Download - MANUAL DE LABORATORIO CLÍNICO - UNSA
Universidad Nacional de san Agustín de Arequipa
Facultad de Ciencias Biológicas
Unidad de Segunda Especialidad y Formación Continua
Segunda Especialidad en Laboratorio de Análisis Clínicos y Biológicos
El Trabajo Académico: Trabajo Académico realizado en laboratorio del
Hospital I Edmundo Escomel - ESSALUD Arequipa - 2018
Presentado por la Bióloga
Obdulia Quispe Leon
para optar el Título
de la Segunda Especialidad en
Laboratorio de Análisis Clínicos y
Biológicos
Arequipa – Perú
2019
JURADOS
Dr. Benjamin Dávila Flores
Presidente
Mg. Ana Lazo Rivera
Secretaria
Dr. Henry Diaz Murillo
Integrante
DEDICATORIA
A mi madre, que es mi seguridad y mi luz, que gracias a ella pude llegar a este momento
con su infinita paciencia, amor, compresión y perdón en cada uno de mis errores, con su
fortaleza en mis momentos difíciles, por no dejarme caer y enseñarme a no rendirme
frente a los imprevistos de la para seguir adelante siendo feliz conmigo en mis pequeños
logros.
A Dios por darme un día más de vida, por protegerme y guiar mis pasos para tratar de ser
mejor y darme la bendición de tener a mi hija Carolina que es el motivo de mi superación
y esfuerzo.
AGRADECIMIENTO
Agradezco a mis padres por su apoyo y su amor, especialmente cuando la fatiga se me
hizo insoportable; sin ustedes no hubiera sido posible realizar este proyecto.
Quiero agradecer, con sincero afecto a mis hermanas, amigos por confiar en mi y
brindarme su apoyo incondicional, su valioso tiempo y conocimientos para realizar este
trabajo; y por los consejos brindados.
A mis profesores docentes de la Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa, por
los conocimientos y consejos brindados, que contribuyeron a mi realización profesional
y personal.
ÍNDICE
RESUMEN
INTRODUCCION
OBJETIVOS
CAPITULO I MARCO TEÓRICO…………..………………………………. 1
1.1. GENERALIDADES……………..……………..………………… 1
1.2. AREA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA…………………………… 2
1.3. AREA DE HEMATOLOGÍA…………………………………... 70
1.4. AREA DE HEMOSTASIA……………………………………… 99
1.5. AREA DE URIANALISISS…………………………………… 102
1.6. AREA DE PARASITOLOGÍA………………………………… 120
CAPITULO II CONCLUSIONES…………………………………………. 133
CAPITULO III RECOMENDACIONES………………………………… 134
BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………… 135
RESUMEN
El presente informe da a conocer la experiencia laboral del Hospital I Edmundo Escomel
en sus 20 años cumplidos de creación en procedimientos de muestras biológicas y
fundamentos de los exámenes realizados
El Hospital I Edmundo Escomel pertenece a una red peruana de seguridad social en salud,
comprometida con la atención integral de las necesidades y expectativas de la población
asegurada que cuenta con el área de laboratorio clínico. El cual representa un apoyo
primordial para el área médica, ya que a través de los análisis realizados en ellos se pueden
diagnosticar diferentes patologías y establecer el tipo de tratamiento que se debe
administrar al paciente.
El laboratorio del Hospital I Edmundo Escomel cuenta con 5 áreas representativas:
− Área de bioquímica clínica
− Área de hematología clínica
− Área de hemostasia
− Área de parasitología
− Área de urianalisis
Es por eso, que conscientes de la gran importancia y con la finalidad de alcanzar un
trabajo representativo brinda resultados de calidad, precisión y exactitud
Los equipos automatizados utilizados son de hematología, equipos de ROCHE de
bioquímica
El de hemostasia – coagulometro. Lo demás equipos son microscopio binocular, estufas,
centrifugas, refrigerador, etc.
PALABRAS CLAVE: Edmundo Escomel, Área de bioquímica clínica, Área de
hematología clínica, Área de hemostasia, Área de Parasitología, Área de urianalisis.
INTRODUCCIÓN
El laboratorio del Hospital I Edmundo Escomel es el lugar donde los profesionales de
laboratorio de diagnóstico clínico realizan análisis clínicos que contribuyen al estudio,
prevención, diagnóstico y tratamiento de los problemas de salud de los pacientes.
También se le conoce como Laboratorio de Patología Clínica.
El laboratorio por sus funciones, se pueden dividir en:
Exámenes pertenecientes a la Rutina de consultorios externos que tienen cinco secciones
básicas: Hematología, Bioquímica, Hemostasia, Urianalisis y Parasitología
Exámenes pertenecientes a Emergencia
El presente informe de procedimientos en el laboratorio clínico del Hospital I Edmundo
Escomel recopila información básica de fundamentos teóricos para cada examen
realizado a los diferentes pacientes; con la intensión de abortar los aspectos más
sobresalientes durante los 15 años de experiencia y aprendizajes logrados
Los exámenes realizados son en gran mayoría automatizados logrando así una mayor
eficiencia ya que los equipos utilizados son de alta tecnología lo que conlleva a que se
pueda analizar un mayor número de muestras en un menor tiempo , no obstante cada una
de las muestras es tratada y examinada por el personal del laboratorio con sumo cuidado
Finalmente, con este informe permite recoger la experiencia que tuve durante 15 años
consecutivos de prácticas profesionales en el laboratorio clínico
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Proporcionar información de los exámenes realizados en las diferentes áreas de
laboratorio clínico del hospital I Edmundo Escomel
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Brindar una herramienta que permita conocer los fundamentos técnicos y prácticos del
laboratorio para ayudar al diagnóstico de alguna enfermedad
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CAPITULO I MARCO TEÓRICO
GENERALIDADES
El laboratorio del Hospital I Edmundo Escomel se creó hace 20 años gracias a una
iniciativa de la Gerencia Departamental de Arequipa ofreciendo la garantía de un
diagnostico efectivo y seguro, procesando ahora análisis clínicos con lo último en
tecnología que le ofrecen rapidez, exactitud y reproductibilidad
MISION
Realizar análisis confiables, confidenciales y oportunos de Laboratorio Clínico,
mediante el uso de la tecnología adecuada, y el respaldo de profesionales capacitados,
en procesos con calidad y garantía.
Visión
Ser un laboratorio eficaz, para el diagnóstico de enfermedades en nuestros pacientes
asegurados brindando confiabilidad en los resultados al personal médico de diferentes
especialidades
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ÁREA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA
ACIDO ÚRICO
El ácido úrico es el producto final del catabolismo de las purinas (adenina, guanina)
provenientes del exterior con la alimentación (parte exógena) y del interior con el ácido
nucleico (parte endógena). Todas las purinas se transforman en xantina e hipoxantina;
después, la enzima xantina-oxidada las oxida y las convierte en ácido úrico. Al hombre,
a diferencia de todas las especies animales, le falta la enzima uricasa, y no puede
transformar el ácido úrico en alantoína.
El ácido úrico es poco soluble en la sangre, se encuentra en forma de urato monosódico
y está ligado a proteínas (albúmina, alfa 1 y alfa 2 globulinas). La mayor parte del ácido
úrico es eliminada por el riñón a través de un mecanismo de filtración, reabsorción y
excreción.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La alteración puede estar relacionada con dietas ricas en purinas o con aumentada
producción endógena o con una reducida excreción. La determinación del nivel del
ácido úrico está indicado en el diagnóstico y monitoreo de algunos desórdenes
metabólicos dietéticos: gota, síndrome dismetabólico alimenticio, neoplasia linfomielo-
proliferativa (como linfomas, leucemias, policitemia), anemia hemolítica, enfermedad
del riñón y pacientes en terapias citostática o radioterapia.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
➢ Método colorimétrico.- El ácido úrico en ambiente alcalino reduce el ácido
fosfotúngstico con formación de color azul; la intensidad del color es
proporcional a la cantidad de ácido úrico.
➢ Método físico-enzimático.- El ácido úrico presenta en ultravioleta un pico de
absorbancia alrededor de 290 nm; la absorbancia a esa longitud de onda está
completamente eliminada por la acción de la uricasa, la cual transforma el ácido
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úrico en alantoína. Por la disminución de la extinción óptica, se conoce la
concentración del ácido úrico.
➢ Método enzimático.- El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y
peróxido de hidrógeno que, en presencia de POD y 4-AF y DCPS, forma un
compuesto rosáceo.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
MUESTRAS REQUERIDA
Suero Tomado completamente en ayunas de 12 horas.
CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por un día
a más a 20-25 °C, cinco días 2-4°C, 1 mes a -20°C
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ Hombres: 3.4 – 7.0 mg/dlMujeres : 2.4 – 5.7 mg/dl
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INTERFERENCIA
No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 µmol/L, hemoglobina
hasta 130 mg/dL y ácido ascórbico hasta 570 µmol/L
AMILASA
La amilasa es una enzima que cataliza la división de 1, 4 – alfa – glicósido en lo interno
de la molécula de los polisacáridos de los vegetales y animales, provocando la
espolimerizacion del almidón a destrina, y del glicógeno, a azúcar sencillo (glucosa).
La amilasa se produce en el páncreas y las glándulas salivales, y en pequeña
concentración en el hígado, en el riñón y las trompas de Falopio, y es eliminado por el
riñón.
Se puede distinguir la amilasa pancreática (isoamilasa P) y la amilasa extrapancreatica
(isoamilasa S).
SIGNIFICADO CLÍNICO
La determinación de la amilasa es de importancia fundamental en el diagnóstico de las
enfermedades pancreáticas. La amilasa es útil en el diagnóstico para el control de la
pancreatitis aguda. En estas enfermedades, la amilasa sérica sube en casi la totalidad de
los pacientes, 5-6 horas después de la sintomatología clínica. Pude añadir valores de 10
a 30 veces mayor de los valores normales. Parece que la amilasa sube más en
correlación con el edema, en vez que en relación con la necrosis pancreática
La amilasa puede aumentar también en otras enfermedades pancreáticas: neoplasia del
páncreas, neoplasia de la papila de Vater
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
Método colorimétrico
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La fosfatasa acida cataliza en medio acido la hidrolisis del A – naftil fosfato. El A –
naftol producido reacciona con una sal de diazonico (FRTR) formando un cromógeno
MODALIDAD DE SOLICITUD
En rutina y/o emergencia
MUESTRA REQUERIDA
Ayuno en rutina, en cualquier momento en emergencia
CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por un día
a más a 20-25 °C, cinco días 2-4°C, 1 mes a -20°C
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ 28 – 100 U/l
INTERFERENCIAS
Las interferencias más significativas son:
➢ Hemolisis: con Hb > 2,0 g/l (porque la fosfatasa acida se encuentra en glóbulos
rojos)
➢ Ictericia : con bilirrubina > 60.0 mg/dl
➢ Lipemia : con triglicéridos > 2000.0 mg/dl
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ASO
Los estreptococos ß hemolíticos del grupo A (bacterias) secretan una sustancia, la
estreptolisina O que tiene la propiedad de destruir los glóbulos rojos de la sangre.
Esta enzima permite la formación de unos anticuerpos llamados antiestreptolisinas O
AELO. Las antiestreptolisinas presentes en la sangre combaten las infecciones agudas
(de período corto) causadas por estreptococos.
Las antiestreptolisinas O, se encuentran particularmente en la sangre de enfermos
afectados por un reuma articular agudo.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Las mediciones de la antiestreptolisina O respaldan el diagnóstico de enfermedades
causadas por bacterias de la streptococcus (entre otras: fiebre reumática, escarlatina,
amigdalitis, glomérulonefritis) y suministran información epidemiológica sobre estas
enfermedades. Los streptococcus patógenos están relacionados con impétigo, infección
de las vías urinarias, fiebre reumática, así como también, con enfermedades renales.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Determinación cuantitativa de la antiestreptolisina O (ASL) por Inmuno nefelometría
MODALIDAD
Rutina
MUESTRA
Suero y plasma con Heparina o EDTA
CONSERVACIÓN
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Los sueros, conservados de 2 a 8 ºC, mantienen su actividad durante 7 días. Para
períodos de tiempo más largos se recomienda congelarlos a –20 ºC
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
INTERFERENCIAS
➢ Los sueros marcadamente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
falsamente positivos
➢ La artritis reumatoide, escarlatina, amigdalitis, infecciones estreptocócicas
diversas y algunos portadores sanos pueden dar resultados falsamente positivos.
➢ Infecciones recientes y niños con edades comprendidas entre 6 meses y dos
años, pueden dar lugar a resultados falsamente negativos.
➢ Una determinación aislada no da información suficiente acerca del estado actual
de la enfermedad. En casos dudosos y con el propósito de seguir la enfermedad,
se recomienda repetir la prueba a intervalos quincenales durante 4 ó 6 semanas.
➢ El diagnóstico clínico no debe realizarse únicamente con los resultados de un
único ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los datos clínicos del
paciente.
VALORES NORMALES
➢ Adultos: < 200 U/Ml
➢ Niños : < 150 U/Ml
INTERFERENCIAS
Los sueros marcadamente lipémicos o contaminados pueden dar resultados falsamente
positivos.
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BILIRRUBINA TOTAL, BILIRRUBINA INDIRECTA Y BILIS RUNA
DIRECTA
Desde un punto de vista médico, la bilirrubina es un pigmento de color amarillo
anaranjado que encontramos en la bilis (un líquido que, como te hemos indicado en
varias ocasiones, es producido por el hígado).
De hecho, cuando una pequeña cantidad de glóbulos rojos viejos es reemplazada por
nuevos glóbulos rojos, la bilirrubina queda en nuestro organismo, de forma que nuestro
hígado ayuda a descomponerla para que nuestro cuerpo pueda eliminarla a través de las
heces.
No obstante, cuando existen grandes cantidades de bilirrubina en la sangre pueden
llevar a la aparición de ictericia, que como te indicábamos, produce una coloración
amarilla tanto en la piel como en los ojos o las membranas mucosas.
Por tanto, el análisis de bilirrubina en sangre es especialmente útil para conocer y
obtener un recuento de los tres tipos de bilirrubina que existen: la conocida como
bilirrubina directa o conjugada, la bilirrubina indirecta o no conjugada y la bilirrubina
total.
Tipos de bilirrubina
➢ La bilirrubina directa o conjugada
La denominada como bilirrubina directa (también conocida médicamente como
bilirrubina conjugada) se trata de la bilirrubina conjugada por el hígado, sobre
todo por el ácido glucurónido y en menor cantidad por la glucosa, proteínas y
xilosa.
De hecho, cuando la bilirrubina no conjugada o indirecta pasa por el hígado se
conjuga con el ácido glucurónido, transformándose en la directa. Esta bilirrubina
se filtra a través de los glomérulos renales, y aparece también en la orina.
La bilirrubina directa se eleva cuando existe una obstrucción de las vías biliares
intrahepáticas o extrahepáticas, ya sea como consecuencia de colangitis,
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colelitiasis, colecistitis, colestasis, el síndrome de Rotor, cáncer de hígado y de
páncreas o el síndrome de Dubin Johnson.
También aumenta por patologías y enfermedades del hígado, como por ejemplo
el caso de hepatitis viral, cirrosis hepática, cirrosis biliar, hepatitis tóxica,
pancreatitis aguda y quistes pancreáticos.
➢ La bilirrubina indirecta, libre o no conjugada
La bilirrubina indirecta o no conjugada es aquella bilirrubina que tras
transformarse en dos moléculas (el grupo heme y el grupo globina), finalmente
la perteneciente al grupo heme se transforma en biliverdina. Esta bilirrubina se
encuentra relacionada con la albúmina, y no es filtrada por los glomérulos
renales.
Es normal que en los hombres los valores de bilirrubina indirecta son más
elevados que en las mujeres. No obstante, aumenta de forma patológica ante la
presencia de enfermedades sanguíneas que cursan con destrucción masiva de
hematíes (anemia hemolítica aguda, policitemia, hemoglobinuria paroxística…).
También aumenta por septicemias y paludismo.
➢ La bilirrubina total
La conocida como bilirrubina total no es más que la suma de la bilirrubina
directa y la bilirrubina indirecta. Por tanto, consiste básicamente en la bilirrubina
de la sangre en todo su conjunto.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Como hemos visto, las distintas causas por las que la bilirrubina puede elevarse depende
directamente del tipo de bilirrubina que aparezca alterado en la analítica sanguínea. Es
decir, no es lo mismo que la bilirrubina directa esté elevada, a que esté alta la bilirrubina
indirecta.
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Bilirrubina directa alta: En caso de que esta bilirrubina esté elevada puede ser debido a
hepatitis agudas, obstrucción de vías biliares (por cálculos biliares o tumores en el
páncreas), cirrosis hepática y por el síndrome de Dubin Johson.
Bilirrubina indirecta alta: Puede estar causado fundamentalmente por el síndrome de
Gilbert y por anemias hemolíticas.
Esta condición médica es conocida con el nombre de hiperbilisrubinemia, y su
elevación está relacionada con la manera en la que este pigmento tiende a viajar por
nuestro torrente sanguíneo.
Por tanto, el tratamiento médico a seguir dependerá de la causa que esté ocasionando
esta patología.
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
➢ BILIRRUBINA DIRECTA
La determinación de la bilirrubina esta generalmente basada en la reacción de
bilirrubina con ácido sulfanílico diazotado. En este método, la bilirrubina directa
(fracción conjugada) se une a la sal diazonica presente en el ácido sulfamico
para formar un compuesto coloreado conocido como azobilirrubina. El
incremento en la absorbancia a 548 nm así como la azobilirrubina es
proporcional a la concentración de la bilirrubina directa.
➢ BILIRRUBINA INDIRECTA
Calcula la bilirrubina indirecta en base a los resultados del laboratorio. Resta la
bilirrubina directa de la bilirrubina total para encontrar la bilirrubina indirecta
➢ BILIRRUBINA TOTAL
El método tradicional de detección de bilirrubina está basada en la reacción de
ésta con un diazo compuesto, para formar el componente coloreado conocido
como azobilirrubina. La reacción, puede ser acelerada con la adicción de varios
químicos, por ejemplo, metanol, cafeína y dimetil sulfoxido (DMSO). Las
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modificaciones de estos métodos incluyen la adicción de surfactantes como
agentes solubilizantes.
Adulto y niño 0 – 1.1 mg/dl
Neonatos
Nacimientos prematuros
24 horas 1.1 – 6.0 mg/dl
48 horas 6.0 – 8.0 mg/dl
3 – 5 días 10.0–15.0 mg/dl
Nacimiento a termino
24 horas 2.0 – 6.0 mg/dl
48 horas 6.0 – 7.0 mg/dl
3 – 5 días 4.0 – 12.0 mg/dl
La bilirrubina total (conjugada y no conjugada) se une al diazo compuesto en la
presencia en presencia de un surfactante para formar azobilirubina. El
incremento en la absorbancia es directamente proporcional a la concentración de
bilirrubina total.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina y Emergencia
MUESTRA REQUERIDA
Suero
CONSERVACIÓN
La bilirrubina en suero es estable 2 días a 2-8ºC si se protege de la luz
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ Bilirrubinas totales:
➢ Bilirrubinas directas: 0 – 0.3 mg /dl
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➢ Bilirrubina indirecta: se realiza el siguiente cálculo
➢ Bilirrubina libre (indirecta) = BRB total - BRB directa
INTERFERENCIAS
No se observan interferencias por hemólisis hasta una concentración de hemoglobina de
500 mg/dl (0,5 g/dl) ni lipemia hasta una concentración de 500 mg/dl (5 g/l) de
triglicéridos. No obstante, muestras hiperlipémicas o con hemólisis moderada pueden
conducir a resultados erróneos
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CALCIO SÉRICO
El calcio es uno de los constituyentes iónicos importantes en el organismo. Se combina
con el fósforo para formar las sales que constituyen el componente principal de los
huesos y los dientes. Tiene un rol esencial en la transmisión neuromuscular del impulso
nervioso. Es un componente clave en la cascada de la coagulación, cofactor de muchas
enzimas del organismo, influye en la secreción de gastrina y es partícipe sustancial en la
contractilidad muscular.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Hay hipercalcemia debida a tumores malignos e hiperparatiroidismo primario y hay
hipocalcemia por insuficiencia renal, hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D e
hiperparatiroidismo secundario.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
El calcio reacciona con la o-cresolftaleín complexona (o-CPC) a pH alcalino, dando un
complejo de color magenta que se mide fotocolorimétricamente a 570 nm.
MODALIDAD
Rutina
MUESTRA
Suero o plasma heparinizado
CONSERVACIÓN
La muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservarse una semana en
refrigerador (2-10 °C) o más de 5 meses en el congelador, sin agregado de
conservadores.
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CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbide
VALORES NORMALES
Adultos 8.6 - 10.2 mg / dl
Niños
0 – 10 días 7.6 - 10.4 mg / dl
10 – 2 años 9.0 – 11.0 mg / dl
2 – 12 años 8.8 – 10.8 mg / dl
INTERFERENCIAS
➢ Los anticoagulantes distintos de la heparina, compleja al calcio produciendo
resultados erróneos.
➢ No interfieren: bilirrubina hasta 20 mg/dl (200 mg/l), triglicéridos hasta 680
mg/dl (6,8 g/dl), hemoglobina hasta 94 mg/dl y magnesio hasta 9,9 mg/dl
CREATININA
La creatinina es una molécula de desecho que se genera a partir del metabolismo
muscular. La creatinina proviene de la creatina, una molécula muy importante para la
producción de energía muscular.
Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día.
La creatinina se transporta desde los músculos por medio de la sangre hacia el riñón.
Los riñones filtran la mayoría de la creatinina y la eliminan en la orina.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnóstica esencial, ya
que se ha observado que su concentración en sangre indica con bastante fiabilidad el
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estado de la función renal. Si los riñones no funcionan bien, no eliminan bien la
creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto la creatinina puede avisar
de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes de que se presenten
síntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de sangre que se realizan
comúnmente.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previa
desproteinización con ácido pícrico, obteniéndose un cromógeno que se mide a 492 nm.
MODALIDAD DE SOLICITUD
En rutina y/o emergencia
MUESTRAS REQUERIDA
Para valor de creatinina en ayunas: Suero Tomado completamente en ayunas de 12
horas.
CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por un día
a más a 20-25 °C, cinco días 2-4°C, 1 mes a -20°C
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CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ 0,7 – 1,4 mg/dl Varones
➢ 0,6 – 1,1 mg/dl Mujeres
Los adultos con mucha masa muscular pueden tener más creatinina en la sangre que la
población normal. Las personas ancianas, por otro lado, pueden tener menos creatinina
en la sangre de lo normal.
INTERFERENCIA
No se observan interferencias por hemoglobina hasta 7,8 g/l, triglicéridos hasta 1.700
mg/dl (17 g/l) ni bilirrubina hasta 24 mg/dl (240 mg/l);
DESHIDROGENASA LÁCTICA (DHL)
La deshidrogenasa láctica (LDH) es una enzima que facilita el proceso de
transformación de glucosa en energía para que las células puedan utilizar esa energía.
La LDH se encuentra en muchos órganos y tejidos del cuerpo, incluidos el hígado, el
corazón, el páncreas, los riñones, los músculos esqueléticos, el cerebro y las células
sanguíneas.
Si una enfermedad o lesión daña las células, puede liberarse LDH en el torrente
sanguíneo, lo cual incrementará el nivel de LDH en sangre. Los niveles altos de LDH en
sangre indican un daño celular agudo o crónico; pero se necesitarán pruebas adicionales
para determinar la causa. Los niveles de LDH anormalmente bajos no son frecuentes y,
por lo general, tampoco son perjudiciales.
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SIGNIFICADO CLÍNICO
La LDH se mide principalmente para diagnosticar condiciones en las cuales hay daño
tisular. Se puede encontrar elevada principalmente en hepatitis, mononucleosis
infecciosa, tumores malignos, linfomas, anemias distrofia muscular, infarto agudo al
miocardio, pancreatitis, cirrosis y necrosis del hígado. Los niveles disminuidos no son
clínicamente importantes.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
El método se basa en el siguiente esquema de reacción:
L-lactato + NAD piruvato + NADH + H
La velocidad de formación de NADH es directamente proporcional a la actividad
catalítica de la LDH y se determina midiendo el aumento de la absorbancia a 340 nm
Las concentraciones del ensayo están optimizadas de acuerdo a los procedimientos de
referencia para la medición de la actividad catalítica de las enzimas a 37oC
MODALIDAD
Rutina
MUESTRA
Suero o plasma
CONSERVACIÓN
En caso de no procesarse en el momento, puede conservarse 7 días a 20-25 °C, 4 días a
2-10 °C o 6 semanas a -20 °C
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CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ 240 – 480 U/l
INTERFERENCIAS
➢ No se observan interferencias por triglicéridos hasta 1400 mg/dl, bilirrubina
hasta 30 mg/dl.
➢ La hemoglobina interfiere significativamente en todo su rango de
concentraciones por lo que se recomienda usar muestras libres de hemólisis
ELECTROLITOS
Un electrolito es una sustancia que contiene iones en su composición, lo que permite
comportarse como un conductor eléctrico, un ion es un átomo o molécula el cual el
número total de electrones no es igual al número total de protones, dándole así al átomo
o molécula una carga eléctrica positiva o negativa. Los electrolitos pueden ser
clasificados como aniones –cargados negativamente- o cationes -cargados
positivamente-.
Los electrolitos más importantes fisiológicamente incluyen sodio, potasio, calcio,
magnesio, cloruro, bicarbonato, fosfato y sulfatos y otros como lactato. La
concentración de hidrógenos es tan baja relativamente con otros iones que por razones
clínicas no es categorizado como un electrolito. Los principales electrolitos son sodio,
potasio y cloro
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CLORO
Es el principal anión extracelular; por lo tanto, similar al sodio está involucrado
significativamente en el mantenimiento de la distribución de agua, presión osmótica y
balance anión-catión en el organismo también, es el anión más abundante en
secreciones gástricas e intestinales. Son filtrados por el glomérulo y son reabsorbidos
pasivamente "junto al sodio en los túbulos próximales, en la porción gruesa ascendente
del asa de Henle es reabsorbido activamente por bombas cloruro que permite
reabsorción pasiva de sodio.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Causas de Hipocloremia
➢ Vómitos de repetición: estenosis pilórica, íleo obstructivo, hiperemesis
gravídica, uremia, pancreatitis aguda.
➢ Aspiración nasogástrica prolongada.
➢ Diarreas copiosas o duraderas.
➢ Íleo intestinal sin vómitos, por trasudación a la luz intestinal.
➢ Sudoración profusa con ingesta de bebidas sin sal.
➢ Fístulas digestivas altas (gástrica, duodenal, biliar, pancreática)
➢ Infecciones agudas, de forma transitoria.
➢ Acidosis metabólica con acumulación de aniones orgánicos (cetoacidosis
diabética, acidosis láctica)
➢ Acidosis respiratoria crónica, en la que se produce eliminación de cloro por la
orina.
➢ Nefropatías perdedoras de sal (tubulopatías)
➢ Insuficiencia corticoadrenal (enfermedad de Addison)
➢ Hiperalosteronismo primario y síndrome de Cushing.
➢ Hiperparatiroidismo grave en fases avanzadas.
➢ Quemaduras extensas.
➢ Utilización profusa de diuréticos.
➢ Expansión del agua extracelular (secreción inadecuada de ADH, insuficiencia
cardíaca congestiva)
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➢ Insuficiencia hepática aguda grave.
Causas de Hipercloremia
➢ La hipercloremia es menos frecuente que la hipocloremia, ya que, si se debe a un
exceso de sal, lleva consigo una retención acuosa proporcional y la
concentración no varía. Puede presentarse aislada o asociada a aumento de
sodio.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La determinación automatizada de la concentración de electrolitos tales como Na+, K+
y Cl- en suero o plasma, se fundamenta en un método potenciométrico que emplea
electrodos "ion-selectivo". Estos electrodos consisten en membranas permeables a una
determinada especie iónica.
La diferencia de potencial que se establece en la interface de la membrana y la muestra
en solución, es directamente proporcional al logaritmo de la actividad o concentración
iónica según lo establecido por la ecuación de Nernst:
E = Eo + RT/nF x log A donde:
E: diferencia de potencial; A: actividad del ión en la solución.
En el método ion – selectivo para cloro se utiliza membranas poliméricas solventes que
incorpora sales de amonio cuaternario como intercambiador aniónico, como el cloruro
de tri-n-octilpropilamonio, decanol, son usados para construir electrodos selectivos para
cloruros
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina y Emergencia
21
MUESTRA REQUERIDA
Suero, y orina.
Fluidos gastrointestinales y fecales, requieren preparación de muestra previo al análisis
(filtración, y centrifugación) y procedimientos especiales de limpieza al instrumento
después del análisis
CONSERVACIÓN
Almacenamiento a 4°C o tiempo muy prolongado de separación: Al disminuir la
temperatura enlentece el metabolismo celular por lo que la bomba sodio potasio
disminuye su actividad y hay difusión de potasio.
También hay una difusión de potasio intracelular al líquido extracelular a temperaturas
superiores (25°C) más sin embargo, mientras menor sea la temperatura y tiempo que
tarda para la separación de la muestra mayor es la pseudohiperpotasemia.
Disminución de los valores de potasio debido al tiempo prolongado de separación de
suero del paquete globular a 37°C o por leucocitosis, esto es debido a que ocurre la
glicolisis dentro de estas células a esta temperatura y hay actividad de las bombas sodio
potasio que permite la disminución del potasio extracelular, si el tiempo se prolonga la
bomba pierde su actividad y ocurre el efecto contrario.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
135 – 145 mEq/L
INTERFERENCIAS
Muestras lipémicas e hiperprotinemia: Efecto de exclusión de electrolitos.
22
POTASIO
Es el principal catión intracelular. En tejido celular su concentración promedio es de
150 mmol/L y en los eritrocitos 105 mmol/L .
El potasio es filtrado en el glomérulo y es casi reabsorbido completamente en los
túbulos próximales, después es secretado en los túbulos distales por entrada de sodio por
influencia de la aldosterona, otros factores que regulan la secreción de potasio es la
ingesta de sodio y potasio, y balance ácido-base.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Se utiliza en la evaluación del balance electrolítico, especialmente en pacientes mayores
con alimentación intravenosa, pacientes con tratamiento diurético, pacientes con falla
renal aguda, pacientes con hemodiálisis y pacientes con nefritis intersticial o nefropatía.
Evaluación de hipertensión arterial donde pueda ocurrir hipercalcemia y ser causa de
falla renal aguda.
El potasio debe ser monitorizado en el tratamiento de la acidosis, incluyendo
cetoacidosis en la diabetes.
Evaluación de debilidad muscular e irritabilidad, confusión mental, seguimientos de
leucemias, enfermedades gastrointestinales, encefalopatía hepática, vómitos, fístula,
tubo de drenaje.
Evaluación y prevención de arritmias.
Detección, diagnóstico y seguimiento de hipermineralo-corticismos (aldosteronismo
primario, síndrome de Cushing, tumor productor de ACTH ectópica, algunos casos de
hiperplasia adrenal congénita).
23
Causas de Hipercalcemia
➢ Suplementos de potasio, infusión rápida de potasio.
➢ Redistribución del K corporal: hemolisis masiva, daños tisulares severos,
anorexia nerviosa, actividad hipercinética, acidosis, deshidratación.
➢ Excreción renal reducida de K: I.R.A. con oliguria o anuria y acidosis, falla
renal crónica con oliguria (filtración glomerular menos de 3-5 ml minuto,
enfermedad de Addison, hipofunción del eje renina-angiotensina-aldosterona,
después de ejercicios fuertes (sobre todo en individuos que toman
betabloqueantes), en shock.
➢ Otras causas: acidosis tubular renal, shock traumático, quemaduras, shock
transfusional por hemólisis intravascular masiva de sangre incompatible, en toda
crisis hemolítica aguda y en reabsorción de grandes hematomas.
Causas de la Hipocalcemia
➢ Disminución de la entrada de potasio.
➢ Perdida de potasio orgánico: En secreciones intestinales: vómitos prolongados
(estenosis pilórica, obstrucción intestinal), diarrea (cólera, esteatorrea, Síndrome
de Zollinger-Ellison, síndrome de Werner-Morrison), perdidas por fístulas
(intestinal, biliar, pancreática). En orina: acidosis tubular renal, falla renal
tubular, aldosteronismo primario y secundario, síndrome de Cushing, diuresis
osmótica, cetosis diabética, tratamiento prolongado con corticosteroides.
➢ Redistribución en el organismo (disminución dentro de las células), glucosa y
terapia con insulina.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La determinación automatizada de la concentración de electrolitos tales como Na+, K+
y Cl- en suero o plasma, se fundamenta en un método potenciométrico que emplea
electrodos "ion-selectivo". Estos electrodos consisten en membranas permeables a una
determinada especie iónica.
24
La diferencia de potencial que se establece en la interface de la membrana y la muestra
en solución, es directamente proporcional al logaritmo de la actividad o concentración
iónica según lo establecido por la ecuación de Nernst:
E = Eo + RT/nF x log A donde:
E: diferencia de potencial; A: actividad del ión en la solución.
Los electrodos ion-selectivos para potasio utilizan una membrana de valinomicina que
elimina eficazmente el sodio y otras interferencias de iones.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina y Emergencia
MUESTRA REQUERIDA
Suero, plasma y orina.
Fluidos gastrointestinales y fecales, requieren preparación de muestra previo al análisis
(filtración, y centrifugación) y procedimientos especiales de limpieza al instrumento
después del análisis
CONSERVACIÓN
Almacenamiento a 4°C o tiempo muy prolongado de separación: Al disminuir la
temperatura enlentece el metabolismo celular por lo que la bomba sodio potasio
disminuye su actividad y hay difusión de potasio.
También hay una difusión de potasio intracelular al líquido extracelular a temperaturas
superiores (25°C) más sin embargo, mientras menor sea la temperatura y tiempo que
tarda para la separación de la muestra mayor es la pseudohiperpotasemia.
25
Disminución de los valores de potasio debido al tiempo prolongado de separación de
suero del paquete globular a 37°C o por leucocitosis, esto es debido a que ocurre la
glicolisis dentro de estas células a esta temperatura y hay actividad de las bombas sodio
potasio que permite la disminución del potasio extracelular, si el tiempo se prolonga la
bomba pierde su actividad y ocurre el efecto contrario.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
3.5 – 5.2 mEq/L
INTERFERENCIAS
La actividad muscular causa liberación de potasio desde las células musculares al
plasma y puede causar una elevación de la concentración del mismo, por ejemplo el mal
uso del torniquete cuando no es soltado antes de que empiece la extracción de la
muestra después que el paciente ha ejercido fuerza al abrir y cerrar la mano
Muestras hemolizadas ya que los eritrocitos tienen altas cantidades de potasio en su
interior 0.5% de los eritrocitos pueden incrementan los valores de potasio 0.5 mmol/L
Muestras lipémicas e hiperprotinemia Efecto de exclusión de electrolitos.
SODIO
Es el principal catión de líquido extracelular, es responsable por casi la mitad de la
fuerza osmótica del plasma por ello, juega un rol central en el mantenimiento de la
distribución normal de agua y la presión osmótica en el compartimiento extracelular. Es
absorbido desde el intestino delgado, filtrado completamente en el glomérulo, 70 – 80%
26
es reabsorbido en los túbulos proximales y 20 y 25% en el asa de henle junto con Cl y
agua. En los túbulos distales es el sitio de regulación a través de la interacción de la
aldosterona con los sistemas de intercambio acoplados resultando en el resto de la
reabsorción de sodio
(5 – 10%) y del cloruro indirectamente, determinando así la cantidad de sodio excretado
en la orina.
Disminución de los niveles de sodio estimulan la aldosterona, y la disminución de
presión arteriales estimula el sistema renina-angiotensina que a su vez estimula la
aldosterona.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Se utiliza para la evaluación del balance hidroelectrolítico especialmente en pacientes
con alimentación intravenosa, con tratamiento diurético, pacientes con falla renal aguda,
nefropatas. Evacuación en enfermedades gastrointestinales, enfermedades heráticas,
enfermedad de adisson, aldosteronismo.
Causas de Hipernatremia
➢ Ingestión excesiva de Na por vía oral, pérdida de agua y Na siendo la pérdida de
agua mayor que la de Na.
➢ Sudoración prolongada (ejercicios, fiebre), diuréticos, dietas bajas en Na,
enfermedad de adisson, en pérdidas de líquidos gastrointestinales (vómitos
diarrea, fístulas), lesiones a través de la piel (lesiones amplias, quemaduras),
desplazamientos de líquidos corporales, edema masivo, ascitis, etc.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La determinación automatizada de la concentración de electrolitos tales como Na+, K+
y Cl- en suero o plasma, se fundamenta en un método potenciométrico que emplea
electrodos "ion-selectivo". Estos electrodos consisten en membranas permeables a una
determinada especie iónica.
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La diferencia de potencial que se establece en la interfase de la membrana y la muestra
en solución, es directamente proporcional al logaritmo de la actividad o concentración
iónica según lo establecido por la ecuación de Nernst:
E = Eo + RT/nF x log A donde:
E: diferencia de potencial; A: actividad del ión en la solución.
La determinación por sodio-ion selectivo es la más común, tiene excelente precisión y
coeficientes de variación menor a 1.5% son logrados con equipos modernos,
calibradores confiables y buen control de calidad.
Los electrodos ion-selectivos para medir sodio tienen una membrana de vidrio sensible
a los iones de sodio que excluye a otros cationes.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina y Emergencia
MUESTRA REQUERIDA
Suero, plasma, y orina.
Fluidos gastrointestinales y fecales, requieren preparación de muestra previo al análisis
(filtración, y centrifugación) y procedimientos especiales de limpieza al instrumento
después del análisis
CONSERVACIÓN
Almacenamiento a 4°C o congelación.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
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VALORES NORMALES
95 – 110 mEq/L
INTERFERENCIAS
Muestras lipémicas e hiperprotinemia: Efecto de exclusión de electrolitos.
FACTOR REUMATOIDEO
El factor reumatoide es un autoanticuerpo del tipo IgM producido contra la porción Fc
de la inmunoglobulina G (Ig G). Los títulos se encuentran elevados en ciertas
enfermedades reumáticas y en algunas infecciones crónicas (tuberculosis, lepra, entre
otras). Se detectan valores elevados de Factor Reumatoide en el 80% de los pacientes
con artritis reumatoide y en menores concentraciones en los pacientes con infecciones
crónicas, enfermedades autoinmunes (lupus eritematoso diseminado o síndrome de
Sjögren); y enfermedades crónicas pulmonares, hepáticas o renales.
Entre otras situaciones, destaca la indicación de solicitar una determinación de FR
cuando existen sospechas clínicas de artritis reumatoide, si bien es cierto que no es un
test específico para esta enfermedad, por lo que el positivo no puede confirmar la artritis
reumatoide, su negatividad nos obligaría a replantear el diagnóstico.
El origen y la patogenia del factor reumatóide, todavía no es claro. Mientras tanto,
inmunocomplejos capaces de activar complemento y que están constituidos por factor
reumatóide IgMe IgG, se encuentran depositados en la región sinovial y vasos
sanguíneos de pacientes portadores de artritis reumatóide. Pueden tomarse medidas
terapéuticas para suprimir las manifestaciones inflamatorias de la enfermedad y ayudar
a la reducción de la disfunción músculo esquelético. Por lo tanto, los test usados para la
detección precoz del factor reumatóide, tiene un significado clínico importante.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La detección de FR es uno de los criterios para el diagnóstico de la Artritis Reumatoide
(AR). Los FR desempeñan un papel importante en el diagnóstico diferencial, para
29
distinguir la AR de otras enfermedades reumáticas. La presencia de concentraciones
elevadas de FR se suele asociar con un curso de la enfermedad más grave. Asimismo,
los FR pueden aparecer con otras enfermedades reumáticas y no reumáticas, tales como
la hepatitis, endocarditis e infecciones parasitarias o virales, así como con otras
enfermedades autoinmunes.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Determinación cuantitativa de los factores de reumatoides (FR) en suero por
Inmunoturbidimétrico
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina
MUESTRA REQUERIDA
Suero o plasma
CONSERVACIÓN
Temperatura ambiente: 24 horas; Refrigerado: 1 semana; Congelado: 2 semanas.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ < 14. 0 Ul/mL
30
INTERFERENCIAS
➢ Transfusiones sanguíneas recientes, vacunación múltiple, o inadecuada actividad
del complemento pueden afectar los resultados.
➢ Sueros con crioglobulinas o altos niveles lipídicos pueden causar falsos
positivos, requiriendo repetir la prueba luego de un periodo de ayuno.
➢ Suero libre de hemólisis y turbios puede afectar los resultados
FOSFATASA ALCALINA
La fosfatasa alcalina es un grupo de enzimas que cataliza la hidrolisis del ligamiento
estérico, entre álcali y ácido fosfórico, con liberación de fosfato inorgánico
La fosfatasa alcalina se encuentra en muchos tejidos: huesos, mucosa intestinal, hígado,
bazo, pulmones, tiroides, etc.
La fosfatasa alcalina en el plasma se encuentra constituida por algunas isoenzimas
producidas por el hígado, tejido del hueso y la mucosa intestinal
La isoenzima de origen hepático constituye la principal fracción de la fosfatasa alcalina
en adultos; en los niños, se evidencia la producidad en los huesos.
El valor de la fosfatasa alcalina en el plasma es diferente con la edad: en el nacimiento,
los valores son iguales a los de adulto; después aumentan el doble del valor, hasta los 10
años_; se mantienen los valores elevados entre 11 y 16 años, y después vuelven a
valores de los adultos. En los hombres, la fosfatasa alcalina es mayor que en las
mujeres.
SIGNIFICADO CLÍNICO
El aumento de la fosfatasa alcalina se encuentra en:
➢ Enfermedades del hígado por un aumento de la fracción hepática o de la fracción
de los huesos por obstrucción de la vía biliares
➢ Hepatopatías celulares
31
➢ Hepatopatías obstructiva
➢ Enfermedad ósea por aumento de la fracción ósea, debido a la incrementada
actividad de los osteoblastos (raquitismo, enfermedad de Paget,
hiperparatiroidismo, osteomalacia, neoplasia del tejido óseo, trauma o fracturas
óseas)
➢ La disminución de la fosfatasa alcalina se origina en la disminución del
magnesio, porque este es el ion necesario para la actividad de la fosfatasa
alcalina.
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
Método colorimétrica cinética optimizada
El sustrato p-nitrofenilfosfato es hidrolizado por la enzima, produciendo p-nitrofenol y
ácido fosfórico. La reacción se interrumpe con hidróxido de sodio que convierte el p-
nitrofenol en ion para nitrofenilato
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
MUESTRA REQUERIDA
Suero
CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por dos
días a temperatura ambiente de 20-25 °C, 7 días 2-4°C y 4 semanas en congelación a -
20°C
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
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VALORES NORMALES
➢ Adulto:10-140 u/l
➢ Personas más de 60 años: 18-180 U/L
INTERFERENCIAS
Las interferencias más significativas son:
➢ Hemolisis: con Hb > 2,0 g/l (porque la fosfatasa acida se encuentra en glóbulos
rojos)
➢ Ictericia : con bilirrubina > 60.0 mg/dl
➢ Lipemia : con triglicéridos > 2000.0 mg/dl
GGT “GAMA GLUTAMIL TRANSFERASA”
La gama glutamil transferasa cataliza el transporte del grupo gamma-glutaminico. La
GGT está presente en muchos tejidos (hígado, riñón, páncreas, pulmón, bazo, intestino
y tiroides)
En el suero, está presente tres isoenzimas que migran de modo distinto en la
electroforesis.
