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Bioseguridad básica en el laboratorio. (febrero 2014)

Antonio López Román ( [email protected] )

Bioseguridad en el Laboratorio

Objetivos- Conceptos básicos de bioseguridad. - Normativa aplicable.- Identificación de las fuentes principales de riesgo.(foco, medio ambiente, trabajador)

- Manejo seguro de agentes biológicos.(Procedimientos, comunicaciones y planes, EPI’s, organización y normas básicas de higiene personal, vacunas, campanas de seguridad biológica)

- Procedimientos de descontaminación.- Gestión de residuos.- Comportamiento ante una emergencia.(derrames, cortes y/o pinchazos, contacto con SEPRUS)

- Resolución de dudas.

mailto:[email protected]


El 20 % de las infecciones que se producen en el laboratorio se identifican como procedentes de incidentes específicos.

El 70 % de las infecciones ocurridas en los laboratorios las sufren personal científico.

El 98% de las infecciones adquiridas en el laboratorio se localizan en instituciones de investigación y diagnóstico


Peligro Riesgo


Trabajo

Riesgos

Accidentes

Consecuencias


Trabajo

Riesgos

Accidentes

Consecuencias

Prevención

Protección

Reparación

Bioseguridad en el LaboratorioProcedimientos de Control del Riesgo


X Exposición = Efectos adversos


RD 664/1997 sobre la protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajo


RD 664/1997. Definiciones

Agentes biológicos microorganismos con inclusión de los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos susceptibles de originar cualquier infección, alergia o toxicidad.

Microorganismo toda entidad microbiológica celular o no capaz de reproducirse o transferir material genético.

Cultivo celularresultado del crecimiento ‘in vitro’ de células obtenidas de organismos multicelulaes.


RD 664/1997. Ejemplos

Ejemplos de Agentes biológicos bacterias hongos, virus, rickettsias, clamidias, endoparásitoshumanos, productos de recombinación, cultivos celu-lares humanos o de animales, especialmente de primates, priones..

Ejemplos de toxinas micotoxinas, endotoxinas, ergosterol, 1,3-glucanos


RD 664/1997. Clasificación

Grupo 1 : poco probable que cause enfermedad en en hombre.

Grupo 2 : agente que puede causar enfermedad en el hombre y suponer un peligro para los trabajadores. Poco probable que se propague y existe profilaxis.

Grupo 3 : enfermedad grave hombre, serio peligro trabajajdores. Riesgo de propagación y existe profilaxis.

Grupo 4 : enfermedad grave hombre, serio peligro trabajajdores. Riesgo de propagación y no existe profilaxis.


RD 664/1997. Ejemplos


RD 664/1997.Niveles de contención


RD 664/1997. Identificación y Evaluación de los riesgos

- proceso destinado a identificar y estimar los riesgos con objeto de adoptar medidas para su eliminación o minimización.

- La evaluación es un medio y no un fin en sí misma.

- proceso dinámico.

- existen diferentes metodologías.

- debe ser periódica.


Evaluación inicial. Preguntas (agente).

- ¿Cual es el agente biológico?- ¿Se encuentra clasificado según la normativa?- ¿Cual es el nivel de seguridad que debemos adoptar?- ¿Cual es el modo de transmisión?- ¿Cual es la dosis de infección?- ¿Es un agente infeccioso o produce toxinas?- ¿Puede afectar a los animales o plantas?- ¿trabajamos con vectores o con muestras ‘in vitro’?- ¿Se puede transmitir a través el aire?...


Evaluación inicial. Preguntas (proceso).

- ¿Tenemos protocolos de actuación?- ¿Está preparado el laboratorio?- ¿Las muestras se procesan continuamente o por temporadas?- ¿Qué volumen de muestra se procesará?- ¿Se producen aerosoles durante la manipulación de las muestras?- ¿Qué tipo de agentes desinfectantes debemos usar?...


Evaluación inicial. Preguntas (medio ambiente).

- ¿Cuales son las condiciones microclimáticas?- ¿La liberación de las muestras al ambiente pueden generar un problema en el entorno?- ¿Cómo se gestionan los residuos procedentes del proceso?- ¿cómo se puede desinfectar el entorno?...


RD 664/1997. Medidas de higiene personal

-No comer, beber o fumar.- Prendas de protección adecuadas.- Antisépticos y limpieza ocular. - Espacio destinado guardar EPI’s.- Lavado cuidadoso de la ropa.- Definir procedimientos de obtencióny manipulación de muestras.


Buenas prácticas laboratorio (1)

- No pipeterar con la boca.- Pelo recogido.- Las manos deben lavarse después de quitarse los guantes.- Las superficies de trabajo deben descontaminarse al finalizar la jornada de trabajo.- todos los procedimientos de trabajo deberán orientarse hacia la minimización de la producción de aerosoles.- todas los líquidos o sólidos deben esterilizarse antes de su eliminación como residuo mediante autoclavado.


Buenas prácticas laboratorio (2)

- el uso de objetos cortantes o punzantes debe limitarse al mínimo y lo estrictamente imprescindible. las jeringas y agujas pueden producir una autoinoculación de agentes y además son una fuente de generación de aerosoles muy grande.

