![Page 1: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/1.jpg)
Η δομή του DNA.
H αντιγραφή του γενετικού υλικού.
Α. Ηλιόπουλος Καθηγητής Βιολογίας & Γενετικής
![Page 2: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/2.jpg)
Δομή του μαθήματος
• Δομή του νουκλεοτιδίου
• Σύνθεση πολυ-νουκλεοτιδικών αλυσίδων
• Οργάνωση των πολυνουκλεοτιδικών αλυσίδων
στο DNA
• Αντιγραφή του DNA
• Εφαρμογή του μηχανισμού αντιγραφής στη
τεχνολογία PCR
![Page 3: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/3.jpg)
DNA: Το μακρομόριο που περιέχει τις
μεταβιβαζόμενες γενετικές πληροφορίες οι οποίες, σε
αλληλοεξάρτηση με το περιβάλλον, καθορίζουν τα
γνωρίσματα ενός οργανισμού (φαινότυπο).
![Page 4: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/4.jpg)
Το νουκλεοτίδιο είναι η βασική μονάδα του DNA
![Page 5: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/5.jpg)
Δομή του νουκλεοτιδίου
N-γλυκοσυλικός δεσμός Phoebus Aaron Theodore Levene,
1929
![Page 6: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/6.jpg)
Cν (H2O)ν
Δομή του νουκλεοτιδίου
![Page 7: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/7.jpg)
Δομή του νουκλεοτιδίου
![Page 8: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/8.jpg)
νουκλεοσίδιο
Ονοματολογία
![Page 9: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/9.jpg)
Χωροπληρωτικό μοντέλο Δομικός χημικός τύπος
Δισδιάστατη vs Τρισδιάστατη δομή του νουκλεοτιδίου
![Page 10: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/10.jpg)
Λειτουργίες των νουκλεοτιδίων πέρα του δομικού τους ρόλου
![Page 11: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/11.jpg)
Στα μόρια DNA τα νουκλεοτίδια συνδέονται μεταξύ
τους με ομοιοπολικούς φωσφοδιεστερικούς
δεσμούς
![Page 12: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/12.jpg)
Στα μόρια DNA τα νουκλεοτίδια συνδέονται μεταξύ
τους με ομοιοπολικούς φωσφοδιεστερικούς
δεσμούς
![Page 13: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/13.jpg)
Οι πολυνουκλεοτιδικές αλυσίδες
χαρακτηρίζονται από:
δομική πολικότητα
(οργάνωση)
Αρνητικό φορτίο
Άτομα με δυνατότητα
σχηματισμού «δεσμών
υδρογόνου»: αλληλεπιδράσεις
με μόρια RNA, DNA,
πρωτεϊνών.
![Page 14: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/14.jpg)
Οργάνωση των πολυνουκλεοτιδικών αλυσίδων
στο DNA Δεσμοί σε μόρια DNA:
• ομοιοπολικοί φωσφοδιεστερικοί • υδρογόνου
![Page 15: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/15.jpg)
Σημασία της συμπληρωματικότητας
των βάσεων
• Κάθε έλικα του DNA μπορεί να αποτελέσει το καλούπι (οδηγίες) για τη σύνθεση ενός νέου κλώνου που θα είναι ταυτόσημος με τη συμπληρωματική της έλικα.
• Έτσι, κάθε μόριο DNA καθοδηγεί την ίδια του την αντιγραφή.
• Η συμπληρωματικότητα των βάσεων χρησιμοποιείται για τη σύνθεση μονόκλωνης αλυσίδας RNA (μεταγραφή).
![Page 16: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/16.jpg)
Οργάνωση των πολυνουκλεοτιδικών
αλυσίδων στο DNA με αντι-παράλληλη
διάταξη
![Page 17: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/17.jpg)
O
P
O - CH2 P Ο
O - CH2 P Ο
O
O
O
P
O - CH2 Ο
O - CH2 P Ο
O
O - CH2
P Ο
O
Ο
O - CH2
P Ο
Ο
5’
5’
3’
3’
O
O
O
…
Θα μπορούσαν οι κλώνοι να είναι παράλληλοι?
