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Colorantes y Coloraci Colorantes y Coloració n I n I T.M Daniela Bravo Vidal Color y coloraci Color y coloraci ón

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Colorantes y ColoraciColorantes y Coloracióón In I

T.M Daniela Bravo Vidal

Color y coloraciColor y coloracióónn

IntroducciIntroduccióónn

En el estudio de los preparados biolEn el estudio de los preparados biolóógicos una limitante fundamental gicos una limitante fundamental es la pequees la pequeñña variacia variacióón en la absorcin en la absorcióón de luz de los diferentes n de luz de los diferentes componentes de ccomponentes de céélulas y tejidos. lulas y tejidos.

Es por esto que el contraste que se obtiene en el microscopio Es por esto que el contraste que se obtiene en el microscopio óóptico ptico es generalmente muy bajo.es generalmente muy bajo.

Para solucionar este problema se recurre al proceso de Para solucionar este problema se recurre al proceso de coloracicoloracióón, n, esto debido a la propiedad que tienen los distintos componentes esto debido a la propiedad que tienen los distintos componentes celulares y tisulares de incorporar con variable intensidad sustcelulares y tisulares de incorporar con variable intensidad sustancias ancias

colorantes.colorantes.

IntroducciIntroduccióónn

La historia de las coloraciones histolLa historia de las coloraciones histolóógicas comienza hace varios gicas comienza hace varios siglos en los primeros laboratorios y talleres de los msiglos en los primeros laboratorios y talleres de los méédicos, dicos, ququíímicos y botmicos y botáánicos, los cuales empezaron a explorar el mundo de nicos, los cuales empezaron a explorar el mundo de las clas céélulas y los microorganismos.lulas y los microorganismos.

Estos pioneros de la histologEstos pioneros de la histologíía utilizaron enseres doma utilizaron enseres doméésticos, como sticos, como jabjabóón, diversos pigmentos utilizados para colorear telas e incluso n, diversos pigmentos utilizados para colorear telas e incluso vino como colorantes para estudiar diversos especvino como colorantes para estudiar diversos especíímenes al menes al microscopio. microscopio.

Estos esfuerzos permitieron el uso generalizado de los mecanismoEstos esfuerzos permitieron el uso generalizado de los mecanismos s bbáásicos para la tincisicos para la tincióón y evaluacin y evaluacióón morfoln morfolóógica. gica.

IntroducciIntroduccióónn

Los protocolos iniciales se limitaban a colorear el nLos protocolos iniciales se limitaban a colorear el núúcleo de la ccleo de la céé lula lula y citoplasma. Sin embargo, como la evaluaciy citoplasma. Sin embargo, como la evaluacióón morfoln morfolóógica se gica se convirticonvirtióó en la men la máás importante herramienta utilizada para guiar el s importante herramienta utilizada para guiar el tratamiento de los pacientes, mtratamiento de los pacientes, méédicos y cientdicos y cientííficos desarrollaron ficos desarrollaron numerosos procedimientos que ahora incluyen una gran variedad denumerosos procedimientos que ahora incluyen una gran variedad detinciones. tinciones.

Hoy en dHoy en díía, estas tinciones nos permiten aumentar la morfologa, estas tinciones nos permiten aumentar la morfologíía de a de los tejidos y demostrar importantes componentes celulares, los tejidos y demostrar importantes componentes celulares, ayudando en al diagnayudando en al diagnóóstico y evaluacistico y evaluacióón de enfermedades e incluso n de enfermedades e incluso identificando organismos patidentificando organismos patóógenos. genos.

TeorTeoríía del colora del color

TeorTeoríía del color:a del color: Es un grupo de reglas bEs un grupo de reglas báásicas de la mezcla de sicas de la mezcla de colores para conseguir el efecto deseado combinando colores en colores para conseguir el efecto deseado combinando colores en relacirelacióón a la n a la luzluz y/o y/o pigmentopigmento. .

La luz blanca se puede producir combinando el rojo, el verde y eLa luz blanca se puede producir combinando el rojo, el verde y el l azul, mientras que combinando pigmentos cian, magenta y amarilloazul, mientras que combinando pigmentos cian, magenta y amarillose produce el color neutro.se produce el color neutro.

