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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA
Efecto del extracto hidroalcohólico de Salvia
hispanica “chía” sobre la absorción intestinal de la
glucosa en Rattus rattus var. Albinus.
TESIS
PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE
BIÓLOGO - MICROBIOLOGO
AUTORA: Br. Reyna Isabel Simón Gómez
ASESOR: Ms.C. Orlando Pretel Sevillano
TRUJILLO – PERU
2016
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Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis.
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AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. ORLANDO GONZÁLES NIEVES
RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. RUBÉN VERA VELEZ
VICE-RECTOR ACADÉMICO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. STEBAN ALEJANDRO ILICH ZERPA
SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDA NACIONAL DE TRUJILLO
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AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dr. MARCO LEONCIO SALAZAR CASTILLO
DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dr. SANTOS ENRIQUE PADILLA SAGÁSTEGUI
SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dra. EVA ELIZABETH VILLANUEVA TARAZONA
DIRECTORA DE ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
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DEDICATORIA
A Dios todopoderoso, por
haberme dado la vida e iluminarla
día a día.
A mí abnegada madre Florencia y mí
querido padre Julio, por su cariño,
apoyo incondicional y por su sacrificio
para hacer de mí una profesional con
valores humanos para servir con
emoción social a los seres humanos
que me rodean.
A mi abuelita Antonia quien
siempre me brinda su bendición y
me incentiva a seguir adelante.
A mis amigos Mirelly y Manuel con
quienes comparto mis alegrías y
tristezas, por su paciencia y consejos.
A Irving por ser mi ejemplo de
lucha y sacrificio constante, a
pesar de la distancia eres mi
punto de apoyo.
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AGRADECIMIENTO
Al profesor asesor Ms.C. Orlando Pretel Sevillano, de la Universidad
Nacional de Trujillo por sus orientaciones y apoyo incondicional para la
realización del presente trabajo de investigación.
Al profesor Carlos Quijano Jara, de la Universidad Nacional de Trujillo por su
orientaciones brindadas en para la realización del presente trabajo.
A los servicios brindados por el Departamento Técnico de Fisiología y
Bioquímica Animal a cargo de la Mblga. Doris Asmat y el Tecn. Víctor Saldaña.
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PRESENTACIÓN
Señores miembros del jurado:
En cumplimiento con las disposiciones establecidas en el reglamento de
grados y títulos de la Universidad Nacional de Trujillo, pongo a vuestra
consideración y criterio el presente trabajo de tesis titulada: Efecto del extracto
hidroalcohólico de Salvia hispanica “chía” sobre la absorción intestinal de la
glucosa en Rattus rattus var. Albinus, con lo cual pretendo obtener el título de
Biólogo-Microbiólogo.
Br. Reyna Isabel Simón Gómez.
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MIEMBROS DEL JURADO
Dr. FELIX CASTILLO VIERA
PRESIDENTE
Dr. MARCO LEONCIO SALAZAR CASTILLO
SECRETARIO
Ms.C. ORLANDO PRETEL SEVILLANO
VOCAL
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APROBACION
Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que el
presente informe de tesis ha cumplido con los requisitos formales y
fundamentales, siendo aprobado por unanimidad.
Dr. FELIX CASTILLO VIERA
PRESIDENTE
Dr. MARCO LEONCIO SALAZAR CASTILLO SECRETARIO
Ms.C. ORLANDO PRETEL SEVILLANO VOCAL
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DEL ASESOR
El que suscribe, asesor de la presente tesis titulada: Efecto del extracto
hidroalcohólico de Salvia hispanica “chía” sobre la absorción intestinal de la
glucosa en Rattus rattus var. Albinus.
CERTIFICA:
Que la investigación ha sido desarrollada de conformidad con su
correspondiente proyecto de tesis y con las orientaciones pertinentes.
El informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo las observaciones
y sugerencias alcanzadas. Por lo tanto autorizo al bachiller Reyna Isabel Simón
Gómez a continuar con los procedimientos según sus fines.
