colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · inhibitory effect of pomegranate...

84
ปัญหาพิเศษปริญญาตรี สาขาวิชาเทคโนโลยีชีวภาพทางการเกษตร เรื่อง ผลการยับยั้งเชื้อราของส่วนสกัดเอทานอลจากเปลือกผลทับทิม ต่อเชื้อ Colletotrichum gloeosporioides สาเหตุโรคแอนแทรคโนสของพริก Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli anthracnose โดย นางสาวพรพนา นาคสิงห์ ควบคุมและอนุมัติโดย ….…………………………………… วันที…….เดือน………………..……..… (ดร. พรศิริ หลีวานิช)

Upload: others

Post on 31-Jan-2020

3 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ปญหาพเศษปรญญาตร สาขาวชาเทคโนโลยชวภาพทางการเกษตร

เรอง

ผลการยบยงเชอราของสวนสกดเอทานอลจากเปลอกผลทบทม ตอเชอ Colletotrichum gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนสของพรก

Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli anthracnose

โดย

นางสาวพรพนา นาคสงห

ควบคมและอนมตโดย

….…………………………………… วนท…….เดอน……………….พ.ศ……..… (ดร. พรศร หลวานช)

Page 2: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ผลการยบยงเชอราของสวนสกดเอทานอลจากเปลอกผลทบทม ตอเชอ

Colletotrichum gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนสของพรก

นางสาวพรพนา นาคสงห

บทคดยอ

จากการทดสอบประสทธภาพของสารสกดเอทานอลจากเปลอกผลทบทม ในการยบยงเชอรา Colletotrichum gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนสของพรก ทดสอบดวยวธ Poison Food Technique บนอาหาร PDA โดยใชสารสกดทความเขมขน 20,000 40,000 60,000 80,000 และ 100,000 ppm พบวาสารสกดจากเปลอกผลทบทมทกระดบความเขมขนสามารถยบยงการเจรญของโคโลนของเชอรา C. gloeosporioides ได โดยทระยะเวลาในการทดสอบ 5 วน สารสกดจากเปลอกผลทบทม ความเขมขน 100,000 ppm มเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของ เชอไดสงสด 64.97% ในการทดสอบการยบยงการงอกของสปอรเชอรา C. gloeosporioides โดย วธ Spore germination test พบวาสารสกดจากเปลอกผลทบทมระดบความเขมขน 100,000 ppm ท าใหสปอรของเชอรามการงอก 73% และจากการทดสอบการยบยงการเจรญของเสนใย ทความเขมขน 100,000 ppm สามารถยบยงการเจรญเปนเสนใยได โดยมความยาว 42 ไมโครเมตร เมอเปรยบเทยบกบกรรมวธควบคม

ค าส าคญ : สารสกดหยาบ ทบทม Colletotrichum gloeosporioides ปญหาพเศษ : ปรญญาตร สาขาเทคโนโลยชวภาพทางการเกษตร คณะเกษตร ก าแพงแสน

มหาวทยาลยเกษตรศาสตร อาจารยทปรกษา : ดร. พรศร หลวานช ปทพมพ : 2550 จ านวนหนา : 73

Page 3: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli anthracnose

Miss Ponpana Naksing

Abstract

The crude Ethanol extract of Pomegranate peel was evaluated their inhibitory

effect of Colletotrichum gloeosporioides, the cause of chilli anthracnose, by using poisoned Food technique on potato dextrose agar (PDA). It was found that the plant extract of five different concentrations of 20,000 40,000 60,000 80,000 and 100,000 ppm could inhibit the growth of C. gloeosporioides by testing in five days. Pomegranate peel extract at 100,000 ppm showed the mostly effective about 64.97%. The effect of the extract on C. gloesporioides were tested by using a spore germination and at concentration of 100,000 ppm the extract could inhibited the growth of fiber with 42 micrometre by compared with process control.

Key words : Crude extract, Pomegranate, Collectotrichum gloeosporioides Degree : Bachelor of Science, Program in Agriculture Biotechnology, Faculty of Agriculture Kamphaeng Sean, Kasetsart University Advisor : Pornsiri Leewanich, Ph.D. Year : 2007 Page : 73

Page 4: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ค านยม

ขาพเจาขอกราบขอบพระคณ รศ.ดร.สนธชย จนทรเปรม และ ดร.พรศร หลวานช อาจารยทปรกษาปญหาพเศษ ทกรณาเสนอแนะขอคดเหนทเปนประโยชนในการแกปญหาตาง ๆ ในการท างาน

ใหค าแนะน า รวมถงการใหก าลงใจ ตรวจแกไขรายงานฉบบนจนแลวเสรจสมบรณ

กราบขอบพระคณคณาจารยทกทาน ทไดกรณาอบรมสงสอนทงในดานความรและความคด

ขอขอบคณ คณอารรตน เทยนขาว ทใหค าแนะน าและความชวยเหลอในการท าปญหาพเศษใหส าเรจลลวงดวยด

ขอขอบคณ ผศ.จระเดช แจมสวาง ทเออเฟอเชอรา C. gloeosporioides ในการท าปญหาพเศษ

ขอขอบคณ เพอน ๆ นสตทกคน ทมสวนชวยเหลอในการท าปญหาพเศษนใหส าเรจดวยด

ขอขอบคณภาควชาโรคพช วทยาเขตก าแพงแสน และเจาหนาทของภาควชาทกทานทคอยชวยเหลอทงในดานอปกรณ และเครองมอตาง ๆ

ขอกราบขอบพระคณ คณพอ คณแม ทชวยเหลอและเปนก าลงใจ ใหการสนบสนนในทก ๆ ดานตลอดมา

พรพนา นาคสงห ธนวาคม 2550

Page 5: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สารบญ

หนา สารบญ i สารบญตาราง ii สารบญภาพ iii ค าน า 1 วตถประสงค 3 ตรวจเอกสาร 4 อปกรณและวธการ 42 ผลการทดลอง 46 วจารณผลการทดลอง 59 สรปผลการทดลอง 60 เอกสารอางอง 61 ภาคผนวก 68

Page 6: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สารบญตาราง ตารางท หนา 1 เปรยบเทยบการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides 46 บนอาหาร PDA ผสมสารสกดจากเปลอกผลทบทมทความเขมขนตาง ๆ 2 เปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides 50 บนอาหาร PDA ผสมสารสกดจากเปลอกผลทบทมทความเขมขนตาง ๆ 3 ประสทธภาพของสารสกดในการยบยงการงอกและการพฒนาเปน germ tube 54 ของสปอรเชอรา Colletotrichum gloeosporioides

Page 7: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สารบญภาพ

ภาพท หนา 1 การเจรญเตบโตของเชอรา C. gloeosporioides บนอาหาร PDA ทผสม 47 สารสกดจากเปลอกผลทบทมเปนเวลา 3 วน 2 การเจรญเตบโตของเชอรา C. gloeosporioides บนอาหาร PDA ทผสม 48

สารสกดจากเปลอกผลทบทมเปนเวลา 5 วน 3 การเจรญเตบโตของเชอรา C. gloeosporioides บนอาหาร PDA ทผสม 49 สารสกดจากเปลอกผลทบทมเปนเวลา 7 วน 4 เปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา C. gloeosporioides 51 5 D.R. curve ของสารสกดจากเปลอกผลทบทมจากการทดสอบประสทธ 52

ภาพของสารสกดตอการเจรญของเชอรา C. gloeosporioides 6 กลไกการยบยงการงอกและเจรญเปน germ tube ของเชอรา C. gloe 55 osporioides โดยหยดสปอรแขวนลอยของเชอรา C. gloeosporioides และเซลลแขวนลอยของสารสกดจากเปลอกผลทบทมลงไปบน depres sion slide พรอมกน 7 กลไกการยบยงการงอกและเจรญเปน germ tube ของเชอรา C. gloe 56 osporioides โดยหยดสปอรแขวนลอยของเชอรา C. gloeosporioides และเซลลแขวนลอยของสารสกดจากเปลอกผลทบทมลงไปบน depres sion slide พรอมกน 8 ประสทธภาพของสารสกดในการยบยงการเจรญเปนเสนใยของเชอรา 57 C. gloeosporioides 9 ประสทธภาพของสารสกดจากเปลอกผลทบทมในการยบยงการเจรญของ 58 เสนใยเชอรา C. gloeosporioides

Page 8: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

วตถประสงค

เพอศกษาผลของสารสกดจากเปลอกผลทบทม ตอการยบยงการเจรญของเสนใยของเชอราColletotrichum gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนสของพรกในสภาพหองทดลอง

สถานทท าการทดลอง

หองปฏบตการ A611 อาคารเทคโนโลยชวภาพทางการเกษตร และ หองปฏบตการ ภาควชาโรคพช คณะเกษตร มหาวทยาลยเกษตรศาสตร วทยาเขตก าแพงแสน

จงหวดนครปฐม

ระยะเวลาท าการทดลอง

ตลาคม 2550 - ธนวาคม 2550

Page 9: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ค าน า

ตงแตอดตจนถงปจจบนการเกษตรกรรมเปนอาชพหลกของคนไทยทมสวนส าคญในการพฒนาประเทศ ผลตผลทางการเกษตร ผกและผลไม เปนสนคาสงออกทท ารายไดหลกใหกบประเทศ ดงค ากลาวของ ประทป วระพฒนนรนดร ทวา “ภาคเกษตรกรรมมไดมความส าคญตอเศรษฐกจของประเทศเทานน แตยงเปนสวนหนงของวถชวตและวฒนธรรมของชมชนในชนบท ซงเปนประชากรสวนใหญ รวมทงมความส าคญตอความมนคงทางอาหาร พลงงาน และธรรมชาตแวดลอมของประเทศอกดวย”

การเกษตรกรรมมการพฒนามาอยางตอเนองพรอมกบความกาวหนาทางดานเทคโนโลยของสงคมในยคปจจบน ท าใหมการแขงขนทางเศรษฐกจสงเนนการผลตเพอสงสนคาไปจ าหนายยงตางประเทศ ท าใหเกษตรกรมความจ าเปนตองใชสารเคมปกปองผลตผลจากการเขาท าลายของโรค และแมลงศตรพช เพอเพมผลผลตใหมากขน สารเคมทน ามาใชในการควบคมและก าจดเชอสาเหตโรคเปนวธทมประสทธภาพสง สามารถก าจดเชอสาเหตโรคพชไดผลรวดเรว แตอนตรายจากการใชสารเคมทางการเกษตรกอใหเกดความเสยหายกบมนษย สตว และสงแวดลอม ท าใหระบบนเวศทางธรรมชาตเสยสมดล เกษตรกรผ ใชไดรบสารพษทงทางตรงและทางออมจากการใชหรอสมผสรวมทงสารพษมการปนเปอนกระจายอยในสงแวดลอมตามแหลงน า ในดน ทงในสวนทตกคางอยในผลตผล สงผลตอสขภาพอนามยของเกษตรกรและผบรโภค การใชสารเคมตดตอกนเปนระยะเวลานานสงผลใหเชอสาเหตโรค และแมลงศตรพชเกดความตานทานตอสารเคมเกดการกลายพนธเปนศตรพชชนดใหมขนได ท าใหตองเพมความรนแรงของสารเคมซงเปนการท าลายศตรธรรมชาตของพชอกดวย นอกจากนยงสงผลกระทบถงเศรษฐกจของประเทศในการสงออกผลตผลทางการเกษตรทส าคญ เชน

พรกเปนพชผกรบประทานผลทมความส าคญเกยวพนกบวถชวตความเปนอย และวฒนธรรมการกนของคนไทยมาชานาน ในป 2549/2550 ประเทศไทยมพนทปลกพรกทงหมด 474,717 ไร ผลผลตพรกสดรวม 333,672 ตน โดยผลตเพอบรโภคภายในประเทศเปนหลก สงออกทงในรปของพรกสดและผลตภณฑแปรรปอน ๆ มมลคาไมต ากวา 2,000 ลานบาทตอป (วรรณภา, 2550) เปนวตถดบทโรงงานอตสาหกรรมซอสพรก รวมทงอตสาหกรรมอาหารตางๆของไทยมปรมาณความตองการใชเปนจ านวนมาก แตผ ประกอบการสวนใหญไมนยมใชพรกของไทย เนองจากมปญหาสารเคมตกคาง จงเปนเหตใหบอยครงทผลผลตถกสงกลบเนองจากมผลกระทบตอความปลอดภยของผบรโภค

Page 10: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สภาวะปจจบนทผคนมกระแสนยมหนมาใสใจกบเรองของสขภาพมากขน รวมทงองคกรอสระ (NGO) ทออกมารณรงคตอตานการใชสารเคมก าจดศตรพช ตลอดจนตลาดอาหารเกษตรอนทรยมแนวโนมวาจะขยายตวมากขน เนองมาจากความตองการบรโภคอาหารทปลอดสารพษขยายตวอยางรวดเรว ท าใหมการตระหนกถงการรกษาสมดลทางธรรมชาต หลกเลยงการใชสารสงเคราะหซงกอใหเกดมลพษกบสงแวดลอม สารสกดจากพชสมนไพรเพอควบคมโรคและศตรพชจงเปนทางเลอกในการพฒนาเพอตอบสนองตอความตองการหลกเลยงการใชสารเคมท าใหมพชหลายชนดทถกน ามาใชประโยชน ในการปองกนก าจดจลนทรยสาเหตโรคพชมากขน (เนองพณช, 2550)

ในงานวจยครงนเปนการศกษาประสทธภาพในการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides สาเหตของโรคแอนแทรคโนสหรอโรคก งแหงในพรกของสารสกดจากเปลอกผลทบทมซงโรคแอนแทรคโนสเปนสาเหตส าคญทท าใหเกดความเสยหายตอปรมาณและคณภาพของผลผลต จากรายงานการน าสารสกดจากเปลอกผลทบทมมาทดสอบ พบวาสารสกดจากทบทม สามารถยบยงการเจรญของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides โรคแอนแทรคโนสของมะมวงได (วชย และคณะ, 2533) และจากการศกษาประสทธภาพของสารสกดจากทบทมในการยบยงการเจรญของเชอแบคทเรย Xanthomonas axonopodis pv. citri สาเหตโรคแคงเกอรของพชสกลสมดวยวธ Papar disc diffusion บนอาหาร NGA พบวาสารสกดจากทบทมทระดบความเขมขน 79,600 ppm ปรมาตร 10 20 30 และ 40 ไมโครลตร ยบยงการเจรญของเชอแบคทเรยได (จรภา, 2548) ชลดา และคณะ (2548) ไดทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากพช 3 ชนด คอ การเวก (ใบ) น านมราชสห (ทงตน) และทบทม (เปลอกผล) ในการควบคมโรคเหยวของขงทเกดจากแบคทเรย Ralstonia solanacearum ในสภาพโรงเรอน พบวาสารสกดจากเปลอกผลทบทมใหผลการยบยงโรคเหยวของขงไดดทสด

จากผลการทดลองขางตนแสดงใหเหนวาสารสกดจากเปลอกผลทบทม มศกยภาพในการยบยงเชอแบคทเรยและเชอราสาเหตโรคพชไดถามการศกษาอยางตอเนอง โดยการศกษาสารสกดจากเปลอกผลทบทมในครงนเปนการทดลองขนพนฐาน โดยศกษาถงปรมาณสารสกดทสามารถยบยงการเจรญของเชอสาเหตโรคพชได เพอใหไดขอมลของสารสกดในการควบคมการเจรญของเชอราในระดบหองปฏบตการและน าไปศกษาในระดบประยกตตอไปในอนาคต มงเนนทจะทดแทนการใชสารเคม และลดความเสยงตอสารพษตกคาง ใหมความปลอดภยตอผผลต ผบรโภคและเปนผลดตอสงแวดลอม

Page 11: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ตรวจเอกสาร

พรก

ความส าคญทางเศรษฐกจ

การผลต

ประเทศทผลตพรกรายใหญของโลก ไดแก จน ไนจเรย ตรก เมกซโก และ สเปน ส าหรบประเทศไทยฝายวเคราะหขอมลสงเสรมการเกษตร (2535) รายงานวาในป 2534 ประเทศไทยมพนทเพาะปลกพรกใหญ (Chili) ทงประเทศประมาณ 114,203 ไร พนทเกบเกยว 111,960 ไร ผลผลตรวม 159,087 ตน ผลผลตเฉลย 1,421 กก. / ไร สวนพรกเลก (Hot pepper) มพนทเพาะปลก 252,998 ไร พนทเกบเกยว 244,981 ไร ผลผลตรวม 339,749 ตน ผลผลตเฉลย 1,387 กก. / ไร พนทปลกกระจายอยทวประเทศจงหวดทปลกพรกมากกวา 10,000 ไร ไดแก เชยงใหม ชยภม เลย นครราชสมา การตลาด

ปจจบนประเทศไทยเปนผสงออกพรกสด พรกแหง พรกปน และเมลดพนธพรก ประเทศลกคาทส าคญ คอ ซาอดอาระเบย สหรฐอเมรกา เยอรมน เนเธอรแลนด มาเลเซย อนโดนเซย และสงคโปร ขณะเดยวกนประเทศไทยกเปนผน าเขาพรกและเมลดพนธพรกดวย โดยเฉพาะเมลดพนธลกผสมชวแรกทใหผลผลตสง สวนมากจะน าเขาจากประเทศสหรฐอเมรกา นวซแลนด ออสเตรเลย จน ไตหวน และญป น (ธรพล, 2548) ถนก าเนด

พรกมถนก าเนดดงเดมในทวปอเมรกาใต และการใชประโยชนมานานนบหลายพนปกอนการส ารวจพบทวปอเมรกาของ ครสโตเฟอร โคลมบส ดวยรสชาตทนาพศวง และไดถกน าเขามาเผยแพรในยโรป ในชอของ พรกแดง (Red pepper: Capsicum sups.) ตามลกษณะสของผล เมอเปรยบเทยบกบพรกไทยด า (Black pepper, Piper unigram L.) ทนยมปลกกนอยแลว กอนแพร กระจายมายงประเทศตาง ๆ ในเอเชย พรกกบพรกไทย แมจะมชอวาพรกเหมอนกน แตพชทงสองชนดไมมความเกยวพนกน พรกเปนพชทอยในวงศโซลานาซอ (Solanaceae) เชนเดยวกบมะเขอเทศ มะเขอ มนฝรง ยาสบ และพทเนย พรกจดอยในสกลแคปซคม (Capsicum มาจาก ภาษากรก

Page 12: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

kapto แปลวา "กด") ซงมประมาณ 25 ชนด (species) ทนยมปลกกนมเพยง 5 ชนดเทานน ไดแก C. annuum L., C. baccatum L., C. chinensis Jacq., C. frutescens L., C. pubescens R. & P. และมพนธ ทถกพฒนาขนอกมากมาย พรกนนมชอทใชเรยกกนอยหลายค า ไดแก pepper chili chilli chile และ capsicum คนไทยอาจจะคนเคยกบค าวา chilli

คณคาทางอาหาร

เสนหของพรกโดยเฉพาะในแงของคณคาทางอาหาร กลาวคอ สารสเหลอง สสม และสแดงของผล จดเปนสารจ าพวกแคโรทนอยด (carotenoids) ซงมอยมากมายถง 20 ชนด เปนสารทไมละลายในน าแตละลายในไขมนเชนกน ดงนนการใชพรกในสวนผสมของอาหารทงการตมแกงนาน ๆ จงไมท าใหสของพรกจางลง แตอาจจะละลายออกมาบางกบไขมนทอยในน าแกง ทส าคญไดแก เบตาแคโรทน (beta-carotene) ซงเปนสารตงตนของวตามนเอทชวยบ ารงสายตา นอกจากนพรก ยงเปนแหลงใหวตามนซในปรมาณทสงมากกลาวคอ ผลพรก 1 ออนซ (28กรม) จะมวตามนซสงถง 100 มลลกรม และวตามนเอ 16,000 หนวย ปรมาณดงกลาวนจะสงกวาปรมาณวตามนซและวตามนเอทรางกายตองการในแตละวน แตวตามนซจะสลายตวไดงายเมอถกความรอน ดงนนถาตองการ ไดวตามนซสงควรรบประทานในรปของพรกสดรวมกบผกสลด ส าหรบผลพรกหรอดอกพรกทมสมวงนน เกดจากสารพวกแอนโทไซยานน ซงสารพวกนสามารถละลายน าได ลกษณะทางพฤกษศาสตร