El color:El color: es un atributo que percibimos de los objetos cuando hay es un atributo que percibimos de los objetos cuando hay luz, no es una caracterluz, no es una caracteríística de una imagen u objeto, sino que es stica de una imagen u objeto, sino que es mmáás bien una apreciacis bien una apreciacióón subjetiva nuestra. Se puede definir como, n subjetiva nuestra. Se puede definir como, una sensaciuna sensacióón que se produce en respuesta a la estimulacin que se produce en respuesta a la estimulacióón del n del ojo y de sus mecanismos nerviosos, por la energojo y de sus mecanismos nerviosos, por la energíía luminosa de a luminosa de ciertas longitudes de onda.ciertas longitudes de onda.

La luz estLa luz estáá formada por ondas electromagnformada por ondas electromagnééticas.ticas.

Las ondas forman, segLas ondas forman, segúún su longitud de onda, distintos tipos de luz, n su longitud de onda, distintos tipos de luz, como infrarroja, visible, ultravioleta o blanca. como infrarroja, visible, ultravioleta o blanca.

Las ondas visibles son aquellas cuya longitud de onda estLas ondas visibles son aquellas cuya longitud de onda estáácomprendida entre los 380 y 770 nancomprendida entre los 380 y 770 nanóómetros.metros.

Los objetos devuelven la luz que no absorben hacia su entorno.Los objetos devuelven la luz que no absorben hacia su entorno.

Nuestro campo visual interpreta estas radiaciones electromagnNuestro campo visual interpreta estas radiaciones electromagnééticas ticas que el entorno emite o refleja, como la palabra que el entorno emite o refleja, como la palabra "COLOR"."COLOR".

Entonces, nuestros ojos reaccionan a la energEntonces, nuestros ojos reaccionan a la energíía y no a la materia en a y no a la materia en ssíí..

Desde el punto de vista fDesde el punto de vista fíísico, el color es luz blanca que se sico, el color es luz blanca que se descompone al atravesar un prisma de cristal.descompone al atravesar un prisma de cristal.

La luz es colorLa luz es color

La luz blanca estLa luz blanca estáá formada por tres colores: rojo intenso, verde y formada por tres colores: rojo intenso, verde y azul violeta, que corresponden a ondas de distintas frecuencias.azul violeta, que corresponden a ondas de distintas frecuencias.

En el caso de un automEn el caso de un automóóvil de color rojo, significa que la pintura que vil de color rojo, significa que la pintura que lo cubre estlo cubre estáá fabricada con pigmentos que absorben las frecuencias fabricada con pigmentos que absorben las frecuencias correspondientes al verde y al azul (luz que recibe) y reflejan correspondientes al verde y al azul (luz que recibe) y reflejan el resto el resto de la luz (la parte roja) lo cual es interpretado por nuestra rede la luz (la parte roja) lo cual es interpretado por nuestra retina tina como color como color rojorojo..

TeorTeoríía a TricromTricromááticatica

En la retina del ojo humano hay dos tipos de cEn la retina del ojo humano hay dos tipos de céélulas, bastones y lulas, bastones y conos; hay a su vez 3 tipos de conos y cada uno de ellos respondconos; hay a su vez 3 tipos de conos y cada uno de ellos responde a e a una de las siguientes frecuencias una de las siguientes frecuencias fotolumfotolumíínicasnicas: Rojo (rojo, naranja, : Rojo (rojo, naranja, amarillo y verdeamarillo y verde--amarillo), azul (azul y violeta) y verde.amarillo), azul (azul y violeta) y verde.

La combinaciLa combinacióón de estas tres frecuencias da origen a todos los n de estas tres frecuencias da origen a todos los colores, de modo que segcolores, de modo que segúún esta teorn esta teoríía todo color es en realidad a todo color es en realidad una mezcla de frecuencias de rojo, azul y verde reflejada en alguna mezcla de frecuencias de rojo, azul y verde reflejada en algúún n objeto.objeto.

TeorTeoríía a TricromTricromááticatica

Debido a que el proceso de identificaciDebido a que el proceso de identificacióón de colores depende del n de colores depende del cerebro y del sistema ocular de cada persona, podemos medir con cerebro y del sistema ocular de cada persona, podemos medir con toda exactitud el toda exactitud el espectroespectro de un color determinado, pero el concepto de un color determinado, pero el concepto del color producido es totalmente subjetivo, dependiendo de la del color producido es totalmente subjetivo, dependiendo de la persona en spersona en síí. .