Ms.C. Orlando Pretel Sevillano
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INDICE
AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ii
AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS iii
DEDICATORIA iv
AGRADECIMIENTO v
PRESENTACION vi
MIENBROS DEL JURADO vii
APROBACION viii
DEL ASESOR ix
INDICE x
RESUMEN xiii
ABSTRACT xiv
I. INTRODUCCION 1
II. MATERIAL Y METODO 7
2. Material biológico 7
3. Procedimiento 7
3.1. Preparación de harina de las semillas de Salvia hispanica “chía” 7
3.2. Obtención de extracto de las semillas de Salvia hispanica “chía”
3.3. Disección de los ejemplares Rattus rattus var. Albinus 7
3.4. Preparación del intestino delgado de los ejemplares
Rattus rattus var. Albinus 8
3.5. Evaluación de las concentraciones 100, 300 y 500 mg/dL del
extracto hidroalcohólico de semillas de Salvia hispanica sobre
la absorción intestinal de glucosa en Rattus rattus var. Albinus 8
3.5.1. Toma de muestra 8
3.5.2. Análisis de glucose 9
4. Análisis de datos 9
III.RESULTADOS 10
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Fig. 1. Concentración de glucosa promedio de grupos controles experimentales en duodeno
de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos horas 10
Fig. 2. Concentración de glucosa promedio de grupos controles experimentales en yeyuno
de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos horas 11
Fig. 3. Concentración de glucosa promedio de grupos controles experimentales en íleon de
Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos horas 12
IV.DISCUSION 13
V. CONCLUSIONES 17
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 18
ANEXOS 23
Anexo 1. Promedios de las concentraciones de glucosa en duodeno de Rattus rattus var.
Albinus medidos cada media hora durante dos horas 24
Anexo 2. Promedios de las concentraciones de glucosa en yeyuno de Rattus rattus var.
Albinus medidos cada media hora durante dos horas 25
Anexo 3. Promedios de las concentraciones de glucosa en íleon de Rattus rattus var. Albinus
medidos cada media hora durante dos horas 26
Anexo 4. Filtración del extracto hidroalcohólico de las semillas de
Salvia hispanica “chía” 27
Anexo 5. Preparación del intestino delgado de los ejemplares Rattus rattus var. Albinus en
el sistema de incubación 28
Anexo 6. Evaluación del efecto de las concentraciones 100, 300, 500 mg/dl del extracto
hidroalcohólico de las semillas de Salvia hispanica “chía” 29
Anexo 7. Variación de las concentraciones de glucosa en duodeno de Rattus rattus var.
Albinus en los diferentes grupos experimentales: Control negativo (sol. Tyrode); Control
positivo con GLUCOSA10%; Experimental 1: GLUCOSA10% + 100mg/kg; Experimental 2:
GLUCOSA10% + 300mg/kg y Experimental 3: GLUCOSA10% + 500mg/kg 30
Anexo 8. Variación de las concentraciones de glucosa en yeyuno de Rattus rattus var.
Albinus en los diferentes grupos experimentales: Control negativo (sol. Tyrode); Control
positivo con GLUCOSA10%; Experimental 1: GLUCOSA10% + 100mg/kg; Experimental 2:
GLUCOSA10% + 300mg/kg y Experimental 3: GLUCOSA10% + 500mg/kg 31
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Anexo 9. Variación de las concentraciones de glucosa en íleon de Rattus rattus var. Albinus
en los diferentes grupos experimentales: Control negativo (sol. Tyrode); Control positivo con
GLUCOSA10%; Experimental 1: GLUCOSA10% + 100mg/kg; Experimental 2: GLUCOSA10% +
300mg/kg y Experimental 3: GLUCOSA10% + 500mg/kg 32
Anexo 10. Variación de las concentraciones de glucosa en duodeno de Rattus rattus var.
Albinus medidos cada media hora durante dos horas 33
Anexo 11. Variación de las concentraciones de glucosa en yeyuno de Rattus rattus var.
Albinus medidos cada media hora durante dos horas 34
Anexo 12. Variación de las concentraciones de glucosa en íleon de Rattus rattus var. Albinus
medidos cada media hora durante dos horas 35
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RESUMEN
El propósito de la presente investigación fue determinar el efecto del extracto
hidroalcohólico de Salvia hipanica sobre la absorción intestinal de la glucosa en Rattus
rattus var. Albinus, por lo cual se obtuvo el extracto por maceración hidroalcohólica de
harina de semillas de “chía”, luego de filtrado y evaporado el solvente.
Se trabajó en cinco grupos de ratas con cinco individuos cada uno. Un grupo control
negativo, un control positivo y experimentales a dosis diferentes del extracto de chía;
cada individuo fue anestesiado con pentobarbital sódico y mediante disección se
extrajo el intestino delgado dividiéndolo en duodeno, yeyuno e íleon.