- los accidentes deben documentarse.

- los trabajadores deben inmunizarse si es posible.


Buenas prácticas laboratorio. Resumen

EL DESORDEN Y LA FALTA DE LIMPIEZA ES INCOMPATIBLE CON LA BIOSEGURIDAD


RD 664/1997. Reducción de los riesgos

- sustitución de agentes biológicos.- establecimiento de procedimientos de trabajo adecuados.- reducción de trabajadores expuestos.- medidas seguras para manipulación y transporte de agentes biológicos- protección colectiva y/o EPI’s- gestión de residuos.- adopción de medidas higienicas que eviten su dispersión- utilización de señal de peligro biológico- establecimiento de planes de emergencia- verificación de la presencia del agente fuera del foco primario- evaluación del riesgo de los trabajadores expuestos.


RD 664/1997. Plan de seguridad frente a la exposición a agentes biológicos

- Evaluación de riesgos biológicos.- Medidas aplicables en caso de exposición accidental y descontaminación.- Tratamiento médico de emergencia para las personas expuestas y lesionadas.- Vigilancia médica de las personas expuestas.- Identificación precisa de agentes biológicos ya sean tóxicos o infecciosos.- Localización de zonas de riesgo elevado.- Identificación del personal con riesgo.- Identificación de recursos humanos y de sus responsabilidades


Tipos de contaminantes

- Físicos: ruido, radiaciones electromagnéticas ionizantes y no ionizantes...

- Químicos: ácidos fuertes, disolventes orgánicos...

- Biológicos: microorganismos infecciosos o que producen toxinas, endoparásitos...


Tamaños referencia

óvulo humano: 150 micras.

límite visión humana 50 micras

globulo rojo: 7 micras

bacteria: E. coli 0.5 x 2 micras

virus hepatitis C: 50 nm, 0.05 micras


Aerosoles

- Los aerosoles son partículas sólidas o liquidas dispersas en un medio gaseoso.

- No forman una mezcla perfecta con el gas, se mantienen en suspensión durante un tiempo determinado y luego se depositan en la superficie.


Vías de entrada. Producción de aerosoles

Procedimientos que producen aerosoles en el laboratorio.

centrifugado, agitación, pulverización, pipetaedo, molienda, homogeneizado de materiales, manejo de jeringas...


Vías de entrada de los agentes biológicos

- Ingestión: alimentos, mala higiene personal, malas prácticas en el laboratorio...- Dérmica: contacto con la piel desprotegida con microlesiones.- Parenteral: cortes, pinchazos.- Conjuntiva: proyección aerosoles y gotas.- Inhalación:

- particulas > 5 micras- particulas < 5 micras


Vías de transmisión

- materiales y productos contaminados.

- animales (zoonosis).

- aire.

- hombre.

- agua.


Trabajo con animales

Se llama zoonosis a la transmisión de enfermedades de origen biológico mediado por animales, por ejemplo la brucelosis o fiebre de Malta


Trabajo con líneas celularesEn principio son poco peligrosas, pero pueden ser un fuente de incubación de enfermedades si las líneas son de humanos o primates.

Si los cultivos están infectados con algún agente biológico deberá adoptarse el nivel de contención adecuado al agente.


Trabajo con líneas celulares


Agentes biológicos. cabinas de seguridad biológica

Clase I Clase II Clase III


Agentes biológicos. cabinas de seguridad biológica


Agentes biológicos. Equipos de protección personal

-Un Epi (Equipo de protección personal) es una barrera física o fisico-química que protege al trabajador de la exposición a los agentes biológicos.

- debe poder proteger cualquier parte del cuerpo potencialmente expuesta.

- debe usarse conjuntamente con otras medidas preventivas.


Agentes biológicos. Epi’s

- los agentes biológicos se comportan como una partícula.- Los equipos de protección deben ser desechables.- Se deben proteger todas las vías potenciales de entrada al organismo.

- piel: guantes.- ojos: gafas u otra protección facial.- cuerpo: bata.



- se suele confundir los equipos destinados a proteger al paciente (ej. mascarillas quirúrgicas) frente a los EPI’s destinados a proteger al trabajador.

- No existen EPI’s específicamente diseñados para agentes biológicos, sino que son adecuados para su uso.

- Se considera que un buen EPI respiratorio una mascarilla autofiltrante para partículas tipo P3.



- un buen guante contra productos químicos se considera que es bueno contra agentes biológicos.

- cualquier equipo utilizado incorrectamente altera su valor de protección.


Protección contra agentes biológicos.Clasificación en función de su uso

- Desechables: Guantes de un solo uso.- Reutilizables de asignación personal: Gafas, mascarillas autofiltrantes y batas.- Reutilizables e intercambiables con control general: Equipos de uso específico y esporádico. Su intercambio no representa un riesgo para la salud: delantales, mandiles, pantallas faciales.- Reutilizables e intercambiables con control específico: Equipos de uso específico y esporádico. Su intercambio puede representar un riesgo para la salud: máscaras, equipos autónomos y semiautónomos.


