE (M) de Merck (NP 248) utilizada en los pasos de intercambio iónico. (02.CCP-1401).



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• Caracterización de las isoformas del planticuerpo HB-01.• Producción del anticuerpo monoclonal CB.Hep-1 en reactores Appliflex Rocker usando medios libre de suero y de proteínas.• Determinación del límite de nicotina en preparaciones del planticuerpo HB-01.• Metodología para la determinación del tamaño de partículas del inmunoadsorbente CB.Hep-1 liofilizado.• Evaluación de análisis de riesgo en el proceso de filtración esterilizante por cápsula de los ingredientes farmacéuticos activos que se producen en la Unidad Productiva Planta 5 del CIGB.

Trabajos presentados en el congreso Biotecnología Habana 2014

• Basabe L, Lugo JM, Martínez R, Morales A, Lopez M, González N, Sanchez K, Salazar E, Ramses G, Gonzalez O, Ruiz O, Leal Y, Machin A, Pimentel E, Estrada MP. A new PACAP formulation administered by immersion bath promotes a high growth performance on tilapia larvae. Cartel.

Trabajos presentados en el congreso “Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas”, Varadero, 2014

• Vivian Pujol Garcia, Ramón Trujillo Marici, Indira Alfonso Menéndez, Eleine Mesa Pérez, Jose Blas Tejera, Rebeca Bouyon Albarrán, Milda Pérez Tamayo, Oleg Evio Savinova, Daniel Rodríguez Reynoso, Lisbiel Hernandez Capestany, Rachel Berrio Martínez, Dunieskys Jiménez Martínez, Neyda Hernández Caso, Jorge Luis Vega, Manuel Montane, Tania de la Cruz, Yair Quiñones Maya, Ines Heredia Revilla, Lourdes Costa Anguiano, Arlene Rodríguez Silva. Consistencia del proceso de fabricación de Heberprot-P®. Cartel.

Tesis defendidas

• Tesis de Maestría: Eduardo Sánchez. Estudio para sustituir la forma farmacéutica líquida del inmunoadsorbente CB.Hep-1, por una forma farmacéutica sólida para purificación del ingrediente farmacéutico activo de la vacuna Heberbiovac HB®. Tutores: Rodolfo Valdés y Miguel Castillo, Diciembre 2014.• Tesis de Maestría: Hasel Aragón. Establecimiento de un método de producción del anticuerpo monoclonal CB.Hep-1 empleando medios libres de suero. Tutor: Rodolfo Valdés, Noviembre 2014.



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Tesis de grado

• Tesis de Grado de Biología: Lic. Dayron Ojeda. Método de producción del anticuerpo recombinante CIGB-598a específico al VEGF humano. 2014. Tutores: Rodolfo Valdés y Hasel Aragón, Agosto 2014.


• Especialistas del proyecto Nasvac, Francia.• Especialistas de Praxis, España.• Especialistas de Trillium, Canadá.• Delegación de Gobierno de Zhenzhen, China.• Viceministro de Relaciones Exteriores, Kasajastan.• Delegación de directivos de Hersil S.A. Laboratorios Industriales Farmacéuticos, Perú.• Delegación de China.• Especialistas de Medsafe, Nueva Zelanda.• Visita del presidente de Tatarstan.• Representantes de la firma Novasep, Francia.• Presidente de grupo Dara, España.• Representantes de una firma de Italia.• Representantes de una firma de Suiza.• Representantes Firma Merck, Alemania.• Representantes de una firma alemana.• Delegación de Cedmed Regulatoria (Brasil, Ecuador y Venezuela).• Especialistas de agencia regulatoria de Vietnam.• Viceministra y ministra de Salud de Ecuador.• Delegación del presidente de la Asociación Americana para el Avance de la Ciencia (AAAS).• Representantes de la firma Stilmas, Italia.• Ministra de Salud de la Federación de Rusia.

• Representantes de la firma Cromael, España.• Representantes de la firma Pagin, Italia.• Comité técnico Biomanghuino, Brasil.• Visita de avanzada del Presidente de Angola.• Especialistas técnicos de Brasil.• Delegación de Portugal.• Delegación de Brasil.• Viceministro de la República Bolivariana de Venezuela.• Delegación de médicos de Colombia.• Proveedor de columnas cromatográficas, Alemania.• Directivos de Argentina.• Jefes de Servicios Médicos de la FAR.• Delegación de Israel.• Presidente del Instituto Nacional de Educación e Investigación Farmacéutica (Niper), India.• Representantes de una firma de Francia.• Representantes de una compañía mexicana.• Embajador de la Federación de Rusia.• Delegación de la firma Lukan, China.• Director General de OPAQ.• Representantes de la firma CRISS, Alemania.• Representantes de la firma DARA, España.• Representantes de la firma Atlas Copco, Italia.• Representantes de la firma IBS, Alemania.• Delegación de la Federación de Rusia.• Representantes de la firma Knauer, Alemania.• Representantes de firma de relaciones médicas, Hungría.

PUBLICACIONES

Se publicaron 7 artículos científicos.

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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

MSc. Jorge Castro VelazcoTeléfono: (53) [email protected]

El Bioterio del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, se responsabiliza con el uso y cuidado de animales que se emplean en la experimentación,

en los ensayos preclínicos y en el control de productos biotecnológicos. Otros de sus objetivos son el diseño y desarrollo de la capacitación en la ciencia de animales de laboratorio, para el CIGB, Cuba y los países que lo soliciten.

Posee equipamiento de alta tecnología y un riguroso control automatizado de los parámetros ambientales, que incluye mediciones de temperatura, humedad relativa y presión diferencial. La medición de la concentración de amoniaco se realiza mediante un dispositivo digital eficiente.

En el Bioterio trabajan científicos y especialistas altamente calificados, con más de 12 años de experiencia, formados en las diferentes temáticas de las ciencias biológicas, en sistemas de gestión de la calidad y la ciencia de animales de laboratorio. Sus principales temáticas de investigación son la obtención de biomodelos para la evaluación de los productos del CIGB: la farmacología y la toxicología experimental, la histopatología, la seguridad ambiental, la bioética, la inmunología y la reproducción animal.

Su misión es satisfacer las demandas de las direcciones del CIGB, con servicios de experimentación in vivo y de preclínica. Sus directivos garantizarán la respuesta a no menos del 98 % de las solicitudes anuales de las áreas de Control de la Calidad y Producción, y al 95 % de las solicitudes anuales de las áreas de Investigación y Desarrollo.

El Bioterio también se ocupa de diseñar y cumplir al menos el 95 % de las solicitudes de entrenamiento teórico y práctico anuales.

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Jefe del Departamento de Experimentación Animal y Buenas Prácticas PreclínicasDra. Dania Bacardí FernándezTeléfono: (53) [email protected]

Jefe del Departamento de Control de Productos y Preparación de MaterialesTéc. Omar Mosqueda LobainaTeléfono: (53) [email protected]

Jefa del Grupo de Experimentación en RoedoresTéc. Laritza GorovayaTeléfono: (53) [email protected]

Grupo de Buenas Prácticas PreclínicasMSc. Lizet Aldana VelazcoTeléfono: (53) [email protected]

Especialista PrincipalDra. Karelia Cosme Dí[email protected]éfono: (53) 7250-4301


LOGROS INSTITUCIONALES

• Respuesta al 100 % de las solicitudes de control de producto sin repetición de estudios.• Realización del curso internacional Desarrollo preclínico de Biofármacos.• Satisfacción del 100 % de las solicitudes de estudios mediante el sistema de I + D.• Se logró mantener de forma estable el suministro al servicio del comedor obrero y se garantizó el autofinanciamiento de dicha actividad según lo normado en el país, con aceptación por parte de los clientes.


• Demostración del efecto preventivo de la vacuna CIGB-247 sobre la neoangiogénesis retiniana experimental inducida por VEGF en conejos.

• Programa preclínico desarrollado para demostrar la seguridad del Heberferon®.• Culminación del programa preclínico realizado al HeberNasvac®, bajo el cumplimiento de los requerimientos de las principales agencias reguladoras. Demostración de su seguridad.• Programa preclínico desarrollado para demostrar la seguridad del supositorio de Proctokinasa® para el tratamiento de la trombosis hemorroidal.• Satisfactoria gestión preclínica para la elaboración de respuestas técnicas a contrapartes y organismos reguladores, con vistas a la obtención de Registros sanitarios, autorizo de ensayos clínicos y documentos CTD/2014.• Desarrollo de una formulación en forma de Pellet que contiene factor de crecimiento epidérmico humano recombinante (FCEhr) para el tratamiento de la colitis ulcerosa.• Candidato vacunal CIGB550-E7 + VSSP, diseñado para tratamiento de tumores y lesiones anogenitales y tumores de cabeza y cuello.• Demostración del efecto preventivo de la vacuna CIGB-247 sobre la neoangiogénesis retiniana experimental inducida por el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) en conejos.• Programa preclínico desarrollado para demostrar la seguridad del Heberferon®.• Inducción de una respuesta inmune humoral y celular multiespecífica y funcional, empleando una proteína quimérica que comprende epitopos relevantes del virus de la hepatitis C.• Farmacocinética y biodistribución del CIGB-210, candidato a fármaco contra el virus de la inmunodeficiencia humana.• Evaluación cuantitativa de la acción de biocompuestos sobre la evolución de procesos fisiopatológicos en investigaciones preclínicas y clínicas con Resonancia Magnética.• Demostración de la seguridad, inmunogenicidad y eficacia del candidato vacunal terapéutico Hebernasvac y nuevos aportes a la caracterización de las poblaciones de pacientes con hepatitis B crónica.• Inducción de una respuesta inmune humoral y celular multiespecífica y funcional empleando una proteína quimérica que comprende epitopos relevantes del virus de la hepatitis C.


PREMIOS ANUALES DE LA ACADEMIA DE CIENCIAS DE CUBA CORRESPONDIENTES AL AÑO 2013

• Evaluación cuantitativa de la acción de biocompuestos sobre la evolución de procesos fisiopatológicos en

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investigaciones preclínicas y clínicas con resonancia magnética.• Demostración de la seguridad, inmunogenicidad y eficacia del candidato vacunal terapéutico Hebernasvac y nuevos aportes a la caracterización de las poblaciones de pacientes con hepatitis B crónica.• Incremento de la biodisponibilidad del IFN α 2b cubano modificado por conjugación química con una molécula ramificada de polietilenglicol.• Inducción de una respuesta inmune humoral y celular multiespecífica y funcional empleando una proteína quimérica que comprende epítopos relevantes del virus de la hepatitis C.• Proctokinasa®, nuevo medicamento para el tratamiento de las hemorroides agudas.• Solicitud e inscripción del registro sanitario del producto HeberNasvac®.

PREMIOS Y RECONOCIMIENTOS INTERNACIONALES

• XX Aniversario del Centro Nacional Coordinador de Ensayos Clínicos. Dra. Dania Bacardí.• Invitación al Comité Científico, Revista de Divulgación Científica de la Federación de Sociedades y Asociaciones Hispanas de América del Norte, Centroamérica y el Caribe de la Ciencia de los Animales de Laboratorio, A.C. Dra. Dania Bacardí.• Biología molecular de la cicatrización, premio de la Academia de Ciencias de Cuba. Dra. Dania Bacardí.

CURSOS GERENCIADOS O IMPARTIDOS POR EL ÁREA

• Curso internacional: Desarrollo Preclínico de Biofármacos.• Curso de Capacitación Continua en Buenas Prácticas Preclínicas.• Curso de Capacitación Continua en Lineamientos y Directrices para el Uso y Cuidado del Animal de Laboratorio.• Maestría Tendencias de la Biotecnología Contemporánea, CIGB: Evaluación de Productos Biotecnológicos. Ensayos no Clínicos.• Entrenamiento de dos compañeros de Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (Cenpalab) en Toxicología de la Reproducción.

• Entrenamiento de pregrado de una estudiante del Instituto Politécnico Agropecuario Villena-Revolución.

CURSOS RECIBIDOS

• Conferencia virtual: BioConferenceLive.• Curso Internacional: Señales de muerte celular en cáncer y en el sistema inmune. Sao Paulo, Brasil.• Curso Internacional: Desarrollo de Biofármacos.

EVENTOS

• Simposio Hepatitis Virales, Varadero 2014.• VII Fórum Ramal de Ciencia y Técnica de la Industria Farmacéutica, Quimefa 2014. • II Seminario Internacional de la Sociedad Cubana de la Ciencia de Animales de Laboratorio (SCCAL).• PANVET 2014.• TECMED 2014.• Fórum de Base (con los siguientes trabajos):- Análisis del reúso de primates no humanos en el Bioterio del CIGB (años 2011-2013).- Implementación del Servicio de Patología Clínica para estudios preclínicos en el Bioterio del CIGB.- Instrumentación de un protocolo de anestesia empleando como alternativa ketamina-midazolam-atropina para el trabajo con roedores de laboratorio en el Bioterio del CIGB.

TESIS DEFENDIDAS

Tesis presentada en opción al título de Doctor en Medicina Veterinaria y Zootecnia (2013-2014): Estudio comparativo de toxicocinética del interferón alfa 2b humano recombinante conjugado con polietilenglicol de 48 kDa, en primates no humanos (Macaca fascicularis). Autor: Santiago Zaragoza Alonzo. Tutor: Dra. Dania Bacardí Fernández.

PUBLICACIONES

• Se publicaron dos artículos científicos y se enviaron dos a publicar.

DIRECCIÓN DE AGROPECUARIA



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INTRODUCCIÓN

VICEDIRECTOR

Dr. Eulogio Pimentel Vá[email protected]

Teléfono: (53) 7250-4301

La Dirección de Investigaciones Agropecuarias del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) conduce la División de Plantas y la División de Biotecnología

Animal. La primera la integran los proyectos de Virología Molecular en Plantas, Biotecnología de Soya, Genómica Funcional, Interacciones Plantas-Microorganismos, Plantas como Biorreactores, Biotecnología Ambiental, y el área de la Parcela Experimental de Plantas. La segunda la conforman los proyectos de Salud Animal, Biotecnología Acuática y Ensayos Clínicos, así como la Estación de Peces. El CIGB de Camagüey y el de Sancti-Spíritus también desarrollan importantes proyectos del perfil agropecuario.

El uso de la ingeniería genética implica una responsabilidad ante la seguridad humana y la protección del medio ambiente. Este es un método esencial para el desarrollo de nuevos productos y la solución de problemas de la ciencia y la tecnología. Nuestra misión tiene esos objetivos, basados en valores éticos, que se ejecutan evaluando los riesgos y siguiendo las más estrictas medidas de bioseguridad y los requisitos de las legislaciones vigentes.

DIRECCIÓNDE AGROPECUARIA




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Jefe del Departamento de Biotecnología de PlantasMerardo Pujol [email protected]éfonos: (53) 7271-6022, Ext. 3103

Jefe del Departamento de Biotecnología AnimalDr. Mario Pablo Estrada Garcí[email protected]éfonos: (53) 7271-6022, Ext. 5154Fax: (53) 7273-1779

Jefe del Proyecto de Plantas como BiorreactoresMsc. Abel Hernández Velá[email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 3157

Jefe del Proyecto de Virología Molecular en PlantasDr. Alejandro Fuentes Martí[email protected]éfono: (53) 7271-6022, ext. 3155

Jefe del Proyecto de Genómica FuncionalDr. Orlando Borrás [email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 3151

Jefe del Proyecto de Laboratorio de Interacciones Plantas-MicroorganismosDr. Lázaro Hernández Garcíalá[email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 3116

Jefe del Proyecto de Biotecnología AmbientalDr. Camilo Ayra [email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 3156

Jefe del Proyecto de Biotecnología de SoyaDr. Gil Enríquez Obregóngil.enrí[email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 3106

Jefa del Proyecto de Ensayos ClínicosLic. Marisela Suárez Pedrosomarisela.suá[email protected]éfono: (53) 7271-6022, ext. 5124

Jefa del Proyecto de Salud AnimalLic. Alina Rodríguez Malló[email protected]éfono: (53) 7271-6022, ext. 5103

Jefe del Proyecto de Biotecnología AcuáticaDr. Mario Pablo Estrada Garcí[email protected]éfono: (53) 7271-6022, ext. 5154

DIVISIÓN DE PLANTAS

La División de Plantas se dedica a la biología molecular y al mejoramiento genético de especies vegetales de interés agrícola, así como a la investigación de compuestos y microorganismos de utilidad para la protección de los cultivos, la alimentación, y para la salud humana y animal.

Los proyectos están encaminados a la introducción de genes para la defensa de las plantas frente a plagas y enfermedades. Se trabaja también en la modificación genética de cultivos como el maíz, la soya, el tomate y el arroz, para mejorar sus propiedades, para su uso posterior en la industria y en la alimentación animal, así como en compuestos nutracéuticos. Se comete en colaboración con instituciones científicas cubanas que estudian cultivos frutales como los cítricos y el plátano. Estos estudios se basan en el más estricto cumplimiento de las normas de bioseguridad vigentes, y promueven la investigación de la implicación toxicológica y ambiental de los organismos genéticamente modificados.

Con los estudios genómicos de estos cultivos se pretende identificar genes relacionados con su resistencia frente a las enfermedades y las adversidades del ambiente (salinidad y sequía).


Mejoramiento genético de maíz

• Se obtuvo la generación S2 de una línea de maíz MIR162 progenitora de híbridos simples de alto valor genético, que contiene la nueva proteína insecticida Vip3A específica contra la palomilla del maíz. Esta proteína tiene un mecanismo de acción contra las larvas de este insecto-plaga que difiere del de la proteína Cry1Fa, por lo que se puede utilizar para el tratamiento de la resistencia de insectos.




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• Se obtuvieron tres hibridomas y sus respectivos bancos semilla, que producen anticuerpos monoclonales contra la proteína insecticida Vip3A.• Se estableció un sistema ELISA para la detección de la proteína Vip3A en extractos vegetales.• Se demostró que las polillas de la palomilla del maíz tienen una fuerte preferencia por ovopositar en las plantas de maíz Bt cuando el daño en el maíz convencional es elevado. Las implicaciones para la evolución de la resistencia a insectos se estudiaron mediante modelación.• La proteína de insectos SfPER Se expresó de manera recombinante en Pichia pastoris para comenzar los estudios de su utilidad como blanco de insecticidas.

Mejoramiento genético de soya

• Se obtuvieron líneas transgénicas de soya de las variedades Inca36 y DT84 que expresan el gen de la defensina y se demostró la resistencia a la roya asiática y otros hongos importantes que afectan el cultivo de la soya.• Se lograron nuevas líneas derivadas del cruce entre parentales de soya con mayores potenciales productivos, y se logró la generación F4-F5. Se avanzó en las técnicas moleculares en función de la caracterización de los genotipos de soya de interés para el programa de mejoramiento, además de genes asociados con fenotipos contrastantes.• En la Empresa Agropecuaria Militar Cubasoy, de la provincia de Ciego de Ávila, Cuba, se logró el escalado de 20 hectáreas de soya transgénica, y se demostraron los potenciales productivos de las líneas obtenidas.

Producción de biofertilizante para soya

• Se cumplió el plan de producción y el cronograma de ventas (1000 L) del inoculante Bradyrhizobium japonicum.• Se inoculó toda el área de soya sembrada en la Empresa Agropecuaria Militar Cubasoy y las áreas de extensión de la variedad transgénica resistente a glifosato en diferentes localidades del país.• La viabilidad promedio del inoculante fue de 3 × 1010 ufc/mL. Las plantas inoculadas presentaron nodulación efectiva y buen estado nutricional. Se ahorró la aplicación de urea. • Se realizó la escritura del paquete tecnológico del proceso de producción del inoculante Bradyrhizobium japonicum para la soya.

Biocatalizadores

• Diseño y desarrollo de biocatalizadores para la conversión enzimática del azúcar de caña en productos de alto valor

agregado, tales como fructooligosacáridos (FOS) y sirope invertido.•Se presentó una patente internacional que reivindica la producción en Pichia pastoris de una fructosiltransferasa vegetal (1-SSTrec) y su uso en conversión de la sacarosa en 1-kestosa.• Se determinó que 1-SSTrec secretada en P. pastoris es una glicoproteína. Las cadenas de manosas son esenciales en la actividad catalítica de la enzima.• Se evidenció que 1-SSTrec es útil para incrementar el contenido de fructanos en extractos de raíz de achicoria, una nueva utilidad comercial de la enzima.• Se logró una formulación sólida de invertasa termoestable mediante el método de secado a 60 °C sin pérdida de actividad enzimática y altamente estable en conservación no refrigerada.

Plantas como sistemas de expresión

En el proyecto de Plantas como Biorreactores se continuó en el desarrollo de estrategias que incrementan los niveles de expresión de moléculas farmacéuticas. Se logró la expresión de más de 10 g de anticuerpo anti-AgsHB por kg de semillas de tabaco y más de 0.18 g/kg de hojas.

Control de enfermedades provocadas por germinivirus

• El estudio del proceso de silenciamiento del ARN geminiviral en especies de plantas de importancia económica podría apuntar a nuevos enfoques para lograr la resistencia frente a la familia de virus de plantas más ampliamente representada y diseminada. Se establecieron varios modelos de interacción planta-virus con las especies TYLCV y ToMoTV. Se definieron patrones de comportamiento y se analizó su efecto en la transcriptora de la planta. •La obtención de herramientas moleculares derivadas de los genomas virales es otro objetivo de este proyecto. El diseño de replicones de origen geminiviral capaces de expresar o silenciar genes específicos es una herramienta eficaz para la genómica funcional y la utilización de las plantas como biorreactores. Se lograron varios diseños de este tipo de vector a partir del genoma de ToMoTV, como integradores y para la expresión sistémica de un gen específico.

Genómica de plantas

Identificación, aislamiento y caracterización de nuevos genes involucrados en la resistencia a enfermedades. El proyecto de genómica de plantas se basa en el estudio de




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los principales mecanismos moleculares y bioquímicos de la resistencia a enfermedades en plantas, con el objetivo de identificar nuevos genes involucrados en el reconocimiento, señalización y respuesta de la planta frente a enfermedades.

El proyecto utiliza herramientas como la SuperSAGE combinada con la nueva generación de secuenciación, para identificar los genes. Además de utilizar varias estrategias para el análisis de función mediante RNAi.

Se identificó un nuevo receptor de respuesta inmune en plantas, y se logró una fuerte actividad biológica de moléculas candidatas para la defensa de las plantas.

DIVISIÓN DE BIOTECNOLOGÍA ANIMAL

La División de Biotecnología Animal lo componen tres grupos fundamentales de investigación.

El grupo de Salud Animal desarrolló una vacuna por vía recombinante, comercial, contra la garrapata Boophilus microplus, conocida como Gavac®, con un amplio y muy exitoso uso en Cuba, con experiencias de campo muy importantes en otros países. Actualmente el grupo desarrolla nuevos antígenos contra garrapatas, que aumenten la eficacia de la vacuna existente. Además trabaja en la obtención de nuevas vacunas veterinarias de subunidad, obtenidas por ingeniería genética, contra enfermedades que afectan especies de interés económico, así como en el diseño y la obtención de sistemas de diagnósticos contra esas enfermedades veterinarias.

