INFORME DE LABORATORIO N 02

CURSO: Bioqumica.

DOCENTE: Blga. Carmen Yzsiga Barrera.

CICLO: III.

GRUPO: B.

INTEGRANTES:

1. Anastacio Jurez Jorge Luis.

2. Huincho Aquio Sonia Marisol.

3. Vsquez Villacorta Nelly Sofa.

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DEMOSTRACIN CUALITATIVA DE

CARBOHIDRATOS

I. INTRODUCCIN

Los carbohidratos son compuestos orgnicos, formados primordialmente por

carbono, hidrgeno y oxgeno. Se encuentran en muchos productos naturales y

son una de las fuentes principales de energa para los organismos quimiotrficos.

La unidad fundamental de los carbohidratos son los monosacridos, estos son

polihidroxialdehdos o polihidroxicetonas. Los monosacridos se combinan, con

la prdida de molculas de agua unindose mediante enlaces glucosdicos,

formndose oligosacridos y polisacridos. En presencia de cidos no oxidantes,

los carbohidratos se deshidratan y forman furfural si el monosacrido es una

pentosa o hidrximetilfurfural, si el monosacrido es una hexosa. Cuando la

reaccin de deshidratacin se efecta con la ayuda del cido sulfrico

concentrado y el color se desarrolla con alfa naftol, la prueba se denomina

reaccin de Molisch. Prueba para azcares reductores, las propiedades

reductoras de los azcares depende de la presencia de grupos aldehdos o

cetonas, reales o potenciales. Al calentar ciertas soluciones de azcares, en

presencia de determinados iones metlicos, el grupo carbonilo se oxida y el ion

metlico se reduce. Los polisacridos son cadenas muy largas o polmeros de

monosacridos, lineales o ramificados. Se dividen

en heteropolisacridos y homopolisacridos dependiendo si la forman distintos

o iguales unidades simples. Algunos polisacridos de reserva importante lo son

el almidn formado por dos constituyentes: amilasa y amilopectina; y el

glucgeno llamado almidn animal, se encuentra en el hgado y msculos.

OBJETIVOS

Reconocer los diferentes tipos de carbohidratos

Identificar la presencia de azucares reductores provenientes de la

hidrolisis acida de muestras de carbohidratos

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II. MATERIALES Y MTODOS

1. REACCION DE MOLISH.-Esta es una reaccin general de los carbohidratos y por lo tanto nos sirvi para detectarlos en una sustancia

problema. Se colocaron en 4 tubos de ensayo muestras de carbohidratos

de la siguiente manera.

TUBOS(ml) I II III IV V

Sol. Glucosa 1% 2.0 ---- ---- ---- ----

Sol sacarosa 1% ---- 2.0 ---- ---- ----

Sol. Maltosa 1% ---- ---- 2.0 ---- ----

Sol. Almidn 1% ---- ---- ---- 2.0 ----

Sol. Alfa naftol5%(gotas) 02 02 02 02 02

Me mezclaron bien los tubos para luego agregar cido sulfrico.

cido sulfrico 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0

2. REACCION DE SELIVANOFF.-reaccin especfica para grupos funcional cetnico.se colocaron nuevamente en tres tubos de ensayo soluciones de

fructosa, glucosa y sacarosa como se muestra en la siguiente cuadro.

TUBOS(ml) I II III

Sol. fructosa 1% 1.0 ---- ----

Sol glucosa 1% ---- 1.0 ----

Sol. sacarosa 1% ---- ---- 1.0

Selivanoff 5.0 5.0 5.0

Se mezclaron bien y se llevaron a bao mara hirviente durante un

intervalo de tiempo de 3 a 15 min.

3. REACCION DE BARFOED.-prueba utilizada para diferenciar monosacridos de disacridos. Se colocaron en 4 tubos de ensayo

soluciones de carbohidratos y se le agregaron a cada tubo de la

siguiente manera.