ΟΧΙ! Κλώνοι είναι αντιπαράλληλοι γιατί μόνο
D-ισομερή νουκλεοτιδίων υπάρχουν στην φύση!
![Page 18: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/18.jpg)
Σχηματίζει δεξιόστροφη έλικα.
Αντιπαράλληλες αλυσίδες.
Περίπου 10 βάσεις (base
pairs bp) ανά στροφή έλικας.
Μία στροφή της έλικας είναι
34 Å.
Οι βάσεις διατάσσονται στο
εσωτερικό, οι φωσφορικές
ομάδες στο εξωτερικό της
έλικας.
Περίληψη δομής DNA
![Page 19: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/19.jpg)
Τρισδιάστατη δομή και σταθερότητα DNA:
1. Δεσμοί υδρογόνου
![Page 20: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/20.jpg)
Τρισδιάστατη δομή και σταθερότητα DNA:
2. Δεσμοί Van der Waals – πλήρωση χώρου
![Page 21: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/21.jpg)
Τρισδιάστατη δομή και σταθερότητα DNA:
2. Δεσμοί Van der Waals – πλήρωση χώρου
![Page 22: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/22.jpg)
Τρισδιάστατη δομή και σταθερότητα DNA:
3. Δεσμοί υδρογόνου μεταξύ βάσεων σε
παράλληλα επίπεδα
![Page 23: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/23.jpg)
Πλεονεκτήματα της διπλής
έλικας
• Σταθερότητα: προστατεύει τις βάσεις από
προσβολή από υδατοδιαλυτά μόρια ή/και από
μόρια H2O.
• Παρέχει ευκολία στον μηχανισμό αντιγραφής.
![Page 24: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/24.jpg)
Αποδιάταξη του DNA
![Page 25: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/25.jpg)
Αποδιάταξη του DNA
H θερμοκρασία στην οποία το ½ του δείγματος DNA έχει
αποδιαταχθεί ονομάζεται «θερμοκρασία αποδιάταξης»
(melting temperature (Tm)
![Page 26: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/26.jpg)
Προφιλ αποδιάταξης DNA
DS
SS
SS
Ab260
Tm
Temperature
Το προφιλ αποδιάταξης μπορεί να διαφοροποιήσει δίκλωνο
(double stranded) από μονόκλωνο (single stranded) DNA
![Page 27: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/27.jpg)
Προφιλ αποδιάταξης DNA
Το προφιλ αποδιάταξης μπορεί να διαφοροποιήσει μόρια DNA με
διαφορετικό ποσοστό G-C και A-T.
• Περιοχές πλούσιες σε A═T αποδιατάσσονται πρώτα (χαμηλή Tm)
• Περιοχές πλούσιες σε G≡C αποδιατάσσονται τελευταία (υψηλή Tm)
DS
SS
GC rich DNA
AT rich DNA
GC/AT DNA
Tm1 Tm2 Tm3
![Page 28: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/28.jpg)
Δομή του μαθήματος
• Δομή του νουκλεοτιδίου
• Σύνθεση πολύ-νουκλεοτιδικών αλυσίδων
• Οργάνωση των πολυνουκλεοτιδικών αλυσίδων
στο DNA
• Αντιγραφή του DNA
• Εφαρμογή του μηχανισμού αντιγραφής στη
τεχνολογία PCR
![Page 29: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/29.jpg)
Ποιός είναι ο ρόλος του DNA?
![Page 30: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/30.jpg)
Πως μεταβιβάζεται με πιστότητα η γενετική πληροφορία?
Κάθε κλώνος του DNA παίζει το ρόλο εκμαγείου για την
σύνθεση ενός καινούργιου κλώνου.
![Page 31: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/31.jpg)
Κάθε κλώνος του DNA παίζει το ρόλο εκμαγείου για την
σύνθεση ενός καινούργιου κλώνου.
