brojenje eritrocita -...
TRANSCRIPT
Ciljevi
� Opisati građu i funkciju eritrocita sisavaca
� Opisati građu i funkciju eritrocita peradi
� Opisati metode brojanja krvnih stanica:
automatski brojači, brojanje u hemocitometru
� Izračunati broj eritrocita u uzorku krvi
� Opisati retikulocite, način bojanja i brojanja
retikulocita
ERITROCITI
- u sisavaca:
bikonkavnog oblika, bez jezgre, životni vijek oko 120 dana
- u ptica, riba i nižih filogenetskih vrsta:
bikonveksnog oblika sa jezgrom, u ptica životni vijek oko 42 dana
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/13/Redbloodcells.jpg
http://www.vet.uga.edu/vpp/archives/ivcvm/1999/phillips/index.php
INDIKACIJE
� sistematski pregledi
� prije kirurških zahvata i sl.
� prije kemoterapija ili zračenja
� hematološkim problemima
krvarenja
kronične anemije
policitemije
� smanjen broj eritrocita:
� akutna krvarenja
� kronična krvarenja
� trudnoća
� deficit željeza
� deficit vitamina B12
� difunkcija koštane srži
� kronične upale…
�povećan broj eritrocita:
�život na višim nadmorskim visinama
�utreniranost
�pušenje
�dehidracija
�plućne bolesti (HIPOKSIJA)
�srčane bolesti
�bubrežne bolesti (eritropoetin)
BROJENJE ERITROCITA
Broj krvnih stanica (eritrocita, leukocita, trombocita) može se odrediti pomoću
elektronskog brojača ili
brojenjem u komorici – hemocitometru.
ELEKTRONSKI BROJAČI- metoda impedancije
- optička metoda
Pribor:
- eritrocitni melanger
- komorica za brojenje stanica (hemocitometar):
Neubaerova,
Bürker-Türkova,
Spencerova
BROJENJE ERITROCITA U HEMOCITOMETRU
Materijal: puna krv
Otopine: Hayemova otopina
Eritrocitni melanžer
Razrjeđenje krvi s HAYEMOVOM otopinom:
� 200xkrv se navuče do oznake 0,5a Hayemova otopina do oznake
101
� 100xkrv se navuče do oznake 1a Hayemova otopina do oznake
101
Prikaz ugravirane mrežice u hemocitometru
Polja za brojenje LEUKOCITA:
1, 3, 7, 9
Polje za brojenje ERITROCITA:
5
Pravilo brojenja:
U svakom malom kvadratiću broje se svi eritrociti koji se nalaze:
� unutar kvadratića
� na lijevoj i gornjoj liniji
RAČUN
N - broj izbrojenih eritrocita
400 - broj eritrocita u 1 mm2 (površina malog kvadratića = 1/400 mm2)
* dijeli se s 80, zbog toga što se eritrociti broje u 80 malih kvadratića
100 ili 200 - razrjeđenje krvi u melanžeru
** množi se s 10 da bi se dobio broj eritrocita u 1 mm3 – zbog dubine
komorice 0,1 mm
N80*
x 400 x 10** x razrjeđenje (100 ili 200) = X [mm3]
X [mm3] x 103 = X [cm3]
X [cm3] x 103 = X [dm3] = X [L]
VRSTA ŽIVOTINJE
Broj eritrocita
HEMOGLOBINg/L
HEMATOKRIT
%
MCV fL
MCHpg
MCHC%
N x1012/L
KONJ 7-12 110-140 32-50 37-58 12-20 31-36
GOVEDO 5-10 80-150 26-42 52-58 11-17 30-36
OVCA 10-13 90-150 24-45 28-40 8-12 31-34
KOZA 8-18 80-120 20-38 16-25 5,2-8 32
SVINJA 6-8 100-160 32-50 50-68 17-21 30-34
PAS 6-8 120-180 37-54 59-69 20-24 30-35
MAČKA 6-8 80-150 24-45 39-55 13-17 32-34
KUNIĆ 5,5-6,5 80-150 37-50 - - -
KOKOŠ 2,5-3,2 65-90 22-35115-125
33-47 26-35
RETIKULOCITI
� Nezreli oblici eritrocita,
koji sadrže ostatke RNA, mitohondrija i organela
� Procjena eritropoetske aktivnosti koštane srži
� broja:
nakon dugotrajnog gubitka krvi i hemolize
u ranoj anemiji uzrokovanoj manjkom željeza
ODREĐIVANJE BROJA RETIKULOCITApo Dacie-u i Lewis-u
� U omjeru 1:1 pomiješaju se
1% otopina BRILJANT KREZIL MODRILA
i uzorak krvi
� ostavi se stajati 15-20 min. u termostatu na 37°C
� napravi se razmaz i osuši
� Mikroskopiranje pod imerzijom:
ostaci RNA, mitohondrija i organela obojeni su TAMNOPLAVO
� Broji se (100, 200 ili 1000 eritrocita) i izrazi % retikulocita
U pasa (0-1,5), mačaka (0,2-1,6) i svinja (0-1) u cirkulaciji nalazimo
mali broj retikulocita,
krave (0), ovce (0), koze (0) često uopće nemaju retikulocita,
a u konja ih ne nalazimo.
Literatura
� Feldman, B. V., J. G. Zinkl, N. C. Jain (eds.) (2000): Schalm’s Veterinary Hematology, 5th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Baltimore, New York, London, Buenos Aires, Hong Kong, Sydney, Tokyo; USA, UK, Argentina, China, Australia, Japan.
� Harvey, J. W. (2001): Atlas of veterinary hematology: blood and bone marrow of domestic animals. W.B. Saunders Company, Philadelphia, Pennsylvania, USA.
� Kaneko, J. J., J. W. Harvey, M. L. Bruss (eds.) (1997): Clinical biochemistry of domestic animals, 5th ed. Academic Press, San Diego, CA, USA.
� Rebar, A. H. (1998): Hemogram Interpretation of Dogs and Cats. Ralston Purina Company, Saint Louis, Missouri, USA.