ชอสามญ Capsicums Chillies Green Pepper Pepper Paprika Tabasco Pepper Cayenne Pepper ชอวทยาศาสตร พรกขหน Capsicum Frutescens Linn., พรกชฟา Capsicum annnuum Linn. Var acuminatum Fingerh., พรกหยวก Capsicum annnuum Linn. พรกยกษ Capsicum annnuu var. grossum Bail. วงศ Solanaceae พรกเปนพชในตระกลโซลานาซอ (Solanaceae) สกลแคปซคม (Capsicum) ปจจบนนตามมาตรฐานขององคการนานาชาตวาดวยแหลงพนธกรรมทางพช (International Board for Plant Genetic Resources) (IBPGR) สามารถ แบงพนธพรกตามลกษณะทางพฤกษศาสตรได 5 กลมโดย Purseglove et.al. (1981) และPickersgill (1989) ไดดงนคอ C. annuum (C. annuum var. annuum) C. frutescens C. chinense C.haccatum (C. baccatum var. pendulum) และ C. pubescens พรกเปนพชทมจ านวนโครโมโซม 2n=24 เปนไมพมลมลกเนอออน บางชนดอยไดหลายฤด บางชนดอยไดฤดเดยว มความผนแปรคอนขางมาก ทงลกษณะส กลบดอก ล าตน ใบ และผล และโดยเฉพาะผล

Page 13: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

จะมความผนแปรของรปราง ขนาด และความเผด พรกเปนพชทมดอกสมบรณเพศและสามารถผสมตวเองได แตกมโอกาสผสมขามดอกและกอใหเกดการกลายพนธได 9-36%

ล าตน

แตกกงกานสาขามาก มการเจรญของกงเปนแบบ Dichotomous คอ กงจะเจรญจากล าตนเพยง 1 กง แลวแตกเปน 2 กง และเพมเปน 4 เปน 8 ไปเรอย ๆ จงมกจะพบวาตนพรกทสมบรณจะมกงแตกขนมาจากตนทระดบดนหลายกง จนดคลายกบวามหลายตนอยรวมทเดยวกน

ใบ

ใบเดยวเลกรปหอกปลายแหลม ขอบจก มขนเลกนอย ใบมรปรางตงแตรปไขไปจนกระทงเรยวยาว ขนาดใบมตาง ๆ กน ใบพรกหวานมขนาดคอนขางใหญ ใบพรกขหนทวไปมขนาดเลก แตในระบบเปนตนกลาและสวนใบลาง ๆ ของตนโตเตมวย มขนาดใบคอนขางใหญ

ราก

เปนพชทมรากหากนไดลกมาก ตนพรกทโตเตมทรากฝอยจะแผออกไปหากนดานขางในรศมเกนกวา 1 เมตร และหยงลกลงในดนเกนกวา 1.20 เมตร ตรงบรเวณรอบ ๆ ตนจะพบวามรากฝอยสานกนอยอยางหนาแนนมาก

ดอก

โดยปกตมกจะพบวาดอกเกดเดยวทขอตรงมมทเกดใบหรอกง แตกพบวามหลายดอกทเกดขนตรงจดเดยวกน ดอกประกอบดวยกลบรองดอกมลกษณะเปนพ 5 พ มกลบดอกซงจะมสขาวอย 5 กลบ (แตอาจจะม 4, 5, 6 หรอ 7 กลบ) บางพนธกลบดอกจะเปนสมวง โดยปกตจะมเกสรตวผอย 5 อน ซงเทาจ านวนกลบดอกนนเอง เกสรนจะแตกออกมาจากตรงโคนของกลบดอก อบเกสรตวผมกมสน าเงนและจะแยกตวเปนกระเปาะเลก ๆ ยาว ๆ ส าหรบเกสรตวเมยจะชขนไปเหนอเกสรตวผ สวนของยอดของเกสรตวเมยมรปรางเหมอนกระบอกหวมน ๆ รงไขจะมอย 3 พ หรออาจจะม 2 หรอ 4 กได

ผล

เปนประเภท Berry ทมลกษณะเปนกระเปาะ มฐานขนผล (Peduncle) สนและหนา โดยปกตผลออนมกชขน เมอเปนผลแกผลอาจชขนหรอหอยลง ถาพนธ ทมลกษณะขวผลออน พนธ

Page 14: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

นนจะใหผลทหอยลง ผลมลกษณะตงแตแบน ๆ กลมยาว จนถงพอง อวน สน ขนาดผลมตงแตขนาดผลเลก ๆ ไปจนกระทงผลขนาดใหญ ผนงผล (Pericarp) มตงแตบางไปจนถงหนาขนกบพนธ เมอผลแกสกอาจเปลยนสจากเขยวเปนแดง หรอเหลองพรอม ๆ กบการแกของเมลดในผลควบคกนไป ผลพรกมความเผดแตกตางกนไป บางพนธเผดจด บางพนธไมเผดเลย ฐานของผลอาจแบงออกไดเปน 2-4 หอง ซงจะเหนไดชดเจนในพรกหวานทวไป แตพรกทมขนาดผลเลกอาจสงเกตไดยาก ในบางพนธอาจดเหมอนวาภายในผลมเพยงหองเดยว โดยตลอด เนองจาก setae ไมเจรญยาวตลอดถงปลายผล ในระหวางการเจรญเตบโตของผลหากอณหภมในเวลากลางวนสงและความชนในบรรยากาศต าจะท าใหผลพรกมการเจรญเตบโต (off-type) ทมรปรางบดเบยว และมขนาดเลก การตดเมลดกยงต ากวาปกตอกดวยนอกจากนภายในผลมสารทกอใหเกดรสเผด คอ capsicin บรเวณทพบสารแคปไซซนภายในผลพรกนน สวนใหญจะอยในบรเวณเยอแกนกลางสขาวหรอทเรยกวา “รกพรก” โดยสวนของเนอผลพรก เปลอก และเมลดพรกจะมสารแคปไซซนอยนอยมาก มชอทางเคมวา 8-methyl-n-vanillyl-6-noneamide เปนตวการส าคญทท าใหพรกเผด เปนสารธรรมชาตจ าพวกอลคาลอยด (alkaloid) มสตรโมเลกลดงน C18H27NO3 น าหนกโมเลกลเทากบ 305.46 มจดหลอมเหลวเทากบ 65 องศาเซลเซยส แคปไซซนเปนสารหลกของสารในกลมแคปไซซนอยด (capsicinoids) นอกจากแคปไซซนแลว กยงมไฮโดรแคปไซซน (hydrocapsicin) ซงเปนสารใหความเผดเชนเดยวกนแตเผดนอยกวา โดยทวๆ ไปแคปไซซนนอยดจะประกอบดวยแคปไซซน 70% และไฮโดรแคปไซซน 22% และสารอนๆ อก 8% สารแคปไซซนสามารถละลายในน าไดเลกนอย แตจะละลายไดดในไขมน น ามน และแอลกอฮอล

เมลด

เมลดจะเกดเกาะรวมกนอยทรก (Placenta) ซงมตงแตโคนจนถงปลายผล เมลดพรกมขนาดคอนขางใหญกวาเมลดมะเขอเทศ แตรปรางคลายกน คอ มลกษณะรปกลมแบน มสเหลอง ไปจนถงสน าตาลแตผวเมลดพรกไมคอยมขนเหมอนอยางในมะเขอเทศ ตามมาตรฐานของขนาดเมลดพรก เชน เมลดพรกหวาน 1 กรม ควรจะมเมลดพนธ 166 เมลดขนไป สวนพรกเผดทมขนาด ผลเลกมขนาดเมลดเลกลง เชน เมลดพรกพนธหวยสทน 1 น าหนก 1 กรม มจ านวนเมลดถง 256 เมลด เมลดพนธจกรพรรด น าหนก 1 กรม ม 150 เมลด เมลดพรกพนธเชอร 1 กรม ม 150เมลด

Page 15: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

พรกทนยมปลกในประเทศไทยจากการส ารวจพบวามอย 2 – 3 กลม ไดแก

1. Capsicum annuum Linn. เปนพนธทปลกมากและมความส าคญทสดเมอเทยบกบพรกชนดอน ๆ พรกชนดนมแหลงดงเดมแหลงก าเนดแรกอยในอเมรกากลาง ไดแก ประเทศเมกซโกและประเทศใกลเคยง มหลกฐานวาพรกชนดนถกน าไปเผยแพรในประเทศยโรปโดยการเดนทางของโคลมบสในป ค.ศ. 1494 และพรกชนดนยงไดแพรกระจายไปทวปเอเชยและแอฟรกา ซงถอวาเปนแหลงก าเนดทสอง (Secondary centres) พรกชนดนมดอกเดยวผลเดยวและมกลบดอกสขาว ส าหรบในประเทศไทยพบวา พรก C. annuum ทใชปลกมมากสายพนธ เมอเทยบกบพรกชนดอน รวมได 31 สายพนธ ชอสายพนธเรยกตามชอพนเมอง ไดแก พรกชฟา พรกชฟาใหญ พรกจนดา พรกแดง พรกฟกทอง พรกขหน พรกขหนชฟา พรกขหนจนดา พรกหวาน พรกหยวกและพรกยกษ เปนตน

2. Capsicum chinense Jacq. มลกษณะทางพฤกษศาสตรคลายกบ C. annuum และ C. frutescens คอสกลบดอกเขยวออน (Greenish white) มดอก 2 หรอมากกวาตอขอ เมอผลแกจะมรอยคอดทกลบเลยงตดกบกานของผล พรกในกลมนมผลใหญเนอหนา ใชรบประทานสด พรกทเนอบางใชท าพรกแหงสวนพรกผลเลกมกลนและรสเผดจดเชอวามรสเผดทสดในพรกทปลกทงหมด เปนพรกทปลกมากในแถบเขาแอนดสในอเมรกาใต กระจายพนธมากในบรเวณลมน าอเมซอนและพรกชนดนยงกระจายไปยงแอฟรกาโดยเสนทางการคาของชาวโปรตเกส แตพรกนไมเปนทนยมในเอเชยแถบรอน ในประเทศไทยเกบรวบรวมสายพนธพรกชนดนอย 18 สายพนธ มชอเรยกดงน พรกขหน พรกขหนแดง พรกกลาง พรกเลบมอนาง พรกขหนหอม พรกสวน และพรกใหญ เปนตน

3. Capsicum frutescens Linn. ดอกมสเขยวหรอสเขยวอมเหลอง เปนมนสะทอนแสง ผลมทงทรงกลมและรปกรวย ตนมความสงประมาณ 45 เซนตเมตร แตในเขตรอนพรกกลมนอาจเปนไมยนตนมอายหลายป เปนพรกทปลกกนอยางแพรหลายทงในเขตรอน และเขตอบอนทวโลก มมากพอสมควรในประเทศไทย เชน พรกขหนสวนและพรกชอ

Page 16: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ประโยชนของพรกในดานการรกษาโรค

นอกจากพรกจะนยมใชเปนอาหารส าหรบบรโภคแลว จากการวจยยงพบอกวา พรกนนสามารถทจะน ามาใชในการปองกนและรกษาโรคไดอยางมากมาย สามารถสรปประโยชนของพรกทมผลตอสขภาพไดดงน (มโนวช และ จนทรตน , 2547)

ชวยบรรเทาอาการไขหวดและท าใหหายใจสะดวกขน

แคปไซซนทมอยในพรกมคณสมบตชวยลดน ามกหรอสารกดขวางระบบทางเดนหายใจ ชวยบรรเทาอาการไออนเนองมาจากหวด สารเบตาแคโรทนในพรก ยงชวยปองกนเนอเยอบผนงชองปาก จมก ล าคอ และปอด

ชวยในการลดความอวนและควบคมน าหนก

สารแคปไซซนเมอเขาสรางกายจะไปกระตนการท างานของระบบประสาทสวนกลางสนบ สนนการสรางฮอรโมนจากตอมหมวกไตชวยลดการสะสมของไขมนโดย เพมระดบการท างานของเอนไซมในตบทเกยวของกบการท าใหไขมนแตกตว ชวยเรงเมตาบอลซม และการสนดาปในรางกาย ชวยท าใหรางกายเผาผลาญไขมนสวนเกนไดดและรวดเรวยงขน

ชวยลดการอดตนของเสนเลอด

พรกมคณสมบตชวยท าใหการไหลเวยนของเลอดดขนชวยลดความดน ทงนเพราะสารเบตาแคโรทนและวตามนซจะชวยสงเสรมสรางผนงหลอดเลอดใหแขงแรง เพมการยดตวของผนงหลอดเลอด มผลตอระบบไหลเวยนโลหตและการเผาผลาญไขมนโดยไดมการศกษาผลของพรกตอระบบไหลเวยนกระแสโลหต พบวาคนในประเทศทรบประทานพรก มกเกดโรคหวใจนอยกวา เชน ประเทศไทย คนไทยจะบรโภคพรกอยางนอยประมาณ 5 กรมตอวนซงเปนอตราปรมาณการบรโภคตอคนทสงทสดในโลก มการวจยพบวาพรกมคณสมบตเปนสารตานแบคทเรยและสารตานอนมลอสระชวยลดระดบคอเลสเทอรอล LDL-C และไตรกลเชอไรด ลดการจบตวกนของเกลดเลอดลดการเกดแผนคราบแขงขนในเสนเลอดลดความดนโลหต ซงลวนเปนประโยชนในการปองกนโรคทเกยวกบระบบไหลเวยนโลหต จงชวยปองกนโรคหวใจ ชวยลดการจบกนของเกลดเลอด ซงท าใหเกดการแขงตวของเลอดทผดปกต และเปนปจจยเสยงตวหนงของการเกดโรคหวใจ โดยเชอวาพรกมกลไกไปยบยงการสงเคราะหสารทรอมโบเซนส (Thromboxanes) ซงเปนสารทชวยท าใหเลอด

Page 17: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

แขงตว นกวจยยงพบวามการสลายสารไฟบรนในคนไทยทกนพรก มากกวาคนผวขาวทอาศยอยในเมองไทยแตบรโภคอาหารพนเมองของชาวอเมรกน

ชวยลดความเสยงของการเกดโรคมะเรง

ชวยลดความเสยงของการเกดโรคมะเรง เนองจากพรกเปนผกทมวตามนซสง การบรโภคอาหารทมวตามนซมาก ๆ จะชวยปกปองการเกดโรคมะเรงได วตามนซยบยงการสรางไนโตรซามนซงเปนสารกอมะเรงในระบบทางเดนอาหาร วตามนซชวยเสรมสรางคอลลาเจนซงเปนสวนประกอบของกระดกออน รวมถงเปนสวนประกอบของผวหนง กลามเนอ และปอด คอลลาเจนเปนโปรตนทสามารถหยดการแพรกระจายของเซลลเนอรายได นอกจากนวตามนซยงเปนสารตานอนมลอสระ (antioxidant) กลาวคอสามารถยตหรอขดขวางบทบาทของอนมลอสระ ทจะกอใหเกดการกลายพนธของเซลล จนเปนเซลลมะเรงในทสด สารเบตาแคโรทนในพรกชวยลดอตราการเสยงของโรค มะเรงในปอด และในชองปาก คนทรบประทานผกทมสารเบตาแคโรทนนอย จะมความเสยงตอการเกดโรคมะเรงมากกวาคนทรบประทานผกทมเบตาแคโรทนสงถง 7เทา คณสมบตของสารเบตาแคโรทนจะชวยลดอตราการกลายพนธของเซลลและท าลายเซลลมะเรง ส าหรบพรกบางชนดทมสมวงจะมสารพวกแอนโทไซยานน ซงมคณสมบตเปนสารตานอนมลอสระ คอ สามารถท าลายอนมลอสระไดเชนกน

ชวยลดปรมาณสารโคเลสเตอรอล

สารแคปไซซนชวยปองกนไมใหตบสรางโคเลสเตอรอลชนดไมด (LDL) ในขณะเดยวกนกสงเสรมใหสรางโคเลสเตอรอลชนดด (HDL) ท าใหปรมาณไตรกรเซอไรดในกระแสเลอดต าลง ซงนบวามผลดตอสขภาพ

ชวยบรรเทาอาการเจบปวด

เราใชพรกบรรเทาอาการเจบมาแตโบราณกาลสารแคบไซซนในพรกชวยลดความเจบปวดโดยลดปรมาณสาร Neurotransmitter Substance P ซงสงผานสญญาณความเจบปวดและความคนจากเสนใยประสาททผวหนงไปทเสนประสาททกระดกสนหลง นกวจยพบวาการทมระดบของ Substance P ในเสนใยประสาทสงผดปกตมความสมพนธกบความเจบปวดในหลายสาเหต นกวจยยบพบวาการบรรเทาความเจบปวดของพรกแตกตางจากยาชาเฉพาะท เนองจากสารแคปไซซนไมไดยบยงเสนใยประสาททงหมด แตยบยงเฉพาะเสนใยประสาทชนด C ซงเกยวของอยางมากตอความเจบปวด อาการชา การเปลยนแปลงอณหภม ความดนโลหต และลดการอกเสบโดย

Page 18: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ลดการขยายตวของหลอดเลอด ในผ ปวยทเปนโรคเรอนกวาง (Psoriasis) พบวามกมความผดปกต เชน มการขยาย ยด ขด งอและฉกขาดของเสนเลอดกอนมแผลปรากฏขนทผวหนง สารแคปไซซนอาจชวยลดการเกดภาวะดงกลาว การวจยพบวาสารแคปไซซนมผลตอการสรางคอลลาจเนส (Collagenase) และพลอสตาแกลนดนส (Plostaglandins) ทเฉพาะเจาะจง ซงจะลดความเจบปวดและการอกเสบได

ชวยเสรมสรางสขภาพทางดานรางกายและอารมณ

ชวยเสรมสรางสขภาพและอารมณด เนองจากสารแคบไซซนมสวนในการสงสญญาณใหตอมใตสมองสรางสาร เอนดอรฟน (Endorphin มาจากค าวา Endogenous morphine) ขน สารเอนดอรฟนเปนเปปไทดขนาดเลก (โปรตนสายสน ๆ) มคณสมบตคลายมอรฟน คอ บรรเทาอาการเจบปวด ในขณะเดยวกนกสรางอารมณใหดขน ยงรบประทานเขาไปมากเทาใด รางกายกจะสรางเอนดอรฟนขนมามากขนเทานน ปกตรางกายของคนเราจะสรางสารเอนดอรฟนขนภายหลงการออกก าลงกาย ดงนนการออกก าลงกายแมจะท าใหรางกายเมอยลา แตผออกก าลงกายจะรสกสดชน แจมใส

ชวยท าใหอยากอาหาร

ความเผดของพรกจะไปชวยกระตนการท างานของลน และกระเพาะจงชวยท าใหอยากอาหาร

ใชผลตเปนสารฉด (Spray) เพอปองกนตว

ในปจจบนไดมการผลตสารฉด (Spray) เพอปองกนตวโดยใชพรกเปนสวนประกอบส าคญ สเปรยดงกลาวจะไมท าอนตรายถงแกชวต แตถาฉดเขาตาโดยตรงจะท าใหตามองไมเหนเปนเวลา 2-3 นาท

สารสกดจากพรกทน ามาใชทางยา

Capsicum oleoresin ไดจากการสกด capsicum ดวย alcohol (90%) แลวระเหยเอาตวท าละลายออกไป Oleoresin ทไดมลกษณะเปนของเหลวหนดสน าตาลแดง กลนฉนมาก ละลายไดใน alcohol acetone ether น ามนหอมระเหยและไขมน มสารส าคญคอ capsaicins (capsaicin dihydrocapsaicin nordihydrocapsaicin) ไมต ากวา 8%

Page 19: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

Capsicum tincture เตรยมไดจากการหมก capsicum oleoresin ดวย alcohol (90%) ใชเปนสวนผสมในต ารบ Methyl Salicylate Ointment Compound ในบญชยาหลกแหงชาต พ.ศ. 2542 โดยใชในปรมาณ 1.5%

Capsaicin (C18H27NO3, MW 305.4) เปนสารส าคญทสกดไดจากผลสกแหงของพรก ละลายน านอยมาก ละลายไดดในแอลกอฮอล เมอทาบรเวณผวหนงจะรสกรอนแดงโดยไมเกดตมพอง ในทาง ยาใชเปนยาตานการระคายเคอง (counter irritant) ในผ ทมอาการปวดบรเวณผวหนง ระงบอาการปวดประสาทหลงจากเปนโรคงสวด โรคแอนแทรคโนสของพรก

โรคแอนแทรคโนสพบระบาดทวไปในสหรฐอเมรกาตงแตป ค.ศ.1690 แตยงไมทราบสาเหตตอมา Higgin (1926) ทมลรฐ Georgia และ Smith ท Delaware ไดศกษาพบวาท าใหเกดโรคกบพรกไดทกระยะและทกสวนของตนพรกโดยจะเกดรายแรงมากกบผลพรกทแกจดส าหรบในประเทศ ไทยโรคนพบเปนมากและท าความเสยหายรายแรงกบพรกตาง ๆ ในแหลงทมการปลกเชน ราชบรเพชรบร ประจวบครขนธฯลฯ ผลพรกทเปนโรคนมกมแผลใหญหรออาจเนาไปเสยกอนท าใหผลผลตลดลงขายไมไดราคา ในท ๆ มความชนสงหรอมฝนตกชกถามโรคนเกดขนแลวไมท าการฉดยาปอง กนก าจดจะมความเสยหายมากกวา 50% (ชวาลา, 2531) โรคนเปนกบพรกทกชนดในประเทศไทย ลกษณะโดยทวไปของเชอรา

