Download - Биохимия ферментов
Биохимия ферментов
Ферменты
Бактериальное брожение
Физиологическая регуляция
Катализ
Клеточный метаболизм
Макромолекулы
Питание
Генетический аппарат
Ультраструктура мембран
Коферменты
Фармакология
Биосинтез
Кинетикареакций
Превращение энергии
Биохимическая эволюция
Врожденныенарушения обмена
Фермент Молекулярная масса
Фермент Молекулярная масса
Рибонуклеаза 13 000 Лактатдегидрогеназа 140 000
Цитохром с 15 000 Альдолаза 142 000
Трипсин 23 000 Каталаза 248 000
Пепсин 32 1000 Глутаматдегидрогеназа 336 000
Гексокиназа 45 000 Уреаза 480 000
Щелочная фосфатаза
80 000 Пируватдегидрогеназа 4 500 000
Молекулярная масса ферментов
Активный центр ферментов
Субстрат
R1 R2
R3 R5
R4R6
R7
R8
R9
R10
R165
R164
R163
R162
R169
Распределение и относительные количества изоферментов ЛДГ
ЛДГ1 - - - - - - - - - - - -
ЛДГ2
ЛДГ3
ЛДГ4
Старт
+
-ЛДГ5
- - - -Сердце Почки
Печень Мышцы
Механизм действия ферментов
Субстрат +
ФерментАктивныйкомплекс
Продукты реакции
Фермент
- - - - - - - - -
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
G
Исходноесостояние
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
ЕНФ
Еф
Р
Переходное состояния
Конечное состояние
Ход реакции
Сво
бод
ная
энер
гия
S
Энергетический механизм ферментативной и неферментативной химических реакций
- - -
- - -
- - -
-
1Km
1Kmi
=
1v
2
1
[ S ]
1-
1Vi
1
vmax
График зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в присутствии неконкурентного ингибитора
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - Максимальная скорость V max
- - - - -- - - - - - - - -
12
V max
а
б
в
Кm Концентрация субстрата [ S ]
Ско
рост
ь ре
акц
ии
V
Уравнение Михаэлиса - Ментен
VMAX . . [ s ]Кs + [ s ]
v =
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
[ s ]
v
1
2 vmax
Vmax
1
2 vmax
Km
Определение численного значения Кm
Если v = ½ vmax
V max
2=
V max . [ s ] Кm + [ s ]
12
=s
Km + [ s ]или Km + [ s ] = 2 [ s ]
Km = [ s ]
График Лайнувера – Берка.
1vmax
1
Km
Наклон = К mV max
1v
1[s]
Основные свойства ферментов
а
б
v
1000 c50
Зависимость скорости катализируемой ферментом реакции от рн
рн
V
Оптимальные значения рН для некоторых ферментов
Фермент рн Фермент рн
Пепсин 1,5 – 2,5 Каталаза 6,8 – 7,0
Катепсин 4,5 – 5,0 Уреаза7,0 – 7,2
Амилаза из солода
4,9 – 5,2 Липаза панкреатическая
7,0 – 8,5
Сахараза кишечная
5,8 – 6,2 Трипсин 7, - 8,5
Амилаза слюны 6,8 – 7,0 Аргиназа 9,5 – 10,0
Торможение активности СДГ малоновой кислотой
+
+
ООС
ООС
С
С
Н
Н
Н
Н
- 2НООС
СН
СН
ООС
;
+
+
ООС
ООС
СН
Блокиро-вание реакции
Сукцинат Фумарат Малонат
+ +
Е + Комлекс Е +(неактивный)
Е + S ES E P1 P2
Действие конкурентного ингибитора
H2NH2N СООН SO2
NH2
n - Аминобензойная кислота
Сульфаниламид
- -
- -
- -
- -
- -
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
12
V max2
1
0
v
V max = v i
Km Kmi [ S ]
График зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в присутствии конкурентного ингибитора
- - -
- - -
- - -
-
1
vmax=
1
vi
1Km
1Kmi
-
1v
2
1
[ S ]
1-
График зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в присутствии конкурентного ингибитора.
- -
- -
- -
- -
- -
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
0
v
Km = Kmi [ S ]
- -
-- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
1
2Vmax1
2V i
2
1
V max
V i
График зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в присутствии неконкурентных ингибиторов
- - -
- - -
- - -
-
1Km
1Kmi
=
1v
2
1
[ S ]
1-
1Vi
1
vmax
График зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в присутствии неконкурентного ингибитора