C – G A -T
Συμπληρωματικότητα Βάσεων:
![Page 32: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/32.jpg)
Η αντιγραφή του DNA είναι ημισυντηρητική
![Page 33: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/33.jpg)
Αντιγραφή στο E.coli
• Κυκλικό DNA περίπου 4.6x106 bp
• H αντιγραφή αρχίζει στην (1) αφετηρία αντιγραφής (origin of replication : OriC)
• H αντιγραφή κινείται προς τις 2 κατευθύνσεις μέχρι να συναντηθούν (θέση τερματισμού - termination site)
• H αντιγραφή επιτυγχάνεται μέσω μιας πρωτεϊνικής μηχανής (replisome).
• H διχάλα της αντιγραφής κινείται 1000 bp/sec – έτσι το χρωμόσωμα του E.coli αντιγράφεται σε 38 min = 2280 s.
![Page 34: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/34.jpg)
![Page 35: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/35.jpg)
Αντιγραφή στο E.coli
• Κυκλικό DNA περίπου 4.6x106 bp
• H αντιγραφή αρχίζει στην (1) αφετηρία αντιγραφής (origin of replication : OriC)
• H αντιγραφή κινείται προς τις 2 κατευθύνσεις μέχρι να συναντηθούν (θέση τερματισμού - termination site)
• H αντιγραφή επιτυγχάνεται μέσω μιας πρωτεϊνικής μηχανής (replisome).
• H διχάλα της αντιγραφής κινείται 1000 bp/sec – έτσι το χρωμόσωμα του E.coli αντιγράφεται σε 38 min = 2280 s.
![Page 36: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/36.jpg)
• Λαμβάνει χώρα στο κυτταρόπλασμα
• Η διαδικασία διακρίνεται σε έναρξη (initiation), επιμήκυνση (elongation) και τερματισμό (termination)
• Πρωτεϊνικά σύμπλοκα «καταλύουν» κάθε τμήμα της διαδικασίας.
Αντιγραφή στο E.coli
![Page 37: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/37.jpg)
• Λαμβάνει χώρα στον πυρήνα
• Η διαδικασία διακρίνεται σε έναρξη (initiation), επιμήκυνση (elongation) και τερματισμό (termination)
• Πρωτεϊνικά σύμπλοκα «καταλύουν» κάθε τμήμα της διαδικασίας
• Πολλαπλά σημεία έναρξης της αντιγραφής
Αντιγραφή στα ευκαρυωτικά
κύτταρα
![Page 38: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/38.jpg)
Η αντιγραφή στο ευκαρυωτικό κύτταρο ξεκινάει από
πολλαπλές ‘αφετηρίες αντιγραφής’ (origins of replication)
![Page 39: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/39.jpg)
![Page 40: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/40.jpg)
Κάθε κλώνος του DNA παίζει το ρόλο εκμαγείου για την
σύνθεση ενός καινούργιου κλώνου.
• εκκινητής
• dNTPs
• εκμαγείο
• πολυμεράση
• Κατεύθυνση
αντιγραφής 5’ 3’
![Page 41: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/41.jpg)
Μερικές από τις πρωτεΐνες που ρυθμίζουν την διαδικασία
της αντιγραφής στα ευκαρυωτικά κύτταρα
![Page 42: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/42.jpg)
DNA replication: a summary
![Page 43: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/43.jpg)
Μερικές από τις πρωτεϊνες που ρυθμίζουν την διαδικασία
της αντιγραφής
• Στον καθυστερημένο κλώνο, η κίνηση του ενζύμου γίνεται προς
αντίστροφη κατεύθυνση από την κατεύθυνση ξεδιπλώματος.