La g-GT también se encuentra en la orina donde su concentración es más elevada que
en el suero
SIGNIFICADO CLÍNICO
El aumento de la GGT se encuentra en todas las enfermedades del hígado y de las vías
biliares. El aumento más alto se encuentra en la obstrucción de las vías biliares. La
determinación es importante en el diagnóstico de metástasis hepática. Se usa también en
el diagnóstico para identificar alcoholismo, para el monitoreo de la abstención del
alcohol en la terapia de desintoxicación, en las enfermedades del hígado. Parece que el
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aumento de la GGT en las enfermedades hepáticas está en relación con una aumentada
síntesis de la enzima a nivel hepático
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La g-glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza la transferencia del grupo
gamma – glutamilo, desde el sustrato L - gamma p- nitroanilida, a una molécula de
glicilglicina (aceptor) liberando p-nitroanilina en cantidades equimoleculares. En las
condiciones de reacción, la cantidad de p-nitroanilina liberada es directamente
proporcional a la actividad a- GT del suero
MODALIDAD
Rutina
MUESTRA
Suero
CONSERVACIÓN
La toma de muestra se puede conservar por tres días a temperatura ambiente de 20-25
°C, siete días 2-4°C, 1 año en congelación
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
Hombres hasta 50.0 U/L
Mujeres hasta 36.0 U/L
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INTERFERENCIA
Las interferencias más significativas son
Hemolisis con Hb > 1.5 g/l
Ictericia: con bilirrubina > 40.0 mg/dl Lipemia:
con trigliceridos > 2000.0 mg/dl Muchos
antibióticos pueden dar un valor elevado
GLUCOSA
El análisis de glucosa en sangre mide la cantidad de glucosa (el tipo de azúcar más
importante en el cuerpo) en una muestra de sangre. La glucosa es la principal fuente de
energía del organismo. Nuestros cuerpos descomponen los alimentos en glucosa y otros
nutrientes, que posteriormente son absorbidos por el torrente sanguíneo en el tracto
gastrointestinal. Los niveles de glucosa en sangre aumentan después de haber ingerido
alimentos y desencadenan la producción de una hormona denominada "insulina" en el
páncreas, la cual se libera en el torrente sanguíneo.
La insulina actúa como una llave que abre las puertas de las células y permite la entrada
de la glucosa. Sin insulina, la glucosa no puede penetrar en las células y permanece en
el flujo sanguíneo. Como consecuencia, los niveles de azúcar en sangre son mayores de
lo normal.
Un alto nivel de azúcar en sangre (hiperglucemia) es un motivo de preocupación ya que,
de no tratarse, puede causar problemas de salud tanto a corto plazo (sed insaciable,
necesidad frecuente de orinar y cansancio) como a largo plazo (daños de los órganos
internos y nerviosos). Un nivel de azúcar en sangre muy bajo es también preocupante ya
que suele causar síntomas como transpiración, temblores y mareos.
La diabetes es la causa más común del aumento anormal del azúcar en la sangre. La
gente que sufre de diabetes no puede generar o responder a la insulina correctamente.
Esto significa que deben controlar muy de cerca los niveles de glucosa y seguir el plan
que le indica el médico para controlar su enfermedad, el cual incluye dieta,
35
medicamentos (como inyecciones de insulina) y ejercicio físico para mantener el azúcar
en sangre dentro de un nivel normal.
SIGNIFICADO CLÍNICO
El análisis de glucosa en sangre se solicita para medir la cantidad de azúcar presente en
la sangre. Se puede llevar a cabo como parte de un examen físico de rutina, para
detectar la diabetes tipo 1 y tipo 2, identificar la existencia de diabetes gestacional
durante el embarazo (los niveles altos de glucosa pueden afectar la salud de la madre y
del bebé).
Los análisis de glucosa (tanto los de autocontrol en el hogar como los que se hacen en el
consultorio del médico) en una persona con diabetes son una parte importante de un
buen plan de control de la enfermedad.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa
oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo catálisis de la peroxidasa con
fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo violeta usando la quinoneimina
como indicador.
MODALIDAD DE SOLICITUD
En rutina y/o emergencia
MUESTRAS REQUERIDA:
Para valor de glucosa en ayunas: Suero Tomado completamente en ayunas de 12 horas.
Para valor de glucosa postprandial: primera muestra completamente en ayunas de 12
horas y segunda muestra 2 horas después de haber ingerido un desayuno completo.
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CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por un día
a más a 20-25 °C, cinco días 2-4°C, 1 mes a -20°C
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
Adultos 74– 109 mg / dl
>60 años 80 – 115 mg /dl
Niños 60 – 110 mg /dl
Recién nacidos
(1día)
40 – 60 mg /dl
R.N, >1 día 50 – 80 mg/ dl
INTERFERENCIA
➢ Los sueros o plasmas con hemólisis visible o intensa deben ser desproteinizados.
➢ No se observan interferencias por: bilirrubina hasta 200 mg/l.
➢ Ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, hemólisis ligera
HEMOGLOBINA GLICOSILADA
La hemoglobina es una proteína que tiene la función de transportar el oxígeno de los
pulmones a los tejidos, se encuentra en los glóbulos rojos (células de la sangre), y se
caracteriza por estar formada de hierro.
37
La glucosa se une a la hemoglobina para formar hemoglobina glucosilada o
hemoglobina A1c, esta unión se mantiene hasta que el glóbulo rojo es desechado, lo
cual ocurre en aproximadamente 120 días. Cuando los niveles de glucosa aumentan,
también se incrementa la hemoglobina A1c.
Diferentes estudios han demostrado que mayores niveles de Hemoglobina A1C se
asocian a un mayor riesgo de complicaciones. Dado que una persona con diabetes
descontrolada es más susceptible de presentar daños en los pequeños vasos sanguíneos,
y por consiguiente de desarrollar complicaciones en el corazón, cerebro, ojos y en los
riñones, entre otros órganos.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Seguimiento a largo plazo de la glicemia en pacientes con Diabetes Mellitus.
Proporciona una estimación del riesgo de complicaciones micro y macrovasculares. En
su empleo clínico de rutina, por lo general basta en realizar la prueba cada 3 o 4 meses.
En situaciones como la diabetes gestacional o al modificar el tratamiento puede ser
conveniente medir la HBA1C en intervalos de 2 a 4 semanas.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La medición de hemoglobina total es colorimétrica y la HbA1c es
Inmunoturbidimétrica.
Para determinar la cantidad de hemoglobina A1c (HbA1c) como una proporción de la
hemoglobina total, en sangre entera humana (% o mmol/mol HbA1c). Para ello, es
necesario liberar la hemoglobina contenida en los glóbulos rojos, mediante la hemólisis
de la muestra. La sangre del paciente se pone en contacto con el Reactivo Hemolizante
que contiene un detergente (bromuro de tetradeciltrimetilamonio - TTAB) que lisa los
glóbulos rojos específicamente.
A partir del hemolizado obtenido, se determina mediante dos reacciones independientes,
el nivel de HbA1c y Hb de la muestra.
38
➢ HbA1c
Durante la primera fase de la reacción, la HbA1c de la muestra reacciona con el
anticuerpo específico anti-HbA1c, formando complejos antígeno-anticuerpo
solubles. Dado que la molécula de HbA1c posee un solo epítope por β-globina
para la fijación del anticuerpo específico, no pueden formarse redes de
inmunocomplejos.
Con la adición del polihapteno, que posee numerosos epítope por molécula, se
produce la reacción de dichas moléculas con el exceso de anticuerpo específico
de la primera reacción, dando lugar a inmunocomplejos insolubles que pueden
ser medidos turbidimétricamente a 340 nm.
De esta manera, cuanto mayor es el contenido de HbA1c de la muestra, menor es
la formación de inmunocomplejos insolubles y menor la señal turbidimétrica
obtenida.
➢ Hb
La hemoglobina liberada al hemolizar la muestra, es convertida en un derivado
que puede ser medido espectrofotométricamente. Este método es capaz de
detectar todas las variantes de hemoglobina glicadas en la porción N-terminal de
la cadena β, cuya región reconocida por el anticuerpo es idéntica a la HbA1c. De
esta manera permite controlar el estado metabólico del diabético con
hemoglobinopatías y uremia.
MODALIDAD
Rutina
MUESTRA
Plasma
organismo y de la transferencia de lípidos de un organismo a otro. Las lipasas, cuya
39
CONSERVACIÓN
La muestra es estable 3 días a temperatura ambiente (15-25ºC), 7 días refrigerada (2-
10ºC) o 6 meses congelada (-20ºC). Sólo puede ser descongelada una vez
CENTRIFUGACIÓN No
se centrifuga VALORES
NORMALES
No diabéticos: 4-6 % Diabéticos controlados: 6-8 % Diabéticos no controlados: hasta
20%
INTERFERENCIAS
Cualquier situación que produzca una ↓en la vida media de los eritrocitos disminuirá los
valores de HBA1C
No se observan interferencias por bilirrubina (conjugada y no conjugada) hasta 40
mg/dL, triglicéridos hasta 13 g/L, ácido ascórbico hasta 50 mg/dL y factor reumatoideo
hasta 500 U/mL.
Deberán interpretarse con cuidado los valores de HbA1c obtenidos en aquellas
patologías o situaciones que alteran la vida media de los eritrocitos, como anemias
hemolíticas, anemias ferropénicas, transfusiones, pérdidas de sangre, etc.
LIPASA
La lipasa es una enzima de la clase de las hidrolasas, que se usa en el organismo para
disgregar los lípidos (grasas) de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su
función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol. También están
involucradas en el rompimiento y movilización de los lípidos dentro de las células de un
40
denominación bioquímica es acil-ester-hidrolasas, son enzimas relativamente
específicas en su actividad catalítica y algunas de ellas se distinguen por su alta
estereoespecificidad. La función principal de esta lipasa gástrica es ayudar a la
absorción de grasas.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Valores aumentados pueden deberse a:
➢ Bloqueo del intestino
➢ Celiaquía (inflamación crónica de la parte próxima del intestino delgado)
➢ Colecistitis (con efectos en el páncreas)
➢ Úlcera duodenal
➢ Gastroenteritis (grave)
➢ Macrolipasemia
➢ Cáncer pancreático
➢ Pancreatitis aguda o crónica
Valores disminuidos:
➢ Durante el embarazo como variación fisiológica, especialmente en los últimos
meses, con pronta recuperación después del parto.
➢ En el curso de la tuberculosis y otras enfermedades infecciosas. Frecuentemente
en la diabetes sacarina.
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
La lipasa hidroliza el sustrato definido glutárico-metilresorufina éster, compuesto
inestable que se descompone espontáneamente liberando un compuesto 1,2-O-dilauril-
racglicerol-3-glutárico-(6’-metilresorufina)-éster para liberar ácido coloreado
(metilresorufina) que se mide a 570 nm. La velocidad de aparición de color es
directamente proporcional a la actividad enzimática.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
realice la fagocitosis hecha por macrófagos, quienes expresan un receptor para PCR.
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MUESTRA REQUERIDA
Suero, líquido peritoneal y pleural
CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por 72
horas a temperatura ambiente y refrigerada 7 días; Congelada 2 meses
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ Adulto: 10-140 u/l
➢ Personas más de 60 años: 18-180 U/L
INTERFERENCIAS
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 40 mg/dl, hemoglobina hasta 500
mg/dl, triglicéridos hasta 1200 mg/dl.
PCR
La PCR es miembro de la clase de reactivos de fase aguda o proteína de fase aguda y su
nivel aumenta dramáticamente durante los procesos inflamatorios que ocurren en el
cuerpo. Este incremento se debe a un aumento en la concentración plasmática de IL-6,
que es producida por macrófagos, células endoteliales y linfocitos T, como también lo
hacen los adipocitos.3 La PCR se liga a la fosfocolina de los microorganismos. Se
piensa que colabora con el complemento ligándose a células extrañas y dañadas, y que
42
También se cree que desempeña un papel importante en la inmunidad innata, como un
sistema de defensa temprano contra infecciones. La PCR aumenta hasta 50.000 veces en
estados inflamatorios agudos. Se eleva sobre su nivel normal dentro de las 6 horas
siguientes y alcanza el pico máximo en 48 horas. Su vida media es constante, y por ello
la principal forma de medir sus niveles, es mediante la determinación de la tasa de
producción (y por lo tanto la gravedad de la causa precipitante). El amiloide A sérico es
un marcador de fase aguda relacionado, que se eleva rápidamente en circunstancias
similares.2 Además se ha demostrado que sus niveles se incrementan en los episodios
agudos coronarios, significando un mal pronóstico tanto a corto como a largo plazo
SIGNIFICADO CLÍNICO
Su nivel aumenta dramáticamente durante los procesos inflamatorios que ocurren en el
cuerpo. Este incremento se debe a un aumento en la concentración plasmática de IL-6,
que es producida por macrófagos, células endoteliales y linfocitos T, como también lo
hacen los adipocitos. Además se ha demostrado que sus niveles se incrementan en los
episodios agudos coronarios (síndromes coronarios agudos), significando un mal
pronóstico tanto a corto como a largo plazo.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Determinación cuantitativa de la Proteína C Reactiva (PCR) en suero humano,
reacciona con el anticuerpo específico formando inmunocomplejos insolubles. La
turbidez provocada por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentración de
PCR en la muestra y puede medirse espectrofotométricamente.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina y emergencia
MUESTRA REQUERIDA
Suero o Plasma
43
CONSERVACIÓN
Refrigerar la muestra a 2-8°C. Por un máximo de 48 horas, en caso contrario congelar a
-20°C o a temperatura inferior. Una vez descongeladas las muestras deben agitarse bien
antes de utilizarse.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ < 0.5 mg /dl
INTERFERENCIAS
➢ No emplear muestras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
➢ Las muestras que poseen precipitado deben ser centrifugadas previo al ensayo.
➢ No se observan interferencias por bilirrubina hasta 22 mg/dl (220 mg/l), ni factor
reumatoideo hasta 500 UI/ml.
PERFIL LIPÍDICO
Los lípidos tienen la propiedad de ser relativamente insolubles en agua, y solubles en
solventes no polares como el éter, cloroformo y benceno.
Los lípidos son constituyentes importantes de la alimentación no solo por su elevado
valor energético, sino también por las vitaminas liposolubles y los ácidos grasos
esenciales contenido en las grasas de los alimentos naturales.
44
Las lipoproteínas son constituyentes celulares que se encuentran en las membranas
celulares y en las mitocondrias y sirven como medio de transporte de los lípidos en la
sangre.
El perfil lipídico mide lo siguiente:
➢ Colesterol total
➢ HDL
➢ LDL “ Lipoproteinas de baja densidad”
COLESTEROL TOTAL
El colesterol es un esteroide que se encuentra distribuido en casi todas las membranas
celulares del organismo animal especialmente en tejido nervioso.
La mayor parte del colesterol del organismo se origina por síntesis y una pequeña
cantidad es suministrada por los alimentos de la dieta, principalmente carne, hígado,
sesos yema de huevos. Se sintetiza principalmente en hígado, corteza suprarrenal, piel e
intestino. En el organismo se encuentra bajo dos formas químicas: colesterol libre y
colesterol esterificado e su grupo 3-OH con ácidos grasos de cadena larga.
En el plasma un 25% de colesterol total se encuentra en forma libre y un 75% en forma
esterificada. El colesterol es transportado como lipoproteínas encontrándose la
proporción más alta de colesterol en las LDL (lipoproteínas de baja densidad) las cuales
se forman a partir de VLDL (lipoproteínas de muy baja densidad) y una pequeña
proporción en las HDL (lipoproteínas de alta densidad) la cantidad de colesterol en los
quilomicrones es mínima y representa el colesterol suministrado por la dieta. El
colesterol tienes funciones muy importantes en el organismo ya que es uno de los
componentes estructurales de las membranas celulares y además es precursor de
hormonas esteroideas, sales biliares y vitamina d.
El colesterol total es el valor que indica el total de colesterol presente, que será en su
mayor parte LDL y HDL. Esta cifra suele servir para calcular el riesgo de enfermedad
45
cardiovascular. Hoy en día los expertos saben, en cualquier caso, que en este sentido el
índice de colesterol LDL es mucho mejor indicador.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Su concentración se ve alterada por:
Edad, factores genéticos, sexo, dieta, actividad física y hormonas.
Se observa hipercolesterolemia en:
➢ Condiciones fisiológicas: embarazo, condiciones patológicas: ictericia
obstructiva, colestasia, síndrome nefrótico y pancreatitis aguda.
Se observa hipocolesterolemia en:
➢ Condiciones fisiológicas: desnutrición Condiciones patológicas: insuficiencia
hepática grave, hipertiroidismo y procesos infecciosos agudos.
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
La determinación de Colesterol total está basada en el procedimiento enzimático
descrito por Allain, donde la colesterol esterasa (CE) hidrolizan los esteres de colesterol
a colesterol libre y ácidos grasos. En presencia de oxígeno, el colesterol libre es oxidado
por la colesterol oxidasa (CO) a cholest-4-en-3-one y peróxido de hidrogeno. Cuando el
fenol esta oxadativamente acoplado con 4-aminoantipirina en la presencia de peroxidasa
(HPO), y peróxido de hidrogeno se produce un cromóforo de quinoneimina. La
intensidad del color producido es proporcional a la concentración de colesterol y se
mide colorimétricamente a cerca de 500nm.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
46
MUESTRA REQUERIDA
Suero y plasma
Para el análisis químico de lípidos y lipoproteínas se prefiere generalmente suero y si es
plasma el anticoagulante aconsejado es EDTA sólido (1 mg/ml de sangre) y las células
sanguíneas deben separase tan pronto como sea posible.
CONSERVACIÓN
Por 5 días a temperatura ambiente, 2 semanas refrigeradas, 6 meses si se congela
NOTA: el HDL-colesterol no debe congelarse para es estable hasta 5 días refrigerado.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ 150 – 200 mg/dl
INTERFERENCIAS
➢ Niveles de ácido ascórbico tan altos como 10 mg %, No Interfieren en la prueba
➢ El presente método de Colesterol, á demostrado ser lineal hasta 500 mg/dl. Más
allá de este límite, las muestras deberán diluirse con solución salina (0,85%) y
ensayadas nuevamente. El nuevo resultado deberá multiplicarse por el factor de
dilución.
47
LIPOPROTEÍNAS DE BAJA DENSIDAD Y DE ALTA DENSIDAD
El colesterol es una sustancia similar a la grasa que la sangre ha de transportar por el
cuerpo. Imagina qué pasa si viertes un poco de aceite en un cuenco de agua. Las dos
sustancias no pueden mezclarse. Por esta razón, el colesterol tiene que viajar unido a un
medio de transporte o un “portador”: la lipoproteína de baja densidad (LDL) y la
lipoproteína de alta densidad (HLD). El colesterol HDL y el LDL se clasifican como
“bueno” y “malo” respectivamente por las tareas que cada uno realiza al transportar el
colesterol por el cuerpo.
COLESTEROL LDL
Conocido como colesterol “malo”: es importante reducirlo al máximo.
El LDL lleva colesterol desde el hígado al resto del cuerpo. Cuando la concentración de
colesterol LDL en nuestra sangre es demasiado elevada, el exceso se va acumulando
lentamente en las paredes de las arterias, estrechándolas y volviéndolas más rígidas.
Con el tiempo esto nos hace más propensos a sufrir un ataque cardíaco.
Junto a otros factores de riesgo, nuestro índice de colesterol LDL sirve para pronosticar
el riesgo de una persona de contraer enfermedades cardiovasculares. Los expertos están
de acuerdo en que los índice de colesterol LDL deben mantenerse lo más bajos posible.
COLESTEROL HDL
Conocido como colesterol “bueno”: realiza funciones importantes para proteger el
corazón.
El colesterol HDL es como un hacendoso experto en limpieza. Retira el colesterol de las
paredes arteriales y lo lleva de vuelta al hígado. Por eso, porque se encarga de eliminar
el colesterol malo (LDL), se considera que el colesterol HDL nos protege frente a las
enfermedades cardiovasculares. De ahí el valor de este colesterol “bueno”.
48
SIGNIFICADO CLÍNICO
Las lipoproteínas plasmáticas tienden a aumentar como resultado de:
➢ Una sobreproducción reducida utilización o hidrólisis deficientes catabolismo de
los mismos
También pueden verse alteradas por:
➢ Variación fisiológica: como la edad y peso. La edad tiende a elevar o disminuir
los valores de fosfolipidos y colesterol. El peso tiende a elevar los valores de
fosfolipidos y colesterol
Variaciones patológicas: dislipoproteinemia
Primaria:
➢ Tipo I: Aumento de quilomicrones
➢ Tipo II a: aumento de LDL
➢ Tipo II b: aumento del LDL Y VLDL
➢ Tipo III: Beta ancha
➢ Tipo IV: aumento del VLDL
➢ Tipo V: aumento del quilomicrones y VLDL
Secundaria:
➢ Hipotiroidismo: aumento del colesterol
➢ Diabetes sacarina: aumento de los triglicéridos
➢ Síndrome nefrótico: aumento de los lípidos totales
49
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
La separación del HDL-colesterol, está basada en la separación en la selectividad de los
iones fosfotungstico y magnesio para precipitar todas las lipoproteínas con excepción
del HDL-colesterol. Después de la centrifugación el HDL-colesterol contenido en el
líquido sobrenadante, se determina con el mismo método que se determinó el colesterol
total.
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene el
colesterol unido a las LDL
CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS PARA DETERMINAR LDL
LDL = CT – T/5 – cHDL
Para calcular el LDL, según la fórmula de Friedewald, se necesita las cantidades del
Colesterol Total (CT), menos los Triglicéridos divido para 5 (T/5), menos colesterol de
las HDL (cHDL).
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
MUESTRA REQUERIDA
Suero y plasma
Para el análisis químico de lípidos y lipoproteínas se prefiere generalmente suero y si es
plasma el anticoagulante aconsejado es EDTA sólido (1 mg/ml de sangre) y las células
sanguíneas deben separase tan pronto como sea posible.
CONSERVACIÓN
50
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por dos
días a temperatura ambiente de 20-25 °C, 7 días 2-4°C y 4 semanas en congelación a -
20°C
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ Hombres: > 55 mg / dl
➢ Mujeres : > 65 mg / dl
INTERFERENCIAS
Anticoagulantes distintos de la heparina y bilirrubinemia mayor de 50 mg/l son causas
de interferencia.
TRIGLICÉRIDOS
Casi todas las grasas presentes en los alimentos y en el cuerpo se presentan en forma
de triglicéridos. Los triglicéridos llevan a cabo una importante labor como fuentes de
energía que llevan la grasa por todo el cuerpo.
Los triglicéridos de la sangre, o bien provienen de las grasas de los alimentos o bien se
han formado en el cuerpo a partir de otros nutrientes como los azúcares. Una
concentración elevada de triglicéridos en sangre se asocia a las enfermedades
cardiovasculares, razón por la cual han de mantenerse bajos.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Aumentado en:
➢ Hipertrigliceridemia familiar.
51
➢ Síndrome nefrótico.
➢ Diabetes mellitus.
➢ Pancreatitis
➢ Embarazo.
➢ Enfermedad hepática.
➢ Insumo crónico de alcohol.
Disminuido en:
➢ Desnutrición.