Cada porción individualmente fue colocado en un sistema de incubación a 37°C en
solución Tyrode con oxigenación continua, el grupo control negativo sin tratamiento
alguno, el control positivo con glucosa al 10% y los experimentales con glucosa al 10%
más 100, 300 y 500mg/dL del extracto hidroalcohólico de “chía” respectivamente. Se
obtuvieron muestras del líquido contenido en cada porción del intestino, a los 0, 30, 60,
90 y 120 minutos, realizándose el dosaje de glucosa leído en espectrofotómetro
SPECTRONIC 20 a 530 nm.
Se encontró que el extracto hidroalcohólico de semillas de Salvia hispanica a
concentración de 500 mg /dL disminuye en forma significativa la absorción intestinal
de la glucosa en la porción duodenal de Rattus rattus var. Albinus mientras que en el
yeyuno e íleon la absorción de glucosa no fue significativa.
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ABSTRACT
The purpose of this study was to determine the effect of alcoholic extract hipanica Salvia on
the intestinal absorption of glucose in Rattus rattus var. Albinus
They worked in five groups of rats with five individuals each. A negative control group, positive
and experimental at different doses of the extract chia Control; each individual was
anesthetized with sodium pentobarbital and dissected small intestine dividing it into
duodenum, jejunum and ileum was extracted.
Each serving individual was placed in a system of incubation at 37 ° C in Tyrode solution with
continuous oxygenation, the negative control group without treatment, the positive control
with 10% glucose and experimental with 10% glucose plus 100, 300 and 500mg / dL of
alcoholic extract of "chia" respectively.
Samples of liquid contained in each portion of the intestine, at 0, 30, 60, 90 and 120 minutes,
performing the assay of glucose read in spectrophotometer SPECTRONIC 20-530 nm were
obtained. It was found that the hydroalcoholic extract of seeds of Salvia hispanica a
concentration of 500 mg / dL significantly decreases intestinal absorption of glucose in the
duodenal portion Rattus rattus var. Albinus while in the jejunum and ileum glucose uptake
was not significant.
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I. INTRODUCCION
La diabetes mellitus (DM) es un desorden metabólico resultado de la deficiencia en
la secreción de insulina, en la efectividad de su acción, o de ambas. Como
consecuencia se produce hiperglucemia crónica con disturbios en el metabolismo de
los carbohidratos, grasas y proteínas, constituyéndose un problema de salud pública
debido a que su prevalencia e incidencia están en incremento; tal es así que para el
año 2000, cerca de 150 millones de personas a nivel mundial padecían de DM y se
estima que para el año 2025 esta cifra se incrementará a cerca de 300 millones
diagnosticados1. Esta enfermedad produce un impacto socioeconómico importante
en el país que se traduce en una gran demanda de los servicios ambulatorios,
hospitalización prolongada, ausentismo laboral, discapacidad y mortalidad producto
de las complicaciones agudas y crónicas 2,3.
La diabetes mellitus es una de las enfermedades crónicas y discapacitantes más
prevalentes en el mundo, constituye un problema de salud pública creciente, a tal
punto de ser considerada una epidemia de carácter mundial. En el Perú se observa
un fenómeno similar, con prevalencia de diabetes mellitus tipo 2 variando entre el
1 y el 8%, siendo Lima y Piura, las regiones más afectadas 4.Se menciona que la
diabetes mellitus afecta a más de un millón de peruanos y menos de la mitad han
sido diagnosticados 5.
Una de las características principales de la diabetes es que durante su evolución
aparecen complicaciones crónicas como angiopatias, ateroesclerosis, hipertensión,
neuropatías entre otros que son, en última instancia, la causa principal de la
morbimortalidad en pacientes diabéticos y provocan una importante disminución de
la calidad de vida de éstos. Asimismo, estas complicaciones son las responsables de
una elevada proporción de los gastos generados por la enfermedad 6.
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Comercialmente se dispone de medicamentos para el tratamiento de la diabetes
mellitus tipo 2; sin embargo, los medicamentos recientemente desarrollados son
generalmente menos potentes, a menudo menos efectivos en disminuir la
glucemia, más caros y además se asocian a eventos adversos serios 7.
En el 2006 y 2007 se evidenció que las glitazonas no solo incrementaron el riesgo
de insuficiencia cardiaca, sino también de infarto de miocardio y el riesgo de
fracturas óseas en mujeres 8, 9.Además, recientes estudios clínicos han demostrado
que los análogos de la insulina, y en particular la insulina glargina, incrementan el
riesgo de cáncer de mama. El nuevo conocimiento generado sobre la seguridad de
los fármacos hipoglicemiantes ha producido que la Food Drug
Administration (FDA) y la European Medicines Agency (EMEA) evalúen estos
fármacos, realicen nuevas advertencias, contraindicaciones y retiro de
medicamentos para su comercialización 10.