Dos personas diferentes pueden interpretar un color de forma Dos personas diferentes pueden interpretar un color de forma diferente, y puede haber tantas interpretaciones de un color comdiferente, y puede haber tantas interpretaciones de un color como o personas hay.personas hay.

TeorTeoríía a TricromTricromááticatica

Colores primarios y secundariosColores primarios y secundarios

Para entender mejor la teorPara entender mejor la teoríía a tricromtricromááticatica diremos que en la diremos que en la naturaleza existen tres pigmentos (materia en forma de grnaturaleza existen tres pigmentos (materia en forma de gráánulos nulos presente en muchas cpresente en muchas céé lulas vegetales o animales), denominados lulas vegetales o animales), denominados bbáásicos o primarios, que pueden reflejar por separado cada uno de sicos o primarios, que pueden reflejar por separado cada uno de

los colores blos colores báásicos: sicos: AMARILLO AMARILLO ROJO ROJO AZUL.AZUL.

Si mezclamos los colores primarios entre sSi mezclamos los colores primarios entre síí obtendremos obtendremos ““colores colores

secundariossecundarios””: : NARANJO NARANJO VERDE VERDE VIOLETA.VIOLETA.

Colores complementariosColores complementarios

Al trabajar con colores, Al trabajar con colores, ééstos pueden contrastarse o situarse al lado stos pueden contrastarse o situarse al lado o encima unos de otros. Cuando esto ocurre, se producen efectos o encima unos de otros. Cuando esto ocurre, se producen efectos visuales que destacan o disminuyen la intensidad (tono) de algunvisuales que destacan o disminuyen la intensidad (tono) de algunos.os.

AsAsíí, por ejemplo, cuando situamos un color de tono claro (amarillo , por ejemplo, cuando situamos un color de tono claro (amarillo limlimóón) sobre un fondo blanco parecern) sobre un fondo blanco pareceráá mmáás "suave" de lo que s "suave" de lo que realmente es, mientras que si lo ubicamos sobre el negro aparentrealmente es, mientras que si lo ubicamos sobre el negro aparentararááser mser máás "intenso".s "intenso".

Pero tambiPero tambiéén existen parejas de colores denominados n existen parejas de colores denominados "complementarios", entre los que no se producen estos efectos "complementarios", entre los que no se producen estos efectos visuales, lo que ayuda a obtener el efecto visual de "tono" desevisuales, lo que ayuda a obtener el efecto visual de "tono" deseado.ado.

Colores complementariosColores complementarios

Los colores complementarios cumplen las siguientes normas:

El complementario de un color primario es siempre uno secundario.

El complementario de un color terciario es siempre otro terciario.

Para "descubrir" cuales son las parejas de complementarios bastacon observar un gráfico estándar y ver cuales están "enfrentados" (amarillo y violeta / naranja y azul / rojo y verde / rojo-naranja y azul-verde /....)

ColoraciColoracióón y n y

ClasificaciClasificacióón de colorantesn de colorantes

ColoraciColoracióón:n:

Proceso mediante el cual un cuerpo es teProceso mediante el cual un cuerpo es teññido o toma ido o toma color por la accicolor por la accióón de una sustancia colorante y no n de una sustancia colorante y no desaparece con lavados de la misma sustancia en desaparece con lavados de la misma sustancia en que se disolvique se disolvióó el colorante.el colorante.

Colorantes:Colorantes:

Sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos, Sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos, ya sean del mismo color que ellas tienen (colorantes ya sean del mismo color que ellas tienen (colorantes ortocromortocromááticos), o bien teticos), o bien teññir de un color distinto ir de un color distinto (colorantes (colorantes metacrommetacromááticosticos). ). (1(1ªª clasificaciclasificacióón).n).

Sustancias cromSustancias cromóótropas:tropas: Son aquellas que provocan el Son aquellas que provocan el ““virajeviraje”” de color en el colorante.de color en el colorante.

