![Page 1: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/1.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium
Elválasztástechnikakv1n1lv1
![Page 2: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/2.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Célvegyületek
Kevésbé illékonyak
Folyadék-folyadék extrakció (LL)
Szilárd fázisú extrakció (SPE, MEPS, DPX, online …)
Szilárd fázisú mikroextrakció (SPME)
Keverőbabás extrakció (TWISTER)
Membrán segített oldószeres extrakció (MASE)
Diszperzív SPE
Folyadékminta
![Page 3: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/3.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Szilárd fázisú extrakció (SPE)
![Page 4: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/4.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Célvegyületek
Illékonyak
Gőztéranalízis (HS, DHS)
Szilárd fázisú mikroextrakció (HS-SPME)
Kevésbé illékonyak
Soxhlet extrakció (SE)
Szuperkritikus fluid extrakció (SFE)
Accelerated Solvent Extraction (ASE)
Ultrahanggal segített szilárd-folyadék extrakció
Mikrohullámmal segített extrakció (MWE)
Mátrix-szilárd fázisú diszperzió (MSPD)
Quechers
Szilárd minta
![Page 5: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/5.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
QuEChERS
Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe
•10 g minta + 10 ml acetonitril+ISTD
•Intenzív homogenizáslás
•+ NaCl, MgSO4 és citrátok (fázis szétválás, pH beállítás)
•Intenzív keverés ⇒ Nyers extrakt
•A szerves fázis egy részletének d-SPE tisztítása (MgSO4 +szorbens
pl. PSA)
•Rövid keverés majd centrifugálás (esetleg védő reagensek mellett)
⇒ Végső extrakt
M. Anastassiades, S. J. Lehotay, D. Stajnbaher, F.J. Schenck, JAOAC Int 86(2) 412-31
![Page 6: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/6.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Ismétlés vége
![Page 7: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/7.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Szükséges-e az egyensúly?
t
A
SHS, SPME, SBSE
![Page 8: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/8.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Származékképzés
Miért ? :
•Mérendő komponens illékonyságának növelése
•Mérendő komponens termikus stabilitásának növelése
•Retenciós tulajdonságok megváltoztatása
•Kimutatási határ csökkentése
![Page 9: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/9.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Származékképzés
Mit kell tudnia a származékképzési reakciónak? :
•Megfelelő sebességgel játszódjon le
•Lehetőleg teljes legyen az átalakulás
•Egy mérendő komponensből lehetőleg egy termék keletkezzen
•Minta egyébkomponensei ne zavarjanak
•A reagens felesleg és a reakció melléktermékei ne zavarjanak
![Page 10: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/10.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Származékképzés
Leggyakrabban alkalmazott reakció típusok :
•Szililezés
•Acilezés
•Alkilezés
•Észteresítés
•…
![Page 11: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/11.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Folyadék kromatográfia
– HPLC
![Page 12: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/12.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
1903
Varsói Természettudományi
Társaság Biológiai Közleményei
A kezdet
![Page 13: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/13.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
HPLC vs. GC
![Page 14: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/14.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
HPLC vs. GC
Paraméter GC HPLC
Mérendő komponens hőstabilitása
Elpárologtatás miatt kellAz analízis általában szobahőmérséklet körül megy
Mérendő komponens molekulatömege
Jellemzően <700Csak az oldhatóság jelent határt
Mintaelőkészítés Végén illékony oldószerSzűrés kell, oldószer legyen az eluenssel elegyedő
Áramlás Nyomás vezéreltÁramlási sebesség vezérelt
Mozgófázis szerepe a szelektivitásban
Nem jellemző Erősen befolyásol
![Page 15: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/15.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
A HPLC rendszer főbb részei
![Page 16: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/16.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Pumpa
Gáztalanító
Automata mintaadagoló
Oszloptér
Oldószerek
Detektor
A HPLC rendszer főbb részei
![Page 17: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/17.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Mozgó fázis gázmentesítése
He sparging, on-line vacuum degassing, refluxing,
vacuum filtration, ultrasonication
![Page 18: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/18.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Kézi injektor