Por más de quince años el grupo de Biotecnología Acuática ha investigado sobre la nutrición y estimulación del crecimiento y del sistema inmune de los organismos acuáticos. Se ha logrado una estimulación notable del crecimiento y del sistema inmune en camarones y peces mediante la adición de suplementos nutricionales (modificadores metabólicos). Acuabio 1® es el primer producto comercial de este grupo, registrado con resultados muy alentadores en las pruebas de campo en Cuba y otros países. Actualmente se han aislado y estudiado por primera vez neuropéptidos y péptidos antimicrobianos, con una función muy importante en el sistema inmune de los peces.

Se ha estudiado la activación y modulación de la respuesta inmune innata y adquirida, como respuesta a la actividad biológica de los péptidos aislados. Estas nuevas moléculas podrían aportar herramientas biotecnológicas para su

aplicación en la acuicultura moderna y en la salud animal en general.

El grupo de ensayos clínicos se dedica al estudio preclínico de campo de vacunas y fármacos veterinarios generados por el Departamento, así como al establecimiento del sistema de diagnóstico certero y rápido de importantes agentes patógenos que amenazan los principales animales de granja a escala mundial, para apoyar los planes de erradicación de enfermedades.

El Departamento cuenta con un servicio de generación de animales transgénicos como modelos, con una tecnología por inyección pronuclear y un sistema de lentivirus, con una elevada eficiencia. Se han logrado desarrollar modelos en ratones, conejos y vacas.

Proyecto de nuevos antígenos contra garrapatas

Se ha logrado demostrar la eficacia de un péptido de la proteína ribosomal P0 de garrapatas contra Rhipicephalus sanguineus y Rhipicephalus (Boophilus) microplus. En este momento se estudian varias moléculas inmunoestimulantes que garanticen una adecuada respuesta contra el péptido y que su producción sea factible desde el punto de vista tecnológico y económico. Además se estudia la efectividad del nuevo candidato contra cepas de otras regiones del mundo y distintas especies de garrapatas.

Proyecto de Biotecnología Acuática

Se demostró la activación y modulación de la respuesta inmune innata y adquirida, a la actividad biológica de los péptidos aislados (por ejemplo, el PACAP). Se demostró la actividad de tres nuevos péptidos, como agentes antimicrobianos en un amplio espectro de bacterias gramnegativas, grampositivas y hongos. Mediante qPCR se efectuaron estudios de la expresión diferencial de los péptidos aislados en varios tejidos de peces, en condiciones normales y luego de infestaciones con bacterias y virus.

Por primera vez se aisló el péptido PACAP de camarones Litopenaeus vannamei: descubrimiento pionero en la caracterización de esos péptidos en crustáceos. Se cuenta con un candidato vacunal contra el piojo de mar (sea lice) que ataca los salmónidos, tanto de los mares del norte como del sur, con resultados prometedores, que pudieran aportar una gran herramienta para el control de estos ectoparásitos que anualmente ocasionan pérdidas millonarias a las economías.




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Extensión nacional del uso de Gavac® en Venezuela como parte del Programa de Control Integrado de la Garrapata

• Se cumplió el 60 % del plan de reinmunización y el 74 % del plan de nuevas incorporaciones al Programa de Control Integrado de la Garrapata (PCIG) en Venezuela. • En el PCIG del bovino se alcanzó la cifra de 1 907 054 animales: récord en la historia del programa a escala mundial. Se han beneficiado 28 332 productores que se han capacitado mediante 5475 actividades de aprendizaje. Los resultados en los estados de Venezuela muestran una reducción del 81.6 % en los tratamientos químicos y una reducción en los costos por animal para el control de la garrapata en 86.65 %. Ello representa un beneficio estimado, por concepto de químicos, de 78 737 300 BsF (12 497 984 dólares estadounidenses), lo que equivale a 260 toneladas menos de químicos que se liberan al medio ambiente. La determinación de anticuerpos en un muestreo corroboró la respuesta a la inmunización y se observó daño en el potencial reproductivo de las garrapatas en el campo, por lo que los resultados en la extensión son los esperados y cumplen los objetivos e impactos propuestos en el proyecto para esta etapa. Ha requerido un intenso trabajo en condiciones complejas, por parte de los integrantes de la parte productiva, de control y de exportación para garantizar el inmunógeno en el tiempo establecido.

Reforzamiento del Programa de Control Integrado de la Garrapata del bovino en Cuba

• Se enviaron promotores de Gavac® a todas las provincias cubanas.• Se establecieron las compras de Gavac® para los productores mediante contratos con Labiofam.• Se promocionó el programa, mediante plegables, reportajes televisivos y periodísticos sobre las ventajas de esta tecnología, lo cual motivó a los productores. • Se fortaleció el trabajo del Instituto de Medicina Veterinaria en Cuba con el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología y la Asociación Nacional de Agricultores Pequeños (IMV-CIGB-ANAP), para expandir los resultados a toda Cuba.• Se identificaron 515 101 animales incluidos en el programa. De ellos, 233 990 del sector no estatal y 281 111 del sector estatal; 157 070 son nuevas incorporaciones.• Se capacitaron 3246 personas en las bases del PCIG.• El trabajo garantizó un récord de venta nacional de Gavac®.• Se crearon las bases necesarias para la reintroducción y ampliación nacional del PCIG, y para alcanzar un impacto

económico y en la salud animal, humana y ambiental, teniendo en cuenta que existe una sola salud.

Desarrollo de un nuevo candidato vacunal E2CD contra la peste porcina clásica, producido en células de mamíferos en suspensión

Se ejecutó el ensayo número 5 con el nuevo candidato vacunal E2CD contra la peste porcina clásica (PPC), producido en células de mamíferos en suspensión. Se reafirmó la calidad del antígeno E2CD y se logró una respuesta humoral elevada que se multiplicó luego de la segunda dosis de refuerzo. La vacunación con el candidato revirtió el efecto del inmunodepresor. Se valoró la acción del adyuvante Montanide ISAV2 como elemento protector. Se demostró la capacidad del inmunógeno de lograr esterilidad viral 7 días después del reto con la cepa de confrontación. Los elevados títulos de anticuerpos neutralizantes permitieron eliminar el virus antes de que pudiera replicarse sistémicamente en el animal.

Se crearon los bancos de células de trabajo y nuevos bancos de semillas del virus, una vez revisadas y ajustadas las condiciones del procedimiento de NPLA establecido.

Avances en el desarrollo y montaje de las técnicas de NPLA y rápidas para medir anticuerpos contra la PPC

• Se estandarizó la técnica para la evaluación de los anticuerpos neutralizantes del virus de la PPC por el método de inmunoperoxidasa directo, lo cual simplificó el trabajo y el tiempo, y los resultados se interpretaron fácilmente, de forma similar, por varios analistas. • Se crearon bancos primarios y de trabajo para las células y virus empleados, y se estableció un método de fijación de las células para el revelado directo con varios conjugados anti-E2 marcados con peroxidasa.• Esta técnica solo se realizaba en el Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA). Contar con ella en el CIGB permite un mejor control de los animales incluidos en los ensayos y conocer directamente el estado de la masa porcina, además del mantenimiento de un panel de sueros.• Se estableció la documentación según buenas prácticas de laboratorio y bioseguridad.

Buenas Prácticas de Laboratorio

La Dirección de Aseguramiento de Calidad del CIGB, otorgó la certificación de Buenas Prácticas de Laboratorio en el área de Investigaciones Agropecuarias.




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TRABAJOS PRESENTADOS EN EL CONGRESO BIOTECNOLOGÍA HABANA 2014

Simposio 1 - Biotecnología Acuática

Presentaciones orales

• Antimicrobial peptides for the improvement of aquaculture health. Mario Pablo Estrada, Juana Maria Lugo, Jannel Acosta, Yamila Carpio, Janet Velazquez, Liliana Basabe, Claudia Garcia, Antonio Morales, Fidel Herrera, Osmany Gonzalez, Reinold Morales, Alexis Machin.• Antiviral activity of growth hormone secretagogues, studies in mammals and in fish system. Rebeca Martínez, Lázaro Gil, Teresa Villavicencio, Julia Béjar, Liz Hernandez, Aniel Sanchez, Luis Javier Gonzalez, Ernesto Marcos, Laura Lazo, Vladimir Besada, Alejandra Fernandez, Lissete Hermida, Belinda Sanchez, Mario P Estrada.• Pituitary adenylate cyclase-activating peptide (PACAP) in the teleost fish immune system: from its discovery to their function. Juana María Lugo, Carolina Tafalla, Yamila Carpio, Aitor González, Javier Leceta, Rosa P Gomariz, Antonio Morales, Fidel Herrera, Osmany González.

Presentaciones de carteles

• A new PACAP formulation administered by immersion bath promotes a high growth performance on tilapia larvae. Basabe L., Lugo J.M., Martínez R., Morales A., López M., González N., Sánchez K., Salazar E, Ramsés G., González O, Ruiz O., Leal Y., Machín A., Pimentel E., Estrada M.P.• Antimicrobial activity of the neuropeptide PACAP: its potential use as novel therapeutic agent. Juana Maria Lugo, Carolina Tafalla, Ayme Oliva, Tirso Pons, Carolina Aquilino, Mario Pablo Estrada García• Characterization of two concealed antigen for immunological control of sea lice. Claudia García Castillo, Yamila Carpio, Juana María Lugo, Tirso Pons, Yassel Ramos, Jannel Acosta, Antonio Morales, Reynold Morales, Osmany Rodrigo, Fidel Herrera, Alexis Machín, Liliana Basabe, Mario Pablo Estrada.• Cytokines expression profiling is differently modulated in response to pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) in naïve rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) leukocytes. Juana Maria Lugo, Carolina Tafalla, Mario Pablo Estrada.• Design and optimization of purification process of MY32Ls protein solubilizing inclusion bodies for a new vaccine against sea lice. Carlos Enrique Perez Heredia.

• Differential expression pattern of pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) alternative splicing variants and its receptors in the immune system of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Juana Maria Lugo, Carolina Tafalla, Javier Leceta, Rosa P Gomariz, Rosario Castro, Mario Pablo Estrada.• Diseño, evaluación y simulación del proceso de purificación de una nueva vacuna para el control del piojo de mar empleando cromatografía de afinidad por quelatos. Carlos Enrique Perez Heredia.• Expression profiles of PACAP and its receptors on IgM+ cells from different immune tissues of the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss): first step for the understanding of the action of PACAP on teleost B lymphocytes. Juana Maria Lugo, Carolina Tafalla, Aitor Gonzalez, Beatriz Abos, Mario Pablo Estrada.• First report of the presence and functional role of pituitary adenylate cyclase activating peptide (PACAP) in the white shrimp Litopenaeus vannamei. Juana Maria Lugo, Yamila Carpio, Reynold Morales, Tania Rodríguez-Ramos, Laida Ramos, Mario Pablo Estrada.• Improvement of growth performance and tissue fatty acid composition through the feed administration of growth hormone secretagogues A 233 in juvenile tilapia Oreochromis sp. Rebeca Martinez, Carmen Morales, Víctor Gonzalez, Fidel Herrera, Alexis Machin, Mario P. Estrada.• Modulation of PACAP splicing variants and its receptors expression after viral challenges in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) immune tissues. Juana María Lugo, Carolina Tafalla, Mario Pablo Estrada.• Molecular cloning of novel tilapia (Oreochromis niloticus) immunoglobulin T heavy chains. Janet Velázquez, Jannel Acosta, Juana Maria Lugo, Antonio Morales, Mario Pablo Estrada.

Simposio 2 - Biotecnología moderna para la salud animal

• Classical Swine Fever E2 to E2CD subunit vaccine candidates: an experience from research to development-production. Maria P. Rodriguez Molto.• Environmental and health impact of the extension and consolidation of the Integrated Control Program against R. microplus tick with Gavac vaccine in Venezuela. Marisela Suarez Pedroso, Julio Alfonso Rubi, Roberto Basulto, Hector Machado, Yusmel Sordo, Milagros Vargas, Carlos Montero, Danny Perez Pérez, Ariel Cruz, Pedro Puentes, Jose L. Rodriguez Reynoso, Ernesto Mantilla Corzo, Osvaldo Oliva Barbón, Eduardo Smith Polo, Andrés Castillo Escobio,




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Boris Ramos Serrano, Yamilka Ramirez Nuñez, Zoila Abad Márquez, Antonio Morales Rojas, Ernesto M. Gonzalez Ramos, Abel Hernandez Velazquez, Yanaysi Ceballo, Danay Callard, Amaurys Cardoso, Mónica Navarro Mena, Jorge Luis Gonzalez de la Rosa, Ricardo Pina, Elaine Santana, Maria P. Rodriguez, Yohandy Fuente, Mario P. Estrada, Madaisy Cueto, Carlos Borroto, Eulogio Pimentel Vazquez, Vladimir Cordova.• High expression of funtional E2-CD protein into lentiviral stable transfected mammalian cells. Yanet Prieto, Elsa Rodriguez, Lídice Mendez, Alina Rodriguez, Maria Pilar Rodriguez, Yusmel Sordo, Marisela Suarez, Ernesto Vega, Mario Pablo Estrada.• P0 peptide-induced morphological changes in oocytes of Brazilian Rhipicephalus sanguineus ticks fed on vaccinated dogs. Sanches G.S., Rodríguez-Mallon A., Evora P.M., Estrada M.P., Bechara G.H.• Recent advances with a novel antigen for the immunological control of ticks. Alina Rodríguez Mallon, Lídice Méndez Pérez, Pedro E. Encinosa Guzmán, Yamil Bello Soto, Mayte González Ferriol, Llilian Gómez Pérez, Yamilet Cárdenas Cuéllar, Marisdania Joglar, Dailenis Abella Matos, Elsa María Rodríguez, Mario Pablo Estrada.• Vaccine candidate against classical swine fever produced in mammalian cells: characterization of the immunogen and the expression system. Elianet Lorenzo Romero, Elsa María Rodríguez Rodríguez, Lídice Méndez Pérez, Yanet Prieto Carratalá, Nemecio Gónzalez Fernández, Niurka Arteaga Moré, Rafael Pimentel, Gleysin Cabrera Herrera, Mario Pablo Estrada García.

Presentación de Carteles

• A E2CD protein subunit candidate vaccine confers protection in pigs against classical swine fever. Maria P. Rodriguez, Yusmel Sordo, Talia Sardinas, Yoandy Fuentes, Danny Perez, Elaine Santana, Ayme Oliva, Lídice Méndez Pérez, Maria T. Frias, Ernesto Vega, Kelvin Estrada, Daine Chong, Carmen Laura Pereda, Paula Naranjo, Mario P. Estrada, Marisela Suárez Pedroso.• Analysis of Active Pharmaceutical Ingredients Gavac by Transmission Electron Microscopy (TEM) to determine the grade of particulation of Bm86 protein. Ivón Menéndez, Rocío Garateix, Raychel Molina, Danny Pérez, Elaine Santana, Alain Moreira, María Pilar Rodríguez Molto, Marisela Suárez, Mario Pablo Estrada, Jesús Zamora, Viviana Falcón Cama.• Aspectos biológicos y reproductivos asociados a Rhipicephalus sanguineus en condiciones de laboratorio en el CIGB-Camagüey. Liszoe Galdós Betartez, Néstor Mora

González, Zoila Abad Márquez, Pedro Enrique Encinosa, Idania Cepero Reyes, Ramón Franco Rodríguez, Eduardo Hernández López, André Serradelo Leal, Rolando Moran Valdivia.• Characterization of the biological cycle of a Dermacentor nitens field isolated using rabbits (Oryctolagus cuniculus) as hosts. Pedro Enrique Encinosa Guzmán, Yamil Bello Soto, Alina Rodríguez-Mallon, Llilian Gomez Pérez, Yasser Zamora Cordova.• Classical swine fever virus E2 glycoprotein fused to CD154 molecule produced in CHO DG44 cells confers complete protection in pigs upon viral challenge. Lidice Méndez Pérez, Elsa Maria Rodriguez Rodríguez, Marisdania Joglar Piñeiro, Yanet Prieto Carratalá, Dailenis Abella Matos, Yusmel Sordo, Maria Pilar Rodríguez Molto, Alina Rodríguez Mallon, Mario Pablo Estrada García.• Clonaje, expresión en E. coli y purificación de la proteína p26 del virus de la anemia infecciosa equina para el diagnóstico de la enfermedad. María Carla Rodríguez Domínguez, Claudia García Castillo, Leonardo Vásquez Frías, Aníbal Domínguez Odio, Mario Pablo Estrada Garcia.• Comparison between an enzyme-linked immunosorbent assay and the microscopic agglutination test for the detection of leptospiral antibodies in dogs. Radamés L., García I., Dania Feraud, Sonia Lugo, Héctor Machado, María A. Abeledo.• Control de garrapatas Rhipicephalus (Boophilus) microplus en bovinos con el inmunógeno Heberbiogar® en Guanare, Portuguesa, Venezuela. Aroldo R. Botello, Botello A.L., Borroto C.N., Pérez D.A., Rodríguez Y.V., Marisela S., Fajardo H., Pérez Kirenia C., González A.O., Rodríguez A.N., Linares B.R., Rivero C., Peraza P.S., Gort A.M.• Control de la salvaguardia en el proyecto de ensayo de Neutralización viral para determinación de anticuerpos contra cólera porcino. Annia A. González Crespo, Angela E. Sosa Espinosa, Elizabeth García Muñiz, Elaine Santana Rodríguez, María Pilar Rodríguez, Talia Sardinas Gonzalez, Marisela Suárez Pedroso.• Design and generation of three genetic variants of the bovine growth hormone. Elianet Lorenzo Romero, Alaín González Pose, Carlos Yrurzun Estrada, Dailenis Abella Matos, Liliana Basabe Tuero, Ernesto González Ramos, Anays Alvares Gutiérrez.• Development and preliminary characterization of a multi-antigenic vaccine against the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Mayte González Ferriol, Pedro E. Encinosa Guzmán, Yamil Bello Soto, Laura Varás Sarzo, Nemecio González Fernández, Carlos Pérez Heredia, Mario P. Estrada García.




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• Diseño del proceso de purificación de la proteína E2CD empleando UFT para su empleo como antígeno de la vacuna Heber-PPC. Carlos Perez Heredia.• Evaluación de diferentes sistemas de contacto para la síntesis de la proteína E2CD en células HEK-293. Rafael M. Piementel Pérez, Niuvis Montoya Echavarría, Niurka O. Arteaga Moré, Nemecio González Fernández, Elsa Rodríguez Rodríguez, María P. Rodríguez Moltó, Mario P. Estrada García.• Evaluation of the chromatographic system HeberFast Line®Gavac. Milagros Vargas Hernández, Marisela Suárez Pedroso, Yohandy Fuentes Rodriguez, Ángela Tuero Iglesias, Hector Machado Morales, Carlos Montero Espinosa, Yusmel Sordo Puga, Elaine Santana Rodriguez, Edel Torres Gómez.• Evaluation of the humoral and cellular immune response induced in mice by the classical swine fever virus E2 protein fused to porcine CD154. Yusmel Sordo, Marisela Suarez, Rosalina Caraballo, Talia Sardina, Emma Brown, Carlos Duarte, Jannel Acosta, Lázaro Gil, María Pilar Rodríguez.• Evaluation of the main impacts of the Integrated Control Program against the Cattle Tick in Anzoátegui (Venezuela) State. Zoila Abad Márquez, Marisela Suarez, Nerio Segura, Alberto Chauran, Luis Figuera, Alejandro Siem, Dixon Medina, Andres Sifontes, Erwin Villarroel.• Generation of two chimeric proteins based on a peptide from the ribosomal protein P0 fused to the T antigens from the tetanic toxoid and the measles virus. Llilian Gómez Pérez, Rossana Aragón Oropesa, Lídice Méndez Pérez, Liliana Basabe Tuero, Alaín González Pose, Anays Alvarez Gutiérrez, Mario Pablo Estrada García.• Gestión integrada para el control de las áreas y actividades del proyecto para la obtención de un candidato vacunal contra el cólera porcino. Evelyn Olano Ruiz, Angela E. Sosa Espinosa, Elizabeth García Muñiz, Elaine Santana Rodríguez, María Pilar Rodríguez, Marisela Suárez Pedroso.• Immunoenzymatic assays to differentiate infected from vaccinated animals by using the nucleoprotein and the hemagglutinin H5 fused to the chicken CD154. Alaín González Pose, Elaine Santana Rodríguez, Julia Noda Gómez, Armando Vega Redondo, Elsa Rodríguez Rodríguez, Ernesto Manuel González Ramos, Anays Álvarez Gutierrez, María Pilar Rodríguez Moltó, Liliam Rios Cordero, Yanina Santana Ugalde, Alejandro Merino López.• Influencia del medio de cultivo en la producción de la proteína E2CD en células HEK-293. Rafael M. Pimentel Pérez, Niurka O. Arteaga Moré, Niuvis Montoya Echavarría, Nemecio González Fernández, Elsa Rodríguez Rodríguez, María P. Rodríguez Moltó, Mario P. Estrada García.

• Mejoras continuas en las etapas de Formulación y Llenado del Inmunógeno Gavac. Arlenis Alfaro Martínez, Jesús Zamora Sánchez, Alain Moreira Rubio, Nemecio González Fernández, Lidiana Martínez Armas, Eikel Pérez González, Rutdali Segura Silva, Eulogio Pimentel Vázquez, Diasmarys Salinas Rodríguez.• Recent advances and perspectives on the immunological control of ticks: The Cuban experience. Marisela Suarez P., Yusmel Sordo P., Milagros Vargas H., Carlos Montero E., Danny Pérez P., Ariel Cruz J., Elaine Santana, Aymé Oliva C., Yohandy Fuente, Boris Ramos S., Abel Hernández V., Danay Callard, Yamilka Ramírez N., Pedro Puente P., José L Rodríguez R., Roberto Basulto B., Osvaldo Oliva B., Eduardo Smith P., Ernesto Mantilla C., Antonio Morales R., Ernesto M. González R., Amaurys Cardoso., Ricardo Pina, Rogelio Oliva, Milagros Ponce C., Anays Alvarez G., Yamil Bello S., Raúl R. Espinosa P., Osmany González de S., Osmany Ramos G., Yunior López R., Yasser Zamora C., Sergio Cruz C., Mónica Navarro M., Jorge L. González La Rosa, Fidel Herrera M., Tatiana Estévez., Lidiana Martínez A., Raúl González R., Marleni Berta Gonzalez, Miguel A. Veliz, Rafael Roig., Omar Mosqueda, Alexander Giraud L., Alina Sobrino L., Dany D Miranda E., Dayamí Dorta, Michel Díaz M., Eliudimir Peña R., Santiago Zaragoza A., Héctor Machado M., Raúl Armas R., N. Gonzalez F., Luis Méndez, Mario P. Estrada G., Madaisy Cueto., Carlos Borroto N., Eulogio Pimentel V.• Recombinant production and purification of the p26 protein from the equine infectious anemia virus: its use for diagnostic tools. María Carla Rodríguez Domínguez, Claudia García Castillo, Leonardo Vásquez Frías, Aníbal Domínguez Odio, Mario Pablo Estrada García, Juana María Lugo González, Alain González Pose.• Stable lentiviral transformation of CHO cells for the expression of the hemagglutinin H5 of avian influenza virus in suspension culture. Alaín González Pose, Nayrobis Oramas Morell, Dailenis Abella Matos, Elsa Rodríguez Rodríguez, Elaine Santana Rodríguez, Liliam Rios Cordero, María Pilar Rodríguez Moltó, Ernesto Manuel González Ramos, Anays Álvarez Gutiérrez, Llilian Gómez Pérez, Julia Noda Gómez, Armando Vega Redondo, Carlos Borroto Nordelo.

