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Normas de laboratório, limpeza, secagem, montagem e esterilização de material usado em microbiologia
Instituto Federal do Ceará – Campus Sobral
Curso Superior de Tecnologia em Saneamento Ambiental
Disciplina de Análises Microbiológicas
Professor:Michael Viana
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Objetivo
• Caracterizar a estrutura e o funcionamento de um laboratório de microbiologia
• Executar técnicas de preparo e montagem de material para esterilização
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Normas adotadas no laboratório de microbiologia
• Desinfetar a bancada de trabalho antes e depois de cada análise‐ Etanol, álcool iodado...
• Não comer ou fumar no laboratório‐ Contamina o ambiente e o alimento pode ser contaminado
• Usar sempre jaleco‐ Mas evitar sair do laboratório vestido com ele
• Lavar bem as mãos ao entrar e ao sair do laboratório
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Normas adotadas no laboratório de microbiologia
• Organização do material usado• Cada aluno é responsável pelo seu material• Seguir as normas de uso dos aparelhos• Cuidado ao manipular equipamentos
‐ Ex: bico de Bunsen
• “Flambar” alças, agulhas e pinças antes e após o uso
• Não correr ou frescar no laboratório• Lavar as suas vidrarias após o uso
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Normas adotadas no laboratório de microbiologia
• Utilizar óculos de proteção e luvas• Calçados fechados• Prender os cabelos longos• Não pipetar com a boca
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Limpeza, secagem, montagem e esterilização de
material usado em microbiologia
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Introdução
• Microrganismos são encontrados:‐ Solo‐ Ar‐ Água‐ Alimentos‐ Esgoto‐ Corpo humano‐ Plantas‐ Animais e etc.
Culturas mistas
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Introdução
• Em laboratório necessidade de se trabalhar com culturas puras
• Para obtenção de culturas puras:‐ Materiais e equipamentos especiais‐ Uso de técnicas específicas (esterilização* e assepsia**)
* Eliminação ou remoção de toda e qualuqer forma de vida em um material ou ambiente** conjunto de medidas que impede a entrada de microrganismos onde eles não são desejados
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Introdução
• Identificação
• Caracterização
• Quantificação
• conservação
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Materiais e equipamentos especiais
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Materiais e equipamentos especiais
• Cultivo de microrganismos
• Esterilização
• Transferência de microrganismos
• Preservação de microrganismos
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Materiais e equipamentos especiais
• Cultivo de microrganismos ‐ VIDRARIAS‐ Tubos de ensaio
‐ Pipetas Pasteur
‐ Pipetas
‐ Becker
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Materiais e equipamentos especiais
• Cultivo de microrganismos ‐ VIDRARIAS‐ Placa de Petri
‐ Balões volumétricos
‐ Erlenmeyers
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Materiais e equipamentos especiais
• Cultivo de microrganismos – CÂMARAS DE CULTIVOS‐ Banhos‐Maria
‐ Agitador rotatório
‐ Incubadoras
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Materiais e equipamentos especiais
• Cultivo de microrganismos – CÂMARAS DE INOCULAÇÃO‐ Câmara asséptica ‐ Câmaras de fluxo laminar
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Materiais e equipamentos especiais
• Esterilização‐ Autoclave ‐ Forno Pasteur
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Materiais e equipamentos especiais
• Transferência de microrganismos‐ Alça de inoculação
‐ Pipetas‐ Pipetas de Pasteur
‐ Swab
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Materiais e equipamentos especiais
• Preservação de microrganismos‐ Refrigeradores
‐ Liofilizador
‐ Frezzer
‐ Câmara com N2 gasoso
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Materiais e equipamentos especiais
• Outros materiais‐ Bico de Bunsen
‐ Balança de pesagem
‐ Lâminas e lamínulas
‐ Algodão
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Materiais e equipamentos especiais
• Outros materiais‐ Papel de embrulho
‐ Espátulas
‐ Pinças
‐ espátula de Drigalsky
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Lavagem, secagem e esterilização de vidraria
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Lavagem de vidraria
• Objetivo‐ Manter vidraria limpa para usos posteriores
• Sabão / Detergente• Solução sulfocrômica• Água• Água destilada
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Secagem da vidraria
• Estufa a 70°C
• Autoclave antes da análise microbiológica e se o material estiver contaminado
• Água fervente• Forno, etc..
Esterilização de vidraria
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Preparo e montagem do material do laboratório
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Preparo e montagem do material do laboratório
Evita a contaminação da amostra e do operador
Enrolar em papel em papel ou em recipientes metálicos
Deverão ser desenroladas antes da análise
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Preparo e montagem do material do laboratório
Tampa de algodão hidrofóbico “filtro”: permite a entrada de ar e retém microrganismos
Pode ser utilizado tampas de metal ou plásticos
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Manobras assépticas
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Manobras assépticas
• Técnicas que impedem a entrada de microrganismos onde estes não são desejados, garantindo a assepsia
• Contaminação:‐ Pelo ar‐ Bancadas‐ Saliva
• Impede contaminação do operador ou do ambiente
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Manobras assépticas
• Bico de Bunsen “zona de segurança”
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Manobras assépticas
1. Trabalhar em áreas submetidas previamente a limpeza e desinfecção
2. Trabalhar dentro da zona de segurança (bico de Bunsen)
3. Flambar ao rubro alças antes e depois da inoculação
4. Deixar esfriar a alça dentro da zona de segurança ou do recipiente com meio de cultura
5. Flambar rapidamente a boca dos tubos ao abrir e ao fechá‐los
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Manobras assépticas
6. A tampa NUNCA deve ser colocada sobre a bancada
7. Desembrulhar a pipeta dentro da zona de segurança