➢ A-beta-lipoproteinemia congénita.
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
1.- El glicerol y los ácidos grasos se forman en una primera etapa por la acción de la
lipasa sobre los triglicéridos.
2.- El glicerol se fosforila por la adenosin-5-trifosfato (ATP) para producir glicerol-3-
fosfato (G-3-P) y adenosin 5-difosfato (ATP) para producir glicerol-3-fosfato (G-3-P) y
adenosin 5-difosfato (ATP) en una reacción catalizada por la glicerol-kinasa (GK).
Glicerol + ATP-----GK--------- G-3-P + ADP
3.- La G-3-P es oxidada por la gliceril fosfato oxidasa (GPO) produciendo
deshidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrógeno.
G-3-P + O2 --------GPO------ DAP + H2O2
4.- Los peróxidos reaccionan con 4-aminoantipirina y 4-clorofenol bajo la influencia
catalítica de la peroxidasa (POD) para formar quinoneimina.
2H2O2 + 4-amionopirina ----POD----- quinoneimina + HCL + 4H2O
52
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
MUESTRA REQUERIDA
Suero o plasma (La heparina y EDTA son los anticoagulantes de elección)
CONSERVACIÓN
Los triglicéridos son estables por 10 días a 2-8’C-No deje las muestra a temperatura
ambiente, ya que los fosfolípidos pueden hemolizarse liberando glicerol libre,
falsamente aumentados los triglicéridos
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ 20 – 200 mg/dl
INTERFERENCIAS
➢ Lipemia (>2 g/L) puede afectar los resultados.
➢ Bilirrubina (20 mg/dL) no interfiere.
➢ Hemoglobina puede afectar los resultados.
➢ Otros medicamentos y sustancias pueden interferir
53
PROTEÍNAS TOTALES, ALBUMINA Y GLOBULINA
Las proteínas son un constituyente muy importante de las células y los tejidos del
cuerpo humano. Las proteínas totales séricas se pueden separar en dos grandes grupos la
Albúmina y las Globulinas.
La albúmina es la proteína de más concentración en la sangre. Transporta muchas
moléculas pequeñas y mantiene la presión sanguínea. Las globulinas se pueden dividir
en alfa-1, alfa- 2, beta y gamma globulinas. La albúmina representa el 60% de las
proteínas que contiene el suero, el resto son las globulinas. La determinación de
proteínas totales se realiza para evaluar la posible presencia de enfermedades
nutricionales, enfermedades del riñón o del hígado.
SIGNIFICADO CLÍNICO
En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnutrición, infecciones
prolongadas, etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como
mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de diversos orígenes,
se observan hiperproteinemias.
En general, ambas situaciones se ven acompañadas también por hipoalbuminemias. Los
aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se relacionan casi siempre con
deshidratación que produce el consecuente aumento en el contenido proteico del
plasma.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Para la determinación de proteínas totales se utiliza el método de Biuret; cuyo nombre
se debe al biuret, una molécula formada a partir de dos moléculas de urea (H2N-CO-
NH-CO-NH2), que es la más sencilla que da positiva a esta reacción.
Determinación de Proteínas Totales: Reacción del biuret. En medio alcalino regulado,
los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con los iones cúpricos del reactivo,
dando un complejo de color azul- violáceo cuya intensidad medida fotométricamente a
540 nm, es proporcional a la concentración de proteínas totales de la muestra.
54
Determinación de Albúmina: Unión a colorantes. En el medio de reacción tamponado a
PH 3,6 y con adecuada fuerza iónica, la albúmina presente en la muestra se une
específicamente con el colorante verde de Bromo Cresol. El cambio en las propiedades
ópticas que muestra el complejo albúmina colorante traducido en un incremento de la
absorbancia medida a 625 nm respecto de la solución del colorante libre, permite
cuantificar fotométricamente a la albúmina de forma proporcional a su concentración en
la muestra
Para la determinación de globulina se calcula de la siguiente manera:
Proteínas totales - Albúmina = Globulina
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina y Emergencia
MUESTRA REQUERIDA
Determinación de P.T en suero libre de hemólisis.
Determinación de Alb en suero libre de hemólisis.
CONSERVACIÓN
Los sueros son estables 48 hs. en refrigerador, o 1 mes en congelador.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
VALORES NORMALES
➢ Albumina: Adultos 3.97 – 4.94 gr/dl
55
➢ Proteínas: 6.6 – 8.7 gr/dl
➢ Globulina: 2.0 a 3.5 gr/dL
INTERFERENCIAS
Para la valoración de P.T. no interfiere la hemólisis ligera. Valores de bilirrubina hasta
200 mg/I no alteran los resultados. Sueros lipémicos con valores de triglicéridos hasta 6
g/l, no modifican significativamente los resultados.
Para la valoración de Alb, no interfiere la hemólisis moderada, valores de bilirrubina
hasta 200 mg/I, como así tampoco suero de aspecto lechoso.
TGO “TRANSAMINASA GLUTÁMICA OXALACÉTICA”
La transaminasa glutámica oxalacétia (TGO) o Aspartato Aminotransferasa (ASTL)
pertenece al grupo de las transaminasas, las cuales catalizan la transformación de los
aminoácidosa a los respectivos alfaceto – ácidos, a través de las transferencia del grupo
amino y viceversa. La ASTL está presente en cantidad elevada en muchos tejidos con
localización celular en las mitocondrias y en el citoplasma. Los tejidos más ricos del
ASTL son: corazón, hígado, musculo, riñón, cerebro, páncreas, eritrocitos, leucocitos,
pulmón y bazo
SIGNIFICADO CLÍNICO
La determinación de la ASTL en el suero está indicada para seguir los fenómenos
lesivos de las células. Si la concentración de la enzima en el suero es moderada, esta
proviene del citoplasma y, en menor medida, de las mitocondrias; si la concentración de
la enzima esta elevada en relación con fenómenos lesivos y necróticos de la célula,
proviene en mayor medida de las mitocondrias.
Los valores más elevados de la ASTL se relacionan con los procesos necróticos del
órgano infarto al miocardio, hepatopatías, distrofia muscular. La determinación de la
ASTL es útil en presencia de un informe dudoso de electrocardiograma. La ASTL
puede aumentar también en el infarto pulmonar, en la pancreatitis aguda, en la hepatitis,
56
en el envenenamiento por hongos (Amanita falloide) o por la absorción de algunos
fármacos (isoniazide, rifampicina, algunos antibióticos)
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La enzima aspartato aminotransefrasa (ASTL) o transaminasa glutámica oxalacétia
(TGO) cataliza la transferencia del grupo amino del aspartato al cetoglutarato, formando
oxalacetato y glutamato. La concentración catalítica e determina empleando la reacción
acoplada de la malato deshidrogenasa (MDH) a partir de la velocidad de desaparición
del NADH
L-Aspartato + α-Cetoglutarato ⎯⎯ →⎯ Glutamato + Oxalacetato AST Oxalacetato + NADH + H+ ⎯⎯ →⎯⎯ Malato + NAD MDH +
MODALIDAD
Rutina y / o emergencia
MUESTRA Suero
CONSERVACIÓN
La toma de muestra se puede conservar por tres días a temperatura ambiente de 20-25
°C, siete días 2-4°C, 1 año en congelación
CENTRIFUGACIÓN
Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por tres
días a temperatura ambiente de 20-25 °C, siete días 2-4°C, 1 año en congelación
57
VALORES NORMALES
Hombres hasta 40.0 U/L
Mujeres hasta 30.0 U/L
INTERFERENCIA
Las interferencias más significativas son
Hemolisis con Hb > 6.0 g/l
Ictericia: con bilirrubina > 60.0 mg/dl Lipemia:
con trigliceridos > 1000.0 mg/dl Muchos
fármacos pueden dar un valor elevado
TGP “TRANSAMINASA GLUTÁMICA PIRÚVICA”
La transaminasa glutámica pirúvica o alanina aminotransferasa pertenece al grupo de
aquellas transaminasas que catalizan la transformación de los aminoácidos a los
respectivos alfacetoácidos a través de la transferencia de un grupo amino y viceversa.
La ALT está presente en cantidad elevada en el hígado, y en pequeña cantidad en el
músculo cardiaco y en el riñón. La localización es en el citoplasma.
En el daño celular leve, los valores de la ALT son más elevados que la ASTL y
viceversa. La ALT permanece mayor tiempo aumentada con respecto a la ASTL
SIGNIFICADO CLÍNICO
La determinación de la GPT está relacionada con las enfermedades del hígado. Se
encuentra muy elevada en las diferentes hepatitis virales (A, B, C, delta, E) con valores
20-50 veces más elevados con respecto a los valores de referencia, aumenta también en
la mononucleosis infecciosa y citomegalovirus. Se puede verificar leve aumento en las
miopatías, colagenopatías, hemopatía y pancreopatía.
58
Es útil el reporte de ASTL/ALT
− En la obstrucción extrahepática, el aumento principal es el de la ALTL
− En la cirrosis, neoplasia del hígado; ictero hemolítico en la hepatitis alcohólica
el aumento de la ALTL es inferior a la ASTL
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La enzima alanina aminotransferasa (ALT) o transaminasa glutámica pirúvica (TGP)
cataliza la transferencia del grupo amino de la alanina al oxoglutarato, formando
piruvato y glutamato. La concentración catalítica se determina empleando la reacción
acoplada de lactato deshidrogenasa (LDH), a partir de la velocidad de desaparición del
NADH.
Alanina + A - xoglutarato ALT piruvato + Glutamato
piruvato + NADH + H + LDH Lactato + NAD+
MODALIDAD
Emergencia y/o rutina
MUESTRA
Suero
CONSERVACIÓN
La toma de muestra se puede conservar por tres días a temperatura ambiente de 20-25
°C, siete días 2-4°C, 1 año en congelación
CENTRIFUGACIÓN
Centrifugación y separación del suero. La toma de muestra se puede conservar por tres
días a temperatura ambiente de 20-25 °C, siete días 2-4°C, 1 año en congelación
59
VALORES NORMALES
Hombres hasta 40.0 U/L
Mujeres hasta 36.0 U/L
INTERFERENCIA
Las interferencias más significativas son:
Hemólisis, Ictericia: con bilirrubina ≥ 4.0 mg/dl, Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0
mg/dl.
Muchos fármacos (cefalosporina, cloranfenicol, rifampicina, isoniazide, alfametildopa)
pueden dar valores elevados.
UREA
La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más importante en la mayoría de
los líquidos biológicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo
proteico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina a través de los riñones.
Una elevación de la concentración sérica de urea, se interpreta generalmente como una
posible disfunción renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los
valores séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados con la dieta y el
metabolismo proteico, por lo que cualquier alteración en estas variables se traducirá en
un cambio de la concentración de urea en suero.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Aumentado en:
➢ Función renal disminuida.
➢ Azotemia pre-renal (Ej., hemorragia gastrointestinal, shock, deshidratación)
➢ Azotemia post-renal.
➢ Enfermedad de Addison.
60
➢ Dieta alta en proteínas.
➢ Drogas: corticosteroides, tetraciclina.
Disminuido en:
➢ Embarazo (3er. trimestre).
➢ Insuficiencia hepática severa.
➢ Sobre hidratación.
➢ Desnutrición.
➢ Nefrosis lípida.
PRINCIPIOS DE REACCIÓN
La ureasa descompone específicamente la urea produciendo dióxido de carbono y
amoníaco. Este reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar
indofenol color verde.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Solo rutina
MUESTRA REQUERIDA
Suero
CONSERVACIÓN
Centrifugación y separación el suero. La toma de muestra se puede conservar por dos
días a temperatura ambiente de 20-25 °C, 7 días 2-4°C y 4 semanas en congelación a -
20°C
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y
centrifugar por 3000 rpm. Verificar la idoneidad del suero: ictericia presencia de
coágulos, filamentos de fibrina y turbidez
61
VALORES NORMALES
➢ 10 -50 mg/dl
INTERFERENCIAS
Las interferencias más significativas son:
➢ Hemolisis: con Hb > 2,0 g/l (porque la fosfatasa acida se encuentra en glóbulos
rojos)
➢ Ictericia : con bilirrubina > 60.0 mg/dl
➢ Lipemia : con triglicéridos > 2000.0 mg/dl
ANALITOS EN ORINA
DEPURACIÓN DE CREATININA
La creatinina se forma por la deshidratación de la creatina, en el transcurso del
metabolismo energético muscular, a un ritmo constante y depende de la masa muscular
del individuo, por lo que la producción de creatinina endógena se mantiene constante
mientras la masa muscular se mantenga de la igual forma. La totalidad de la creatinina
producida es filtrada por el glomérulo y se elimina disuelta en la orina, por lo que
constituye un índice muy seguro de la capacidad de filtración glomerular.
Este examen constituye la prueba de función renal glomerular y su disminución
representa una pérdida de la función de filtración del riñón (glomérulos renales).
El término aclaramiento plasmático (filtración glomerular) indica la capacidad de los
riñones para eliminar diversas sustancias del plasma.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Se basa en el método JAFFE- CINETICO descrito para la determinación de creatinina y
se procede a calcular el aclaramiento plasmático teniendo en cuenta la superficie
62
corporal del paciente, las concentraciones de creatinina en sangre y orina del paciente
para expresar el valor del aclaramiento absoluto.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Los estadíos tempranos de la enfermedad renal crónica son silenciosos, y solamente
pueden ser detectados por los exámenes de laboratorio. La evaluación de la enfermedad
renal crónica depende del nivel actual de la función renal. La velocidad de filtración
glomerular es considerada la prueba estándar de oro para identificar el nivel de función
renal tanto en individuos sanos como afectados
La velocidad de filtración glomerular es una medición directa de la capacidad de
filtración glomerular; la velocidad de filtración glomerular disminuye en los pacientes
glomerulopaticos con aumento en la proteinuria y disminuye en los pacientes con
proteinuria baja. La velocidad de filtración declina alrededor del 10% por década
después de los 50 años de edad. Algunos pacientes con una significativa velocidad de
filtración tienen un ligero aumento de la creatinina sérica. La depuración está calculada
en base a la superficie de área del paciente. El porcentaje de error estimado en la
determinación de la depuración utilizando orina de 24 horas está entre el 10-15%.
La depuración de creatinina disminuye en:
➢ Alteraciones de la función renal, enfermedades renales intrínsecas,
glomerulonefritis, píelonefritis, síndrome nefrótico, disfunción tubular aguda,
amiloidosis.
➢ Choque
➢ Hemorragia
➢ Insuficiencia cardiaca congestiva
➢ Insuficiencia hepática
La depuración de creatinina se eleva en:
➢ Gasto cardiaco elevado
➢ Embarazo
63
➢ Quemaduras
➢ Intoxicación por monóxido de carbono
La creatinina urinaria se eleva en:
➢ Acromegalia
➢ Gigantismo
➢ Diabetes sacarina
➢ Hipotiroidismo
La creatinina urinaria disminuye en:
➢ Hipertiroidismo
➢ Anemia
➢ Distrofia muscular
➢ Poliomiositis, atrofia neurogénica
➢ Enfermedad vascular inflamatoria muscular
➢ Nefropatía avanzada, estenosis renal
➢ Leucemia
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Se basa en el método JAFFE- CINÉTICO descrito para la determinación de creatinina y
se procede a calcular el aclaramiento plasmático teniendo en cuenta la superficie
corporal del paciente.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina
MUESTRA REQUERIDA
Sangre venosa del paciente y orina de 24 horas.
64
Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Pueden utilizarse tanto la primera
orina de la mañana, como orinas de 3, 8, 12 ó 24 horas de recolección. Las muestras no
deberán ser recolectadas después de realizar ejercicio, en presencia de infecciones del
tracto urinario, durante enfermedad aguda, después de una cirugía o sobrecarga líquida
aguda.
Se requiere además de otros datos imprescindibles como: Peso en kg, talla en metros,
sexo, edad y raza del paciente.
CONSERVACIÓN
Temperatura ambiente: 7 días; Refrigerada: 14 días; Congelada: 2 meses.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario de orina en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5
minutos y centrifugar por 3000 rpm.
VALORES NORMALES
Los resultados se realizan mediante la siguiente fórmula:
Creatinina en orina X Volumen X 1.73 = ml/mim/24 hr
Creatinina en suero X 1440 X Sup. Corporal
Hombres: 97 a 137 mL/min
Mujeres: 88 a 128 mL/min
INTERFERENCIAS
➢ El ejercicio aumenta la depuración de la creatinina
➢ El embarazo eleva considerablemente la depuración de creatinina
➢ La depuración de creatinina exagera la velocidad de filtración glómerular
cuando al creatinina sérica se encuentra elevada.
65
➢ El consumo de carnes en abundancia eleva al creatinina urinaria
➢ El ácido ascórbico, cuerpos cetónicos, hidantoína, numerosas cefalosporinas y la
glucosa, pueden interferir. El trimethoprim, la cimetidina, quinina, quinidina y la
procainamida reducen la excreción de la creatinina
➢ Las muestras ictéricas, lipémicas y con hemólisis, interfieren en su
determinación. Aunque la secreción tubular de la creatinina es fraccionalmente
más importante en la progresión en la falla renal, la depuración de creatinina
sobrestima la rata de filtración glómerular con niveles de creatinina altos en el
suero.
➢ Volumen de orina incompleto y muestra de sangre no recolectada
MICROALBUMINURIA
Se denomina microalbuminuria al aumento de excreción urinaria de albúmina por
encima de niveles normales pero en ausencia de nefropatía clínica manifiesta. Se define
como la excreción de 30 a 300 mg de albúmina en 24 horas (20-200 ug/min) en 2 de 3
recolecciones urinarias realizadas en un período de pocas semanas.
La determinación de microalbúmina (MAlb) es importante en el seguimiento de
pacientes diabéticos, ya que permite detectar precozmente a aquellos individuos en
riesgo de desarrollar enfermedad renal progresiva permitiendo la aplicación de medidas
terapéuticas adecuadas.
Actualmente, se ha reconocido a la microalbuminuria como un factor de riesgo
independiente de enfermedad cardiovascular en pacientes con y sin diabetes
SIGNIFICADO CLÍNICO
Es un marcador precoz de la enfermedad renal en diabetes insulinodependiente y otras
glomerulopatías. El aumento de sus niveles urinarios predice la progresión hacia la
insuficiencia renal, que es potencialmente reversible en sus inicios, mejorando el control
glucémico, la tensión arterial y otras medidas nutricionales y farmacológicas. Se postula
que sería un marcador del daño vascular producido por diferentes enfermedades.
66
Afecta, aproximadamente, al 50% de los pacientes con diabetes mellitus insulino
dependiente.
La excreción de albúmina es superior durante el día que por la noche.
PRINCIPIO DE REACCIÓN
La albúmina reacciona con el anticuerpo específico formando inmunocomplejos
insolubles. La turbidez causada por estos inmunocomplejos es proporcional a la
concentración de albúmina en la muestra y puede ser medida espectrofotométricamente.
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina
MUESTRA REQUERIDA
Orina
Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Pueden utilizarse tanto la primera
orina de la mañana, como orinas de 3, 8, 12 ó 24 horas de recolección. Las muestras no
deberán ser recolectadas después de realizar ejercicio, en presencia de infecciones del
tracto urinario, durante enfermedad aguda, después de una cirugía o sobrecarga líquida
aguda.
Aditivos: no se requieren
CONSERVACIÓN
Las muestras pueden conservarse durante 7 días refrigeradas (2-10 °C) o 2 meses
congelada (a -20°C).
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario de la orina en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5
minutos y centrifugar por 3000 rpm.
VALORES NORMALES
67
Los valores normales son desde 0.1 a 1.3 ml.
INTERFERENCIAS
➢ No se observan interferencias por creatinina hasta 440 mg/dl, urea hasta 4500
mg/dl, bilirrubina hasta 25 mg/dl (250 mg/l), ácido ascórbico hasta 500 mg/dl e
IgG hasta 2300 mg/dl.
➢ No deben emplearse muestras de orina que contengan hemoglobina y/o sangre.
➢ Muestras que evidencian turbidez deberán ser centrifugadas y usar sólo el
sobrenadante para realizar el ensayo.
PROTEINURIA DE 24 HORAS
Una cantidad de proteínas plasmáticas de pequeño peso molecular son filtradas
normalmente en forma libre a través del glomérulo renal y luego son, en parte,
reabsorbidas por los túbulos renales.
Hay condiciones fisiológicas o benignas donde se puede observar un aumento en la
excreción urinaria de proteínas como en el ejercicio violento, fiebre, hipotermia,
embarazo.
La medición de las proteínas urinarias es importante en la detección de patología renal.
La proteinuria en la enfermedad renal puede resultar de una disfunción glomerular o
tubular.
En el primer caso se da por un aumento en el pasaje a través de los capilares del
glomérulo y caracterizada por la pérdida de proteínas plasmáticas de igual o mayor
tamaño. En el segundo caso se da por una disminución en la capacidad de reabsorción
de proteínas por los túbulos.
Entre las patologías en las que se produce un aumento en la excreción de proteínas
urinarias se encuentran: síndrome nefrítico, síndrome nefrótico,
68
hipergammaglobulinemia monoclonal, nefropatía diabética, infecciones del tracto
urinario.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Los resultados anormales pueden significar el incremento de la proteinuria y ser indicio
de:
➢ Pielonefritis bacteriana
➢ Tumor en la vejiga
➢ Insuficiencia cardíaca congestiva (perfusión inadecuada de los riñones)
➢ Nefropatía diabética
➢ Glomerulonefritis
➢ Síndrome de Goodpasture
➢ Envenenamiento por metales pesados
➢ Lupus eritematoso sistémico
➢ Hipertensión
➢ Mieloma múltiple
➢ Síndrome nefrótico
➢ Terapia con fármacos nefrotóxicos
➢ Enfermedad poliquística del riñón
➢ Preeclampsia
PRINCIPIO DE REACCIÓN
Las proteínas presentes en la muestra reaccionan en medio ácido con el complejo Rojo
de Pirogalol Molibdato originando un nuevo complejo coloreado que se cuantifica
espectrofotométricamente a 600 nm
MODALIDAD DE SOLICITUD
Rutina
MUESTRA REQUERIDA
Orina o líquido cefalorraquídeo
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Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Pueden utilizarse tanto la primera
orina de la mañana, como orinas de 3, 8, 12 ó 24 horas de recolección. Las muestras no
deberán ser recolectadas después de realizar ejercicio, en presencia de infecciones del
tracto urinario, durante enfermedad aguda, después de una cirugía o sobrecarga líquida
aguda.
