EFECTIVIDAD DE LA IDENTIFICACIÓN DEL EFECTIVIDAD DE LA IDENTIFICACIÓN DEL SÍNDROME DE LYNCH MEDIANTE FILTRADO SÍNDROME DE LYNCH MEDIANTE FILTRADO MOLECULAR DEL CÁNCER COLORRECTAL MOLECULAR DEL CÁNCER COLORRECTAL 

INCIDENTE: RESULTADOS PRELIMINARES DEL INCIDENTE: RESULTADOS PRELIMINARES DEL ESTUDIO PROSPECTIVO DE BASE POBLACIONAL DE ESTUDIO PROSPECTIVO DE BASE POBLACIONAL DE 

LA COMUNIDAD DE NAVARRALA COMUNIDAD DE NAVARRAAngel Alonso Sánchez(1), Sira Moreno Laguna(1), Mar Arias Alonso(1),

Marta Montes Díaz(2), Marisa Gómez Dorronsoro(2), Ana Guerra Lacunza

(3), Ruth Vera García(4), Rosana Grández Ladrón De G(5), Susana Oquiñena

Legaz(3), Erika Borobio Aguilar(6)

(1) SºGenética. (2) Sº Anatomía Patológica. (3) Sº Digestivo. (4) Sº Oncología Médica.

COMPLEJO HOSPITALARIO DE NAVARRA.

(5) Sº Oncología Médica. HOSPITAL REINA SOFÍA DE TUDELA.

(6) Sº Digestivo. HOSPITAL GARCÍA ORCOYEN DE ESTELLA.

AntecedentesAntecedentes HipótesisHipótesis199199

Selección clínica

Serie: “criterios clínicos”Serie: “criterios clínicos”Serie: “criterios clínicos”Serie: “criterios clínicos”Clinical Criteria

(Bethesda-R)

7-20107-2010

Serie: “CCRi”Serie: “CCRi”Serie: “CCRi”Serie: “CCRi”

Batería diagnósticaAMS Criteria +

AMSCriteria -

201201

1.000 CRC incidente(no seleccionados)

Se e CCSe e CCSe e CCSe e CC30 Familias

(90 portadores)IHC/ MSIIHC

* If MLH1 expression is lost DNA analysis of BRAF in tumour can be performed because the 10-2013

10-2013

Batería diagnóstica

30 Familias(90 t d

abnormal expression*

normal expression

abnormal expressio

n* or MSI-H/L

normal expressio

nor MSS

MSI

presence ofBRAF-mutation makes HNPCC very unlikely.

(90 portadores

ComparaciónComparación

MSI L/H MSS

mutation analysis

2nd tumour

mutation analysis

noanalysis

1Vasen et al J Med Genet 2007 Jun;44(6):353-62

Angel M. Alonso Sánchez. COMPLEJO HOSPITALARIO DE NAVARRA SERVICIO NAVARRO DE SALUD

EFECTIVIDAD DE LA IDENTIFICACIÓN DE SD LYNCH MEDIANTE FILTRADO MOLECULAR DEL CÁNCER COLORRECTAL INCIDENTE 2

Vasen et al. J Med Genet. 2007 Jun;44(6):353-62

Nuevos CCR

ObjetivosObjetivosN= 1.000 (333/ año x 3)

IMSX 1.000

CI

85 % IMS-LN= 850

15% IMS-HN= 150

MSH2/MSH6 11%N =16

MLH1 89%N= 133

IHQX150(más 150 IHQ confirmación)

BRAF WT V600E BRAF

V600E BRAFMETILACIÓN X120

SECUENCIACIÓN+ BRAF WTNO MET 40%

N=53

V600E BRAFMET 60%

N= 80

SECUENCIACIÓN+GRANDES DELECIONES

X69

33 FAMILIAS CON SINDROME DE LYNCH(99 portadores de Sd. de Lynch)(99 portadores de Sd. de Lynch)

Consentimiento informadoTejido tumoralInmunohistoquímicaInestabilidad microsatélites

Consulta consejo genético

Mutación V600E B-RafMutaciones germinales

CI

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Inestabilidad microsatélites Mutaciones germinalesADN sangre periférica

ResultadosResultados

“Serie CCRi” % CCR (15/11/2010-01/10/2012) N = 525

Tumores/año 279,52 Población C F Navarra (m periodo) 643 713

Patrones IHQ (tumores MSI-H) N = 47 INESPECÍFICO/DUDOSO 2 4,2% MLH1 34 72,3% MSH2 6 12 8% Población C.F. Navarra (m periodo) 643.713

Incidencia CCR en Navarra 43 / 100.000 hb/ año

Inestabilidad de microsatélites N = 417 ALTA (MSI-H) 47 11.3%

MSH2 6 12,8% MSH6 3 6,3% NORMAL 3 6,3%

Mutación V600E BRAF N= 43 V600E 9 20,9%

BAJA 15 3,6% ESTABLES 355 85,1%

Patrones IHQ N = 472 NORMAL 416 88,1% MLH1 39 8 3%

WT 34 79,1% Metilación Promotor MLH1 N= 44

Metilado 23 52,3% No metilado 21 47,7%

Mutaciones Germinales N = 16 MLH1 39 8,3% MSH2 7 1,5% MSH6 1 0.2% PMS2 1 0,2% DUDOSO 7 1,5%

