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Groupe « Résistance Pays du Sud »
Réunion de l’AC12-ANRSParis, 29 Février 2008
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Sénégal (C. Toure-Kane)Côte d’Ivoire (TA. Toni, D. Joulia)Cameroun (L. Vergne, A. Agokheng)Burkina Faso (F. Rouet)
Thaïlande (N. Ngo)Vietnam (L. Xuan)Cambodge (E. Nerrienet)
Necker (ML. Chaix)Montpellier (M. Peeters)Bichat (D. Descamps, F. Brun-Vezinet)Bordeaux (B. Masquelier, H. Fleury)Rouen (JC. Plantier)
Coordination: ML.Chaix, M.Peeters
MEB: A. Ayouba
Création: Février 2005
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4 projets avaient été définis 1. Contrôle de Qualité pour les laboratoires participants
identiques à celui des labos nord (pré-requis pour les autres études)
2. Etudier les résistances du VIH-1 aux ARV chez les personnes naïves de traitement, en Afrique et en Asie (ANRS 12134)
3. Évaluer la faisabilité d’étude des résistances sur du matériel sanguin prélevé sur papier filtre (en cours)
4. Mettre en place les procédures pour l’étude des résistances chez les personnes traitées, dans un contexte d’accès élargi aux ARV (dépôt projet CSS6)
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Contrôle de qualité
Envoi et réception en Décembre 2007 - Janvier 2008 selon les sites
Date de fin de réception des résultats (fin février) – Cambodge, Vietnam
Analyse D. Costagliola (Mars) Conditionne la participation aux autres
étdes du groupe
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Projet ANRS 12134 Méthode générique développée par l’OMS: HIVDR-TS
( surveillance de résistance par la méthode de seuil)– Femmes enceintes– Première grossesse– Âgées de de 15 à 24 ans– Naïves de traitement ARV– Récemment infectées– N=60 à inclure en moins de 6 mois
Adaptation en fonction des pays Techniques biologiques
– Plasma– RT PCR et séquençage– Analyses et interprétations selon: ANRS, Schaffer B list, Stanford et
Rega– Saisie dans base de donnés Access®
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Résultats1. Population étudiée
PAYS n Femmes Hommes
Cameroon (OMS) 52 52 0
Burkina Faso (Kesho Bora, CD4 > 500 et/ou 15-4 ans)
51 51 0
Thailand (PHPT-4, CD4 > 500 et/ou 15-4 ans)
56 56 0
Cambodia (CD4 > 500 et/ou 15-4 ans)
58 46 12
Vietnam (CD4 > 500 et/ou 15-4 ans)
63 34 29
5 pays ont terminé l’étude: N=280
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Résultats2. caractéristiques de la population étudiée
Age
Nombre de Grossesses
CD4
CV
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Connaissance statut VIH
Country n Median (months) IQR
Burkina Faso 50 2.3 1.2-4.0
Cambodia 55 13.0 7.6-33.2
Cameroon 52 ND ND
Thailand 56 0.9 0.0-2.2
Vietnam 62 1.8 0.1-5.8
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Cambodia (n=58)
95%
5%
Thailand (n=56)
94%
4% 2%
Viet Nam (N=63)
100%
CRF01BAE/B
Burkina Faso (n=51)
Cameroon (n=52)
68%10%
6%4%4% 8%
CRF02CRF06Other SubtypesA*D’CRF11G
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Fréquence des mutations de résistance
Country Number of Sequences (RT and PR)
Number of samples with resistant viruses
(%)
95% Confidence
Interval
Burkina Faso 51 0 (0) 0.0-7.0
Cambodia 58 1 (1.7) 0.3-9.2
Cameroon 52 1(1.9) 0.3-10.2
Thailand 56 0 (0) 0.0-6.4
Vietnam 63 2 (3.2) 0.9-10.9
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Caractéristiques des échantillons résistants
Sample ID Country Gender Age CD4 cells/µL
VL (Log
cp/mL)
HIV-1
subtype
Scored mutations
KC12134-12 (RT)
Cambodia
F 28 568 2.6 AE K101KQ, K103N, M184V
CYN0632 (RT)
Cameroon
F 20 525 ND CRF02 K103N
R26 (RT) Vietnam F 24 868 3.82 AE G190A
R40 (PR) Vietnam F 22 981 5.35 AE M46I