CONSERVACIÓN
La orina puede conservarse refrigerada (2-10°C) hasta 8 días o congelada (-20°C) hasta
3 meses.
CENTRIFUGACIÓN
Poner el tubo primario de orina en la centrifuga de modo balanceado, poner el reloj 5
minutos y centrifugar por 3000 rpm.
VALORES NORMALES
Los resultados se realizan mediante la siguiente fórmula:
LECTURA X Volumen (l) X 0.1 =gr /24h
1000
Para una prueba de 24 horas, el valor normal es menor a 150 mg/por 24 h
INTERFERENCIAS
➢ La hemólisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados en orina
➢ Los conservantes para orina tales como ácido clorhídrico, ácido benzoico o timol
pueden ser causas de resultados falsamente disminuidos;
➢ Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción.
70
AREA DE HEMATOLOGÍA
Muchas de las mediciones en el campo de la Hematología conciernen a variables
continuas. Algunos ejemplos de este tipo de variables son la medición de
concentraciones de hemoglobina (Hb) en la sangre y el hierro, así como su capacidad
total de unión en suero. Por otra parte, gran parte de la práctica de la Hematología se
relaciona con observaciones que incluyen la identificación de tipos de células y la
interpretación de la composición de las poblaciones celulares sanguíneas. Los temas
centrales que se abordarán a continuación se centrarán principalmente sobre estas
determinaciones discontinuas. En relación con el recuento de células sanguíneas, los
métodos manuales son la base de algunos métodos de referencia en el laboratorio
hematológico, a los que aún es necesario recurrir cuando hay discrepancia con los
métodos automatizados.
La mayoría de estos instrumentos son totalmente automatizados, es decir las mediciones
se realizan a partir de sangre entera sin necesidad de que el operador la diluya en forma
manual. En efecto, con el fin de garantizar un manejo seguro, la mayoría de los
instrumentos cuenta con dispositivos que atraviesan la tapa del tubo de colecta de
sangre, de modo que el operador no tiene que quitarla. También es común que los
instrumentos mezclen las muestras de sangre antes de que las mismas sean incluídas en
el análisis
En un autoanalizador existen principios que utilizan para medir o calcular poblaciones
celulares:
IMPEDANCIA ELÉCTRICA
Utiliza la propiedad de las células (leucocitos, hematíes y plaquetas) de ser malas
conductoras de la electricidad. Uno de los reactivos usados en el contador es una
71
solución isotónica, sin partículas y conductora de la electricidad. La sangre diluida en
ese reactivo, hace que se produzca un aumento de la resistencia eléctrica; ante el paso de
un elemento, que corta la corriente eléctrica, generándose un pulso eléctrico medido por
el software del equipo. De esta forma se obtiene:
➢ Recuento de glóbulos rojos
➢ Recuento de plaquetas
➢ Recuento de glóbulos blancos, y su diferenciación en sub-poblaciones según el
tamaño del elemento (fórmula leucocitaria)
Se visualizan gráficos de distribución de frecuencias (histogramas).
Las células son conducidas a través de un estrecho orificio, detectándose los cambios de
impedancia.
La impedancia es efectivamente medida en la zona sensora situada entre los electrodos
colocados a ambos lados del orificio. Así, las células funcionan como aislantes frente a
los diluyentes salinos, de modo que la impedancia aumenta transitoriamente a medida
que las células pasan a través de la zona sensora. Los cambios de impedancia
transitorios producen impulsos eléctricos que pueden ser contados. Estos instrumentos
han sido llamados contadores de apertura-impedancia.
La impedancia es basaba en hacer que las células pasen a través de un delgado haz de
luz. La zona censora estaba restringida parcialmente por la estrechez del haz de luz y
por el pasaje de células en una corriente de líquido muy delgada. A medida que las
células pasan a través de la zona censora, interceptan el haz de luz que se dispersa,
pudiendo ser colectada por un sistema óptico adecuado y medida por un fotómetro
Los aumentos transitorios en la luz dispersada crean impulsos desde el fotómetro, que
luego pueden ser contados electrónicamente, por ello estos sistemas son llamados
contadores de dispersión de luz. Los impulsos contados en los primeros instrumentos de
apertura-impedancia y de dispersión de luz también se utilizaron para determinar el
tamaño celular, dado que el tamaño del impulso es aproximadamente proporcional al
tamaño de la célula. Por lo tanto, el tamaño del impulso puede usarse para discriminar
72
entre la célula de interés y otras células, restos o ruido electrónico. Este proceso lleva a
la definición de un umbral. Además las células tienen que estar en una corriente muy
estrecha que interactúe perfectamente con el haz de luz. Esa corriente se logra por una
técnica donde se emplea un flujo laminar envolvente. El flujo del líquido se ajusta a
través de un capilar delgado para crear un efecto de enfoque hidrodinámico que fuerza a
la suspensión celular a permanecer en la corriente estrecha a medida que pasa por el
centro de la zona sensible
En la práctica, para hacer el recuento celular tanto los sistemas de apertura-impedancia
como los de dispersión de luz son adecuados para contar eritrocitos, plaquetas o
leucocitos totales.
CARTOMETRÍA DE FLUJO
Citometría de flujo basada en un sistema de óptica láser. Es un proceso en el cuál las
células u otras partículas biológicas son obligadas a pasar, de una en una, en fila, por
medio de un flujo de reactivos líquidos y a través de sensores que miden sus
características físicas y químicas, después de pasar frente a la luz láser.
Cada metodología utiliza reactivos específicos para evaluar las propiedades de las
células que se miden (granularidad, lobularidad, complejidad, tamaño, estructura
interna). Estos principios sirven particularmente para diferenciar las sub-poblaciones de
leucocitos (neutrófilos, eosinófilos, linfocitos, basófilos y monocitos), generando una
diferencia sustancial según el equipo en uso.
Algunos equipos miden por láser también los hematíes y plaquetas.
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
Se emplea para la lectura de la concentración de Hemoglobina.
Además de estos parámetros medidos, también se obtiene información de parámetros
calculados.
La información obtenida es evaluada minuciosamente por el bioquímico responsable del
área, quien analiza no sólo los valores numéricos, sino que estudia en conjunto los
73
mensajes y alertas que puede haber reportado el equipo; y que se corrobora con la
observación microscópica.
La automatización se traduce en resultados más rápidos, con datos altamente
reproducibles, con menor error que en las determinaciones manuales; prácticos sistemas
de control de calidad y óptima contribución a la bioseguridad.
Es evidente, que aun desde el instrumental que usa la impedancia eléctrica, la cantidad
de secuencias de lecturas que realizan hasta llegar a un valor de probabilidad estadística
muy pequeño limitada solo por el instrumento que se trate, nos da la pauta de estar
trabajando con una calidad, exactitud y seguridad en un solo minuto de proceso que
resulta muy difícil de igualar en forma manual.
Dejando así el control y confirmación de las dudas y alarmas que indica el instrumento
a un ojo experto que ayude a confirmar dichos avisos, además el control y conocimiento
del instrumental debe ser riguroso, por ese motivo es obligatorio el conocimiento a
través del manual, prácticas y experiencias propias para lograr tener la responsabilidad
de su manejo rutinario.
HEMOGLOBINA
Se denomina hemoglobina a la proteína presente en el torrente sanguíneo que permite
que el oxígeno sea llevado desde los órganos del sistema respiratorio hasta todas las
regiones y tejidos. Es posible identificar la hemoglobina como una heteroproteína ya
que, de acuerdo a los expertos, se trata de una proteína conjugada (donde es posible
apreciar una parte proteica bautizada como globina con una parte no proteica que se
conoce como grupo prostético).
METODOLOGÍAS
La Concentración de Hb Es él método más uniforme en todos los instrumentos y
presenta dos opciones de uso común:
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➢ La primera es convertir la hemoglobina en cianmetahemoglobina (HiCN) y
luego medir la absorbancia alrededor de 540 nm. En la práctica, sin embargo, el
tiempo del ciclo de los instrumentos disponibles en el mercado es tan corto que
puede impedir que la conversión total se produzca por completo y que los
derivados intermedios sean medidos. La conversión a HiCN requiere el uso de
un reactivo tipo Drabkin, que contiene cianuro de potasio y ferrocianuro de
potasio.
➢ La segunda opción es la medición en un equipo automatizado que son Los
métodos alternativos -libres de cianuro- para la medición de la Hb, que usan
laurilsulfato de sodio (LSS)
En el análisis de hemoglobina utiliza el reactivo SLS (lauril sulfato de sodio) libre de
cianuro. El producto final es un compuesto colorido que es medido por
espectrofotometría. Debido a que las determinaciones de hemoglobina se realizan a
partir de una dilución y en una cámara de reacción separada, no existe ninguna
interferencia por conteos altos de leucocitos, lipemia o proteínas anormales
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
La determinación de la concentración de hemoglobina total es indicativa de la capacidad
de transporte de oxígeno y anhídrido carbónico de la sangre entre los pulmones y otros
tejidos, siendo también importante como paso inicial en la detección de la anemia y la
eritrocitosis.
La tasa de hemoglobina puede hallarse disminuida como consecuencia de una
hemorragia, hemólisis o como resultado de un daño en la médula ósea que afecte la
formación de hematíes.
Por el contrario, la concentración de hemoglobina en sangre puede verse aumentada
cuando el intercambio de gases a través de los pulmones se halla alterada, así como en
otros diversos transtornos.
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VALORES NORMALES:
Niños al nacer 13,6 - 19,6 g/dL
Niños de 1 año 11,3 - 13,0 g/dL
Niños de 10 -12 años 11,5 - 14,8 g/dL
Mujeres 11,5 - 16,5 g/dL
Hombres 14,0 - 18,0 g/dL
HEMATOCRITO
El Hematocrito es una medición de la
proporción del volumen que ocupan los
eritrocitos en el volumen total de sangre entera
en una muestra de sangre.
Mide la fracción que comprende a los glóbulos
rojos (masa globular), respecto al volumen total
de la muestra de sangre venosa o capilar. Puede
expresarse en porcentaje o como valor decimal.
El porcentaje de una muestra centrifugada
de sangre que corresponde a los
eritrocitos es el hematocrito
Hto = altura de la columna de glóbulos rojos / altura de la columna de sangre total
(glóbulos rojos más plasma)
METODOLOGÍAS
Se puede determinar por métodos manuales, centrifugación o métodos automáticos.
76
En un equipo automatizado el conteo se realiza por La altura de pulsos acumulados de
los conteos de todos los eritrocitos, que da como resultado el hematocrito directo. Esto
está basado en el principio de que el nivel de los pulsos (cambio de voltaje) producido
por las células que pasan a través de la apertura, es proporcional al volumen celular.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Valores bajos de hematocrito
➢ La disminución de glóbulos rojos en la sangre es una anemia. Se puede
relacionar con diferentes condiciones, como hemorragia o leucemia.
➢ Hay numerosos factores que pueden contribuir a desarrollar una anemia, como la
baja en la ingesta de hierro, o pacientes con enfermedad renal crónica, que no
generan suficiente eritropoyetina para estimular la producción de glóbulos rojos
en la médula ósea. Aun así, solo se utilizan los valores de Hb para detectar si el
paciente es o no anémico.
Valores altos de hematocrito
➢ Se pueden asociar a deshidratación o hipoxia.
➢ Patologías como la policitemia vera consisten en una desmedida producción de
glóbulos rojos. En casos de enfermedad pulmonar obstructiva crónica, la hipoxia
genera un aumento en la producción de eritropoyetina por el riñón, lo que puede
resultar en un hematocrito alto.
VALORES NORMALES
➢ Hombres: 40% - 54%
➢ Mujeres : 38% - 48%
77
ERITROCITOS
Los glóbulos rojos, también llamados eritrocitos o hematíes, son las células sanguíneas
más abundantes y relativamente pequeñas de los mamíferos. Su principal misión es
transportar O2 y CO2 entre los tejidos y los pulmones.
METODOLOGÍAS
Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y
precisos, y los métodos manuales.
MÉTODO MANUAL
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:
➢ Dilución de la sangre
➢ Muestreo de la sangre diluida en un volumen
➢ Recuento de células en ese volumen
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas
microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la
densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la
relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes,
entre ellas la que utiliza la cámara de Neubauer
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, en
una proporción exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeña
colocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se
encuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación se obtiene el número
total.
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Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara de
recuento, una pipeta diluidora y un microscopio.
En los autoanalizdores Por lo general, el recuento de eritrocitos se realiza sobre
diluciones de sangre entera con un umbral adecuado para discriminar entre grandes
plaquetas y pequeños eritrocitos
Los eritrocitos son contados en un canal exclusivo dedicado, que utiliza como método
de detección la impedancia o corriente directa combinada con la tecnología de enfoque
hidrodinámico. De esta forma se superan los retos en el conteo celular tales como la
coincidencia o recirculación y unos discriminadores automáticos separan las dos
poblaciones celulares. Aún en muestras de concentraciones extremadamente bajas o
inusualmente altas, el sistema analiza eritrocitos y plaquetas con gran precisión y
exactitud.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Los números de glóbulos rojos más altos de lo normal pueden deberse a:
➢ Consumo de cigarrillo
➢ Cardiopatía congénita
➢ Deshidratación (como por ejemplo, por diarrea severa)
➢ Tumor renal (carcinoma de células renales)
➢ Niveles bajos de oxígeno en la sangre (hipoxia)
➢ Fibrosis pulmonar
➢ Policitemia
Los números de glóbulos rojos más bajos de lo normal pueden deberse a:
➢ Anemia
➢ Insuficiencia de la médula ósea (ejemplo, por radiación, toxinas o tumor)
➢ Deficiencia de eritropoyetina (secundaria a enfermedad renal)
➢ Hemólisis (destrucción de glóbulos rojos) debido a transfusión, lesión vascular u
otra causa
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➢ Hemorragia (sangrado)
➢ Leucemia
➢ Desnutrición
➢ Deficiencias nutricionales de:
➢ Hierro
➢ Cobre
➢ Folato
➢ Vitamina B12
➢ Vitamina B6
➢ Sobrehidratación
➢ Embarazo
VALORES NORMALES
Hombres 4 500 000 – 3 500 000 millones de celular/ mm3
Mujeres 4 000 000 – 5 000 000 millones de celular/ mm3
Niños (4 años) 4 200 000 – 5 200 000 millones de celular/ mm3
Lactantes (1 a 6 meses) 3 800 000 – 5 200 000 millones de celular/ mm3
Recién nacidos 5 000 000 – 6 000 000 millones de celular/ mm3
ÍNDICES ERITROCITARIOS
Los índices eritrocitarios también se denominan como índices hematimétricos o índices
corpusculares. Son una serie de parámetros que expresan diferentes características de
los hematíes. Los tradicionales se calculan en método manual y automatizado a partir de
los valores obtenidos, previamente, del número de hematíes (en millones por mm3), del
hematocrito (en %) y de la concentración de hemoglobina en la sangre (en g/dl).Los
auto analizadores hematológicos son capaces de proporcionar los índices tradicionales,
y además, suministran otros nuevos.
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Prestan una ayuda eficaz para diferenciar las anemias y da una mejor visión de la
morfología del glóbulo rojo y se clasifican en:
VCM “VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO”
Es el valor medio del volumen de los hematíes. Se calcula a partir del hematocrito
(HCT) y del recuento del número de hematíes (RBC). Se utiliza la siguiente fórmula
para su cálculo:
HCT
VCM = -------- x 10
RBC
Nos da una idea del volumen corpuscular medio de los hematíes. Nos permite saber si
son:
➢ Normocíticos: tamaño normal
➢ Macrocíticos: tamaño grande
➢ Microcíticos: tamaño pequeño
Su valor normal está comprendido entre 80 y 100 µ3 (1 µ3 = 1 femtolitro = 10-15litros).
Si es menor de 80 fl, se dice que hay una microcitosis, y si es mayor de 100 fl, se habla
de macrocitosis. La microcitosis se da en la ferropenia y en la talasemia, y la
macrocitosis en lascarencias de B12 o ácido fólico, en las hepatopatías crónicas y en la
reticulocitosis.
El contador automático utiliza impulsos que tienen una característica inusual que les
permite ser identificados por circuitos electrónicos adecuados y procesados de modo
que no afecten la magnitud del impulso promedio que se utiliza como medición de
VCM.
81
Aunque todos los contadores hematológicos automatizados miden el volumen
corpuscular medio (VCM), hay otros factores importantes que afectan las mediciones,
según sean hechas por los instrumentos de apertura-impedancia o por los de dispersión
de luz. Debido a que ninguna tecnología es perfecta, varios fabricantes han intentado
resolver los problemas, pero lo han hecho, con frecuencia, en diferente forma. La
dificultad es que el impulso producido por cualquier célula es sólo una aproximación
proporcional al volumen de la célula
HCM “HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA”
Es el valor medio del contenido en hemoglobina de los hematíes.
Su resultado estará en relación con el VCM y MCHC.
Se calcula a partir de la concentración de hemoglobina (Hb) y del número de hematíes.
Se utiliza la siguiente fórmula para su cálculo:
Hb
HCM = --------- x 10
RBC
Su valor normal está comprendido entre 27 y 31 picogramos .
Si es menor de 27 pg, se dice que hay una hipocromía, y si es mayor de 31 pg, se habla
de hipercromía relativa. La hipocromía suele asociarse a la microcitosis y la
hipercromía relativa a la macrocitosis.
Ya sea de parámetros derivados de métodos manuales o electrónicos mediante la
computadora incorporada al autoanalizador de hematología.
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CHCM “CONCENTRACIÓN DE LA HEMOGLOBINA CORPUSCULAR
MEDIA”
Es el valor de la cantidad de hemoglobina (en g) contenida en 1 dl de hematíes. Se
calcula a partir de la concentración de hemoglobina y del hematocrito. Para su cálculo
se emplea la siguiente fórmula:
Hb
CHCM= ---------- x 100
HCT
Su valor normal está comprendido entre 32 y 36 g/dl. Si es mayor de 36 g/dl se habla de
hipercromía absoluta
OTROS ÍNDICES ERITROCITARIOS
ÍNDICE DE DISTRIBUCIÓN DE LOS HEMATÍES (IDH) O (IDE)
También se denomina anchura de la distribución eritrocitaria o ADE (en inglés, RDW)
y como CV-GR. Es el coeficiente de variación (CV) de los volúmenes de los glóbulos
rojos (GR). El CV es un parámetro estadístico que expresa el grado de dispersión
existente entre los valores obtenidos (en este caso, entre los volúmenes de los hematíes
evaluados). Se calcula a partir de la desviación estándar (SD) y de la media de los
valores obtenidos. Para su cálculo en porcentaje, se emplea la siguiente fórmula:
SD-GR
IDH = ----------------- x 100
VCM
Su valor normal debe ser igual o inferior al 15%. Indica la variación existente entre los
tamaños de los hematíes. Cuando ésta es muy grande, el IDH es superior al 15% y se
dice que hay una anisocitosis. Hay anisocitosis en los períodos iniciales del tratamiento
de las ferropenias y también puede haberla en las fases inmediatas a la administración
de transfusiones.
83
ANCHURA DE LA DISTRIBUCIÓN DE LA HEMOGLOBINA (ADH):
También se la conoce como HDW y como ET-Hb.
Es la desviación estándar de las concentraciones de hemoglobina de los hematíes. La
desviación estándar es otro parámetro estadístico que también estima el grado de
dispersión de los valores obtenidos (en este caso, las concentraciones de Hb de los
hematíes evaluados). Para su cálculo, se emplea la siguiente fórmula:
Su valor normal está comprendido entre 2,2 y 3,2 g/dl. La disminución del ADH indica
la presencia de hematíes hipocrómicos; el aumento del ADH expresa la existencia de
hematíes hipercrómicos. La separación del ADH de sus valores normales es, por tanto,
un signo de anisocromía.
PLAQUETAS
Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemostático
del cuerpo. Son cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 μ, de bordes
irregulares, pero pueden tener forma esférica u ovalada, carecen de núcleo y son muy
frágiles. Provienen de una célula gigante que mide de entre 50-100 μ de diámetro
llamada megacariocito.
Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la
hemostasia (Hemos=sangre, stasis=detención) adhiriéndose entre ellas y a las paredes
84
de los vasos sanguíneos lesionados, para formar así el trombo plaquetario o tapón
hemostático.
METODOLOGÍAS
En el método manual En el recuento directo de las plaquetas se realiza mediante la
cámara de Neubauer, se mezcla la sangre en la pipeta de Thoma con un diluyente que
cause la hemólisis de los eritrocitos. Se llena el hemocitómetro con dicha mezcla y se
recuentan las plaquetas en la cuadrícula central, de preferencia con microscopio de
contraste de fases y con el objetivo de 40X.
En MÉTODO INDIRECTO el RECUENTO DE PLAQUETAS se realiza EN un
FROTIS de sangre donde la muestra de sangre venosa o capilar (de no contar con la
sangre venosa) se somete a un extendido en una lámina coloreándola luego
observándola en el microscopio reconociendo las plaquetas y realizando el conteo
Las plaquetas también son contados en un equipo automatizado por un canal exclusivo
dedicado, que utiliza como método de detección la impedancia o corriente directa
combinada con la tecnología de enfoque hidrodinámico. De esta forma se superan los
retos en el conteo celular tales como la coincidencia o recirculación y unos
discriminadores automáticos separan las dos poblaciones celulares. Aún en muestras de
concentraciones extremadamente bajas o inusualmente altas, el sistema analiza
eritrocitos y plaquetas con gran precisión y exactitud.
Estas células pueden contarse sobre la misma dilución de sangre entera usada para el
recuento de eritrocitos. Hay, por lo general, un umbral superior para eliminar pequeños
eritrocitos y un umbral inferior para discriminar del ruido electrónico y los restos
celulares.
Estos umbrales simples son adecuados, siempre y cuando el instrumento tenga flujo
laminar, y vale tanto si se usa apertura-impedancia como dispersión de luz para su
detección.
85
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Aumentan:
➢ En ocasiones las plaquetas aumentan como reacción a una enfermedad
transitoria o crónica o en casos de hemorragia aguda.
➢ Existen patologías de la sangre que se caracterizan por un número de plaquetas
por encima de lo habitual (entre dos y tres veces). En ocasiones es necesario un
tratamiento quimioterápico para reducir dichas cifras y evitar que aparezcan
trombos en la sangre.