Ejemplo: Ejemplo: TioninaTionina, ti, tiññe de azul casi todos los elementos de una e de azul casi todos los elementos de una preparacipreparacióón y de rojo las granulaciones de las cn y de rojo las granulaciones de las céé lulas lulas cebadas y el mucus.cebadas y el mucus.

Thionin blue (CI 52025)

Este cambio de color tiene que ver con las Este cambio de color tiene que ver con las caractercaracteríísticas qusticas quíímicas del colorante y del micas del colorante y del

tejido que se esta titejido que se esta tiññendo.endo.

Es muy compleja debido a la gran variedad, tamaEs muy compleja debido a la gran variedad, tamañño molecular y o molecular y nnúúmero de grupos funcionales que poseen estas sustancias.mero de grupos funcionales que poseen estas sustancias.

Se utilizan nombres de fantasSe utilizan nombres de fantasíía y por tanto hay colorantes que se a y por tanto hay colorantes que se comercializan con diversos nombres aunque se trate de un mismo comercializan con diversos nombres aunque se trate de un mismo compuesto por ejemplo el compuesto por ejemplo el LuxolLuxol fastfast blueblue tambitambiéén se expende con n se expende con los nombres de los nombres de LuxolLuxol fastfast blue MBS yblue MBS y SolventSolvent blue 38.blue 38.

ClasificaciClasificacióón o nomenclatura de colorantesn o nomenclatura de colorantes

La ComisiLa Comisióón de estandarizacin de estandarizacióón de colorantes bioln de colorantes biolóógicos publica y gicos publica y actualiza regularmente un listado de los colorantes con sus actualiza regularmente un listado de los colorantes con sus sinsinóónimos conocidos y su nnimos conocidos y su núúmero de color mero de color indexindex ((C.IC.I), al cual se ), al cual se debe recurrir para identificar con seguridad un colorante (esto debe recurrir para identificar con seguridad un colorante (esto es es aceptado internacionalmente).aceptado internacionalmente).

Ver libro Ver libro BiologicalBiological StainsStains de de H.JH.J ConnConn y py páágina gina webwebhttp://http://stainsfile.infostainsfile.info//StainsFileStainsFile//jindex.htmljindex.html

ClasificaciClasificacióón o nomenclatura de colorantesn o nomenclatura de colorantes

ClasificaciClasificacióón de colorantes (2n de colorantes (2ªª))

COLORANTES NATURALES:En todos ellos hay un principio colorante producido por la naturaleza pueden ser de origen animal (carmín) o vegetal (hematoxilina, orceína, azafrán, pimentón, etc.).

COLORANTES ARTIFICIALES O SINTÉTICOS (COLORES DE ANILINA):Son derivados de la destilación de la hulla (tipo de carbón mineral), químicamente todos son sales.

- Ácidos: Tienen carga negativa y afinidad por el citoplasma (ej.eosina). - Básicos: Tienen carga positiva y afinidad por la cromatina nuclear (ej. azul de metileno o clorhidrato de azul de metileno).

-- Neutros: Neutros: Se obtienen mezclando en distintas proporciones Se obtienen mezclando en distintas proporciones colorantes colorantes áácidos con bcidos con báásicos (Ej. Eosinato de azul de metileno). Al sicos (Ej. Eosinato de azul de metileno). Al colorear los tejidos actcolorear los tejidos actúúan disocian disociáándose, el ndose, el áácido colorea las cido colorea las estructuras celulares acidestructuras celulares acidóófilas (Ej. citoplasma) y la base las filas (Ej. citoplasma) y la base las estructuras basestructuras basóófilas (Ej. cromatina nuclear).filas (Ej. cromatina nuclear).

-- Indiferentes:Indiferentes: no forman sales. Tino forman sales. Tiññen aquellas sustancias que tienen en aquellas sustancias que tienen un poder disolvente superior al del lun poder disolvente superior al del lííquido que ha servido para quido que ha servido para preparar la solucipreparar la solucióón colorante (Sudn colorante (Sudáán n llllll, rojo escarlata)., rojo escarlata).