ลกษณะโดยทวไปของเชอรา C. gloeosporioides จะสรางสวนขยายพนธทเรยกวา สปอร เปนเซลลเดยว ๆ ขนาดเลก ลกษณะรปทรงกระบอกตรงปลายมน มผนงเรยบใสไมมส (hyaline) มองดวยตาเปลาไมเหน มขนาด 12-16x4-5 ไมครอน สปอรเกดบน conidipohore ใน fruiting body แบบ acervulus ซงมขนาดเสนผาศนยกลาง 90-270 ไมครอน พบอยบนพชบรเวณเนอเยอพชแสดงอาการตาย (necrotic) หรอบรเวณทเนอเยอพชเปนแผล ปกตแลว acervulus ม setae เลกนอยจนถงไมมเลย รปรางยาว ๆ หรอกลม หรอมรปรางไมคงตวแนนอน มขนาดตงแต 200 ไมครอน ขนไป และขนาดกวาง 4-8 ไมครอน เสนใยมผนงกน 1-4 septate สน าตาล จะบวมทฐานเลกนอยจะไมมผนงกน (Binyamini and Shiffmann Nadel, 1972) เชอราสราง appressoria อยบนอาหารทอายมากหรอใน slide culture โดย appressoria มสน าตาลเขมปนแดง รปรางรปไขถงรปไขยาวร หรอรปทรงกระบอก (clavate) กวาง 6-20 ไมครอน ยาว 4-12 ไมครอน ซงเกดบน

Page 20: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

เสนใย (hyphae) ทโปรงใสหรอสน าตาลออน C. gloeosporioides ทน ามาเลยงบนอาหาร Potato dextrose agar (PDA) เชอสามารถเจรญเตมจานเลยงเชอภายใน 7 วน โคโลนกลมขอบเรยบ การเจรญของเชอราจะขยายวงกวางออกไปเปนวงกลมซอนกนเหนไดชดเจน เสนใยมสเทาอมขาวจนถงเทาอมด า ส าหรบเสนใยทชสอากาศอาจมหลายแบบ บางสายพนธเสนใยมลกษณะดานไมเปนมนเงา หรอบางสายพนธเสนใยทชสอากาศ (aerial mycelium) มเพยงเลกนอย หรอมอยเปนหยอม ๆ และบางสายพนธ อาจแบงเขตเสนใยเปนแบบบาง ๆ และหนาทบ ส าหรบสปอรจะมรป รางและขนาดแตกตางกนไป ขนอยกบชนดของพชอาศยและการ form ตวอยใน acervulus ทม setae หรอไมม setae หรออาจอยเดยว ๆ บน phialides ซงอยบนกลมของเสนใยอกทในทางกลบ กนโคโลนอาจมสขาวจนถงด า ขนอยกบอาย บางครงจะด ามากเนองจากม appressoria อยจ า นวนมาก และพบวาเชอราสรางกลมสปอร (spore mass) สสมอมชมพ Tebeest และ คณะ (1983) พบวาสปอรของเชอรา C. gloeosporioides มจ านวนนวเคลยสในสปอรไมแนนอน ขน อยกบอาหารทใชเลยง พบวาเชอทเลยงในอาหารทมวนเปนสวนผสมจะสรางสปอรทมนวเคลยส 3 แบบดวยกน คอ จ านวน 1 นวเคลยส/สปอร พบ 97.7% จ านวน 2 นวเคลยส/สปอร พบ 0.4-2.2 % และจ านวน 3 นวเคลยส/สปอร พบนอยกวา 1% แตถาเลยงในอาหารเหลวจะพบความผนแปรมากกวา คอจะพบการสรางสปอรทม 1 นวเคลยส/สปอร มากทสด 79% จ านวน นวเคลยส/สปอร พบ 11.6-6.6% และจ านวน 3 นวเคลยส/สปอร พบ 2.8% และอาจพบได 6 นวเคลยสในเชอราบางสายพนธ การแพรระบาด

เนองจากเชอราสามารถสรางสปอรขนาดเลกจ านวนมากภายในโครงสรางทท าหนาทสรางสปอร ซงเปนจดสด าขนาดเลกบนแผล เมอสปอรแกจดสด าเลก ๆ นจะแตก และสปอรสามารถปลวแพรระบาดไปกบลม น าฝน น า หรอการสมผส และยงสามารถตดไปกบกงพนธ ซงเชอราสามารถท าใหเกดอาการโรคไดเกอบทกสวนทอยเหนอดน เชน ใบ กงออน ดอก และส าหรบเชอรานยงสามารถเขาท าลายทกระยะการเจรญเตบโต เมอสปอรตกบนพชกจะงอก germ tube แผเปนแผนบาง ๆ แนบกบผวพชจาก germ tube กจะสราง appressorium เปนโครงสรางพเศษใชสราง penetration peg แทงทะลผานชนควตเคลไปยงผนงเซลล แลวแทงเขา cell lumen ทสวนปลาย penetration peg ของเชอจะมการปลอยเอนไซม pectolytic enzyme และ cellulolytic enzyme ออกมายอย pectic substance และ cellulose ซงเปนองคประกอบของผนงเซลล ท าใหผนงเซลลแยกออกจากกนไมรวมกนเปนโครงสรางของผนงเซลล (Meon, 1980) ท าใหเนอเยอพช

Page 21: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ยบตวและเกดการเนา (รตตา, 2542) อาการเรมจากเกดจดช า บม และขยายใหญขนจนตดกบแผลอน ตอมาผลจะแหงเหยวยนหงกงอ ถามสภาพความชนสงจะเกดอาการเนาและสราง acervulus ซงเปนแหลงใหก าเนดสปอร

ในประเทศเกาหลมรายงานวาเชอรา C. gloeosporioides มอย 2 strain คอ strain G และ strain R โดย strain G มความรนแรงมาก สามารถเขาท าลายไดทงผลทมสเขยวและผลสกสแดง ไมสราง perithecium และ setae สวน strain R มความรนแรงนอยและกอใหเกดความเสย หายกบผลสกสแดง พบวามการสราง perithecium และ setae (Kim, 1986) ในปจจบนพบวาเชอรา C. gloeosporioides strain G ท าความเสยหายอยางมากกบผลพรกทวประเทศเกาหล (Kim et.al., 1990) Adikaram et al. (1982) พบวาเชอราสาเหตโรคแอนแทรคโนสของพรกเกดการเขาท าลายแบบแฝง (atent infection) ในพรกสเขยวทยงไมสก (immature fruits) สปอรของเชอราหลง จากงอกบนผลพรกแลวจะสราง appressorium แลวเชอราจะหยดการเจรญเตบโต จนกระทงผลพรกเรมสกเชอรากจะเจรญตอไมได แตบางสปอรของเชอราซงเปนสวนนอยจะสามารถเขาท าลายผลพรกในชวงสเขยวยงไมสกได ซงสาเหตทเชอราไมสามารถเขาท าลายผลทมสเขยวไดเนองจากผลพรกสราง phytoalexin เปนพษตอเชอรา คอ capsicannol ซงการสะสมของสาร capsicannol เกดขนหลงจากปลกเชอลงบนแผลพรกทมสเขยว 18 ชวโมง และจะมปรมาณมากทสดหลงจากปลกเชอนาน 4 วน บรเวณผวของเนอเยอทมการปลกเชอจะมการสะสมสารความเขมขนสงซงมปรมาณเพยงพอทจะยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา ซงสาร capsicannol ไมสามารถตรวจพบไดในผลพรกทเปนปกต มการสะสมอยบางเลกนอยถาผลพรกมบาดแผล สวนในผลพรกสกหลงจาก ปลกเชอบนผลพรกพบวา มการสะสมของสาร capsicannol อยางรวดเรว ปรมาณของสารในผลพรกสกมเพยงแคจ ากดการพฒนาของเชอเทานน ซงความเขมขนของสาร capsicannol ในผลสกจะต ากวาในผลพรกทยงไมสก เมอผลพรกสกมากขนความเขมขนของสาร capsicannol จะลดลงจนไมเพยงพอตอการยบยงการเจรญเตบโตของเชอราท าใหผลพรกแสดงอาการของโรคเพมมากขน

การเขาสเมลดของเชอเกดขนได 2 ทางโดย

1) กลม acervuli และเสนใยของเชอราจะเจรญไปตามแกนกลางของผลส palacenta ทเหลออย และเชอราจะเจรญอยบรเวณเนอเยอปากเปดของเมลด ไมพบเสนใยของเชอราเจรญลงมาอก 2) จากกลมเสนใยของเชอราทผวดานในของพรกสด ซงเจรญมาจากผวภายนอกของผลพรกผานเนอเยอลงมา โดยกลมของเสนใยจะเขามาท าลายเปลอกของเมลดทตดอยกบบรเวณทมเชอราอย เมอเชอราเขาท าลายบรเวณเปลอกของเมลดเชอราจะไมท าลายลกลงไปจะอยบรเวณผวของ

Page 22: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

endosperm เนองจากผวของ endosperm ม cutin ท าใหชอราผานไดยาก แตเชอราอาจเจรญผานเขาไปใน endosperm และ embryo ไดซงไดท าการศกษาตอพบวาเชอสวนใหญจะอยบรเวณเปลอกมากถง 95% สวน endosperm และ embryo จะพบเชอราประมาณ 45%

สามารถจดอนกรมวธานของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ไดดงน

Division Eumycota Subdivision Dueteromycotina From-Subclass Coelomycetidae From-Order Melanconiales From-Family Melanconiceae

From-genus Colletotrichum การปองกนก าจด

1. ควรเลอกเกบเมลดพนธจากพรกทไมเปนโรคนไวท าพนธถาบงเอญเกบจากแปลงทไมเปนโรค กอนปลกควรคลกเมลดดวยยา Ceresan 0.16% ของน าหนกเมลด หรอ Delsene 0.8% ของน าหนกเมลด (Juangbhanich et al., 1975) นอกจากนอาจใชแชน ารอนทอณหภม 122-125 องศาฟาเรนไฮตนาน 30 นาท กไดผลด 2. ควรปรบระยะปลกหรอตดแตงทรงพมของพรกไมใหหนาทบเกนไป เพอชวยลดความชนลงท าให ไมเหมาะสมกบการเจรญของเชอสาเหต 3. หลงจากเกบพรกจากตนแลวและอยในระหวางการขนสง ควรเกบไวในทเยนภายใตอณหภมคงทจะลดการเกดโรคระบาดได 4. ก าจดเศษซากพชทเปนโรคท าลายเสยใหหมดจากแปลงปลก เพราะเชอราทตดอยกบเศษซากพชทเปนโรคได นอกจากนควรควบคมวชพชและพชอาศยของโรคนดวย จากการทดลองพบวาเชอสามารถเขาท าลายมะเขอยาวและมะมวงได 5. ปลกพชหมนเวยนสลบกบพชทไมอยในตระกล Solanaceae 6. เมอพรกโตหรอเมอโรคเรมระบาด ฉดยาฆาเชอราพวก Captan Ziram อตรา 2:1,000 ทก ๆ 7 วน หรอใชยาประเภทดดซม เชน Benlate และ Folcidin อตรา 12 กรม ตอน า 20 ลตรทก ๆ 5 วน สามารถปองกนโรคได 7. ควรปลกพรกบางพนธทมความตานทานโรคสง เชน พรกเหลอง พรกหยวกเปนตน

Page 23: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

8. ควรเพมป ยโปแตสเซยมเพอชวยใหพรกมความตานทานตอโรคสงขน การปรบดนใหม pH 6-6.8 จะท าใหป ยชนดนละลายมประโยชนตอพชมากขน (อนงค และ ลกษณา, 2515)

Page 24: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ทบทม

ชอสามญ (Common name) Pomegranate ชอวทยาศาสตร (Scientific name) Pumnica granatum Linn. ชอวงศ (Family name) Punicaceae ชอพนเมองอน ๆ (Other name) เซยะลว (จน) พลา (หนองคาย)พลาขาว มะกองแกว

(นาน) มะเกาะ (เหนอ) หมากจง (ชานแมฮองสอน)

ลกษณะทางพฤกษาศาสตร

สภาพอากาศทเหมาะสมตอการเจรญเตบโตคอสภาพอากาศหนาวเยนในฤดหนาวและอากาศแหงในฤดรอน ทบทมจดเปนพชททนตอสภาพอากาศรอนไดด แตตองไดรบน าอยางเพยงพอเพราะถาขาดน าการใหผลผลตจะต า (นกร, 2528) โดยเฉพาะพนธทมรสเปรยวสามารถทนตอสภาพ แวดลอมทไมเหมาะสมไดเปนอยางด (Popenone, 1974) ระยะเวลาการออกดอกแตกตางกน ขน อยกบพนธและสถานทปลกเชน พนธ dela Grenouillere ในอยปตจะออกดอกกลางเดอนเมษายนถงเดอนมถนายน พนธ Wonderful ในอสราเอลออกดอกปลายเดอนเมษายนถงเดอนมถนายน และทอนเดยออกดอกปลายเดอนมนาคม (Found et al., 1979) พนธอตชยบนทสงจงหวดเชยงใหมออกดอกตงแตเดอนมกราคมถงเดอนเมษายน

ล าตน ไมพมสงไมเกน 3 เมตร ปลายกงออนหอยลงสกงเลก มกกลายเปนหนามแหลม ๆ

ใบ

เปนชนดใบเดยวออกเปนค ๆ ตรงขามกนรปขอบหนามแกมรปหอกกลบ กวาง 0.5-2.5 ซม. ยาว 1-9 ซม. โคนกลบผลกตดกนเปนหลอด ยาว 2-3 ซม. ปลายหลอดจกเปนฟนเลอยและปลายหยกจะโคงออก กลบดอกมจ านวนเทา ๆ กบกลบรองกลบดอก เนอกลบบาง ยน ยาว ยนพนหลอด กลบรองกลบดอกออกมาและจะหลดรวงเรวมาก เกสรตวเมยมมากตดอยตามผนงกลบรองกลบดอกดานใน รงไขจะจมอยในฐานดอก (จรภา, 2547)

ดอก

ดอกทบทมเปนดอกเดยวแบบสมบรณเพศ อาจพบเกดเปนกระจก 3-5 ดอกทปลายกงยอย การพฒนาตาดอกทบรเวณปลายกงมการพฒนาไดรวดเรวกวาตาขาง ดอกทบทมมสแดงปน

Page 25: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สม สวนของกลบเลยง (calyx) หนา ลกษณะเปนทอยาวม 5-7 lobes กลบดอกมจ านวน 5-7 กลบซอนกนอยระหวางกลางของกลบเลยง ลกษณะของดอกมสองชนด คอ ดอกกระเทยทท าหนาทเปนดอกตวเมย (hermaphrodite functioning as female flower) เปนดอกทมรงไขสามารถพฒนาไปเปนผลได และดอกกระเทยทท าหนาทเปนดอกตวผ (hermaphrodite functioning as male flower) มลกษณะคลายทรงแจกน (vase shaped) จะพบมากเมอมการออกดอกระยะแรก ดอกทบทมมยอดเกสรตวเมยเพยงอนเดยว และมเกสรตวผจ านวนมาก เกดเปนกระจกอยรอบเกสรตวเมย (สมชาย, 2527) เมอดอกไดรบการปฏสนธแลวกลบดอกจะรวงหรอแหงตดอยกบผลเหลอกลบเลยงทแขง ภายใน calyx tube จะมรงไขฝงตวตดอยภายในมผนงแบงออกเปนชองมเหยอสครมอมเหลองอยระหวางแตละชองซงเตมไปดวยเมลดทอดตวกนแนน การเรยงตวของเมลดอยบน placenta สองแบบไดแก axile placentation อยสวนบนและสวนลางเปนแบบ parietal placenta ion (ด ารง และกตตพงษ, 2519)

ผล

มลกษณะกลมหรอคอนขางกลม มรปรางแตกตางกนไปตามพนธ บรเวณดาน stylar end ม crown ทเปนกลบเลยง การพฒนาของเปลอกผล สผว และกลบเลยงสามารถใชเปนดชนการเกบเกยวได ผวเปลอกเรยบเปนมน ระยะผลออนมสเขยวแก เมอผลเรมแกสผวของผลจะพฒนาไปเปนสเหลองอมแดง หรอสแดง จากการเปลยนแปลงของเมดส anthocyanin อยางรวดเรว เมอผลอาย 90 วนแลวจะเพมปรมาณอยางรวดเรว (Lee et al., 1974) ถามการหอผลดวยกระดาษทบจะท าใหสผวไมแดง เมลดมรปรางแบบ oblong หรอ obconical มลกษณะเปนหลายเหลยมยาว สวนของ outer integument เจรญขนมามน าอยภายในเปนสวนทใชรบประทานมเยอบาง ๆ หอหมน าใสสแดงไวจดเปน outer seed coat รสหวานอมเปรยว ชนในเปน inner seed coat ลกษณะเปนเหลยมประกอบดวย sclerenchyma layer บางพนธชนนจะมลกษณะนมสามารถเคยวกลนได

การเจรญเตบโตของผลในระยะแรกจะมปรมาณกลโคส และฟลกโตสปรมาณใกลเคยงกน เมอผลมอาย 125 วน หลงดอกบานหรอผลแกจะมน าตาลกลโคสเปนสวนใหญ และกรดทส าคญเชน citric acid เปนกรดอนทรยทมมาก และกรดอน ๆ เชน Succinic acid Tartaric acid Fumaric acid และ Malic acid ภายหลงจากดอกบาน 100 วนในผลจะมปรมาณกรดทงหมดมากกวา 6.2 กรมตอน า 100 มลลลตร และม Amino acid ทพบอย 13 ชนดทส าคญคอ Glutamic acid พบในปรมาณมากเมออาย 75 วนหลงดอกบาน (Lee et al., 1974)

Page 26: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

การเกบเกยวผลเมออาย 5-7 เดอนหลงจากดอกบานแลว กอนการเกบผลประมาณหนงอาทตย มกจะเอาวสดหอผลออก ใหเปลอกผลไมปรแตก สวนของกลบเลยงยงคงอย หลกเกณฑในการพจารณาผลทบทมทมคณภาพดคอ ผลมขนาดใหญ เสนผาศนยกลาง 10-12 เซนตเมตร รปรางคอนขางกลมมเหลยมเลกนอย ปลายผลมกลบเลยงอย ทรงกรวยสนๆ ฐานตดกนแตสวนปลายแยกออก ผวเรยบคอนขางแขงสเหลองจนถงแดง มกระสน าตาลกระจายอยรอบผว เปลอกหนาประมาณ 3-4 มลลเมตร เนอมสแกงก าใส (ส าหรบพนธทบทมทอง) สวนทหมเมลดเปนเหลยมใสหนาและน านอย กรอบ รสหวานอมเปรยวเลกนอย ไมมรสฝาด เมลดควรมขนาดเลกและไมแขง นเวศวทยาและการกระจายพนธ

นยมปลกเปนไมผลและไมประดบตามสวนทว ๆ ไป ชอบดนรวนทมอนทรยวตถสง การระบายน าด ชอบแสงมาก

การขยายพนธ

โดยการตอนกงและใชเมลดเพาะ ควรปลกใหหางกน 1-1.5 ซม.ใสป ยคอกไวกนหลม และรดน าใหชม ฤทธทางเภสชวทยาและการทดลองทางคลนก

ราก

1. ฤทธขบพยาธ (Anthelmentic activity) มผพบวาสารสกดจากเปลอกรากทบทมดวยน ารอนไมมผลตอพยาธ Ancylostoma ในคน 2. ถายพยาธตวตด จากการทดลองกบคนไข 9 คน โดยการใชเปลอกรากแหง หลงจากขดผวนอกออกแลวประมาณ 25 กรม น าไปดองหรอแชน า (300 มล.) นานประมาณ 24 ชม. จากนนกน ามาตม ตงไฟออน ๆ จนใหน าเหลอประมาณ 100 มล. ใชดมกอนทจะรบประทานอาหารเชาจากนนอก 4 ชม. กใหกนดเกลอประมาณ 20-25 กรม ส าหรบขบพยาธตวตดออกมา จากการทดสอบปรากฏวา มผ ปวย 5 คน ทเปนพยาธจากหม 4 คน เปนพยาธจากวว และอก 1 คนไมปรากฏผลอะไรเลย

ตน

1. ความเปนพษตอเซลล (Cytotoxic activity) สารสกดเปลอกตนดวยซโตนและอเธอร 5% ไมมพษตอ CA-Ehrlich As cite