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Sénégal-Côte d’IvoirePays Sénégal Côte d’Ivoire
Inclusions N=48
F:44
N=47
F:47
Période d’inclusion 05/06/07-04/12/07
Amplification
RT-Protéase
36 27
Necker
Age (n=35) 30
(23-35)
CD4 (n=36) 641
(573-846)
VL (n=26) 4.0
(3.58-4.52)
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Conclusions Applicabilité de HIVDR-TS limitée car:
• Critères très stricts– pour l’âge– Le nombre de grossesses– Le temps d’inclusion
• Visites de 32 laboratoires (7 laboratoires accrédités)– 4 spécialisés (Montpellier, Madrid, Ottawa et Utrecht)– 2 régionaux (Fort de France et Burnett Institute, Sydney)– 1 national (NARI, Pune, Inde)
Fréquence de mutations de résistance inférieure à 5% pour les 5 pays ayant terminé le projet
Cas particuliers• Cameroun: seul pays à avoir réalisé le projet avec les critères HIVDR-TS• Difficultés de recrutement (Côte d’Ivoire, Sénégal)
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Projet Pilote Papier filtreProjet Pilote Papier filtreTechnique: JC PlantierTechnique: JC Plantier
amplification / sequencing
Protease and RT
separate
Buffer
viruses elution
RNA extraction Qiagen
spot
20 to 50 µl of plasma or serum
S&S903 ou 3MM CHR®
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Projet pilote papier buvard: où en est-on?
Pays Projet fait DPS Résultats
Burkina Non (colis décongelé à l’arrivée)
Cambodge Oui 5000-10 000 (10)10 000-100 000 (10)> 100 000 (5)
88% RT +20% Prot +
Cameroun En cours
Côte d’Ivoire Non
Sénégal Oui Protocole modifié Protocole modifié
Thaïlande Oui 5000-10 000 (5)10 000-100 000 (10)> 100 000 (5)
1 Prot +3 RT +, 4 Prot +4 RT+ Prot +
Vietnam Oui 5000-10 000 (5)10 000-100 000 (10)> 100 000 (5)
Pas d’amplifPas d’amplif> 100 000 RT + Prot -
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Expériences papier filtre(Marjorie Monleau, Martine Peeters,
IRD)• extraction Qiagen : mauvais résultat
• extraction Biomérieux > Abbott pour quantification et amplification. Mais différences avec plasma < 1 log
• conservation à TA : OK jusqu’à 1 mois (sauf pour faible CV)
• conservation à 37°C : OK jusqu’à 2 semaines (sauf pour faible CV)
• Finir de tester (mesure CV et amplification PCR) la conservation des spots, sur papier 903, dans le temps selon les conditions : t°ambiante, sec et 37°C, humide
• Selon résultats, tester autres papiers : 3MM, FTA cards
• Essai DPS (DBS ?) avec plusieurs technologies pour la mesure de la CV
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Projet: Patients traitésRefus AO 15 sept 07Dépôt AO 16 mars 08(M Peeters, A Ayouba)
• L’objectif primaire est: – Evaluation de l’échec virologique et résistances
aux ARVs chez les patients VIH+ pris en charge dans les programmes et structures nationaux au Burkina-Faso, Cameroun, Côte d’Ivoire, Sénégal, Thaïlande, Togo et Vietnam
– Patients en échec de 1° ligne de traitement– Coupe transversale à M12 et à M24– Nécessité de recruter 300 patients par site et par point (soit
600 patients traités)
![Page 18: Groupe « Résistance Pays du Sud » Réunion de lAC12-ANRS Paris, 29 Février 2008](https://reader035.vdocuments.net/reader035/viewer/2022062318/551d9da1497959293b8d055c/html5/thumbnails/18.jpg)
Projets en cours et perspectives CQ distribué par le
CNR (Bichat) automne 2008
Finalisation du protocole d’étude des résistances sur papier filtre (Rouen, Montpellier) et transfert sur sites
Projet « Patients traités »– A soumettre à l’AO du
15 mars
Analyse du polymorphisme de l’intégrase (Vietnam, Cambodge, Thaïlande, Burkina Faso, Cameroun) à la suite du projet 12134 en lien avec le groupe Nord
Analyse du polymorphisme de l’enveloppe (Vietnam, Cambodge, Thaïlande, Burkina Faso, Cameroun) à la suite du projet 12134