Simposio 3 - Interacción molecular planta-patógeno


• Bioinformatics analysis of a sweet potato RNASeq experiment: from sequences to pathways. Maria Elena Ochagavia, Cathie Martin, Chris Watkins, Aylin Nordelo, Rolando Morán.




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• Fighting against the citrus HLB: how can we defeat it? Orlando Borras Hidalgo.• Tomato yellow leaf curl disease in Cuba and transgenic virus resistant plants. Alejandro Fuentes.

Presentación de carteles

• A gene for plant protection: expression of a bean polygalacturonase inhibitor in tobacco confers a strong resistance against fungi and oomycetes. Ingrid Hernandez Estevez.• Effect of plant steroids on activation of molecular mechanisms related to the defense of plants against diseases. Yamilet Coll, Eduardo Canales, Ingrid Hernández, Francisco Coll, Mayra Rodríguez, Roxana Portieles, Yunior López, Carlos Borroto, Orlando Borrás.• Effective control of ‘Candidatus’ Liberibacter, causal agent of citrus Huanglongbing, using brassinosteroids. Eduardo Canales.• Genetic transformation of Musa spp. cv. `Grande naine´ with the PGIP2 gene of Phaseolus vulgaris L. Mairenys Concepción-Hernández, Borys Chong-Pérez, Maritza Reyes, Mayelín Rodríguez Urquiza, Rafael G. Kosky, Orlando Borras-Hidalgo.• Genetic variability analysis using marker RAPD of acerola accessions (Malpighia emarginata). Yohaily Rodríguez Alvarez, Eduardo Canales López, Juliette Valdes-Infante Herrero, Orlando Borrás Hidalgo, Raixa LLauger Riverón.• Increased expression of antibody anti-HBsAg in the progeny of transgenic tobacco plants. Vivian Doreste Brown, Yadira Sanchez Guerra, Danay Callard Barrera, Tatiana González Estevez, Mayra Wood Duque, Osvaldo Oliva Barbon, Ada Triguero Cruz, Merardo Pujol Ferrer, Alejandro Fuentes Martinez.• Interspecific Nicotiana tabacum x Nicotiana megalosiphon genotypes and its interaction with blue mold disease on seedling stage. Morphological and molecular response. Humberto García, Eduardo Canales, Marlyn Valdéz, Leixys Rodríguez, María del Carmen Castro, Yuderkis Martín, Eglis Velázquez, Madelin Hernández, Gil Enriquez.• Nicotiana tabacum as model host for studies on infectivity of Tomato mottle Taino virus and Tomato yellow leaf curl virus. Natacha Carlos, Ivette M. Menéndez, Yoslaine Ruiz, Yadira Sánchez, Danay Callard, Vivian Doreste, Suriam Valdés.• NmDef02, a novel antimicrobial gene isolated from Nicotiana megalosiphon confers high-level pathogen resistance under greenhouse and field conditions.Roxana Portieles.

• Use of Mil 27 molecular marker in tobacco improvement programs at Tobacco Research Institute for blue mold disease. Humberto García, Eduardo Canales, María del Carmen Castro, Orlando Borrás.

Simposio 4 - Tecnología de enzimas


• 1-SSTrec: basis of an integral solution to the main constraints of the fungal-based technology for FOS production. Enrique Rosendo Pérez Cruz, Duniesky Martínez García, Luis Enrique Trujillo Toledo, Alina Sobrino Legón, Carmen Menendez Rodríguez, Ricardo Ramirez Ibañez, Gumersindo Feijoo Costa, Lázaro Hernández García.• A comparative molecular dynamics study of thermophilic and mesophilic β-fructosidase enzymes. Yuliet Mazola, Osmany Guirola, Glay Chinea, Carmen Menéndez, Luis E. Trujillo, Lázaro Hernández, Alexis Musacchio.• Development of immobilized biocatalysts for complete sucrose inversion at pasteurization temperatures. Duniesky Martínez, Carmen Menéndez, Enrique R. Pérez, Alina Sobrino, Luís E. Trujillo, Ricardo Ramírez, Bessy Cutiño, Alberto del Monte, Lázaro Hernández.• Fructan production and utilization. Smeekens S., Hernandez L., Weyens G., Meyer D., Ritsema T., van Arkel J., van der Meer I.• Pichia pastoris as a host system for the production of heterologous sucrose-transforming enzymes. Hernández L., Menéndez C., Martínez D., Alfonso D., Trujillo L.E., Pérez E.R.• Proteomics platform for enhanced protein identification and quantitation. Lázaro H. Betancourt, Yasset Perez-Riverol, Aniel Sánchez , Yassel Ramos , Gabriel Padrón, Luis Javier González , Jorge Fernández-Cossío, Yairet García, Vladimir Besada.• The horizontally acquired levansucrase-levanase operon in endophytic diazotrophs of the genus Gluconacetobacter. Hernández L., Ochagavia M.E., Ramírez R., Estrada. P., Menéndez C.

Presentaciones de carteles

• Integrating bioinformatics tools to handle protein glycosylation. Yuliet Mazola, Glay Chinea, Alexis Musacchio.• Modelling and simulation of 1-kestose enzymatic synthesis from sucrose. Duniesky Martínez García, Roberto J. Cabrera Carrazana, Iván Rodríguez Rico, Alina Sobrino Legón, Lázaro Hernández García, Enrique Rosendo Pérez Cruz.




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• Sucrose hydrolysis by a highly thermostable bacterial β-exofructosidase produced in the yeast Pichia pastoris. Menéndez C., Martínez D., Pérez E.R., Ramírez R, Sobrino A., Hernández L.

Simposio 5 - Plantas transgénicas


• Molecular dissection of the Bt-resistant caterpillar midgut epithelium to better understand how Bt Cry toxins destroy target cells and the mechanisms by which insects develop resistance. Camilo Ayra-Pardo.• Tobacco seeds as alternative for efficient production platform of a biologically active anti HBsAg monoclonal antibody. Abel Hernández Velázquez.


• Brassinosteroids: an enhancing tool for efficient expression-plant platform. Meilyn Rodríguez, Yamilet Coll, Giselle Hernández, Merardo Pujol, Yoslaine Ruiz, Marlene Perez, Kenia Tiel, Suriam Valdes, Osmany Ramos, Adrian Toledo, Yanileysis Fernandez, Fidel Leon, Luis Valentin, Siomara Portillo, Vladimir Niebla, Francisco Coll, Abel Hernández.• Effect of salinity on the development of soybean (Glycine max (L.) Merrill) during early stages of growth. Yuniet Hernández, Natacha Soto, Marilyn Florido, Yamira Quintero, Celia Delgado, Rodobaldo Ortiz, Gil A. Enriquez.• Establecimiento del sistema de inspecciones de bioseguridad de la biotecnología en los Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología. Elizabeth Garcia Muñiz, Angela E. Sosa Espinosa, Evelyn Olano Ruiz, Annia A. Gonzalez Crespo.• Estructuración de la capacitación en seguridad y ambiente del personal que trabaja en proyectos agropecuarios. Angela Estela Sosa Espinosa.• Gestión integrada de calidad y bioseguridad para el manejo seguro de la liberación de soya transgénica. Yanileysis Fernández Parlá, Angela Sosa Espinosa, Celia Delgado Abad, Gil Enriquez Obregon.• Insecticidal efficacy of homozygotic and heterozygotic maize hybrids to the event TC1507 against Spodoptera frugiperda in field plot conditions. Pilar Téllez, Ivis Morán, Daily Hernández, Albis Riverón, Eliudimir Peña, Yanileysis Fernandez Parlá, Moisés Morejón Pereda, Lianet Rodríguez-Cabrera, Claudia Rodríguez, Milagro Ponce Castillo, Angela Sosa, Camilo Ayra-Pardo.

• Morpho-agronomical and molecular characterization of new transgenic genotypes of soybean [Glycine max (L.) Merr.]. Celia Delgado, Gil A. Enriquez, Oreste Corrales, Yuniet Hernandez, Rodobaldo Ortiz, Natacha Soto, Odett Cespedes.• Obtainment of an inbred line of maize resistant to Spodoptera frugiperda that contains the transgenic event MIR162. Pilar Téllez, Ivis Morán, Daily Hernández, Albis Riverón, Eliudimir Peña, Yanileysis Fernandez Parlá, Moisés Morejón Pereda, Lianet Rodríguez-Cabrera, Claudia Rodríguez, Milagro Ponce Castillo, Angela Sosa, Camilo Ayra-Pardo.• PvAlf transcription factor induced accumulation of monoclonal antibody regulated by phaseolin promoter in leaves. Alina López Quesada, Kenia Tiel González, Yanaysi Ceballo Cámara, Abel Hernández Velázquez, Rosabel Pérez Castillo, Marlene Pérez Martínez, Osmani Ramos González.• Replicon based on Tomato yellow leaf curl virus to increase the accumulation of foreign proteins in tobacco plants. Yoslaine Ruiz, Midalys Cabrera, Leyanet Barbería, Natacha Carlos, Yadira Sánchez, Suriam Valdes, Rosabel Pérez, Alejandro Fuentes.• Sistema para la identificación y evaluación de riesgo en proyectos de investigación desarrollo en la biotecnología contemporánea. Angela Estela Sosa Espinosa.• Strategy based on siRNA-mediated to 11S globulin gene silencing in tobacco seed. Yanaysi Ceballo Cámara, Alina López Quesada, Kenia Tiel González, Marlene Pérez Martinez, Osmani Ramos González, Siomara Portillo Mesquía, Yanileysis Fernández Parla, Abel Hernández Velázquez.• The matrix attachment region (MAR) of Nicotiana tabacum H9 enhances the expression of therapeutic proteins in plants. Meilyn Rodríguez, Yoslaine Ruiz, Lincidio Pérez, Jorge V. Gavilondo, Marlene Pérez, Abel Hernández, Osmani Ramos, Osvaldo Oliva, Kenia Tiel, Fidel Rodríguez, Luis Valentín, Merardo Pujol.• Tools for immunodetection of MIR162 event in genetically modified corn plants resistant to Spodoptera frugiperda. Daily Hernández, Hasel Aragón, Marcos González, Rodolfo Valdés, Lianet Rodríguez-Cabrera, Albis Riverón, Ivis Morán, Claudia Rodríguez, Yassel Ramos.• Two copies of heavy chain units enhance anti-hepatitis B surface antigen antibody accumulation in transgenic tobacco plants. Yoslaine Ruiz, Pedro Ramos, Natacha Carlos, Margarita Simón, Osvaldo Oliva, Danay Callard, Yadira Sánchez, Alejandro Fuentes.• Using Quality Risk Management in the Plantibody HB-01. Lorely H. Milá Cáceres, Rodolfo Valdes Veliz, Sigifredo




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Armando Padilla, Otto Mendoza Santana, Leonardo Gomez Bayolo, Cristina García Aguirre, Déborah Geada López, Merardo Pujol Ferrer, Gil Enriquez Obregón.

Simposio 6 - Bioproductos para la agricultura


• Evaluation of native bacteria isolated from nematodes to control Meloidogyne sp. Ileana Sánchez Ortiz, Irene Alvarez Lugo, Idania Wong Padilla, Danalay Somontes, Rolando Morán Valdivia, Rosa Basulto Morales, Eulogio Pimentel Vázquez, Alain Moreira Rubio.• Methodology for functional validation of genes with potential for the control of Spodoptera frugiperda. Claudia Rodríguez-de la Noval, Lianet Rodríguez-Cabrera, Milagro Ponce-Castillo, Albis Riverón-Hernández, Pilar Téllez-Rodríguez, Ivis Morán-Bertot, Daily Hernández-Hernández.• Microencapsulation of bioactive steroid in chitosan matrix

for agricultural use. Giselle Hernández Campoalegre, Vladimir Niebla Morejón, Anna Karelia Collado Coello, Elian Cruz Peñalver, Yamilet Coll García, Meilyn Rodríguez Hernández, Francisco Coll Manchado.• Results of work in evaluating suppliers taxed at agrobiotechnological IGBC productions. Working Projections for Agricultural Research. Norelbys Albelo Rondón, Ines Heredia Revilla, Ilena Garcia Martinez, Rubén Lopez Eghill, Michael Alderete Avalos, Alain Moreira Rubio, Iraima Perez Urriza, Elianed Pool, Yair Quiñones Maya, Jose Luis Marcelo Sainz, Carlos Arturo Garcia.• Incorporación de Investigaciones Biomédicas (IBM) al Sistema de Gestión de la Calidad del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología como modelo para áreas de Investigación, que incluye la Biotecnología Agropecuaria. Silian Cruz León, Caridad González Molina, Janet García Aguirre, Gerardo E. Guillén Nieto, Lidia Inés Novoa, Marisel Quintana Esquivel, Mercedes Ortega, Lorely Mila Caceres, Carlos A. García Sánchez, Lourdes Hernández Perez.

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DIRECCIÓN DE INFORMÁTICA Y COMUNICACIONES


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Dr. Ricardo Ricardo [email protected]

Teléfono: (53) 7250-4156

La Dirección de Informática y Comunicaciones, del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, se ocupa de la gestión de todo lo relacionado con

los medios de cómputo y su utilización, el desarrollo de programas, la automatización de procesos, así como las comunicaciones telefónicas y por radio.

Está integrada por 41 trabajadores, de los cuales 21 son profesionales y 13 son técnicos medio.

La dirección está organizada en las áreas de Dirección (2 trabajadores), Redes (8 trabajadores), Bioinformática (8 trabajadores), Desarrollo de Aplicaciones (9 trabajadores), Automatización de Procesos (5 trabajadores), Asistencia Técnica (4 trabajadores) y Comunicaciones (5 trabajadores).


Jefe del Departamento de BioinformáticaDr. Ricardo Bringas Pé[email protected]éfono (53) 7250-4156

Jefe del Grupo de Desarrollo de AplicacionesIng. Julio César Iglesias [email protected]éfono (53) 7250-4157

Jefe de la Sección de RedesIng. Ronny Córdova Dí[email protected]éfono (53) 7250-4157

DE INFORMÁTICA Y COMUNICACIONESDIRECCIÓN



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Jefe del Grupo de ComunicacionesTéc. Amaurys Cardoso Á[email protected]éfono (53) 7250-4211

Jefe del Grupo de Asistencia TécnicaIng. Wilfredo Alemán Ferná[email protected]éfono (53) 7250-4210


Trabajos en proyectos priorizados del CIGB

Heberprot-P®

• Análisis de datos de muestras de secuenciación profunda en el Centro de Genómica de la Universidad McGill de Toronto (MUGQIC).• Identificación de genes que explican las diferencias entre pacientes con UPD neuropáticos respondedores y no respondedores antes de ser aplicado el Heberprot-P®: propuesta de posibles marcadores y blancos de interés.

CIGB-300

• Ensayo EHPMA: participación en taller del ensayo y entrega de informe del análisis de datos qPCR en este ensayo.• Propuesta, discusión y aprobación del diseño de experimento de microarreglos en líneas de leucemia: selección de tecnología, condiciones y estimación del tamaño de la muestra.• Identificación de substratos de CK2 ubicados en rutas biológicas de interés.• Análisis bioinformático de los datos de microarreglos en células endoteliales de cordón umbilical humanas (HUVEC).

CIGB-378

• Búsqueda de anticuerpos para la validación experimental de posibles proteínas blanco cuya expresión fue previamente correlacionada con el coeficiente de inhibición del crecimiento celular al 50 % (GI50).• Se encontró asociación de algunas de estas posibles moléculas blanco a la no respuesta del Cisplatino.• Obtención de los gráficos de sinergismo a partir del análisis de datos experimentales del CIGB370 con drogas anticáncer como Paclitaxel, Cisplatino y Gemcitabine. Permitieron observar un antagonismo del CIGB-370 y el Paclitaxel,

cierto sinergismo con el Cisplatino en ovario (células SKOV-3) y un fuerte sinergismo con la Gemcitabine en páncreas (células PANC-1).

CIGB-128 (HeberPAG®)

• Se obtuvo una lista de genes posiblemente asociados con la respuesta del producto a partir del análisis de datos de microarreglos de las expresiones basales de clones respondedores al tratamiento con HeberPAG® o no. • Se identificaron los eventos biológicos que distinguen al tratamiento con HeberPAG®, con respecto a los interferones individuales, como resultado del análisis bioinformático de los datos de microarreglos en la línea celular U87MG.

Proyecto IL-15

Análisis de datos de evaluación de citoquinas en pacientes con osteoartritis y artritis reumatoide.

Proyecto de Investigaciones Agropecuarias

Experimento de secuenciación masiva en paralelo en boniato (Ipomoea batatas):• Se identificaron 30 568 genes, en al menos una de las muestras estudiadas.• Se identificaron 2293 nuevos transcritos de Ipomoea batatas.• Se predijeron 65 nuevos factores de transcripción de acuerdo con el análisis de anotaciones ortólogas utilizando la clasificación gene ontology (GO).• Se encontró por primera vez expresión de la sintetasa lupeol en Ipomoea batatas, lo que sugiere que el lupeol es producido en boniato.• Se identificaron enzimas que participan en las vías metabólicas del mevalonato y los triterpenoides, los que están relacionados con la atracción de los insectos.

Desarrollo de herramientas bioinformáticas

BisoGenet

• Conclusión de nueva versión de Bisogenet para la versión 3.0 de CytoScape.• Implementación de nuevos algoritmos para la expansión de redes.

BisoPharma

Se incorporó información de la base de datos DrugBank a BisoPharma, que contiene información sobre drogas,



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interacciones de tres drogas, drogas y sus blancos moleculares y entre drogas y las enzimas que las metabolizan.

SysBiomics

• Realizadas dos actualizaciones de la base de datos SysBiomics, del CIGB.• Se instaló y puso a punto la actualización de la base de datos SysBiomics en un nuevo servidor.

Instalación de nuevo servidor y expansión del existente

Se instaló un nuevo servidor y se mejoró el servidor con el que contábamos, lo que permitió un mejor balance del trabajo de servicios y desarrollo.

Proteómica

Protium: plataforma para el análisis y cuantificación de datos de alto flujo de proteómica:• Se rediseñó Protium, concebida inicialmente como una aplicación web, en un componente WebService (ProtiumWebService) y un cliente Windows (ProtiumApp 4.0). • Se reprogramó el código de Protium para la versión 4.5 del NetFramework, Visual Studio 2012, Windows Server 2012, SQL Server 2012 e IIS 8, Windows Presentation Fundation.• Desarrollo de componentes visuales para la manipulación de los espectros con tecnología WPF en el cliente ProtiumApp, una página para la visualización de corridas completas de espectrometría de masas, la cuantificación de péptidos y proteínas. Optimización del acceso a los detalles de la asignación y cuantificación en la página de asignación de precursores.• Se desarrolló un instalador con control de actualizaciones de la aplicación cliente de ProtiumApp 4.0.• Se incorporó la versión 3.2 del formato estándar MzXML para las corridas de LCMS. Esta versión permite representar los datos compactados.• Modificación de la base de datos Guarapon, actualización del servicio de importación ProtiumService y la aplicación cliente de importación ImportToGuarapon.• Instalación de Isotopica en Windows Server 2008, y definición de parámetros del IIS 8.

Análisis y cuantificación de señales:• Se reformuló el máximo de verosimilitud del modelo de separación de señales de Isotópica como linearización

iterativa, incorporando una métrica entrópica en forma cuantificable para la determinación del ruido.• Solución e implementación del modelo aplicando gradiente conjugado, e iteración de punto fijo para aproximar la constante de regularización (multiplicador de Lagrange) del componente entrópico, y la estimación del ruido en el modelo de cuantificación.• Aplicación del modelo para discriminar entre posibles combinaciones de la composición de señales superpuestas en un rango del espectro de masas. Aplicación del método al análisis de puentes de disulfuro en el factor de crecimiento epidérmico.• Programa para la determinación de momentos de picos individuales de la distribución isotópica.

Soporte informático

• Mejora en la infraestructura de la red. Cableado de más de 200 nuevos puntos de red y sustitución del cableado de red obsoleto. • Aumento del nivel de seguridad de la red con la implementación de nuevos mecanismos y actualización de varios sistemas. Obtención del dictamen de seguridad por Segurmática (empresa cubana de seguridad informática). • Implementación de nuevos servicios y mantenimiento de los existentes en la red del CIGB, de La Habana, que mejoran la gestión del trabajo y la seguridad informática.• Soporte a la organización y desarrollo de las actividades del CIGB, de La Habana: Congreso Biotecnología Habana 2014, auditorías, visitas y otras.


Plataforma para la Evaluación, Análisis e Interpretación del Efecto Combinado de Drogas. Yasser Perera, Jorge Fernández-de-Cossio, Jamilet Miranda, María del Carmen Abrahantes, María del Rosario Alemán, Maribel Guerra, Yolanda Gómez, Brizaida Oliva y Silvio Perea.

Estabilidad en la administración de la red y en el servicio de soporte técnico de redes y software. Ronny Córdova, Ulises Garriga, Leila Elba de la O, Maykel Cuevas, Giraldo Alonso, Adrián Fernández, Claudia Sosa, Ricardo Ricardo.

Intensa labor de colaboración y contratación de servicios que posibilitaron el uso de nuevas tecnologías de alto flujo de genómica funcional en el área de Farmacogenómica. Lidia Imés Novoa, Isabel Guillén, Hamlet Camacho, Dania M. Vazquez, Daniel Palenzuela, Iraldo Bellos, Julio R Fernandez,



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Maria Elena Ochagavía, Jamilet Miranda, Ricardo Bringas, Tamara Díaz, María Elena Fernández de Cossio.

Trabajos presentados en el congreso OMICS 2014, Varadero

Bioinformatics analysis of a sweet potato RNASeq experiment: from sequences to pathways. María Elena Ochagavía, Cathie Martin, Chris Watkins, Aylin Nordelo Valdivia, Rolando Morán. Conferencia.

BisoGenet 3.0: Building Biological networks in the Big-Data era. Alexander Martin Tornet, María Elena Ochagavía Roque, Jamilet Miranda Navarro, Carelys Suárez Arencibia, Jorge Fernández de Cossio, Ricardo Bringas Pérez. Conferencia.

Protium: a Platform for Analysis of Proteomics Data. Carlos M Aleaga Núñez; Jorge Fernández-de-Cossío, Luis Javier González, Jeovanis Gil, Aniel Sánchez, Lázaro Betancourt, Vladimir Besada. Cartel.


Bioinformatics analysis of a sweet potato RNASeq experiment: from sequences to pathways. María Elena Ochagavía, Cathie Martin, Chris Watkins, Aylin Nordelo Valdivia and Rolando Morán. Conferencia.

Cursos gerenciados o impartidos por el área

• Genómica, en la Universidad de La Habana.• Bioinformática, en la maestría del CIGB: Tendencias de la Biotecnología Contemporánea.• Redes de Genes y Proteínas, en el doctorado curricular en Bioinformática que organiza la Universidad de La Habana.