Disminuyen:
➢ Algunas infecciones muy graves pueden reducir el número de células que se
producen en la médula ósea, por ello los pacientes tienen anemia, pocas
plaquetas y pocos leucocitos.
➢ Algunos individuos tienen unas sustancias (anticuerpos) en su sangre que
destruyen sus propias plaquetas, como si no las reconocieran como propias. Es
más frecuente en mujeres jóvenes. El nombre de esta enfermedad es 'púrpura
trombocitopénica idiopática'. Si las cifras bajan por debajo de 10.000/mL existe
riesgo de sangrado espontáneo.
➢ Cuando existe una actividad excesiva del bazo, un órgano situado en la parte
izquierda de nuestro abdomen cuya función es ayudar en la defensa frente a las
infecciones. En algunas situaciones crece de tamaño (por ejemplo cuando hay
una enfermedad hepática crónica y evolucionada) y trabaja más de la cuenta,
produciendo una disminución en las células de la sangre.
VALORES NORMALES
Primera semana de vida 150 000 – 340 000 plaquetas /mm3
1 semana a meses 200 000 – 400 000 plaquetas /mm3
2 meses a adulto 150 000 – 500 000 plaquetas /mm3
86
RETICULOCITOS
La investigación de reticulocitos es una de las pruebas más útiles en la investigación de
la causa de la anemia, pues nos da idea del estado de la producción de glóbulos rojos
por la médula ósea.
METODOLOGÍAS
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teñir
manualmente con el azul de cresil brillante. Este colorante en combinación con una
misma cantidad de sangre anticoagulada se mezcla y con la ayuda de la temperatura
(baño maría) se produce la coloración de estos eritrocitos jóvenes visualizándose en los
frotices sanguíneos por microscopía
Los recuentos de reticulocitos teñidos con varios colorantes pueden realizarse en un
instrumento automatizado, diseñado para ese propósito o en un citómetro de flujo
convencional.
Actualmente, se pueden hacer los recuentos sin necesidad de coloración manual, ya que
están totalmente automatizados donde introducen colorantes fluorescentes. En el caso
de mediciones hechas con colorantes fluorescentes, de acuerdo con la intensidad de
fluorescencia, los reticulocitos se pueden dividir en tres sectores que representan
estadios diferentes de maduración. El estadio más joven, muy fluorescente, es un
indicador temprano de recuperación, que aparece antes de un recuento de reticulocitos
total elevado. Un alto recuento de elementos muy fluorescentes es un indicador de
recuperación medular después de, por ejemplo, un trasplante de médula ósea (TMO) o
de la administración de eritropoyetina exógena.
Otros son detectados por citometría de flujo, en tanto que otros usan el nuevo azul de
metileno. Este último método es menos preciso porque es más dificultoso estandarizar
la coloración y porque los cuerpos de Howell-Jolly pueden interferir.
87
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Causas de aumento
El número de reticulocitos aumenta en todas las circunstancias en las que existe un
incremento de la eritropoyesis, tales como en la hemólisis, como respuesta a sangrados
o tras el inicio de un tratamiento antianémico que ha resultado eficaz.
Causas de disminución
Como la producción de reticulocitos es necesaria para compensar las pérdidas
fisiológicas de glóbulos rojos maduros, una disminución de su número es la expresión
de un estado arregenerativo o hiporregenerativo de la serie roja. Esta circunstancia es
típica de anemias aplásicas, anemias carenciales y enfermedades inflamatorias y
neoplásicas.
VALORES NORMALES
Edad Recuento de
reticulocitos (%)
Recuento absoluto de reticulocitos
(mm3)
Primeras 24 horas 2.0 a 6.0 70 000 a 330 000
1 día a 2 semanas 0.3 a 1.5 10 500 a 82 000
2 semanas a adulto 0.5 a 2.2 20 000 a 120 000
“RECUENTO DE LEUCOCITOS TOTALES”
El recuento total de leucocitos nos sirve de referencia para determinar si hay algún
proceso infeccioso activo. Al efectuar el recuento total no encontraremos diferenciación
entre los 5 tipos de leucocitos normales (neutrófilos, monocitos, linfocitos, basófilos y
eosinófilos).
88
Los glóbulos blancos o leucocitos son células sanguíneas que se producen en la médula
ósea y el tejido linfático y se pueden hallar en la sangre, las amígdalas, el bazo, las
adenoides, los ganglios y demás partes del sistema inmune. La función principal de los
glóbulos blancos es prevenir las enfermedades, ayudando al organismo a combatir
gérmenes y bacterias que puedan causar procesos virales o infecciones importantes.
METODOLOGÍA
El examen mediante microscopía óptica de un frotis teñido de sangre periférica para
evaluar la morfología de eritrocitos y trombocitos (plaquetas) y la generación del
recuento diferencial de leucocitos aún hoy resulta crucial para el diagnóstico de
enfermedades hematológicas
Para lograr buena ejecución se requiere un personal bien preparado y muy motivado
En el método manual se realiza con el reactivo de Turk se utiliza un solución de ácido
acético al 2% que tiene como función lisar los eritrocitos para evitar interferencias en el
recuento.
En Un equipo automatizado El recuento total de leucocitos se hace similar al recuento
de eritrocitos en la mayoría de los autoanalizadores de hematología, mediante la
tecnología de impedancia, e incorporada al autoanalizador de hematología.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Causas de una leucocitosis:
Infección o enfermedad reciente, exceso de estrés, efecto secundario de algún
medicamento, alergias, artritis reumatoide, mielofibrosis o leucemia.
Causas de una leucopenia:
Anemia, uso de antibióticos y diuréticos, malnutrición o un sistema inmune debil
provocado por HIV, leucemia, lupus o quimioterapia.
89
VALORES NORMALES
➢ 5,000 – 10,000/mm3
5.00 – 10.00 X109 /L
“RECUENTO DE LEUCOCITOS DIFERENCIALES”
Consiste en valorar y reconocer la cantidad y tamaño de los distintos tipos de glóbulos
blancos que podemos observar en una placa o medir en un equipo automatizado. De esta
manera, sabiendo dicha proporción, se podrá conocer la cantidad de glóbulos existentes
en el torrente sanguíneo.
Por lo tanto, es un examen que mide el tanto por ciento de cada clase o tipo de glóbulo
blanco, también llamado GB, de esta forma además se mostrará si existen células
anormales o inmadura.
METODOLOGÍAS
El examen mediante microscopía óptica de un frotis teñido de sangre periférica es
importante en la metodología manual. El recuento diferencial visual se reconoce como
una de las tareas de labor más intensa en el laboratorio. A pesar de estas limitaciones, el
recuento diferencial visual constituye el estándar para comparar resultados obtenidos
con analizadores hematológicos automatizados. El papel del examen visual de frotis
sanguíneos sigue siendo importante en el laboratorio clínico, ya que los analizadores
hematológicos automáticos pueden rechazar un alto porcentaje de muestras
consideradas como anormales que deben evaluarse visualmente
Un equipo automatizado está basado en el fundamento de la impedancia donde la
combinación de dispersión lateral (complejidad celular), dispersión frontal (tamaño) y
fluorescencia (concentración de ácidos nucléicos ADN y ARN) de las células nucleadas,
proporciona una imagen precisa y concisa de cada célula de la sangre periférica
detectada. Este análisis tridimensional de las células sanguíneas proporciona una
precisión y exactitud únicas. La tinción fluorescente de células en sangre periférica es
90
fundamental para el diferencial leucocitario de rutina. La tecnología de fluorescencia
permite diferenciar de forma confiable las poblaciones normales de las poblaciones
anormales de leucocitos. La sensibilidad de la citometría de flujo fluorescente,
proporciona al laboratorio un alto nivel de confianza en el reporte exacto del análisis
diferencial de leucocitos, aún en muestras de pacientes críticos con conteos bajos de los
mismos.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
Posibles causas de alteraciones en la fórmula leucocitaria
Tipo de
leucocito
Abreviatura Ejemplos de causas de aumento Ejemplos de causas de
disminución
Neutrófilos Polis,
PMNs, %
Neu
Conocido como neutrofilia
Infecciones bacterianas agudas y
algunas infecciones por hongos y
víricas
Inflamación (enfermedad
inflamatoria intestinal, artritis
reumatoide)
Muerte tisular (necrosis) causada por
traumatismos, cirugía mayor, infarto
agudo de miocardio, quemaduras
Fisiológicas (estrés, ejercicio
extenuante)
Consumo de tabaco Embarazo -
último trimestre o en el parto
Leucemia crónica (mielogénica)
Conocido como
neutropenia Síndromes
mielodisplásicos
Infecciones graves
(sepsis - elevado
consumo de neutrófilos)
Reacciones a fármacos
(penicilina,
ibuprofeno, fenitoína,
etc.) Enfermedades
autoinmunes
Quimioterapia
Cáncer diseminado a
médula ósea Anemia
aplástica
Linfocitos Linfos, %
Linf
Conocido como linfocitosis
Infecciones víricas agudas (hepatitis,
varicela, citomegalovirus - CMV,
Epstein-Barr - VEB, herpes, rubéola)
Algunas infecciones bacterianas (tos
ferina, tuberculosis) Leucemia
linfocítica Linfoma
Conocido como
linfopenia o
linfocitopenia
Trastornos autoinmunes
(lupus, artritisreumatoide)
Infecciones (VIH,
tuberculosis,
hepatitis, gripe)
Afectación, daño o lesión
de la médula ósea
91
(quimioterapia,
irradiación)
Deficiencias inmunes
Monocitos Monos, %
Monos
Conocido como monocitosis
Infecciones crónicas (tuberculosis,
infecciones por hongos)
Infecciones intracardíacas
(endocarditisbacteriana)
Enfermedades del colágeno con
afectación vascular (lupus,
esclerodermia, artritis reumatoide,
vasculitis)
Enfermedad inflamatoria intestinal
Leucemia monocítica Leucemia
mielomonocítica crónica Leucemia
mielomonocítica juvenil
Conocido como
monocitopenia
Normalmente, en una
única ocasión no suele ser
significativa.
En caso de existir de
manera repetida puede
indicar
Insuficiencia medular o
lesiones de la médula
ósea
Leucemia de células
peludas o tricoleucemia
Eosinófilos Eos, % Eos Conocido como eosinofilia
Asma, alergias (como fiebre del
heno)
Reacciones a fármacos
Inflamaciones cutáneas
(eccemas, dermatitis)
Infecciones parasitarias
Trastornos inflamatorios
(enfermedad celíaca, enfermedad
inflamatoria intestinal) Algunos
cánceres
Conocido como
eosinopenia
Difícil de establecer ya
que normalmente existen
poco eosinófilos en
sangre; si se detectan en
una única ocasión no
suele ser significativo
Basófilos Baso, %
Baso
Conocido como basofilia Reacciones
alérgicas raras (urticaria, alergia a
alimentos)
Inflamaciones (artritis
reumatoide, colitis ulcerosa)
Algunas leucemias (por ejemplo,
leucemia mieloide crónica)
Conocida como
basopenia.
Difícil de establecer ya
que normalmente existen
pocos basófilos en
sangre; si se detectan en
una única ocasión no
suele ser significativo
VALORES NORMALES
➢ Valores de referencia:
Total del conteo diferencial: 4.500 – 10.000
92
✓ Bandas: 0 - 5 % (0,0 - 0
✓ Eosinófilos: 0 - 6 % (0,0 - 0,6)
✓ Basófilos: 0 - 2 % (0,0 - 0,02)
✓ Linfocitos: 20 - 50 % (0,20 - 0,50)
✓ Monocitos: 4 - 8 % (0,04 - 0,08)
➢ Conteo relativo:
✓ Neutrófilos: 40-70 % (0,40 - 0,70)
,05)
➢ Conteo absoluto:
✓ Neutrófilos: 1420 - 6340/mm3 (1,42 - 6,34 X109/L)
✓ Bandas: 0 - 450/mm3 (0 - 0,45 X109/L)
✓ Eosinófilos: 0 - 540/mm3 (0 - 0,54 X109/L)
✓ Basófilos: 0 - 180/mm3 (0 - 0,18 X109/L)
✓ Linfocitos: 710 - 4530/mm3 (0,71 - 4,53 X109/L)
✓ Monocitos: 140 - 720/mm3 (0,14 - 0,72 X109/L)
OTROS PARÁMETROS
ANCHO DE LA DISTRIBUCIÓN DEL VOLUMEN Y DE LA
CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA ERITROCITARIA
Además de estimar VCM es posible producir histogramas que muestren el ancho de la
distribución del volumen de eritrocitos (RDW). Tales histogramas son útiles para medir
la anisocitosis y para caracterizar situaciones en las que dos poblaciones eritrocitarias
estén presentes, por ejemplo en la deficiencia de hierro que responde al tratamiento. Si
se utiliza una dispersión de luz de ángulo dual es posible medir la concentración de
hemoglobina individual de un eritrocito y construir histogramas que muestren el ancho
de la distribución de la concentración celular de hemoglobina (HDW).
93
ANCHO DE DISTRIBUCIÓN DEL VOLUMEN PLAQUETARIO (PDW)
Este parámetro puede ser usado para determinar el recuento de plaquetas así como para
medir el volumen medio de la plaqueta y la anisocitosis plaquetaria. Así, los contadores
hematológicos automatizados ofrecen un rango de los llamados nuevos parámetros,
tales como anisocitosis eritrocitaria y plaquetaria, volumen medio de plaquetas y otros
más que reflejan otras características de los eritrocitos, plaquetas y leucocitos.
Desafortunadamente, la mayoría de estos parámetros tienden a ser específicos de un
instrumento y la comparación de los parámetros del mismo nombre puede resultar pobre
entre diferentes instrumentos, aún del mismo fabricante. Es probable que por esta razón
hayan encontrado poca aplicación en la hematología diagnóstica
Se han publicado muchos estudios interesantes que muestran diferencias entre diversos
trastornos, por ejemplo la anisocitosis plaquetaria en la trombocitosis secundaria y la
trombocitemia. Sin embargo, estas diferencias con frecuencia no son suficientes o no
están suficientemente establecidas para convertirse en criterios firmes de diagnóstico,
aunque pueden arrojar alguna luz interesante sobre la fisiopatología subyacente.
Sin embargo, los nuevos parámetros disponibles tienen un rol importante dentro del
laboratorio, aún si no son informados, debido a que constituyen una guía útil sobre
cómo y cuándo debe examinarse un extendido de sangre.
TIEMPO DE COAGULACIÓN
La exploración global de la coagulación sanguínea puede realizarse mediante varias
pruebas que miden el tiempo que tarda en coagular la sangre o el plasma. No sirve para
el diagnóstico del déficit de un factor en particular, pero suministra una idea general
sobre el estado de la vía intrínseca y de la vía común.
Para ello existe un conjunto de principios elementales y comunes a todas las técnicas
que es preciso conocer para evitar errores en las determinaciones.
94
METODOLOGÍAS
Método de Ivy Principio Mediante esta prueba se estudia la adhesión de las plaquetas al
endotelio vascular y su capacidad para formar el trombo plaquetario que detiene la
hemorragia a nivel de un vaso de pequeño calibre. Consiste, por tanto, en realizar una
pequeña herida y medir el tiempo que tarde en dejar de sangrar.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Se busca monitorizar el tratamiento con heparina o con otros anticoagulantes cuando se
realiza un by-pass cardíaco, una angioplastia coronaria o una diálisis.
TIEMPO DE SANGRÍA
El tiempo de sangría por este método es la mejor valoración de la función plaquetaria.
La prolongación del tiempo en esta prueba se encuentra en trombocitopenias o las
enfermedades de alteración funcional de las plaquetas, como son la enfermedad de Von
Willebrand, la tromboastenia de Glasmann, el Síndrome de Bernard-Soulier, la
enfermedad de Storage Pool y otras. Mide in vivo la adhesión, la agregación y la
liberación plaquetaria como respuesta del organismo a la lesión vascular. Al realizar
esta prueba, debe tenerse siempre en cuenta que la ingesta previa de ácido
acetilsalicílico puede alterar los resultados.
METODOLOGÍA
Método de Duke
Con una lanceta se hace una pequeña incisión en el lóbulo de la oreja. La sangre fluye
por esta incisión y se mide el tiempo que transcurre hasta que se detiene el sangrado.
SIGNIFICADO CLÍNICO
➢ Para diagnosticar ciertos padecimientos hemorrágicos.
95
➢ Antes de realizar operaciones quirúrgicas.
➢ Antes de efectuar una punción en el hígado o el bazo.
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR
La eritrosedimentación globular es una prueba que se usa ampliamente para estudiar la
actividad de diversas enfermedades. La velocidad de sedimentación de los glóbulos
rojos se refiere al tiempo que tardan en separarse del plasma. Se le mide en
MILIMETROS POR HORA. La velocidad de sedimentación es un examen
hematológico que no está incluido en el desarrollo de un hemograma; sin embargo, es
una prueba muy importante por su gran sensibilidad, pues resulta anormal en las
enfermedades funcionales, así como en los procesos inactivos o estrictamente locales.
La eritrosedimentación depende de la formación de “ROULEAUX”, de la
concentración de fibrinógeno y de la concentración de globulinas alfa y beta en el
plasma. La concentración de las diversas proteínas plasmáticas afecta la
eritrosedimentación y en muchas enfermedades se altera la relación entre las proteínas,
con la consiguiente aceleración de la eritrosedimentación. Una disminución en el
número de glóbulos rojos también la acelera y en algunos laboratorios se corrige su
resultado en los casos de anemia. Además de las elevaciones producidas en procesos
infecciosos e inflamatorios, se producen elevaciones fisiológicas en el embarazo y
durante la menstruación. La VSG disminuye en la anemia falciforme y en las severas.
FENÓMENO DE ROULEAUX
El ROULEAUX o “formación de pilas de monedas”, es un fenómeno que consiste en
que los glóbulos se aglomeran en masas. Las causas de este fenómeno radican en el
plasma o en el suero y no están influidas por la temperatura. La administración de
algunos medicamentos puede producir este fenómeno. Otras veces se trata de una causa
intrínseca al paciente, que tiene un desequilibrio de sus proteínas (aumento del
fibrinógeno o aparición de proteínas anormales).
96
Observado en el microscopio, el fenómeno de Rouleaux es característico: se ven los
glóbulos reunidos en filas, apilados por sus caras planas, varias filas se entrecruzan en
diversos planos, produciendo un grumo el cual puede ser visto de forma macroscópica
(a simple vista)
METODOLOGÍA MANUAL
Método de Wintrobe
Se transfiere un mililitro (ml) de la muestra anticoagulada a cada tubo de Wintrobe y se
mantiene en posición vertical a 90 grados durante una hora. La cuantificación de la
VSG se efectúa de manera visual y el resultado se corrige de acuerdo con el hematocrito
del paciente mediante el nomograma.
Método de micro-eritrosedimentación con capilar
Procedimiento
➢ Extraer sangre venosa y mezclarla bien con el anticoagulante EDTA.
➢ A partir de la muestra bien homogeneizada se recolecta la muestra en capilares
sin heparina.
➢ Se sella el tubo en su borde inferior con plastilina
➢ Se coloca en posición vertical a 90 grados sobre un soporte.
➢ La medición de la microeritrosedimentación se lleva a cabo con una regla
milimétrica desde el borde superior del plasma hasta el inicio de la columna de
eritrocitos
➢ Los resultados se leen después de una hora y se expresaron como mm/hora
INTERPRETACIÓN CLÍNICA:
La VSG es un buen índice de la presencia de procesos infecciosos activos como la
tuberculosis o la endocarditis bacteriana subaguda, el lupus eritematoso diseminado, las
carditis reumáticas, ciertas neoplasias, embarazo ectópico, etc. Sirve igualmente para
controlar la actividad evolutiva de las infecciones mencionadas.
97
VALORES NORMALES
➢ Hombres: hasta 15 mm/h.
➢ Mujeres: hasta 20 mm/h.
➢ Niños: hasta 10 mm/h.
➢ Recién nacidos: 0-2 mm/h.
➢ Embarazadas: 40 mm/h a 45 mm/h.
GRUPO SANGUÍNEO
Un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características
presentes en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos
clasificaciones más importantes para describir grupos sanguíneos en humanos son
los antígenos (el sistema ABO) y el factor Rh.
El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, convirtiéndolo en el
primer sistema de grupo sanguíneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de
grupos que se identifican: los de antígeno A, de antígeno B, y O sin antígenos. Las
transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reacción
inmunológica que puede desembocar en hemólisis, anemia, fallo renal, choque
circulatorio y muerte.
FUNDAMENTO
La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectúa enfrentando los
glóbulos rojos del paciente con anticuerpos monoclonales Anti-A, Anti-B o Anti-AB.
La aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos indica
la presencia o ausencia de los correspondientes antígenos
METODOLOGÍA EN PLACA
➢ Se utiliza la punción cutánea por medio de la lanceta, se desecha la primera gota
se deposita una gota en cada una de las excavaciones de la placa en forma
98
horizontal y marcar con letras A, B, AB, y Rh posteriormente se añade una gota
den suero Anti A, Anti B y Anti D respectivamente.
➢ Mezclar perfectamente con un hisopo (aplicador) cada preparación (no
contaminar las diferentes preparaciones)
➢ Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos
aproximadamente.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA
La determinación del grupo sanguíneo se hace para una transfusión de sangre o un
trasplante de manera segura. EL tipo de sangre debe coincidir cercanamente con el tipo
de sangre de la sangre que SE recibe. Si los tipos de sangre no coinciden:
➢ EL sistema inmunitario verá a los glóbulos rojos donados como extraños
➢ Se desarrollarán anticuerpos contra los glóbulos rojos donados que atacarán a
estas células sanguíneas
➢ Las dos formas en que LA sangre y la sangre donada pueden no coincidir son:
➢ Una falta de concordancia entre los tipos de sangre, A, B, AB y O. Ésta es la
forma más común de falta de concordancia. En la mayoría de los casos, la
respuesta inmunitaria no es muy grave.
➢ El factor Rh puede no coincidir. La respuesta inmunitaria puede ser mucho más
grave.
➢ La determinación del grupo sanguíneo es especialmente importante durante el
embarazo. Pruebas cuidadosas pueden prevenir una anemia grave en el recién
nacido e ictericia.