Page 27: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

2. ขบพยาธ (Anthelmentic activity) สารสกดเปลอกตนทบทมดวยกรดน าสมขนาด 6.5-8 ซ.ซ., 8-10 ซ.ซ., และ 10-12 ซซ.สามารถขบสวนหวและ Prolottides ของพยาธเสนดายได 58.1, 82.2 และ 87.5% ตามล าดบ แตสารสกดดวยน าจะมฤทธออนกวาน 3. ฤทธฆาแมลง (Insecticide) เปลอกตนทบทมไมสามารถฆาแมลงวน มด หมดหรอแมลงสาบได

ใบ

1. ฤทธตานเชอแบคทเรย (Antibacterial activity) สารสกดดวยน าเกลอจากใบทบทมในความเขม ขน 1-40 มฤทธฆาเชอ Staphylococcus aureus ซงเปนสาเหตของการเปนหนองและฆาเชอ Pasteurella pestis 2. สารสกดใบสด ดวยแอลกอฮอลจะไดสารทเรยกวา Lawson มความเขมขนต าสด 1,000 ppm ซงมฤทธสามารถฆาเชอราหรอเชอโรคไดหลายประเภทเชน Micrococcus pyogenes var.aureus Staphylococcus Salmonella Streptococcus Escherichia coli Brucella แตไมมฤทธฆาเชอ Candida albicans และ Pseudomonas aerugingosa (นนทวน, 2539)

ดอก

ฤทธลดน าตาลในเลอด (Hypoglycemic activity) เมอใหหนขาวกนดอกทบทมในขนาดตวละ 4 กรม พบวาท าใหปรมาณน าตาลในเลอดลดลง

เปลอกผล

1. พษตอตวออน (Embryotoxicity) ไดมผทดลองทดสอบพษของสารสกดเปลอกผลทบทมดวยแอลกอฮอล 95% พบวาในขนาด 200 มก. / กก. ไมเปนพษตอตวออนของหนขาว เมอใหหนขาวกนสารสกดดงกลาว 2. พษตอตบ (Hepatotoxicity) เมอฉดสารสกดเปลอกผลสวนทม Gallo tannin เขาชองทองหนถบจกรวนละ 20 ซ.ซ. / กก. 2 วน เมอตรวจหนวนท 3, 5 และ 9 วน หลงจากใหยาพบวาตบถกท าลายอยางรนแรง 3. ฤทธขบพยาธ (Anthelmintic activity) สารสกดเปลอกผลทบทมดวยแอลกอฮอล 95% มฤทธขบพยาธไสเดอน ท าใหพยาธเปนอมพาตแลวตาย และไดมผทดลองใหหนถบจกรกนสารสกดเปลอก ผลดวยเมธานอล 120 มก. / กก. พบวาใน 2 วน ขบพยาธ Hymenolepsis diminuta ไดถง 87%

Page 28: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

4. ฤทธคมก าเนด (Antifertility activity) ในอนเดยไดมการรายงานผลของเปลอกผลทบทมในการคมก าเนดในหนขาวและหนตะเภาทง 2 เพศ โดยผสมในอาหารใหหนตะเภาทง 2 เพศ โดยผสมในอาหารใหหนตะเภาในขนาด 18 ก. / กก. แตผลการทดลองไมเพยงพอทจะสรปผลได และไดมผทดลองใชสารสกดดวยตวท าละลายตาง ๆ พบวาสารสกดเปลอกผลดวยน าสามารถกระตนกลามเนอ มดลกหนขาวและสารสกดดวยแอลกอฮอล 95% ไมท าใหหนแทงเมอกนสารสกด 200 มก. / กก. 5. ฤทธตานเชอไวรส (Antiviral activity) สารสกดผลทบทมดวยน าสามารถฆาไวรส Red virus type I ไวรส ซงเปนสาเหตของไขหวดใหญ โปลโอ เรม และ Coxackic B5 Virus 6. ฤทธตอเอนไซม (Effect on enzyme) เมอฉดสารสกดเปลอกผลทบทม สวนทมแทนนนเขาชองทองหนถบจกรในขนาด 20 ซ.ซ. / กก. จะกระตนเอนไซม Glutamate – Pyruvate ได และสารสกดเปลอกผลดวยน ารอนมผลยบยงเอนไซม Postaglandin synthetase เพยงเลกนอยเมอใชในขนาดความเขมขน 750 ไมโครกรม / ซ.ซ. 7. สารสกดจากผลมฤทธยบยงการเจรญของเชอ Staphylococcus aureus Escherichia coli Salmonella typhosa S. Montevideo S. schottmuelleri Shigrlla paradysenteriae B.H. และ S. paradysenteriae III-Z 8. สารสกดดวยแอลกอฮอลจากเปลอกผล มฤทธยบยงการเจรญของเชอ Staphylococcus aureus ทความเขมขน 10 กรมตอลตร มฤทธคลายกบสารสกดจากพชทมแทนนนมากทงหลาย คอมฤทธยบยงการเจรญของเชอรา Piricularia oryzae Cav. และ Colletotrichum falcatum went. (Physalospora tucumanensis Speg.) ทเปนตนเหตของโรคขาวและออย น าคนจากใบมฤทธฆาเชอไวรสในยาสบ (ชยโย และคณะ, 2525) 9. ตานแบคทเรย จากการทดสอบกบผ ปวยทเปนโรคน ในจ านวน 50 คน โดยการใชเปลอกผลทแหงแลวตมใหมความเขมขน 50-60% ใหผ ปวยกน 3-4 ครงตอวนในปรมาณ ครงละ 10-20 มล. ผลปรากฏวามผ ปวย จ านวน 49 คน มอาการดขน อก 1 คน มอาการดขนภายหลง 10. การอกเสบจากการตดเชอ จากการทดสอบคนปวยทเปนไสตงอกเสบ ล าไสอกเสบ ทอน าดอกเสบ ผวหนงเปนแผลตดเชอ ตอมน าเหลองอกเสบ และหลอดลมอกเสบ จ านวน 415 คน โดยการใชเปลอกผล ตมใหเดอดกรองน าน าไประเหยแหง แลวน าไปบดใหละเอยดเปนผง น ามาใสในแคปซล ขนาด 250 มก. กนวนละ 3 ครง ๆ ละ 1-2 แคปซล ผลปรากฏวาผ ปวยมอาการหายขาดเลย 305 คน อาการดขนอยางเหนไดชด 57 คน อาการดขน 36 คน และอก 17 คน ไมไดผลเลย

Page 29: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

เมลด

1. ฤทธคมก าเนด (Antifertility activity) น ามนจากเมลดทบทมมผลตอระบบสบพนธหลายอยาง เมอฉดเขาชองทองหนถบจกรตวละ 0.2 ซ.ซ. มผลท าใหกลาเนอมดลกคลายตวและเมอฉดเขาชองทองหนถบจกรตวละ 0.4 ซ.ซ. หรอฉดเขาชองทองกระตายตวละ 0.5 ซ.ซ. จะมผลเหมอนฮอรโมนเพศหญงและเมอน าน ามนไป sponified น าสวนทไมท าปฏกรยาไปฉดเขาชองทองกระตายตวละ 250 มก. พบวาฤทธเหมอนฮอรโมนเพศหญง ซงมผพบผลเชนเดยวกนเมอฉดเขาใตผวหนงหนขาวซงตดมดลกออกและในหนถบจกรซงตดมดลกออก 2. ฤทธตานเชอแบคทเรย (Antibacterial activity) น ามนจากเมลดสามารถฆาเชอ Klebsiella pneumoniae ซงเปนสาเหตของนวมอเนย Shigella flexneri และ Salmonella paratyphi

สวนทอยเหนอดน

ไดมผทดลองน าเอาสารสกดสวนทอยเหนอดนดวยแอลกอฮอล 50% และพบฤทธตอไปน 1. ฤทธลดน าตาลในเลอด (Hypoglycemic activity) เมอใหหนขาวกนสารสกดในขนาด 250 มก./ กก. ไมสามารถลดน าตาลในเลอดได 2. ฤทธคมก าเนด (Antifertility activity) เมอทดลองใหสารสกดในความเขมขน 2% ไมสามารถฆา อสจหรอท าใหอสจจบตวเปนกอนได 3. ฤทธตานเชอแบคทเรย (Antibacterial activity) เมอน าสารสกดไปทดลองกบเชอแบคทเรยตาง ๆ พบวาไมสามารถฆาเชอแบคทเรย Bacillus subtilis Staphylococcus aureus Salmonella typhosa Escherichia coli และ Agrobacterium tumefaciens 4. ฤทธตานเชอราและยสต (Antifungal and Antiyeast activity) สารสกดในขนาด 25 ไมโครกรม / ซ.ซ. ไมมผลตอเชอราและยสตเปนสาเหตของโรคกลาก Trichophytum mentographytes Microsporum canis และ Aspergillus niger หรอไมมผลตอเชอยสต Candida allbicans อนเปนสาเหตของการตกขาวและ Cryptococus neoformans 5. ฤทธลดไข (Antipyretic activity) เมอฉดสารสกดในขนาด 0.125 มก. / กก. เขาชองทองหนถบจกรพบวาไดผล 6. ฤทธขบปสสาวะ (Diuretic activity) เมอฉดสารสกดเขาชองทองหนขาวขนาด 0.063 มก. / กก. พบวามฤทธขบปสสาวะ 7. ฤทธกดประสาทสวนกลาง (CMS depressant) เมอฉดสารสกดในขนาด 0.125 มก. / กก. เขาชองทองหนถบจกรพบวาไมสามารถแกปวดหรอลดตานการชก และไมเสรมฤทธยานอนหลบ

Page 30: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

8. ฤทธตานการอกเสบ (Antiinflammatory activity) เมอใหหนขาวกนสารสกด 0.125 มก. / กก. พบวาไมสามารถตานการอกเสบทเหนยวน าใหเกดดวย carageenine 9. การทดลองความเปนพษ (Toxicity assessment) เมอฉดสารสกด 0.25 มก. / กก. เขาชองทองหนถบจกรท าใหหนตายครงหนงของจ านวนททดลอง

ต ารบยา

1. บาดแผลจากเชอรา แผลเรอรงทผวหนง ใหใชเปลอกรากพอประมาณ น ามาตมใชน าลางแผล 2. เปนบดเรอรง หรอถายเปนเลอด ใหใชเปลอกผล น ามาผวไฟใหเกรยม แลวน ามา บดใหละเอยด ประมาณ 3-6 กรม ผสมกบน าขาวกน หรอมะเขอยาว 1 ลก แลวตมเอาน าดมกน 3. เปนโรคผวหนงเรอรง ถกน ารอนลวก และแผลจากไฟไหม ใชควหรอผงใหเกรยม แลวบดใหละ เอยด ผสมกบน ามนพชคลกใหเขากน ใชทาบรเวณแผล หรอใชเปลอกผลและสารสมในประมาณ เทา ๆ กน แลวน ามาบดใหละเอยด แลวใชทาบรเวณทเปน 4. เทาทเปนแผลเนาเรอรง ใหใชเปลอกผลน ามาตมเคยวน าใหเหลว แลวปลอยใหตก ตะกอน จาก นนกใชทาบรเวณแผลทเปนทกวน 5. แกเลอดก าเดาไหลไมหยด - ใชดอกทบทมสด โขลก หรอหนใหเปนฝอย แลวใชอดรจมก - ใชดอกทแหงแลว น ามาต าใหละเอยด ประมาณ 0.3 กรม ใชเปาเขารจมก - ใชดอกแหงประมาณ 0.3 กรม และดอกปอแกวประมาณ 3 กรม น ามาบด ผสมกนใหละเอยด แลวน ามาตมหรอใชผสมกบน ากน ในประมาณ 3 กรม ตอน า 1 แกว 6. ขบพยาธตวกลม และตวตด ใหใชเปลอกรากทแหงแลว ประมาณ 18 หรอ 25 กรม น ามาต าใหละเอยดแลว ใชตมน ากน หรอรนเอาน าตมใสขาวขน ๆ กนกอนอาหาร 7. หญงทเปนระดขาว หรอตกเลอดมากผดปกต ใหใชรากทสด ประมาณ 1 ก ามอ น ามาเผาไฟใหเกรยม จากนนเอาไปตม หรอเคยวกบน าใหขน ใชกนครงละ 1 แกว 8. นวในไต ใหใชรากสด และล าตน ในปรมาณ 30 กรม เทากน น ามาตมใชกนน า 9. แผลทถกคมมด หรอของมคมทกชนด ทมเลอดไหลใชดอกทแหงแลว น ามาต าใหละเอยดแลวใชพอกบรเวณทเปนแผล 10. หชนกลางอกเสบ ใหใชดอกสดน ามาผงไฟใหเกรยมบนกอนอฐ จากนนน ามาบด ใหละเอยดผสมกบพมเสนพอประมาณ ใชเปาเขาห

Page 31: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

11. ส าหรบเดกทไมเจรญอาหาร อาเจยนเปนโลหต หรอจมกและฟนไมปรกต ใหใช ดอกสด (แหง) น ามาตมน ากน

ต ารบยา (สตว)

1. ถายพยาธตวกลมในสกร ใหใชเปลอกรากและผลเลบมอนาง ในประมาณ 15 กรม เทากน และเมลดหมากอก 10 กรม น ามาตมน าใหกน 2. ถายพยาธตวตดกบสตวเลยง ใชเปลอกรากน ามาบดใหละเอยด แลวดอง หรอ แชน าประมาณ 4-5 ชม. จากนนน าไปตมใหสตวกน (เปลอกรากผง สตวทมอายมากใหใชในปรมาณ 30-60 กรม ส าหรบสตวทมอายออนหรอปานกลาง ใหใชในปรมาณ 10-12 กรม) 3. มาและวว ทออนแอหมดก าลง ใหใชเปลอกของผลทแหงแลวในปรมาณ 30 กรม น ามาต าใหละเอยดใชละลายน าใหกน 4. ลกสกรเปนโรคบด ใหใชเปลอกผลประมาณ 3 กรม และเจยวซวจา ผสมกนแลว ควใหแหง แลวเตมใบกบกประมาณ 10 กรม น ามาตมเอาน าใหกน 5. หามเลอดส าหรบบาดแผลขางนอก ใหใชดอกทแหงแลวบดใหละเอยดใชโรย บรเวณทเปนแผล อน ๆ

ในประเทศอนเดยทางดานแถบตะวนตกเฉยงใต ไดมการใชเปลอกผลทบทมน ามายอมผา ซงใชผสมกบครามหรอขมน จะไดสผาทยอมนนเปนสน าตาลอมแดง แตถาใชเปลอกผลอยางเดยวกจะไดเปนสเขยว ผาทยอมชนดนเรยกวา RAKREZI

ขอหามใช

1. เปนบด ทองเสย หรอทองผก ไมสมควรใชเปลอกราก เปนยาแก 2. การใชเปลอกรากเปนยาแก ควรจะใชอยางระมดระวงใหมาก เพราะเปลอกรากม พษ

Page 32: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

การใชประโยชนจากพช

ในปจจบนไดใหความส าคญตอสงแวดลอมมากขน จงไดมการศกษาการควบคมโรคโดยชววธมาใชเพอลดปญหาสารเคมทก าลงกอใหเกดผลเสยตอสภาพแวดลอม เชน การใชสารสกดจากพชสมนไพรโดย Morris (1979) รายงานวา ประสทธภาพของพชสมนไพรในการยบยงการเจรญเตบโตของจลนทรยแตละชนดขนอยกบระดบความเขมขนของสารสกดดวย และปรากฏวา สมนไพรหลายชนดมฤทธในการท าลายเชอจลนทรย การทสมนไพรจะมฤทธมากหรอนอยขนอยกบชนดของจลนทรยสารสกดจากสมนไพรในแอลกอฮอลสวนใหญมฤทธท าลายเชอจลนทรยไดดกวาสารสกดใน chloroform และ petrolium ether และพบวาจากการทดสอบฤทธของสารสกดจากพช 30 ชนด ตอการยบยงการเจรญของเชอรา C. gloeosporioides ปรากฏวาสารสกดจากชงโค (Buahinai purpurea ) ทระดบความเขมขน 100 1,000 10,000 ppm สามารถยบยงการเจรญของเชอราไดถง 100% สารสกดทไดผลรองลงมาไดแก ตอยตง (Ruellia tuberose Linn.) วานน า (Acorus calamus Linn.) กระดมทอง(Wedlia trilobata L. Hitche) และกระทง (Calophyllum inophyllum Linn.) (ศรวรรณ, 2533)

การศกษาผลของสารสกดหยาบจากพชสมนไพร 3 ชนด คอใบหปลาชอน (Emiliax sonchifolia Linn.) ใบฝรง (Psidium guajava Linn.) และเปลอกผลทบทม (Punica granatum Linn.) ตอการพฒนาอาการโรคแคงเกอรของผลสกลสม ทเกดจากเชอ Xanthomonas axonpodis pv. citri โดยใชสารสกดความเขมขน 10,000 ppm ทสกดดวยเอทลแอลกอฮอล 95% แลวระเหยตวท าละลายออกดวย Rotary vacuum evaporator ท าการฉดพนลงบนใบมะกรดกอนการปลกเชอดวยวธ detach leaf ในหองปฏบตการและในสภาพเรอนทดลอง โดยสารสกดหยาบจากหปลาชอนมประสทธภาพในการลดความรนแรงและการพฒนาอาการของโรคดทสดรองลงมาคอ สารสกดหยาบจากใบฝรงและเปลอกผลทบทมตามล าดบ (ศรวรรณ, 2548)

การศกษาการจดการดนเพอลดปรมาณเชอ Erwinia carotovora supsp. carotovora สาเหตโรคเนาและของผกกาดเขยวปลในสภาพโรงเรอน ท าโดยใชน าสกดหยาบและกากของพช 5 ชนด ไดแก เปลอกทบทม ใบพล เปลอกสมเขยวหวาน ตนลกใตใบและผลเปลอกมงคด คลกลงในดนทมเชอแบคทเรยสาเหตโรคทเตรยมไว ในอตรา 800 กโลกรมตอไร ในกระบะซเมนตขนาด 1 ลก บาศกเมตร จากนนจงน าผกกาดเขยวปลอาย 40 วนยายปลกลงในกระบะละ 10 ตน ตรวจนบปรมาณในดนทกสปดาห ตงแตสปดาหท 0 ถงสปดาหท 5 โดยการเกบตวอยางดนมาท า serial dilution และ spread plate บนอาหาร Endo agar พบวาทกกรรมวธสามารถปรมาณเชอในดนลง

Page 33: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ได โดยท าใหปรมาณเชอในดนในแตละสปดาหลดลงในอตราทสงกวา control นอกจากนยงพบวา การใชน ายาสกดและกากของใบพลและเปลอกผลทบทมคลกลงในดนทมการตดเชอ สามารถชะลอการพฒนาของโรคไดดกวากรรมวธอน ๆ (ศศธร, 2546)

ผลการทดสอบประสทธภาพของสารสกดวานน า (Acorus calamus L.) ทความเขมขน 0 100 500 และ 1,000 ppm ในการยบยงการเจรญของโคโลน และการยบบงการงอกสปอรของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ในมะมวงพบวาบนอาหาร PDA ผสมสารสกดทมความเขมขน 1,000 ppm สามารถยบยงการเจรญของเชอไดดทสด คอ 77.11% และจากการทดสอบโดยวธ Paper disc diffusion technique ไมพบ clear zone การทดสอบการยบยงการงอกสปอรเชอรา C. gloeosporioides บนอาหาร water agar (WA) water agar+rose Bengal (WA-RB) Potato dextrose gar (PDA) potato dextrose agar+rose Bengal (PDA-RB) microcentrifuge tube multiwell plates concave slide slide culture และบนใบมะมวง ผลการทดสอบพบวาวธการตาง ๆ สามารถน ามาใชในการทดสอบสารสกดจากพชในการควบคมเชอรา C.gloeosporioides ได ยกเวน Paper disc diffusion technique วธการทตรวจสอบไดรวดเรวและประหยดคอการทดสอบการยบยงการงอกของสปอรใน concave slide (พรชนก และคณะ, 2546)