Componentes Componentes

BasBasóófilos:filos: Componentes de estructuras que se tiComponentes de estructuras que se tiññen con en con colorantes bcolorantes báásicos.sicos.AcidAcidóófilosfilos:: Componentes de estructuras que se tiComponentes de estructuras que se tiññen con en con colorantes colorantes áácidos.cidos.NeutrNeutróófilos: filos: Componentes de estructuras que se tiComponentes de estructuras que se tiññen con en con colorantes neutros.colorantes neutros.AzurAzuróófilosfilos: : Componentes de estructuras que se tiComponentes de estructuras que se tiññen con azul de en con azul de metileno.metileno.OsmiOsmióófilosfilos:: Componentes de estructuras que se tiComponentes de estructuras que se tiññen con en con tetrtetróóxidoxido de osmio.de osmio.ArgirArgiróófilosfilos:: Componentes de estructuras que se tiComponentes de estructuras que se tiññen con sales en con sales de plata.de plata.

PenetraciPenetracióón: n: Entrada del colorante a la cEntrada del colorante a la céélula y a travlula y a travéés del tejido.s del tejido.

Inocuo: Inocuo: No debe producir alteraciones en las cNo debe producir alteraciones en las céélulas ni en los lulas ni en los demdemáás componentes del tejido a a colorear.s componentes del tejido a a colorear.

Especificidad: Especificidad: Debe colorear ciertas estructuras celulares a travDebe colorear ciertas estructuras celulares a travéés s de uniones fuertes.de uniones fuertes.

Para poder impartir color son muy importantes sus caracterPara poder impartir color son muy importantes sus caracteríísticas sticas ququíímicas, por esto, deben poseer 2 regiones: micas, por esto, deben poseer 2 regiones: cromcromóóforo y foro y auxocromoauxocromo..

CaracterCaracteríísticas de los colorantessticas de los colorantes

Los Los auxocromosauxocromos son grupos son grupos ionizablesionizables, los que permiten la , los que permiten la uniunióón del colorante a la sustancia a ten del colorante a la sustancia a teññir, a travir, a travéés de s de uniones con grupos de carga opuesta. Determinan si son uniones con grupos de carga opuesta. Determinan si son colorantes bcolorantes báásicos (negativos), sicos (negativos), áácidos (positivos) o cidos (positivos) o neutros, son por tanto, determinantes para su unineutros, son por tanto, determinantes para su unióón a los n a los tejidos. tejidos.

EjEj:: ÁÁcidos: cidos: --COOH, COOH, --OH, OH, --SO3HSO3H

BBáásicos: sicos: --NHR, NHR, --NR2, NR2, --NH2NH2

CaracterCaracteríísticas de los colorantessticas de los colorantes

Los cromLos cromóóforos son grupos que poseen el color, por lo foros son grupos que poseen el color, por lo tanto, cuando se elija que colorante utilizar se debe tener tanto, cuando se elija que colorante utilizar se debe tener en cuenta las caracteren cuenta las caracteríísticas de los grupos funcionales a sticas de los grupos funcionales a determinar, determinar, presentan dobles enlaces alternados con presentan dobles enlaces alternados con enlaces simples. enlaces simples.

EjEj:: --C=CC=C-- --NONO2 2 --C=O C=O --N=N N=N -- --N=ON=O..

CaracterCaracteríísticas de los colorantessticas de los colorantes

•• Algunos colorantes presentan tambiAlgunos colorantes presentan tambiéén grupos n grupos modificadores los cuales intensifican el color.modificadores los cuales intensifican el color.

•• TambiTambiéén se debe considerar el taman se debe considerar el tamañño (PM) de la o (PM) de la molmoléécula del colorante y su cula del colorante y su planalidadplanalidad (capacidad de (capacidad de rotacirotacióón) ya que de esto dependern) ya que de esto dependeráá cuan fcuan fáácil y rcil y ráápido pido penetrara dentro de un tejido y por lo tanto a cuales penetrara dentro de un tejido y por lo tanto a cuales

componente celulares se unircomponente celulares se uniráá..

CaracterCaracteríísticas de los colorantessticas de los colorantes

Colorantes nitradosColorantes nitrados

Colorantes azoicosColorantes azoicos

Colorantes Colorantes quinoidesquinoides

Colorantes derivados del Colorantes derivados del dibenzopiranodibenzopirano

PtalocianinasPtalocianinas

ClasificaciClasificacióón de colorantes n de colorantes de acuerdode acuerdo

al grupo cromal grupo cromóóforoforo (3(3ªª):):

Nitrosos:Nitrosos: Producto de la interacciProducto de la interaccióón de un compuesto fenn de un compuesto fenóólico con el lico con el áácido nitroso. cido nitroso.