• Επομένως η αντιγραφή γίνεται τμηματικά (~1000): Okazaki
fragments
• Η DNA Pol απομακρύνει τον εκκινητή RNA
• DNA λιγκάση συνδέει τα τμήματα Okazaki
![Page 44: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/44.jpg)
![Page 45: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/45.jpg)
DNA replication: a summary
![Page 47: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/47.jpg)
a: εναρκτήρια (πριμάση)
d: Επιμήκυνση και επιδιόρθωση
e: Επιμήκυνση και επιδιόρθωση (μύκητες)
b: Επιδιόρθωση
g: Αντιγραφή μιτοχονδριακού DNΑ
Οι ευκαρυωτικές DNA πολυμεράσες
![Page 48: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/48.jpg)
Το πρόβλημα της αντιγραφής στα άκρα των χρωμοσωμάτων
![Page 49: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/49.jpg)
Το πρόβλημα της αντιγραφής στα άκρα των χρωμοσωμάτων
![Page 50: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/50.jpg)
Το πρόβλημα της αντιγραφής στα άκρα των χρωμοσωμάτων
![Page 51: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/51.jpg)
Tελομερή και τελομεράση
GGGGTTA
![Page 52: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/52.jpg)
Το πρόβλημα της αντιγραφής στα άκρα των χρωμοσωμάτων
λύνεται από τις τελομεράσες…
![Page 53: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/53.jpg)
Τα τρία στοιχεία αλληλουχιών που είναι απαραίτητα
για την σωστή αντιγραφή του DNA στα χρωμοσώματα.
![Page 54: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/54.jpg)
Δομή του μαθήματος
• Δομή του νουκλεοτιδίου
• Σύνθεση πολύ-νουκλεοτιδικών αλυσίδων
• Οργάνωση των πολυνουκλεοτιδικών αλυσίδων
στο DNA
• Αντιγραφή του DNA
• Εφαρμογή του μηχανισμού αντιγραφής στη
τεχνολογία PCR
![Page 55: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/55.jpg)
Melting
94 oC
Tem
per
atu
re
100
0
50
T i m e
5’ 3’
3’ 5’
![Page 56: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/56.jpg)
Melting
94 oC
Tem
per
atu
re
100
0
50
T i m e
3’ 5’
5’ 3’
Heat
![Page 57: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/57.jpg)
Melting
94 oC Annealing
Primers
50 oC
Extension
72 oC T
emp
erat
ure
100
0
50
T i m e
3’ 5’
5’ 3’ 5’
5’
Melting
94 oC
![Page 58: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/58.jpg)
Melting
94 oC
Melting
94 oC Annealing
Primers
50 oC
Extension
72 oC T
emp
erat
ure
100
0
50
T i m e
30x
3’ 5’
5’ 3’
Heat
Heat
5’
5’
5’
![Page 59: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/59.jpg)
Melting
94 oC
Melting
94 oC Annealing
Primers
50 oC
Extension
72 oC T
emp
erat
ure
100
0
50
T i m e
30x
3’ 5’
5’ 3’ 5’
5’
5’
5’
5’
5’
![Page 60: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/60.jpg)
Melting
94 oC
Melting
94 oC Annealing
Primers
50 oC
Extension
72 oC T
emp
erat
ure
100
0
50
T i m e
30x
3’ 5’
5’ 3’ 5’
5’
5’
5’
5’
5’
Heat
Heat
![Page 61: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/61.jpg)
Melting
94 oC
Melting
94 oC Annealing
Primers
50 oC
Extension
72 oC T
emp
erat
ure
100
0
50
T i m e
30x
3’ 5’
5’ 3’ 5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
![Page 62: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/62.jpg)
Fragments of
defined length
Melting
94 oC
Melting
94 oC Annealing
Primers
50 oC
Extension
72 oC T
emp
erat
ure
100
0
50
T i m e
30x
3’ 5’
5’ 3’ 5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
5’
![Page 63: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/63.jpg)
DNA Between The Primers Doubles With
Each Thermal Cycle
0
Cycles
Number
1
3
8
2
4
1
2
4
16
5
32
6
64
![Page 64: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/64.jpg)
Περισσότεροι κύκλοι= περισσότερο DNA
Number of cycles
0 10 15 20 25 30
Size
Marker
![Page 65: Η δομή του DNA. H αντιγραφή του γενετικο υλικο · •Κυκλικ DNA περίπου 4.6x106 bp •H αντιγραφή αρχίζει στην (1)](https://reader034.vdocuments.net/reader034/viewer/2022042806/5f73429cdd46c674ef4068c1/html5/thumbnails/65.jpg)