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Bacterias Filamentosas Bacterias Filamentosas de Interés en Micología de Interés en Micología Bacterias Filamentosas Bacterias Filamentosas de Interés en Micología de Interés en Micología Universidad Nacional del Nordeste Universidad Nacional del Nordeste Facultad de Medicina Facultad de Medicina Maestría en Micología Médica Maestría en Micología Médica Luis Merino - 2012

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Bacterias Filamentosas Bacterias Filamentosas de Interés en Micologíade Interés en MicologíaBacterias Filamentosas Bacterias Filamentosas de Interés en Micologíade Interés en Micología

U niversidad N acional del N ordesteU niversidad N acional del N ordesteFacultad de MedicinaFacultad de Medicina

Maestría en Micología MédicaMaestría en Micología Médica

Luis Merino - 2012

• Ampliamente distribuidas en el suelo

• Algunos son patógenos de humanos, animales y plantas

Reino

Bacteria

Philum

Actinobacteria

Orden

TaxonomíaTaxonomía

Actinomycetales

Suborden

Streptosporangineae Actinomycineae Streptomycineae Corynebacterineae

Familias

Streptosporangiaceae Actinomycetaceae Streptomycetaceae Nocardiaceae Mycobacteriaceae

Géneros

Actinomadura Actinomyces Streptomyces Nocardia Mycobacterium

Gram Negativas

Micobacterias

Características de los ácidos micólicos

• Mycobacterium spp: 60-90 carbonos de longitud

• Corynebacterium spp: 28-40 carbonos de longitud

• Nocardia spp: 40-56 carbonos de longitud

Gram Positivas

Bicapa lipídica

peptidoglicano lípidos + LPS porinas

Micolato

acil lipidos

arabinogalactano

Lipoarabinomanosa

Hábitat Natural

• Actinomicetales aeróbicos – Las especies de Nocardia y otros actinomicetales aeróbicos son

ubicuos en la naturaleza, principalmente en la tierra y participanactivamente en la descomposición de los vegetales

– Las especies de Streptomyces (>3.000) y Actinomadura se encuentran ampliamente distribuidos en los suelos.

– Las micobacterias atípicas se encuentran en el suelo, el agua y – Las micobacterias atípicas se encuentran en el suelo, el agua y animales de sangre fría y caliente.

• Actinomicetales anaeróbicos– Las especies de Actinomyces son colonizantes normales de las

membranas mucosas del hombre y los animales: orofaringe, amígdalas, glándulas salivales, árbol traqueobronquial, tracto gastrointestinal, aparato genital femenino.

Modos de infección

• Actinomicetales aeróbicos– La infección por Nocardia se adquiere por inhalación o inoculación

directa de la piel (traumatismo) con elementos contaminados

– Streptomyces y Actinomadura son organismos que infectan por traumatismos, especialmente en los miembros inferiores

– Especies de Actinomadura (A. madurae, A. latina, A. pelletieri) producen infecciones subcutáneas en zonas tropicales y subtropicales producen infecciones subcutáneas en zonas tropicales y subtropicales en personas que caminan descalzos.

– Las micobacterias atípicas principalmente las de crecimiento rápido se adquieren por inhalación o ingresan a través de heridas en la piel o prótesis.

• Actinomicetales anaeróbicos– Actinomyces invade tejidos normalmente estériles a partir de las

membranas mucosas donde se encuentran colonizando.

Formas de InfecciónActinomycetes aeróbicos

• Las infecciones por Nocardia se producen generalmente en pacientes

immunocomprometidos o aquellos con enfermedad pulmonar anterior

– Nocardia asteroides complex son agentes de infección pulmonar

• Las complicaciones de la neumonía por Nocardia son la diseminación extrapulmonar (~50%) y absceso cerebral (~30%)

– N. otitidiscaviarum agente infrecuente de infección sistémica.

– N. brasiliensis agente de micetomas cuando se produce la inoculaciónsubcutáneasubcutánea

• El micetoma actinomicótico causa destrucción local de los tejidos, incluido el óseo

Formas de InfecciónActinomycetes aeróbicos

• Las micobacterias atípicas de crecimiento rápido producengranulomas y abscesos, generalmente pulmonares o de piel ypartes blandas.

• Los más frecuentes son M. fortuitum, M. peregrinum, M. chelonae, M. abscessus y M. fortuitum biovariedad 3.

– La coloración de Z-N puede mostrar ovillos de BAAR y con Gram – La coloración de Z-N puede mostrar ovillos de BAAR y con Gram suelen verse como “collar de perlas”

Formas de InfecciónActinomycetes aeróbicos

• Los Streptomyces (S. anulatus antiguamente S. griseus y S.somaliensis) y Actinomadura son productores de micetomasactinomicóticos, principalmente en zonas cálidas.

– Los micetomas por S. somaliensis se localizan con frecuencia en la

cabeza y el cuello.

– Otras localizaciones frecuentes son los miembros inferiors– Otras localizaciones frecuentes son los miembros inferiors

Formas de InfecciónActinomycetes anaeróbicos

• Actinomyces israelii causa actinomicosis en los cuales los

granulomas son supurativos.

– La actinomicosis cérvico facial es la más común (~60%), seguido por laabdominal (20%) y la pulmonar (15%), en los últimos años han

aumentado los casos de endometritis por DIU.• El pus contiene gránulos de aspecto sulfuroso, que son una masa enredada

de bacterias ramificadas cuya observación establece diagnóstico.