RESULTADOS
Aglutino positivo
No aglutino negativo
99
AREA DE HEMOSTASIA
La hemostasia es un sistema biológico de defensa donde intervienen elementos celulares
y plasmáticos para mantener la sangre fluida dentro de los vasos. Fisiológicamente la
hemostasia funciona a través de un conjunto de fuerzas, que deben interaccionar de
manera equilibrada para mantener la sangre en estado líquido, este conjunto está
constituido por las fuerzas procoagulantes y las anticoagulantes. En caso de un
desequilibrio puede generarse un estado protrombótico o un trastorno hemorrágico
La automatización en hemostasia es un hecho relativamente reciente, en la década del
70 aparecieron los primeros equipos semiautomáticos que detectaban la formación del
coagulo en forma electromecánica, mientras que la segunda generación de
coagulometros utilizaron una detección foto-óptica. Estos equipos semiautomáticos
permitieron estandarizar la observación del punto final, uno de los mayores problemas
de las pruebas de coagulación manual donde era necesario contar con personal
entrenado en la detección del coagulo.
Existen básicamente dos formas de detectar la formación del coagulo: mecánica y
fotoptica.
MÉTODOS DE DETECCIÓN DEL COAGULO
➢ Detección foto óptica
➢ Detección nefelometríca
➢ Detección basada en la viscosidad
➢ Detección electromagnética
1) Detección basada en la viscosidad
Es la resistencia del material a cambiar de forma. Se monitorea la
formación del coagulo a través del cambio de amplitud del movimiento
de una bolilla. Al formarse el coagulo la viscosidad aumenta y la
amplitud decrece
100
La ventaja de este sistema es que puede utilizarse cualquier tipo de
muestras ictéricas, lipémicas etc.
La desventaja: Difícil detección de los coágulos friables
2) Detección mecánica
Basado en el empleo de una cubeta de reacción especial con una bola de
acero incorporada. La bola se mantiene fija en una posición en la cubeta,
gracias a la acción de un imán magnético. Con la adición del reactivo, la
cubeta empieza a rotar alrededor de su eje longitudinal, manteniéndose la
bola en su sitio gracias al campo magnético.
La formación de fibrina, desplaza la bola de su posición original y este
cambio de posición es registrado por un sensor que automáticamente
registra el tiempo de formación del coágulo. Estos equipos también
hacen una detección óptica del coagulo.
3) Detección fotoóptica
Basada en el cambio de ABS que se observa al producirse la malla de
fibrina. Cada coagulómetro utiliza un algoritmo diferente para calcular el
punto final. Algunos definen el punto final cuando se alcanza el 50 % del
cambio total de absorbancia, es decir el punto de inflexión de la curva.
Este método depende fuertemente de la concentración de Fbg.
Otros, en cambio, calculan cuanto tiempo tarda un cambio fijo de
Absorbancia, por ej. de 30 mA sobre la línea de base o utilizan derivadas
matemáticas de la curva. Estos últimos detectan la formación del coagulo
al comienzo y por lo tanto suelen dar tiempos cortos. Algunos de los
coagulómetros con este sistema de detección tienen la posibilidad de
realizar la determinación a una longitud de onda de 620 nm para evitar la
interferencia con la bilirrubina.
101
TIEMPO DE PROTROMBINA
INTRODUCCIÓN
La protrombina es una proteína producida por el hígado que actúa en la coagulación
sanguínea. La producción de esta proteína depende de la ingestión suficiente de
Vitamina K y de su absorción. Durante el proceso de la coagulación, la protrombina se
convierte en trombina. En los pacientes con problemas hepáticos, el contenido
sanguíneo de protrombina disminuye.
E l tiempo de protrombina es una de las 4 pruebas más importantes para el diagnóstico
de trastornos dela coagulación y analiza la capacidad de 5 factores de la coagulación
(protrombina, fibrinógeno y factores V, VII y X). Esto se conoce como el “tiempo de
protrombina y suele ordenarse durante el tratamiento con anticoagulantes.
Evalúa el sistema extrínseco de la coagulación; como ayuda en el tamizaje de
deficiencia congénita de factores II, V, VII y X; deficiencia de protrombina;
disfribrinogenemia; afibrinogenemia (completa); efecto de heparina, coumadin o
warfarina; falla hepática; coagulación intravascular diseminada; tamizaje para la
deficiencia de vitamina K.
METODOLOGÍA
El tiempo de coagulación del plasma anticoagulado con citratado después de la adición
de una concentración óptima de calcio y un exceso de tromboplastina. La detección del
coágulo es realizada por un equipo automatizado electro-óptico.
UTILIDAD CLÍNICA
➢ Monitoreo del tratamiento con cumarínicos o heparinoides.
➢ Evaluación de la función hepática.
➢ Screening cuando se sospechan desórdenes de los factores II, VII, X, V,
fibrinógeno odisfibrinogenemias.
➢ Screening preoperatorio para detectar un posible desorden hemostático
102
VALORES NORMALES
El rango normal para los resultados de TP es: 11 a 13.5 segundos; y el INR es desde 0.9
hasta 1.3.
AREA DE URIANÁLISIS
INTRODUCCIÓN
El estudio del sedimento urinario es un método diagnóstico muy simple en esta época,
en la cual las técnicas de estudios complementarios son tan complejas. Sin embargo,
éste representa un medio diagnóstico auxiliar muy valioso, no sólo por su sencillez, sino
también por su rentabilidad. Pero, a pesar de su simplicidad, este método diagnóstico
sólo puede ser aprovechado por el médico que tiene cierta experiencia en relacionar el
cuadro clínico con los datos obtenidos a través del sedimento, y es muchas veces una
tarea difícil establecer una correcta correlación en la práctica diaria.
Cuando se estudia el sedimento urinario con el microscopio, se reconocen numerosas
estructuras con una forma muy diversa. En primer lugar, se pueden observar células de
la vía urinaria descendente y de los riñones, así como sangre, sales urinarias
precipitadas con forma cristalina o cilindros formados en los canalículos renales que
aparecen como bandas anchas y estrechas en el campo visual.
Al análisis óptico de la orina se agrega su examen químico a través de las tiras reactivas,
las cuales logran evidenciar la presencia de proteínas, hematíes, leucocitos, nitritos, así
como aportan información acerca del ph y la densidad. Sin embargo, el médico debe
conocer las limitaciones y ventajas de las tiras reactivas y del estudio del sedimento.
EXAMEN COMPLETO DE ORINA
Examen microscópico del Sedimento urinario
103
Métodos para su análisis:
➢ Microscopio
➢ Microscopio óptico: permite realizar la mayoría de los análisis de la orina.
➢ Microscopio de polarización: con el cual se logra evidenciar compuestos
birrefringentes.
➢ Microscopio de contraste de fases: logra reconocer elementos de la orina con
menor contraste.
OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DE ORINA
Para poder efectuar un análisis representativo, es necesario tener en cuenta ciertos
aspectos de importancia:
➢ La muestra de orina se recogerá siempre en un recipiente limpio y se examinara
dentro de los 45 minutos de emitida o bien si es el caso y dependiendo del tipo
de análisis se puede guardar en heladera por 24 horas.
➢ La orina se debe agitar antes de extraer la muestra para estudiar el sedimento.
➢ La orina podrá ser recolectada por micción espontánea, micción espontánea con
técnica del chorro medio, cateterismo vesical estéril o punción percutánea
suprapubica de la vejiga.
Método de centrifugación
Es de rigor estandarizar el método para poder obtener resultados comparables.
Con centrífuga de mesa se centrifugan 10ml de orina durante unos 7 minutos a una
velocidad de 2000 rpm. El sobrenadante se descarta y se agita el sedimento aplicando
una gota de este sobre un portaobjetos, extendiéndolo homogéneamente con un
cubreobjetos. Examinando la muestra inicialmente con escaso aumento (100x) se
obtendrá una visión general, luego se intensificará el aumento (400x), lo cual permitirá
identificar y contar el número de distintos elementos formes.
104
Métodos de tinción
Existen numerosos métodos de tinción del sedimento de orina. En ocasiones, la tinción
facilita el reconocimiento de distintos elementos. Sin embargo, la inmensa mayoría de
los métodos no son imprescindibles ni ofrecen información complementaria, sino sólo
espectaculares imágenes microscópicas y fotográficas. Por eso, apenas se utilizan en la
práctica diaria.
➢ Tinción de Sternheimer-Malbin: permite visualizar leucocitos con un patrón
tintorial diferente (leucocitos vitales, leucocitos desvitalizados).
➢ Tinción de peroxidasa de Kaye, modificada por Lampen: permite reconocer
cilindros leucocitarios.
➢ Tinción de la grasa con Sudan III: identifica la grasa contenida en células o
cilindros.
➢ Tinción con lugol: para la identificación de leucocitos.
➢ Tinción de Eosina: tiñe eritrocitos de color rosa, logrando diferenciarlos de otros
elementos.
➢ Doble tinción con eosina y azul de metileno: otorga color rojizo a los hematíes y
cilindros eritrocitarios, diferenciándolo del color azul que toman otros
elementos. Tinción con rojo neutro y violeta de metilo de Schugt
➢ Doble tensión simultanea de Quensel
➢ Tinción con azul de metileno de Loffler
➢ Tinción eosinofilica de Hansel: Para la detección de eosinofiluria, hallazgo
característico de la nefritis intersticial aguda inducida por medicamentos.
EXAMEN QUÍMICO DEL SEDIMENTO URINARIO
Tiras reactivas y métodos túrbido-métricos
La tira reactiva es una banda angosta de plástico con pequeños tacos adheridos, que
contienen un reactivo diferente para cada determinación, lo que permite la evaluación
simultánea de varias pruebas. Un requerimiento crítico es que las reacciones de las tiras
sean leídas en el momento indicado después de haber sido sumergidas en la muestra, y
105
luego deben ser comparadas cuidadosamente con la carta de colores proporcionada por
el fabricante.
La utilización de tiras reactivas permite la detección de diversos elementos que pueden
ocasionalmente estar presentes en la orina, siendo su uso de fácil realización, bajo costo
y resultados inmediatos. Se trata de la determinación semicuantitativa de proteínas,
glucosa, hemoglobina, mioglobina, leucocitos nitritos, cuerpos cetónicos, bilirrubina,
urobilinogeno así como la verificación de Ph y densidad.
La detección de proteínas por este medio, permite estimar el grado de albuminuria
según la escala cromática que acompaña al frasco y que varía entre 1+ (que corresponde
aproximadamente a 30 mg/dl) y 4+ (>2000 mg/dl). El método es relativamente
insensible a las globulinas. Orinas alcalinas (Ph 8) pueden producir falsos positivos, al
igual que la Fenozopiridina y la contaminación con antisépticos como la Clorohexidina
y algunos detergentes utilizados en la limpieza del material de vidrio. Asimismo, orinas
diluidas pueden dar falsos negativos.
Parámetros de las tiras reactivas:
➢ Urobilinógeno: la prueba está basada en la reacción de unión de una sal de
diazonio con el urobilinógeno urinario en un medio ácido. El color vira del rosa
pálido al rosa intenso.
➢ Glucosa: reacción enzimática secuencial donde la glucosa oxidasa cataliza la
oxidación de la glucosa dando ácido glucónico y peróxido de hidrógeno. Luego,
la peroxidasa cataliza la reacción del peróxido de hidrógeno con ioduro de
potasio, formándose productos coloreados que van desde celeste verdoso,
pasando por marrón verdoso intermedio, a marrón.
➢ Cetonas: se basa en la reacción de ácido acetoacético de la orina con
nitroprusiato. El color resultante va desde tostado, cuando no hay reacción, a
distintos tonos de púrpura para reacciones positivas.
106
➢ Bilirrubina: se basa en la unión de la bilirrubina con la sal de diazonio del 2,4-
diclorofenilo en un medio fuertemente ácido. El color cambia de tostado suave a
tostado intenso.
➢ Proteínas: basada en el cambio de color del indicador, azul de tetrabromofenol,
en presencia de proteínas. Una reacción positiva está indicada por un cambio de
color del amarillo verdoso al verde, y luego al verde intenso.
➢ Nitrito: esta prueba está basada en la reacción de ácido p-arsanílico y nitrito,
derivado del nitrato de la dieta en presencia de bacterias de la orina, para formar
un compuesto de diazonio. Este compuesto reacciona con N-(1-naftil)
etilendiamina en un medio ácido. El color resultante es rosa. Cualquier tonalidad
rosada es considerada positiva.
➢ pH: esta prueba está basada en indicadores dobles (rojo de metilo y azul de
bromotimol) los cuales dan un amplio espectro de colores cubriendo el rango de
pH urinario completo. Los colores varían desde ocre, pasando por verdoso-
amarillento, a verde azulado.
➢ Sangre: esta prueba está basada en la actividad de pseudo peroxidasa de la
hemoglobina, la cual cataliza la reacción de 3,3',5,5'-tetrametilbencidina con
hidroperóxido orgánico tamponado. El color resultante varía desde verdoso-
amarillento, pasando por verde azulado, hasta azul oscuro.
➢ Densidad: basado en el cambio de pKa. En presencia de los cationes urinarios,
se liberan protones de un polielectrolito produciéndose un cambio de color en el
indicador azul de bromotimol desde azul a amarillo
➢ Leucocitos: esta prueba revela la presencia de esterasas granulocitarias. Las
esterasas escinden un derivado del éster pirazol aminoácido para liberar un
derivado de hidroxipirazol que luego con la sal de diazonio determina un
producto violeta.
107
➢ Ácido ascórbico: esta prueba está basada en el efecto reductor del ácido
ascórbico. Comprende un compuesto aromático coloreado en su estado oxidado,
que se decolora cuando es reducido por el ácido ascórbico. El color cambia del
verde intenso al amarillo verdoso.
Otra forma semicuantitativa de estudiar la proteinuria son los métodos túrbido-métricos,
los cuales consisten en medir la turbidez que desarrollan las proteínas de la orina al
precipitar con ácido sulfosalicílico, ácido nítrico, ácido tricloroacetico o ácido acético
con calor.
La turbidometría se realiza por fotometría o nefelometría. Estos métodos son más
sensibles que las cintas colorimétricas y detectan 5 mg/dl de proteína. Además, detectan
todas las proteínas, y por esta razón, un resultado negativo con la cinta y positivo con un
método túrbido métrico, indica la excreción urinaria de proteínas diferentes a la
albúmina. Cuando esto sucede debe estudiarse la posibilidad de proteinuria de Bence-
Jones (cadenas ligeras de inmunoglobulinas), la cual se asocia con Mieloma o de
Lisozimuria que acompaña en ocasiones a las Leucemias Mielociticas. Falsos positivos
pueden ocurrir en orinas muy concentradas y cuando hay excreción urinaria de medios
yodados de contraste radiológico, metabolitos de la Tolbutamida y Sulfas o bien
concentraciones altas de Penicilina o Cefalosporinas en la orina.
Otros métodos para determinar proteinuria son de uso menos frecuente en la práctica
clínica. Entre ellos está el método de Biuret y el Folin/Lowry, que utilizan la fijación de
proteínas por el cobre y cuantifican espectrofotométricamente los cambios de color que
dicha reacción produce.
Finalmente está la técnica de Kjeldahl que determina el nitrógeno resultante de la
digestión de la proteína, después de eliminar otros compuestos nitrogenados no-
proteicos. Esta última técnica es la más precisa y es usada como referencia para los
demás métodos, pero tiene como desventaja que toma mucho tiempo y es costosa.
108
ELEMENTOS FORMES DEL SEDIMENTO URINARIO
El sedimento normal se halla prácticamente vacío, aunque en ocasiones pueden
observarse células de la vía urinaria e incluso de los genitales externos, así como
eritrocitos o leucocitos aislados, cristales, sales amorfas o filamentos de moco,
resultando el resto de los elementos de probable origen patológico. Los componentes
patológicos que se observan más a menudo son bastante inespecíficos y se evidencian
en diversas enfermedades de la vía urinaria. Eritrocitos - Leucocitos - Epitelio -
Cilindros - Cristales - Otros
1) Eritrocitos
Los hematíes se eliminan en forma muy reducida en la orina, incluso en
personas normales, con aumento 400x, se puede observar aproximadamente 0 a
2 hematíes por campo. Éstos se identifican al examen microscópico como
discos redondos de color débilmente amarillo rojizo, con doble contorno.
En las orinas hipotónicas se hinchan y en las hipertónicas se arruganLa
morfología de los hematíes puede revelar el origen glomerular o
postglomerular de la hematuria. Los eritrocitos que atraviesan el canal
glomerular aparecen "dismórficos", es decir, se desforman, fragmentan y tienen
muescas
Estas células se diferencian de los hematíes uniformes de origen
postglomerular. La hematuria glomerular se sospecha cuando más del 80% de
los hematíes tienen aspecto dismórfico. De todas formas, la observación de
hematíes eumórficos no descarta la enfermedad glomerular. Los acantocitos, es
decir los hematíes en forma de anillo y evaginaciones, son característicos de la
enfermedad del glomérulo. Un 5% de ellos con relación a la totalidad de los
eritrocitos sugiere fehacientemente una hematuria glomerular, probabilidad que
aumenta aún más si el porcentaje aumenta a un 10%. Elementos que apoyan la
sospecha de una hematuria de origen glomerular son la presencia simultánea de
cilindros eritrocitarios, granulosos, hialinos
109
2) Leucocitos
Cuando se habla de leucocitos casi siempre se habla de granulocitos, y estos
indican la presencia de procesos inflamatorios del riñón y la vía urinaria. Al
examinar un sedimento urinario de una persona sana, pueden detectarse hasta 5
leucocitos por campo de 400x, sin que esto tenga significado patológico. Son
células de tamaño mayor a los hematíes y menor a las células epiteliales, con
presencia de núcleo sementado y granulaciones.
En la mujer debe tenerse en cuenta que los leucocitos hallados pueden ser de
origen vaginal, sobre todo si se acompañan de una gran cantidad de células de
epitelio plano, por lo que el estudio de la orina de chorro medio puede ser de
gran valor para aclarar esta cuestión.
Si además de la leucocituria se evidenciaran cilindros leucocitarios procedentes
de los túbulos, el origen sería renal y el diagnóstico pielonefritis.
En los casos de leucocituria estéril (sin desarrollo bacteriano en los
urocultivos) deberá descartarse tuberculosis, micosis, clamidias, herpes simple
así como también Nefritis intersticial medicamentosa
110
3) Epitelio
Los elementos epiteliales son frecuentes en el sedimento urinario y su valor
diagnóstico muy reducido.
Existen diversos tipos:
− Epitelio plano: Procede de los genitales externos o de la porción
inferior de la uretra. Se trata de grandes células de aspecto irregular con
un núcleo pequeño y redondo, pudiendo observarse en forma frecuente
un repliegue parcial en el borde celular
− Epitelio de transición: Tiene su origen desde la pelvis renal, uréter y
vejiga, hasta la uretra. Su presencia acompañada de leucocituria puede
indicar una inflamación de la vía urinaria descendente. En caso de
apreciar anomalías nucleares deberá descartarse un proceso maligno.
Estas células son más pequeñas que las del epitelio plano, son
redondeadas con "cola" y su núcleo es más grande y redondo.
111
− Epitelio tubular o renal: Son células algo mayores que los leucocitos y
presentan granulaciones. Su núcleo, de difícil visualización es grande y
redondo.
Las células de epitelio tubular que contienen gotas de grasa muy
refringentes en el protoplasma, se conocen como células granulosas o
cuerpos ovales grasos y su presencia sugiere la existencia de un Sme.
Nefrótico.
4) Cilindros
La presencia de cilindros indica casi siempre la presencia de una enfermedad
renal, aunque la evidencia de alguno de ellos (hialinos y granulosos) pueden
encontrarse en personas sanas tras grandes esfuerzos físicos.
Por lo general la cilindruria cursa con proteinuria, ya que los cilindros se
originan por el espesamiento de las proteínas o su precipitación sobre todo en
el túbulo distal.
Los cilindros son estructuras longitudinales que se corresponden con la luz de
los túbulos y que pueden contener diferentes elementos.
Existen diversos tipos de cilindros:
− Cilindros hialinos: Está compuestos por una proteína de alto peso
molecular (mucoproteina de Tamm-Horsfall) que se produce y elimina
en cantidades muy pequeñas en condiciones normales. Estos cilindros
112
son homogéneos, incoloros, transparentes y poco refringentes, por lo
que son fáciles de omitir
Pueden aparecer en forma aislada en personas sanas o tras la
administración de diuréticos potentes como la furosemida, sin embargo
su número aumenta drásticamente durante el curso de un Sme.
Nefrótico. No es raro detectar cilindros hialinos con inclusiones
celulares (eritrocitos, leucocitos, epitelio tubular), lo que determina la
presencia de enfermedad del parénquima renal.
− Cilindros granulosos: Ocasionalmente pueden aparecer en personas
sanas, aunque su presencia se relaciona con enfermedades agudas y
crónicas del riñón. Suelen ser más grandes que los hialinos y presentar
inclusiones granulares. No es raro observar una mezcla de cilindros
hialinos y granulosos
− Cilindros céreos: Suelen ser más anchos que los hialinos, muestran una
refringencia mucho mayor y no son fáciles de omitir. Presenta muescas
o hendiduras finas en sus bordes, que se dirigen perpendicularmente al
eje longitudinal del cilindro.
113
Su presencia indica siempre una enfermedad renal crónica grave en un
paciente con insuficiencia renal crónica avanzada, pero en ocasiones
puede observarse en la fase de recuperación de la diuresis luego de un
período de anuria.
− Cilindros epiteliales: Están compuestos de epitelio tubular descamado.
Su presencia se aprecia especialmente en la fase de recuperación de la
diéresis luego de una falla renal aguda por necrosis tubular isquémica o
tóxica. Son poco frecuentes.
− Cilindros con inclusiones lipídicas: Se diferencian de los epiteliales por
la inclusión de gotas de grasa en las células tubulares. Se observan en el
curso de un Sme. Nefrótico.
− Cilindros eritrocitarios: Se componen de eritrocitos hinchados que se
adhieren a una sustancia fundamental hialina. Indican siempre el origen
renal de la hematuria y por consiguiente se trata de un hallazgo muy
valioso. Aparecen fundamentalmente en la Glomerulonefritis aguda y
crónica y también en la Nefropatía lúpica, panarteritis nodosa,
endocarditis bacteriana asociada a Glomerulonefritis.
114
− Cilindro leucocitario: Se producen cuando ocurre una exudación intensa
de leucocitos y al mismo tiempo se eliminan proteínas por el túbulo. Su
presencia tiene fundamental importancia ya que demuestra que la
inflamación es de origen renal, casi siempre, a causa de una
pielonefritis (figuras 24, 25 y 26).