PUBLICACIONES

Se publicó un artículo científico en una revista internacional.

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DIRECCIÓN DE CONTROL DE LA CALIDAD


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

MSc. Lourdes Beatriz Costa Anguiano

[email protected] Teléfono: (53) 7250-4381;

7271-6022, Ext. 3210

La Dirección de Control de la Calidad del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, tiene como misión principal efectuar ensayos

analíticos para evaluar la calidad de los productos que se generan en la empresa y emitir resultados analíticos exactos y confiables. Además debe comprobar y poner en práctica todos los procedimientos de control y del muestreo, la preparación, la evaluación, el mantenimiento, el almacenamiento y la custodia de los materiales de referencias empleados en la institución, así como asegurar que se controle la estabilidad de los ingredientes farmacéuticos activos (IFA) y de los productos terminados (PT). También es la responsable de liberar o rechazar las materias primas y los productos intermedios, así como liberar y conservar los bancos de células primario y de trabajo.

La Dirección de Control de la Calidad tiene como recurso esencial su colectivo de trabajadores, dedicado a los objetivos y tareas en función de lograr un sistema de control eficiente en el CIGB. La Dirección promueve la identificación y el compromiso de este personal con la labor.

El área está comprometida con todos sus clientes en garantizar la eficiencia y eficacia en los resultados del trabajo, como vía de mejoramiento continuo de todos sus procesos.

La Dirección de Control de la Calidad mantiene una actualización constante en cuanto a las normas y regulaciones nacionales e internacionales aplicables a la industria biofarmacéutica, como necesidad imperiosa para la proyección del trabajo, en función de lograr la certificación de la calidad de los productos que ofrece el CIGB, la satisfacción y la confianza de los clientes.

DE CONTROL DE LA CALIDADDIRECCIÓN



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Para tales funciones, la Dirección está compuesta por dos departamentos y tres grupos de trabajo:

Departamento de Biológicos

En el Departamento de Biológicos se ejecutan las técnicas analíticas relacionadas con la determinación de la actividad biológica in vivo e in vitro, de todos nuestros productos; la cuantificación e identificación de los IFA y de proteínas contaminantes de hospederos por métodos inmunológicos (Elisa, Western blot, Inmunodot), la detección de ADN contaminante del hospedero por métodos de biología molecular como la hibridización y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), así como el almacenamiento y control de los bancos de células primarios. Además cuenta con el Laboratorio de Microbiología, encargado del control y monitoreo microbiológico de los procesos, las áreas y los sistemas auxiliares de las plantas de producción.

Departamento Físico-Químico

En el Departamento Físico-Químico se desarrollan los métodos de identificación y control de la pureza de los IFA mediante cromatografía líquida de alta eficacia, cromatografía gaseosa, electroforesis, isoelectroenfoque y mapeo peptídico. También utilizando métodos espectrofotométricos se cuantifican las proteínas, los aditivos y los preservantes en los IFA y los productos terminados. Además se realiza el control y la liberación de las materias primas empleadas en las producciones, y se controlan las propiedades físicoquímicas de los sistemas auxiliares a las producciones. Este departamento es el responsable de gerenciar las validaciones de técnicas analíticas en el CIGB, así como las inspecciones internas de Buenas prácticas de laboratorio en la Dirección de Control de la Calidad y otros laboratorios del CIGB.

Grupo de Estabilidad y Materiales de Referencias

El Grupo de Estabilidad y Materiales de Referencia de la Dirección de Control de la Calidad es responsable de los estudios de estabilidad de todos los IFA y los productos finales del CIGB y que son registrados por el Centro Estatal para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed). Elabora los materiales de referencia que se utilizan en las técnicas analíticas de todos los laboratorios del CIGB. Su elaboración incluye los estudios de caracterización, homogeneidad y estabilidad que permiten el establecimiento de cada uno de estos materiales. Además se efectúan las tareas relacionadas con la

bioestadística y la automatización de los cálculos necesarios en Control de la Calidad.

Grupo de Liberación Analítica

El Grupo de Liberación Analítica recibe y distribuye las muestras que llegan a la Dirección de Control de la Calidad para ser analizadas en los laboratorios del CIGB. A su vez, recibe los resultados analíticos emitidos por los laboratorios y confecciona el expediente analítico de cada lote de producto. Es responsable, además, de la recepción, conservación, control y destrucción de las muestras testigos de los productos terminados. Todas estas operaciones se realizan bajo procedimientos patrones de operación, con métodos validados, equipos calificados y materiales de referencia traceables para garantizar el cumplimiento de las buenas prácticas de laboratorio y las regulaciones internacionales que rigen el trabajo en los laboratorios de control.

Grupo de Administración y Costos

El Grupo de Administración y Costos tiene las funciones de control económico, cobro de servicios productivos y no productivos, control de inventario de activos fijos tangibles (AFT) y utensilios y herramientas tangibles (UHT). También implementa la planificación y ejecución de compras por normas de consumo de los diferentes laboratorios analíticos acorde con las especificaciones de calidad establecidas, así como la planificación y ejecución de inversiones.

Grupo de Aseguramiento analítico

Este grupo tiene entre sus principales funciones controlar el cumplimiento de las buenas prácticas de laboratorio, establecer y mantener los procedimientos para el control de los documentos que forman parte del sistema de gestión de los laboratorios, establecer un sistema de auditorías internas y el seguimiento de las acciones correctivas, asegurar la competencia mediante un programa de formación del personal: de los que operan equipos específicos, los que realizan ensayos o calibraciones y los que evalúan los resultados. Entre sus funciones también debe garantizar la validación de los métodos analíticos aptos para el fin previsto.

PRINCIPALES EJECUTIVOS DEL ÁREA

Jefa del Departamento de Biológicos MSc. Gladys Mabel Izquierdo López [email protected] Telefono: (53) 7250-4383; 7271-6022, Ext. 3212



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Jefa del Departamento Físico-Químico MSc. Galina María Moya Fajardo [email protected] Teléfono: 7250-4395; 7271-6022, Ext. 3256


• Respuesta analítica efectiva que ha permitido garantizar las entregas de productos solicitados a la red nacional y las principales exportaciones. Disminución de tiempos de análisis.• Cumplimiento de los indicadores de calidad del área y reducción del tiempo promedio de liberación analítica, con respecto a igual periodo del año anterior y ensayos no válidos. • Trabajo estable del área de esterilidad del CIGB con un desempeño satisfactorio e impacto positivo en la calidad y el tiempo del ensayo.• Adecuado aseguramiento analítico de materiales de referencia, reactivos biológicos e insumos. Aseguramiento adecuado al incremento del envío de reactivos y materiales para acciones de registro, comerciales y de transferencia tecnológica.• Intenso trabajo con resultados satisfactorios y en tiempo de la entrega de información para acciones de registro y comerciales. • Resultados satisfactorios en auditorias nacionales e internacionales.• Certificación de material de referencia de interferón pegilado como nacional y elaborado el primer material de referencia de PEG40 sin activar. • Resultados satisfactorios en confrontaciones analíticas reguladoras del Heberprot-P® en ANVISA/EU y Europa.• Montaje del método tinción para la detección del 1 % como límite de detección del método de electroforesis en geles de poliacrilamida en presencia de SDS para el control del ingrediente farmacéutico activo (IFA) de los antígenos de superficie (AgsHB) y de la cápsida (AgcHB) del virus de la hepatitis B.• Establecimiento y validación de RT-PCR para Heberprot-P®, alfa IFN y AgcHB.• Establecimiento y validación del ensayo de inmunogenicidad para el producto terminado de HeberNasvac®, AgsHB y AgcHB.• Establecimiento y validación del ensayo de inmunogenicidad para IFA de AgcHB.• Resultados satisfactorios en estabilidad:

- Aprobación de la extensión de la fecha de vencimiento de la Heberpenta®-L, de 24 a 36 meses.

- Aprobación de la fecha de vencimiento de 36 meses para la presentación de Heberpenta®-L en jeringas. - Aprobación por el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed) de la especificación (número de parte) del IFA de Heberprot-P® edición 09, con 12 meses de estabilidad. - Aprobación de la inclusión del IFN-PEG de ChangHeber en el Registro Sanitario de PEG-Heberon® con fecha de vencimiento de 24 meses en bulbos y de la nueva presentación en jeringas con 12 meses de estabilidad. - Aprobación de cambio de temperatura de –20 a –70 °C con la misma fecha de vencimiento para la P64K. - Resultados satisfactorios en la estabilidad a 25 ± 2 °C hasta 36 meses del placebo de Heberprot-P® producido en Praxis, que permitieron la fabricación satisfactoria de nuevos lotes en Vitoria, España. - Aprobación en Turquía de la estabilidad de 36 meses del Heberprot-P®, lotes de Praxis. - Demostración de 24 meses de estabilidad con el producto de la Planta de Productos Parenterales No. 3 del Biocen.

• Establecimiento del método de Actividad biológica para GCSF según la Farmacopea Europea.• Realización estudio de fotoestabilidad del Heberprot-P®. Primer estudio en el CIGB.• Culminación de la asistencia técnica de Control de la Calidad en la producción del PRP de Hib y GCSF en ChangHeber, China.• Análisis del contenido de PRP total y PRP libre por HPAEC-PAD a 80 lotes de Heberpenta®-L correspondientes a toda la campaña de 2013 y parte de la campaña de 2014.• Participación en el estudio colaborativo internacional para el análisis de un material de referencia de Hib de la Organización Mundial de la Salud (OMS).• Adiestramiento del personal de control de la calidad en el marco del proyecto de la Planta de vacunas del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel, de la República Bolivariana de Venezuela. • Análisis del estudio de caracterización físico química y de actividad biológica del patrón de bandas electroforéticos de la Heberkinasa®, que permitió la continuidad de la comercialización del producto en la República Bolivariana de Venezuela.• Establecimiento del ensayo de potencia in vivo (neutralización) para IPV en la vacuna hexavalente DPT-HB-HIB-IPV. Análisis de las primeras formulaciones experimentales.• Puesta en funcionamiento de la cámara fría nueva de estabilidad.



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• XVI Fórum de Ciencia y Técnica, CIGB, 2014.• Validación del procedimiento para la separación de la P64K por la técnica de electroforesis (SDS-PAGE). Mención.• Comparación de la Estabilidad de la P64K a -20 y -70 °C. Mención.• Validación de un ensayo inmunoenzimático para medir impurezas proteicas de la cepa hospedera de Pichia pastoris empleando reactivos comerciales. Destacado.• El establecimiento del material de referencia nacional de interferón pegilado completa los materiales de referencia necesarios para el control de la calidad de este producto. Destacado.• Estudio de fotoestabilidad del Heberprot-P®. Destacado.• Materiales de referencia de trabajo para EGFhr: su idoneidad para el control de la calidad del Heberprot-P®. Resultó relevante a nivel de base y municipal. Destacado, nivel provincial.• Demostración de la estabilidad de la vacuna Heberpenta®-L por 36 meses. Destacado.

CURSOS GERENCIADOS O IMPARTIDOS POR EL ÁREA

Cursos y conferencias impartidas en los módulos de Control de la Calidad de la Maestría Tendencias de la Biotecnología Contemporánea, del CIGB, de La Habana:• Métodos de la Estadística Aplicada en Biotecnología.• Estabilidad de Productos Farmacéuticos.• Control Microbiológico en la Industria Biofarmacéutica.• ICH Q6B. Especificaciones de los productos biotecnológicos y biológicos.• Validación de métodos analíticos.Curso impartido en la Maestría Ingeniería de los Procesos Biotecnológicos, del Instituto Superior Politécnico Enrique José Varona (ISPJAE): Estabilidad de Medicamentos.

VISITANTES EXTRANJEROS RECIBIDOS EN EL ÁREA

• Zandra Yamilet Diaz Zambrana. Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel (INHRR), República Bolivariana de Venezuela.• Kelly Naomi Kina Chin. Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel (INHRR), República Bolivariana de Venezuela. Entrenamiento en Control de la calidad en las técnicas de la vacuna Heberpenta®-L.

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DIRECCIÓN DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Ing. Yair Quiñónez [email protected]éfono: (53) 7250-4375

La Dirección de Aseguramiento de la Calidad del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, tiene como misión diseñar e implementar el

Sistema de Gestión de la Calidad, con el objetivo de garantizar que las investigaciones, los servicios brindados y los productos desarrollados y elaborados en el Centro se distingan por su calidad, seguridad y eficacia, mediante el cumplimiento de los requisitos enunciados en las regulaciones de las buenas prácticas aplicables, así como los requisitos reglamentarios y legales.

El área está comprometida con todos sus clientes (internos y externos), en cuanto a la eficiencia y eficacia en los resultados de su trabajo, como vía de mejoramiento continuo en todos sus procesos.La Dirección está compuesta por dos departamentos: Inspección y Auditoría, y Mejoramiento e Ingeniería de la Calidad, y los grupos de Metrología, Liberación de Lotes, Documentación, y Administración y Costos.

DEPARTAMENTO DE MEJORAMIENTO E INGENIERÍA DE LA CALIDAD

• Diseña e implementa el sistema de gestión de la calidad.• Garantiza la gestión de los programas y procesos siguientes: monitoreo ambiental de las áreas limpias y la evaluación del análisis de los resultados, validación y calificación, control de cambios, quejas y atención posventa a los clientes externos, retirada de productos del mercado, devoluciones, sistema de compras de equipamiento.• Coordina las acciones para la revisión de la calidad del producto, incluyendo los sistemas críticos y la revisión del sistema por la dirección.

DEPARTAMENTO DE INSPECCIÓN Y AUDITORÍA

• Gestiona el sistema de auditorías, que incluye auditorías al sistema de gestión de la calidad, a los estudios clínicos y preclínicos, a los procesos, a los proveedores de materias primas y componentes, y a las entidades a las que se contratan servicios de fabricación y ensayo.

DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDADDIRECCIÓN



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• Gestiona las no conformidades y el programa de acciones correctivas y preventivas. • Proceso de evaluación y selección de los proveedores.• Gestiona los riesgos de la calidad. • Realiza inspecciones de calidad: inspección a las áreas de producción para verificar el cumplimiento de las buenas prácticas de fabricación, inspecciona la calidad y la documentación de los envíos y los embarques, así como las autorizaciones de cambios de campañas en plantas multiproductos.

GRUPO CENTRAL DE DOCUMENTACIÓN

Establece los lineamientos que permiten el funcionamiento del sistema de documentación de la institución, pilar fundamental para garantizar el cumplimiento de las buenas prácticas. El sistema de documentación está conformado por el Grupo Central de Documentación de la Dirección de Aseguramiento de la Calidad, los grupos y la actividad de documentación en cada una de las plantas y áreas.

GRUPO DE LIBERACIÓN DE LOTES

Garantiza la liberación de los lotes de ingredientes farmacéuticos activos, así como de los productos terminados, sobre la base de la revisión integral de los expedientes de los lotes. Esto permite garantizar la salida de productos a otros países y a la red de distribución nacional con la calidad requerida. En el grupo también se prepara la documentación que acompaña los envíos, de acuerdo con la solicitud del cliente. Además, la liberación de los lotes que se fabrican fuera de Cuba, sobre la base de la contratación de los servicios.

GRUPO DE METROLOGÍA

Garantiza la calibración y verificación de los instrumentos de medición de acuerdo con el plan anual de calibración de las plantas y áreas. Los trabajos de este grupo o los servicios que se contratan, cumplen los requisitos de las buenas prácticas de fabricación y de laboratorio. El grupo tiene la responsabilidad de garantizar la trazabilidad de las mediciones a través de patrones nacionales o internacionales.

GRUPO DE ADMINISTRACIÓN Y COSTOS

Coordina las actividades relacionadas con los cobros y los gastos de la Dirección de Aseguramiento de la Calidad, las inversiones y las compras de materiales, el control de los activos fijos tangibles (AFT), los utensilios y las herramientas tangibles (UHT).


Jefa del Departamento de Inspección y AuditoríaMSc. Inés Heredia [email protected]éfono: (53) 7250-4390

Jefa del Departamento de Mejoramiento e Ingeniería de la Calidad MSc. Kenia María Vázquez [email protected]éfono: (53) 7250-4373

Jefe del Grupo de Metrología Téc. Leonel Godinez [email protected]éfono: (53) 7250-4360

Jefe del Grupo Central de Documentación Ing. Ana M. Cinza Gonzá[email protected]éfono: (53) 7250-4376

Jefe del Grupo de Liberación de Lotes Téc. Carmen Diana Pérez Pé[email protected]éfono: (53) 7250-4390

Grupo de Administración y Costos Téc. Luis Álvarez Á[email protected]éfono: (53) 7250-4391

RESULTADOS RELEVANTES DEL ÁREA

• Certificación por el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos de los sistemas productivos: Planta 1 (HB), Planta 5 y 6 (ingrediente farmacéutico activo (IFA) de INF α, INF γ, GCSF y P64K), Planta 7 (IFN pegilado), Planta 9 (factor de transferencia), Planta 10, Planta 4 (IFA de factor de crecimiento epidérmico parenteral), Praxis (Heberprot-P®), Clausen (Heberpenta®-L), Planta de Productos Parenterales No. 3 del Biocen (IFA Hib), Saokim (Proctokinasa®).• Resultados satisfactorios en las inspecciones de la autoridad reguladora de Nueva Zelanda y Trillium Technologies Group Inc.• Recertificación del sistema de gestión de la calidad del CIGB por las ISO 9001:2008 y ampliación del alcance al



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desarrollo y la producción de productos biotecnológicos para uso agrícola y veterinario.• Mantenimiento del sistema de liberación de lotes que permitió cumplir los planes de producción y ventas planificados.• Efectivo trabajo de salidas productivas en el extranjero y de transferencia de tecnologías a Venezuela, China, Vietnam y Uruguay. • Confección de la metodología para la evaluación y certificación de las bases de datos en el Open Clínica. Implementación en el estudio de farmacocinética de Heberprot-P® MUSE.

PROYECTOS INTERNACIONALES

• Comité Técnico Cuba-España (Heberprot-P®).• Mantener el asesoramiento en la Planta, de la Empresa Socialista de Producción de Medicamentos Biológicos (Espromed Bio, C.A.) de Venezuela, en cuanto a los procesos de envasado, inspección, etiquetado, embalaje y liofilizado de vacunas y otros productos biológicos, según sea el caso.


• Curso Básico de Buenas Prácticas de Fabricación 2014. • Asignatura Aspectos Básicos de la Calidad y Herramientas, en la Maestría Tendencias de la Biotecnología Contemporánea, CIGB 2014. Se coordinó el programa de la asignatura, se comenzó a impartir las clases y entregó la documentación asociada al curso.• Participación en tres talleres para evaluar tesis de maestría que están en preparación.• Se impartió la conferencia: Garantía de la Calidad en las producciones biotecnológicas, en la Maestría de la Universidad de Oriente.• Participación en el Consejo Científico del CIGB, coordinando la Comisión de Analítica y Regulaciones.• Se preparó e impartió una presentación en el Consejo Científico del CIGB sobre actualización de las regulaciones y certificación de buenas prácticas de manufactura en el primer mundo.

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DIRECCIÓN DE RECURSOS HUMANOS


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Oswald Ravelo [email protected]éfono: (53) 7250-4562;

7271-6022, Ext. 1189

La Dirección de Recursos Humanos del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, tiene la misión de propiciar la mejora continua de la

Organización, a partir de las estrategias de cambio y de desarrollo de los recursos humanos, además de preparar la fuerza de trabajo para que sea capaz de llevar adelante cada una de las investigaciones y las producciones de la institución. La capacitación y el desarrollo continuo del capital humano es uno de los pilares fundamentales, con el fin de satisfacer la demanda de conocimiento requerida con una calidad superior y asegurar el cumplimiento de las normas de seguridad y salud ocupacional.

Esta Dirección tiene un carácter estratégico y se incluye entre los planes globales de la Organización. Entre sus principales tareas está garantizar y cumplir con la planificación, el reclutamiento, la selección, ubicación, capacitación, evaluación y retribución de los recursos humanos. A su vez, es el área encargada de la aplicación de la legislación vigente sobre salarios, empleo, seguridad social, salud y capacitación.

Sus funciones y atribuciones específicas son:

a) Organizar, dirigir y controlar la actividad de formación de los trabajadores y cuadros, a partir de la identificación de las necesidades de aprendizaje. Seleccionar los candidatos y coordinar los programas de formación. Organizar y controlar la actividad de seguridad social y salud en el trabajo.b) De conjunto con el sindicato, organizar el sistema de estimulación a los trabajadores, en correspondencia con sus resultados en la prestación de servicios.c) Organizar los programas de captación y selección del personal, mediante los procedimientos establecidos.d) Cumplir con la legislación vigente sobre la contratación del personal.

DE RECURSOS HUMANOSDIRECCIÓN



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e) Conciliar la fluctuación del personal, las altas, las bajas, los ajustes y las modificaciones de las categorías ocupacionales.f) Controlar las sanciones disciplinarias impuestas a los trabajadores y velar por su rehabilitación. g) Tramitar licencias, certificados, peritajes médicos, accidentes de trabajo y trayecto, y jubilaciones de los trabajadores.h) Cumplir con la legislación vigente para garantizar el éxito de la evaluación del desempeño, clasificación y valoración de los puestos de trabajo, y analizar la estimulación salarial y la administración del salario.i) Propiciar que se mantenga una atmósfera de trabajo favorable facilitando el desarrollo integral del personal, desde el punto de vista laboral, social y cultural, y su identificación con la institución.j) Garantizar todo lo referente al aseguramiento del salario de los trabajadores a partir de una correcta elaboración y confección de la prenómina y la nómina de los trabajadores; cumpliendo los procedimientos establecidos por el Ministerio de Finanzas y Precios.k) Promover y mantener el más alto grado de bienestar físico, mental y social en los trabajadores de todas las profesiones, prevenir los daños a la salud causados por las condiciones de trabajo, proteger a los empleados de los riesgos resultantes de la presencia de agentes perjudiciales, así como colocar y mantener al trabajador en un empleo acorde con sus aptitudes fisiológicas y sicológicas. En síntesis, se busca adaptar el trabajo al hombre y cada hombre a su trabajo.l) Trabajar de conjunto con las comisiones de categorización tecnológica y científica para la promoción de los trabajadores.m) Garantizar el cumplimiento de la política laboral.