Generalmente para el manejo terapéutico del control de la diabetes mellitus tipo
2 (DM2) se utilizan medicamentos con diferentes estructuras químicas y
mecanismos de acción, que tienen el propósito de normalizar los niveles de
glucosa en sangre. Los tratamientos son administrados de por vida, lo que
representa un alto costo económico. Por otra parte, la aparición de efectos
adversos o reacciones de hipersensibilidad son situaciones que obligan a
suspender el tratamiento o cambiarlo constantemente 11.
El control metabólico de la diabetes tiene como objetivo la normalización de la
glucemia, intentando aliviar los síntomas derivados de la hiperglucemia y evitar la
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aparición, o al menos retrasar, la evolución de dichas complicaciones. Uno de los
aspectos que, hoy día, se siguen estudiando es el impacto de los diferentes
abordajes terapéuticos de la DM2 sobre su evolución 12.
Las plantas medicinales se convierten en una alternativa válida con el fin de
mejorar la calidad de vida de quienes padecen la más importante enfermedad
relacionada con el páncreas endocrino; resultando de particular interés aquellas
que manifiesten tanto propiedades hipoglucemiantes como antioxidantes. Ciertas
especies empleadas popularmente para el tratamiento de la diabetes han sido
probadas científicamente con el fin de corroborar esta bioactividad 13, 14.
Salvia hispanica L., comúnmente conocido como “chía”, es una planta anual que
pertenece a la familia de Lamiaceae. Proviniendo en tales países como Guatemala,
México y Colombia, la semillas de “chía” se usó y se consumió como una fuente de
energía e incorporado en varios alimentos en la dieta de la civilización azteca
indígena15.
El contenido del lípido en semillas de “chía” varía del 25% al 40%, con el 60% de
los lípidos totales arreglado de ALA (n-3) y el 20% formado de ácido linoleico (n-
6) 16. Cuando el aceite se extrae de la semilla de chía, lo que permanece en una
concentración significativa de fibra alimenticia (33.9g/100g) y proteína (17g/100g)
17.
De fibra alimenticia total, la mayor fracción (el 53.45g/100g) comprende la fibra
insoluble, que juega un papel en saciedad y función del intestino apropiada 18. Por
su alto contenido en magnesio y compuestos fenólicos (principalmente quercetina
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y kaempferol), la semilla de “chía” ofrece la capacidad de antioxidante significativa
19, mientras que el contenido de calcio y potasio sugiere que puede ser provechoso
en el control tensión arterial alta 20.
En nuestro país, de acuerdo a un estudio de alcance nacional realizado por el
Instituto Nacional de Salud, la prevalencia de Diabetes Mellitus en mayores de 20
años para el año 2005 fue de 2,8%; asimismo, los estudios de factores de riesgo
para enfermedades no transmisibles (FRENT) realizados por la Dirección General
de Epidemiología encontraron una prevalencia de Diabetes mellitus de 2,8 a 3,9%
en ciudades de la costa y sierra (Lima, Callao, Villa el Salvador, Trujillo,
Huancayo),es esperable un incremento de los casos de DM y de consecuencias
fatales21.
Los medicamentos para el control glicémico interfieren con la acción de los
enzimas alfa- glicosidasas intestinales sobre los carbohidratos complejos y
disminuyen la absorción de glucosa por el intestino 22; En la actualidad y después
de numerosos estudios se han revelado las notables propiedades nutricionales de
la semilla de “chía”, por lo que su consumo es recomendable debido a su alto
contenido en aceite, proteínas, antioxidantes, minerales y fibra dietética 23.
La semilla posee 25-38% de aceite, el cual contiene un alto contenido de ácidos
grasos omega-3 y omega-6 (principalmente ácido linolénico 50-67% y ácido
linoleico 17-27%, respectivamente); 15 g de chía aportan más de 3000 mg de
Omega 3 y se recomienda el consumo de mínimo 3g de omega 3 como mecanismo
de prevención para el desarrollo de enfermedades cardiovasculares 24.
