Download - Bui Laurent
H. Bobby Gaspar,1, Emma Bjorkegren, Kate Parsley, Kimberly C. Gilmour, Doug King, Joanna Sinclair, Fang Zhang, Aris Giannakopoulos, Stuart Adams, Lynette D. Fairbanks, Jane Gaspar, Lesley Henderson, Jin Hua Xu-
Bayford, E. Graham Davies, Paul A. Veys, Christine Kinnon,1 and Adrian J. Thrasher1
Molecular Immunology Unit, Institute of Child Health, University College London, 30, Guilford Street, London WC1N
1EH, UK Department of Clinical Immunology and Bone Marrow Transplantation, Great Ormond Street Hospital NHS Trust,
Great Ormond Street, London WC1N JH, UKPurine Research Laboratory, Guys and St Thomas’ Hospital,
London Bridge Road, London SE RT, UKBui Laurent
Introduction
ADA = Enzyme qui catalyse l'hydrolyse de l'adénosine en inosine avec l'élimination de l'ammoniaque.
L'inosine elle-même donnant l'hypoxanthine sous l'influence d'une purine nucléoside phosphorylase. L'inhibition de l'adénosine déaminase tend à augmenter la concentration d'adénosine.
ADA-SCID
Un déficit de l’Adenosine DéAminase (ADA) entraine un développement anormal des cellules T, B et NK.
Ce qui donne un déficit immunitaire combiné sévère (SCID, severe combined immunodeficiency disorder).
Maladie génétique rare qui sans traitement cause des infections chroniques et des troubles du développement pouvant amener à la mort dans les premières années de la vie.
Traitements possiblesADA-SCID patient
Untreated
DeathInfectio
n
HSCTransplantation
PEG-ADA Gene Therapy
Survival > 85%Good
immunological and
Biochemical correction
Overall survival goodVariable immun
reconstitution Lymphopenia
Defects LT< Thymus output
Susceptibility to Viral infection
?
Thérapie GéniqueTri des cellules CD34+
de la moelle osseuse du patient (PEG-ADA)
25-30 % de transduction efficace
on réinjecte 1,4 M de CD34+ADA+/kg
Arrêt pendant 1 mois du traitement PEG-ADA
Après 2j d’un traitement Melphalan
Patient 1 (P1)
Diagnostiquer ADA-SCID à 2 mois.Sans donneur compatible => débute le
traitement PEG-ADA.Après 3 ans de traitement :
(+)- Correction
Métabolique- Statut clinique bon- Pas de pb d’infection
(-)- Lymphopénie T- Production faible d’Ig- Mauvais
fonctionnement Thymique
- Disparition des cellules T naïves
BioéthiqueThérapie génique approuvée par : - UK Gene Therapy Advisory Committee - Medecine and Health Core Control Agency - Local Institutional Research Ethics Committee
Condition pour participer au Programme : - Confirmation ADA-SCID (Génétique ou
Biochimique) - Pas de greffe possible - Echec du traitement PEG-ADA - Accord parental
Après 2 ans de Thérapie génique les premiers
résultats
Immune Reconstitution
Diversity of the T cell Repertoire
Metabolic Correction
Immune Reconstitution (1)
Immune Reconstitution (2)
Profil de prolifération normal des LT après stimulation par CD3 et PHA (phytohémaglutinine)
Augmentation des LT, NK, LT naïfs nouvellement formésRéinitiation de la Thymopoiëse
Diversity of the T cell Repertoire
Après l’analyse des TCR Vβ on a montré qu’il y avait un usage de tous les segments Vβ (40aine)
Les spectratypes du CDR3 des TCR Vβ montre une évolution vers la complexité du répertoire T
On ne trouve pas d’anomalie ou de pathologie lié à une prolifération non contrôlée des lymphocytes
Metabolic Correction
Après 1 an de traitement génique on observe une activité ADA des érythrocytes = 3-5 nmol/mg Hb/h
Cela suggère que la thérapie a amené des GR exprimant des ADA de façon stable
Proviral Copy Number and Lineage-Specific Integration
Analysis
Analysis of proviral integration sites
Les produits de PCR montre une multitude de site d’intégration
Le séquençage de chaque intégrant est en cours
ConclusionMise en place d’un protocole d’autogreffe pour la
thérapie génique = essai clinique.
Après 2 ans de thérapie = Tableau + (LT naïfs en hausse, prolifération normale à une stimulation des LT, TREC, …)
Rétablissement de l’immunité humorale faible (peut être plus longue due au Lthelper)
=> On continue la surveillance clinique