การทดสอบประสอบสทธภาพของสารสกดหยาบจากพชสมนไพรในการยบยงการเจรญของ Erwinia carotovora subsp. carotovora เชอสาเหตโรคเนาเละของผก ท าโดยน าสารสกดหยาบจากพช 14 ชนด ซงสกดดวยเอทลแอลกอฮอลล 95% มาทดสอบกบเชอแบคทเรยสาเหตโรคดวยวธ Paper disc diffusion บนอาหาร double layer NGA โดยใชสารสกดทระดบความเขม ขน 100,000 ppm พบวาสารสกดจากพชสมนไพรทสามารถยบยงการเจรญของเชอได โดยเกดบรเวณยบยงเหนไดชดเจนม 5 ชนด ไดแก สารสกดจากผลสมอพเภก (Terminalia belerica) ใบฝรง (Psidiumvaaja) ผลสมอไทย (Terminalia chebula) ผลเบญกาน (Quercus infectori) และเปลอกผลทบทม (Punica granatum) เมอน าสารสกดหยาบทใหผลดในการยบยงการเจรญของเชอมาปรบความเขมขนเปน 5 ระดบ ไดแก 100,000 50,000 10,000 5,000 และ 1,000 ppm และน าไปทดสอบประสทธภาพในการยบยงเชออกครงดวยวธการเดยวกน ผลปรากฎวาสารสกดจากเปลอกผลทบทมและผลเบญกาน กอใหเกดบรเวณยบยงเหนไดชดเจนททกระดบความเขมขนตงแต 1,000 ppm ขนไป สารสกดจากผลสมอพเภกและสมอไทย กอใหเกดบรเวณยบยงทระดบความเขมขน 5,000 ppm ขนไป สวนสารสกดจากใบฝรงกอใหเกดบรเวณยบยงไดทระดบความเขมขน 50,000 ppm ขนไป ขนาดเสนผาศนยกลางของบรเวณยบยงทเกดขน ผนแปรตามชนดและ

Page 34: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ระดบความเขมขนของสารสกดจากพชเมอเปรยบเทยบทระดบความเขมขน 100,000 ppm สารสกดจากผลเบญกานกอใหเกดบรเวณยบยงไดกวางทสดคาเฉลย 3.51 ซม. รองลงมาไดแก สารสกดจากผลสมอพเภก 2.80 ซม. สารสกดจากเปลอกผลทบทมเฉลย 2.61 ซม. สารสกดจากผลสมอไทยเฉลย 2.45 ซม. และสารสกดจากใบฝรงเฉลย 1.32 ซม. (ศศธร, 2547)

การศกษาวธการทดสอบประสทธภาพของของสกดจากพชสมนไพรในการยบยงการเจรญของเชอ R. solnacearum สาเหตโรคเหยวของมะเขอเทศท าโดยแบงการทดลองเปน 5 การทดลอง การทดลองท 1 ศกษาวธการสกดสารสกดหยาบจากพช 11 ชนด ทงชนดสดและแหงโดยใชเอทลแอลกอฮอลล 40 60 และ 95% เปนตวท าละลาย และเปรยบเทยบระยะเวลาในการแชเพอสกดสารจากพชนาน 13 และ 7 วน จากนนระเหยตวท าละลายดวยเครองกลนระเหยสญญากาศ แลวน าสารสกดหยาบความเขมขน 100,000 ppm มาทดสอบประสทธภาพในการยบยงการเจรญของเชอดวยวธ Paper disc diffusion บนอาหาร Doublelayer NGA พบวามสารสกดหยาบจากพชสมนไพร 6 ชนดทสามารถยบยงการเจรญของเชอ R. solnacearum สาเหตโรคเหยวของมะเขอเทศโดยกอใหเกดบรเวณยบยงเหนไดอยางชดเจน ไดแก สารสกดหยาบจากแงงขมนชน ใบทองพนชง เปลอกผลทบทม ใบฝรง เปลอกผลมงคด และหวหญาแหวหม จงน าสารสกดหยาบจากพชทง 6 ชนดน มาปรบระดบความเขมขนเปน 5 ระดบไดแก 100,000 50,000 10,000 5,000 และ 1,000 ppm แลวน ามาทดสอบกบเชออกครงดวยวธการเดยวกน พบวาสารสกดหยาบจากเปลอกผลทบทมสดและแหงสามารถยบยงการเจรญของเชอ ไดทระดบความเขมขน 10,000 ppm ขนไป สารสกดจากแงงขมนชนสดและสารสกดจากสวนสดและแหงของใบฝรง เปลอกผลมงคด และรากหญาแหวหม สามารถยบยงการเจรญของเชอไดทระดบความเขมขน 50,000 ppm ขนไป สวนสารสกดจากขมนชนแหง ทองพนชงสดและแหงยบยงไดทระดบความเขมขนตงแต 100,000 ppm ขนไป การเปรยบเทยบระยะเวลาในการแชพชนาน 1 3 และ 7 วน พบวาสารสกดจากใบทองพบชงทแชนาน 1 และ 3 วน สามารถยบยงการเจรญของเชอได สารสกดหยาบจากใบฝรงตองแชนาน 3 วนขนไปจงจะสามารถยบยงการเจรญของเชอได สวนสารสกดหยาบจากแงงขมนชน เปลอกผลมงคด เปลอกผลทบทม และรากหญาแหวหมทงชนดสดและแหงสามารถยบยงการเจรญของเชอไดตงแตระยะการแช 1 วนขนไป การทดลองท 2 การคดเลอกพชสมนไพรทมประสทธภาพในการยบยงการเจรญของเชอ น าพช 89 ชนด มาเตรยมสารสกดหยาบโดยใชเอทลแอลกอฮอลล 95% เปนตวท าละลายและน าสารสกดหยาบไปทดสอบโดยวธ Paper disc diffusion บนอาหาร Double layer NGA พบสารสกดพชสมนไพร 19 ชนด ทมประสทธภาพในการยบยงการเจรญของเชอโดยกอให เกดบรเวณยบยงอยางชดเจนไดแก สารสกดจากใบฝรง เปลอกผลทบทม เปลอกผลมงคด ผลสมอ

Page 35: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

พเภพ ผลเบญจกาน ขมนชน ผลสารภ ผลกระทง ใบทองพนชง รากหญาแหวหม ผลมะขามปอม ผลยคาลปตส เนอผลมะปลง เมลดผลมะปลง ใบชา เมดในของเมลดมะมวง โกศพงปลา เปลอกผลเงาะ และผลสมอไทย การทดลองท 3 จงไดน าสารสกดหยาบจากพชทง 19 ชนด มาผานการระเหยตวผานตวท าละลายออกแลวปรบความเขมขนเปน 5 ระดบ ไดแก 100,000 50,000 10,000 5,000 และ 1,000 ppm แลวน ามาทดสอบประสทธภาพในการยบยงการเจรญของเชอโดยวธ Paper disc diffusion อกทง พบวาสารสกดหยาบทใหผลดทสด 2 ล าดบแรกไดแก สารสกดหยาบจากเปลอกผลทบทม และผลสมอพเภก โดยสามารถกอใหเกดบรเวณยบยงไดทกระดบความเขมขน การทดลองท 4 จงน าสารสกดจากพชทง 2 ชนดนมาแยกสกดอยางละเอยดโดยวธ Quick Column Chromatography สามารถแยกสารได 31 ล าดบ น าสารแตละล าดบมาทดสอบประสทธ ภาพในการยบยงเชอพบวาสารสกดจากเปลอกผลทบทม ล าดบการชะท 22, 23, 24, 25, 26, 27 และ 28 สามารถยบยงการเจรญของเชอสาเหตโรคได สวนสารสกดจากผลสมอพเภกทสามารถยบยงการเจรญของเชอได ไดแก ล าดบการชะท 15, 16, 17, 20, 24, 25, 25, 26, 27 และ 28 การทดลองท 5 จงน าสารแตละล าดบการชะทสามารถยบยงการเจรญของเชอไดมาทดสอบหากลมสารธรรมชาตเบองตนโดยวธ Phytochemical method พบวาสารทมฤทธยบยงการเจรญของเชออยในกลมของฟลาโวนอยดและแทนนน (สพจน, 2548)

สารสกดของพช 56 ชนด ไดน ามาศกษาการยบยงการเจรญของเชอแบคทเรย Ralstonaia solanacearum (RS) สายพนธ T160 โดยวธ Paper disc diffusion มสารสกดจากพช 9 ชนด ไดแก ฝรง (Psidium guajava, Pgu) ยคาลปตส (Eucalyptus globulus, Eg) หปลาชอน (Acalyphy wilkesiana, Aw) การะเวก (Artabotrys hexapetatus, Ah) มะกอกฝรง (Spondias cytherea, Sc) น านมราชสห (Euphobia hirta, Eh) มะขาม (Tamarindus indicus, Ti) สบปะรด (Ananas comosus, Ac) และทบทม (Punica granatum, Pgr) ทแสดงประสทธภาพยบยงเชอแบคทเรยททดสอบ สารสกดจากพชทง 8 ชนด ยกเวน Ac ยบยงการเจรญของเชอ RS 4 สายพนธ คอ T14 T17 T25 และ T160 และยบยงการเจรญของเชอ RS สายพนธ คอ T17 และ T25 ไดด สารสกดจากพชทง 9 ชนด ในสภาพสดและแหงน ามาศกษาการยบยงการเจรญของเชอ RS สายพนธ T160 สารสกดจาก Ah ในสภาพสดใหผลการยบยงดทสด แตสารสกดจากใบแหงจะยบยงไดต าสด สารสกดจาก Pgr ทงในสภาพสดและแหงใหผลในการยบยงเชอโรคไดดทสด (อไรวรรณ, 2544)

Page 36: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

การทดสอบประสทธภาพของสารสกดพช 3 ชนด คอเจตมลเพลงแดง (ราก) ทองพนชง (ใบ และ ล าตน) และนอยหนา (ใบ) ในการยบยงการเจรญของเชอรา C. gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนส มะมวงจ านวน 8 ไอโซเลท เชอราทเปนสาเหตโรคขวเนาผลมะมวงคอ Lasiodi plodia theobromae 4 ไอโซเลท Phompsis mangiferae 2 ไอโซเลท และ Dothiorella dominicana 2 ไอโซเลท พบวาสารสกดจากเจตมลเพลงแดงและทองพนชง สามารถยบยงการเจรญของเชอรา C. gloeosporioides L. theobromae P. mangiferae และ D. dominicana สารสกดจากนอยหนา ไมสามารถยบยงการเจรญของเชอราทง 16 ไอโซเลท เมอท าการทดสอบประสทธภาพของสารสกดมงคด (เปลอกผล) ยบยงการเจรญของเชอรา C. gloeosporioides 8 ไอโซเลท L. theobromae 4 ไอโซเลท และ P. mangiferae 2 ไอโซเลท พบวาสามารถยบยงการเจรญของเชอทงหมด 14 ไอโซเลททท าการทดสอบ เมอท าการทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากพชในการยบยงการงอกของสปอรเชอราพบวาสารสกดจากเจตมลเพลงแดง ทองพนชง และเปลอกมงคด สามารถยบยงการงอกของสปอรเชอรา C. gloeosporioides 8 ไอโซเลท ทท าการทดสอบได 100% โดยสารสกดจากเจตมลเพลงแดงและทองพนชงสามารถยบยงการงอกของสปอรเชอรา P. mangiferae 2 ไอโซเลท และ D. dominicana 2 ไอโซเลท สวนสารสกดจากเปลอกมงคดและทองพนชงสามารถยบยงการงอกของสปอรเชอรา L. theobromae 4 ไอโซเลท ท 100% เชนเดยวกน (สรวรรณ, 2547)

ศกษาประสทธภาพของสารสกดจากพชสมนไพรในการยบยงการเจรญของเชอ Erwinia cartovora subsp. cartovora สาเหตโรคเนาของพชผก โดยน าสารสกดจากพชจ านวน 14 ชนด มาทดสอบกบเชอแบคทเรยสาเหตโรคโดยชววธ disc diffution บนอาหาร double layer NGA พบวาสารสกดจากพชสมนไพรทสามารถยบยงการเจรญของเชอแบคทเรยอยางเหนไดชดม 4 ชนด คอ สารสกดจากเปลอกผลทบทม (Punica granatum) ผลเบญกาน (Quercus infectoria) ผลสมอไทย (Terminalia belerica) ผลสมอพเภก (Terminalia chebula) และใบฝรง (Psidium quajava) พบวาสารสกดจากเปลอกผลทบทมและเบญกาน กอใหเกดบรเวณยบยงเหนไดชดเจนททกระดบความเขมขน (วาสน, 2546)

การควบคมโดยชววธอกวธการหนง คอการใช bacteria antagonist มาใชควบคมเชอรา C. gloeosporioides ถงแมจะยงไมมรายงานทแนนอนวาควบคมโรคไดด แตเชอวาในอนาคตจะสามารถปรบปรงวธการใชเพอควบคมโรคใหไดผลดทสด และการศกษาการควบคมเชอราภายหลงการเกบเกยวสามารถท าไดโดยการใชความรอนและความเยนในการชะลอการเกดโรค พบวาการใชอณหภมต าในการเกบรกษาผลผลต เปนวธการทท ากนอยางแพรหลายในทางการคา เชน ใน

Page 37: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

การเกบรกษาผลเงาะ ควรเกบทอณหภม 15 องศาเซลเซยส (นพนธ , 2531) หรอการใชความรอนในการควบคม เชน มะละกอ ทอณหภมน ารอน 50 องศาเซลเซยส นาน 20 นาท มะมวง ทอณหภม 51 องศาเซลเซยส นาน 5 นาท ใชควบคมโรคแอนแทรคโนส การใชกาซ CO2 ในการรมควน และการใชผลไมจมลงในสารปองกนก าจดเชอรา เชน iprodione carbendazim หรอ thiabendazole แลวเปาใหแหง จะชวยลดการเนาเสยของผลไมจากเชอราได ความหมายของพชสมนไพร

ค าวา “สมนไพร” ตามพระราชบญญตยา หมายความถง ยาทไดจากพช สตว และแร ซงยงมไดมการผสม ปรง หรอแปรสภาพ (ยกเวนการท าใหแหง) เชน พชทยงคงเปนสวนของราก ล าตน ใบ ดอก ผล ฯลฯ ยงไมไดผานขนตอนการแปรรปใด ๆ เชน การหน การกลน การสกดแยก รวมทง การผสมกบสารอน ๆ (วนด, 2537)

สารส าคญในพช

สาระส าคญในพชสมนไพรแบงออกเปน 2 จ าพวกใหญ ๆ ไดแก 1. สารปฐมภม (Primary metabolite) เปนสารทพบในพชชนสงทวไป ๆ พบไดในพชเกอบทกชนด เปนสารผลตผลทไดจากกระบวนการสงเคราะหแสง (photosynthesis) โดยพชดดน า กาซ คารบอนไดออกไซด และพลงงานจากแสงแดดเพอสรางสารจ าพวกคารโบไฮเดรต ดวนเหตนพชเกอบทกชนดจงประกอบดวยแปงและน าตาล สารเหลานมนษยไดน ามาใชเปนอาหาร นอกจากน สารปฐมภมยงรวมสารจ าพวกไขมน โปรตน เมดส (pigment) และเกลออนนทรย (inorganic salt) ชนดตาง ๆ อกดวย 2. สารทตยภม (secondary metabolite) เปนสารประกอบทมลกษณะคอนขางพเศษในพชแตละชนด คาดวาสารเหลานเกดจากขบวนการชวสงเคราะห (biosynthesis) ในพชตวอยางของสารในกลมนไดแก แอลคาลอยด ไกลโคไซด น ามนหอมระเหย เปนตน สารกลมนสวนมากจะมสรรพคณทางยาหรอเปนสารพษ (วนด, 2537) จากการศกษาถง Primary และ secondary metabolite ของพช ท าใหสามารถน ามาใชเปนยารกษาโรคได ซงอาจจ าแนกออกไดเปน 9 กลมใหญ ๆ คอ

1. คารโบไฮเดรต (carbohydrate) 2. แอลคาลอยด (alkaloid) 3. ไกลโคไซด (glycoside)

Page 38: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

4. น ามนระเหย (volatile oil) 5. ไขมน (lipid) 6. เรซน (resin) 7. วตามน (vitamin) 8. สเตอรอยด (steroid) 9. ยาปฏชวนะ (antibiotic)

1. คารโบไฮเดรต (carbohydrate)

คอสารทประกอบดวย C H และ O ซงอตราสวนของ H:O มกจะเปน 2:1 และอยในรปของ polyhydroxy aldehyde หรอ Ketone ในปจจบนกลมของคารโบไฮเดรตทใชในทางยา มกใชในรปของ dextrose fructose glucose lactose dextran starch cotton agar pectin tragacanth ฯลฯ

2. แอลคาลอยด (alkaloid)

เปนสารอนทรยซงมไนโตรเจนเปนสวนประกอบ (Organic nitrogen compound) พบในพชชนสงเปนสวนมาก แตบางครงกพบในสตวและพวกจลนทรย คณสมบตของแอลคาลอยด สวนใหญมรสขม ไมละลายน า แตละลายไดในตวท าละลายในอนทรย (Organic solvent) ชนดตาง ๆ มฤทธเปนดาง และมกมฤทธตอระบบตาง ๆ ของรางกาย หนาทของแอลคาลอยดในพชยงไมมค าตอบทแนนอน แตนกวทยาศาสตรไดใหขอสงเกตทนาเชอถอไดวาอาจมหนาทดงน 2.1 เปนสารทมพษ ปองกนมใหแมลงหรอมารบกวนหรอท าลาย 2.2 เปนผลทไดจากกระบวนการท าลายพษ (detoxification) ของสารทเปนอนตรายตอพช 2.3 เปนตวทชวยควบคมการเจรญเตบโตของพช (growth regulator) 2.4 เปนตวเกบแรธาตสามารถจะสลายตวในไนโตรเจน และธาตอน ๆ ทจ าเปนตอการด ารงชพ ของพช 2.5 เปน nitrogen excretory product เชนเดยวกบยเรยหรอกรดยรก 2.6 ชวยรกษาดลของไอออน

3. ไกลโคไซด (glycoside)

เปนสารอนทรยทประกอบดวยสวนทเปน aglycone (genin) กบสวนทเปนน าตาล ดงนนเมอถก hydrolyze ดวยกรดหรอน ายอย จะไดผลผลต 2 อยางน สวนทไมใชน าตาลมสตรโครงสราง

Page 39: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

แตกตางกนไปหลายประเภท ดงนนฤทธทางเภสชวทยาของสารประกอบในกลมนจงมไดกวางขวางแตกตางกนออกไป สวนทเปนน าตาลจะไมมฤทธทางเภสชวทยาแตเปนสวนชวยท าใหการละลายและดดซมเขาสรางกายดขน

หนาทของไกลโคไซดในพชจะท าใหการด ารงชวตของพชอยอยางปกต (Regulator and sanitary function) และท าหนาทปองกนอนตรายใหแกพชดวย

ไกลโคไซดอาจจ าแนกคราว ๆ ตามสตรโครงสรางของ aglycon (เนองจากเปนสวนทมฤทธทางเภสชวทยา) ไดดงน

3.1 Cardiac glycoside จะมฤทธตอระบบกลามเนอหวใจและระบบไหลเวยนของโลหต

3.2 Anthraquinone glycoside ใชเปนยาระบาย (laxative) ยาฆาเชอ (antibiotic) และยอมส (dry stuff)

3.3 Saponin glycoside เมอเขยากบน าจะไดฟองคลายสบ มกใชเปนสารตงตนในการผลตยาประเภทสเตอรอยด

3.4 Cyanogenetic glycoside เปนไกลโคไซดซงเมอถก hydrolyse จะไดน ามนมสตารด น ามนนจะเปนตวท าใหมกลน และมฤทธฆาเชอโรคดวย

3.5 Phenolic glycoside พบมากในธรรมชาต โดยเฉพาะในรปของอนพนธของ phenol เชนพวก tannin ในทางยามฤทธฝาดสมาน (astringent) ฆาเชอโรค ในทางอตสาหกรรมฟอกหนงและท าหมกพมพ

4. น ามนระเหย (volatile oil or essential oil)

เปนน ามนไดจากพชโดยการกลนดวยไอน า (Steam distillation) หรอการบบ (expression) มกลนรสเฉพาะตว ระเหยไดงายในอณหภมธรรมดา เบากวาน า นกวทยาศาสตรบางทานกลาววา น ามนระเหยเปน waste product ไมมประโยชนในกระบวนการชวเคม บางทานกลาววามนเกดขนเพอดงดดแมลงแตเปนไปไดวาน ามนระเหยเกดจากผลตผลทผดปกตของกระบวนการชวเคมของมน และอาจเปนสารทเกดจากการท าลายพษ

ประโยชนทางดานยานอกใชเปนตวแตงกลนแลวสวนใหญจะใชในทางขบลม (carinative) ฆาเชอ (antibacterial antifungal) ทาถนวด

Page 40: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

5. ไขมน (lipid)

คอสารทไมละลายน า แตละลายในตวท าละลายอนทรย (Organic solvent) เมอตมกบดางจะไดสบ ถาเปนของแขงทอณหภมหองเรยกวาไขมน ถาเปนของเหลวเรยกวาน ามนมกอยในรปของอาหารสะสมของพช ประโยชนของ lipid ในทางยาจะใชเตรยมขผง emulsion หรอใชเปนยาระบาย เชน น ามนละหง รกษาโรคผวหนง เชน น ามนกระเบา

6. เรซน (resin)