El ácido graso Omega – 6 derivan del ácido linoleico el cual se encuentra
asociado a los fosfolípidos de membrana, además puede ser oxidado a una
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variedad de compuestos eicosanoides importantes en la señalización célula –
célula. Tiene un alto contenido de fibra (18-30%) controla la ansiedad y el apetito
ya que retrasa el vaciamiento gástrico y por tanto disminuiría la liberación de
glucosa al torrente sanguíneo, siendo así un aliado para personas con diabetes
mellitus II. 25
En la actualidad se siguen usando los medicamentos que para el control
glucémico y son de tres tipos: insulina, hipoglucemiantes orales y
antihiperglicemiantes. Entre estos últimos se encuentran la acarbosa que se
obtiene de Actinoplanes utahensis y el fibraguar de la Cyamopsis tetragonoloba,
que interfieren la acción de las enzimas alfa glicosidasas intestinales sobre los
carbohidratos complejos y disminuyen la absorción de glucosa por el intestino 11.
Resulta importante para los pacientes diabéticos poder contar con fármacos
capaces de controlar los estados hiperglicémicos.
La semilla de “chía” es fuente de calcio que es necesario para la contracción
muscular, coagulación sanguínea, trasmisión de impulsos nerviosos, secreción
hormonal, presión arterial y activación enzimática y fuente de magnesio para que
la insulina lleve la glucosa dentro de las células y para el uso de la misma 26.
Además, la chía contiene una alta proporción de compuestos antioxidantes
(flavonoides, tocoferol, beta-caroteno), por lo que evita la rancidez de los ácidos
grasos insaturados en los alimentos que la contiene 27.
Por sus beneficios resulta de suma importancia el desarrollo de su estudio sobre
propiedades antidiabéticas que no perjudiquen nuestro sistema, siendo los
objetivos:
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- Evaluar el efecto del extracto hidroalcohólico de Salvia hispanica “chía” sobre la
absorción intestinal de la glucosa en Rattus rattus var. Albinus.
- Determinar el tiempo de la efectividad del extracto hidroalcohólico de Salvia
hispanica “chía” sobre la absorción intestinal de la glucosa en Rattus rattus var.
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II. MATERIAL Y METODOS
2 Material de estudio
1.1. Muestra biológica
Rattus rattus var. Albinus de la ciudad de Trujillo
Semillas de Salvia hispanica “chía”
3 Procedimiento
3.1. Preparación de harina de las semillas de Salvia hispanica “chía”.
Las semillas de “chía” fueron limpiadas de los residuos orgánicos e
inorgánicos, luego fueron molidas dos veces con molino de mano.
3.2. Obtención del extracto de las semillas de Salvia hispanica “chía”.
El polvo fino obtenido, se procedió a macerar en alcohol al 70 % en
proporción de 1:4, en un frasco ámbar por 6 días, con agitación de 5
minutos diarios. Después del tiempo transcurrido, primero se colocó el
macerado en gasa estéril, luego filtrado (papel filtro Wathman Nº 1) y el
líquido obtenido se sometió a evaporación mediante flujo de aire
constante para eliminar todo el líquido extractante (alcohol y agua) 28.
Finalmente el extracto concentrado se guardó en refrigeración hasta su
uso en el presente proyecto de investigación (Ver Anexo 4).
3.3. Disección de los ejemplares Rattus rattus var. Albinus.
Las ratas en estudio estuvieron en ayuno (12 horas), fueron anestesiadas
con pentobarbital sódico (Halatal) con una dosis de 1 mL por kilogramo
de peso corporal y se les extrajo todo el intestino delgado, el cual fue
lavado con solución de Tyrode para eliminar la sangre 29.
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3.4. Preparación del intestino delgado de los ejemplares Rattus rattus var.
Albinus.
El intestino de cada rata se dividió en tres porciones (duodeno, yeyuno e
íleon) cada uno de 10 cm y cada parte se evertido de manera que las
vellosidades queden hacia fuera, colocados en un sistema de incubación
a 37 °C y con aireación constante; las porciones tuvieron los extremos
fuera del contenedor atados con hilo y sostenidos con cinta adhesiva30
según el diseño experimental estas porciones fueron llenadas con
solución de Tyrode con la siguiente composición (en g/L): NaCl 8.00, KCl
0.40, CaCl2. 2H2O 0.20, MgCl2 0.10, NaHCO3 1.00 NaH2PO4 0.05 31(Ver
Anexo 5).
3.5. Evaluación de las concentraciones 100, 300 y 500 mg/dL del extracto
hidroalcohólico de semillas de Salvia hispanica sobre la absorción
intestinal de glucosa en Rattus rattus var. Albinus.
