autoantibodies in a subgroup of patients with linear iga disease react with the nc16a domain of...

7
Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP180 1 Detlef Zillikens, Karin Herzele, Matthias Georgi, Enno Schmidt, Iakov Chimanovitch, Hauke Schumann,* Jose M. Mascaro Jr,² Luis A. Diaz,² Leena Bruckner-Tuderman,* Eva-B. Bro Ècker, and George J. Giudice² Department of Dermatology, University of Wu Èrzburg, Wu È rzburg, Germany; *Department of Dermatology, University of Mu Ènster, Germany; Departments of Dermatology and Biochemistry, ²Medical College of Wisconsin, Milwaukee, Wisconsin, U.S.A. Linear IgA disease is an autoimmune subepidermal blistering disease characterized by IgA deposits at the cutaneous basement membrane zone. IgA anti- bodies from linear IgA disease sera react with antigens of 97 kDa (LABD97) and 120 kDa (LAD-1), both of which appear to be fragments of the extra- cellular domain of bullous pemphigoid 180 (type XVII collagen). The aim of this study was to deter- mine whether linear IgA disease sera react with the immunodominant region of BP180 (NC16A domain), which is a major target of IgG autoanti- bodies produced by patients with bullous pemphi- goid. Indeed, 11 of 50 linear IgA disease sera were found to contain IgA autoantibodies that recognized a recombinant form of NC16A by immunoblotting. The same sera also reacted with NC16A by enzyme- linked immunosorbent assay. An epitope mapping analysis uncovered four linear IgA disease-associated epitopes located within the 45 amino acid N-term- inal stretch of NC16A, all of which were previously identi®ed as antigenic sites targeted by bullous pem- phigoid autoantibodies. Eight of the linear IgA dis- ease sera that were reactive with NC16A also recognized LAD-1 secreted by the SCC-25 cell line, and ®ve sera recognized BP180 extracted from keratinocytes. Linear IgA disease sera depleted of reactivity to NC16A by immunoadsorption con- tinued to react with both the LAD-1 antigen and BP180 by immunoblotting and with the basement membrane zone by indirect immuno¯uorescence microscopy. Our results demonstrate that IgA auto- antibodies from a subset of linear IgA disease patients react with the same sites on BP180 that are targeted by IgG autoantibodies in bullous pemphi- goid. Key words: autoantigen/collagen/epitope/hemides- mosome. J Invest Dermatol 113:947±953, 1999 L inear IgA disease (LAD) is a bullous autoimmune disorder characterized by subepidermal blisters and linear deposits of IgA at the cutaneous basement membrane zone (BMZ) (Chorzelski and Jablonska, 1979). Clinically, LAD of childhood, also referred to as chronic bullous disease of childhood, is differentiated from LAD of adulthood. Immunoelectron microscopic studies have uncovered what appears to be a heterogeneity in the autoimmune response among LAD patients. Some LAD sera show IgA reactivity to sites within the lamina lucida, others label the sublamina densa region, and still others react with both locations (Yaoita and Katz, 1977; Bhogal et al, 1987; Prost et al, 1989). Multiple target antigens associated with LAD have been described. LAD sera with dermal binding on salt-split skin have been reported to react with a 255 kDa polypeptide present in dermal extracts (Dmochowski et al, 1993) and with type VII collagen, the autoantigen in epidermolysis bullosa acquisita (Zambruno et al, 1994). Wojnarowska et al (1991) reported reactivity of LAD sera with a 285 kDa protein, although this antigen has not been further characterized. Zone and coworkers were the ®rst to report that IgA autoantibodies associated with the lamina lucida type of both the adult and childhood forms of LAD react with a 97 kDa protein (LABD97) extracted from epidermis and dermis (Zone et al, 1990, 1996; Dmochowski et al, 1993). Based on biochemical studies and peptide sequence analyses, it appears that LABD97 and its 120 kDa precursor form (LAD-1) may be generated as proteolytic cleavage products of the extracellular domain of bullous pemphigoid (BP) 180, a transmembrane hemidesmosomal glycoprotein also known as type XVII collagen (Marinkovich et al, 1996; Pas et al, 1997; Hirako et al, 1998; Scha Ècke et al, 1998; Zone et al, 1998). BP180 has been identi®ed as the target antigen of autoantibodies in LAD by other investigators as well (Ghohestani et al, 1997). BP180 was ®rst identi®ed as a major antigenic target of IgG autoantibodies produced by patients with BP, another subepider- mal bullous disease characterized by linear deposits of IgG at the BMZ (Labib et al, 1986; Diaz et al, 1990; Giudice et al, 1992). BP180 is a transmembrane glycoprotein with a type II orientation, i.e., its amino-terminal domain localizes to the cytoplasm whereas the carboxy-terminus projects into the extracellular space and spans the lamina lucida of the BMZ (reviewed in Zillikens and Giudice, 1999). The pathogenic relevance of antibodies to murine BP180 has been demonstrated using a passive transfer mouse model (Liu 0022-202X/99/$ 14.00 ´ Copyright # 1999 by The Society for Investigative Dermatology, Inc. 947 Manuscript received March 10, 1999; revised July 22, 1999; accepted for publication September 1, 1999. Reprint requests to: Dr. Detlef Zillikens, Department of Dermatology, University of Wu Èrzburg, Josef-Schneider-Strasse 2, 97080 Wu Èrzburg, Germany. Email: [email protected] Abbreviations: BMZ, basement membrane zone; BP, bullous pemphi- goid; GST, glutathione S-transferase; IB, immunoblotting; NC, non- collagenous; TBST, Tris-buffered saline plus Tween-20. 1 The authors declared to be free of con¯ict of interest.

Upload: george-j

Post on 06-Jul-2016

212 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

������������ �� � ��� ���� �� ������� ���� ����� � ������ ���� ���� �� ����� ������ �� ���� �

������ �������� � �� �������� � ���� ������� �� �������� � ��� ���� ������� � ��� ����� ����� � � � �� ���� !�� " �� ��� !�� #������$%����� �� �� $# #��&����� � ������ � ����������' ����� �� ���� �����(� )������( �� *�&��+���� *�&��+���� ���� (, ���' ����� �� ���� �����(� )������( �� ��&���� ���� (,

��' ����� �� ���� �����( � #���������(� ������ � ������� �� *����� ���- ����� *����� ) � "

����� � � ���� �� �� ��������� ��������!�!������ ���� ���������" �# � � ������ ���� �������� ������ ������ "��$ � � ����%���� ���� !���� � � ���� ��� ���� �������� �� �� &' (�� )����&'* �� �+ (�� )���%�*,���� �� ����� ����� �� � ��� ���� �� �� -���%�!!�!�� ����� �� ��!!��� ����� �� �� )�#�./�� ��!!� �*$ 0� ��� �� ���� ���# ��� �� ��%��� ����� !���� � � ���� ��� ���� ������ ������������� � ��� �� ���� )����������*, ����� �� � ��1�� ��� � �� � 2 ��������%���� ����� �# ������� ���� ��!!��� �����% ��$ ��, �� �� 3 !���� � � ���� ��� ������ �� ������� � � ������������ ���� ��� ��"� ���������� ���� �� ����� �# �������!����� $0� ��� ��� �!�� ���� ���� ����� �# �"#�%!��( ������������ ����#$ �� ����� ������ ���!#��� ����4� ���� !���� � � ����%��������

������ !���� ������ �� 53 ����� ��� �%���%���! ������ �� �����, �!! �� ����� �� ��4����!#����6 �� ���� ��� ���� ��� � �# ��!!��� ��%��� �� ������������$ 7� �� �� �� !���� � � ��%�� ��� ���� �� �����4 ���� ����� �!����� ��" ���%� ���� �# �� ���%+3 �!! !��,�� 64 ��� ��� ��" ���� -����� ����(�������#��$ ����� � � ���� ��� �!� �������4��# �� ����� �# ��������������� ���%���� �� ���� ���� ���� �� ���%� ���� � ������ �# �������!����� �� ���� �� ������������ "�� �# ������ ������8����������������#$ 9�� ���!�� �������� ���� � � ����%�������� ���� � ����� �� !���� � � ����������� ���� ���� �� ��� ���� �� ���� ���� ����� � �# � 2 ������������ �� ��!!��� �����% ��$ ��� ����� ��� ���� ������� ������������������������ � � ���� ������� ����� !�"�# ����

