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Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont N&H ACHIPIA 2015 8 de octubre de 2015 Santiago, Chile

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Page 1: Avances Tecnológicos en PCR para la Detección …...Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont

Avances Tecnológicos en PCR para laDetección Rápida de Patógenos enAlimentos y Medio AmbienteM.Sc. Viviana Fino - DuPont N&H

ACHIPIA 20158 de octubre de 2015

Santiago, Chile

Page 2: Avances Tecnológicos en PCR para la Detección …...Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont

Necesidades de la Industria Alimentaria

Detección Precisa de Patógenos

DuPont™ BAX® es la solución!

Tecnología molecular para una excepcionalreproducibilidad, confianza y sencibilidad

Cebadores cuidadosamente diseñados

• Que reconozcan la secuencia específica de ADN quese encuentra solamente en el “target”

• Minimizar los problemas de reacciones cruzadas quese encuentran comunmente en reacciones Ag-Ac

Excelente inclusividad/exclusividad

Validados por organismos reconocidosinternacionalmente

Resultados claros, rápidos y reproducibles

Page 3: Avances Tecnológicos en PCR para la Detección …...Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont

Evolución del Sistema de Detección BAX®

Gel Based Classic Q7 X5

¿Está ahí?

Detección de organismos patógenos. Rápido, seguro y fácil de usar

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The DuPont™ BAX® System X5

4

La plataforma Sistema BAX® X5 ofrece la misma solución rápida, precisa yfácil de usar para detección de patógenos que los clientes esperan de elmétodo Sistema BAX®, pero en un diseño más pequeño

• The BAX® System X5 instrument has a capacity of 32-samples.

• The BAX® System X5 PCR assays contain 64 tests

• The computer is a thin 14-inch laptop

• The default equipment for the lysis procedureis the compact DuPont™ Thermal Block.

Page 5: Avances Tecnológicos en PCR para la Detección …...Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont

Portafolio de Productos del Sistema BAX®PCR Standard

Salmonella spp.Listeria género (std. and 24E)Listeria monocytogenes (std. and 24E)E. coli O157:H7 MP (multiplex)Enterobacter sakazakiiYeast and mold

Real-Time PCR (TaqMan)Real-Time Campylobacter jejuni/coli/lariReal-Time Staphylococcus aureusReal-Time Vibrio cholerae/parahaemolyticus/vulnificus

Real-Time PCR (Scorpions)Real-Time E. coli O157:H7Real-Time STEC suite

Screening assay – eae, stxPanel 1 - O26, O111, O121Panel 2 - O45, O103, O145

Real-Time Salmonella spp.Real-Time Listeria género & Listeria monocytogenesReal –Time Shigela

Cada kit contiene 96 pruebas:Tubos para PCR con sus

tabletasTapas ópticasTampón de lisisProteasa

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USDA-APHIS NPIP

Brazil MAPA

People’sRepublic ofChina AQSIQ

HealthCanada

DanishVeterinary andFood Administration

Russian Rospotrebnadzor

Japanese Ministry of Health, Labourand Welfare

APROBACIONES

AOAC International

AOAC ResearchInstitute

AFNOR

NordVal

CERTIFICACIONES

USDA-FSIS

Mexico, Uruguay, Argentina, Costa Rica,Colombia, Honduras, Turquia, Australia, etc.

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Reactivos para PCR: Tabletas

Contienen todos los reactivos necesarios paraPCR:

PolimerasaNucleótidosCebadoresReacción de ControlMarcador fluorescente

Empacados en tubos para PCR

Contienen un control positivo de proceso interno

Se eliminan las transferencias múltiples

Se reducen los errores por operador: Mayor Reproducibilidad

Incluyen ingredientes que previenen la inhibición del PCR

Los sistemas de tapas cerradas reducen la contaminación potencial por amplicones

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Protocolos de Ensayos con Sistema Dupont™ Bax®

EnriquecimientoColectar la muestra ymezclarla con el medio deenriquecimiento.

1 2

IncubarIncubar la muestra durante el tiempodesignado

Preparación de la muestraTomar una alícuota delenriquecimiento y transferirla ala mezcla de buffer lisis. Calentarlos tubos para romper la paredcelular y liberar el DNA dentro dela solución.

3

4

Hidratación de tabletasTransferir el lisado a latableta contenida en cadatubo de PCR.

Amplificación y DetecciónColocar los tubos de PCR en elequipo del sistema BAX® Q7.Después Ud. puede trabajar enotras tareas mientras el sistemaBAX® amplifica y detecta..

5 6

Revisión de ResultadosLos resultados se muestranclaramente con unos íconos “SI oNo” tomando un tiempo entre 1 o3,5 hs, dependiendo del kit.

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Resultados para Ensayos Estándar

Negativo

Positivo

Indeterminados

Error en la señal

Control Positivo Interno!!

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Revisión de Resultados

Curvas: presentan picos a una temperatura determinada tanto para el controlpositivo interno como para el patógeno de interés

Resultado Positivo

Resultado Negativo

Pico del Target

Pico de Control Positivo

Pico de Control Positivo

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Resultados para Ensayos en Tiempo Real

Control Positivo Interno!!

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Impresión de los Reportes

Page 15: Avances Tecnológicos en PCR para la Detección …...Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont

Paquete de Arranque de DuPont TM Sistema BAX®

Todo lo que usted necesita paracomenzarEquipos

• Bloques de Calentamiento• Bloques de Enfriamiento• Pipetas• Herramientas para tapar y

destapar• Gradillas para tubos

Consumibles (para 192 pruebas)• Puntas para pipetas• Tubos para lisis con sus tapas• Guantes de Nitrilo

Entrenamiento en su laboratorio

Page 16: Avances Tecnológicos en PCR para la Detección …...Avances Tecnológicos en PCR para la Detección Rápida de Patógenos en Alimentos y Medio Ambiente M.Sc. Viviana Fino - DuPont

MUCHAS GRACIAS!

Viviana FinoDuPont Nutrición & SaludGerente Ventas y Técnico – Sud América

+56 (9) 7615 2869 o + 56 (2) 2362 [email protected]

Visite: www.dupont.cl


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