*: Solución de Tyrode modificado (sin glucosa)
**: Concentración del extracto hidroalcohólico de Salvia hispanica.
3.5.1. Toma de muestra.
De cada porción de intestino (duodeno, yeyuno e íleon) se
Grupos Intestino Contenedor Ejemplares
Control negativo Solución de
Tyrode*
Solución de
Tyrode*
5 ratas
Control positivo Solución de
Tyrode*
Glucosa 10%
5 ratas
Experimental 1
Solución de
Tyrode*
Glucosa
10%+100mg/dl**
5 ratas
Experimental 2 Solución de
Tyrode*
Glucosa
10%+300mg/dl**
5 ratas
Experimental 3 Solución de
Tyrode*
Glucosa
10%+500mg/dl**
5 ratas
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procedió a tomar una muestra de 0.5 mL del contenido con una
pipeta Pasteur y colocadas en un vial para el dosaje de glucosa.
El tiempo para cada toma de muestra fue de 0, 30, 60, 90 y 120
minutos 32.
3.5.2. Análisis de glucosa
Las muestras de cada porción del intestino (duodeno, yeyuno e
íleon) estas fueron analizadas con el reactivo para glucosa
(Glicemia enzimática, WIENER LAB.) que dió una reacción de color
y se midió en espectrofotómetro a una longitud de onda de 530nm
(Ver Anexo 6).
4. Análisis de datos
El análisis estadístico se llevó a cabo en base al paquete estadístico STATGRAF
aplicando la prueba de Análisis de Varianza Unidireccional (ANOVA) para ver la
respuesta de la concentración de 100, 300 y 500 mg/dl del extracto hidroalcohólico
de semillas de “chía” sobre la absorción intestinal de la glucosa de los ejemplares.
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III. RESULTADOS
Se determinó las concentraciones de glucosa del intestino delgado, en la porción del duodeno
la concentración de 500mg/dl del extracto hidroalcohólico de Salvia hipanica “chía” disminuyó
la glucosa en comparación con el grupo control positivo, las concentraciones de glucosa varían
con el tiempo posterior a 60 minutos, mientras en yeyuno e íleon de los animales de
experimentación (Rattus rattus var. albinus) no hubo absorción intestinal de glucosa.
Fig. 1. Concentración de glucosa promedio de grupos controles experimentales en
duodeno de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos
horas.
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Fig. 2. Concentración de glucosa promedio de grupos controles experimentales en
yeyuno de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos
horas.
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Fig. 3. Concentración de glucosa promedio de grupos controles experimentales en íleon
de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos horas.
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IV. DISCUSION
Las plantas son consideradas un laboratorio biosintético, que elaboran
metabolitos primarios: carbohidratos, proteínas, lípidos; participando en la
actividad celular de todo ser vivo además sintetiza principios activos, como es en
la semilla de “chía” en la que se encuentran flavonoides y otros antioxidantes
como el ácido clorogénico, ácido cafeíco, miricetina, kaempferol, quercetina,
betacaroteno (vitamina A) y tocoferol (vitamina E). Considerados los metabolitos
secundarios; dichos compuestos difieren por su carácter químico, estructura
potencial y concentración, lo que producen ciertos efectos beneficiosos en el
organismo 33.
Sobre la biodisponibilidad absorción y metabolismo poco se conoce, pero es
sabido que los diferentes grupos de flavonoides poseen distintas propiedades
farmacocinéticas. Los compuestos solubles son metabolizados en el tracto
gastrointestinal. Las agliconas libres como la quercetina, genisteína y compuestos
simples como los ácidos ferúlico, cafeico y p-cumárico son absorbidos a través de
la mucosa del intestino delgado, determinado mediante ensayos experimentales
en ratas 34 de estos compuestos bioactivos reducen el riesgo de muchas
enfermedades, incluyendo enfermedades crónicas entre ellas la diabetes 35.
Entre las actividades biológicas de los compuestos fenólicos destacan su
capacidad de establecer radicales libres, regular la apoptosis e inducir enzimas
antioxidantes. Además, se ha reportado que modulan el metabolismo de
carbohidratos, atenúan la hiperglucemia, debido a que reducen la absorción
intestinal de los carbohidratos ingeridos, modulan los enzimas implicados en el
metabolismo de la glucosa y estimulan la secreción de la insulina36.
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Pueden unirse a los polímeros biológicos, tales como enzimas, transportadores
de hormonas, y ADN; quelar iones metálicos transitorios, tales como Fe2+, Cu2+,
Zn2+, catalizar el transporte de electrones, y depurar radicales libres. Debido a este
hecho se han descrito efectos protectores en patologías tales como diabetes
mellitus, cáncer, cardiopatías, infecciones víricas, úlcera estomacal y duodenal, e
inflamaciones 37.