!�� � ��" ��� � .!"�/ � +����� ��������������� �� � �������� +( �+�'����� � +����� ���� � ��'��� �� ��" � ��� ��� ��� + �������+� � ��� .#��/ .��������� � � +��� �0121/ ����� ��(� !"� �� ���������� �� �������� ��

������ +����� ��� � �� ���������� � ��������� ��� ���� !"� �� �������� ������������ �������'�� ����� � �� ��������-� � ''� � �� +� �����������( � ��� �������� ��'�� ��� !"� ' ���� ���� !"� �� ��- ��" �� ������( �� ���-���� ��� � �� ����� � ����� � +�� ��� �+� �� �� ������ � ���� ����� �� �� -��� +��� ��� ��� .3 ��� � � ��� 0122,#��� � �� ��� 0142, 5��� �� ��� 0141/

�����'�� � ���� ���� ��� ��� -��� !"� � �� +�������+�� !"� �� -��� ���� � +���� � ��$'��� �� � ��+�� ��'����� �� �� �� -��� 677 �� '��('�'���� '���� ����� � �8�� �� .������-�� �� ��� 0119/ � -��� �('� :��

���� ��� ��� ��� ���� � �'�������(� +���� �;���� .� �+��� �� ��� 011</ *�= ��-� �� �� .0110/ ��'������� ������( �� !"� �� -��� 647 �� '������ ������� ��� ���� � �� +�� ������� �� � �������� ��� � ��-�����-��� ��� >�� �� ��'��� �� � ��" ��� ��+���� ��� ��� -��� ���� �� ����� �('� �� +��� ��� ���� � ��������� ���� �� !"��� �� -��� 12 �� '����� .!"#�12/ �8�� ���� ���� �'������ � ����� .��� �� ��� 011?� 011@, ������-�� �� ��� 0119/ # �� � +�������� � ����� � '�'���� �;���� �(�� �� ''� � �� � !"#�12 � �� 06? �� '������� ���� .!"�$0/ � (+� ���� ��� '������(��� ��� � �� '������ �� ��� �8�� ������ ���� � �� +����� '��'������ .#5/ 04?� �� ���+� ����������� � ��(��'����� �� ��- �('� A:�� ���� ��.� �������� �� ��� 011@, 5 �� ��� 0112, ��� �� �� ��� 0114,��� &��� �� ��� 0114, ��� �� ��� 0114/ #504? � +�� �����>�� ��� � ���� ���� �� ��� ��+���� � !"� +( ����� ������ ��� -��� .������ � �� ��� 0112/

#504? - >�� �����>�� � =�� ������ � ���� �� ��� ��� ��+���� '������� +( ' ���� -��� #5� ����� �+�'����$� � +����� ��� � �� � �������� +( ��� � ��'��� �� ��� � ���#�� .! +�+ �� ��� 014@, �� � �� ��� 011?, ������� �� ��� 0116/ #504? � �� ���+� � ��(��'����� -��� �('� �� ����� ����� � � �� ���$����� � ��� � ��� ���� �� ��� �(��'� � -���� ��� � �+�8($������ '��=��� ��� ��� �8�� ������ � ' �� � ' ��� � �� ����� �� ��� #�� .�����-�� � ������� � ��������0111/ %�� ' ������� ����� �� �� ��+���� �� ����� #504?� +�� ������ ��� ��� ' ��� �� ��� ���� ����� .!��

??66$6?6AB11BC 0< ?? D ��'(����� � 0111 +( %�� ������( ��� ������ ���� ���� �����(� ��

&5'

� ����'� �������� � ��� 0?� 0111, ������ ���( 66� 0111, ���'��� ���'�+��� ��� ��'���+�� 0� 0111

E�'��� ��;��� ��F �� ������ �������� ��' ����� �� ���� �����(�)������( �� *�&��+���� ����$��������$��� � 6� 12?4? *�&��+�������� ( �� ��F �������$� ���� G� �� ��$-����+��� ��

"++���� ���F #��� + ���� ���+� � ���, #5� +����� '��'��$����, ��%� ���� ����� �$�� ��� �, �#� �����+������, H�� �$���� ����, %#�%� %��$+������� ��� '�� %-��$6?

0%�� ����� ���� ��� �� +� ���� �� ��I��� �� ������

Page 2: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

�� ��� 0119/ %�� ������� � �� ��� #504? ���� �� 07������'��� ���� �� ��� � �'���'� � ''�� ����� � �� ��-�� � ��� H�0@" ��� � �� ��� #504? � �+�� � =���8�� ������ � ������ ��� ��������� +( #5 �� .������� �� ���0119, ������� �� ��� 0112 / J��� ������ #5$ ��� ��� �'���'�-��� �����>�� .��*$?� ��*$0� ��*$6� ��*$9/ �� � -����������� -���� ��� H$����� � <7 ��� ��� ������ �� H�0@".������� �� ��� 0112 / )������� �����+� � ���� �� H�0@" ��� ���� ������ ������ � '���>� ( (��� ��� ����������� �� ��+���� �� #504? � �� +�� ������'�� .� ����� �� ��� 011@, ������� �� ��� 0112+/ � ������� �� ������( �� #5 �� -��� ����� ��� ������ � � �8�� ������ � ��� � #504? � +����'����� .��� � �� �� ��� 0114, ��� �� ��� 0111, H�� �� ������� 0111, 5���� �� �� ��� 0111/

%�� �� �� ��� ���( - �� �������� -������ ��� ��+����� !"� �� �� -��� ��� ��������� � H�0@" ������ � ���#504? ������� � K�� >��� ���� �� �� �� ������ ��+�������� �+����' �� !"� ' ���� � ���� ��� ����� �� #504?

�"%�E�"!� "H� ��%�K��

:���� �� ������ ��� %�� ���( ������� ��� �� �� 7? !"�' ���� J���( �� -��� ���� ' ���� -��� !"� �� �������� � 0? -������� ' ���� -��� !"� �� ��������� %�� �� �� �� ���� ' ���� - @7 ( � ��� �� �� �� ��� ������� - 7 ( #( �����������I�������� .�J/ �� '������� � ��� �� ' ���� ��-�� ��� �� ��� �� ��" � ��� #�� ������� �J �(� � 0 � H ��$�' � ����� - '�������� �����+�� .������� �� ��� 011@/ � �� �� 97' ����� ������ ��� ��" ��+���� -��� �������� �� � +��� �� ����'����� � ��� �� ��� '��� %���� �� ��-�� ���� � +���� � ������ E ++�� ���� E71< - � ��� � �� ���� ����� �$�� ��� � .��%/���� '����� ��� ��� <6 ��� ��� �� ��� H�0@" ��� � .��%$H�0@"6L</ � � ++�� ���� E09@ � �� ��% ���� '���������' �� <1 ��� ��� ������ �� ��� �$����� � '����� ��#504? .;� �/ E ++�� ���� E74 - ���� ��� +( ������ ��� -��������+� � ��% .# ���� �� ��� 0112/ ���� ��� �� ������ � ��+��( .��"+/ ��04 �� ��� H�0@" ��� � �� #504? � ��"+069 �������� �� ��� 06? �� ��� ����(��$������� !"�$0 -��� �����+��'�������( .5��� $��+� �� ��� 0117, � �������� �� ��� 011@/ " �������-� ��� '������� � ++�� ����� ��"+ ��<7 .�������� �� ��� ��<7EK'����� � ��� % ����/ .� ��� ������'� ��� ��/� � �� ���� 0@' ���� -��� ���� ���� ���'�������� � 7? �� ���( ������ "�� �� ����' ���� -��� ���� ���� ���'�������� ��� ��� ��" ��+���� �� � +����� ����(��� �� ����( ��'� ��

���� ���������� ������� ��% ���� '����� ��� ��� ��� ����$����� #504? H�0@" ��� � �� � ���� �� ���� �� ��� ��� � -������� ��� ��'����� '�������( .������� �� ��� 0112 / � ��� ���(� -���� ��% ���� '����� ��� ��� ��� �����-�� �� ���� �� ��� ��� #504? ������� �F H�0@"0� H�0@"6� H�0@"6 7� H�0@"9�H�0@"0L9� H�0@"6L7� � H�0@"0L7 %�� ���� ��� �� ������ ���� �� H�0@" �����-�� '������ ��'��� .������� �� ��� 0112 / ��% ���� '����� -��� '���>�� +( ���� ����� � ��� �>��(����� ���� '�( .������� �� ��� 0119/

��������� �� �� ��!��! �������� �� ���� �� -�������� ������ ���� ��!��� (�������#�� %�� 06? �� ���+�� ������� ��� #504? - ��� ��� ���� ������� ������ �� ��� ���$67 ��� ."%���E! 0@64/ ������ ���( ���� ��������� ��� ������� �� - '� ��� � ���� � '��(�����(�����(� I������ .���� � �������� ���� (/ ����(����� ��� ���� ����� ��� -��� ���� �� > � ������ ��� ��0 �� � 7 ��� ��'�������( ������ � ��+�� - ������� +(�������� ��� � 0???� � ��� 0? �� ��+�;����(� '����� ���� 0? �������� -��� '����'�� ��� -��� 9?M ������ ��� �� ��� 6 � � <�� "���� �������� ��� � 07 ???� � ��� 1? �� � <��� ��� '����� - ���'���� � 0??�� �� +����� ��� ��� @7 �� H ��� 67 �� %��L���� '� 2 4� 0 �� ������(�+����$����(�I������ .���� /� �7 �� ���(����� ��� ���� ����� ��� � ���� � ��� ��� 6 � .� ���������� ��� 0116/ "���� �� �(� � �� ���'��� +����� ��������� �'��-��� ���������� � 09 ???� � ��� 6? �� � <��� ��8 �� '���� ����+���� ������� ���'�'��� '�'� ��� ��(��� ��� � ��' � .���� /- ���� �� ��� �'�� � �� � �'�� -��� ����� � ��;��� �L4?�� ��+��I��� �������� ��� ����(�� -��� �8�� ���� -��� +����� ��� ��� @6 7 �� %��$���� '� @ 4� 7M ���� '����� ���6M ����� �����(� ��� �� .���/� 0 �� ���(�����(���$+�.�$ ������(� �����/$����� ��� �$���� ����� ���� 0 �� ���������������

? 0 �� '��(�����(�����(� I������� � ��� ��8 �� '���� ����+���� %�� �8�� �� - ���������� 07 ???� � � <�� � ����'�� � � ����� � L4?��

�������!����� E����+� � '������ ������ ��� ��� ����(��������� ������� � ��� ����(�� �8�� �� -��� �� ���� ��� +( 07M�4M� � @M ���L'��( ��(� ���� ��� �������'����� .���L5"��/���'�������(� � �������'������� ��( �� ������ �� ������������.������� �� ��� 0119, ������� �� ��� 0112 / #��� -��� +������ ���<7 �� � 9M ������ �� ������ ���� '�-��� � %��$+������� ���'�� %-��$6? .%#�%/ +����� N? ?6 � %��$.�(�������(�/$ ������� �� ? 0< � H ��� %-��$6? ? ?0M .���� /� '� 2 7O ��� �� -��� ������� 6?$���� � � ++�� �� -��� ������� 0???$���� � 0M +���� ���� �+��� .#�"/ %#�% "���� 06 � �������'�� ���� ���+ ��� -��� ��� ������� �� � ��� +��� -��� - ��� � ���+ ��� -��� '���8�� �$��=�� ��� � ++�� ��$��� ��" ����� .� ��� �������� ��� ! +�� ������ *�� ������ 5"/ ������� �0M #�" %#�% ��� 0 � *�� �� �����'��(�+���� - ��� ������������� �+�� ��� ��� ���� �( ��+���� -��� ������� 0???$���� � �8'������ -���� ��� �� ��� �������������� ."���� �!��� ������� !����� �� ����� ) � / '������� - ��� ��� ��������(���� ��-����� ��� ���� �( ��+���� -��� ��� � 0F6? ???

;� �� �$ �������� �� ��� �� ���� , �� �����! &' (�� !����� � ��!!��� ���� ���� � )����&'*, �� (�������#�%��4�+ (�� ������, �� �� ���������� ��� ���� �� ���� �� ������ ���#$ #504? � �� ���+� � '����� �� + � ��� ����(�� .#�/-��� � ��� ������� � ��� ��� 07 ������'��� ���� �� ��� � .+� ��+�8/ %�� � =�� ����� ���� �8�� ������ � ��� � .H�0@"/ � ��� �����-��� � ���� ��� �� ���+� � ��� � .H�0@#/ %�� ���$����� � H�0@� ��� � ��� ���� �� ��� �(��'� � "��� ��� ��������+�� �� ��- +��� ��� +�8� %�� ���$������ �� !"#�12� �;����� +( ��� �� �� .0114/� � '������� <6 ��� ��� ��-��� ����� ��� �� ���+� � ��� � N-���� ����� 9 �� H�0@" .��������� ��� 0112 /O � ''� � �� +� ���� ''��8�� ���( 644 ��� ��� ���� �$������ �� #504? H������ ������ � +�� '������( ��>�� ������ 06? �� !"�$0 ����, ��-����� �� � ������� �� � ��� H$������ ���� ��� � �� � � ��� H$������ ��>�� ��� !"#�12 � ��� !"�$0 �$������ � ( +� ��� �� �� � ��� ��� ����$����� #504? '����� E����+� � �� ���� �� H�0@" �� ��- +���- E ++�� 71< - �������� -��� ��% ���� '����� ����' �� <6 ��� ��� �� ���H�0@" ��� � .H�0@"6L</ .E71</ E ++�� 09@ - �������� -��� ��% ���� '����� ��� ��� <1 ��� ��� ������ �� ��� �$������ ��#504? .<727/

&5� ��!!���H� �� %�� �K)EH"! KJ �H:��%��"%�:� ��E�"%K!K�3

Page 3: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

��������������� ������� ����� ���'��� -��� '����������� ��;��� '� � '������� �����+�� .������� �� ��� 0112 / ��� �� -��� ������� � 0M #�" � %#�% +����� � ���+ ��� �������� -������� �( �� ��� ��� �����+� � ��% �� ����� �� �� ���� �( ����� ��� ��%$H�0@"0� ��%$H�0@"0L9� � ��%$H�0@"6L7���'�������( %�� ��8���� -��� ���������� � 0? ???� � ��� 07 �� �<��

7�"#�%!��( ������������ ����# )7����* %�� '�������� ���������'��� �� ��� �'��� � -����� ������� �� ��� �!��" �� ������ ��" ��� ��+���� �� H�0@" �����-�� '������ '������� .������� �� ���0112+/ #���I(� �(� �� ��� �������� '��� ���� ��� +( ���+� ������ ��� �� ��� � ������� �� ���� .0? �� �� 0? �/� '��� �( ��+��(.67L7??$���� ������� �� H�0@"$�� ���� !"� ����/� � ���� �( ��+��( .7??L7???$���� �������/ ������ ��� �� � �� ��� �� � �� -���-��� <?? � �� ��%$H�0@"0L7� 7?$���� ������� �� ��� '��� �( ��+��(� � 0???$���� ������� �� ��� ���� �( ��+��( (������ ��������� ����� �� ������� ��� � ��� ( " ������ ��� '�������(.������� �� ��� 0112+/� � 8�� � ����� �� '����� -��� ���+�� -�� -���-��� �� ��� -��� <?? � �� ��� � ���� ���� %�� �'������� �!��" - �� ���� ��� �����-�� �������F *��� -��� �� ��� ��� 6 � -��� <?? ��� '���>�� �����+� � ��%$H�0@"0L7 � 7?�� �� ? 0 � � �+� ��B+�� �+� �� +������ '� 1 @ "���� - ��� -��� '��'� ��$+������� ����'� 2 6� � +������ -��� 0??�� '��'� ��$+������� ��� ��� ��� 0M#�"� -��� -��� ���+ ��� ��� 0 � -��� 7?�� �� '��� �( ���� .!"� ��������/ ������� 7? ���� � '��'� ��$+������� ��� ��� ��� 0M #�" � ? ?7M %-��$6?� - ���� � ���+ ��� ��� 0 � -��� 7?�� ����� ���'���8�� �$� +���� �� � ��$��� ��" .� ���/ ������� 0???$���� �'��'� ��$+������� ��� -��� 0M #�" � ? ?7M %-��$6? "���� ����� - ���� �$'��(����� ��� � ? 0M �6K6 �� 0? �� � ����7?�� 6 � �6�K< -��� ���� � �� ���� - (�� � ���'��� �� ����� ������( -��� +��� ��%$H�0@"0L7 � �����+� � ��% J�� � ������ ������ ��� �� K�<16 �� ��� �+� ��� -��� ��% - �+�� �������� ��� �� �� ��� �+� ��� -��� ��%$H�0@"0L7