––NN=O (NO)=O (NO)

Nitro:Nitro: Son producto de la interacciSon producto de la interaccióón de un compuesto fenn de un compuesto fenóólico con lico con el el áácido ncido níítrico. trico.

--N (NON (NO22))

Colorantes nitradosColorantes nitrados

O

OO

MonoazoicosMonoazoicosDiazoicosDiazoicosSales de Sales de diazoniumdiazonium o o diazoniodiazonioSales de Sales de tetrazoliumtetrazolium o o tetrazoliotetrazolioRR--N=NN=N--RR--N=NN=N-- �� grupo grupo azoazoR = derivado del benceno o del naftalenoR = derivado del benceno o del naftalenoEntre los colorantes azoicos hay una variedad que pierde los Entre los colorantes azoicos hay una variedad que pierde los cromcromóóforos por reordenamiento molecular formando foros por reordenamiento molecular formando quinoidesquinoides..

Este tipo de colorantes no pueden interactuar con los tejidos poEste tipo de colorantes no pueden interactuar con los tejidos por r medio de una unimedio de una unióón qun quíímica, sino que por medio fmica, sino que por medio fíísico. Ej. sico. Ej. DisoluciDisolucióón en un componente orgn en un componente orgáánico y el lnico y el líípidos (como el Sudpidos (como el Sudáán n III CI 26000).III CI 26000).

Colorantes azoicosColorantes azoicos

Derivados del Derivados del arilmetanoarilmetano (radical arilo= cualquier radical de un anillo (radical arilo= cualquier radical de un anillo aromaromáático): tico): DifenilmetanoDifenilmetano, trifenilmetano (, trifenilmetano (diaminodiamino, , triaminotriamino, , hidroxitrifenilmetanohidroxitrifenilmetano), ), difenilnaftilmetanodifenilnaftilmetano. No se usan como . No se usan como colorantes propiamente tales sino que como colorantes propiamente tales sino que como fluorocromosfluorocromos..

Derivados del Derivados del xantenoxanteno:: Aminados, Aminados, hidroxiladoshidroxilados..

Derivados de la Derivados de la acridinaacridina

Derivados de la quinonaDerivados de la quinona--iminaimina:: azinasazinas ((aminoazinasaminoazinas, , safraninassafraninas), ), oxazinasoxazinas, , tiazinastiazinas..

Derivados de la antraquinona:Derivados de la antraquinona: hidroxiantraquinonahidroxiantraquinona, , aminoquinonaaminoquinona..

Colorantes Colorantes quinoidesquinoides

XantenoOxazina

Ejemplo:

Eosina Y CI: 45380

Colorante ácido debido a la presencia de un grupo auxocromocarboxilo por lo que tiene afinidad por las estructuras básicas de la proteína, es decir, el citoplasma por ejemplo. Soluble en agua y alcohol. Posee 4 grupos bromo que son los modificadores y un anillo quinoide.

En general son colorantes naturales:En general son colorantes naturales:•• Hematoxilina (CI 75290): Hematoxilina (CI 75290): Origen vegetal extraOrigen vegetal extraíído del do del áárbol del rbol del

Campeche, no tiene poder colorante por si misma, pero se oxida Campeche, no tiene poder colorante por si misma, pero se oxida ffáácilmente a cilmente a hematehemateíínana un colorante un colorante debelmentedebelmente áácido.cido.

•• CarmCarmíín o n o áácido carmcido carmíínico:nico: Origen animal, fue de los 1Origen animal, fue de los 1ºº en en utilizarse, pigmento rojo extrautilizarse, pigmento rojo extraíído de la cochinilla (parasito de un do de la cochinilla (parasito de un cactus mexicano), proviene de las hembras y se encuentra en el cactus mexicano), proviene de las hembras y se encuentra en el vitelo de los huevos, hoy en dvitelo de los huevos, hoy en díía se prepara (artificialmente) a partir a se prepara (artificialmente) a partir del del áácido carmcido carmíínico.nico.