PRINCIPALES EJECUTIVOS DEL ÁREA Jefa del Departamento de Formación Ada Triguero [email protected]éfono: (53) 7250-4172; 7271-6022, Ext. 1187

Jefa del Departamento de Recursos Laborales Mirlen Diaz [email protected]éfono: 7250-4111; 7271-6022, Ext. 1104

RESULTADOS FUNDAMENTALES

• Se logró mantener la certificación ISO 9001:2008.• Cuatro compañeros se mantuvieron en misiones como promotores del Heberprot-P®.• Desarrollo satisfactorio de los sistemas de pago por resultados (Resolución 17/2014) y en moneda convertible en el CIGB, la cual continúa su aplicación y atención permanente. Se alcanzaron ejecuciones del pago de las nóminas en moneda nacional entre los días 5 y 7 de cada mes. Ello ha permitido adelantos en los cierres contables y entrega de las informaciones estadísticas en tiempo.• Ejecución de los proceso de categorización científicas y tecnológicas incluidas las recalificaciones de estas últimas.• Participación satisfactoria en inspecciones y auditorías externas.• Programa de actividades desarrolladas de atención al hombre con un resultado relevante en el plan vacacional.• Ejecución de los chequeos médicos de los trabajadores ocupacionalmente expuestos y no expuestos a riesgos de su salud. Así como exámenes especializados a los trabajadores que laboran con solventes orgánicos, al operario de fumigación y a los trabajadores del área de Ingeniería que trabajan con plomo. • Organización y ejecución de toda la entrega de los equipos de protección personal.• Ejecución satisfactoria de las acciones de capacitación y desarrollo.• Se mantuvo por nueve años consecutivos la condición de Centro Destacado Municipal y Provincial en el Trabajo del Fórum de Ciencia y Técnica.Se comenzó el trabajo de implementación de las competencias laborales en el CIGB.

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HEBER BIOTEC S.A.

HEBER BIOTEC S.A.

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INTRODUCCIÓN

GERENTE GENERAL

MSc. Madaisy Cueto Sá[email protected]

Teléfono: (537) 250 4528

HEBER BIOTEC S.A.

Heber Biotec S. A. comercializa productos biotecnológicos y farmacéuticos, servicios tecnológicos, proyectos de investigación y desarrollo (I+D) y derechos

de propiedad industrial que contribuyen a mejorar la salud y el bienestar de la población y a preservar el medio ambiente.

Se proyecta a consolidar los resultados en los mercados actuales y penetrar el mercado del primer mundo para multiplicar la contribución de la empresa a la economía de nuestro país.

Líneas fundamentales de productos que comercializa

• Heberfarma: medicamentos y vacunas para uso humano. • Heberdiag: reactivos y medios de diagnóstico.• Hebervet: productos para uso veterinario.• Heberplant: productos agrícolas.• Hebertec: transferencia tecnológica.

Proveedores

• Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología• Centro de Biopreparados (Biocen)• Laboratorios LIORAD• Laboratorios AICA• Laboratorios Novatec

HEBER BIOTEC S.A.

HEBER BIOTEC S.A.

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Subdirectora General MSc. Ibis de Atocha Portuondo Martí[email protected] Teléfono: (537) 250 4528

Subdirector General MSc. Ramón Aloy Peñ[email protected] Teléfono: (537) 250 4528


• La empresa exporta a más de 30 países.• Se cubrió la demanda nacional de los medicamentos que comercializa la empresa. • Los productos y vacunas del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) impactan de manera positiva en la atención a 28 enfermedades que aquejan a la población cubana. • Se mantienen las alianzas estratégicas con los socios comerciales en China, Brasil, Rusia, Vietnam, Argentina, Ecuador, Venezuela y Sudáfrica, entre otros territorios.• La empresa mantiene la certificación ISO 9001:2008 de su sistema de gestión de la calidad.• Se obtuvieron 6 nuevos registros y renovaciones de registros sanitarios de productos en el exterior.• Se logra mantener una alta visibilidad de CIGB-Heber y los productos a través de una amplia cobertura de prensa, la participación en eventos y la disponibilidad de materiales promocionales.

CARTERA DE PRODUCTOS

Heberfarma

Vacunas

• Heberpenta®-L: vacuna pentavalente líquida contra la difteria, tétanos, tosferina, hepatitis B y Haemophilus influenzae de tipo b.• Heberbiovac HB®: vacuna antihepatitis B recombinante.• Quimi-Hib®: vacuna conjugada contra el Haemophilus influenzae de tipo b.

Farmacéuticos biológicos

• Heberprot-P®: producto que favorece la cicatrización de las úlceras del pie diabético y reduce el riesgo de amputación.

• Heberon Alfa R®: interferón alfa-2b humano recombinante, antiviral, antiproliferativo e inmunomodulador.• Heberon alfa R® líquido: interferón alfa-2b humano recombinante. Solución líquida inyectable.• Heberkinasa®: estreptoquinasa recombinante sin albúmina, destinada a combatir el infarto del miocardio.• Hebervital®: factor estimulador de colonia de granulocitos.• PEG-Heberon®: interferón alfa-2b humano recombinante conjugado al polietilenglicol

Medicamentos genéricos

• AntihipertensivosAmlodipina 10 mg, tabletas (anticálcico)Verapamilo clorhidrato 5 mg, inyección (anticálcico)Captopril 50 mg, tabletas (inhibidor de la enzima conversora de la angiotensina, ECA)Enalapril 10 y 20 mg, tabletas (ECA)Carvedilol 6.25 y 12.5 mg, tabletas (α y β bloqueador)

• Analgésico e hipnoanalgésicoTramadol 100 mg, inyección

• Analgésico y antipiréticoÁcido acetil salicílico 500 mg, tabletas

• Anestésicos y adyuvantes de la anestesiaBupivacaína 0.5 %, inyecciónKetamina 10 y 50 mg, inyecciónLidocaína clorhidrato 2 %, 20 mL, inyecciónLidocaína 2 %, inyecciónProcaína 2 %, inyecciónAtracurio besilato 25 mg, inyección (adyuvante de la anestesia)Bromuro de pancuronio 4 mg, inyección (adyuvante de la anestesia)Fentanilo 0.05 mg, inyección (adyuvante de la anestesia)Mefenesina 500 mg, tabletas (relajante muscular)Midazolam 10 y 15 mg, inyección (relajante muscular)Pancuronio 4 mg, SP (relajante muscular)Succinilcolina 50 mg, inyección (relajante muscular)Lido 2 %-Epin1:50000, carpule (anestésico dental)Lido 2 %-Epin1:80000, carpule (anestésico dental)Mepivacaína 3 %, inyección (anestésico dental)

• Antihipertensivo y antianginosoDiltiazem 25 y 50 mg, inyección

• Antagonista de la benzodiazepinaFlumazenil 1 mg, inyección

• Antiagregante plaquetarioClopidrogel 75 mg, tabletas

•Antinflamatorio no esteroideo Diclofenato 75 mg, inyección (analgésico)

HEBER BIOTEC S.A.

HEBER BIOTEC S.A.

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• AntiulcerososCimetidina 300 mg, inyecciónOmeprazol 20 mg, tabletas y 40 mg, inyecciónRanitidina 50 mg, inyección

• Antibióticos Azitromicina 250 cápsulas y 500 mg, tabletas Gentamicina 10 y 80 mg, inyecciónKanamicina 50 y 100 mg, inyección

• Agente antinfecciosoSulfadiazina sódica 10 %, inyección

• AnticoagulanteHeparina 25 000 U, inyección

• AntidiabéticoGlimepiride 1 y 4 mg, tabletas

• AntieméticosDimenhidrinato 10 y 50 mg, inyecciónOndansetron 4 y 8 mg, inyección

• Agentes inotrópicosDobutamina 250 mg, inyecciónDopamina 200 mg, inyección

• AnsiolíticoDiazepam 10 mg, inyección

• AntihipoglicemianteDextrosa 20 y 50 %, inyección

• AntihistamínicosDifenhidramina 20 mg, inyecciónLoratadina 10 mg, tabletas

• AntimicóticosFluconazol 150 mg, cápsulasMiconazol 200 mg, inyección

• AntimigrañosoSumatriptán, inyección

• Antiosteoporósico Ácido zolendrónico 4 mg, inyección

• Antipsicótico Risperidona 3 mg, tabletas

• AntirretroviralesEstavudina 40 mg, cápsulasIndinavir 200 mg, cápsulasLamivudina 150 mg, tabletasNevirapina 200 mg, tabletasTriviral 30 mg, tabletasZidovudina 100 mg, cápsulas

• AntiasmáticosMontelukast 5 y 10 mg, tabletas

• BroncodilatadorAminofilina 250 mg, inyecciónFenoterol 0.5 mg, inyección

• AntiviralRibavirina 200 mg y 400 mg, cápsulas

• CardiotónicoDigoxina 0.5 mg, inyección

• Corticosteroide, antinflamatorio y antialérgicoBetametasona 4 mg, inyección

• Diurético y osmóticoManitol 250 mg, inyección

• ElectrolitosCloruro de calcio 10 %, inyecciónCloruro de potasio 1.8638 g inyección (equivalente a 25 mmol (mEq) K+)Gluconato de calcio 10 %, inyecciónGluconato de potasio 0.30 g, inyección (equivalente a 1.28 mmol (mEq) K+)Sulfato de magnesio 10 %, inyección

• Hipertrofia benigna próstataTerazosina 2 y 5 mg, tabletas

• HipnoanalgésicosMorfina clorhidrato 10 y 20 mg, inyecciónPetidina 50 y 100 mg, inyección

• Hipolipemeante (Statina)Atorvastatina 10 y 20 mg, tabletas

• OxitócicoOxitocina 10 U, inyección

• LaxanteBisacodilo 5 mg, tabletas

• NeurolépticosHaloperidol 5 mg, inyección

• Solución hidratanteDextrosa 5 %, inyección

• VasoconstrictorNorepinefrina bitartrato 8 mg, inyección

• Vasoconstrictor, broncodilatadorEpinefrina 1 mg, inyección

• Vasodilatadores periféricos Pentoxifilina 300 mg, inyección y 400 mg, tableta lib cont.

• VitaminasHidroxocobalamina 0,1 y 1.0 mg (vitamina B12), inyecciónPiridoxina clorhidrato 25 y 50 mg (vitamina B6), inyecciónTiamina clorhidrato 100 mg (vitamina B1), inyección

Heberdiag

Kits de diagnóstico

• AuBioDot antigliadinas: para la detección de anticuerpos contra gliadinas en suero humano.• HeberFast Line embarazo: para el diagnóstico temprano de embarazo mediante la orina.

HEBER BIOTEC S.A.

HEBER BIOTEC S.A.

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• HeberFast Line MaterniTest: autoensayo para el diagnóstico temprano del embarazo mediante la orina.• HeberFastLine Rotavirus: prueba rápida, de un paso, para la detección de rotavirus en heces fecales.

Hebervet

Veterinario

• Gavac®: vacuna recombinante contra la garrapata del ganado bovino. Boophilus sp.

Acuícola

• Acuabio 1®: suplemento nutricional para organismos acuáticos.

Heberplant

• HeberNem®-S: producto biológico para el control de nemátodos parásitos de plantas.

Hebertec

• Transferencia de tecnologías desarrolladas por el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología para la producción de medicamentos recombinantes.

• Desarrollo conjunto de proyectos de investigación y desarrollo.• Desarrollo y escalado de procesos de producción de productos recombinantes.• Diversos servicios técnicos, asesorías y entrenamiento de personal en el campo de la biotecnología moderna.

PARTICIPACIÓN EN FERIAS, EXPOSICIONES Y TALLERES

• X Jornada de la Ciencia y XI Jornada Científica.• II Convención Internacional “Tecnología y Salud” 2014.• VII Seminario Internacional de Sanidad Vegetal 2014.• III Congreso Internacional. LABIOFAM 2014 y el II Simposio de Productos Naturales en la Terapia contra el Cáncer.• XXIV Congreso Panamericano de Ciencias Veterinarias.• VIII Congreso Nacional de Microbiología y Parasitología, el V Congreso Nacional de Medicina Tropical y el III Seminario de la Infección por el VIH/sida en Cuba.• Evento Bio Industry Expo en Korea 2014.• XXXII Feria Internacional de La Habana (FIHAV 2014).• Biotecnología Habana 2014.• Congreso Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas.

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DIRECCIÓN DE PROPIEDAD INTELECTUAL


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Dr. Rolando Páez [email protected]éfono: (53) 7250-4439

La Dirección de Propiedad Intelectual del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, tiene la misión de asegurar la protección de

todos los resultados novedosos de la institución, mediante la modalidad de Propiedad Intelectual más adecuada para cada caso, y orientar la actividad de investigación-desarrollo (I+D) hacia nichos de alta novedad y actividad inventiva, capaces de generar resultados de alto impacto en el mercado, y así lograr la mejor explotación de cada uno de los productos y proyectos generados.

Política de propiedad intelectual del CIGB

• Estrategia de propiedad intelectual por proyecto de investigación.• Análisis periódico de los resultados de I+D en cuanto a su patentabilidad u otra forma de protección de la propiedad intelectual.• Estrategia de publicación definida de acuerdo con las características de cada proyecto.• Uso de la información de patentes como fuente de actualización del estado del arte y análisis estratégico.• Utilización del know-how como forma de protección de activos intangibles. • Utilización de la transferencia de tecnología como producto.

La cartera de patentes del CIGB posee 59 invenciones y 1275 patentes y solicitudes internacionales, distribuidas en los principales mercados del mundo. Más del 80 % de ellas entre países del primer mundo (Estados Unidos, Europa, Japón, Canadá, entre otros) y los llamados países emergentes. El 69,5 % de las patentes se han otorgado.

DIRECCIÓNDE PROPIEDAD INTELECTUAL



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Primer Mundo. 53 %(US, EP, CA, JP, AU)

BRICS + AR + KR + MX. 27 %

Resto del mundo. 20 %

40 - 49 patentes

21 - 39 patentes

10 -20 patentes

< 10 patentes

Figura B

Figura A

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> 50 patentes

US: Estados Unidos; EP: Oficina Europea de Patentes; CA: Canadá; JP: Japón; AU: Australia; AR: Argentina; KR: Corea del Sur; MX: México; BRICS: Brasil, Rusia, India, China y Sudáfrica

DIRECCIÓN DE NEGOCIOS Y DESARROLLO DE PROYECTOS


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Ernesto López [email protected]éfonos: (53) 7271-2397,

250-4120

DE NEGOCIOS Y DESARROLLO DE PROYECTOSDIRECCIÓN

El Grupo de Negocios y Desarrollo de Proyectos (GNDP) es un Departamento del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) adjunto a la Dirección General,

que se ocupa de la gerencia y negociación internacional de proyectos de investigación y desarrollo en el área de la biotecnología. Coordina la estructuración y ejecución de negocios de proyectos de alta novedad, desde etapas tempranas, hasta convertirlos en productos competentes en los mercados de la más elevada exigencia reguladora.

Incluye al Grupo de Gestión de Promotores del Heberprot-P®, encargado del aseguramiento nacional e internacional de la logística en recursos humanos y viales de Heberprot-P® para el cumplimiento exitoso de los programas de atención integral al paciente diabético con úlceras del pie diabético, en Cuba y otros países.


Vicedirector Ricardo Silva Rodríguez [email protected]éfonos: (53) 7271-2397, 250-4121

Ejecutiva en Gerencia y Negociación de Proyectos del CIGBMiriela Gil [email protected]éfonos: (53) 7271-2397, 250-4121

Ejecutiva en Gerencia y Negociación de Proyectos AgropecuariosMarianela García Siverio [email protected]éfonos: (53) 7250-4113



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Ejecutiva en Gerencia y Negociación de ProyectosAriadna Hernández Garcí[email protected]éfono: (53) 7250-4113

Ejecutivo en Gerencia y Negociación de ProyectosJorge Martín [email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 1020

Ejecutiva en Negociación y Gerencia de ProyectosPromoción de ProyectosWebmáster Mailyn Palmero [email protected]éfono: (53) 7250-4608

Ejecutiva en Negociación y Gerencia de ProyectosYunarquis Fernández [email protected]éfono: (53) 7250-4608

Promoción de Proyectos Internacionales y Ejecutivo en Negociación y Gerencia de ProyectosManuel Raíces Pérez-Castañ[email protected]éfonos: (53) 7271-2397; 250-4121

Director del Grupo de Gestión de Promotores Heberprot-P® (GGP)Osvaldo Reyes [email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 1144

Asesor Jurídico y Miembro de GGPIsrael Miranda [email protected]éfono: (53) 7250-4113

Miembro de GGPRegla Soto [email protected]éfono (53) 7250-4113

Miembro de GGPKarelia Macías [email protected]éfono: (53) 7250-4113

Miembro de GGPAmelia de la Caridad Gonzá[email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 1130

Miembro de GGPErick Hernández [email protected]éfono: (53) 7250-4113

Miembro de GGPJoanna Rodríguez [email protected]

Miembro de GGPReina Lourdes Morejó[email protected]

Promoción de proyectos internacionalesJosé Ángel Acosta [email protected]éfono: (53) 7271-6022, Ext. 1190

ChoferesArturo Enríque de RojasVicente García Ruiz

AdministradoraDaysi [email protected]: (53) 7271-6022, Ext. 1141

SecretariaIvona Gutiérrez [email protected] Teléfono: (53) 7250-4608

RESULTADOS RELEVANTES RELACIONADOS CON EL HEBERPROT-P®

• Organización y celebración del Congreso Internacional Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas:• Organización de 4 cursos nacionales y 2 internacionales sobre Programa de Atención Integral al Paciente con Úlcera del Pie Diabético con el uso de Heberprot-P®.• Desarrollo de una metodología para el análisis desglosado de la situación de la diabetes y las úlceras del pie diabético en cualquier país.• Participación exitosa en negociaciones internacionales dirigidas al registro y uso de Heberprot-P® en Rusia,



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Venezuela, Ecuador, Panamá, Colombia, Turquía, Brasil y Kuwait entre otros.• Apoyó el trabajo de introducción de Heberprot-P® en Europa a través de la interacción directa con Praxis Pharmaceuticals y entrenamiento de especialistas médicos de Portugal y Eslovaquia.• Edición e impresión del Portafolio de Negocios del CIGB 2014-2015.• Ejecución de 3 recorridos nacionales para promover Congreso Controlando la Diabetes y sus complicaciones más severas. Secretario Científico del Congreso Internacional Controlando la Diabetes y sus complicaciones más severas.

RESULTADOS RELEVANTES PARA PROYECTOS EN BIOTECNOLOGÍA MÉDICA • Resultados satisfactorios de la negociación del proyecto NASVAC con Francia.• Inicio de intereses de negociación con el proyecto CIGB-128 en Eslovaquia.

RESULTADOS RELEVANTES PARA PROYECTOS EN BIOTECNOLOGÍA AGROPECUARIA

• Constitución de la Empresa Mixta Lukang Heber para fabricar varios productos de Agbiotec del CIGB (Hebernem, Acuabio 4 y 1 kestosa (alimento prebiótico). Se ha avanzado en la identificación de socios potenciales como parte de la apertura de los mercados de la Empresa Mixta.• Participó como parte de los comités organizadores de los Congresos Biotecnología Habana 2014 y Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas.

• Participación en las mesas de trabajo de la Comisión Mixta Intergubernamental Cuba-Rusia. Se lograron incluir los productos y proyectos de la esfera agrobiotecnológica en su agenda de trabajo para el 2015.


• Premio Anual de Comunicación 2014 a la Gerencia Heberprot-P® otorgado por la Asociación Cubana de Comunicadores Sociales.

TRABAJOS PRESENTADOS EN EL CONGRESO CONTROLANDO LA DIABETES Y SUS COMPLICACIONES MÁS SEVERAS, CUBA 2014

• Manuel Raíces: Programa nacional de atención integral al paciente con UPD en Cuba con el uso del Heberprot-P®: conferencia en simposio 4. • Ernesto López Mola: Proyección futura del programa Heberprot-P®: conferencia plenaria de clausura del congreso.


Celebración de 6 cursos nacionales e internacionales en el tratamiento integral del paciente diabético con el uso de Heberprot-P®.


Se atendieron más de 100 visitas de negocios durante 2014.

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DIRECCIÓN DE INVESTIGACIONES CLÍNICAS


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Dra. Verena Lucila Muzio González

[email protected]éfonos: (53) 7208-7378,

(53) 7271-6022 ext. 1250, 1251.(53) 7208-0428 ext. 106

La Dirección de Investigaciones Clínicas (DIC) del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, tiene la misión de ejecutar la actividad de estudios

clínicos (EC) y la farmacovigilancia (FV) de las vacunas y los fármacos obtenidos en la institución. Para ello cuenta con un colectivo de profesionales y técnicos especializados y capacitados científicamente en todas las etapas de investigación en seres humanos.

En la actividad fundamental participan tres departamentos de EC con monitores dedicados a coordinar, diseñar y controlar la ejecución y terminación de los protocolos de investigaciones clínicas (IC) en Cuba y otros países. Un grupo de FV se encarga de monitorear el perfil de seguridad de los productos en IC y durante su uso poscomercialización.

El grupo de Estadística garantiza la gestión óptima de los datos del ensayo y los análisis estadísticos correspondientes. Mientras que los especialistas en Informática contribuyen a la automatización de procesos y actividades, como los diseños electrónicos de avanzada para la entrada remota de datos clínicos.

Un grupo de Suministros se encarga de la distribución de los productos farmacéuticos y demás insumos necesarios hacia los sitios clínicos. Además se encarga de la elaboración, el control y la gestión de las listas aleatorias, de garantizar el enmascaramiento, las condiciones de conservación y la contabilidad trazable de los productos de IC durante cada ensayo.

El grupo de Laboratorio Clínico trabaja con muestras biológicas de pacientes. Se encarga de investigaciones bioquímicas e inmunológicas muy específicas, que no son habituales en el sistema nacional de salud: estudios farmacocinéticos, farmacodinámicos y de inmunogenicidad.

El grupo de Gestión y Control coordina talleres de capacitación y satisface los servicios de imprenta, alojamiento, transportación y otras acciones logísticas para monitores y pacientes durante las IC.

DE INVESTIGACIONES CLÍNICASDIRECCIÓN



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El cumplimiento de la política de la calidad lo gerencia el grupo de Documentación y Buenas Prácticas Clínicas, basado en la NC-ISO 9001:2008 y en las guías internacionales de buenas prácticas clínicas y de laboratorio.

Los servicios brindados por la DIC se distinguen por su eficacia, eficiencia, confiabilidad, reproducibilidad, seguridad y calidad, basados en evidencias para la toma de decisiones y en las relaciones mutuamente beneficiosas con los proveedores y clientes.

Los directivos y los trabajadores del área se mantienen permanentemente comprometidos en aumentar la satisfacción y cumplir las expectativas de los clientes.

La meta de la DIC consiste en mantener la excelencia, la avanzada y el liderazgo en la actividad de IC; alcanzar los estándares de calidad más elevados; contribuir al desarrollo de la industria biotecnológica nacional con nuevas alternativas terapéuticas, para enfermedades que constituyen problemas de salud en la población cubana e insertar los productos del CIGB en los mercados internacionales más exigentes.


Jefe del Departamento de Heberprot-P®

Dr. Julio Esmir Baldomero Herná[email protected]éfonos: (53) 7208-7379, (53) 7208-0428, Ext. 108

Jefe del Departamento de Ensayos Clínicos en Oncología y Otros ProyectosHugo Nodarse Cuní[email protected]éfonos: (53) 7208-7379, (53) 7208-0428, Ext. 107

Jefe del Departamento de Ensayos Clínicos de VacunasDra. Zurina Cinza Esté[email protected]éfonos: (53) 7208-0428 Ext. 133


La DIC contribuyó directamente al objetivo del CIGB, de desarrollar nuevos productos y mercados según el Plan Estratégico 2013-2017. La actividad de investigaciones clínicas tuvo participación en 184 sobrecumplimientos, de ellos 149 considerados como extraordinarios en las evaluaciones de resultados mensuales por el Consejo de

Dirección. En el Consejo Científico del CIGB se aprobaron 23 logros científico-técnicos y 26 logros institucionales, entre cuyos autores había miembros de la DIC.

