Az újszülöttkori galactosaemia szűrés eredményei és
differenciáldiagnosztikai lehetőségei
Balázs Imre
SZTE ÁOK Gyermekgyógyászati Klinika és Gyermekegészségügyi CentrumAnyagcsere-Szűrő Laboratórium
Magyar Orvosi Laboratóriumi Szakdolgozók EgyesületeIX. Nagygyűlés; Bük, 2005. szeptember 29-30.
A kötelező egészségbiztosítás ellátásairól szóló
1997. évi LXXXIII. törvény 83.§ ( 3 )bekezdésének a) és b) pontjában
megfogalmazottak alapjánPhenylketonuriaGalactosaemiaHypothyreosisBiotinidase hiány
betegségekre van kötelező szűrés.
Mire irányul?
A veleszületett anyagcsere betegségek korai diagnosztizálására.
Klasszikus angol meghatározása:
Egy enzim vagy hormon aktivitásának monogenetikus működési zavara az intermedier anyagcsere folyamatban.
Országos szűrőcentrumok
1. Fővárosi Önkormányzat Budai Gyermekkórháza
2. SZTE Gyermekklinika
Országos szűrőcentrumok
1. SZTE Gyermekklinika
2. Fővárosi Önkormányzat Budai Gyermekkórháza
Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:
Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem
NÉV:
NÉV:
Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:
Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem
NÉV:
NÉV:
Schleicher-Schüll szűrőpapír - Guthrie kártya
NÉV:
Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:
Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem
NÉV:
Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:
Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem
NÉV:
NÉV:
Schleicher-Schüll szűrőpapír - Guthrie kártya
Mi a galactosaémia?Enzimhiányon alapuló veleszületett anyagcsere betegség.
/ autoszomális, recesszív /
• Galaktóz Szőlőcukor
Tejcukor ( Laktóz )
Vékonybél bolyhainak tövében laktáz enzim
Glükóz
( diszaharid )
monoszaharid monoszaharid
monoszaharid
Története:
1908 Von Ruess galactosaemia felfedezése/ megfigyelés anyatej táplálásnál /
1917 Tejmentes diéta bevezetése
1935 Mason és Turner Leroir cukor metabolizmusának leírása / 1970 Nobel dij /
1956 Galactosaemia génjének felfedezése
1963 Guthrie és Paigen újszülöttkori szűrés bevezetése
1970 SZOTE szűrés megkezdése
1975 Kötelező szűrés bevezetése
ATP galaktóz aldózreduktáz galaktitolNADPH + H NADP
galaktokinázADP
galaktóz-1-PUTP
gal.-1-P uridil transzf. Weidemann
P ~ P UDP galaktóz
UDP gal.-4-epimeráz
UDP glükóz Beutler
UDPG pirofoszforiláz
glükóz-1-P
- Galaktokináz enzimhiány:újszülöttkorban tünetmentestejtáplálás után galactosaemia, cataractafelnőttkorban a galaktitól miatt vakság
-Galaktóz-1-PUT enzimhiány:/ klasszikus galactosaemia /
hányás, hasmenés, elhúzódó sárgaságveseelégtelenség, máj megnagyobbodásfejlődési zavar, cataractamentális retardáció
-Duarte - galactosaemia
Galactosaemia újszülöttkori tömegszűrése Guthrie metabolitgátláson alapulómikrobiológiai módszerével történik.
Elve: galaktózra érzékeny mutáns E. colibaktérium-törzset tartalmazó agaróz táptalajra helyezzük fel a vérrel átitatott szűrőpapír korongokat
„ Mikrobiológiai „tömegszűrés”
Zavaró tényezők:
Ál-pozitív eredmény:1. ha olyan antibiotikumot kapott az
újszülött ami gátolja az E-coli növekedését2. bármilyen szennyezés ami kioltási zónát ad
Ál-negatív eredmény:1. ha vérmintát a tejtáplálás megkezdése előtt
vették le2. ha a szűrőpapír nem volt megfelelően átitatva3. ha az újszülött transzfúziót kapott
ATP galaktóz aldózreduktáz galaktitolNADPH + H NADP
galaktokinázADP
galaktóz-1-PUTP
gal.-1-P uridil transzf. Weidemann
P ~ P UDP galaktóz
UDP gal.-4-epimeráz
UDP glükóz Beutler
UDPG pirofoszforiláz
glükóz-1-P
Weidemann teszt: galaktóz 30 mg % fölött
Elve: A galaktóz – dehidrogenáz ( Gal-DH )
enzim a galaktózról a NAD-ra hidrogént
visz át, fluoreszkáló NADH-t képezve.
Kontroll (mg % ) Minta
20 25 30 35 40
Beutler próba: a galaktgalaktóózz--11--foszffoszfáátt--uridiluridil--transzfertranszferáázz ( G-1-PUT ) enzim hiányának kimutatása a klasszikusgalaktozémia diagnózisának megerősítésére
Minta: heparinnal levett teljes vér ( vérgáz-kapillárisban ) azonos körülményekközött levett, tárolt és szállítottegészséges kontroll minta
Elve: G-1-PUT jelenlétében a NADPredukálódik fluoreszkáló NADPH-tképezve
Vér + galaktóz-1-foszfát + NADP
30‘ 60‘ 90‘ 120‘
Kontroll:
Minta:
Idő ( perc ) 0 30 60 90 120
Kontroll
Galactosaemiaheterzygote
Galactosemic
Duarte variant
Duarte variantheterozygote
összgalaktóz — totál galaktóz mérése/ galaktóz és galaktóz-1- foszfát /
alkalikus foszfatázGalaktót –1- foszfát Galaktóz
galaktóz dehidrogenázGalaktóz + NAD+H2O Galaktono (1,4) lakton +
NADH + H
diaphoraseNADH + NBT ( sárga ) NBT ( ibolya ) + NAD
/ nitroblu-terazolium /
Specifikus enzimvizsgálatok: galactokinase
gal.-1-P uridil transzferase
Németország
A szűrésből kimaradó populációk pl.:
roma
török
észak afrikai
1956 Galactosaemia génjének felfedezéseMa már több száz mutációt ismerünk
Galactokinase: P28T
G1PTU enzim: Q188RK285N
Duarte: G1391AN314D
THE END
Köszönöm a figyelmet!