คอสารอนทรยหรอสารผสมประเภทโพลเมอร มรปรางไมแนนอน มสตรโครงสรางทางเคมสลบซบซอน ไมละลายน า ละลายไดดในตวท าละลายอนทรย เมอตมกบดางจะไดสบ เมอเผาจะไดควน เรซนอาจเกดจาก Normal physiological product คอพชไดสรางอยเปนปกต หรอเกดการสรางเมอเปนโรค (pathological product) เมอตมไมมแผลเกดขน ในธรรมชาตพบเรซนรวมกบน ามนระเหย หรอ ตวอยางเชน ยางสน มหาหงค ก ายาน

7. วตามน (vitamin)

สารประกอบอนทรยทมอยเลกนอยในอาหาร ตามธรรมชาตสามารถเขาสรางกายจากอาหารหรอแหลงอน เพอใหมหนาทเฉพาะทางกายภาพ หรอเพอการเตบโตเพอเขาสภาพปกต

วตามนสามารถแบงออกไดเปน 2 ชนด คอ 7.1 วตามนชนดทละลายไดในไขมน จะมการสะสมในรางกายไดโดยจะละลายอย

ในไขมน เชน วตามน A D E K 7.2 วตามนชนดทละลายในน า จะสามารถก าจดออกโดยทางปสสาวะไมเกบสะสม 7.3 ไวในรางกาย ดงนน เมอขาดวตามนเหลานอาการจะปรากฏออกมาในเวลาไม

นาน เชน วตามน B C

8. ยาปฏชวนะ (antibiotic)

ยาปฏชวนะเปนผลตผลทางเคมทไดจากสงมชวต สวนใหญจะไดจากแบคทเรยและรา ส าหรบพชชนสงกมฤทธเปนยาปฏชวนะแตยาปฏชวนะทไดจากพชสมนไพร ทใชอยในตลาดยา ยงมจ านวนนอยมาก

Page 41: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

9. สเตอรอยด (steroid)

คอสารอนทรยทมโครงสรางเปน tetra cyclic terpenoid ซงถกสรางขนมาโดยพชและสตวในทางการแพทยมการใชสเตอรอยดพวกโฮรโมนเพศ เปนยามานานแลว แตเดมสารสกดพวก cortisone จาก bile acid นนยงยากและท าใหมราคาแพง ปจจบนกสามารถผลตสเตอรอยดจากพชและจลชพท าใหราคาของสเตอรอยดนนถกลง (นจศร และ พะยอม, 2534) การสกดสารส าคญจากพชสมนไพร

การสกดเบองตนไมวาจะสกดดวยวธใดหรอใชตวท าละลายใด กจะไดองคประกอบเปนของผสมหรอสกดอยางหยาบ (crude extract) ซงเปนสงทสกดออกมาจากสมนไพรโดยใชน ายาสกดหรอตวท าละลาย (solvent) สารสกดอยางหยาบนเปนของผสมขององคประกอบทางเคมของสมนไพรซงจะมทงองคประกอบทมฤทธทางเภสชวทยา (pharmacologically active constituents) ซงมกเรยกวาสารส าคญ (active constituents) และองคประกอบทไมมฤทธทางเภสชวทยา (pharmacologically inactive constituents) ซงเรยกวา สารเฉอย (inert substances) ชนดและสดสวนขององคประกอบในสารสกดจะแปรเปลยนไปตามสภาพของสมนไพรทใชและสภาวะทใชในการสกด วตถประสงคของการสกดพชสมนไพรคอ

- เพอสกดแยกเอาสารส าคญออกจากสมนไพร - เพอใหไดสารสกดทมความเขมขนของสารส าคญสง

- เพอลดขนาด (dose) ของการใชสมนไพรลงใหอยในปรมาณทเหมาะสม

1. น ายาสกดหรอตวท าละลาย

ตวท าละลายทนยมใชในการเตรยมสารสกด ไดแก น า (water) แอลกอฮอล (alcohol) หรอ สารละลายผสมของสารละลายทง 2 ชนด นอกจากนอาจใชกรด ดาง เตมลงในน ายาสกดเพอปรบความเปนกรด-ดางของน ายาสกดใหเหมาะสมยงขน สวนสารละลายชนดอน ๆ เชน อเทอร (ether) คลอโรฟอรม (chloroform) มใชบางเฉพาะกรณ

1.1 น า จดเปนตวท าละลายทด หางายและราคาถก แตการใชน าอยางเดยวเปนตวท าละลายในการสกดพชสมนไพรมขอเสยหลายประการ คอ สามารถละลายองคประกอบทไมตองการออกมาไดมาก เชนเดยวกบสารส าคญทตองการ สารเฉอยทละลายออกมากบน า เชน น าตาล แปง ลวนเปนอาหารทดของเชอจลนทรย จงท าใหเกดการบดเสยของสารสกดเนอง

Page 42: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

จลนทรยได ถาไมใสสารกนบด (preservative) นอกจากนน าระเหยไดทอณหภมสง ถาตองการท าใหสารสกดในน าเขมขนจะตองใชอณหภมสงในการระเหยไลน าออกไปซงอาจจะเกดความเสยหายกบสารส าคญได ดงนนจงไมคอยนยมใชน าเดยว ๆ เปนน ายาสกด แตใชรวมกบตวท าละลายอน ๆ เชน แอลกอฮอลหรอกรด หากเตมกรดเลกนอยลงในน า (acidified water) ใชสกดองคประกอบส าคญในพชสมนไพรทมองคประกอบส าคญเปนสารประกอบแอลคาลอยด สวนน าทเตมดางลงไปเลกนอย (alkalized water) จะใชสกดพชสมนไพรบางชนด เชน เปลอกคาสคารา (Cascara bark)

1.2 แอลกอฮอล จดเปนตวท าละลายทดมากเมอเปรยบเทยบกบน า แอลกอฮอล มขอ ดกวาดงน

- มความจ าเพาะ (Selectivity) ในการละลายมากกวาน า - มฤทธยบยงการเจรญเตบโตของจลนทรย - หากตองการท าใหสารสกดเขมขนจะระเหยไดงาย แตราคาของแอลกอฮอลจะแพงกวาน า

1.3 น ายาผสมแอลกอฮอล (hydroalcoholic mixture) เปนน ายาสกดทใชกนอยางกวางขวาง เนองจากสามารถละลายสารส าคญในพชสมนไพรไดใกลเคยงกบแอลกอฮอล แตราคาถกกวา และยงสามารถยบยงการเจรญเตบโตของเชอจลนทรยไดอกดวย นอกจากนการใชน ายาผสมแอลกอฮอล ยงชวยปองกนการแยกตวของสารตาง ๆ ในสารสกดเมอตงทงไว ซงมกเกดขนในกรณทใชน าอยางเดยวในสารสกด

นอกจากนน ายาสกดตาง ๆ ทกลาวมาขางตน ตวท าละลายอนทรยกอาจใชในการสกดพชสมนไพรได เชน เฮกเซน (Hexane) และปโตเลยมอเทอร (petroleum ether) ใชสกดพชสมนไพรในขนตนเพอสกดสารพวกไขมนออกไปกอนทจะท าการสกดสารส าคญ แตตองระเหยเอาน ายาสกดเหลานออกไปจนหมดกอนท าการสกดขนตอนตอไป ตวท าละลายเหลานนยมใชสกดองคประกอบทไมมขว (non polar component) เชน ไขมน (lipids) สเตยรอยด (steroids) เทอรพนอยด (terpenoids) เปนตน

คลอโรฟอรม (Chloroform) และอเทอร (ether) จดเปนตวท าละลายทไมมขว (polarity) และมขวปานกลาง ใชสกดองคประกอบทไมมขว (non-polar component) ไปจนถงสารทมขวปานกลาง

Page 43: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

เมทานอล (Methanol) เปนตวท าละลายทใชในการสกดสาระส าคญทมขว (polaractive constituent) เชนเดยวกบแอลกอฮอล แตนยมใชแอลกอฮอลมากกวา เพราะราคาถกกวาและมความเปนพษนอยกวา

2. การเลอกน ายาสกด

หลงจากท าการเตรยมตวอยางพชสมนไพรส าหรบการสกดแลวควรเลอกน ายาสกดใหเหมาะสมกบชนดของสารทตองการสกด โดยน ายาสกดดงกลาวควรมคณสมบตดงน

2.1 มความสามารถในการละลายสารส าคญมากทสดและไมละลายหรอองคประกอบอน ๆ ไดนอย (selectivity) เนองจากสารส าคญสวนใหญเปนสารประกอบอนทรย ซงอาจมโครงสรางสลบซบซอนมากนอยตางกนและมอยในพชทงในสภาพอสระและรวมตวกบสารอน ๆ ในสภาพเกลอหรอสารประกอบเชงซอน ดงนนควรพจารณาถงสภาพหรอรปแบบของสารส าคญทตองการสกดนอกเหนอจากความมขวของสารส าคญดงกลาว ในการเลอกน ายาสกดมกฏทวไปวา สงทเหมอนกนยอมละลายในกนและกน (like dissolve like) เชน คณสมบตของสารส าคญมขว กควรเลอกตวท าละลายหรอน ายาสกดทมขวเชนเดยวกนในสารสกด

2.2 มความคงตวด และหางาย ราคาถก ไมเปนพษตอรางกาย

2.3 ไมระเหยงายหรอยากเกนไป

2.4 สภาพของพชสมนไพรทท าการสกด เชน เมลด เปนสวนทมไขมนอยมาก ควรขจดไขมนพวกนออกกอนโดยการสกดดวยตวท าละลายอนทรยประเภทไมมขว เชน ปโตรเลยมอเทอร เปนตน แลวจงน ากากพชทเหลอไปสกดตอดวยตวท าละลายทเหมาะสม

3. วธสกด

3.1 มาเซอเรชน (maceration) เปนวธการสกดสารส าคญจากพชโดยวธการหมกสมนไพรกบน ายาสกดจนกระทงเนอเยอของสมนไพรออนนมและน ายาสกดสามารถแทรกซมเขาไปละลายองคประกอบภายในผงสมนไพรออกมาได

การหมกสมนไพรควรท าในภาชนะทมฝาปดสนทในน ายาสกดทเหมาะสม จะท าเปนเวลา นาน 7 วน หรอตามก าหนดในเภสชต ารบหรอจนกระทงองคประกอบทตองการละลายออกมาหมด ในระหวางทหมกผลสมนไพรอยนนควรเขยาหรอคนเปนครงคราวเพอเพมอตราเรวของการสกด

Page 44: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

เมอครบก าหนดเวลาจงกรอง แยกกาก (marc) ออกจากน ายาสกด วธการสกดนเหมาะสมกบพชสมนไพรทมโครงสรางหรอเนอเยอไมแขงแรงมากนก เชน ใบ ดอก ซงท าใหออนนมไดงายจดเปนวธทใชน ายาสกดนอย จงประหยด และเนองจากเปนวธการทไมใชความรอนจงเหมาะสมกบการสกดสารทไมทนตอความรอน แตวธการสกดนมกจะไมสมบรณเนองจากไมคอยมการเคลอนทของน ายาสกด เมอสารในสมนไพรละลายออกมาถงระดบหนงจะเกดความสมดลขององคประกอบภายในสมนไพรและน ายาสกดทใช ท าใหอตราเรวของการสกดชะงกลง จงไมเหมาะทจะใชสกดในกรณทตองการสกดสารส าคญจากสมนไพรจนสมบรณ

เนองจากวธการสกดแบบมาเซอเรชน ใชเวลานาน จงมผดดแปลงใชมกเซอร (Mixer) หรอ โฮโมจไนเซอร (homogenizer) มาชวยท าใหเซลลพชแตกออกกอนท าการสกด เพอยนระยะเวลาการสกด ตอมาพฒนาใชเสยงทมความถสงเกน 20,000 เฮรตซ รวมในการสกดเรยกวธนวา การสกดอลตราซาวน (ultrasound extraction) แตวธหลงนอาจท าใหเกดการเปลยนแปลงของน าไปเปนเพอรออกไซด ตอสารโดยตรง เพราะขณะทใชการสกดอลตราซาวนท าใหเกดชองวางและมอากาศแทรกเขาไปในตวท าละลาย

3.2 เพอรโคเลชน (percolation) เปนวธการสกดสารส าคญจากพชสมนไพรโดยการปลอยใหน ายาสกดไหลผานผงสมนไพรอยางชา ๆ พรอมกบละลายเอาองคประกอบออกจากผงสมนไพรออกมา โดยใชเครองมอทเรยกวา เพอรโคเลเตอร (percolator)

วธการท าเพอรโคเลชน คอ น าผงสมนไพรมาหมกกบตวท าละลายกอน 1 ชวโมง เพอใหพองตวเตมทแลวคอย ๆ บรรจผงยาทละชนลงในเพอรโคเลเตอร ซงมลกษณะเปนคอลมน (column) ปลายเปดทง 2 ดาน โดยดานบนจะกวางกวาดานลาง เพอความสะดวกในการบรรจผงสมนไพร สวนปลายดานลางปดเปดได เพอสามารถควบคมอตราการไหลของสารสกดหรอเพอรโคเลตจากเพอรโคเลเตอรได เตมตวท าละลายหรอน ายาสกด (menstruum) ลงไปใหระดบน ายาสกดไหลผานผงสมนไพรในอตราเรวทพอเหมาะ พรอมกบเตมน ายาสกดใหมลงไปเรอย ๆ อยาใหแหง เกบเพอรโคเลตจนการสกดสมบรณโดยการตรวจสอบเพอรโคเลตสวนสดทาย น าเพอรโคเลตทเกบไดทงหมดรวมกนน าไปกรองวธเพอรโคเลชนจดเปนวธการสกดทดส าหรบการสกดสารจากสมนไพรแบบสมบรณ และไมตองใชความรอน แตวธนมขอเสย คอ เปลองน ายาสกดและใชเวลาในการสกดนาน ดงนนจงมการดดแปลงเพอเพมประสทธภาพในการสกดสารจะใชเพอรโคเลเตอรตอกนหลายตว และใหมการเคลอนทของตวท าละลายเขาหากน

Page 45: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

3.3 การสกดแบบตอเนอง (continuous extraction) เปนวธการสกดสารส าคญจากสมนไพรท านองเดยวกบเพอรโคเลชน แตตองใชความรอนเขาชวยและซอกซเลตเอกซแทรกเตอร (soxhlet extractor) ซงเปนระบบปด โดยใชตวท าละลายซงมจดเดอดต า เมอไดรบความรอนจากฮทตงแมนเทล (heating mantle) หรอหมอองไอน า น ายาสกดในภาชนะระเหยขนไปแลวกลนตวลงมาในทมเบอร (thimble) ซงบรรจสมนไพรไว น ายาสกดจะผานผงสมนไพรซ าแลวซ าอกไปเรอย ๆ จนกระทงองคประกอบในสมนไพรถกสกดออกมา

วธการสกดแบบตอเนองนเหมาะสมส าหรบการสกดองคประกอบททนตอความรอนและใชน ายาสกดนอย ไมสนเปลองแตมขอเสย คอ ไมเหมาะสมทจะใชกบองคประกอบทไมทนตอความรอน และน ายาสกดทใชไมควรเปนของผสม เพราะจะเกดการแยกของตวท าละลายแตละชนดเนองจากมจดเดอดตางกน จะมผลใหสดสวนของน ายาสกดแตกตางไปจากเดม และผลการสกดไมดเทาทคาดเอาไว

3.4 การสกดน ามนหอมระเหย (extraction of volatile oil) มหลายวธเลอกใชตามความเหมาะสมของพชทใช

3.4.1 การกลน (distillation) ในทางอตสาหกรรมม 3 วธ คอ

- การกลนโดยใชน า (water distillation) ใชกบพชแหงซงไมถกท าลายเมอตม เนองจากพชทน ามากลนจะแชอยในน าเดอดทงหมดตลอดระยะเวลาการกลน วธนใชกลนน ามนจากเปลอกไม เชน กลนน ามนสน (turpentine oil) จากยางสน เปนตน

- การกลนโดยใชน าและไอน า (water and steam distillation) ใชไดกบพชสดหรอแหง ซงอาจถกท าลายไดงายเมอถกตม เชน กานพล จะบดใหเปนผง เตมน าใหทวมผานไอน าเขาไป สวนทกลนไดจะมทงน ามนและน า ท าการแยกน ามนออกมา การกลนวธนสะดวกทสดและใชกนอยางกวางขวางในการผลตน ามนในทางการคา

- การกลนโดยใชไอน า (steam distillation) วธนใชกบพชสด เชน สะระแหน โดยน าพชสดมาวางบนตะแกรง แลวผานไอน าเขาไปโดยตรง โดยไมตองมการหมกพชดวยน ากอน จดเปนวธทสะดวก รวดเรว และคาใชจายนอย

Page 46: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

3.4.2 การบบหรอการอด (expression) ใชกบหมอน ามนระเหยทใชวธกลนไมได เนอง จากถกท าลายไดงายเมอถกความรอน เชน น ามนหอมระเหยจากพชตระกลสม ไดแก น ามนผวมะนาว (orange oil)

การบบทนยมคอ วธเอกควเอล (ecuelle method) ซงใชกบน ามนหอมระเหยจากพชตระ กลสม (citrus oil) โดยเอาผลไปบบบนรางทมเขมแหลม ๆ อย เขมตองยาวพอทจะแทงผานผนงชนนอก (epidermis) เพอใหตอมน ามนแตกออก น ามนจะหยดลงไปในรางซงเกบน ามนได

3.4.3 วธเอนฟอยเรนซ (enfleurage) ใชกบน ามนหอมระเหยของกลบดอกไมตาง ๆ เปนวธทเกบแตกอนใชความหอมไดด แตกอนใชในอตสาหกรรมท าน าหอม (perfume) วธนจะใชไขมน (fat) หรอน ามนไมระเหย (fixed oil) ทไมมกลนเปนตวดดซบ [สวนใหญใชไขมนวว (beef tallow) รอยละ 40 กบไขมนหม (lard) รอยละ 60] โดยน าตวดดซบมาแผเปนแผนบาง ๆ แลวเอากลบดอกไมมาวางเรยงบนตวดดซบนาน 24 ชวโมง แลวเปลยนกลบดอกไมใหม ท าเชนนเรอย ๆ จนตวดดซบดดเอาน ามนหอมระเหยมากพอ จงเอาตวดดซบมาสกดเอาน ามนหอมระเหยออกดวยแอลกอฮอล

3.4.4 การสกดโดยใชตวท าละลาย (extraction with solvent) ตวท าละลายทนยมใชมากทสดคอ ปโตเลยมอเทอร (petroleum ether) อาจใชตวท าละลายอน เชน แอซโทน (acetone) เมทานอล แอลกอฮอล เปนตน วธนจะควบคมอณหภมใหอยในชวงไมเกน 50 องศาเซลเซยส ซงเมอเปรยบเทยบกบการกลนทตองใชอณหภมสงท าใหองคประกอบทางเคม เปลยนแปลง และมกลนผดไปไปจากธรรมชาตได จงน าวธการสกดโดยใชตวท าละลายนนมาใชในทางอตสาหกรรม แตตนทนการผลตสงกวาวธการกลน

4. การเลอกวธการสกด การสกดส าคญในพชสมนไพรมหลายวธ ซงวธการสกดทดทสดส าหรบพชสมนไพรแตละชนดมกไดจากการทดลองขนตน โดยทวไปวธการสกดทเหมาะสมขนกบปจจยหลาย ๆ อยาง ไดแก

4.1 ธรรมชาตของพชสมนไพร โดยพจารณาจาก - ลกษณะและโครงสรางของเนอเยอ สมนไพรทมลกษณะออนนม เชน ดอก ใบ อาจสกดดวยวธมาเซอเรชน หากเปนสมนไพรเนอเยอแขงแรงและเหนยว เชน เปลอก ราก เนอไม ควรใชวธเพอรโคเลชนหรอการสกดแบบตอเนอง

Page 47: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

4.2 คณคาของสารสกดและคาใชจายในการสกด หากตองการสกดทไมใชสารส าคญและมคณคาทางการรกษานอย เชน สารทใชแตงกลน รส ของยาเตรยมตาง ๆ กอาจใชวธงาย ๆ ทไมยงยาก นอกจากนควรค านงถงคาใชจายทงหมดเปรยบเทยบกบราคาของสารสกดทเตรยมไดวาคมคากบการลงทนหรอไม

4.3 ความตองการทจะใหไดการสกดทสมบรณ (exhausted extraction) หรอเกอบสมบรณ หากตองการสารสกดเจอจาง การใชวธมาเซอเรชนกเพยงพอแลว แตถาตองการสารสกดเขมขนกควรใชวธเพอรโคเลชนหรอการสกดแบบตอเนอง

5 การท าสารสกดใหเขมขน (concentration)

สารสกดอยางหยาบทไดจะมปรมาตรมากและเจอจาง ท าใหน าไปแยกองคประกอบไดไมสะดวกและไมมประสทธภาพ จงตองน ามาท าใหเขมขนเสยกอนดวยวธตาง ๆ ดงน