Front View
Inject
Rear View
Load - Inject
Sample Loop
![Page 19: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/19.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Kézi injektor
Sample inSolvent inSolvent out
Sample Load
Sample Inject
From Pump
To column
Sample inSolvent in
Solvent out
From Pump
To column
![Page 20: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/20.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Automata injektor
Pretreatment with automatic injection system:
![Page 21: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/21.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
HPLC-s módszerek típusai
Mérendő komponens
Módszer Állófázis Mozgófázis
Semleges, gyenge sav, gyenge bázis
Fordított fázisúC18,C8,C4, ciano, amino
Víz/szerves Módosítók
Ionos, savas, bázikus
Inpárképzés C18, C8Víz/szerves ionpárképzők
Vízoldhatatlan Normál fázisúSzilika, ammino, ciano, diol
Szerves
Szervetlen ionok ioncsere ioncserélő Vizes puffer
Nagy molekulatömegű
Méretkizárásos SzilikaGélszűrés – vizesGélpermeáció-szerves
![Page 22: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/22.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Folyadékkromatográfia típusok – Állófázis/eluens
•Normál fázisú folyadékkromatográfia (Normal-phase) NP-HPLC
•Fordított fázisú folyadékkromatográfia(Reverse-phase) RP-HPLC
•Fordított fázisú ionpár kromatográfia (Reverse-phase ionpair) RP-IP-HPLC
•Ioncserés folyadékkromatográfia (Ion-exchange chrom.) IC
•Méretkizárásos folyadékkromatográfia(Size exclusion chrom.) SEC
•Királis folyadékkromatográfia(Chiral chromatography) CC
•Affinitás folyadékkromatográfia (Affinity chromatography) AC
![Page 23: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/23.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
A vizsgálandó komponens és az állófázis között fellépő kölcsönhatások
Ionos (Ioncserés)
Dipólus - Dipólus (Normál fázisú)
Intermolekuláris erők, amelyek poláris molekulák pozitív és negatív dipólus momentumai között alakulnak ki;
Dipólus - Indukált Dipólus (Normál fázisú)
Dipólus momentummal nem rendelkező molekulákban poláris molekulák ideiglenesen dipólus momentumot indukálhatnak az elektronok szimmetrikus elrendeződését megbontva.
Hidrofób (Fordított fázisú)
Sztereospecifikus (Királis)
------
Ezek mind kompetitív kölcsönhatások!!Ezek mind kompetitív kölcsönhatások!!
![Page 24: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/24.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Félpreparativ oszlop 20 mm i.d.
Félpreparativ oszlop 8 mm i.d.
Analitikai oszlopok 3,0; 4 vagy 4,6 mm i.d.
Mikro(bore)oszlopok 1 vagy 2 mm i.d.
Kapilláris oszlopok 20-800 m i.d.
Gyors oszlopok 2,0- 4,6 mm i.d.
Preparativ oszlop 40-100 mm i.d.
Oszlopgeometria
acél vagy PEEKacél vagy PEEK
![Page 25: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/25.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Van Deemter egyenlet
uCduB
AdH pp2
u (cm/sec)u (cm/sec)
HH dp= 10 dp= 10 mm
dp= dp= 55 mm
dp= dp= 33mm
Nyomásesés a kolonnánNyomásesés a kolonnán::
p- nyomásesés;p- nyomásesés;
- kolonna áramlási ellenállása;- kolonna áramlási ellenállása;
- eluens viszkozitás;- eluens viszkozitás;
L- kolonna hossz;L- kolonna hossz;
ddpp- töltet átlagos szemcseméret- töltet átlagos szemcseméret
2pd
Lup
![Page 26: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/26.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
FÉMOXIDOK: SiO2, Al2O3, CaO, MgO, BaO, TiO2, CeO2, ZrO2,
SÓK: SZILIKÁTOK, Mg-Al szilikátok és egyéb összetett vegyületek
(Florisil, földpátok, bentonit, kaolin, síkpor, agyag)
KARBONÁTOK, SZULFÁTOK (Ca-Mg-karbonát, Ca-szulfát),
FOSZFÁTOK (Ca-, Zr-, HIDROXI APATIT)
NITRIDEK – BN
PORÓZUS ÜVEG SZEMCSÉK (Controlled Pore Glass, CPG 75-3000 μm)
CPG GLYCOPHASE (gliceropropilszilán réteggel)
SZERVETLEN (SZILIKA) – SZERVES (POLIMEREK) KEVERT TÍPUSOK
A folyadékkromatográfiás állófázisok - szervetlen
![Page 27: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/27.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
SZÉN (aktív C, porózus grafitált karbon, PGC)
POLISZACCHARIDOK (cellulóz, keményítő, porcukor)
DEXTRÁN (keresztkötésekkel térhálósított gélek, Sephadex)
AGARÓZ (agar-agar, agaropektin)
POLIAMID
POLIAKRILAMID (akrilamid - metilén bis-akrilamid kopolimer)
POLIETILÉN IMINEK
A folyadékkromatográfiás állófázisok - szerves
![Page 28: Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium](https://reader036.vdocuments.net/reader036/viewer/2022062309/568135c8550346895d9d2a96/html5/thumbnails/28.jpg)
Elválasztástechnika 2011 Eke Zsuzsanna
Column Packing Materials - Silica
Silica Sols Xerogels
Spherical
IrregularParticles are 3-10 m in
diameter for standard columns.