5) Cristales
Los cristales pueden adoptar múltiples formas que dependen del compuesto
químico y del ph del medio.
En comparación con otros elementos de la orina, los cristales sólo poseen
significación diagnóstica en muy pocos casos.
− Uratos: Se encuentran en forma amorfa en orinas ácidas o conformando
un cilindro, lo que puede llevar a confusión. Cuando se eliminan en
grandes cantidades, se reconocen macroscópicamente como un
precipitado rojo-pardo (polvo de ladrillo).
115
− Urato diamónico: Aparece en orinas ligeramente alcalinas como
pequeñas esferas de color amarillo pardo. No tiene ningún significado
diagnóstico especial.
− Ácido úrico: En la orina ácida pueden adoptar múltiples formas
(cuadros romboidales, rosetas, pesas, barriles, bastones). Son frecuentes
en orinas concentradas, como ocurre en la fiebre, en la gota y en la lisis
tumoral.
− -Oxalato de calcio: Es incoloro y muy birrefringente. Es característica
su forma en sobre de carta. Se producen con gran frecuencia luego de la
ingesta de alimento ricos en oxalato
− Sulfato de calcio: Se observan como agujas largas y finas. Son raros y
sólo se detectan en orinas muy ácidas.
− Fosfato amónico-magnésico: Se aprecian como formas incoloras en
"tapa de ataúd" en la orina alcalina. Aparecen como consecuencia de la
fermentación amoniacal en casos de bacteriuria marcada.
116
− Cistina: Se detectan en orinas ácidas como cuadros hexagonales
incoloros. Se observan en la cistinuria, trastorno congénito de la
reabsorción tubular de cistina
6) Otros
− Cuerpos cilindroides y pseudocilindros
Es importante conocer estas estructuras para no confundirlas con los
verdaderos cilindros. Tienen forma de banda longitudinal, acaban en
punta por los extremos o se disponen en filamentos. Su origen no está
bien determinado.
− Tricomonas
Se destacan en el sedimento urinario por su movilidad, por lo que no
basta con observar una imagen inmóvil con un aspecto sugerente. Se
trata de estructuras redondas u ovaladas que disponen de cuatro flagelos
en uno de los polos, generalmente móviles. Su tamaño es
aproximadamente 2 a 3 veces mayor que el de los leucocitos. Suelen
encontrarse en la orina de mujeres con infección vaginal y en ocasiones
indican infección vesical.
117
VALORACIÓN DIAGNÓSTICA DE LOS DISTINTOS ELEMENTOS DEL
SEDIMENTO URINARIO
A continuación se describirá la valoración diagnóstica y el diagnóstico diferencial de los
distintos elementos formes y no formes que se reconocen al microscopio.
Elemento Frecuente Menos Frecuente Raro
Eritrocituria Todas las formas de
Glomerulonefritis
Afección renal de
las enfermedades
sistémicas Tumores
benignos y
malignos del riñón
y la vía urinaria
Nefrolitiasis
Traumatismos
Poliquistosis
Trombosis de los
vasos renales
Diátesis
hemorrágica
Infección primaria
Tuberculosis
Nefropatía
diabética
Pielonefritis
Nefritis intersticial
Nefropatía toxica
Enfermedades
renales hereditarias
Microhematuria
asintomática
Enfermedades
infecciosas
Esfuerzo físico
considerable
Insuficiencia
cardiaca Hematuria
benigna familiar
Personas sanas
Leucocituria Pielonefritis Todas
las enfermedades
inflamatorias de la
vía urinaria
descendente
Nefritis intersticial
Glomerulonefritis
Rechazo de
trasplante
Enfermedades
sistémicas con
afección renal
Eosinofiluria Nefritis intersticial
aguda de origen
medicamentoso
Glomerulonefritis
rápidamente
progresiva
Prostatitis aguda
118
Cilindro eritrocitario Todas las formas de
Glomerulonefritis
Afección renal de
las enfermedades
sistémicas
Poliquistosis renal
Amiloidosis renal
Nefritis intersticial
Esfuerzo físico
considerable
Cilindro leucocitario Pielonefritis aguda
y crónica
Glomerulonefritis
Nefritis intersticial
Cilindro bacteriano Pielonefritis aguda
y crónica
Cilindro hialino Todas las
enfermedades
renales agudas y
crónicas (sobre
todo con Sme.
Nefrótico) Riñón de
estasis por
insuficiencia renal
Esfuerzo físico Diuréticos potentes
Sme. febril
Albuminuria
ortostatica
Cilindro granuloso Todas las
enfermedades
renales agudas y
crónicas
Afección renal en el
mieloma
Esfuerzo físico
Cilindro céreo Todas las
enfermedades
renales crónicas
avanzadas
Insuficiencia renal
aguda
Cilindro graso,
células con
inclusiones grasas,
gotas de grasa
Todas las
enfermedades
renales con Sme.
Nefrótico
Insuficiencia renal
aguda Nefropatía
diabética
Arteriosclerosis
119
Epitelio plano Contaminación de
los genitales
externos femeninos
Porción inferior de
la uretra en el varón
y la mujer
Epitelio de
transición
Inflamación de la
vía urinaria
descendente
Personas sanas
Epitelio renal o
tubular
Enfermedades
víricas
generalizadas
Nefropatía toxica
Pielonefritis
Glomerulonefritis
Reacción de
rechazo al
trasplante renal
Cilindro epitelial Enfermedades
víricas
generalizadas
Comienzo de la
diuresis en la IRA
Pielonefritis
Glomerulonefritis
Agrupaciones
celulares
Tumores de la vía
urinaria Necrosis
papilar
Tricomonas Infección por
tricomonas de la vía
urinaria y de los
genitales
120
AREA DE PARASITOLOGÍA
INTRODUCCIÓN:
Regularmente en el área de Parasitología, las muestras más analizadas para demostrar la
presencia de parásitos intestinales del hombre son las heces fecales; sin embargo,
existen otros parásitos cuya presencia se puede evidenciar en muestras biológicas como:
bilis, jugo duodenal, esputo, secreción, biopsia o frotis perianal, no obstante estas
pruebas se harán tomando en cuenta los antecedentes clínicos específicos del paciente.
A continuación, se hará referencia a los diversos aspectos con los cuales deberán
proceder las muestras a analizar con fines parasitológicos para obtener resultados
reproducibles y de esta manera ayudar eficazmente al médico en el diagnóstico,
pronostico, y tratamiento del paciente.
PREPARACIÓN:
− Antes de tomar la muestra debe lavar con agua y jabón la "zona
perianal y secar con toalla desechable, la materia fecal debe ser
recogida en un recipiente adecuado plástico, el cual debe ser rotulado
con nombre-fecha-edad del paciente.
− Las heces deben estar exentas de orina, debido a que esta modifica su
aspecto, consistencia y su reacción, así mismo altera o destruye las
formas vegetativas (móviles) de los protozoarios.
− Deben examinarse en un lapso inferior a 6 horas luego de tomada la
muestra, ya que sufren un proceso de fermentación. Deben mantenerse
a 4°C si no son examinadas inmediatamente.
− Si se quiere recolectar una muestra de un niño que utiliza pañales, se
recomienda colocar plástico entre el niño y el pañal para evitar la
absorción de la humedad de la muestra.
121
EVALUACIÓN MACROSCÓPICA:
1. Aspecto:
Heterogéneo es el aspecto normal ya que las heces están constituidas por restos
de alimentos. Una muestra muy heterogénea es indicativo de un tránsito
intestinal muy rápido.
Homogéneo indicativo de tránsito intestinal lento.
2. Consistencia:
Pueden ser líquidas, blandas, pastosa o dura/ formada.
3. Color
El color de las heces proporciona una significativa información al químico
clínico ,ya que con solo realizar un detallado análisis macroscópico de estas , le
puede orientar en gran parte para detectar alguna patología, disfunción orgánica,
hemorragia, o bien hacer de su conocimiento el tipo de alimentación o ingestión
de algún medicamento que este presentando el paciente en ese momento .El
color anormal ayuda al médico a seleccionar las pruebas tanto químicas como
microbiológicas necesarias para llegar finalmente a extender un buen
diagnóstico ,pronostico y plan de tratamiento adecuados para el paciente. A
continuación se hará referencia a los colores más comunes que pueden presentar
las heces fecales ya sea por patología o bien por algún factor externo
− Marrón pardo: es el color normal debido a las sales biliares
− Amarillas: en lactantes (reciben lactancia).
− Oscuras: por proteínas de carnes ingeridas, consumo de hierro.
− Gris-arcilloso: Acolia, se debe a obstrucción de vías biliares o conductos
hepáticos.
− Negras: melena, debido a hemorragia digestiva superior.
122
− Verdes-azuladas presencia de pseudomonas.
4. Olor.
El olor fecal, característico, se hace fétido en todos los procesos que cursan con
petrufacción de las proteínas ingeridas o endógenas (lo cual puede ocurrir,
aunque no obligadamente, en pacientes con insuficiencia gástrica, biliar o
pancreática, colitis, cáncer, etc.), y sobre todo en las melenas, en el cáncer de
colon y en el absceso abierto en el intestino grueso. En la acolia es desagradable,
pero no hediondo
De olor rancio, agrio, son las "diarreas de fermentación" con tránsito rápido a
partir del ciego. Inodoras se vuelven las deposiciones durante las curas con
antibióticos intestinales. De olor amoniacal son las diarreas urémicas y en las
fístulas recto vesicales.
5. Moco.
Su aparición en las deposiciones suele ser reconocible ya macroscópicamente,
por lo menos en la emulsión de heces observada sobre todo oscura. Si está
finamente dividido y mezclado en las heces, dándoles un aspecto brillante
procede del intestino delgado, a diferencia del moco en copos visibles, que
tienen un origen más bajo y sobre todo en tiras o gleras, cuyo punto de partida
está en el colon distal. Su significación clínica es muy distinta si se presenta
aisladamente como moco perlado, transparente, o si es opaco, mezclado con
células epiteliales, sangre o pus: en el primer caso se trata de un catarro alérgico,
puramente funcional o mixoneurosis ("colitis mucomembranosa"), y
excepcionalmente, si es muy abundante, de un tumor vellos; mientras que en el
segundo caso señala la existencia de un proceso inflamatorio, más o menos
profundo (enteritis y colitis genuinas)}
EVALUACIÓN MICROSCÓPICA
FUNDAMENTO:
123
Permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos adultos,
enteros o fraccionados, así como los cambios en las características organolépticas de las
heces eliminadas (color, presencia de sangre y/o moco, consistencia etc.)
Este método permite buscar principalmente en muestras frescas, la presencia de formas
evolutivas móviles de parásitos de tamaño microscópico (trofozoitos, quistes de
protozoos: Entamoeba histolytica, Giardia lamblia (duodenalis), Balantidium coli etc.,
así como larvas o huevos de helmintos: Strongyloides stercolaris, Ancylostoma
duodenale, Necator americanus, Paragonimus, Fasciola etc.
Material y equipo
➢ Aplicadores de madera
➢ Portaobjetos de 25 X 76 mm
➢ Cubreobjetos de 22 X 22 mm
➢ Solución salina isotónica
➢ Lugol
➢ Microscopio
Método:
− En un portaobjetos limpio y desengrasado, se colocan separadamente, una gota
de solución salina y otra de lugol
− Con el aplicador de madera se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces (si tuviera
presencia de sangre y moco elegir esa parte para estudiar) y se mezcla con la
solución, con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos gruesos,
procurando hacer una suspensión no un frotis.
− Colocar el cubreobjetos.
− Repetir estas operaciones en la gota de lugol.
− Observar al microscopio con objetivos de 10X y 40X. No es recomendable usar
objetivo de inmersión (100 x), pues se puede ensuciar el microscopio. Recorrer
la lámina siguiendo un sentido direccional, ejemplo de derecha a izquierda, o de
arriba abajo.
124
NOTA:
Con el suero fisiológico, los trofozoitos y quistes de los protozooarios se observan en
forma natural, y con lugol, las estructuras internas, núcleos y vacuolas.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Se informará detalladamente la presencia de alguna forma parasitaria observada durante
el análisis coproparasitoscopico, indicando su especie y estado evolutivo (trofozoito,
quiste en caso de un protozoo) o (huevo, larva en caso de un helminto)
PARASITOLÓGICO SERIADO DE DEPOSICIONES
El examen seriado se realiza con muestras fecales diarias ya sea dos a tres muestras por
día
Este examen se realiza si se sospecha de cualquier parasitosis intestinal o elementos
parasitarios que se eliminen con las deposiciones.
MÉTODO:
Se realiza el mismo método de la microscopia informando detalladamente la presencia o
ausencia de parásitos
TEST DE GRAHAM
Este examen se realiza para el diagnóstico de Enterobius vermicularis. Se observa la
ausencia o presencia de huevos de Enterobius vermicularis.
MÉTODO
Graham.
TOMA DE MUESTRA
125
− Al paciente se le entregará 5 portaobjetos con una cinta adhesiva tipo “scotch”
pegada a lo largo de cada portaobjeto.
− El paciente no se debe lavar la zona perianal antes de la obtención de las
muestras (en la mañana).
− Debe realizar tocaciones perianales con la cinta scotch (por el lado engomado)
sin contaminar con deposiciones, talco o pomadas.
− Luego debe colocar la cinta por su lado engomado hacia el portaobjeto y
adherirla a él.
− Se debe obtener 5 muestras, 1 muestra cada día por 5 días.
− Debe envolver cada placa en papel y escribir su nombre y apellidos sobre éste.
RESULTADOS
Se detalla la presencia o ausencia de huevos del parásito
SANGRE OCULTA EN HECES
El examen químico del pigmento hemático en las deposiciones (método de Weber, con
la tintura de guayaco, de Adler, con la bendicina, o de Meyer, con la fenolftaleina), tiene
interés en todos los casos en que se sospecha la existencia de hemorragias digestivas
subclínicas, es decir, sin que se acusen visiblemente en forma de melena .
➢ Las mismas causas capaces de dar lugar a melena pueden irrigar hemorragias
ocultas, pero en especial las siguientes:
➢ Tumores del tracto digestivo, sobre todo cáncer gástrico o de colon. (El derecto
suele dar hemorragias aparentes).
➢ Enteritis y colitis.
➢ Ciertas diátesis hemorrágicas: púrpura de Henoch, hemofilia, escorbuto, etc.
➢ Algunas parasitosis intestinales (anquilostoma, teniasis, etc).
➢ En ocasiones, las cirrosis hepáticos.
➢ Epistaxis posteriores, hemoptisis o hemorragias gingivales deglutidas.
126
PRINCIPALES PARÁSITOS INTESTINALES DEL HOMBRE
PROTOZOARIOS
Parásitos Formas evolutivas
para el diagnóstico
Tipo de muestra Patogenicidad
Clase Lobosea
Entamoeba histolytica Trofozoítos, quistes Heces Si
Entamoeba coli Trofozoítos, quistes Heces No
Entamoeba hartmanni Trofozoítos, quistes Heces No
Entamoeba polecki Trofozoítos, quistes Heces No
Endolimax nana Trofozoítos, quistes Heces No
Iodamoeba bütschlii Trofozoítos, quistes Heces No
Blastocystis hominis Trofozoítos Heces Si
Clase Zoomastigophorea
Giardia lamblia Trofozoítos, quistes Heces Si
Enteromonas hominis Trofozoítos Heces No
Retortamonas
intestinalis
Trofozoítos, quistes Heces No
Chilomastix mesnili Trofozoítos, quistes Heces No
Dientamoeba fragilis Trofozoítos Heces Si
Lophomonas sp Trofozoítos, quistes Fluidos Si
Clase Ciliata
Balantidium coli Trofozoítos, quistes Heces Si
Phylum Apicomplexa
Clase Sporozoa
Isospora belli Ooquistes Heces, contenido
duodena
Si
Cryptosporidium sp Ooquistes Heces, secreciones Si
Cyclospora
cayetanensis
Ooquistes Heces, contenido
duodena
Si
Sarcocystis (bovis-
hominis, bovis-canis,
suis hominis=Isospora
hominis)
Esporoquiste Heces Si
Phylum Microspora
Microsporidios
Enterocytozoon
bieneusi
Esporas Heces Si
Encephalitozoon spp. Esporas Heces Si
Pleistophora Esporas Heces , fluidos Si
127
Entamoeba histolytica con 1, 2
y 4 núcleos, coloración lugol
(400X)
Trofozoíto de Entamoeba
histolytica con glóbulos rojos
(1000X)
Trofozoíto de Entamoeba
histolytica, coloración lugol
(400X)
Trofozoíto de Entamoeba
histolytica con coloración
tricrómica
Entamoeba coli con solución
de lugol (1000X)
Quiste de Endolimax nana con
4 núcleos. Coloración lugol
(izq.), Coloración 3
Trofozoíto de Entamoeba
histolytica con coloración
tricrómica
Trofozoíto de Entamoeba
histolytica con coloración
tricrómica
Trofozoíto de Entamoeba
histolytica con coloración
tricrómica
128
PROTOZOARIOS INTESTINALES: FLAGELADOS, CILIADOS Y
COCCIDIOS
Quistes de Giardia lamblia, (lugol)
(400X). (1000X)
Trofozoíto de Giardia lamblia,
concoloración tricrómica y
hematoxilina férrica (1000x)
Trofozoíto de Gamblia (200x),
Lophomonas sp 400x
Trichomonas hominis con
Colorac. tricrómica y Hem.férrica
Quistes y trofozoítos de
Chilomastix mesnili, Solución
salina (200x) y Hematoxilina
Dientamoeba fragilis,
Hematoxilina férrica (1000X)
Quistes y trofozoítos de Balantidium
coli, coloración tricrómica (100x) Isospora belli en coloración Ziehl Neelsen (400X)
Cryptosporidium parvum,
coloración: Ziehl-Neelsen (1000X)
Cyclospora cayetanensis con
coloración Ziehl-Neelsen
Sarcocystis hominis en formalina
10%
Enterocytozoon bieneusi,
coloración Gram-chromotrope
129
HELMINTOS
Parásitos Formas evolutivas
para el diagnóstico
Tipo de muestra Patogenicidad
Phylum Nematoda
Clase Aphasmidea
Ascaris lumbricoides Adultos, juveniles,
huevos
Heces SI
Anquilostomídeos
Ancylostoma
duodenale
Larvas, huevos Heces SI
Necator americanus Larvas, huevos Heces SI
Trichuris trichiura Huevos Heces SI
Capillaria
philippinensis.
Huevos, larvas,
adultos
Heces SI
Clase Phasmidea
Strongyloides
stercoralis
Adultos, huevos,
larva rabditiforme
Heces, contenido
duodenal, esputo
SI
Enterobius vermicularis Adulto hembra,
huevos
Frotis perianal,
hisopado anal,
heces
SI
Trichostrongylus sp Huevos, larvas Heces SI
Phylum Platyhelminthes
Clase Cestoda
Taenia solium Fragmentos de
estróbila, progótidos,
huevos
Heces, frotis
perianal
SI
Taenia saginata Fragmentos de
estróbila, progótidos,
huevos
Heces, frotis
perianal
SI
Diphyllobothrium
pacificum
Adulto, estróbila,
proglótidos, huevos
Heces SI
Dipylidium caninum Estróbila, proglótidos, cápsulas
ovígeras
Heces SI
Hymenolepis nana Huevos Heces SI
Hymenolepis diminuta Huevos Heces SI
Clase Trematoda
Fasciola hepática Huevos Heces, contenido
duodenal, secreción
biliar
SI
Paragonimus peruvianus = P.
mexicanus
Huevos Esputo, heces SI
130
Clonorchis sp Huevos Heces SI
Schistosoma mansoni Huevos Heces SI
Echinostoma sp Huevos Heces SI
Cotylophorum sp Huevos Heces SI
Phylum Acanthocephala
Macracanthorhynchus
Hirudinaceus
Linguatula sp
Huevos, adultos Huevos
Heces, cirugías o
autopsias Huevos
SI
Fitoparásitos
Meloidogyne sp Huevos, larvas Heces SI
Heterodera sp. Huevos, larvas Heces ¿?
Rhabditis sp Larvas, adultos Heces ¿?
HELMINTOS: NEMÁTODES
Huevo fertilizado de Ascaris
lumbricoides
Huevo fértil corticado de
Ascarislumbricoides en
coloración temporal de eosina
Huevo infértil de Ascaris
lumbricoides con lugol (400X)
Ascaris lumbricoides Huevo
larvado, (solución salina)
Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura y Ancylotoma o
Necator en solución salina
Meloidogyne sp. (Arriba) y
Enterobius vermicularis
(abajo) en solución salina
131
HELMINTOS: PLATELMINTOS (CÉSTODES)
Huevo de Taenia sp.,
coloración lugol (200X)
Huevo de Taenia sp. Solucion
salinal (400X)
Huevo de Hymenolepis nana
con solución lugol (200X)
Huevo de Hymenolepis
diminuta con solución salina
Hymenolepisnana. Huevo de
en solución salina (400X)
Huevo de Hymenolepis nana
con solución de lugol (400X)
132
HELMINTOS: PLATELMINTOS (TREMATODOS Y ACANTOCÉFALOS)
Huevo de F. hepatica.
Solución salina (200X))
Huevo de Paragonimus
peruvianus con solución salina
(400X
Huevo de Clonorchis sinensis
con solución salina (400X)
Huevo de Fasciola hepatica
con miracidium (200X)
Huevo Cotylophorum sp en
solución salina (400X) Huevos de Paragonimus sp en
muestra de esputo (400X)
133
CAPITULO III CONCLUSIONES
− Los principios utilizados en los diferentes análisis clínicos en el laboratorio son
impedancia o resistencia eléctrica en hematología, turbodensitometrico en
hemostasia y métodos enzimáticos en bioquímica
− Las técnicas para obtención sanguínea son con sistemas de tubos al vacío,
jeringas, etc.
− Para el procedimiento de parasitología y urianalisis se realizan manualmente por
un personal capacitado
134
CAPITULO IV RECOMENDACIONES
− Realizar un cronograma de mantenimiento de los equipos automatizados
− Antes de realizar un análisis realizar la calibración y control de cada prueba
− Tener en cuenta las condiciones pre analíticas
− Tener en cuenta las medidas de bioseguridad en procedimientos realizados
135
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