Esterilización.

El mejor sistema para eliminar el peligro biológico es usar la esterilización en húmedo bajo presión, autoclave.

Los procedimientos químicos con más complicados de ejecutar y es más dificil de comprobar su eficacia. Hay que usarlos cuando no se puede autoclavar.


Agentes desinfectantes

Desinfectante Indicaciones Ventajas Inconvenientes

Alcohol isopropílico 70 %

Limpieza piellimpieza instrumental

Fácil de conseguir Se evapora facilmentePor debajo de 50 % no es efectivo

Hipoclorito sódico Bueno para derrames de líquidos contaminados.Bueno contra bacterias, virus y hongos.

BaratoFácil de conseguir.Penetra bien.

Corrosivo para materiales.Menos efectivo si hay materia orgánica.Vapores irritantes.

Peróxido de hidrógeno

Destruye bacterias, hongos y virus, pero no esporas. 3-6 %.

Fácil de conseguir.No deja residuo.

En presencia de materia orgánica pierde efecto. Es muy oxidante.

Glutaraldehído Buen bactericida, fungicida y esporicida.Elimina virus.

Mecanismo de acción muy potente

Sustancia tóxica.La materia orgánica baja su efecto.

Formaldehído Buen bactericida, fungicida y esporicida.Elimina virus.

Es un gas, se puede vaporizar.Mecanismo de acción muy potente

Sustancia tóxica.La materia orgánica baja su efecto.


Fichas seguridad agentes infecciosos

Public Health Agency of Canada

http://www.phac-aspc.gc.ca/lab-bio/res/psds-ftss/index-eng.php


Comportamiento ante una emergencia




Comportamiento ante una emergencia: Derrames

- Planificación de la actuación ante una emergencia con procedimientos concretos.- Debe actuarse lo antes posible.- Debe señalizarse la zona de emergencia.- Los miembros del laboratorio deben contribuir.

Bioseguridad en el LaboratorioComportamiento ante una emergencia:

Derrames


Derrames


Derrames dentro de una campana.

- Encender la campana.- Ponerse guantes y bata.- Preparar una disolución fresca de lejía 1:10.- Cubrir toda la zona con papel absorbente y pulverizar esta disolución en la zona afectada dejando actuar 10-15 minutos.- Recoger todo el líquido con papel absorbente.- Limpiar bien todo con agua y jabón.- Esterilizar en autoclave todo el material desechado.- Documentar el incidente.


Comportamiento ante una emergencia: Derrames dentro de una centrífuga.

- esperar al menos 30 minutos antes de actuar para dejar que los aerosoles se depositen en la superficie interior.- abrir cuidadosamente con protección facial, ocular y nasal. Guantes dobles porque es posible que haya tubos rotos.- pulverizar con desinfectante la centrífuga (dependiendo del tipo de agente liberado) y esperar un tiempo prudencial para que actúe. - recoger el líquido y desechar para autoclavar.- limpiar todo con agua y jabón perfectamente.- documentar el incidente.


Salpicadura de líquido contaminado.

- Eliminar la ropa contaminada y colocarla en bolsa para esterilizar en autoclave.- Lavar con agua y jabón la zona durante al menos 10-15 minutos para arrastrar los restos de material infeccioso.- Avisar al responsable del laboratorio.- Acudir al médico por si hubiese algún tratamiento para combatir la posible contaminación.- Documentar el incidente.


Comportamiento ante una emergencia: Derrame en una zona abierta del laboratorio

- Si el agente se transmite por el aire aguante la respiración y evacue el laboratorio.- Espere a que se depositen los aerosoles formados (20-30 minutos)- Protéjase con EPI adecuado al agente.- Descontamine la zona (nunca en solitario).- Esterilice los residuos generados.


Comportamiento ante una emergencia: Derrames en zona abierta del laboratorio.


Comportamiento ante una emergencia: Derrames en zona abierta del laboratorio.


Derrames en zona abierta del laboratorio.


Derrames. Propuesta.Una vez que se ha abordado el derrame:

- La actuación ante el derrame debe analizarse para aprender de la experiencia.

¿qué fallos ha habido?¿qué se puede mejorar?

- La comprobación de la eficacia de la descontaminación se puede hacer tomando una muestra de alguna zona afetada y haciendo un cultivo, si se estima oportuno.


Residuos biológicos

Residuos urbanos sanitarios:

restos de orina, de pequeñas intervenciones quirúrgicas, bolsas de orina vacías y empapaderas, recipientes desechables de aspiración vacías, gasas, sondas, pañales y, en general, todos aquellos residuos cuya recogida y eliminación no ha de ser objeto de requisitos especiales para prevenir infecciones.


Residuos biológicos

Residuos sanitarios peligrosos: Residuos infecciosos. Agujas y cualquier otro material punzante y/o cortante. Cultivos y reservas de agentes infecciosos. Residuos infecciosos de animales de experimentación. Restos de vacunas. Sangre y hemoderivados en forma líquida. Residuos anatómicos no identificables.

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