Í %

Mutaciones Germinales N = 16 No mutación 8 4,2% MLH1 3 72,3% MSH2 2 12,8% MSH6 1 6,3%

INESPECÍFICO 1 0,2%

Otros (epimutacion germinal promotor MLH1 1 6,3% Síndrome de Lynch N = 8

Incidencia S de L en “CCRi” 8/417 1,9%

Angel M. Alonso Sánchez. COMPLEJO HOSPITALARIO DE NAVARRA SERVICIO NAVARRO DE SALUD

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Nuevos CCR recibidosN 525

tado

sta

dos

N= 525

IMS=417

CI=172

Res

ult

Res

ult

88,8 % IMS-E o LN= 370

11,2% IMS-HN= 47

RR

Patrón “MSH2” Patrón “MLH1”

IHQ = 47(471 IHQ CCR realizadas)

Patrón “MSH6”“Normal” PatrónPatrón MSH2N = 6 (13%)

Patrón MLH1N= 34 (72%)

Patrón MSH6N = 2 (6%)

NormalN = 3 (6%)

WT & no MetiladoN= 3 (100%)

BRAF/Metilación

WT & no MetiladoN= 10 (29%)

BRAF/Metilación

Patrón”Inespecífico”N = 2 (4%)

WT & no MetiladoN= 0 (100%)( )

Mutaciones MSH2/MSH6

No mutaciónN 3

Mutaciones MLH1No mutación

Mutaciones MSH2/MSH6

Mutaciones MLH1,MSH2& MSH6

N=3

No mutaciónN=1

Mutación

En proceso 1No mutación

N=3

Mutación MLH1 N=4

En proceso 3

No mutaciónN=2

Mutación MSH2 N=2

En proceso 1

5

Mutación MSH6 N=1

8 FAMILIAS CON SINDROME DE LYNCH41 portadores de Sd. de Lynch

ResultadosResultados

Rendimiento Rendimiento

“Criterios Clinicos” (N=30)

“CCRi” (N=8)

Tiempo de CCR a diagnostico de S de L (meses) 23 3Tiempo de CCR a diagnostico de S de L en familiares (meses) 27 5Casos con diagnóstico S de L antes de la cirugía  % 6,60% 50%Casos con diagnóstico MSI antes de la Qt % 5% 100%Banco DNA tumor 23% 100%

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ResultadosResultados

Coste económicoCoste económico

Serie "CCRi"Serie "Criterios Clínicos"Procesos Clínicos Nº Procesos Coste Nº Procesos Coste

Nuevas consultas 743 21Consulta y revisión antecedentes (horas) 150 € 928,75 139.313 € 26,25 3.938 €

Total Clinica 139.313 € 3.938 €

Serie  CCRiSerie  Criterios Clínicos

Procesos de LaboratorioMuestras tumorales 371,5 417MSI analysis  50 € 184 9.200 € 417 20.850 €IHC 75 € 312 23.400 € 47 3.525 €BRAF 75 € n/d 39 2 925 €BRAF 75 € n/d 39 2.925 €Metilation 100 € n/d 39 3.900 €Estudio mutaciones (pacientes) 57 19Estudio mutaciones (genes) 500 € 97 48.500 € 30 15.000 €

Total laboratorio 81.100 € 46.200 €

220.413 € 50.138 €30 8

7.347 € 6.267 €COSTE POR MUTACIÓN IDENTIFICADA

Mutaciones idenitificadas

Angel M. Alonso Sánchez. COMPLEJO HOSPITALARIO DE NAVARRA SERVICIO NAVARRO DE SALUD

EFECTIVIDAD DE LA IDENTIFICACIÓN DE SD LYNCH MEDIANTE FILTRADO MOLECULAR DEL CÁNCER COLORRECTAL INCIDENTE 7

ConclusionesConclusiones

• El estudio de todos los nuevos casos de CCR en una comunidad,mediante una batería de pruebas moleculares yp yanatomopatológicas, es un método eficaz de identificación delSíndrome de Lynch.

• Comparativamente con el esquema tradicional que depende decriterios clínicos, es más sensible, rápido y económico.

• Prospectivamente, su empleo durante un periodo de 3 años va apermitir diagnosticar un alto número de familias con SL,semejante al identificado mediante nuestro esquema tradicionalde identificación de 15 años de evoluciónde identificación de 15 años de evolución.

Angel M. Alonso Sánchez. COMPLEJO HOSPITALARIO DE NAVARRA SERVICIO NAVARRO DE SALUD

INMUNOHISTOQUÍMICA  PROTEÍNAS REPARADORAS EN ENDOMETRIO DE PORTADORAS DE SÍNDROME DE LYNCH  8