•• OrceOrceíínana:: Origen vegetal (Origen vegetal (liquenesliquenes), incolora pero al tratamiento con ), incolora pero al tratamiento con amonio y exposiciamonio y exposicióón al aire se torna azul o violeta debido a algunos n al aire se torna azul o violeta debido a algunos compuestos fencompuestos fenóólicos entre ellos el licos entre ellos el OrcinolOrcinol, la f, la fóórmula exacta es rmula exacta es desconocida y se utiliza para tedesconocida y se utiliza para teññir fibras elir fibras eláásticas y cromosomas.sticas y cromosomas.

Colorantes derivados del Colorantes derivados del dibenzopirenodibenzopireno

Hulla

Cochinilla

Campeche

MMéétodos de coloracitodos de coloracióónn

MMéétodos de coloracitodos de coloracióónn

ColoraciColoracióón en bloque: n en bloque: Colorea a la pieza en su conjunto antes de Colorea a la pieza en su conjunto antes de cortarla. Es poco utilizada.cortarla. Es poco utilizada.

ColoraciColoracióón en cortes: n en cortes: Colorea cada corte por separado. Es el Colorea cada corte por separado. Es el mméétodo mtodo máás largo pero de resultados superiores.s largo pero de resultados superiores.

ColoraciColoracióón directa:n directa: existe una verdadera afinidad entre el existe una verdadera afinidad entre el colorante y el objeto.colorante y el objeto.

ColoraciColoracióón indirecta: n indirecta: requiere la intervencirequiere la intervencióón de intermediarios o n de intermediarios o mordientes para que la coloracimordientes para que la coloracióón tenga lugar.n tenga lugar.

MMéétodos de coloracitodos de coloracióónn

ColoraciColoracióón progresiva: n progresiva: se hace actuar el colorante hasta que se hace actuar el colorante hasta que llegue a su punto llegue a su punto óóptimo.ptimo.

ColoraciColoracióón regresiva: n regresiva: se realiza primero una se realiza primero una sobrecoloracisobrecoloracióónn y y luego se elimina el resto del colorante por medio de diferenciadluego se elimina el resto del colorante por medio de diferenciadores. ores. A este proceso se lo denomina diferenciaciA este proceso se lo denomina diferenciacióón.n.

ColoraciColoracióón simple: n simple: se colorean solamente algunos elementos del se colorean solamente algunos elementos del preparado (npreparado (núúcleo, fibras elcleo, fibras eláásticas, etc.).sticas, etc.).

ColoraciColoracióón combinada:n combinada: se tise tiññen los elementos nucleares y en los elementos nucleares y citoplasmcitoplasmááticos recurriticos recurriééndose, generalmente, al empleo sucesivo de ndose, generalmente, al empleo sucesivo de colores bcolores báásicos y sicos y áácidos que contrastan por sus colores.cidos que contrastan por sus colores.

MMéétodos de coloracitodos de coloracióónn

ColoraciColoracióón pann panóóptica:ptica: es una coloracies una coloracióón combinada realizada n combinada realizada sucesivamente por colorantes neutros (Maysucesivamente por colorantes neutros (May--GrGrüünwaldnwald--GiemsaGiemsa).).

ColoraciColoracióón n pancrpancróómicamica: : en un solo baen un solo bañño colorante acto colorante actúúan todos an todos los colorantes neutros que se necesiten.los colorantes neutros que se necesiten.

ColoraciColoracióón citoplasmn citoplasmáática: tica: Se obtiene con el uso de colorantes Se obtiene con el uso de colorantes áácidos. Ej. Orange G, eosina, verde luz, etc.cidos. Ej. Orange G, eosina, verde luz, etc.

ColoraciColoracióón nuclear: n nuclear: Se obtiene con el uso de colorantes bSe obtiene con el uso de colorantes báásicos. sicos. Ej. Ej. TioninaTionina, azul de toluidina, fucsina b, azul de toluidina, fucsina báásica, etc.sica, etc.

ColoraciColoracióón vital: n vital: ColoraciColoracióón de organismos vivos. Ej. Mitocondrias n de organismos vivos. Ej. Mitocondrias con verde con verde janojano, macr, macróófagos con rojo neutro, etc.fagos con rojo neutro, etc.