diagnóstico general de las enfermedades infecciosas
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Diagnóstico General de las Enfermedades Infecciosas
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¿Qué debe esperar un clínico del laboratorio de Microbiología?
• Información para una decisión clínica.• Normas de recogida y transporte de
muestras.• Identificación de microorganismos.• Sensibilidad a los antimicrobianos.• Control de antibioterapia.• Procesamiento y respuesta rápida.• Información actualizada.
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Diagnóstico Microbiológico
• Confirmar o excluir un diagnóstico clínico– Falso positivo: ITU– Falso negativo: Meningitis
• Relevancia: Actividades a ejercer en el paciente en función del resultado– Clínica: • Tratamiento antimicrobiano precoz y
adecuado• Gravedad del proceso
– Epidemiologica: • Declaración obligatoria• Quimioprofilaxis
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Diagnóstico Microbiológico: Fases
1. Recogida de muestras clínicas (Prácticas):• Importancia.• Normas generales.
2. Transporte de muestras clínicas (Prácticas):• Viales.• Condiciones de transporte.• Medios de transporte.
3. Diagnóstico:• Directo.• Indirecto.
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• Directo. Implica la demostración del agente o componentes en los fluidos orgánicos.
• Indirecto. Implica la demostración de la huella que el agente ha dejado en su contacto con el sistema inmune (RI adquirida celular o humoral).
Diagnóstico Directo/Indirecto
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Diagnóstico Directo
1. Visualización de microorganismos.2. Cultivo.3. Identificación y antibiograma.4. Detección de antígenos microbianos.5. Técnicas moleculares.
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Diagnóstico Directo 1. Visualización de microorganismos
1. Examen Directo– Examen en fresco.– Microscopía de campo oscuro.– Microscopía electrónica.
2. Tinciones:– Gram.– Ziehl: micobacterias.– Tinciones fluorescentes.– Giemsa: parásitos.
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Microscopía ópticaExamen en Fresco
Hifas
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Microscopía de campo oscuro. Treponema pallidum
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Microscopía ElectrónicaHerpes simplex
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Tinción de Gram
Streptococcus mitis
Uretritis gonocócica
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Tinción de GramBacillus anthracis
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Tinción de Ziehl NeelsenB.A.A.R
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Tinciones fluorescentesAuramina rodamina (MTB)
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Tinción de GiemsaFilarias
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Diagnóstico Directo2. Cultivo
1. Medios artificiales Tipos. Condiciones de incubación.
2. Cultivos celulares: Efecto citopático.
3. Huevos embrionados.4. Animales de experimentación.
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Medios de CultivoMedios sólidos
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Jarra para bacterias anaerobias
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Cultivos CelularesHerpes Simplex
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Diagnóstico Directo3. Identificación y antibiograma
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Diagnóstico Directo4. Detección de antígenos
Aglutinación con partículas de látex
(Ag capsular de Cryptococcus neoformans)
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Legionella pneumophilaPneumocystis jiroveci
Diagnóstico Directo4. Detección de antígenos
Inmunofluorescencia directa (IFD)
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Diagnóstico Directo4. Detección de antígenos
Inmunocromatografía
Otros ejemplos: Ag de Legionella y S.pneumoniae en orina, toxinas de Clostridium difficile en muestras de heces
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D. Directo. 5. Técnicas moleculares
1. Análisis de material genético microbiano– Técnicas de hibridación (sondas de ADN).
(Identificación)– Técnicas de amplificación (PCR). (Diagnóstico e
identificación)– Técnicas de tipado epidemiológico molecular
(PFGE, RFLP,...). (Identificación)
2. Análisis de proteínas microbianas:– MALDI-TOF (identificación)
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Diagnóstico Directo5. Técnicas moleculares
PCR
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Diagnóstico Indirecto
- Fijación del complemento.- Inmuno blot y Western blot
1. Detección de RI específica humoral (Anticuerpos):- Aglutinación- ELISA- IFI
2. Detección de RI específica celular:– Mantoux– IGRAs
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Fundamento. D.indirecto
-IgM-Baja avidez
-IgG-Alta avidez
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Fundamento. D. indirecto
Suero sin anticuerpos
Suero con anticuerpos
Antígeno libre
Antígeno se une a los anticuerpos
Complemento libre
Complemento se une al complejo Ag/Ac
Sistema indicador: hematíes/ hemolisina
Sistema indicador: hematíes/ hemolisina
Los hematíes intactos se depositan en el fondo del pocillo (punto rojo)
Los hematíes se lisan (ausencia de punto)
Reactivo No reactivo