Naše skúsenosti s detekciou T buniek reagujúcich na SARS-Cov-2 pomocou T- Spotu

Stanislava Blažíčková, Jaroslava Sokolová, Martina Havriško, Alexandra BražinováPiešťany, Trnava, Bratislava

Počet štúdií na PubMed „T cell immunity, COVID-19“

• 2249 článkov

56

1607

760

2

Cox, R.J., Brokstad, K.A. Not just antibodies: B cells and T cells mediate immunity to COVID-19. Nat Rev Immunol 20, 581–582 (2020)

SARS-CoV-2 a imunitasprostredkovaná T a B bunkami

Imunitná odpoveď sprostredkovaná T lymfocytmi

• Vyššia individuálna úroveň môže skrátiť trvanie infekcie SARS-CoV-2

• Pacienti s ťažkým COVID-19 majú zníženú T bunkovú odpoveď

• závažné infekcie COVID-19 sú asociované s redukciou CD4+ a CD8+ T lymfofcytov, ale nie s odpoveďou B buniek

• Štúdie na zvieratách• pasívny prenos T buniek poukázal na

protektívnu ochranu bez prítomnosti protilátok, ale nie 100%

• Preskúmaná je dlhodobá T bunková imunitná reakcia po 17 rokoch od infekcie SARS-CoV

Nguyen THO, Cohen CA, Rowntree LC, Bull MB, Hachim A, Kedzierska K, Valkenburg SA. T Cells Targeting SARS-CoV-2: By Infection, Vaccination, and Against Future Variants. Front Med (Lausanne). 2021 Dec 24;8:793102.

Analýza dynamiky šírenia COVID-19 v Slovenskej

republike prostredníctvom kľúčových epidemiologických

ukazovateľov – podklad pre strategické rozhodovanie a

efektívnu kontrolu epidémie.

Projekt je podporený grantom APVV č. PP-COVID-20-0102

prof. MUDr. Alexandra Bražinová PhD., MPH

Hlavný cieľ projektu: určiť sekundárny attack rate (SAR) (mieru infekcie) v slovenských domácnostiach

Vedľajšie ciele:

• Stanoviť SAR prostredníctvom protilátkovej odpovede po prekonaní Covid-19

• Stanoviť T-bunkovú odpoveď po prekonaní Covid-19

T-SPOT.COVID

(Oxford Immunotec)

• vyšetrenie určené na kvalitatívnu detekciu bunkami sprostredkovanej (T lymfocyty) imunitnej odpovede na SARS-CoV-2 v „ľudskej celej krvi“

• T-lymfocyty sú senzibilizované na antigény SARS-CoV-2 (N a S) --> aktivácia efektorových T-lymfocytov, ktoré potom produkujú interferón gama (IFN-g)

Princíp: test využíva enzýmovú immunospot metódu (ELISPOT) na stanovenie počtu T-lymfocytov senzibilizovaných na SARS-CoV-2 zachytávaním IFN-g v blízkosti T-lymfocytov, z ktorých bol vylúčený

Hodnotenie T-Spotov

Ideálny patient

Nehodnotiteľný pacient

Počet spotov je viac ako 5

Výsledky (n=206)

• Vek – 42± 13,2 rokov• Pohlavie – muži 47%, ženy 53%

nezaočkovaní BEZ COVIDU-19 50

nezaočkovaní s COVIDOM-19 52

zaočkovaní BEZ COVIDU-19 53

zaočkovaní s COVIDOM-19 51

Celkový súčet 206

Štatistická analýza: Chí-kvadrátový test nezávislosti, ANOVA

Výsledky (n=206)

39

12

12

9

11

40

41

42

0 20 40 60

nezaočkovaní BEZcovidu

nezaočkovaní scovidom

zaočkovaní BEZ covidu

zaočkovaní s covidom

pozitnegat

54%

• V skupine prekonaných, očkovaných a prekonaných+ očkovaných boli hodnoty na rovnakej úrovni

• 72 (35%) účastníkov negatívnych

• Najviac v skupine nezaočkovaný bez COVID-19 (54%)

• Negatívny výsledok nebol signifikantne asociovaný s vyšším vekom, pohlavím, komorbiditami

• Pozitívny výsledok u neočkovaných bez COVID-19

• skrížené reakcie• blízky kontakt

Prítomnosť/neprítomnosť špecifických efektorových buniek proti spike antigénu / nukleokapsidovému antigénu

Existuje rozdiel v pozitivite bunkovej imunity podľa toho, či boli respondenti v kontakte a nedostali Covid-19

0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%

kontakt bez COVID-19

kontakt s COVID-19

%

kontakt bez COVID-19 kontakt s COVID-19bunková imunita pozit. 35 58bunková imunita negat. 42 18

P<0,005

Existuje rozdiel v hodnotách T –spotov voči spike/nukleokapsidovému proteínu v závislosti od očkovacieho statusu respondenta

**

**

S proteín N proteín

*

* p<0,001

?????

Nehodnotiteľnýpacient

Počet spotov je viac ako 5v negatívnej kontrole

Čo ďalej?

• Je slabší priebeh infekcie asociovaný s existujúcimi T lymfocytmi po bežných koronavírusových infekciách?

• Štúdium zmien T bunkovej imunitnej odpovedi vzhľadom na rôzne boostrovacie režimy

• Pamäťové T lymfocyty v tkanivách (Trms)

• Analýza T-bunkovej imunitnej odpovedi po dlhšom období od prekonania/očkovania

• T bunková lymfopénia u COVID-19 pacientov – priama inhibícia signalizácie T lymfocytov vírusom ?

• Spôsoby zvýšenia stimulácie T-bunkovej imunitnej odpovedi

Vyšetrenie T bunkovej imunity v klinickej praxi

• Doplnkové vyšetrenie k ostatným

• Nevhodné /vhodné pre klinickú prax ?

• Doplnok pri sérologických štúdiách

• Použitie vo vede a výskume nezastupiteľne, viacero zložiek imunity nemožno chápať jednotlivé vyšetrenia izolovane a posudzovať ich komplexne

https://iuis.org/events/2022-international-day-of-immunology/

Ďakujem za pozornosť