E��)!%�

��� ��� ���� ���� ���������� ���� ����� !"� �� -��� (�� +( �����+������ ��� �� ������( -��� ��� #504?���� '������ ��%$H�0@"0L7� -���� ��� � ��� �����H�0@" ��� � �� #504? %� ����� �� ( '��+��������� ������( -��� ��� ��% �����( �� ��� ���� '��������� ' ����P � ������ �� -��� '�� ���+�� -��� + ����� ��( �� ��� ��� �����+� � ��% K� 7? !"� �� ������ 00��-�� '���>� ������� ������( -��� H�0@"0L7 ��� ��$

��� ��" ���� �( ��+���� .;� +/ H� ��" �� ������( -���#504? H�0@"0L7 - �������� � �� �� 0@ ' ���� -������� ���� ���'�������� �� � 7? �� ���� �� ���( ������

��+�;����(� �!��" (��� ��� ��� �������� �� ��" ��� ��+���� �� H�0@" - ������'�� )��� ��� �'������� ( ������� ������� � ����� ��� ��� �������� 67 !"� �� -��� ����� %�� ����' �� �� ������� ��� �� �� ������� ��� �����+��� �� ������( -��� H�0@" %�� ����� �� �� �� ���� -��� H�0@" +( �!��" .�� K�<16 ��? @0/ -���� ��� ��� ��� 04 !"� �� � ���� �'�� ����7? �� ���( ������ � � �� ��� +���- ��� ���$��� �� ��� ( ��K� ? 94 .�� K� �� ������ Q 6��/

� � �������� ���� ��� ��� ���� ���� ��!���! ����������� %� �� � ������� ��� ������ ��� -���� ��� H�0@"��� � �� � �� ��������� +( ��� ��+���� � !"� �� ������+������ - '�������� ��� ��� �����-�� �8 ����'����� ��� ��� � ���� �� ���� �� ��� ��� #504? H�0@"��� � .;� </F ��%$H�0@"0L7 .���� �/, ��%$H�0@"0L9 .�����/, ��%$H�0@"9 .���� �/, ��%$H�0@"6 7 .���� �/, ��%$H�0@"6 .���� �/, � ��%$H�0@"0 .���� �/� �;� � ���� ����� �������� �����+� � '����� -��� ��� ��� ��� �(�� ��>���� +( �����+������ -��� ��� ��$��% � ++�� ��$����� E74 %�� �(� - '�������� -��� ��� !"� �� �� ���-�� �� ������( -��� H�0@"0L7 E���� �� ��� ����� �0��! � � ��'���� ���� ' ���� �� ��- � ;� < K� ������ !"� �� ������ �� �� ���� -��� H�0@"0L9 � H�0@"0��-� �������� �+�� �� �8 �� �� ���� -��� H�0@"6 �H�07"6 7� � ����� �� �� ���� -��� H�0@"9

��� ���, !�( =��� �+<, =��� :���, �� ������ ����%���� ��������, ���� ���� � �+ (�� (�������#�%��4������ )���%�* %�� H�0@"$�� ����� !"� �� -��� �(���+( �����+������ ��� �� ������( -��� ��� !"�$0 ���� E������ ��� �(� �� ��� ����� � 0��! �� � ��'���� ����>��� �� ��- � ;� 5 " �� �� �� ������� ��� 06? �� !"�$0 ���� '������� +( �������� ��� ��� ����(�� - ��- �� �� �� -��� ��"+ 069 .���� �/ � ������� !"�$0�� ���� -��� ��"+ ��04 .�������� � �� ��� H�0@" ��� �/.���� �/� � ++�� ���� E71< . �� �������� � �� H�0@"/ .���� �/� � E09@ .-���� �������� ��� �$����� � '����� �� ��� #504?������� �/ .���� �/ H� �� ������( - �� -��� ��� � � ++������ .���� �/ � -��� ��"+ �������� �� ��� ��<7EK '����� K� ��� 00 H�0@"$�� ����� !"� �� � ����� ��-�� �� ������( -���!"�$0 .����� � � �/� � >�� �� ������ ��� ��" ��+���� ��

;� �� +$ � ����� �� ��� ��� ����� ���� ���������� ���� �����$ "�>��( '���>�� #504? H�0@" - �� ���� ��� +( 07M ���L5"�� � �� ������ �� ������������ ����' -��� ���+ ��� -��� !"�.����� ����/ � �� ���( ������ �� .H��/ .����� �����/� ��� -��� ��� � ������� �� 0 F 6? � '�� ���+�� � �� �����+� � ��% �� +�����'���>� �� ������( -��� ��� ��% �����( �� ��� ���� '����� J���$����� ��%$H�0@" � ������� � -����� �� 97 7 �� !�-�� + ���'���� ���� � ��� '������ �� ��� �� �� '����� %�� ���� ���'����� �� ��� ������� � -����� � ���� �� <7� 90� 60� � 0< �� ������ ��� �� ��� �����

;� �� <$ � ����� �� ��� ��� ����� ���� ������ ������ �� �%������! 53 ����� ���� �� �� ���� ����� ����� ���� �� �!����� � �# � 2 �������� �� ��$ E����+� � '����� -����� ���� ��� +( 07M ���L5"��� �� ������ �� ������������ � � +����-��� �� !"�$*�� !"�$"�� � ��� � ������ ���� .H��$0/ %������� �����+��� ��- � ��� >���� ��� ��� �;� � ���� �������+� �� �>��( '���>�� '����� H�0@"0L7 .����� �� �� � ��/�H�0@"0L9 .����� �� �� � ��/� H�0@"9 .����� �� �� � ��/� H�0@"6 7.����� �� ��� � ��/� H�0@"6 .����� �� ��� � ��/� � H�0@"0 .����� ����� � ��/ ��� -��� ������� 0 F 6? � ���'�����( '�� ���+�� � �������+� � ��% %�� ���� ��� '����� �� ��� ������� � -������ ���� �� @@� <7� 90� 60� � 0< �� �� ���� ��� �� ��� ����� %��' ���� �� ������� ������( �� ��'���� ���� �� ' ���� ���� ��� +(����� !"� �� ��- � 0��! �

:K! 009� HK @ �����#�E 0111 �)#��% KJ !"� ��E" %"E��%� H�0@" KJ #504? &5&

Page 4: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

#504? �8�� ���� ���� ��� ����(�� .�� ��-/ � ���� �� ��"�� ������( �� !"�$0 �� ��� ����(��$������� ����$����� #504? - �� �+����� -��� ( �� ��� ��� � ������ ��� ��

����� �� ������# �3&5 �� ���%� �� ���� �# ������� �� � ��� 5 �� ����� � ������� �� �� �8'�������-� �� � �������� ��� >� '���>���( �� ��+���� �� !"�$0 ����� E71< %�� ���� - ���� ��� +( �������� � ++��-��� �����+� � ���� �� ��%$H�0@"6L< #( �����+��� �(�� ���� '�� ���'��� � �� �����+� � ��%� E71<�� ���� -��� H�0@"6� H�0@"6 7� � H�0@"9 "������'����� �� �� ������( -��� H�0@"6L9� E71< ��� ��� ���� ������( -��� H�0@"6L< ���� ��� �� � �� �� ��������� �'���'� � ����� < �� H�0@" ��+�;����(� �� ������( ��� ��� �!"�$0 ���� ��� ��� +���� �� E71<� -� (�� ��������+��� �� ������( �� E71< � �� !"�$0 ���� ��'����� ������� �� �� ������( -��� ���� � �+�� ���� �� ��� H�0@"��� � E�'���� ���� ����� �� ��� �(� �� ��- � ;� 3 "���� '�� ���'��� -��� ��%$H�0@" 6� H�0@"6 7� H�0@" 9� � H�0@" 6L9 .���� �/� �� ������( �� E71< -��� !"�$0 ��� ���� �� ���' ��� -��� ��� ��� ��� �� ������( ���� ��'����� -��������+� � ��% .���� �/ "���� '�� ���'��� -��� H�0@"6L<���-����� E71< ���'�����( ��� �� +����( �� +�� �� !"�$0 .�����/ %��� ����� ���� �� �� � +���� �� E71< �� !"�$0 ����� ��� +( �'���'� � ����� < . ��� ��� <7L74/ �� H�0@"

����������� �� ��� ��� � ����� ���� ����� �� ����� ��6����!# �!�� ���� �������!�� �����4��# ���� �����%� ���� � �� ���� , �� ���� ������ �; �����4��#���� �� �=> %� ������ �� -������ !"� �� �� � ��� � ��+���� �� H�0@" �� �� �� -��� ����� �'���'� � ��� #504?������� �� -� '�� ���+�� >�� H�0@"$�� ����� �� .!"�$!��!"�$!H� !"�$:K� !"�$*�� � !"�$3�/ -��� ���� �( ����8 ��� ��� ��%$H�0@"0� ��%$H�0@"0L9� � ��%$H�0@"6L7 " ��'���� ���� �8 �'�� �� ��� �(� � ��- �;� � 5�� ���'��� -��� ��8 �� ���� �����+� � ���� ��H�0@" ���'�����( +������ �� ������( �� ��� !"� �� -���H�0@"0L7 .;� �$� ���� �/� %�� >�� !"� �� �� ���� -���!"�$0 '����� ���� ���$67 ������� ������ .;� �%� ���� �,0��! ��/� -���� ��� � ������ �� -��� ��� ����� .���� �/ ��'��� ��(� '�� ���'��� �� ��� !"� �� � �� ��� H�0@"��� � ��� �� ���� ����� �� ������( -��� !"�$0 .;� �%� ���� �/ ��+�;����(� ��� �� ���( - ��� � ����� !"� �� �� ������� ��� ��" ��� ��+���� �� ����� -��� +��� �����+� �H�0@" � #504? �8�� ���� ���� ��� ����(�� .!"�$!�� !"�$��� � !"�$*�/ 5�� ���'��� �� ��� ����� �� -��� ��� �����( �� ��8 �� H�0@" �����+� � � � ��� �� ���� ������� ������( -��� #504? �8�� ���� ���� ��� ����(�� .� � ����-/ %��� �+��� ��� -��� ��>���� +( ������� �J �(�� 0 � H ��$'��� �� J��� !"� �� � '�� ���+�� � �������+� � ��%� +��� �� ��� �'����� � ��� �� ��� '��� -�������� �� 0F0@? .!"�$3�� !"�$:K/� 0F4? .!"�$!H� !"�$*�/� � 0F<? .!"�$!�/� ��'�������( 5�� ���'��� �� ��� �� -��� ���

���� �( �� ��8 �� �����+� � ���� �� H�0@" ��� �� ���� ���������� �� ������� �J �� ������( -��� ��� #��

����)���KH

K��� ��� ' � ���� � (� �� ��� ��� ��� ����' � ����� � �������� ��� �� � ��� + � ��� ����(�� ��� �� '������ #504?� � � =�� ������ � ���� �� ��� ��+���� '������� +( ' ����-��� ���� � ����� � � �� � �� +������� ��� � ����� � �������� � � �� ��� ��� � �����( ������ #5� '��'������B���'���� ����� ��� ����� � '��'������� ����� '� � '��'�������� �� ��� ���� �� ��� ���(� !"� E���� ����� ��� ' ����� ��� ���� ����� (��� ����� �� � ��+���� �� #504?����� -��� +� ��� � � ���� � ���� � ���� ��� � " �('������� � � =�� +����� �� +� �8'����� � �� � ��� �����������(�+����� ��� ��� ����' �� ������� ����� +� ������� ��� +(��������� � ��� >� '���>����� �B�� ��� �������� ������ ����� ��$#504? ��+����

%�� +��(������ ��� �����' +��-�� #504? � ��� � =��!"� ��� ���� � ��� +�� ���� ��+ �� 5������ +������$�� � � ���������� >��� ��������� ���>� � ���������+��-�� ���� '����� J�� �8 �'��� �� � -��� �� +����� �� ����� � !"� �� � ��"+ �� �� -��� !"#�12 � !"�$0.�'����� � �� ��� ����(��$������� ���� �� 12 � 06? �� ���'�������(/� +�� �� �� �� �� -��� #504? ��� ��� ���� �'������.� �������� �� ��� 011@, ��� �� ��� 0114/ %���� � �-���'����� �������� ��-����� �� � +��� !"#�12 � !"�$0 ��� ��( �����'�� �� ����� �� ��� �8�� ������ � ��� � ��#504? .5 �� ��� 0112� 0111, ��� �� �� ��� 0114, ��� &��� �� ���

0��! �$ � ����� �� ��� ��� ����� ���� �� ��� ���� ��� ���� ������ ���� ����� ���� �� ��� � �# � 2�������� �� ��

!"� �� H�0@"0$7 H�0@"0$9 H�0@"9 H�0@"6 7 H�0@"6 H�0@"0

!"�$"� QQ QQ Q Q Q QQ!"�$#� QQ QQ Q Q Q Q!"�$�) Q Q L Q L Q!"�$!" Q Q L L Q Q!"�$�� Q Q Q Q Q Q!"�$*� QQ QQ L Q Q Q!"�$�# Q Q L Q Q Q5������ �� 2B2 2B2 9B2 @B2 @B2 2B2

�!"� �� . R 2/ -��� ��'����� �� ��$��% ������� ������( � (�� ��� �����+��� �� ������( -��� ��% ���� '����� ��� ��� �������� '����� �� ���#504? H�0@" ��� �

0��! ��$ ��� �����%�����4 ��� ��� �!�� ���� ������ (�������#�%��4 ���%� ���� � �� ��!!%!� ��

���� -����� ���� (�������#��

!"� �� H�0@" !"�$0 #504? ������� �J

!"�$"� Q L L L!"�$#� Q L L L!"�$�) Q Q Q 0 F 4?!"�$!" Q Q Q 0 F 0@?!"�$!� Q Q Q 0 F <?!"�$!H Q Q L 0 F 4?!"�$�� Q Q Q 0 F 6?!"�$:K Q Q L 0 F 0@?!"�$*� Q Q Q 0 F 4?!"�$3� Q Q L 0 F 0@?!"�$�# Q L L 0 F 0?5������ �� 00B00 4B00 7B00 1B00

�!"� �� -��� ��'����� �� ��$��% �� ������( � (�� ��� �����+����� ������( -��� ��%$H�0@"� !"�$0 ���� ������ ��� ��������� ���$67������� ������� � #504? �8�� ���� ���� ��� ����(�� ������� �J �� ������(- ��������� � 0 � H ��$'��� ��

&3 ��!!���H� �� %�� �K)EH"! KJ �H:��%��"%�:� ��E�"%K!K�3

Page 5: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

0114, ��� �� ��� 0114/ # �� � ���� +�������� � � ������� �+������� ������ �� ''� � �� � ��� 06? �� !"�$0 ���� � ������� ��� + � ��� ����(�� ��� �� +( '������(��� ��� � �� ��#504? � � �� ���+� �$' �� ��� �� � �� � ��� !"#�12� ���� ��� +( ������� '������(� -���� ����� � �� �� ����� � ��� #504? �$������ .;� �/

