Download - NeuroBook : Conversas entre neurónios
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Estágio de Verão - Ciência Viva CNC
Catarina FernandesHelga AfonsoMariana SantosMónica Ferreira
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Estímulo de morte celular
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Quantificação de proteínas
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O hipocampo é uma estrutura localizada nos lobos temporais do cérebro humano, considerada a principal sede da memória e importante componente do sistema límbico.
Esta estrutura denomina-se “hipocampo” devido à sua forma curva, que se assemelha a um cavalo-marinho (Grego: hippos = cavalo, kampi = curva).
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Esta estrutura é muito importante :◦ Para converter a memória a curto prazo em
memória a longo prazo.
◦ Pois permite ao mamífero comparar as condições de uma ameaça actual com experiências passadas semelhantes, permitindo-lhe, assim, escolher qual a melhor opção a ser tomada para garantir o seu bem-estar.
As lesões no hipocampo impedem a pessoa de construir novas memórias e a pessoa tem a sensação de viver num lugar estranho onde tudo o que experimenta simplesmente se desvanece, mesmo que as memórias mais antigas anteriores à lesão permaneçam intactas.
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Sacrificou-se o rato fêmea;
Retiraram-se os embriões do seu interior;
Extraímos os seus cérebros e de seguida os 2 hipocampos de cada cérebro;
Colocámos os hipocampos em soluções, que permitiu extrair os neurónios para depois os pôr em cultura.
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Cultura de neurónios com 8DIV
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Conjuntos de técnicas que utilizam anticorpos para identificar macromoléculas, no nosso caso, para identificar as proteínas.
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Fixação; Permeabilização; Bloqueio; Incubação com os anticorpos primários; Incubação com os anticorpos secundárias; Preparação das lâminas e lamelas; Visualização ao microscópio de
fluorescência.
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Marcámos a PSD-95 e a Geferina com os anti-corpos de fluorescência. Assim foi possível visualizarmos ao microscópio de fluorescência.
A PSD é específica das sinapses glutamatérgicas (excitatórias) enquanto que a Geferina é específica de sinapses gabaérgicas (inibitórias).
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Normalmente usado:
◦ Laboratórios de investigação médica e biológica;
◦ Detecções de doenças hereditárias;◦ Identificação de “impressões digitais”
genéticas;◦ Construção de relações entre espécies;◦ Clonagem de genes;◦ Testes de paternidade;◦ Genotipagem.
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PCR consiste em três fases: Desnaturação, Annealing e Extensão
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Gráfico obtido a partir do termociclador.
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O produto do PCR pode ser visualizado após a electroforese em gel de agarose e o seu tamanho é estimado com padrões lineares de DNA.
Electroforese-gel de agarose
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