El efecto inhibitorio en la absorción intestinal de glucosa mediante un bloqueo
de los cotransportadores de Na+ - Glucosa presentes en la membrana apical de los
enterocitos se atribuye a los flavonoides 38.
Los flavonoides actúan bloqueando o inhibiendo al cotransportador SGLT-1 en la
membrana de borde en cepillo o produciendo una alteración del gradiente Na+ -K
+ en la membrana del enterocito por lo que se produciría una disminución en la
absorción de glucosa a nivel del intestino de las ratas diabéticas 39.
La relación que existe entre los flavonoides y la actividad antidiabética ha sido
estudiada en modelos in vivo se estudiaron el efecto del flavonoide isoquercetina
en ratones con diabetes mellitus inducida. Los autores plantearon que la
isoquercetina inhibe la acción de la enzima α-glucosidasa localizada en el epitelio
del intestino delgado. La inhibición de la α-glucosidasa retrasa la absorción de
carbohidratos en el intestino delgado y consecuentemente disminuye la
hiperglucemia 40.
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Aunque es difícil desarrollar un sistema único in vitro que puede simular todas
las condiciones existentes en el intestino humano, algunos de los modelos in vitro
que han sido aplicados en el estudio de absorción intestinal de metabolitos 41.
En la porción del duodeno el grupo control positivo obtuvo un promedio de las
concentraciones de la glucosa de 37.69 mg/dL a los sesenta minutos. El promedio
de las concentraciones de glucosa de duodeno, del grupo experimental 300mg/dL
de extracto hidroalcohólico fue 30.05 mg/dL mientras que en el grupo
experimental de 500mg/dL del extracto fue 21.92 mg/dL (ver Anexo 2).
El tercer grupo experimental de 500 mg/dL del extracto de semillas de Salvia
hispanica presento diferencia significativa de concentraciones de glucosa en las
porción de duodeno a los sesenta minutos (ver figura 1) mientras que en el resto
del tiempo las concentraciones fueron diversas.
Las concentraciones fueron diversas debido a que bajo condiciones óptimas el
saco intestinal es viable hasta aproximadamente 120 minutos 42 mientras que en
la porción del íleon no hubo diferencia significativa de concentraciones (ver figuras
2 y 3), debido a que el epitelio especializado para la absorción de nutrientes se
encuentra principalmente en duodeno y yeyuno mientras que en el íleon
desaparecen gradualmente las vellosidades hasta la mucosa plana del colon 43.
Es posible entonces que la presencia de dichos metabolitos secundarios sean los
responsables del efecto hipoglucemiante en combinación sinérgica o solo alguno
de ellos como se ha reportado en algunos trabajos de investigación. Los
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flavonoides presentan un gran número de actividades farmacológicas entre ellas
la de hipoglucemiante a través de un incremento en la salida de insulina, además
en esta especie también se le atribuye el efecto hipoglucemiante a los taninos por
tener acción astringente controla y evita la hiperglicemia al disminuir la absorción
intestinal 44.
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V. CONCLUSIONES
- El extracto hidroalcohólico de semillas de Salvia hispanica a concentración
de 500 mg/dL disminuye significativamente la absorción intestinal de la
glucosa en la porción duodenal.
- El extracto hidroalcohólico de semillas de Salvia hispanica no demostró
diferencia significativa en la absorción intestinal de la glucosa en Rattus
rattus var. Albinus.
- El tiempo de efectividad de la concentración de 500 mg/dl del extracto
hidroalcohólico de Salvia hipanica fue durante 60 minutos, posterior a este
tiempo las concentraciones variaron.
.
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ANEXOS
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Anexo 1. Promedios de las concentraciones de glucosa en duodeno de Rattus
rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos horas.
ST: Solución de Tyrode *: Concentración del extracto hidroalcohólico Salvia hispanica.
GRUPOS TIEMPO[min]
CO
NC
ENTR
AC
ION
[m
g/d
l]
0 30 60 90 120
CONTROL NEGATIVO ST
10.94 19.74 18.31 16.99 19.32
CONTROL POSITIVO ST +GLUCOSA 10%
9.77 27.62 37.69 44.44 49.76
EXPERIMENTAL 1 ST +GLUCOSA 10%+ 100 mg/dl*
12.57 19.64 21.45 37.76 41.40
EXPERIMENTAL 2 ST +GLUCOSA 10%+ 300 mg/dl*
11.30 16.33 30.05 51.41 71.48
EXPERIMENTAL 3 ST +GLUCOSA 10%+ 500 mg/dl*
10.53 17.22 21.92 42.65 73.46
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Anexo 2. Promedios de las concentraciones de glucosa en yeyuno de Rattus rattus var.