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TUBOS(ml) I II III IV

Sol. Glucosa 1% 1.0 ---- ---- ----

Sol fructosa 1% ---- 1.0 ---- ----

Sol. sacarosa 1% ---- ---- 1.0 ----

Sol. Maltosa 1% ---- ---- ---- 1.0

Rx Barfoed 5.0 5.0 5.0 5.0

Se mezclaron bien y se sometieron a bao mara hirviente por

5 min.

4. ACCION DE LOS ALCALIS SOBRE LOS CARBOHIDRATOS. Se trituro en un mortero una papa sin cascara.

Se le agregaron 5-10 ml de agua destilada, luego se mezcl y se

decant el sobrenadante en un vaso de precipitacin.

En un tubo de ensayo aparte se midi 2ml del sobrenadante

anterior y en otro tubo se coloc 2ml de solucin del almidn

preparado.

Se aadi 2 ml de HCl 1.55 a cada uno de los tubos.

Se calentaron los tubos de ensayo en bao mara hasta que hierva

durante 15 minutos, se dej enfriar y se le aado 5 gotas de KOH

1%.

Finalmente se le aadi a los tubos anteriores 1ml de soluciones

de fehling A y B, luego se someti a ebullicin entre 3 y 5 minutos.

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III. DISCUSIN

Guarnizo, A. et al. (2000) seala que La mayora de las pruebas

cualitativas para la caracterizacin qumica de carbohidratos se basa en

la formacin de sustancias coloreadas o precipitados mediante

tratamiento con reactivos, los cuales proporcionan informacin sobre la

estructura de la molcula. Y tal como se describe en la teora, las pruebas

cualitativas que se realizaron en la prctica se basaron en la formacin

de sustancias y precipitados coloreados mediante tratamiento con

distintos reactivos, los cuales proporcionaron informacin para

diferenciar entre los distintos tipos de carbohidratos y sus caractersticas.

La primera prueba realizada fue la Reaccin de Molish. Guarnizo indica

que la prueba de Molisch es una prueba general para cualquier

carbohidrato sin importar su complejidad; el H2SO4 hidroliza los

carbohidratos complejos y deshidrata los monosacridos resultantes

formando furfural y derivados y estos, finalmente, producen compuestos

color prpura por reaccin con el -naftol. En la prctica, los cuatro tubos

dieron positivo a la prueba de Molisch, ya que se observ la aparicin de

un anillo rojo violeta oscuro (prpura); esto confirm que los tubos

contenan carbohidratos (glucosa, sacarosa, maltosa y almidn).

La segunda prueba realizada fue la Reaccin de Selivanoff. Guarnizo

explica que las cetohexosas y aldohexosas se deshidratan en medio

cido dando lugar a 5-hidroximetilfurfural, el cual se condensa con

resorcinol para dar lugar a un producto rojo oscuro. Sin embargo, las

cetohexosas (como la fructosa) reaccionan con mucha mayor rapidez (de

3 a 5 minutos) que lo hacen las aldohexosas; por este motivo el reactivo

de Seliwanoff se usa para diferenciar cetohexosas de aldohexosas. Los

disacridos que contienen fructosa (por ejemplo la sacarosa), dan

positiva esta prueba si se deja correr la reaccin durante un tiempo

prudencial para permitir la hidrlisis cida; de esta manera la sacarosa

libera fructosa y, esta, da positiva la prueba de Seliwanoff. Gracias a los

resultados de la prctica uno se puede dar cuenta de que se comprueba

al pie de la letra lo que dice la teora, porque el tubo de fructosa y el de

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sacarosa dieron positivo a la prueba de Seliwanoff al presentar una

coloracin rojo-cereza (rojo oscuro); mientras que el tubo que contena

la glucosa dio negativo a esta prueba.