%�� H�0@" ��� � � ������( +�� ��- �� +� � =��� ���� �� ��� ��+���� ���� ���� � ������ ����' �� ' ���� ��� ��� ��+���� ���� ��� �� �� ' ���� -��� #5 � ���� ���� ������(�������� �'���'� -���� ��� H$����� � <7 ��� ��� �� ���#504? H�0@" ��� � .������� �� ��� 0112 / H� � =�� �� ������(- ���� -��� ��� ��� ��� 90 ��� ��� � ��� �$����� �'����� �� H�0@" .������� �� ��� 0112 / " ���� '����� �� ��'��'������ ��� ���� �� �� �� �� -��� ��� �� #5$��� ��� ������ ��� -���� ��� H�0@" ��� � " ���� �+�� ��'��'������ ��� ���� �� ���������� � ������� �'���'� ���� ���( �$����� � '����� �� H�0@" .���� ������ �� ��� 0111/ � ���� �� �� ���� ' ���� -��� ����� '� � '��'�������-��� ���� �� �� �� -��� ��;�� �'���'� ��� ��� � ��� �$����� � '����� �� H�0@" ����+���� #5$ ��� ��� �'���'�.������� �� ��� 0111/ ���������(� ��� ��� ��� �;����� � � '������� +( ��� �� �� .0114/ ���� �� �� � !"#�12 � �� ��� H$����� � <0 ��� ��� �� H�0@" %��� ��� '����� � ������� � =�� ������ ��� � ������ +( ��� ��+���� � #5 �'��'������ ��� ���� � ��� ���(� -� ������ �� �� � �+���� !"� ' ���� .00 �� 7? ' ����/ �� �� �� -��� �����+� �'����� �� � �����'�� �� ��� H�0@" ��� �

# �� � ��� � � �����+�� +���� -� �('�������� �� � ��" ��+���� � !"� �� +�� �� �'���'� ��� ��� -���� ��� �$����� � 9@ ��� ��� �� ��� ��� � %� ���� ��� ;����� -�'�������� �'���'� � ''�� �� ��" ��+���� � !"� �� ���� ���� �����+� � ���� �� H�0@" ����-� � ��8'������(���-����� ��� �� ��� !"� �� -��� ���� �� �� �� -��� �'���'� ��� ��� -���� ��� H$����� � 0< ��� ��� ������ ��H�0@"� � �8 �� ��� !"� �� �� ���� -��� �'���'� -���� ��� ��� 07L64 �� H�0@" H������ �� ���� ������ ��� ����� ��� -���� ��� 12 �� !"� '����� �����+�� +( ��� �� ��.0114/

� ���� � �� ��� '������ >��� � #5� ��-����� ��� H�0@"��� � ��� �� ''� � �� +� ��� ��������� � ������ ������ +( ��" ��+���� � !"� *�� !"� �� � �� ����� -���+��� ��� #504? H�0@" ��� � � ��� 06? �� ���+�� �� ������ ��� #504? ������� �� -��� '�� ���+�� � �� ��� H�0@"��� �� �� ��-�� � �������� � ����� �� ������( -��� ���06? �� '�'���� !���-��� -�� !"� �� � �� ����� -��� +���H�0@" � ����$����� #504? -��� '�� ���+�� � �� H�0@"�

���( ��-�� � �������� � ����� �� ������( -��� #504? %�������� ���� �� �� �� -���� ���� � !"� �� �� �� -��� ���H�0@" ��� �� ���( �� �8��+�� � =�� �� ������( -��� ������ ��'���'� � ��� ��� ��� '����� �� ��� !"�$0 ���� � ����$����� #504?

"���� �(��� ��� ����� � � � ���� ��� ' ����� -� -���� +�� �� >� ( ������ ��� +��-�� ��� '����� �� ��" ��+���� �� ��� H�0@" ��� � � ( � =�� ����� � �� ���� %�� ����' �� !"� ' ���� -��� H�0@" �� ������( ������ +���!"� �� �������� .�� �� <? ' ����/ � !"� �� ��������� .�-��� 0? ' ����/ � ������� ����� � � �8 �� �� '����'����� ������ �+�� �� !"� ' ����� � ���� � ��������� - ��-��� ��� �� ���;���( � !"� ' ���� �� � ���� ��� ������ ��'�� �� H�0@"

� ����� '��� �� ��� ���(� -� ��������� �������������$�� ������( +��-�� #504? � ��� !"�$0 ���� ��� �-�� ++�� ��$�� S�� .E71</ �������� � �� ��� H$����� ������ �� ��� #504? ������� � � ��� ����� .E09@/ �������� � �� ��� �$����� � '����� �� ��� �������� #��� �� ���� -���$�� � �������� ��� �$'���>� ��$#504? ��+���� -��� ��"+ ��04� �������� �� ��� H�0@" ��� � �� #504?� �� ����-��� ��� �� 06? �� '����� .!"�$0/ �� � - �� ���������+( ��"+ 069 � �� ���� !"� ' ���� !"�$0 - ����� ��(�����+�� ��� � ���� ���� �� ��"+ 069 � �� ���� !"�' ���� .� �������� �� ��� 011@/ K�� ����� �� ������ -���'������ �+��� ��� ������� �� � ��� 06? �� '����� ����������� ��� ����(�� � '����� �� ��� #504? ������� � .��� �� ����� 0114, ��� &��� �� ��� 0114/ %��� ����� ��� �� ������ ��+���� ���� !"� ' ���� �� ��"+ 069 � ���� ������ �����' +��-�� ��� 06? �� #504? �� ���� � ��� !"�$0 ���� �������� � � ���� ����� ������ ��� .5 �� ���0112� 0111, ��� �� ��� 0114/ � ��� >��� �� ��� ���( �����(������ ��-����� �� � ��� 06? �� #504? �� ���� � !"�$0

;� �� 5$ ��� ���, !�( =��� �+<, =��� :���, �� ������ ����%���� ��������, ���� ���� ���%�$ 5����� �� ������ ������������ ���$67 ������� ������ -��� �� ���� ��� +( 4M ���L5"��� �� ������ �� ������������� � ���+ ��� -��� ��"+ 069 .�����/� ��"+ ��04 .���� �/� E71< .���� �/� E09@ .���� �/� ��� � � ++������ .���� �/� !"� �� !"�$:K .���� �/ !"�$!" .���� �/� � ��� ������� ���� .���� �/ %�� ���� ��� '����� �� ������� � -������ ���� �� 6??� 00@� 12� @@� � <7 �� �� ���� ��� �� ��� �����

;� �� 3$ ������ ���� 3&5 ����� ���� ����� � ��� 5 �� ���%�$� ./� �����+� � ��%$H�0@"6L< .����� � � �/ � ��%$H�0@"0L9 .����� � � �/ -��� �� ���� ��� +( 07M ���L5"�� � .�/������� ��� ��������� ������ ���� ���$67 ���� - �� ���� ���+( 4M ���L5"�� %�� +��� -��� � +���� -��� ���� E71< �� � � � +��'�� ���+�� -��� ��� �����-�� �����+� � '�����F ��% .� ����� � ��, �� ���� �/� ��%$H�0@"6L< .� ���� �, �� ���� �/� � ��%$H�0@"6L9.� ���� �, �� ���� �/ "���� '�� ���'��� �� E71< � �� ��%� ��� ������� ��� �� ������( -��� ��%$H�0@"6L<� ��%$H�0@"0L9 .� ����� � � �/� � !"�$0 .�� ���� �/ ���'���� '�� ���'��� �� E71< � ����%$H�0@"6L< .� ���� �/ +������ �� ������( �� ��� ���� -��� !"�$0.�� ���� �/ � ���� �� ���� ���'���� '�� ���'��� � �� ��%$H�0@"6L9 .� ���� �/� ��� ���� ��� ��� �� �� ������( -��� !"�$0 .������ �/ %�� ��� �� ��� ���� �� ./ ���� �� ��� '����� �� ������� �-����� � ���� �� <7� 90� � 60 �� � � ���� �� ��� ����� �� .�/��'���� ��� '����� �� ������� � -����� � ���� �� 6??� 00@� 12� �@@ ��

:K! 009� HK @ �����#�E 0111 �)#��% KJ !"� ��E" %"E��%� H�0@" KJ #504? &3�

Page 6: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

�� ������ � "��� ��� �;����� � � � !"�$0 �� �� � �� +�� � ��� H$������ �� !"�$0 -���� ��� H�0@" ��� �� �� +�� '������( ��>�� (�� � ��� ���(� -� ��- �'���'�� ''�� � � �� ���� ���� � ++�� 71< �� � - �������� -��� �����+� � ���� �� H�0@"6L< "������� E71< ��� ��� ��+���� �� �������� ������ ��� � H�0@"� �������H�0@" ����� 6� 6 7� 9� � <� '�� ���'��� �(� ����$�� ��� �� � ��( ��+���� �� H�0@" ����� < ''� � �� +������ � ��� ��� +���� �� E71< �� !"�$0 K�� >��� ������� -��� ��� ��'��� �� � ��� H$������ �� !"�$0 ���� ��� � � �� � ��� H$������ ��>�� ��� !"#�12 .��� �� ���0114/ %�� ������� �� � �������� ��-����� ��� ��>�� ���+( ��� ��� �;����� �� ��� !"�$0 '����� � ���������� ����� �� �� �� ���( ��� ���� �� +( -���� !"�$0 ����� ���

"������� ��� '������ ��'��� ��� �� >� !"� �� �� �� ��-��� #504?� ��� ����� ����� ������ ��� �� � �� ����' ���� -��� ��� ����� � � �����I�������� >��� �� !"�� ( �������� 04? �� '����� �8�� ���� ���� �� ����� ����(�� �� � ������ �� -��� #504? .#�� �� �� ��� 011@,������ � �� ��� 0112, "���� ��� �� ��� 0111, ������� �� ��� 0111/ � ������� ������(� � � -��� ��" �� �� ���� �8���� ��� ��+���� �� #504? H�0@" - ��'����� .������� �� ��� 0111/ *� ���� �� � >�� �� ��� 00 !"� �� �� � -��� �� ����� -���#504? H�0@" ��������� #504? �8�� ���� ���� ��� ����(�� %�� �����' �( +��-�� �� ������( -��� H�0@" � �� ������(-��� ����$����� #504? � �����( �� +� ��� �� ��� � �� �� � ��������+��� ( � ���� ������ � �������� ��$#504? ��+���� -�� �����+� � #504?� � ���� �� #504? ��� ������� �'������ �� ��� ����(��� � ���� - '�������( ��-.������� �� ��� 0112+/

� ��� �(� ��� ����� ��>�� �� � !"� � �������������� � *� ������ �� �� � �+�� �� ' ���� -��� !"�'������ ��� ��+���� �� ��� #504? H�0@" ��� � ��" ��� ��+���� � ��� �+�� �� ' ���� �� �� -��� ��� �� ������ ��� �� � �� � ������ +( ��� ��� ��+���� � #5 � '��'������ ��� ���� J������ ����� -��� ���� ���' ������� ����� �� �� ��" ��� ��+���� �� ��� #504?H�0@" ��� �

�� � ��! �� �"##����� $% &�'� ("$� ) *����� '��+ )� ����� ,��-,�����

..�/�.�/0 $% 1�"��)�� 2���)�"�����3� ��)��4� ����� 5 ���6��� ��� �����

�������� 4��3 ��� 7 ����3 '�����-'� 4�"�� .1�5�/0 ��� '2� ����� ���6��

.����/� 7� �����4"��% �)!�� ����� ��� 4���� �� �+��� ������ 4�� #��+ � �� "� ��

#�� ����8 ����9 1�� /�/� 5���0 '��� �!� : �%0 &�'��0 1�� ��(� ��� �!�+ )�0

'���4���0 &�'��0 1�� �'� :���0 :� )���0 &�'��0 1�� .� ������0 �"� )�0

.��3��%0 1�� '� /�$����!�0 7���� 0 (�����0 ��� 1�� �� ��"���0 1������0

.��3��%� ;� ��� � ��0 1�� ��� �!�+ )� ! ���% #��+ ��� "� �� 3���� ���

���#�� "� �� #���") �� 1-� 4��3 )��� � ���� '::-�� 3�� "3� 7� ��� ����

�����4"� �� :�� ��� <��"�0 '��� ���"� ,� 3��0 :�� �� �� ')��)!��$�)�0 ��� &�� )�

7�����3���0 &� +��� �% �4 7"=�>$"��0 4�� ��)�� )�� ��� ����)��

E�J�E�H���

"���� ��� "� #� � E5� � �� "�� ����� �� ������=� !� � �� � ��� #��� ���� !F��������� +����� '��'������ ��� ��� -��� ��" ��+���� � �� #504?�� #569? ���� �� / 1��3���� 0<?F006L004� 0111

# ���� ��� �� � !"� ������� ��F " �����+� � ���� �� ��� ��� #504?������� � ���� ���� ��$����� ������������ ���'��8 � �)��3 ���%9@F4460L449?� 0112

#�� �� J� � �� �� �� ��� �� �� �� ��F !�� � ��" +����� ���� ��� � ������� -��� ��� ��+���� � �� 04? �� '��'������ ���� �)� (�� ��� 9F9<7L9<2�011@

#��� � #�� *�= ��-� J� � ��� E"� � "� #� �� ��� ����� 5�F !�� ���" +����� ���� ��� �� ���� � �������F ������������ �������'�����( �� / 1��3���� 002F641L61@� 0142

���� ������ �� ������� �� ���� �� �� ��F ���0 � ���9 �� ��� � =����������+��� �+�� � � ������ �'���'� -���� ��� H�0@" ��� � ��#504? � '��'������ ��� ���� / ;�+��� 1��3���� 009F0<?L0<6� 0111

��������� %5� � +��� �F ��" ��� � ���� ��� �� ��������� .������ +�������� � �� ���������/ �� / 1��3���� 0?0F797L7<6� 0121

�� � !"� E ���� � ���� � ���� *�� J�� ��� �� �;��;��� �!� "� �� ��� ���������F ��� ��� �� ��� �'����� � ��H" �����'���� �� ��� 04?$�� ��� ���� ��������� +( +����� '��'������ � ���'� ��� ���� �� �������� ��� ��� �� ��� '����� �� ��� ����������� / :� � ;�+���4@F0?44L0?1<� 011?

������-�� �� � ������ %� #��� � #�� #� �� ��� ��� ��� H���� - %F�����+������ ����� �� ��� � ��" ��� � / 1��3���� ') @F01<L6??� 0119

��� �"� % (��� %#� ��(�� !�� 5����� ��� ��� ��F #����� '��'������ �� �� ���� � ��+���� �� #5"�6 �� ��� � ��+���� �� !"#�12 �� � ���������'���'� ��� � �� ��� H�0@" ��� � / ;�+��� 1��3���� 006F0<4L076� 0111

������ � EJ� H���� �J� � �� �� �� �� ��( "F !�� � ��" +����� ���� ���-��� ��" ��+���� �8�������( �������� � �� ��� 04?$ �� 69? �� �'����� � ���� / ;�+��� 1��3���� 0?4F47<L474� 0112

������� ��� ����( ��� �� � !"F ����� � '��� �( ������� � �(� �� ���+����� '��'������ ��� ���� #504? / ;�+��� 1��3���� 11F6<9L67?� 0116

������� ��� ����( ��� ������� #�� "� �� ��� !�� �� �� � !"F #�����'��'������ � ���'� ��� ���� ��� ��+���� �������� ����� �$���� ���� ��� � ��� #504? ������� � / ;33"��� 070F72<6L727?� 0119

��� �� 3� )���� �� )�� �� �� � ������ %� ��� =�� 3� K- ��+� �F ��� � �� ��#504?� 04? �� +����� '��'������ ����� (���� 06? �� ���� �����8�� ������ � '��('�'���� / � �� :��3 629F1200L1202� 0114

! +�+ E�� "� �� ��� 5 ��� �5� ��� �� �J� �� � !"F ������� � �����������( ����� +����� '��'������ ���� �������� +( �����+������ / ;33"���09@F0690L0697� 014@