Albinus medidos cada media hora durante dos horas.
GRUPOS TIEMPO[min]
CO
NC
ENTR
AC
ION
[m
g/d
l]
0 30 60 90 120
CONTROL NEGATIVO ST 10.00 20.86 18.40 16.56 18.40
CONTROL POSITIVO ST +GLUCOSA 10%
9.46 25.42 32.97 41.29 48.60
EXPERIMENTAL 1 ST +GLUCOSA 10% + 100 mg/dl*
12.06 19.74 25.09 35.12 46.43
EXPERIMENTAL 2 ST +GLUCOSA 10%+ 300 mg/dl*
11.35 22.44 35.03 54.57 71.45
EXPERIMENTAL 3 ST +GLUCOSA 10%+ 500 mg/dl*
10.26 23.26 37.33 52.68 75.83
ST: Solución de Tyrode *: Concentración del extracto hidroalcohólico Salvia hispanica.
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Anexo 3. Promedios de las concentraciones de glucosa en íleon de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante dos horas.
GRUPOS TIEMPO[min]
CO
NC
ENTR
AC
ION
[m
g/d
l]
0 30 60 90 120
CONTROL NEGATIVO ST 10.78 17.78 17.21 19.51 20.50
CONTROL POSITIVO ST +GLUCOSA 10%
9.74 20.06 30.77 37.79 43.06
EXPERIMENTAL 1 ST +GLUCOSA 10% + 100 mg/dl*
12.08 20.20 23.66 27.26 39.57
EXPERIMENTAL 2 ST +GLUCOSA 10%+ 300 mg/dl*
10.25 22.58 40.26 55.70 68.56
EXPERIMENTAL 3 ST +GLUCOSA 10%+ 500 mg/dl*
10.98 20.60 49.83 71.98 95.11
ST: Solución de Tyrode *: Concentración del extracto hidroalcohólico Salvia hispanica
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Anexo 4. Filtración del extracto hidroalcohólico de las semillas de Salvia hispanica “chía”.
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Anexo 5. Preparación del intestino delgado de los ejemplares Rattus rattus var.
Albinus en el sistema de incubación.
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Anexo 6. Evaluación del efecto de las concentraciones 100, 300, 500 mg/dl del
extracto hidroalcohólico de las semillas de Salvia hispanica “chía”.
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Anexo 7. Variación de las concentraciones de glucosa en duodeno de Rattus rattus var.
Albinus en los diferentes grupos experimentales: Control negativo (sol.
Tyrode); Control positivo con GLUCOSA10%; Experimental 1: GLUCOSA10% +
100mg/kg; Experimental 2: GLUCOSA10% + 300mg/kg y Experimental 3:
GLUCOSA10% + 500mg/kg
[mg/
dL]
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Anexo 8. Variación de las concentraciones de glucosa en yeyuno de Rattus
rattus var. Albinus en los diferentes grupos experimentales:
Control negativo (sol. Tyrode); Control positivo con
GLUCOSA10%; Experimental 1: GLUCOSA10% + 100mg/kg;
Experimental 2: GLUCOSA10% + 300mg/kg y Experimental 3:
GLUCOSA10% + 500mg/kg.
[mg/
dL]
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Anexo 9. Variación de las concentraciones de glucosa en íleon de
Rattus rattus var. Albinus en los diferentes grupos
experimentales: Control negativo (sol. Tyrode); Control
positivo con GLUCOSA10%; Experimental 1: GLUCOSA10% +
100mg/kg; Experimental 2: GLUCOSA10% + 300mg/kg y
Experimental 3: GLUCOSA10% + 500mg/kg.
[mg/
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Anexo 10. Variación de las concentraciones de glucosa en duodeno
de Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora
durante dos horas.
[mg/
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[Min]
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Anexo 11. Variación de las concentraciones de glucosa en yeyuno de
Rattus rattus var. Albinus medidos cada media hora durante
dos horas.
[mg/
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[Min]
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Anexo 12. Variación de las concentraciones de glucosa en íleon de Rattus rattus var.
Albinus medidos cada media hora durante dos horas.
[Min]
[mg/
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