Entre los resultados generales:

• Se ejecutaron 96 objetivos de investigaciones clínicas. De ellos, 56 incluidos en el plan de tareas relacionadas con la cartera de 12 proyectos novedosos de investigación y desarrollo (I+D) y 7 productos registrados. Se investigaron clínicamente 20 indicaciones médicas, en las líneas principales de enfermedades infecciosas, cánceres, cicatrización, citoprotección y neonatales, entre otras.• La autoridad nacional reguladora cubana aprobó dos solicitudes de autorizo para nuevos ensayos clínicos (SAEC).• Los dos EC propuestos para iniciarlos en el país en 2014 recibieron el dictamen de aprobación del Ministerio de Salud Pública de Cuba.• Se elaboraron 24 informes finales de EC, que se entregaron a la autoridad nacional reguladora cubana. • La autoridad nacional reguladora cubana emitió dictámenes de aprobación de cinco informes finales de estudios clínicos con cuatro productos del CIGB.• Resultados satisfactorios en las auditorías internacionales recibidas durante el año.• Continuaron los avances en EC y definición de estrategias en los proyectos de I+D negociados con los productos de primer nivel, como el CIGB-247, CIGB-300, HeberNasvac® y Heberprot-P®.• Se respondieron las solicitudes de información clínica para la obtención o renovación de registros sanitarios en Cuba y en el extranjero, con énfasis en los principales productos de primer nivel.• Se consolidaron las informaciones de poscomercialización en varios países, que permiten un mejor conocimiento del perfil de seguridad y efectividad del Heberprot-P®, y se avanzó en la recogida de esta información a escala nacional e internacional.• Se obtuvieron resultados satisfactorios en la auditoría efectuada por la Oficina Nacional de Normalización (ONN) y la Asociación Española de Normalización y Certificación (Aenor), que concedieron la recertificación del sistema de gestión de la calidad de EC del CIGB, por quinto año consecutivo, a partir de la certificación lograda en el año 2009.• Se incrementó la divulgación científica de resultados clínicos en revistas de alto impacto, con énfasis en los productos de primer nivel.• Se contribuyó a fortalecer la cartera de patentes del CIGB.



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Heberprot-P®

• Se capacitaron en técnicas de farmacovigilancia a los profesionales de salud que se incorporaron a cumplir misión de salud en Ecuador y a los integrantes de los equipos multidisciplinarios que se incorporarán posteriormente.• Se participó en el proceso metodológico de selección y preparación de nuevos promotores del Programa de Atención Integral al Paciente con Úlcera del Pie Diabético con el tratamiento del Heberprot-P® en Cuba y Venezuela.• Tres compañeros del área se integraron como promotores en el Programa de Atención Integral al Paciente con Úlcera del Pie Diabético con el tratamiento del Heberprot-P® en Cuba y Venezuela; dos de ellos comenzaron la misión en 2014.• Se conformó el informe final del estudio de seguridad y efectividad de uso del Heberprot-P® en los servicios médicos de las FAR. Se realizó el II Taller CIGB-FAR.• Se obtuvieron resultados satisfactorios en la auditoría de Trillium, de seguimiento del estudio de farmacocinética del Heberprot-P® MUSE.• Se preparó el expediente de solicitud de registro sanitario en Brasil, y entrega satisfactoria a Anvisa.• Se conformó el Informe de Heberprot-P®: Evaluación de la efectividad y seguridad en la República Bolivariana de Venezuela. 2008-2013.• Se realizó de manera exitosa del V Taller Internacional sobre Aplicación del Heberprot-P® en Pacientes con Úlceras del Pie Diabético.• Se sobrecumplió el plan de inclusión de pacientes en el Programa del Buen Vivir del Diabético en Venezuela para el año 2014.• Se sobrecumplió el plan nacional de inclusión de pacientes en el Programa de Atención Integral al Paciente con Úlcera del Pie Diabético con el tratamiento del Heberprot-P®, en el año 2014.• Se elaboraron protocolos demostrativos del uso del Heberprot-P® en el tratamiento de la úlcera del pie diabético y enviaron a dos países. Igualmente se cumplieron misiones técnico-comerciales solicitadas por la gerencia del proyecto. Se obtuvo la aprobación del registro sanitario para el producto en cinco países y su renovación en Cuba y Argentina.• Se participó en la XV reunión nacional del programa “Controlando la Diabetes y sus complicaciones más severas”.• Se recibieron y evaluaron los reportes clínicos de uso del producto en cuatro países: Ecuador, Panamá, República Dominicana y Nicaragua.• Se inició un importante estudio epidemiológico de

incidencia de la diabetes mellitus y la úlcera de pie diabético en varias localidades de la República Bolivariana de Venezuela.

CIGB-300

• Se emitió el dictamen de aprobación por el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed) para el Informe final de EC Fase I, con el producto administrado por vía endovenosa en pacientes con tumores sólidos. Este estudio corroboró la información farmacocinética y los principales eventos asociados al mecanismo de acción del CIGB-300 en células tumorales que habían sido obtenidos en anteriores ensayos clínicos con el producto empleado por otras vías de administración.• Elaboración, entrega y dictamen de aprobación por el Cecmed para el anexo de seguimiento de los pacientes del estudio en tumores sólidos. Las conclusiones mostraron una tendencia global al incremento de la supervivencia por encima del límite superior esperado en este tipo de pacientes, cuya expectativa de vida era solo de 3 a 6 meses antes comenzar el tratamiento con el CIGB-300.• Elaboración y entrega al Cecmed del informe final del estudio clínico exploratorio del tratamiento con CIGB-300 en leucemias agudas refractarias o en recaídas, leucemia mieloide del anciano y síndromes mielodisplásicos con exceso de blastos. Este estudio permitió la experimentación y análisis de posibles biomarcadores genómicos del efecto del CIGB-300 en leucemia mieloide aguda, así como obtener evidencias experimentales de inducción de apoptosis inmunogénica por el CIGB-300 esta enfermedad.

CIGB-247

• Resultados satisfactorios de la auditoría de una experta extranjera, contratada por la contraparte, para la revisión de la marcha y los resultados del plan clínico del CIGB-247 en tumores sólidos.• Culminación satisfactoria de la etapa de ejecución clínica del estudio Centauro-2, con cinco meses de adelanto del cronograma previsto. El informe final del estudio fue elaborado, entregado y recibió el dictamen de aprobación por el Cecmed.•Demostración a largo plazo (3 años) del efecto clínico e inmunogenicidad del candidato vacunal CIGB-247 en pa-cientes con tumores malignos sólidos, en etapa clínica avan-zada, no respondedores a otras terapias oncoespecíficas.• Sobrevida de más de 2 ½ años en pacientes con tumores malignos sólidos, en etapa clínica avanzada, no respondedores a otras terapias oncoespecíficas.



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• Aval de seguridad oftalmológica para estudio en nueva indicación terapéutica: degeneración macular asociada a la edad. Aprobación del Cecmed para la solicitud de autorizo de ensayo clínico en este tipo de pacientes.

HeberNasvac®

Inicio de la ejecución clínicas del estudio clínico fase II para la evaluación de esquemas, rutas y dosis.

CIGB-500

Aprobación del Cecmed para la solicitud de autorizo de ensayo clínico en infarto agudo del miocardio: Estudio AMIGOS.

CIGB-814

Rápida inclusión de los 18 pacientes con artritis reumatoide planificados en el ensayo clínico, sin ocurrencia de reporte de eventos adversos. Finalización del tratamiento a los pacientes en el primero y segundo nivel de dosis.

Heberpenta®-L

Dictamen de conformidad del Cecmed referente al Informe Final del estudio Fase IV de Seguridad.

Interferón alfa pegilado a PEG-48 kDa

El estudio clínico fase II-III en hepatitis C crónica continúa satisfactoriamente su etapa de ejecución clínica, en Brasil. En 2014 concluyó la fase II, con resultados que corroboraron la caracterización farmacocinética y farmacodinámica del producto halladas en la fase clínica anterior (fase I). En estos momentos la fase III se encuentra en 75 % de inclusión de pacientes y en el primer semestre de 2015 se debe completar el tamaño de muestra planificado para el estudio. Los datos clínicos disponibles muestran un porcentaje de respuesta virológica temprana en correspondencia con la hipótesis del estudio y un perfil de seguridad que continúa con menor incidencia e intensidad de eventos adversos para el Interferón Pegilado (CIGB-BioM) respecto al producto control. El estudio recibió los informes satisfactorios de la inspección Anvisa-Cecmed en dos sitios clínicos, que se unen a otros dos que recibieron igual distinción en el 2013.

HeberPAG® - HeberFeron®

• Primera confirmación de eficacia terapéutica para la extensión nacional del uso del HeberPAG® como tratamiento de los carcinomas basocelulares.

• Nuevas evidencias de posible mecanismo de acción y marcadores de respuesta a tratamiento con HeberFeron®, mediante el análisis bioinformático de la expresión diferencial de genes en clones de gliomas malignos respondedores y no respondedores.• Entrega al Cecmed del expediente del HeberFeron® para solicitar su registro sanitario.• Obtención de cumplimiento de buenas prácticas clínicas en inspección realizada por el Cecmed en el Hospital Provincial Universitario Arnaldo Milián Castro, de Villa clara, para el estudio clínico BRATINC de tolerancia de la aplicación intravenosa del HeberFeron® en tumores cerebrales difusos recurrentes o progresivos.• Concedida patente para HeberFeron® en la República de la India.• Concedida patente para HebePAG® en Corea del Sur.

PEG-Heberon®

Elaboración del Programa para el diagnóstico y tratamiento de las hepatitis virales B y C en la República Bolivariana de Venezuela y la República de Belarús.

Quimi-Hib®

Resultados satisfactorios de la inspección del Cecmed al ensayo clínico de la vacuna Quimi-Hib® y su variante adyuvada en fosfato de aluminio en lactantes sanos, según el esquema de primovacunación 6-10-14 semanas.

Heberon alfa R

Informe del perfil de seguridad del uso del Heberon alfa R® en 2466 individuos tratados entre los años 1986 y 2010.

Heberprovac®

Dictamen de aprobación del Informe final Fase II del candidato vacunal Heberprovac® contra el cáncer de próstata avanzado por el Cecmed.

GRUPO DE ESTADÍSTICAS

En el año 2014 el Grupo de Estadísticas se vinculó a 10 proyectos o productos. Entre lo más significativo estuvo el incremento del uso de diseños adaptativos como principal variante adoptada en años anteriores. En total hubo 40 informes estadísticos, distribuidos de la siguiente manera:• Informes finales: 12



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• Análisis estadísticos relacionados con estudios clínicos: 14• Diseños de estudios clínicos: 14

GRUPO DE INFORMÁTICA

• Se mantuvo una actualización permanente de la información y mejora continua en el diseño y accesos disponibles de la página web del área, visible en la intranet del CIGB. • Se optimizó e incrementó el sistema de entrada remota de datos clínicos desde las instituciones hospitalarias participantes de las investigaciones clínicas.

GRUPO DE SUMINISTRO

• Se garantizó la disponibilidad, conservación, preparación y distribución de productos e insumos solicitados para 19 investigaciones clínicas, en 31 sitios clínicos de 11 provincias cubanas. • Se atendieron 1143 solicitudes con garantía en el cumplimiento de las normas de buenas prácticas clínicas, acorde con lo establecido en los Procedimientos Patrones de Operaciones, referentes al proceso de aleatorización de los sujetos en los ensayos clínicos, a la guía para el etiquetado de las formas farmacéuticas destinadas a los estudios clínicos utilizando técnicas de enmascaramiento, el manejo, preparación y entrega de productos e insumos destinados a los ensayos clínicos, así como la conservación de los medicamentos. Se destacó la inmediatez de las entregas de los recursos solicitados, sin quejas o no conformidades por parte de los clientes, que incluyó el envío de 1139 bulbos de productos enmascarados destinados a la investigación clínica en el extranjero.• El sistema de suministros de medicamentos e insumos de la Dirección de Investigaciones Clínicas fue auditado directamente en dos ocasiones por compañías internacionales, y en una ocasión por el Cecmed e indirectamente en cada una de las auditorías e inspecciones que ocurrieron en los sitios clínicos con productos e insumos distribuidos por el grupo. En todos los casos quedó avalada la calidad de la actividad por las autoridades correspondientes, sin no conformidades.

SECCIÓN DE DOCUMENTACIÓN Y BUENAS PRÁCTICAS CLÍNICAS

Realizó inspecciones de buenas prácticas clínicas (autoinspecciones) a 31 instituciones hospitalarias vinculadas a los ensayos clínicos del CIGB.

SECCIÓN DE GESTIÓN Y CONTROL

Se encargó de garantizar la efectiva actividad de tramitación y control del uso adecuado de los medios de transportación alquilados, con un cumplimiento satisfactorio de forma permanente de los ensayos clínicos, farmacovigilancia y de la actividad de promoción del Heberprot-P® en Cuba. En total se garantizaron más de 3500 solicitudes de servicios logísticos en 15 provincias del país, relacionados con 30 ensayos clínicos, con un desempeño exitoso y alto nivel de satisfacción de los clientes.


Premios anuales de la Academia de Ciencias de Cuba correspondientes al año 2013:

• Isis Belkis Yera Alos, Pedro A. López-Saura y colaboradores. Confirmación de la efectividad y seguridad del factor de crecimiento humano recombinante en el tratamiento de la úlcera de pie diabético durante la poscomercialización en Cuba.• Liz Alvarez-Lajonchere y colaboradores. Relación de la respuesta de anticuerpos y la especificidad de la respuesta celular frente al virus de la hepatitis C con el daño hepático y el resultado del tratamiento antiviral.• Ana Aguilera Barreto y colaboradores. Proctokinasa®, nuevo medicamento para el tratamiento de las hemorroides agudas.

Premio Citma, 2014

Isis Belkis Yera Alos, Pedro A. López-Saura y colaboradores. Confirmación de la efectividad y seguridad del factor de crecimiento humano recombinante en el tratamiento de la úlcera de pie diabético durante la poscomercialización en Cuba. Premio Especial del Ministerio de Ciencia, Tecnología y Medio Ambiente (Citma), por su resultado de mayor integración.

Fórum de Ciencia y Técnica, 2014

• Odalys M. González Díaz y colaboradores. Impacto del uso de Heberprot-P® en la reducción del índice de amputaciones mayores en pacientes cubanos con úlcera de pie diabético. Resultado Relevante en el Fórum de Ciencia y Técnica, Instancias de Base, Municipal y Provincial.• Isis Yera Alós y colaboradores. Seguridad a largo plazo del Heberprot-P®: riesgo potencial de cáncer y uso



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del medicamento. Cruce de bases de datos. Resultado Relevante en el Fórum de Ciencia y Técnica, Instancias de Base, Municipal y Provincial.• Lidia González Méndez y colaboradores. Seguridad, evaluación Farmacocinética e indicios de eficacia de la administración intravenosa del CIGB-300 en pacientes con tumores sólidos refractarios al tratamiento oncoespecífico. Resultado Relevante en el Fórum de Ciencia y Técnica, Instancias de base y Municipal.

EVENTOS Y CURSOS

A los miembros de la DIC correspondieron las coordinaciones logísticas o la organización y contribución científica de 22 talleres de EC vinculados a 9 productos y 14 objetivos anuales. Específicamente se efectuaron cinco talleres de expertos relacionados con igual cantidad de productos, cuatro talleres de unificación de criterios sobre nuevos protocolos de EC y tres para presentar y discutir los resultados de EC concluidos. Participaron más de un centenar de investigadores y hubo una representación de más de 10 especialidades médicas, con destaque principal para los angiólogos, ginecólogos, oncólogos, virólogos, hepatólogos, oftalmólogos, dermatólogos, neonatólogos, gastroenterólogos y nefrólogos.• Como parte del plan de capacitación planificado en la DIC, seis especialistas recibieron cursos de superación profesional; fundamentalmente aquellos comprendidos en la Mención en Ensayos Clínicos de la maestría Tendencias de la Biotecnología Contemporánea impartida por el CIGB, en los planes de doctorado curricular en Modelación Matemática y sus Aplicaciones, así como en idiomas inglés y francés. • Una compañera defendió exitosamente su tesis de doctorado en Ciencias Médicas y un compañero defendió su tesis de maestría en Ensayos Clínicos, en ambos casos con tutores miembros de la DIC. • La actividad docente en la DIC incluyó la participación de un grupo de sus miembros como profesores de pregrado y posgrado, en el año dos de sus miembros recibieron la categoría docente como profesores titulares. • La docencia de la DIC se complementa con el desempeño de varios de sus miembros en los tribunales de grado científico tanto en el CIGB como en la Escuela Nacional de Salud Pública y de otros en los tribunales del Fórum Provincial de Ciencia y Técnica. • Otra importante actividad docente de posgrado es la integración de tres miembros de la DIC en el Comité Académico de la maestría impartida por el CIGB, destacando las responsabilidades como jefe de la mención en EC, más

los coordinadores y profesores principales de las asignaturas:- Dr. Hugo Nodarse Cuní: miembro del Comité Académico. Jefe de la Mención en Ensayos Clínicos. Profesor coordinador y principal de la asignatura Metodología y Práctica en EC.- Dra. C. Verena Lucila Muzio Gonzáles: miembro del Comité Académico. Profesora de la asignatura Metodología y Práctica en EC. Profesora principal del Curso Aspectos específicos de ensayos clínicos en Vacunas y Oncología.- Dr. Pedro López Saura: miembro del Comité Académico. Profesor de la asignatura Metodología y Práctica en EC.- MSc. Carmen María Valenzuela Silva: coordinadora y profesora principal de la asignatura Métodos de la Estadística Aplicada en Biotecnología. Profesora de la asignatura Metodología y Práctica en EC.- Dr. Francisco Hernández Bernal: coordinador y profesor principal de la asignatura Principios de Epidemiología.- Dr. C. Antonieta Herrera Buch: profesora de la asignatura Metodología y Práctica en EC.- Dra. Odalys Margarita González Díaz: profesora de la asignatura Metodología y Práctica en EC.- Dra. Isis Belkis Yero Alós: profesora de la asignatura Principios de Farmacología.- MSc. Angela Tuero Iglesias: profesora de la asignatura Métodos de la Estadística Aplicada en Biotecnología.- MSc. Maria M. Vázquez Marcos: profesora de la asignatura Biología Molecular.

TESIS DEFENDIDAS

Tesis de doctorado

Isis Yera Alós. Vigilancia poscomercialización de la efectividad y seguridad del factor de crecimiento humano recombinante (Heberprot-P®) en Cuba (2007-2010). Tesis de doctorado en Ciencias Médicas. Tutor: Dr. Pedro López Saura. Marzo 2014.

Tesis de maestría

Ivan Campa Legrá. Implementación de metodología para validar la cadena de frío de los productos en investigación clínica. Tesis de Maestría en Tendencias de la Biotecnología Contemporánea. Mención en Ensayos Clínicos. Tutor: Dra. Antonieta Herrera Buch. Julio 2014.

PUBLICACIONES

Se publicaron cuatro artículos científicos y un capítulo de libro.

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DIRECCIÓN DE SEGURIDAD Y PROTECCIÓN


INTRODUCCIÓN

DIRECCIÓN DE SEGURIDAD Y PROTECCIÓN

DIRECTORA

Ing. Elizabeth García Muñ[email protected]

Teléfono: (53) 7250-4556

La Dirección de Seguridad y Protección, del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, de La Habana, tiene como misión mantener un sistema de gestión

de la seguridad. Ello es posible mediante el cumplimiento del Programa de Seguridad que garantiza el cumplimiento de las regulaciones nacionales del Ministerio de Ciencia, Tecnología y Medio Ambiente (Citma), del Ministerio del Interior, del Convenio de Biodiversidad, del Protocolo de Cartagena y de las convenciones internacionales que regulan la utilización de agentes biológicos, químicos y radiológicos. Como parte de esta Dirección se inserta la defensa, que requiere mantener actualizados los planes de reducción de desastres y otros afines.

La Dirección de Seguridad y Protección está conformada por varios grupos:

• Protección contra incendios.• Seguridad Biológica, Química y Radiológica, que mantiene el control de la bioseguridad.• Salvaguardia, que centraliza las colecciones de cultivos, cumple la convención de no proliferación de armas químicas, identifica, analiza y evalúa los riesgos biológicos en los proyectos de la institución.• Seguridad Interna, que asegura y protege físicamente la institución.• Seguridad Informática.• Defensa.


• Efectiva actividad reguladora en materia de seguridad biológica, química y radiológica.• Destacados resultados en la preparación para la defensa y la defensa civil en el CIGB.• Resultados satisfactorios en las inspecciones del Ministerio del Interior, de Cuba, a las sustancias controladas y al Grupo de Seguridad Interna.

DE SEGURIDAD Y PROTECCIÓNDIRECCIÓN

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DEPARTAMENTO DE REGISTROS Y REGULACIONES


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INTRODUCCIÓN

Jefa de DepartamentoMSc. Marisol Cruz Díaz

[email protected]éfono: 250 4188

El Departamento de Registros y Regulaciones del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) gerencia el cumplimiento de las regulaciones nacionales

y extranjeras durante la revisión de la información que va dirigida a los expedientes de ensayos clínicos y de registro. Evalúa y clasifica los cambios en los procesos productivos, de calidad y control de los productos del CIGB (como parte de su comité de expertos), de acuerdo con la regulación nacional del Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed). Gerencia la confección de los expedientes de los ensayos clínicos y de registros de los productos del CIGB, y los tramita ante el Cecmed.

Ejecuta los trámites de autorización y modificación de los ensayos clínicos, la solicitud de licencias de operaciones farmacéuticas en Cuba y otros países. Confecciona los expedientes de registro en otros países, de acuerdo con las regulaciones específicas de sus autoridades de medicamentos. Interactúa con los expertos de otros países y responde sus requerimientos, por medio del trabajo con las áreas del CIGB y de otros centros, para garantizar el proceso de inscripción, renovación y modificación de los productos del CIGB, representados comercialmente por Heberbiotec S.A. y GNDP. Esta última actividad permite la comercialización de los productos del CIGB en otros países, con un elevado índice de exportación. Entre ellos destaca el Heberprot-P®, como producto líder del CIGB.


Este año, el Departamento de Registros y Regulaciones centró sus esfuerzos en la confección de los expedientes de registro de varios productos del CIGB y en los trámites para nuevos registros, renovaciones y modificaciones de registros, autorizaciones y modificaciones de ensayos clínicos, y en la solicitud de licencias de operaciones farmacéuticas ante las autoridades reguladoras de Cuba y otros países. Participó activamente en la etapa de desarrollo de nuevos productos y en la evaluación de los cambios a los registros sanitarios. Asesoró para registrarlos en Cuba y otros países, según las regulaciones vigentes.

DIRECTOR

DE REGISTROS Y REGULACIONES DEPARTAMENTO



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Los objetivos de trabajo definidos por el Departamento se han correspondido con los objetivos estratégicos del CIGB en 2014:

• Cumplir el plan de ventas anual del 2014.• Lograr un impacto en la sustitución de importaciones agroalimentarias.• Desarrollar nuevos productos y mercados según el plan estratégico 2014-2017. • Mantener y mejorar los estándares de calidad del CIGB.• Alcanzar un nivel de excelencia de la fuerza laboral del CIGB en lo científico-técnico, económico y cultura general (formación, categorización, educación y cultura general).