!�� �� �� � !"� %��( �!� % (��� "J� ����( ��� J ����( �"� ������� ��F " ' ����� ��� ����� �� ��� ��� $'���>� �������� ��� �� +����� '��'���������� ��+���� ���� ��� � �� ��� ���������� � ����� #504? / :� �;�+��� 16F6<4?L6<44� 0119

� �������� �5� !����� #5� #����� E�F %�� ���� �$�'����� � =����� ����� �� ��� � ���� � ��� � �� � / :��� � �� 001F@17L2?9� 0116

� �������� �5� % (��� %#� ���� �E� #����� E�� ��� ��F !"�$0� ��� ��� ���" ���� ��� ��� ����� � ���� 06? �� ������ >� ��� '�����(������� +( �'����� � ���� / ;�+��� 1��3���� 0?@F29<L294� 011@

� ����� �� "� � � �� H���� - %� � ������ %F %�� � =����( �� +�����'��'������ � ���'� ��� ���� ���� �'�� �� �� -��� ��� H�0@ ��� � �� ��� 04? �� +����� '��'������ ���� �)� 1��3���� ,��644F7?2L7?1� 011@

��� � �� �� � ������ %� #��� � #�� �� ��F " �(� �� ��� ����� � '��'������ ���� / 1��3���� ') 02F91L<<� 0114

H�� �� � ������ %F ��" ��+���� �� ��� ����� � '��'������ �� '���>� ��( �� ��-��� ��� �$������ �� #504? / ;�+��� 1��3���� 006F67<L677� 0111

5 ��� ���������� ��� ����� �� � ��� ���� �#� ���� �JF #�����'��'������ � ��� � ��" ���� ��� �� �������� ���� � 06? �� ��� ����(�� ���� ���� ��(��'����� -��� ������ ���$�� ������( �� #504? / ;�+��� 1��3���� 0?4F<69L<61� 0112

5 ��� ���������� ��� H�=���� �� �� ��� ����� � ��� ���� �#� ���� �JF %('� A:�� ���� �� .#504?/ � !"�$0 �� '���� �' � �� �����������'��8� / ;�+��� 1��3���� 006F74L@0� 0111

5���� �� �� � �� J� J ��� #� #�&����� !� ����� �� � �� � �$�� #��� ���� !F ��� ��� ��+���� ���� +����� '��'������ .#5/ ' ���� +�� ������ ��� �

;� �� �$ ����������� �� ��� ��� ���� �� ����� ����� ������ �� ��� �!�� ���� �����4��# ���� ���%�$ � ./� ����� ���� �>��( '���>�� ��%$H�0@" - �� ���� ��� +( 07M ���L5"�� � .�/������ ���� ������ ��� ��������� ������ ���� ���$67 ���� - �� ���� ��� +( 4M ���L5"�� %�� +��� -��� � +���� -��� !"�$*�'�� ���+�� -��� ������ ��% .����� � � �/ �� -��� ��8 �� + ����� � �����( �� ��� ��� �;� � ���� �� ��%$H�0@"0� ��%$H�0@"0L9� ���%$H�0@"6L7 .����� � � �/ %�� +��� � ����� � � � -��� ���+ ���-��� H�� %�� ��� �� ��� ���� �� ./ ���� �� ��� '����� �� ������� �-����� � ���� �� <7� 90� 60� � 0< �� � � ���� �� ��� ����� �� .�/��'���� ��� '����� �� ������� � -����� � ���� �� 6??� 00@� 12� �@@ �� %�� ' ���� �� �� ������( � ��'���� ���� �� ��� ' ���� ���� ��� +( �� >�� !"� �� �(��� +( ��� '��������

&3+ ��!!���H� �� %�� �K)EH"! KJ �H:��%��"%�:� ��E�"%K!K�3

Page 7: Autoantibodies in a Subgroup of Patients with Linear IgA Disease React with the NC16A Domain of BP1801

+��� ��� �8�� ������ � � ��� ��� ������ � ��� � �� ��� #5 ���� 04? /;�+��� 1��3���� 006F0<0L0<2� 0111

5��� $��+� �� ! � ��- �� ������� ��� !��+��� �� �� ���� "� ����� ��3 ��( �#F �������� �8'���� �� ��� �8�� ������ � ��� � �� +�����'��'������ ���� 6 .#5"�6/ � ��� �'����� � + ���� ���+� � ��' ���� -��� ���� ����� ���'��� +��� �'�������(� +���� �?# 1��3����<F011L6?@� 0117

5��� �� ! � "�� ���+�� �� 5� �� ��F �� ��� �� ���� ��� � ��" ���� ��� +(�������������������'( � 0@ ' ���� -��� ��� � ��" ��'��� / ;�+���1��3���� 16F91L<7� 0141

��� &��� �� ����� �� � �� ��$� � �� H� E ��� � �� #������$%����� !F %-� ���� �� ���� �� A:�� � ��� ����(�� " ����$����� �� ���+� �'����� � ���+�� ������� � / � �� :��3 629F67192L671<9� 0114

������� �� ������� �� ����� �� �� ��F !�� � ��" ��� � -��� ������ ��� ��" ��+���� � �� ��� H�0@" ��� � �� #504? �� / 1��3���� 0<?F1@<L1@@�0111

*�= ��-� J� *������ � 5� !���� ��� #��� � #�� #� �� ��F �����>� ��� ����� � ���� ���� � ������ +����� ��� � �� ��������� � ��� � ��" ��� ��� ���� �� / 1��3���� 06<F072L0@6� 0110

3 ��� �� � �� ��F ������ ��� ��" ��$+ ���� ���+� � ��� ��+���� ����� ���� ���'�������� / ;�+��� 1��3���� @1F774L7@?� 0122

� �+��� �� � � :� � �� �� �� ���� � �� H���� �J� �� ���� "F !�� � ��"+����� ���� ��� -��� ��� ��+���� �� 61? �� ���� �� ������>+��� / 3 )�� 1��3���� 90F44<L444� 011<

������� �� ������� ��F #504?B�('� A:�� ���� ��F �� ���� � �;����� �

�������� ������� �� ��� ���� �$�'����� � =����� �)� 1��3���� ,��610F042L01<� 0111

������� �� � - � � 3� ����� "� �� ��F " ���� �+�'����� � +������� ��� � -��� ��� ��+���� �� 6?? �� ���� �� ��� + ���� ���+� � ��� / ;�+���1��3���� 0?@F0999L099@� 011@

������� �� E�� 5E� # ���� ��� !�� �� K� ���$� ��� �� �� � !"� ���������F %���� �������� �� �8�� ������ � #504? �'���'� ��������� +( +�����'��'������ ��� ��+���� / ;�+��� 1��3���� 0?1F729L721� 0112

������� �� � � �� ��� E�� 5E� �� ��F " �����( ������ ��(��$������������+�� ( ��� ��� �������� �� ������ ��� ��$#504? ��� ��+���� � ' ���� -��� +����� '��'������ / ;�+��� 1��3����0?1F@21L@49� 0112+

������� �� � �8 J� � � �� ��� �� ��F "��� ��+���� � ����� '� �'��'������� � ���� ���� �'���'� -���� ��� �$����� � H�0@" ��� ��� #504? / ;�+��� 1��3���� 009F002L060� 0111

��� ��� % (��� %#� � ���� �5� ��(�� !�F �����>� ��� �� ��� ��� ���+ ���� ���+� � ��� ���� � ��� ��� �� ��+��( � ��� � ��"+����� ���� ��� / :� � ;�+��� 47F406L46?� 011?

��� ��� % (��� %� � ���� �5� �� ��F ��" ��+���� � ������ +����� ��� � ����������� �� �� -��� 12 �� + ���� ��� '����� / ;�+��� 1��3����0?@F0622L064?� 011@

��� ��� % (��� %#� ��(�� !�� 5����� ��F %�� 12 �� ��� � ��" +����� ��� � ���� � ������ � �� '����� �� ��� �8�� ������ � ��� � �� ��� 04? �� +����� '��'������ ����� #5"�6 / ;�+��� 1��3���� 00?F6?2L60?� 0114

:K! 009� HK @ �����#�E 0111 �)#��% KJ !"� ��E" %"E��%� H�0@" KJ #504? &3<