DiagnósticoDiagnóstico

Micetomas actinomicóticos

Agentes Color de los gránulos Frecuencia

El micetoma es un pseudotumor inflamatorio crónico, localizado, no contagioso que afecta progresivamente tejido cutáneo, subcutáneo y

óseo, produciendo deformación y destrucción delos tejidos invadidos

Agentes Color de los gránulos Frecuencia

Nocardia asteroides Blanco Raro

N. brasiliensis Blanco Común

N. otitidiscaviarum Blanco a amarillo Raro

Actinomadura madurae Blanco a amarillo Común

A. pelletieri Rojo Ocasional

Steptomyces somaliensis Amarillo a café Ocasional

durante

FLUJO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS ACTINOMICETALESMÁS COMÚNMENTE ENCONTRADOS EN MATERIAL CLÍNICO

A) Bacilos Gram positivos delgados, filamentosos o células pleomórficas(menos de 1 mm de diámetro) a menudo en apariencia de cuentas, detinción irregular.Posible selección: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia,Actinomyces.

B) Bacilos alcohol-ácido-resistentes, filamentos o células pleomórficasB) Bacilos alcohol-ácido-resistentes, filamentos o células pleomórficas(frecuentemente en forma de cuentas).Posible selección: Mycobacterium, Nocardia.

C) No alcohol-ácido-resistentes.Posible selección: Corynebacterium, Nocardia, Actinomyces.

FLUJO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS ACTINOMICETALESMÁS COMÚNMENTE ENCONTRADOS EN MATERIAL CLÍNICO

D) Crecimiento Aeróbico.

Posible selección: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia.

E) Crecimiento Anaeróbico.Posible selección: Actinomyces.

F) Células filamentosas de formas ramificadas que fragmentan a bacilos ycocos cuando crecen en todos los medios de laboratorio.Posible selección: Nocardia, Actinomyces.

G) Raramente forman filamentos ramificados en la mayoría de los mediosde laboratorioPosible selección: Mycobacterium, Corynebacterium.

Identificación

• Actinomycetes aeróbicos– Nocardia, Actinomadura y Streptomyces (poco patógenos) son aerobios

obligados.

– El género Nocardia está formado por bacterias delgadas Gram positivas y Kinyoun positivo.

– Nocardia desarrolla en agar sangre, Sabouraud dextrosa sin antibióticos,

Lowenstein-Jensen, Middlebrook , thioglicolato, tripticasa soya, agar glicerinado, etc.

– El tiempo de crecimiento es entre 3 días hasta 2 semanas a 37ºC, pero

también crece a 25ºC.

– Es Ureasa positivo.

– Para su tipificación se utiliza la descomposición de la caseína, tirosina,

xantina e hipoxantina.

– Nocardia son parcialmente ácido resistentes en la coloración de Kinyoun (1% H2SO4 como decolorante)

– Actinomadura y Streptomyces desarrollan en las mismas condiciones y en el mismo período que Nocardia.

Nocardias

Nocardias

Nocardias

Lisozima1 Ureasa2 Lactosa Xilosa Arabinosa

Nocardia asteroides + + – – –

N. brasilensis + + – – –

N. otitidiscaviarum + + – – –

Streptomyces anulatus – +/– – – –

Identificación

Streptomyces anulatus – +/– – – –

S. somaliensis–

– – – –

Actinomadura madurae – – + + +

A. pelletieri– – – – –

1 - Resistencia al crecimiento en caldo glicerinado con lizosima 2 - Medio de Christensen

Caseína Tirosina Xantina Hipoxantina

Nocardia asteroides1 - - - -

N. brasilensis + + - +

N. otitidiscaviarum - - + +

Identificación

Strepomyces anulatus + + + NI2

S. somaliensis + + - +

Actinomadura madurae3 + + - +

A. pelletieri3 + + - +

1 - Pruebas de sensibilidad requeridos, N. farcinica presenta característica resistencia a

cefotaxima, y resistencia variable a ceftriaxona.

2 - NI = no informado.

3 - A. madura descomposición de la esculina positiva, A. pelletieri descomposición de la

esculina negativa.

Porcentaje de susceptibilidad de Nocardia asteroides complex a los antimicrobianos

Sul Cip Ami Cef Ctr Imi

N. asteroides1 96-99 38-98 100 94-100 94-100 77-98

N. farcinica 89-100 68-88 100 0-7 0-73 64-87

Fuente: Sorrell, T.C., Mitchell, D.H., and Iredell, J.R.. Chapter 252. Nocardia species. In Mandell, Douglas, andBennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases. G.L. Mandell, J.E. Bennett, R. Dolin, Eds. ElsevierChurchill Livinstone, 2005.

N. nova 89-97 0 100 87-100 100 100

Sul = sulfametoxazol, Cip = ciprofloxacina, Ami = amikacina, Cef = cefotaxima, Ctr = ceftriaxona, Imi = imipenem 1 - Nocardia asteroides sensu stricto tipo VI

Streptomyces

Micobacterias

Micobacterias

Identificación

• Actinomycetes anaeróbicos– Actinomyces sp. en cultivos pueden ser

microaerófilos o anaerobios estrictos– Actinomyces sp. se identifican mediante pruebas

de fermentación e hidrólisis (muy complicadas),de fermentación e hidrólisis (muy complicadas),pruebas comerciales (rapID, ANAII, API-ZYM) opruebas moleculares: RLFP, sondas de ADN(Gen-Probe) o PCR y posterior secuenciación.

Actinomyces

Actinomyces

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