Se efectuaron las tramitaciones en el Registro Sanitario Nacional e Internacional con el cumplimiento satisfactorio permanente. Se respondieron más de 140 solicitudes del área comercial (Heberbiotec S.A.), para trámites de licitación, exportaciones y registros sanitarios de varios productos en otros países. Para esto fue necesario gerenciar la información técnica y documental con las áreas del CIGB y otros centros (Biocen, Finlay, Centro de Inmunología Molecular, CIGB de Sancti Spíritus, CIGB de Camagüey), teniendo en cuenta las regulaciones y particularidades idiomáticas de cada región.


• Se aprobó la renovación del registro sanitario del Heberprot-P® en Cuba hasta junio de 2019: es el resultado más importante de este registro.• Se renovó el registro sanitario del Heberprot-P® en Argentina hasta febrero de 2019, lo que permitió la continuidad de su exportación.• El 17 de febrero se aprobó el registro sanitario del Heberprot-P® en Rusia: primer registro del Heberprot-P®

en un país perteneciente a los BRICS, como resultado de más de 4 años de trabajo.• El 19 de septiembre se aprobó el registro sanitario del Heberprot-P® en Turquía: país de elevados estándares reguladores. Con este resultado suman 29 registros del Heberprot-P® en 23 países.• Se aprobó el registro sanitario del Heberprot-P® en Bielorrusia.• Se logró el registro del Heberprot-P® en El Salvador por 5 años. El registro del Heberprot-P® en El Salvador permite comenzar la comercialización del producto en este territorio. • Se aprobó la renovación del registro sanitario de Heberbiovac HB® 100 μg en Bielorrusia, lo cual permite

continuar las exportaciones y participar en las licitaciones comerciales anuales.• Se aprobó la renovación del registro sanitario de Gavac® en el IMV Cuba, hasta diciembre de 2018.• Se aprobó la renovación del registro de Quimi-Hib® en Cuba, hasta septiembre de 2019: resultado más importe de este producto en el año.• El Cecmed aprobó la inclusión de la Planta de Parenterales 3 del Biocen en el registro sanitario de Heberkinasa®. Este resultado permite disponer de nuevas capacidades productivas, con estándares de buenas prácticas de fabricación (GMP) superiores a los existentes. Esta ha sido una prioridad y una necesidad para la comercialización de Heberkinasa® en los mercados existentes y buscar nuevos mercados con un alto nivel de exigencia.• Se obtuvo la inclusión del ingrediente farmacéutico activo (IFA) de la vacuna Quimi-Hib® producida por el CIGB, en el Registro de Medicamentos de la Federación Rusa. Este resultado permite la continuidad del proyecto con la contraparte. Heber Biotec S.A. se convierte en suministrador exclusivo de este antígeno para la producción de las vacunas pentavalentes desarrolladas por Microgen para el mercado ruso.• Se incluyó la Planta 10 del CIGB en el Registro Sanitario para efectuar las operaciones de inspección visual, etiquetado, envase y embalaje a otras unidades terminadoras externas.• Venezuela aprobó la inclusión de la Planta PP3 en el registro sanitario del Heberprot-P®. En junio, el Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel de Venezuela aprobó la modificación del Registro Sanitario de Heberprot-P®, debido a la inclusión de la Planta PP3 y la Planta de Envase del Biocen. Disponer de estas nuevas capacidades productivas ha sido una prioridad y una necesidad para la comercialización de Heberprot-P® en varios territorios.• Se incluyó Changchun Heber Technology Co., Ltd., de China, como productor del ingrediente farmacéutico activo y del producto terminado de PEG-Heberon® en el Registro Sanitario del fabricante. Se incluyó la presentación de 180 μg/mL en jeringuillas prellenadas. La aprobación de la Planta de ChangHeber en China, que cumple las buenas prácticas de fabricación, para la producción del IFA y del producto terminado de PEG-Heberon® abre nuevos horizontes para la promoción del producto en otros países. • Se incluyó en el registro sanitario de Heberpenta-L® la presentación de la vacuna en jeringas prellenadas en Clausen, Uruguay. La presentación en jeringas prellenadas de la vacuna abre nuevas alternativas para mercados más exigentes, ya que se incrementa la seguridad en su aplicación por eliminar la manipulación en el proceso de preparación.



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• Dos especialistas participaron en el comité técnico efectuado en Cuba, Varadero, de la vacuna terapéutica de la hepatitis B, HeberNasvac®, con la compañía francesa ABIVAX.• Se respondieron todas las preguntas de ANVISA que dan continuidad a la evaluación del registro sanitario del Heberprot-P® en Brasil. Hubo intercambios con esta autoridad para el esclarecimiento de diversos temas. Se confeccionó la RDC 50 para comenzar el nuevo proceso de registro sanitario.• Se participó en auditoría de Chemo a estudios Centauro. Esta avala los resultados de seguridad del candidato vacunal CIGB-247 en pacientes con afecciones oncológicos, y apoya la continuidad del desarrollo clínico del producto.• Se participó en los resultados positivos tras la auditoría de buenas prácticas de fabricación según los requerimientos exigidos por la Administración de Alimentos y Drogas (FDA) de Chemo.• Se participó en el proyecto de transferencia tecnológica de la vacuna Quimi-Hib® y PEG-GSCF entre CIGB y ChangHeber.• Excelentes resultados de la misión en China con la Empresa Mixta Lukang Heber, con la participación de uno de los especialistas del departamento.• El Cecmed aprobó los cambios menores a los registros sanitarios de 2013. • Se obtuvieron resultados satisfactorios en la evaluación preliminar del Cecemd al expediente de solicitud de registro sanitario de HeberFeron®. • Envió de información del registro de CIMAvax-EGF® en Colombia, como respuesta a las preguntas de Bioven para la aprobación del ensayo clínico en Alemania, información para el registro de Corea de las materias primas de origen biológico, actualización de los estudios de estabilidad de continuidad.• Obtención del registro sanitario de bulbos desnudos de Heberpenta®-L en Venezuela.• Exitoso desempeño del expediente IMPD de HeberNasvac® (con un impacto positivo en los resultados de negociación y aplicación para ensayos clínicos por la compañía francesa ABIVAX y Generium, de Rusia), y del expediente de registro CTD para su inscripción en Cuba por el Cecmed. El expediente IMPD del producto HeberNasvac®, de acuerdo con las regulaciones ICH de la Autoridad de Medicamentos Europea (EMA) ha impactado en el desarrollo de las acciones de negocio y acuerdos con la compañía ABIVAX, de Francia, y Generium, de Rusia. Durante 2014, las áreas del CIGB y Biocen involucrados en el proyecto intercambiaron y trabajaron junto con los expertos franceses. El trabajo tenía el objetivo de elevar el estándar de este expediente de acuerdo con las regulaciones actuales de la industria biofarmacéutica,

lo que permitió la versión del IMPD de la empresa ABIVAX para la aplicación del ensayo clínico multinacional en Asia.• En diciembre se presentó la solicitud de inscripción del registro de HeberNasvac® en el Cecmed.

PARTICIPACIÓN EN DESARROLLO CLÍNICO DE PRODUCTOS

Se participó en la preparación y presentación de trámites de SAEC/MOD DE EC Cecmed, de acuerdo con lo planificado por la Dirección de Investigaciones Biomédicas, del CIGB, la Dirección de Desarrollo Tecnológico y la Dirección de Investigaciones Clínicas.

HEBERPROVAC®: VACUNA TERAPÉUTICA PARA CÁNCER DE PRÓSTATA

• Se logró la aprobación del ensayo clínico provincial fase III y la ejecución exitosa del taller nacional.• El Cecmed aprobó el informe final FII-III del ensayo clínico de Heberprovac®, y emitió el cetificado. Resultados positivos nacionales para el desempeño y aplicación de este producto.

CIGB-500: PARA CARDIOCICATRIZACIÓN Y CITOPROTECCIÓN

Gerencia de las respuestas a los comentarios del Cecmed relacionados con el trámite de SAEC para el ensayo clínico en pacientes con IMA. En marzo se presentó el trámite al Cecmed, en curso respuesta a CD2. El Cecmed emitió el certificado de aprobación MODEC.

CIGB-530: FIBROSIS HEPÁTICA

Se participó en el taller de expertos “Hacia ensayos clínicos con el péptido CIGB-530” (marzo).

VACUNA SIDA

Se solicitó el MOD ensayo clínico fase I en pacientes seropositivos al VIH-1 con el candidato vacunal Teravac contra el sida, al Cecmed. El Cecmed emitió el certificado de aprobación del MOD EC.

HEBERNASVAC®: VACUNA TERAPÉUTICA CONTRA LA HEPATITIS B

El Cecmed aprobó el ensayo clínico fase II-IIb en Cuba. Se comenzó la inclusión de pacientes y la realización de pruebas.



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ENSAYOS CLÍNICOS DE HEBERNASVAC® EN OTROS PAÍSES

• Se perfeccionó el IMPD del CIGB según las regulaciones europeas, que sirvió de base para el IMPD de las compañías extranjeras ABIVAX, de Francia y Generium, de Rusia.• Concluyó el IMPD de HeberNasvac® de ABIVAX sobre la base del IMPD del CIGB, luego de 3 años de intercambio con esta compañía.• Se aprobó la solicitud de ensayo clínico de HeberNasvac® en Nueva Zelanda-ABIVAX.• Se aprobó la solicitud de ensayo clínico de HeberNasvac® en Australia.•Se presentó el IMPD y la solicitud para el ensayo clínico multinacional en nueves países de Asia. • Concluyó el IMPD de la compañía rusa Generium y se presentó la solicitud de autorización de ensayo clínico de HeberNasvac® en Rusia.

CÁNCER

CIGB-247

• Se presentó el informe final del ensayo clínico Centauro 2 con las vacunas CIGB-247-V y CIGB-247-A, al Cecmed. El Cecmed emitió la conformidad.• Se presentó SAEC CELIMAR al Cecmed. El Cecmed emitió la aprobación del EC.

Oncología molecular

• Se presentaron al Cecmed, los protocolos de los estudios clínicos del CIGB-300 en los nichos de leucemia.• Se notificaron los eventos adversos y modificaciones menores al Cecmed.

Proyecto CIGB-552

Se presentó la SAEC fase I (estudio Argos), al Cecmed. En febrero y en julio se enviaron las respuestas a los comentarios por las evaluadoras de la AR.

AUTOINMUNIDAD

001. CIGB-814

Se informó el inicio del ensayo clínico al Cecmed. Se presentaron los trámites de modificaciones al protocolo aprobado por el Cecmed, y el reporte de posibles reacciones adversas.

APROBACIONES NACIONALES EN LA MODIFICACIÓN DE REGISTROS SANITARIOS POR EL CECMED

Se aprobaron 10 cambios mayores sugeridos por el Cecmed, a los expedientes de registro de Heberbiovac HB®, Heberpenta®, Heberpenta®-L y Heberprot-P®.

Aprobaciones de ensayos clínicos por el Cecmed

• El Cecmed aprobó seis informes finales de ensayo clínico, fases II y III.• El Cecmed aprobó cuatro informaciones adicionales para trámites de registro que están en curso.

Actualización de los resúmenes de calidad de los productos del CIGB aprobados por el Cecmed

Heberbiovac HB®, Heberpenta®, Heberon Gamma R®, HeberPAG®, Hebervital®, PEG-Heberon®, Heberitro®, Heberon Alfa R® líquido y Heberon Alfa R® liofilizado.

AUDITORÍAS A HEBERNASVAC® POR EUROPA

El Departamento de Registros y Regulaciones tuvo una incidencia muy importante y una activa participación en la auditoría diagnóstica de buenas prácticas de manufactura (GMP) al producto HeberNasvac®, por la EMA y un experto en GMP de Francia. El Departamento envió la información técnica y regulatoria que evaluaron estos especialistas y gerenció la información técnica relacionada con el expediente IMPD del producto durante esta inspección. La contraparte francesa reconoció el trabajo y fue satisfactorio.

AUDITORÍA AL IMPD DE HEBERNASVAC®

En el mes de septiembre de 2014 el expediente IMPD de HeberNasvac® recibió una auditoría de control y ayuda por un experto de ABIVAX, de Francia. Se entregó un gran volumen de información nueva y se hicieron las actualizaciones regulatorias pertinentes. También se recibieron recomendaciones y sugerencias para elevar el estándar regulatorio del expediente. Estas se cumplieron.

AUDITORÍAS POR EL CECMED

El Departamento de Registros y Regulaciones tuvo participó en las auditorías del Cecmed a las Plantas del CIGB y del Biocen. Los especialistas tramitaron las GMP y licencias de



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producción de los productos del CIGB, en respuesta ante la autoridad por la calidad y el seguimiento de estos trámites.


• Renovación de la licencia de fabricación en todas las etapas de la fabricación de los diagnosticadores basados en ensayos inmunocromatográficos y de reactivos biológicos hasta 2019, otorgada por el Cecmed al CIGB de Sancti Spíritus y obtención de reconocimiento como empresa destacada por la Unidad Técnica de Normalización Provincial.• Renovación de los registros sanitarios en la República Bolivariana de Venezuela de los diagnosticadores HeberFast Line® Embarazo II y HeberFast Line® rotavirus hasta diciembre de 2018. Registro Sanitario del Heberprot-P® en un país del BRICS.• Exitoso proceso de tramitación del expediente IMPD de HeberNasvac®, con un impacto positivo en los resultados de negociación y aplicación para ensayos clínicos por la compañía francesa ABIVAX y Generium de Rusia, y en la realización del expediente de registro CTD para su inscripción en Cuba por el Cecmed.• Obtención del registro sanitario de bulbos desnudos de Heberpenta®-L en Venezuela.• Efectiva tramitación del registro nacional e internacional de producto con cumplimiento satisfactorio permanente. • Registro sanitario de Heberprot-P® en cinco países.• Aprobación del estudio clínico fase III con CIMAvaxEGF en Alemania y la República Checa.• Renovación de los registros sanitarios de Heberprot-P® y Quimi-Hib® en Cuba • Renovación de los Registros de 20 y de 100 de microgramos de Heberbiovac HB® en Bielorrusia.

PARTICIPACIÓN EN LOGROS CIENTÍFICO-TÉCNICOS

• Seguridad del CIGB-300 en los seis ensayos clínicos en Cuba de 2006 a 2012. Etapa de tratamiento y seguimiento hasta los 3 meses.• Informe final del ensayo clínico de seguridad y evaluación farmacológica de la administración endovenosa del CIGB-300 en pacientes con tumores sólidos refractarios al tratamiento oncoespecífico. Etapa de tratamiento y seguimiento. • Satisfactoria gestión preclínica para la elaboración de respuestas técnicas a contrapartes y agencias reguladoras, con vistas a la obtención de registros sanitarios, autorizo de ensayos clínicos y documentos CTD/2014.• Estudio exploratorio del tratamiento con CIGB-300 en leucemias agudas refractarias o en recaídas, leucemia

mieloide del anciano y síndromes mielodisplásicos con exceso de blastos (Estudio EHPMA).

EVENTOS Y CURSOS IMPARTIDOS O GERENCIADOS POR EL ÁREA

Eventos

• Se participó en el evento Biotecnología Habana 2014 con el cartel “Marketing authorization of Heberprot-P®, a cuban product for the diabetic foot ulcer treatment”. • Se participó en el Congreso Nacional de hepatitis virales, Varadero 2014.

Cursos

• Se impartió la conferencia “Formato CTD”, en la maestría “Tendencias de la Biotecnología Contemporánea”, impartida en el CIGB, asignatura “Aspectos regulatorios y sistemas de gestión de la calidad”, tema 6, tercera edición.• Se impartió la conferencia “Registro sanitario” ”, en la maestría “Tendencias de la Biotecnología Contemporánea”, impartida en el CIGB, asignatura “Introducción a la biotecnología contemporánea”, tema 11, cuarta edición.• Se impartió la conferencia “Estado del arte de las regulaciones en el primer mundo”, en Consejo Científico del CIGB.• Se coordinó el curso “Regulaciones, aspectos legales y éticos relacionados con los estudios clínicos”, de la maestría “Tendencias de la Biotecnología Contemporánea”, impartida en el CIGB, cuarta edición. Se impartieron dos conferencias “Evolución de la ética en la investigación clínica” y “Ética en los estudios clínicos del CIGB”.

Talleres

• Péptido CIGB-530 (fibrosis hepática): participación en el taller de expertos “Hacia los ensayos clínicos”.• Heberprovac-cáncer de próstata: taller nacional para el estudio clínico multiprovincial de la vacuna contra cáncer de próstata Heberprovac®.

CAPACITACIÓN

• Se aprobó un plan de formación en correspondencia con las necesidades del área.• Se cumplió con el plan de doctorados previsto en el área.• Se realizó una correcta aplicación y análisis de la estimulación por la Resolución 9.



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• Se realizó un análisis de idoneidad del personal por puesto de trabajo en búsqueda de un máximo de eficiencia.• Se capacitó el personal del área para aumentar la eficiencia del desempeño. • Se capacitó el personal que gerencia la actividad de traducción de documentos. Se efectuaron sesiones de recalificación de procedimientos relacionados con la actividad fundamental. Se participó en varios talleres sobre ensayos clínicos. • Se participó en el Congreso Internacional “Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas”, Varadero, 2014 y en el congreso Biotecnología Habana 2014 (de Investigaciones Agropecuarias). Se colaboró en el trabajo presentado en el evento europeo de Reumatología en París, de un elevado nivel científico. El trabajo se publicó en un número especial de la revista Annals of the Rheumatic Diseases (factor de impacto 9.1). (CIGB 814).• Se participó en el Fórum de Ciencia y Técnica, con dos profesores de la maestría “Tendencias de la Biotecnología Contemporánea”, impartida en el CIGB.

Premios de la Academia de Ciencias de Cuba

• “Proctokinasa, nuevo medicamento para el tratamiento de las hemorroides agudas” (un especialista del departamento fue coautor y un especialista fue colaborador).• “Determinación de la capacidad promotora del crecimiento vegetal de Tsukamurella paurometabola C-924 y caracterización de los principales mecanismos involucrados en el proceso” (un especialista fue autor).

Participación en el Comité de Competencia del CIGB

El Departamento está participando con un especialista en el Comité para la Gestión de competencias laborales del CIGB, impartido por una especialista de GECYT, que está en curso.

Conferencias impartidas

Un especialista del departamento impartió cuatro conferencias relacionadas con el trabajo de la misión en la Universidad de Taian, China:• Brief summary on the Cuba's history: from cuban nationality to sciences and Biotechnology in Cuba.• Patents: industrial creations and how we can protect them. The Chinese case.• HeberNem®, biocontrol of nematodes and a biofertilizer.• Advantages and disadvantages of drip irrigation system. China context.


• Atención a la visita de especialistas de Sri Lanka relacionada con el registro sanitario de varios productos. Envío de expedientes de PEG-Heberon® y Heberon Alfa R® líquido para acciones de registro en Sri Lanka.• En los meses de septiembre y noviembre se recibió la visita de un experto de la compañía francesa ABIVAX para intercambio técnico relacionado con el producto HeberNasvac®.

MISIONES EN EL EXTRANJERO

Un especialista del Departamento participó en el montaje y evaluación de experimentos de validación con el producto HeberFort® (HeberNem®) en China. Estuvo en dos misiones en ese país durante 5 meses. Los resultados fueron favorables y por ello se llegó a la firma de una empresa mixta Lukang/CIGB.

PUBLICACIONES

Se publicaron dos artículos científicos y tres informes técnicos.

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INTRODUCCIÓN

Jesús Zamora Sánchez [email protected]éfono: (53-32) 26 1295

El Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) de Camagüey tiene como misión generar, desarrollar, producir y comercializar productos biotecnológicos

en la esfera agropecuaria y para la terapia de tumores hormono-sensibles. Además contribuye con el desarrollo económico, social y medioambiental de Cuba, basado en un sistema de gestión de la calidad que garantice la satisfacción de los clientes. El trabajo de las áreas completa el ciclo de investigación-desarrollo-producción y comercialización.

Su producto líder es la vacuna recombinante contra la garrapata del ganado bovino, conocida comercialmente como Gavac®, de probada eficacia. También produce y comercializa un producto biológico para el control de fitonemátodos parásitos de cultivos agrícolas, denominado HeberNem®, que se emplea con éxito en casas de cultivo protegido.

Su sistema de calidad garantiza el cumplimiento de buenas prácticas de fabricación, y constituye un importante aval para los productos que se elaboran.

Las principales investigaciones como el desarrollo tecnológico comprenden la obtención de nuevos bioproductos de uso agrícola y veterinario que por su efectividad, seguridad y calidad se incorporarán a la cartera de las producciones comercializables del Centro.

También se acomete una línea de investigaciones con aplicaciones médicas para la salud humana. Entre ellas, el candidato vacunal terapéutico contra el cáncer de próstata avanzado, conocido como Heberprovac, con el que recientemente concluyó un estudio clínico multicéntrico fase II en seres humanos, con resultados satisfactorios.

Como resultado del quehacer científico-productivo de la institución se ha logrado que alrededor del 90 % de los ingresos por ventas correspondan a exportaciones de productos biotecnológicos elaborados en el propio Centro.

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DIRECTOR

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Jefe del Departamento de InvestigacionesRolando Morán [email protected] Teléfono: (53-32) 26 2798

Jefe del Departamento de Producción Eikel Pérez González [email protected]éfono: (53-32) 26 5841

Jefe del Departamento de Desarrollo TecnológicoNemecio González Fernández [email protected]éfono: (53-32) 26 1044



• Recertificación del sistema de gestión de la calidad del CIGB por las ISO 9001 y ampliación del alcance al desarrollo y la producción de productos biotecnológicos para uso agrícola y veterinario.• Congreso Biotecnología Habana 2014. Agrobiotecnología por la sostenibilidad alimentaria.• Obtención del Permiso de Registro de formulado plaguicidas HN-S hasta el 2018 y el HN-L hasta el 2017.• Implementación, gestión y gerencia de la aplicación de la Resolución 17 (Pago por Resultados del Trabajo) en el CIGB Camagüey.• Intensa actividad de colaboración internacional que ha impactado significativamente en el avance de los proyectos de Investigación.• Desarrollo exitoso de actividades conmemorativas por los primeros 25 años de trabajo del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología de Camagüey.• Diseño y despliegue de la Intranet del CIGB Camagüey.• Servicio de comedor en el CIGB Camagüey con calidad y autofinanciado.• Diseño y construcción del rincón histórico en el CIGB Camagüey.• Certificación por parte del Ministerio de Comercio Interior de los tres almacenes del CIGB, y la obtención de las licencias comerciales de la institución.• Establecimiento de proceso productivo a escala piloto para fabricación de lotes de Heber-PPC para ensayos clínicos y registro.