5.1 การระเหย (free evaporation) เปนการน าตวท าละลายออกจากน ายาสกด โดยใชความรอนจากหมอองไอน า (water bath) หรอแผนความรอน (hot plate) วธนอาจท าใหองคประ กอบในสารสกดสลายตวไดเนองจากอณหภมสงเกนไป และหากใชสารละลายอนทรย (organic solvent) ในการสกด การระเหยโดยใหความรอนโดยตรง (direct heat) บนแผนความรอน อาจเกดอนตรายไดงาย นอกจากนควรค านงถงอณหภมทจะท าใหเกดการสลายตวของสารส าคญ เมอใชความรอน

5.2 การกลนในภาวะสญญากาศ (distillstion in vacuo) จดเปนวธทนยมมากทสดเปน การระเหยเอาตวท าละลายออกจากน ายาสกดโดยการกลนทอณหภมต า พรอมทงลดความดนลงใหเกอบเปนสญญากาศโดยใชปมสญญากาศ (vacuum pump) เครองมอนเรยกวา โรตารอวาโพเรเตอร (rotary evaporator) ซงประกอบดวยสวนตาง ๆ 3 สวน คอ ภาชนะบรรจสารสกดอยางหยาบทกลน (distillation flask) สวนคอนเดนเซอรหรอสวนควบแนนไอสารละลาย (condenser) และภาชนะรองรบสารละลายหลงการกลน (receiving flask) โดยสารสกดอยางหยาบซงบรรจในภาชนะจะแชอยในหมอองไอน าทควบคมอณหภมไดและจะหมน (rotary) ตลอดเวลาทท างาน เพอใหมการกระจายความรอนอยางทวถงและสม าเสมอ ภาชนะบรรจสารสกดอยางหยาบนจะตอเขากบสวนควบแนน ซงมระบบท าความเยนหลออยตลอดเวลา ปลายของสวนควบแนนจะมภาชนะรอง รบโดยทงระบบจะตอเขากบระบบสญญากาศ สารละลายทระเหยออกจากภาชนะบรรจจะควบแนน

Page 48: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ทบรเวณคอนเดนเซอรและหยดลงมาในภาชนะรองรบสารละลายหลงการกลนซงสารละลายดงกลาวสามารถน าไปท าใหบรสทธและน ากลบมาใชใหมได

5.3 การท าใหแหง (drying) เปนการระเหยเอาตวท าละลายออกจากน ายาสกดจนแหง ไดสารสกดออกมาในสภาพของแขงหรอกงของแขง มหลายวธ เชน การใชความเยน (lyophilizer หรอ freeze dryer) หรอการใชความรอน (spray dryer) ฯลฯ

5.4 อลตราฟลเทรชน (ultarfilitration) สกดดวยน าใหเขมขนโดยใชแผนเมมเบรน ใชกบ สารทมน าหนกโมเลกล (Molecular weight) สงกวา 5,000 (รตนา, 2547)

Page 49: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

อปกรณ

สารสกดพชทใช สารสกดเอทานอลของเปลอกผลทบทมทระดบความเขมขน 20,000 40,000 60,000 80,000 และ 100,000 ppm

เชอราทใชทดสอบ เชอรา Colletotrichum gloeosporioides จากผลพรก

อาหารเลยงเชอ อาหารสตร PDA (Potato dextrose agar)

สารเคม mancozeb (80 wp) ท 1,600 ppm

อปกรณทใชในหองปฏบตการ จานเลยงเชอ หลอดทดลอง บกเกอร เขมเขยเชอ หมอนงความดน Cork borer ขนาด 3 มลลเมตร ตะเกยง สไลด (Depresion slide)

อปกรณตรวจนบสปอร (Heamacytometer) น ากลนนงฆาเชอ

อปกรณเสรม

กลองถายภาพ กลองจลทรรศน แอลกอฮอล 95, 70 % กลองชน ตะแกรงวาง Slide ในกลองชน

Page 50: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

วธการทดลอง

1. การเตรยมตวอยางพช

น าสวนเปลอกผลทบทมมาลางในน าสะอาดและน ามาผงใหแหงสนท แลวน าเขาตอบ ใชอณหภม 50-60 องศาเซลเซยส นาน 24 ชวโมง น าเปลอกผลมาบดเปนชนเลก ๆ จากนนจงน ามาสกดสาร

2. การสกดสารจากพช

น าชนสวนเปลอกผลทบทมทบดแลวประมาณ 400 กรม บรรจลงในภาชนะขวดแกวขนาดบรรจ 3,000 มลลลตร เตมเอทลแอลกอฮอลล 95 เปอรเซนต ปรมาตร 2,000 มลลลตร ใหทวมตวอยาง พช ปดฝาใหสนทแชทงไว 15-20 วน จากนนกรองแยกเอาชนสวนพชออก น าสวนของสารสกดมาระเหยแหง โดยใชเครอง Rotary evaporatory อณหภม 40 องศาเซลเซยส ท าการระเหยจนกระทงไดสารสกดทมลกษณะขน เศษพชทกรองออกแลวท าไปแชแอลกอฮอลลตอดวยวธเดมอกครง แลวท าการระเหยแหงดวยวธการเหมอนกน รวบรวมสารทไดไวในภาชนะเดยวกน ชงน าหนกทไดแลวเกบไวทอณหภม 4 องศาเซลเซยส เพอน าไปใชตลอดการทดลอง

3. การเตรยมสารสกดจากพชในระดบความเขมขนตางๆ

ในการทดลองใชความเขมขนของสารทระดบความเขมขนคอ 20,000 40,000 60,000 80,000 และ 100,000 ppm โดยท า stock solution เปน 10 เทาของความเขมขนทตองการทดสอบคอ 200,000 400,000 600,000 800,000 และ 1,000,000 โดยน ามาปรบความเขมขนรวมกบน าทผานการนงฆาเชอแลวเพอใหไดความเขมขนทตองการเมอผสมลงในอาหาร PDA

4. การผสมการสกดจากพช

เมอได stock solution ทมความเขมขนเปน 10 เทาของความเขมขนทตองการแลว เตรยมอาหาร PDA แลวใสในหลอดทดลองหลอดละ 9 มลลลตร น าไปนงฆาเชอทความดน 15 ปอนดตอตารางนว อณหภม 121 องศาเซลเซยส 15 นาท ทงไวจนอณหภมลดลงเหลอ 45-50 องศาเซลเซยส ดดสารละลายแตละความเขมขนปรมาตร 1 มลลลตร ผสมลงในอาหาร PDA ทเตรยมไวผสมใหเขากนโดยใชเครอง vortex mixture แลวเทใสจานเลยงเชอท า 5 ซ า ในแตละความเขมขนททดลองกจะไดอาหารสารสกดจากพชส าหรบทดลองจ านวน 10 มลลลตร สวนการเลยงเชอทใชเปนตวเปรยบเทยบ

Page 51: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

จะใชน ากลนทนงฆาเชอปรมาตร 1 มลลลตร ผสมลงในอาหาร PDA 9 มลลลตร แทนสารสกดจากพช หลงจากเทอาหารแลววางทงไว 1 วน เพอใหผวหนาอาหารแหง แลวจงยายเชอราทตองการทด สอบลงไป

5. การทดสอบประสทธภาพของสารสกด

เชอรา C. gloeosporioides ทดสอบโดยใชวธ Poisoned food technique บนอาหาร PDA ในจานเลยงเชอ เลยงไวทอณหภมประมาณ 28-32 องศาเซลเซยส เปนเวลา 5 ถง 7 วน จากนนใช Cork borer ทมขนาดเสนผาศนยกลาง 3 มลลเมตร มาลนไฟฆาเชอ ทงไวใหเยนแลวเจาะเสนใยทบรเวณโคโลน เพอใหไดเสนใยใหมทก าลงเจรญ จากนนใชเขมเขยทผานการลนไฟฆาเชอแลว ยายชนวนไปวางบนอาหาร PDA ทผสมสารสกดจากพชทความเขมขน 0 20,000 40,000 60,000 80,000 และ 100,000 ppm วางชนวนลงบนจดศนยกลางของจานเลยงเชอ โดยคว าเอาดานทมเสนใยของเชอราใหสมผสกบผวหนาอาหาร แลวน าไปบมไวทอณหภม 28-32 องศาเซลเซยส นาน 7 วน บนทกผลการทดลองทระยะ 3 วน 5 วน และเมอครบ 7 วน

6. การตรวจสอบและบนทกผลการทดลอง

6.1 การยบยงการเจรญของโคโลนของเชอรา Colletotrichum gloeosporides

การตรวจผลการทดลองโดยวดการเจรญเตบโตของเสนใย เชอราทก าลงเจรญอยบนผวหนาอาหารผสมสารสกดจากพชทระดบความเขมขนตาง ๆ โดยการวดเสนผาศนยกลางของโคโลน ทเจรญในอาหาร โคโลนของเชอราเปรยบเทยบการเจรญของเชอราในชดควบคม จนกระทงครบ 7 วน จงหยดการบนทกผล จากนนน าคาทไดมาค านวณหาเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโต จากสตรดงตอไปน

เปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอ = [(A-B) / A] x 100

A = คาเฉลยของเสนผาศนยกลางของโคโลนเชอราบนจานเลยงเชอเปรยบเทยบ B = คาเฉลยของเสนผาศนยกลางของโคโลนเชอราบนอาหารทผสมสารสกดจากพช

วเคราะหความแปรปรวนของขอมลโดยวธ Duncan' New Multiple Range Test (DMRT) ทระดบความเชอมน 95% จากนนเปลยนคาเปอรเซนตการยบยงเปนคา Probit โดยใชการเปรยบเทยบกบตาราง Probit แลวน าคา Probit ทไดมาสรางกราฟ โดยใชแกน Y แทนคาเปอรเซนตการยบยงของคา Probit และแกน X แทนคา log ของความเขมขนทมหนวยเปน ppm (เมษ,2546) กราฟทไดคอ

Page 52: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

dosage response curve (DR. curve) ของสารสกดพชทใชทดลองหาคาระดบการยบยง 50% (Effective Dose : ED50) โดยลากเสนตรงจากจดทคา Probit เทากบ 5 ขนานกบแกน X

6.2 ทดสอบการยงยงการงอกของสปอรดวยวธ spore germination test

เลยงเชอรา C. gloeosporioides บนอาหาร PDA เปนเวลา 14 วน เพอใชสวนของสปอรมาท าสปอรแขวนลอย โดยตรวจนบดวย Haemacytometer ทความเขมขน 105 สปอรตอมลลเมตร หยดสปอรแขวนลอยลงบนสไลดหลม ทผานการฆาเชอทอณหภม 121 องศาเซลเซยส ภายใตความดน 15 ปอนดตอตารางนว เปนเวลา 15 นาท จากนนจงหยดสารสกดทความเขมขน 20,000 40,000 60,000 80,000 และ 100,000 ppm บนสไลดหลม (depression slide) ปรมาณ 0.02 มลลเมตร เทากนลงไป ผสมใหเขากน น าไปบมเชอในกลองพลาสตกชน หลงจากนน 24 ชวโมง หยดปฏกรยาดวย lactophenol น าไปตรวจภายใตกลองจลทรรศน สงเกตการงอกของสปอร และ germ tube โดยนบ 5 spore ตอสไลด 10 ซ า ในกรรมวธควบคมใชน ากลนนงฆาเชอแทนการสกด เปรยบเทยบกบสารเคม แมนโคเซบ (80 wp) ท 1,600 ppm

6.3 ทดสอบการยบยงการเจรญเปนเสนใย

หยดสปอรแขวนลอยของเชอรา C. gloeosporioides บนสไลดหลม บมเชอในสภาพเดยวกนกบการทดสอบความสามารถของสารสกดในการยบยงการงอกของสปอร หลงจากนน 8ชวโมง น าไปตรวจภายใตกลองจลทรรศน สงเกตการงอกเปน germ tube แลวจงหยดสารสกดลงไป บมเชอตออก 24 ชวโมง จากนนน ามาหยดปฏกรยาดวย lactophenal น าไปตรวจภายใตกลองจลทรรศน สงเกตการเจรญของเสนใยโดยนบ 5 spore ตอสไลด 10 ซ า ในกรรมวธควบคมใชน านงฆาเชอแทนสารสกด เปรยบเทยบกบสารเคมแมนโคเซบ (80 wp) ท 1,600 ppm

Page 53: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ผลการทดลอง

การทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากเปลอกผลทบทม ทสกดดวยแอลกอฮอล 95 เปอรเซนต ในการยบยงการเจรญของโคโลนของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ทอายการทดลอง 3 วน 5 วน และ 7 วน ท าการตรวจสอบผลการทดลอง โดยการวดการเจรญของเสนใยเชอรา C. gloeosporioides ทเจรญบนอาหาร PDA ผสมสารสกดจากเปลอกผลทบทมโดยการวดเสนผาศนยกลางของโคโลนทเจรญในแนวราบ เปรยบเทยบกบเชอในจานอาหารควบคม (ตารางท 1 และ ภาพท 1 2 และ 3)

ตารางท 1 เปรยบเทยบการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides บนอาหาร PDA ผสมสารสกดจากเปลอกผลทบทมทความเขมขนตาง ๆ

คาเฉลยเสนผาศนยกลางโคโลน (ซม.)1

3วน 5วน 7วน

0 ppm 4.25 e 7.25 e 9 e

20000 ppm 3.5 d 5.71 d 7.03 d

40000 ppm 2.7 c 4.21 c 5.34 cd

60000 ppm 2.37 bc 3.62 abc 4.82 abc

80000 ppm 1.95 ab 2.88 ab 3.64 ab

100000 ppm 1.77 a 2.54 a 3.25 a

mencozeb 1.8 a 3.81 bc 6.02 cd

F-test ** ** **

C.V. (%) 1.9 3.08 3.62

1 = คาเฉลยจากตวอยางทดลอง 5 ซ า

Treatment

Page 54: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพท 1 การเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides บนอาหาร PDAทผสม สารสกดจากเปลอกผลทบทมเปนเวลา 3 วน A: 20,000 ppm. B: 40,000 ppm. C: 60,000 ppm. D: 80,000 ppm. E: 100,000 ppm. F: mancozeb 1,600 ppm.

control

A

B

D E

A C

F

Page 55: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพท 2 การเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides บนอาหาร PDA ทผสม สารสกดจากเปลอกผลทบทมเปนเวลา 5 วน A: 20,000 ppm. B: 40,000 ppm. C: 60,000 ppm. D: 80,000 ppm. E: 100,000 ppm. F: mancozeb 1,600 ppm.

control

A B C

D E F

Page 56: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพท 3 การเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides บนอาหาร PDA ทผสม สารสกดจากเปลอกผลทบทมเปนเวลา 7 วน A: 20,000 ppm. B: 40,000 ppm. C: 60,000 ppm. D: 80,000 ppm. E: 100,000 ppm. F: mancozeb 1,600 ppm.

control

B C A

D E F

control

Page 57: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

หาคาเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา พบวาทอาย 5 วน สารสกดจากเปลอกผลทบทมทระดบความเขมขน 100,000 ppm สามารถยบยงการเจรญของเชอรา C. gloeosporioides ไดดทสดคอ 64.97% และรองลงมาคอ 80,000 ppm สามารถยบยงได 60.28% เมอเปรยบเทยบกบ mancozeb พบวาทอาย 3 วน มความสามารถในการยบยงการเจรญของโคโลนของเชอรา C. gloeo sporioides ไดดทสด 57.65% รองลงมาคอวนท 5 และ 7 มเปอรเซนตการยบยงเทากบ 47.45 และ 33.11% ตามล าดบ (ตารางท 2 และ ภาพท 4) ตารางท 2 เปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides

บนอาหาร PDA ผสมสาร สกดจากเปลอกผลทบทมทความเขมขนตางๆ

%การยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา C.gloeosporioides 1

3วน 5วน 7วน

0 ppm 0 e 0 e 0 e

20000 ppm 17.47 d 21.24 d 21.89 d

40000 ppm 36.48 c 41.85 c 40.67 abc

60000 ppm 44.25 bc 50.12 abc 46.44 abc

80000 ppm 54.05 ab 60.24 ab 59.56 ab

100000 ppm 58.34 a 65 a 63.89 a

mencozeb 57.65 a 47.45 bc 33.11 bc

F-test ** ** **

C.V. (%) 3.03 4.42 5.92 1 = คาเฉลยจากตวอยางทดลอง 5 ซ า

Treatment

Page 58: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

0

10

20

30

40

50

60

70

%กา

รยบย

3 5 7จ านวนวน

0 ppm

20000 ppm40000 ppm

60000 ppm

80000 ppm100000 ppm

mencozeb

ภาพท 4 คาเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ทอายการทดลอง 3 วน 5 วน และ 7 วน

Page 59: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

จากนนเปลยนคาเปอรเซนตการยบยงเปนคา Probit น าคา probit ของสารสกดมาเขยนกราฟกบคา log ของความเขมขน พบวาทระยะเวลา 3 วน คา ED 50 เทากบ 69,180 ในขณะทอายการทดลอง 5 วน คา ED 50 เทากบ 54,950 และทอายการทดลอง 7 วน คา ED 50 เทากบ 58,880 ดงนนสารสกดจากเปลอกผลทบทมทอายการทดลอง 5 วน จะมประสทธภาพดทสด ในการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา C. gloeosporioides จะเหนวาคา ED 50 ของวนท 5 มคาต าทสด รองลงมาคอวนท 7 และวนท 5 ตามล าดบ (ภาพท 5)

ภาพท 5 D.R. curve ของสารสกดจากเปลอกผลทบทมจากการทดสอบประสทธภาพ ของสาร

สกดตอการเจรญของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides

3

4

5

6

7

4.3 4.6 4.7 4.9 5 log of concentration (ppm)

Dose

3 7

5

Probit of inhibition

Page 60: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ทดสอบการยงยงการงอกของสปอรดวยวธ spore germination test จากการทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากเปลอกผลทบทมในการยบยงการงอกของสปอรของเชอรา C. gloeosporioides โดยหยด spore suspension เชอรา C. gloeosporioides และสารสกดจากเปลอกผลทบทม ปรมาตร 0.02 มลลลตรเทากน ลงบนแผนสไลดพรอมกน หลงจากนน 24 ชวโมง สงเกตการงอกของสปอรเชอรา C. gloeosporioides พบวาสารสกดทระดบความเขมขน 100000 ppm สามารถยบยงการงอกชองสปอรของเชอรา C. gloeosporioides ไดดทสดโดยการวด ความยาวของ germ tube พบวาสารสกดทความเขมขน 20,000 40,000 60,000 80,000 และ100,000 ppm วดความยาวของ germ tube ได 286.2 216.2 115.6 109.8 และ 83.4 ตามล าดบ (ตารางท 3 และ ภาพท 6และ 7)

Page 61: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ตารางท 3 ประสทธภาพของสารสกดในการยบยงการงอกและการพฒนาเปน germ tubeของสปอรเชอรา Colletotrichum gloeosporioides

Treatment ลกษณะของ germ tube

(ppm) %1 germ tube (µm) 2

Control 100 c 3 355.5 e 4 Germ tube เจรญปกต

20000 84 bc 286.2 d Germ tube เจรญชากวาเลกนอย

40000 81 b 216.2 c บรเวณปลาย Germ tube โปงพอง เสนใยแตกแขนง

60000 81 b 115.6 b บรเวณปลาย Germ tube โปงพอง เสนใยแตกแขนง

80000 79 b 109.8 b บรเวณปลาย Germ tube มการแตก

100000 73 b 83.4 b บรเวณปลาย Germ tube โปงพอง

mancozeb 0 a 0 a -

1 เปอรเซนตยบยงการงอกของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides โดยใชสตร

เปอรเซนตการยบยง = [(A-B) / A] x 100 A คอคาเฉลยของจ านวนสปอรเชอราทงอกบนอาหารเลยงเชอราชดเปรยบเทยบ

B คอคาเฉลยของจ านวนสปอรเชอราทงอกบนอาหารเลยงเชอราผสมสารสกด

2 คาเฉลยความยาว Germ tube ทพฒนาเปนเสนใย รวมทงแขนงของเสนใยทงหมดทงอกออกมาจากสปอรท 24 ชวโมง หลงจากหยดสารสกดจากผลทบทม 3 คาเฉลยเปอรเซนตการงอกของสปอรเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ท 24 ชวโมง หลงจากท าการหยดสารสกดจากผลทบทม 4 คาเฉลยทตามหลงดวยตวอกษรทเหมอนกนในแนวตง ไมมความแตกตางกนอยางมนยส าคญทางสถตตามวธ Ducan’s multiple range tests

