Download - LIOFILIZACION DIAPO 01
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PROCESO
Congelar elagua libre delas células
Eliminación del agua
Agua congelada Vapor de agua
Sublimación
1ª Fase de laDesecación
2ª Fase de laDesecación
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Tipos de Liofilizadores
Liofilizador concentrifugación Se utilizan ampollas de vidrio
taponadas La suspensión se centrifuga
durante la 1ª fase de ladesecación
Se estrechan las ampollas y,después de conectarlas a una
bomba de vacío, se sellan. Ventajas: Se utiliza la centrifugación para
que el proceso de congelación sea suave y de forma homogénea
Liofilizador con estantes La suspensión se prepara en
viales y es precongelada a Tª
muy bajas antes de aplicar el vacío.
La segunda etapa de ladesecación se realizatambién en el liofilizador.
Ventajas: La Desecación es demanera progresiva y continuada
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¿Cuándo aplicar la Liofilización?Es un método ampliamente utilizado para conservar distintosMicroorganismos.
SI NO
-Bacterias,Levaduras,Hongos,Algunos virus,Algas
-Dificultad de un crecimiento Adecuado.-Microorganismos delicadosque no resisten el paso decongelación.-A tamaños de células mayores,
menos efectivo es el procesoProtozoos,Células animales,Células vegetales,Arqueobac-terias y bacterias delicadas
Ejemplos:Rhodospirillum, ,Azospirillum, vibrio y demásbacterias marinas.-Levaduras miceladas con difi-cultad en la esporulación.-Hongos con grandes conidios ocon dificultad en la esporulación.
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FACTORES IMPLICADOS EN LA CONSERVACIÓN POR EL
PROCESO DE LIOFILIZACIÓN
Condiciones de CultivoEl medio de cultivo
Dependerá del tipo de microorganismo y susrequerimientos nutricionales.
Fase de crecimiento del cultivo.F.exponencial. Suspenciones celulares de 108-109
Células/ml en bacterias, algo inferiores enhongos y levaduras.
Condiciones de incubación.Tª,aerobiosis, anaerobiosis, etc.
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FACTORES IMPLICADOS EN LA CONSERVACIÓN POR EL PROCESO
DE LIOFILIZACIÓN
Temperatura durante la sublimación.Debe ser lo más baja posible, sin subir por encima de –50ºC.
Grado de deshidratación alcanzado.Lo más alto posible.
Atmósfera de oxígeno en el tubo.Las células liofilizadas se guardan en tubos al vacío para evitar
Rehidratación o presencia de gases (como el oxígeno) que puedendañar las células.
Condiciones de almacenamiento.La temperatura debe ser constante a 18ºC y sin bajar de los 0ºC
y, en oscuridad
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Debe trabajarse, por tanto, por debajo del
punto triple del agua (273,16 K y 6,105 kPa).
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DESVENTAJAS
-El alto coste inicial delequipo.
-La preparación de formaincorrecta de los distintoslotes puede desembocar enun estancamiento de la
viabilidad y/o en pérdidas
en la estabilidad de loscaracteres de losmicroorganismos
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