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UNIVERSITAUNIVERSITA’’ DEGLI STUDI DI TRIESTEDEGLI STUDI DI TRIESTE
FACOLTAFACOLTA’’ DI MEDICINA E CHIRURGIADI MEDICINA E CHIRURGIADipartimento di Scienze della Riproduzione e dello SviluppoDipartimento di Scienze della Riproduzione e dello Sviluppo
Direttore: Prof. A. VenturaDirettore: Prof. A. Ventura
DOTTORATO DI RICERCA IN MEDICINA MATERNODOTTORATO DI RICERCA IN MEDICINA MATERNO--INFANTILEINFANTILE
Dottoranda:Dott.ssa Annalisa Marcuzzi
Tutor:Dott. Alberto Tommasini
Anno Accademico 2009-2010Anno Accademico 2009-2010
EFFETTO DI COMPOSTI ISOPRENOIDI SUL FENOTIPO INFIAMMATORIO DEL DIFETTO DI MEVALONATO CHINASI
(MKD)
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Difetto di Mevalonato Chinasi(MKD)
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Difetto di Mevalonato Chinasi (MKD)Autosomica recessivaMalattia rara (200 casi registrati in www.hids.net)
Esordio precoceEvento scatenante: vaccinazione, stress, piccole infezioniEpisodi febbrili 3-5 gg ogni 2-12 wksSINTOMATOLOGIA ASSOCIATA:-Dolore addominale e/o vomito e/o diarrea-Artralgia/artrite-Linfoadenopatia-Eritema cutaneo-Afte orali
In alcuni casi più gravi coinvolgimento SNC
Mevalonico Aciduria
Malattia orfana di trattamento
eziologico specifico
Sindrome da Iper-ID
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Una minore produzione di isoprenoidi determina una carenza di geranil-
geranilazione che attiva la caspasi 1 (IL1β)
HMG-CoA reductase inhibition induces IL-1beta release through Rac1/PI3K/PKB-dependent caspase-1 activation
Kuijk LM, Beekman JM, Koster J, Waterham HR, Frenkel J, Coffer PJ. Blood. 2008 Nov 1;112(9):3563-73. Epub 2008 Aug 6.
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Obiettivi del progetto
Parte ICostruire un modello malattia “in vivo” ed “in vitro” che
riproduca il fenotipo infiammatorio della malattia;
Parte IIIdentificazione e valutazione di possibili interventi
farmacologici:• isoprenoidi (GOH, FOH, GGOH, MOH)• inibitori della farnesil transferasi (ManA,
Tipifarnib, Lonafarnib)
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MK
ALD
…per creare il modello malattia
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in vitro
IL-10 44h 20
LPSALD
1 3day 0
MDP
2
SAA
ALDin vivo
saline ALD MDP ALD/MDP0
50
100
150**
SA
A (
g/m
l)
Control ALD LPS ALD/LPS0
200
400
600
800
1000**
IL-1
B p
g/m
l
Parte I Il trattamento con alendronato aumenta la suscettibilità infiammatoria agli stimoli.
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Control ALD LPS ALD/LPS0
200
400
600
800
1000**
IL-1
B p
g/m
l
Control ALD LPS ALD/LPS ALD/LPS0
200
400
600
800
1000**
+GOH
IL-1
B p
g/m
l
ISOPRENOIDI
0 44h 20
LPSALD
0 44h 20
LPSALD
GOH 10µM
Parte II
Il GOH diminuisce la iper-suscettibilità infiammatoria del nostro modello in vitro
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GOH 250 mg/Kg
ISOPRENOIDI
saline ALD MDP ALD/MDP0
50
100
150**
SA
A (
g/m
l)
saline ALD MDP ALD/MDP ALD/MDP0
50
100
150
**
+GOH d0/1
SA
A (
g/m
l)
Parte II
… e lo stesso in vivo
A. Marcuzzi et al. Inflammatory Research . 2010A. Marcuzzi et al. International Immunopharmacology 2010
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Alcuni farmaci anti tumorali (Tipifarnib®, Lonafarnib ®) agiscono come inibitori della farnesil transferasi !!!
Control ALD LPS ALD/LPS0
200
400
600
800
1000**
IL-1
B p
g/m
l
control ALD LPS ALD+LPS ManA ALD+LPS0
200
400
600
800
1000
+Man A
**
IL-1
B p
g/m
l
INIBITORI FARNESIL TRANSFERASI
0 44h 20
LPSALD
0 44h 20
LPSALD
Man A: 10µM
Parte II
La ManA diminuisce la suscettibilità infiammatoria indotta nel nostro modello in vitro
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saline ALD MDP ALD/MDP0
50
100
150**
SA
A (
g/m
l)
+Man Asaline ALD MDP ALD/MDP ManA ALD+MDP
0
50
100
150
**
SA
A (
g/m
l)
INIBITORI FARNESIL TRANSFERASI
ManA 7.5 mg/Kg
Parte II
… e lo stesso in vivo
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… dato il potenziale anti infiammatorio degli isoprenoidi e degli inibitori della farnesil-transferasi: è
possibile ipotizzare una loro sinergia???
VERIFICA !!
Isoprenoidi+Tipifarnib®/Lonafarnib®
L. De Leo, A. Marcuzzi. Pharm Res 2010
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ISOPRENOIDI+
INIBITORI FARNESIL TRANSFERASI
A.Marcuzzi, et al. Submitted to Cl.Exp. Pharm Phys (2010)
0
2000
4000
6000
8000
**
IL-1
(
pg
/ml)
0
500
1000
1500
2000
*
*****
IL 1
8 (p
g/m
l)
0
2000
4000
6000
8000
***
***
***TN
Fa
(pg
/ml)
Ald+Lova+LPS
GOH
Tip
+ + + +
+
+
-
- -
-
+
+
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Conclusione
Gli isoprenoidi e gli inibitori della farnesil transferasi presentano una significativa
azione anti infiammatoria nei modelli malattia di MKD
da soli o…meglio in combinazione!!
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Ringraziamenti
IRCCS Burlo Garofolo (Trieste)
Dott. Tommasini Alberto Dott.ssa Pontillo AlessandraDott.ssa De Leo Luigina
Prof. Ventura Alessandro
Università degli Studi di Trieste
Prof.ssa Decorti Giuliana
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Grazie per l’attenzione!