การงอก ความยาว germ tube

Page 62: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพท 6 กลไกการยบยงการงอกและเจรญเปน germ tube ของเชอรา C. gloeosporioides โดยหยดสปอรแขวนลอยของเชอรา C. gloeosporioides และเซลลแขวนลอยของ สารสกดจากเปลอกผลทบทมลงไปบน depression slide พรอมกน

a; เสนใยเจรญเปนปกต b; เสนใยมขนาดใหญขน และเกดการโปงพอง c; สปอรมขนาดใหญขน germ tube สน d; สปอรงอกเลกนอย e; เสนใยขนาดใหญขน และคดงอ f; เสนใยขนาดใหญขน มขอปลองเพมมากขน g; สปอรไมงอก

control 20000 ppm

40000 ppm 60000 ppm

a

b

a

f e

Page 63: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพท 7 กลไกการยบยงการงอกและเจรญเปน germ tube ของเชอรา C. gloeosporioides โดยหยดสปอรแขวนลอยของเชอรา C. gloeosporioides และเซลลแขวนลอยของ สารสกดจากเปลอกผลทบทมลงไปบน depression slide พรอมกน

a; เสนใยเจรญเปนปกต b; เสนใยมขนาดใหญขน และเกดการโปงพอง c; สปอรมขนาดใหญขน germ tube สน d; สปอรงอกเลกนอย e; เสนใยขนาดใหญขน และคดงอ f; เสนใยขนาดใหญขน มขอปลองเพมมากขน g; สปอรไมงอก

control 80000 ppm

Mancozeb 100000 ppm

a

d g

c

Page 64: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากเปลอกผลทบทมในการยบยงการเจรญเปนเสนใย โดยหยดสปอรแขวนลอยของเชอรา C. gloeosporioides ปรมาตร 0.02 มลลลตร ลงบนแผนสไลดทงไว 8 ชวโมง จงหยดสารสกดจากเปลอกผลทบทมลงไป หลงจากนน 24 ชวโมง จงน ามาตรวจดภายใตกลองจลทรรศน สงเกตการเจรญของเสนใย พบวาทความเขมขนของสารสกดจากเปลอกผลทบทมทระดบ 100,000 ppm สามารถยบยงการเจรญของเสนใยไดดทสด มความยาวของเสนใย 42 ไมโครเมตร รองลงมาคอความเขมขน 80,000 และ 60,000 ppm มความยาว 60.6 และ 118 ไมโครเมตร (ภาพท 8) โดยท าใหเกดอาการผดปกตกบสปอรเชอรา เชน มการเจรญเตบของเสนใยลดลง เสนใยขนาดใหญขนและเกดการโปงพอง มการแตกแขนง ท าใหมขอปลองเพมขน ความยาวของ germ tube มขนาดสนลง (ภาพท 9)

0

50

100

150

200

250

300

350

400

450

500

contro

l

2000

0ppm

4000

0ppm

6000

0ppm

8000

0ppm

1000

00pp

m

man

coze

b

ภาพท 8 ประสทธภาพของสารสกดในการยบยงการเจรญเปนเสนใยของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides

ความยาว getm tube (ไมโครเมตร)

Treatment

Page 65: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพท 9 ตวอยางประสทธภาพของสารสกดจากเปลอกผลทบทมในการยบยงการเจรญของ เสนใยเชอรา C. gloeosporioides

control

20000 ppm

Page 66: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

วจารณผลการทดลอง

การศกษาครงนเปนการศกษาเพอทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากเปลอกผลทบทม ในการยบยงการเจรญเตบโต การยบยงการงอกของสปอร และการยบยงการเจรญเปนเสนใยของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนสของพรก เมอท าการทดสอบประสทธภาพในการยบยงการเจรญของเชอรา ดวยวธ Poisoned Food Technique พบวาทระยะ เวลาในการทดลอบ 5 วน สารสกดจากเปลอกผลทบทมมประสทธภาพการยบยงเชอไดดทสด ทระ ดบความเขมขน 60,000 ppm ขนไป มเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอราไดสงกวาการ ใชสารเคม mancozeb ดงจะเหนไดจากคา ED50 ของสารสกดจากเปลอกผลทบทมทระยะเวลาในการทดสอบ5 วน มคาต าสด คอ 54,950 ppm และมความผนแปรของขอมลต า หมายถงคา C.V.จากการค านวณดวยวธ Duncan' New Multiple Range Test (DMRT) มคาไมเกน 20 คอ มคาเพยง 4.42 เปอรเซนตจงเปนขอมลทนาเชอถอ นอกจากนยงพบวาผลการทดลองสวนใหญเมอใชสารสกดจากพชทมระดบความเขมขนมากขน จะมประสทธภาพในการยบยงการเจรญของเชอมากขนดวย การศกษากลไกการยบยงการงอกของสปอร พบวาทความเขมขน 20,000 ppm ขนไปสามารถยบยงการงอกของสปอรเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ได โดยทความเขมขน 100,000 ppm ใหผลดทสดทดสอบประสทธภาพในการยบยงการเจรญเปนเสนใยทความเขมขน 60,000 80,000 และ 100,000 ppm พบวาสามารถยบยงการเจรญเปนเสนใยไดไมแตกตางจากสารเคม mancozeb โดยทความเขมขน 100,000 ppm มประสทธภาพสงสด ผลการศกษาการยบยงการงอกของสปอร และการยบยงการเจรญเปนเสนใย พบวาสารสกดจากเปลอกผลทบทมท าใหการพฒนาเปน germ tube และเสนใยมอาการผดปกต เชน สปอรงอกผดปกต สปอรมขนาดใหญขน germ tube สนลง เสนใยมขนาดใหญขนมการโปงพองเปนกระเปาะ เสนใยคดงอ แตกแขนง มขอปลองเพมมากขนแสดงใหเหนวา สารสกดจากเปลอกผลทบทม มศกยภาพในการน ามาใชควบคมโรคแอนแทรคโนสของพรก มความปลอดภยตอผบรโภค โดยการทดลองครงน เพยงเพอใหทราบขอมลเบองตนในระดบหองปฏบตการ เพอเปนแนวทางในการศกษาเพมเตมถงประสทธภาพในการควบคมโรคในสภาพพนทจรง รวมทงตองท าการศกษาเพมเตมถงสารออกฤทธทมผลในการควบคมโรคโดยตรง รวมทงปจจยตาง ๆ ทมสวนเกยวของ

Page 67: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สรป

จากการน าสารสกดเอทานอลจากเปลอกผลทบทม มาผสมในอาหาร PDA ทระดบความเขมขน 20,000 40,000 60,000 80,000 และ 100,000 ppm แลวทดสอบการเจรญของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ปรากฏวา ทระยะเวลาในการทดลอบ 5 วน มเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตของเชอราไดดทสดคอ 21.24 41.85 50.12 60.24 และ 65 เปอรเซนต ตามล าดบโดยทระยะเวลาในการทดลอบ 5 วน ใหคา ED50 ต าสด เทากบ 54,950 ppm การยบยง การงอกของสปอรเชอรา C. gloeosporioides พบเปอรเซนตการงอกของสปอร 84 81 81 79 และ 73 เปอรเซนตตามล าดบ และจากการทดสอบการยบยงการเจรญเปนเสนใยของเชอรา C. gloeo sporioides ทความเขมขน 60,000 80,000 และ 100,000 ppm พบความยาวของเสนใย 118 60.6 และ 42 ไมโครเมตร ตามล าดบ โดยทสารสกดจากเปลอกผลทบทมทกระดบความเขมขนพบการงอก ของสปอรเชอราแตสปอรและเสนใยของเชอรามความผดปกตเมอเปรยบเทยบกบกรรมวธควบคม

Page 68: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

เอกสารอางอง กมลสร เพชรบรณ. 2542. การศกษาเปรยบเทยบเชอรา Colletotrichum gloeosporioides จาก

ผลไมชนดตางๆ. ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม. จรภา เปยมมสมบรณ. 2547. ผลของสารสกดจากทบทมตอการเจรญของเชอแบคทเรย Xantho

monas axonopodis pv. citri. มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม. 3-7 น. จรสสา มกลนหอม. 2546. การคดเลอกและการใชจลนทรยทแยกไดจากผวพชในการควบคมเชอรา

Colletotrichum spp. สาเหตโรคแอนแทรคโนสกของพรก. วทยานพนธปรญญาโท, มหา วทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

ชวาลา บรณศร. 2531. โรคพชทเกดจากเชอรา. คณะเทคโนโลยทางการเกษตร, สถาบนเทคโนโลย

พระจอมเกลาเจาคณทหารลาดกระบง. 208 น. ชยวฒน ประสพสข. 2526. การเปรยบเทยบวธการเพมเปอรเซนตความงอกของเมลดทบทม .

ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. ชยโย ชยชาญทพยทธและคณะ. 2525. สมนไพรอนดบท 02: การรวบรวมขอมลเบองตนส าหรบ

งานวจยของโครงการศกษาวจยสมนไพร. สารมวลชน. 53(2) : 256 ด ารง พรหมศร และ กตตพงษ อองสวรรณ. 2519. ผลของ colchicine ทมตอตนกลาทบทม.

ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. ธารทพย ภาสบตร. 2540. ผลของสารสกดจากพชบางชนดทมผลตอเชอราสาเหตโรคแอนแทรค

โนสของมะมวง. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. ธรพล วชนโรจนจรล. 2548. ศกยภาพของสารสกดจากเจตมลเพลงแดงในการควบคมโรคแอน

แทรคโนสพรก. มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม. 9 น.

Page 69: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

นนทวน บณยะประภศร. 2539. สมนไพร---ไมพนบาน. ส านกงานขอมลสมนไพร คณะเภสชศาสตร มหาวทยาลยมหดล, กรงเทพฯ.

นกร บรรดษฐ. 2528. การเจรญเตบโตของผลทบทมพนธบานหลวง. ปญหาพเศษปรญญาโท,

มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. นจสร เรองรงส และ พะยอม ตนตวฒน. 2534. พชสมนไพร. โอเดยน สโตร, กรงเทพฯ. 243 น. นพนธ วสารทานนท. 2531. โรคไมผล. มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. นโลบล สจสนธ. 2544. การควบคมโรคแอนแทรคโนสของพรกสาเหตจากเชอรา Colletotrichum

gloeosporioides โดยเชอจลนทรยทแยกไดจากใบและผลพรก. ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม.

บญญวด จระวฒ. 2540. การท าใหเกดโรคของเชอรา Colletotrichum capsici บนผลพรกและ

ถายทอดเชอจากผลทเปนโรคสวนเมลดและตนกลา. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลย เกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

พรชนก จนดาวงษ, วชย กอประดษฐสกล, ชยณรงค รตนกรฑากล, ประสาท กตตคปต และ จงรกษ

แกวประสทธ. การคดเลอกวธการทดสอบสารสกดในการควบคมเชอรา Colletotrichum gloeosporioides สาเหตโรคแอนแทรคโนสหลงการเกบเกยวของมะมวง. [Online]. Avalible : http://www.hunsa.com [2007,September 17].

ภทรลดา เปยมจต. 2535. การทดสอบผลของสารเคมปองกนก าจดโรคพช และสารสกดจากพช

บางชนดทมตอการเจรญของเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ( Penz. ) Sacc. สาเหตโรคแอนแทรคโนสของมะมวง. ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

Page 70: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภทรธ นจรมย. 2543. การทดสอบความรนแรงของเชอ Colletotrichum capsici และเชอรา Colletotrichum gloeosporioides ทเปนสาเหตโรคแอนแทรคโนสในพรก. ปญหาพเศษ ปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม.

มโนวช เรองดษฐ และ จนทรตน จนดารศม. 2547. พรกใครวาดแตเผด. วารสารกรมวทยาศาสตร

บรการ. 52 (164) : 33-39 น. เมษ พณชยกล. 2546. ผลของสารสกดจากพชบางชนดทมผลตอเชอราสาเหตโรคแอนแทรคโนส

ของพรก 2 ชนด. ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม. รตตา อเนกธนโชต. 2542. ปฏกรยาทมตอกนระหวางเชอรา Colletotrichum capsici ซงเปน

สาเหตโรคแอนแทรคโนสกบพรก. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

รตนา อนทรานปกรณ. 2547. การตรวจสอบและการสกดแยกสารส าคญจากสมนไพร. ส านกพมพ

แหงจฬาลงกรณมหาวทยาลย, 82-90 น. ลกษณา วรรณภร และ อนงค จนทรศรกล. 2514. การศกษาเรองโรคพรกเนา. รายงานประจ าป

2520, กองพชสวน กรมกสกรรม, กรงเทพฯ. 81-84 น. วฒนา สวรรยาปต. 2530. มะมวง. ศนยสงเสรมและฝกอบรมการเกษตรแหงชาต ส านกงานสง

เสรมและฝกอบรม มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. วนด กฤษณพนธ. 2537. สมนไพรนาร. จฬาลงกรณมหาวทยาลย, กรงเทพฯ. 257 น. วาสน ลละตานนท. 2546. ประสทธภาพสารสกดหยาบจากพชสมนไพรในการยบยงการเจรญ

ของเชอ Erwinia cartovora subsp. cartovora . ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลย เกษตรศาสตร, นครปฐม. 6-10 น.

Page 71: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ศศธร วฒวณชย. 2546. การจดการดนโดยใชน าสกดหยาบและกากของพชเพอลดปรมาณเชอ Erwinia carotovora subsp. carotovora สาเหตโรคเนาเละของผกกาดเขยวปล. วทยาสารก าแพงแสน. 1(1) : 11.

. ศศธร วฒวณชย. 2547. ประสทธภาพของสารสกดหยาบจากพชสมนไพรในการยบยงการเจรญ

ของ Erwinia carotovora subsp. carotovora เชอสาเหตโรคเนาเละของผก. วทยาสาร ก าแพงแสน. 2(2) : 73.

ศรวรรณ เจรญพานช. 2533. การทดสอบผลของสารสกดจากพชทมตอการเจรญของเชอรา

สาเหตของโรคพช. ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม. ศรวรรณ พรมเพยงชาง. 2548. การศกษาผลของสารสกดหยาบจากใบหปลาชอน ใบฝรงและเปลอก

ผลทบทม ตอการพฒนาอาการของโรคแคงเกอรของมะกรดทเกดจากเชอ Xanthomonas axonopodis pv. Citri. ปญหาพเศษปรญญาตร, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม.

ศภลกษณ ฮอกะวด. 2536. โรคผกตระกลพรกและมะเขอเทศ. มหาวทยาลยขอนแกน, ขอนแกน.

249 น. สรวรรณ สมทธอาภร. 2547. การควบคมโรคแอนแทรคโนสและโรคขวผลเนาในมะมวงพนธน าดอก

ไมโดยการใชสารสกดจากพช. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

สชาต วจตรานนท และ ขจรศกด ภวกล. 2521. การทดสอบประสทธภาพของยาเคมบางชนด

ตอโรคแอนแทรคโนสของมะมวง. รายงานทดลองและวจยกองวจยโรคพช, กรมวชาการเกษตรประจ าป 2526.

สพจน ศภนนธร. 2548. การสกดและการทดสอบประสทธภาพของสารสกดจากพชสมนไพรใน

การยบยงการเจรญของเชอ Ralstonia solanacearum สาเหตโรคเหยวของมะเขอเทศ. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, นครปฐม.

Page 72: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

สรนทร นลส าราญจต. 2528. การศกษาเปรยบเทยบลกษณะสณฐานวทยาและคณภาพผลทบ

ทมพนธบานบางหลวงและพนธทอง. ปญหาพเศษปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

สมเกยรต วชรปราการกล. 2535. การใชสารสกดจากเปลอกผลไมบางชนดในการควบคมโรค

แอนแทรคโนสของมะมวง. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยมหดล, กรงเทพฯ. สมชาย กลาหาญ. 2527. การศกษาวธการตดตาและตอกงทบทม. ปญหาพเศษปรญญาโท,

มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. สมศร จวสกล. 2521. เซรมวทยาการถายทอดทางเมลดของโรคแอนแทรคโนสของพรกและประสทธ

ภาพของสารเคมควบคมโรคบนใบ. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ.

อนงค จนทรศรกล และ ลกษณา วรรณภร. 2515. โรคพรกและการปองกนก าจด. 45(2) : 241-247. อาภา หวงเกยรต. 2538. ผลของสารสกดจากพชสมนไพรตอเชอราสาเหตโรคพช. วทยานพนธ

ปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. อไรวรรณ ตวงสน. 2544. การศกษาประสทธภาพของสารสกดจากพชในการควบคมโรคเหยวจาก

แบคทเรยของมะเขอเทศ. วทยานพนธปรญญาโท, มหาวทยาลยเกษตรศาสตร, กรงเทพฯ. Adikaram, N. K. B., A. E. Brown and T. R. Swinburn. 1982. Phytoalexin involvement in

the latent infection of Colletotrichum annuum L. fruit caused by Glomerella cingulata (Stonem.) Physiol. Plant Pathol. 21 : 161-170.

Backer, C. A. 1951. Punicaceae. Flora Malasiana. 4 : 226-227.

Page 73: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

Binyami. N. and Schiffmann - Nadel M. 1972. Latent infection in avdcado fruit due to Colletotrichum gloeosporioides. Phytopathology. 62(2) : 592-594.

Fouad, M. M., M. R. Barakat and S. A. EL - Yazal. 1979. Comparative studies on fruit

growth and development of de la Grenouilere and Manfaloti cultivars under Giza conditions. Hort. Abst. 51 : 180.

Higgins, B. B. 1926. Anthracnose of pepper (Capsicum annuum L.). Phytopathol. 16 :

333-343. Juangbhanich, Pairoj and C. Chana. 1975. Efficacy of some fungicides against seed

bome infection of Colletotrichum anthracnose and Ripe rot of peper (Copsicum frutescens). The Kasetsart Journal. 9(1) : 115-119

Kim, B. S. 1986. Resistance to Phytophthora root in introduced peppers (Copsicum

spp.). Hort. Sci. 27(1) : 11-14. Kim, B. S. H. K. Park. And W. S. Lee. 1990. Resistance to anthracnose (Colletotrichum

spp.). in pepper, pp. 184-188. In S. K. Green, T. D. Griggs and B. T. Mcleand, (eds.)., Shanhua, Taiwan.

Lee, S. W., K. S. Kim and S. D. Kim. 1974. Studies on changes in the composition of

pomegranate fruit during maturation. 1. Changes in sugar, organic acids, amino acids and the respiration rate. J. Korean Society for Horticultural Science. 15 : 57-63.

Page 74: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

Lee, S. W., K. S. Kim and S. D. Kim. 1974. Studies on changes in the composition of pomegranate fruit during maturation. 2. Changes in polyphenol compounds and anthocyanin pigments. Hort. Abst. 45 : 391.

Morris, J. A. 1979. Antimicrobial activity of aroma chemicals and essential oils. J. of

American Oil. Chemist,s Soc. 56(3) : 596-603. Pickergill, B. 1989. The domestication of chilli pepper. Pp 443-450. In P. J. Ucko and

G. Dimbleby(eds). The domestication and exploitation of Plant and animals. Dukworth and CO., London.

Popenone, W. 1974. Manual of Tropical and Subtropical Fruits. Hafnre Press, New York.

474 p Purseglove, J. W., E. G. Brown, C. L. Green and S. R. J. Robbins. 1981. Spices. Volume 1.

Longman, Inc., New York. 439p. Punsri, P., M. L. C. Thongtham and S. Nilsamranchit. 1985. Exotic Fruit Production as a

Substitute for Opium Poppy in Highlands of Thailand. Final Report for August 1982 to July 1985. Highland Agricutlture Project , Bangkok, Thailand. 135p.

Tebesst,D. O., C. W. Snilling, L. H. Riley and WEIDEMANN, g. j. 1989. The number of nuclei in spores of three species of Colletotrichum. Mycologia. 81(4) : 147-169. Tricita. H and Quimio. A. J. 1974. Pathogenicity of mango anthracnose. Phillipine Agri

culturist. 58 : 323-329.

Page 75: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาคผนวก

Page 76: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพผนวกท 1 ผลทบทม (ก) เปลอกผลทบทมอบแหง (ข)

ภาพผนวกท 2 ลกษณะการเขาท าลายของเชอรา C. gloeosporioides บนผลพรก

(ก) (ข)

Page 77: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพผนวกท 3 เปลอกผลทบทมในเอทานอล (ก) เครอง Rotary evaporator (ข)

ภาพผนวกท 3 สารสกดเอทานอลจากเปลอกผลทบทม

(ก) (ข)

Page 78: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพผนวกท 5 ตารางคา Probit

Page 79: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,
Page 80: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,

ภาพผนวกท 5 (ตอ) ตารางคา Probit

ภาพผนวกท 5 (ตอ) ตารางคา Probit

Page 81: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,
Page 82: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,
Page 83: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,
Page 84: Colletotrichum gloeosporioides, the cansal agent of chilli ... · Inhibitory effect of Pomegranate (Punica granatum Linn.) peel ethanol extract on Colletotrichum gloeosporioides,