• Uso alternativo de las cápsulas de filtración Sartobran® P para las etapas de filtración no estéril y filtración esterilizante del ingrediente farmacéutico activo (IFA) de Gavac®.• Récord productivo de IFA de Gavac®.• Disminución significativa del número de no conformidades, en los procesos productivos de Gavac® y HeberNem®.• Récord de ventas de HeberNem® por el Departamento Comercial del CIGB de Camagüey.• Renovación del registro sanitario de Gavac®.• Renovación de la Licencia de Fabricación-Comercialización de Gavac® hasta 2019.• Renovación de licencias de seguridad biológica a la Planta 11 y al área multipropósito de desarrollo tecnológico hasta 2016.


Estudio de la actividad antagónica de Tsukamurella paurometabola C-924 y determinación de los metabolitos secundarios involucrados en el proceso.

Culminación exitosa del ensayo clínico fase II con el candidato vacunal Heberprovac® contra adenocarcinoma prostático en los estadios III y IV.


Premios anuales de la Academia de Ciencias de Cuba correspondientes al año 2014

Marieta Marín Bruzos, et al. Determinación de la capacidad promotora del crecimiento vegetal de Tsukamurella paurometabola C-924 y caracterización de los principales mecanismos involucrados en el proceso.

Fórum de Ciencia y Técnica, 2014

Madelyn de la Caridad Sardiñas Padrón. Mejora continua del proceso de fabricación del Inmunógeno Gavac®. Renovación del Registro Sanitario en 2013. Relevante en el XVI Fórum Provincial.


• Marieta Marín, et al. Potencialidades del bioproducto Hebernem como estimulador del crecimiento vegetal. Presentación oral.• Rolando Morán, et al. Bioinformatics analysis of a sweet potato RNASeq experiment: from sequences to pathways. Presentación oral.

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• Rolando Morán, et al. Phytonematode control activity of several solid formulations of the bioproduct HeberNem-S with different levels of wettability. Presentación oral.• Danalay Somontes, et al. Characterization by morphometric and molecular methods of phytonematode populations present at some protected crop areas treated with the nematode control bioproduct HeberNem®-S (HN-S). Cartel.• Ileana Sánchez, et al. Evaluation of native bacteria isolated from nematodes to control Meloidogyne sp. Cartel.• Ileana Sánchez, et al. Control of Meloidogyne spp. by combined application of Tsukamurella paurometabola C924 with Bacillus thuringiensis CIGBR23 and Sphingobacterium sp. CIGBTb. Cartel.• Ileana Sánchez, et al. In vivo and in vitro nematicidal activity of Sphingobacterium sp CIGBTb. Cartel.• Ramón Franco, et al. Aislamiento y caracterización de cepas bacterianas con efecto probiótico en postlarvas de camarón Litopenaeus vannamei. Cartel.• Niuvis Montoya, et al. Estabilidad genética del banco de células primario (BCP 091129) que expresa la proteína MY32/Ls. Cartel.• Niuvis Montoya, et al. Establecimiento de la etapa de propagación de las cepas E.coli-pET28a-my32/Ls y E.coli-pET28a-my32/Cr en el proceso productivo de la proteína MY32, antígeno vacunal contra Piojo de Mar. Cartel.• Yunier Paneque, et al. Estudio de estabilidad a temperaturas cercanas al ambiente de la Tsukamurella paurometabola C-924 principio activo del HeberNem-S. Cartel.• Yunier Paneque, et al. Extensión del tiempo de vigencia del bionematicida HeberNem-S. Cartel.• Yunier Paneque, et al. Mejoras en la etapa de precalentamiento en el proceso de secado por atomización de la Tsukamurella paurometabola ingrediente activo del HeberNem-S. Cartel.• Yunier Paneque, et al. Evaluación de condiciones de operación del secador atomizador e influencia de aditivos en la humectabilidad del HeberNem-S”. Cartel.• Arlenis Alfaro. Mejoras continuas en las etapas de Formulación y Llenado del Inmunógeno Gavac®. Cartel.• Rafael Pimentel. Influencia del medio de cultivo en la producción de la proteína E2CD en células HEK-293. Influence of culture media in the production of the protein E2CD in HEK-293 cells. Cartel.

• Rafael Pimentel. Evaluation of different contact systems for protein E2CD synthesis in HEK-293 cells. Evaluación de diferentes sistemas de contacto para la síntesis de la proteína E2CD en células HEK-293. Cartel.• Liszoe Galdós. Aspectos biológicos y reproductivos asociados a Rhipicephalus sanguineus en condiciones de laboratorio en el CIGB-Camagüey. Cartel.• Ramón Franco. Efecto de bacterias con potencial probiótico, en el cultivo de la tilapia Oreochromis niloticus variedad Chitralada. Cartel.• Carlos Pérez. Physical-chemical characterization and comparison the oily phase of the Gavac immunogen and Montanide ISA 50 v2 adjuvant. Quality evaluation and stability of the formed emulsions. Cartel.• Carlos Pérez. Establishment of E.coli high density fermentation fed expression of proteins MY32CR and MY32LS by induction with IPTG, comparison the batch and fed batch process. Cartel.• Carlos Pérez. Partial results of homologation study of new adjuvant montanide ISA 50 V2 and the oily phase of Gavac immunogen. Cartel.• Carlos Pérez. Purification process design using tangential ultrafiltration system to produce E2CD protein as antigen against classical swine fever. Cartel.• Carlos Pérez. Design and optimization of purification process of MY32LS protein solubilizing inclusion bodies for a new vaccine against sea lice. Cartel.• Carlos Pérez. Design, evaluation and simulation of a purification process to obtain a new vaccine against sea lice, using metal affinity chromatography. Cartel.


• Dr. Prof. Cathie Martin, del John Innes Centre, Reino Unido.• Dr. Jeremy Murray, del John Innes Centre, Reino Unido.• Dr. Prof. Dilantha Fernando, del Manitoba University, Canadá.

PUBLICACIONES

Se publicó un artículo científico en una revista internacional.

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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

MSc. Raúl Alfredo Armas [email protected]

Teléfono: (53-41) 32 6273 ext. 102


Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) de Sancti Spíritus, integrante del CIGB de La Habana, se ubica a 350 km al este de esa ciudad. Está estructurado

por los departamentos de Producción, Investigación y Desarrollo, Administración y Servicio, y el Grupo de Aseguramiento y Control de la Calidad.

Su misión fundamental es producir reactivos biológicos que emplea en los controles de procesos, los controles de calidad y para la liberación de los principales productos biotecnológicos que fabrica. También produce reactivos biológicos para el Centro de Inmunoensayo de La Habana, como componentes primarios de los sistemas Ultramicroelisa para el diagnóstico del virus de la inmunodeficiencia humana, y los virus de la hepatitis B y C en donantes de sangre.

El CIGB de Sancti Spíritus posee una licencia de fabricación, emitida por el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos, de Cuba, que ampara la producción de reactivos biológicos y la fabricación de los diagnosticadores HeberFast Line® Embarazo, HeberFast Line® rotavirus y HeberFast Line® antitransglutaminasa, destinados al Ministerio de Salud Pública, de Cuba.

Otras misiones del Centro incluyen la generación de hibridomas secretores de anticuerpos monoclonales, para apoyar el desarrollo de proyectos de investigación-desarrollo ejecutados por el CIGB; el desarrollo de nuevos sistemas diagnósticos del tipo tira reactiva rápida para uso veterinario o biomédico; el diseño, desarrollo y validación de nuevos inmunoensayos para apoyar las etapas de evaluación de productos líderes del propio Centro; el mejoramiento genético de especies vegetales de interés agrícola,



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con proyectos en curso, encaminados a la introducción de genes para la defensa contra plagas y enfermedades fungosas en el arroz; el uso de las plantas como biorreactores para la producción de proteínas de interés farmacéutico; el desarrollo de tecnologías para la producción de prebióticos (fructooligosacáridos) y la intervención directa en la extensión y uso de productos del CIGB en la provincia de Sancti Spíritus.


Jefe del Departamento de Investigación-DesarrolloMSc. Enrique Rosendo Pérez Cruzenrique.perez @cigb.edu.cuTeléfono: (53-41) 32 6273 ext. 107

Jefe del Departamento de ProducciónLic. Omar Reinaldo Blanco Á[email protected]éfono: (53-41) 32 6273 ext. 105

Jefe del Grupo de Aseguramiento y Control de la CalidadMSc. Vladimir Leal Gó[email protected]éfono: (53-41) 32 6273 ext. 109


• Renovación de la licencia sanitaria que otorga el Centro para el Control Estatal de Medicamentos, Equipos y Dispositivos Médicos (Cecmed) para la fabricación de diagnosticadores y reactivos biológicos, con buenas prácticas de fabricación, vigente hasta abril de 2019.• Sobrecumplimiento del plan de producción de diagnosticadores y reactivos biológicos por el que se lograron ingresos de más de 2.3 millones de pesos. La actividad ha sido rentable por 4 años: este año con ingresos y nivel de utilidades que constituyen un récord para el CIGB de Sancti Spíritus. • Obtención de registros sanitarios de los diagnosticadores HeberFast Line® Embarazo y rotavirus, en la República Bolivariana de Venezuela.• Demostración experimental exitosa del uso de la enzima 1-SSTrec para la producción de fructoligosacáridos a la Empresa Mixta Lukang-Heber y constitución de esta empresa en noviembre de 2014.• Desarrollo de un biocatalizador termoestable de células inmovilizadas para la producción de sirope invertido.

• Obtención de un sistema Elisa de inhibición para la cuantificación del interferón α2b humano, que permite determinar la concentración del AcM CBIFNα2.3 en sobrenadante de cultivo y la elevación de los niveles de secreción del hibridoma.• Establecimiento de un sistema de subcultivos de callos de arroz con potencial morfogénico a largo plazo. • Desarrollo y validación de un ensayo inmunoenzimático de pesquisa y otro confirmatorio para evaluar la inmunogenicidad del Heberprot-P®. También se logró la aprobación, por expertos de la Food and Drug Administration (FDA), estos inmunoensayos para la evaluación de sueros de pacientes tratados con el novedoso medicamento.


Empresa destacada en la provincia de Sancti Spíritus en la actividad de normalización, metrología y calidad.


• Autofinanciamiento y servicio con calidad del comedor del CIGB de Sancti Spíritus en 2014.• Impermeabilización del techo del CIGB de Sancti Spíritus y sustitución de tanques para almacenamiento de agua.• Renovación de la licencia de fabricación a todas las etapas de la fabricación de diagnosticadores basados en ensayos inmunocromatográficos y de reactivos biológicos hasta el año 2019, otorgada por el Cecmed al CIGB de Sancti Spíritus y obtención de reconocimiento como empresa destacada por Unidad Territorial de Normalización Provincial.• Renovación de los registros sanitarios en la República Bolivariana de Venezuela de los diagnosticadores HeberFast Line® Embarazo II y HeberFast Line® rotavirus hasta diciembre de 2018.• Sobrecumplimiento de la planta 16 (de reactivos biológicos) y planta 17 (de diagnosticadores) del CIGB de Sancti Spíritus.• Demostración experimental exitosa del uso enzima 1-SSTrec en la producción de fructoligosacáridos a la Empresa Mixta Lukang-Heber.• Consolidación de los Resultados del Programa de Atención Integral de Úlceras del Pie Diabético (PAIDPUPD) en la Atención Primaria de la Salud (APS) de Sancti Spíritus.• Cumplimiento de encargo de la Dirección Provincial de Salud Pública para suministro de sangre de carnero a entidades hospitalarias de la provincia Sancti Spíritus. • Aplicación satisfactoria de los sistemas de pago por resultado y estimulación en pesos convertibles como una



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herramienta para el control de los objetivos estratégicos de la institución.• Elaboración de piezas de vehículos automotores que permitieron la continuidad de su explotación técnica.• Certificación por parte del Ministerio de Comercio Interior (MINCIN) de los tres almacenes del CIGB de Sancti Spíritus, y la obtención de las licencias comerciales de la institución.


• Establecimiento de un sistema de subcultivos de callos de arroz con potencial morfogénico a largo plazo.

• Desarrollo y validación de un ensayo inmunoenzimático de pesquisa y uno confirmatorio para evaluar la inmunogenicidad del Heberprot-P®.• Desarrollo de un biocatalizador termoestable de células inmovilizadas para la producción de sirope invertido.

PUBLICACIONES

Se publicaron cinco artículos científicos.

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DIRECCIÓN DE GESTIÓN Y SERVICIOS DE INFORMACIÓN


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INTRODUCCIÓN

DIRECTOR

Raúl Alejandro ValdésTeléfono: (53) 7250-4135,

7271-6022, Ext. 1050

GESTIÓN Y SERVICIOS DE INFORMACIÓNDIRECCIÓN DE

La Dirección de Gestión y Servicios de Información (GSI) del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB), de La Habana, creada en septiembre de 2000,

comete todas las actividades relacionadas con la información y el conocimiento científicos. Está integrada por seis unidades: Inteligencia Empresarial, Centro de Información, Editorial Científica Elfos Scientiae, Desarrollo de Aplicaciones Informáticas, Reprografía y Fotografía Científica.

La Dirección de Gestión y Servicios de Información está especializada en el uso e implantación de las tecnologías de la información, con el propósito de convertirse en la encargada de organizar y gestionar la recogida, tratamiento, procesamiento, análisis, disponibilidad y explotación de la información y el conocimiento de interés para apoyar el logro de los objetivos estratégicos de la institución.

RESPONSABILIDADES DE LA DIRECCIÓN

• Hacer o gerenciar productos de información de interés para el CIGB.• Mantener actualizadas y protegidas las bases de datos y los servicios de información ofrecidos a través de sitios web.• Garantizar el desarrollo de herramientas informáticas que refuercen la automatización y la gerencia del CIGB (de conjunto con la Dirección de Informática del CIGB, pero enfocado al software de gestión).• Mantener copias de seguridad de la información electrónica y de los software desarrollados.• Garantizar la tramitación, actualización y el control de la información científica del CIGB, teniendo en cuenta los reglamentos establecidos.• Garantizar la diseminación selectiva de la información relevante a través de boletines y otras alternativas, al personal implicado en las investigaciones.• Garantizar la digitalización con calidad de documentos.• Cumplir los cronogramas de trabajo establecidos para el proceso de edición de libros, revistas y otros soportes publicitarios solicitados por el CIGB y otros clientes.



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• Garantizar el cumplimiento de las normas de calidad previstas para cada uno de los procesos productivos concebidos en la edición de libros, revistas y otros soportes publicitarios.• Garantizar la distribución y entrega a tiempo de las publicaciones.• Mantener los controles económicos exigidos por la Dirección de Economía, de acuerdo con las normas establecidas por el CIGB.• Ofrecer y mantener los medios para la ejecución de la formación interactiva en el CIGB.• Impulsar la gestión del conocimiento como una herramienta importante para lograr la eficiencia del CIGB.• Brindar con calidad el servicio de circulación de documentos.• Brindar con calidad el servicio de Reprografía a otras áreas cumpliendo con las prioridades y los tiempos establecidos.

Esta Dirección pretende convertirse en imprescindible en la estrategia de la empresa, mediante la vigilancia tecnológica, la inteligencia empresarial y la gestión de contenidos para apoyar prospectivamente en el ciclo cerrado del proceso integrador de la biotecnología en Cuba; es decir, participar desde la concepción del producto hasta su comercialización de forma innovadora, inteligente y a la vanguardia.

INTELIGENCIA EMPRESARIAL

La Unidad de Inteligencia Empresarial se especializa en la vigilancia tecnológica, el análisis de información y la inteligencia empresarial.

Tiene entre sus funciones:

• Hacer o gerenciar los productos de información de interés para el CIGB.• Mantener actualizadas y protegidas las bases de datos y los servicios ofrecidos a través de sitios web.• Perfiles estratégicos como productos de inteligencia empresarial.• Garantizar la tramitación, actualización y el control de la información científica del CIGB, teniendo en cuenta los reglamentos establecidos.• Brindar con calidad el servicio de circulación de documentos.• Garantizar la diseminación selectiva de la información relevante a través de boletines y otras alternativas, al personal implicado en las investigaciones.

CENTRO DE INFORMACIÓN

El Centro de Información se especializa en:

• Circulación de documentos.• Reprografía.• Selección y adquisición de literatura científico-técnica, comercial y de regulaciones.• Diseminación selectiva de información.• Sistemas de información del CIGB.• Formación interactiva (EaD).• Reproducción de documentos.• Gestión de la Biblioteca Virtual en Biotecnologías (BVB, ahora en Microsoft Office SharePoint Server) administración del portal y cada subsitio.

Resultados relevantes de estas dos áreas

• Publicación de boletines electrónicos.• Inserción de cursos y eventos en el portal de educación a distancia.• Inserción de nuevos libros electrónicos.• Se publicó una nueva versión del JCR.• Manejo y creación de las fichas electrónicas de la literatura y tesis del fondo documental.• Inclusión de nuevos recursos en línea.• Diseminación selectiva de información a través los boletines BVB-Noticias y BVB-Lo nuevo.• Manejo de los gestores de referencia ProCite y Reference Manager.• Certificación del sistema de información del CIGB.• Solicitud y recepción de información para Anuario CIGB 2013.

DESARROLLO DE APLICACIONES INFORMÁTICAS

• Desarrollo de software asociados a bases de datos textuales.• Minería de datos y de textos (data mining y text mining).• Desarrollo de aplicaciones web con tecnología Microsoft SharePoint.

Principales resultados de esta área

• Desarrollo de la aplicación web del sistema CAPA.• Aplicación web de la gerencia global del Heberprot-P®.• Cambios en la aplicación web eCTD (en español y en inglés) para nuevos requisitos de EMA.• Aplicación web del sistema de gestión de Promotores del Heberprot-P®.



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• Cambios en la aplicación web del repositorio del CIGB.• Confección de los cuadernos de recogida de datos electrónicos (CRDE) del estudio clínico.• Gestión del nodo Infomed-CIGB.• Biblioteca Virtual en Biotecnologías en Microsoft Office SharePoint Server.• Seguridad informática.• Aplicación web del sistema de gestión para la inclusión de pacientes que requieren Heberprot-P a través de la red nacional de salud.• Grupo gestor de la promoción del Heberprot-P® a través del trabajo colaborativo del Grupo Nacional de Desarrollo de Negocios (GNDP) y el de Gestión y Sistemas de Información (GSI).• Miembros de la Comisión Nacional para la Política Nacional de Información.• Administración del Portal de Información del Polo.• Trabajo de promoción del Heberprot-P® en Venezuela (heberpropistas).

EDITORIAL ELFOS SCIENTIAE

• Edición y publicación de la revista Biotecnología Aplicada en formato electrónico.• Edición y publicación de libros.• Digitalización y multimedia. • Servicios de impresión.

Principales resultados de esta área

• Inclusión de la revista Biotecnología Aplicada en la Web of Science (WoS), Colección SciELO Citation Index y otorgamiento de Factor de Impacto.• Publicación del Vol. 31 de la revista Biotecnología Aplicada e indización en la base de datos Scientific Electronic Library Online (Scielo).• Asesoría a autores del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, CIGB.• Edición de libros y publicación de productos informacionales:

- Distribución del libro Nahuel, el niño que curó después de un viaje. Manuel Raíces Pérez-Castañeda. Colección Elfos Para Niños. En Español, inglés y francés. 32 p. ISBN 978-959-235-024-3.- Libro Infiltración del Heberprot-P®: Un tratamiento eficaz para la úlcera del pie diabético. Colectivo de autores. Segunda edición, 2014. Versión digital. ISBN 978-959-235-033-5. Versión impresa ISBN 978-959-235-032-8.- Multimedia Heberprot-P®. Language in use. Colectivo de

autores. Producto destinado a la capacitación en inglés de los promotores del Heberprot-P® y del personal médico que atiende a pacientes con úlceras del pie diabético. ISBN 978-959-235-025-0.- Portafolio de Negocios del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología 2014-2015. ISBN 978-959-235-031-1.- Anuario institucional del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, 2013. Versión digital. En Español, inglés y francés. - Libro de resúmenes del Congreso Biotecnología Habana 2014. Agro-Biotecnología por la sostenibilidad alimentaria. Avances en Biotecnología Moderna, ISSN 1027-2860. Versión digital.- Libro de Resúmenes del Congreso Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas. Varadero, 2014. Avances en Biotecnología Moderna, ISSN 1027-2860. Versión digital.

Servicios editoriales

• Edición de promocionales, certificados, credenciales, diseño de pancartas, programas científicos, grabación de los soportes, servicios de impresión de pancartas, programas y sueltos, participación con el stand editorial, edición de otros documentos empleados en los congresos Biotecnología Habana 2014 y Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas.• Servicios de impresión de libretas de trabajo, planillaje, modelos de gestión administrativa, pancartas, sueltos y otros soportes del Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, CIGB.• Diseño e impresión de tarjetas de presentación corporativas.

Servicios comunicacionales

• Elaboración del video promocional institucional Contar con Biotecnología de Cuba.• Elaboración de la nueva versión del Manual de Identidad Visual del CIGB.

EVENTOS ASISTIDOS

• Participación en la 23 Feria Internacional del Libro de La Habana, FILH, 2014: se presentó póster y materiales editoriales en el Stand de Publicaciones Seriadas. Se expusieron las últimas estrategias editoriales de la revista Biotecnología Aplicada. Se presentaron oficialmente la



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multimedia “Infiltración Heberprot-P®, Language in use” y el libro Nahuel, el niño que se curó viajando, de la colección Elfos para niños.• Participación en la 15 Feria Internacional del Libro de Guadalajara, México, 2014.• Participación en el Taller sobre Comunicación Científica, Congreso Internacional de Parasitología, Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí, 13 y 14 de Octubre, 2014.• Congreso “Controlando la diabetes y sus complicaciones más severas”, Varadero, 2014: como parte del Comité Organizador, se editaron los soportes promocionales, certificados, programas científicos, credenciales, libros de resúmenes, sueltos y elaboraron otros documentos. Participación como expositores de productos editoriales en un stand promocional.•Congreso Biotecnología Habana 2014: como parte del Comité Organizador. Participación como expositores de productos editoriales en un stand promocional.


• Gerencia editorial en apoyo al Heberprot-P® y la misión fundamental del CIGB.• Plataforma editorial de servicios comunicacionales y gestión de la revista científica Biotecnología Aplicada.

RECONOCIMIENTOS

• Premio Nacional de Comunicación, otorgado al Heberprot-P®, por la campaña comunicacional de promoción del producto. Asociación Cubana de Comunicadores Sociales. Aporte de la Editorial Elfos Scientiae con la edición y publicación de sueltos, libros, servicios de impresión y participación en congresos desde 2010.• Reconocimiento por el aniversario 30 de la revista Biotecnología Aplicada. Otorgado por el Registro Nacional de Publicaciones Periódicas, Cámara Cubana del Libro, Instituto Cubano del Libro.

PUBLICACIONES CIENTÍFICAS

• Ernesto Galbán Rodríguez, Ricardo Arencibia Jorge. Editorials and cascading peer review. European Science Editing. 2014; 40(2):34-35.• Aleimys Pichs Fernández, Gloria Ponjuán Dante. La Cultura Informacional: sus principales relaciones conceptuales. Ciencias de la Información. 2014;45(2):33-7.• Aleimys Pichs Fernández, Gloria Ponjuán Dante: La Cultura Informacional y su delimitación: el caso de los contextos académicos. Ciencias de la Información. 2014;46(2):25-31.

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PUBLICACIONES

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