La tercera prueba realizada fue la Reaccin de Barfoed. Guarnizo dice

que esta prueba se utiliza para diferenciar monosacridos de

disacridos. Los monosacridos dan positivo a la reaccin de Barfoed al

observarse la aparicin de un precipitado color rojo naranja, mientras que

los disacridos dan negativo por presentar el enlace O-glucosdico que

no les permite reaccionar con el reactivo de Barfoed. En la prctica, a

esta prueba dieron positivo la glucosa y la fructosa, ya que en sus tubos

se form un precipitado rojo naranja, confirmando lo que dice la teora

de que estos dos carbohidratos son monosacridos; y estos se

diferenciaron de la sacarosa y la maltosa, ya que dieron negativo a la

prueba de Barfoed por ser disacridos.

La cuarta prueba realizada fue la Accin de los lcalis sobre los

carbohidratos. La teora dice que las aldosas y las cetosas, como los

carbohidratos compuestos que contienen un grupo azcar libre,

presentan el fenmeno de la tautomerizacin cuando son sometidos a la

accin de los lcalis dando origen a las formas enlicas que se

comportan como cidos dbiles y tiene la capacidad de unirse al lcali

dando lugar a sales enlicas que tienen propiedades reductoras. De

estas propiedades se valen los mtodos para la identificacin y

cuantificacin de muchos azcares (Reaccin de Benedict, Fehling, etc.)

En la prctica se hizo la hidrlisis cida de un polisacrido (almidn) y

luego se identific el azcar reductor correspondiente.

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IV. CONCLUSIONES

1. La reaccin Molish no ayudo a determinar si en alguna solucin muestra estaba constituida por un azcar. Con este mtodo se determin si se

trata de unos monosacridos (azcar) o un polisacrido. Sera un

polisacrido cuando la reaccin sea negativa; es decir que estaremos en

presencia de un monosacrido, en el caso del tubo I; II, III y IV, estos

arrojaron positivos.

Para poder diferenciar monosacridos de disacridos, hicimos uso del

reactivo de Barfoed. Que nos permiti determinar si nos encontramos

frente a un disacrido o un monosacrido o un polisacrido. La prueba

ser positiva cuando observemos un precipitado rojo naranja, en el caso

del tubo I y tubo II, que contenan glucosa y fructuosa respectivamente

2. En el desarrollo de la prctica se determin al almidn como azcar reductor. En la hidrolisis acida se produce un rompimiento total de los

enlaces que mantienen unido a los monmeros del almidn y se forma

glucosa, maltosa e isomaltosa.

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V. RECOMENDACIONES

Tener siempre puesto el guardapolvo al ingresar a la prctica de laboratorio.

Llegar puntual a las prcticas, y regirse a las horas ya establecidas para no estar interrumpiendo la clase.

Saber emplear bien la pipeta, sobre todo al momento de pipetear cualquier acido.

Emplear bien los instrumentos, materiales, ya que en esta prctica se hiso uso de un cuchillo para pelar la papa.

Realizar las pruebas a bao mara con mucho cuidado para evitar lesiones o daos peores.

Manipular siempre los equipos de laboratorio con nuestra docente gua, para no ocasionarnos algn dao o daos al equipo.

Tomar apunto sobre los resultados obtenidos en la prctica.

Dejar siempre limpio el laboratorio, lavando los materiales usados en nuestra prctica.

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VI. REFERENCIAS

8.1 Bohinski, R. 1978. Bioqumica 2da edicin. Fondo Educativo

Latinoamericano S.A.

8.2 Morrison, R. y Boyd. 1985. Qumica orgnica. 2da edicin. Fondo

Educativo Latinoamericano S.A. Mxico.

8.3 Villavicencio, M. 1993. Bioqumica. A&B S.A. Editores, Lima - Per.

8.4 Quesada, S. 2005. Manual de experimentos de laboratorio para

bioqumica. EUNED. Espaa.

8.5 Macarulla, J. et al. 1993. Biomolculas: lecciones de bioqumica

estructural. Edicin Ilustrada. Reverte. Espaa.

8.6 Guarnizo, A. et al. 2000. Experimentos de Qumica Orgnica.

ELIZCOM S.A.S. Mxico.

8.7 Giraldo, G. et al. 2007. Laboratorio de Bioqumica: Una Visin

Prctica. ELIZCOM S.A.S. Mxico.

8.8 Ocampo, R. 2008. Curso prctico de qumica orgnica. Enfocado a

biologa y alimentos. Universidad de Caldas. Espaa.

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VII. CUESTIONARIO

1. Cul de las pruebas permite diferenciar aldosas de cetosas? Fundamente su respuesta.

La Reaccin de Selivanoff. Se explica que las cetohexosas y

aldohexosas se deshidratan en medio cido dando lugar a 5-

hidroximetilfurfural, el cual se condensa con resorcinol para dar

lugar a un producto rojo oscuro. Sin embargo, las cetohexosas

(como la fructosa) reaccionan con mucha mayor rapidez (de 3 a 5

minutos) que lo hacen las aldohexosas; por este motivo el reactivo

de Seliwanoff se usa para diferenciar cetohexosas de

aldohexosas. Los disacridos que contienen fructosa (por ejemplo

la sacarosa), dan positiva esta prueba si se deja correr la reaccin

durante un tiempo prudencial para permitir la hidrlisis cida; de

esta manera la sacarosa libera fructosa y, esta, da positiva la

prueba de Seliwanoff. Gracias a los resultados de la prctica uno

se puede dar cuenta de que se comprueba al pie de la letra lo que

dice la teora, porque el tubo de fructosa y el de sacarosa dieron

positivo a la prueba de Seliwanoff al presentar una coloracin rojo-

cereza (rojo oscuro); mientras que el tubo que contena la glucosa

dio negativo a esta prueba.

2. el almidn ingerido por el ser humano sufre el mismo tipo de hidrolisis acida realizada en la prctica? cmo se

hidroliza?

Disacridos: (ejemplo, la sacarosa), producen dos molculas de

monosacrido por hidrlisis. Rompimiento de enlace glucosdicos.

La sacarosa (enlace (1 2) O), es un disacrido que no posee

carbonos anomricos libres puesto que estn siendo utilizados en

el enlace glucosdicos, por lo que carece de poder reductor. Sin

embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se

hidroliza, es decir, incorpora una molcula de agua y se

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descompone en los monosacridos que la forman, glucosa y

fructosa, que s son reductores, lo cual demuestra que se rompi el

enlace O-glucosdicos de esta.

3. Cules son las unidades monomricas de:

- Lactosa: disacrido

- Sacarosa: oligosacrido

- Maltosa: oligosacrido

- Celulosa: polisacrido

4. Represente la unin de molculas en la formacin de almidn, glucgeno y celulosa.

ALMIDON:

CELULOSA

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5. De los siguientes azucares Cul no es reductor? por qu?

- glucosa: S es reductor.

Porque tienen un carbono anomrico libre capaz de oxidarse, si puede

oxidarse, entonces puede reducir a otro compuesto, por esto es

reductor todo monosacrido tiene poder reductor, sea una aldosa o

una cetosa, porque posee potencialmente un carbono cuyos

sustituyentes pueden oxidarse

- Lactosa: S es reductor,

Porque tienen la estructura qumica abierta necesaria para actuar

como agentes reductores. La estructura simple de los monosacridos

les permite descomponerse al doble de velocidad que los disacridos,

mientras que los disacridos deben descomponerse en partes ms

pequeas primero.

- Sacarosa: No es reductor.

En la sacarosa no ocurre tal reaccin como la glucosa, ya que los dos

monosacridos que la componen estn unidos mediante esos

carbonos anomricos que son capaces de oxidarse. Al estar

comprometidos en la unin glucosdicos, no estn aptos a reducir

nada.

- Fructosa: s es reductor.