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El crustáceo anacostraco Thamnocephalus platyurus es más susceptible que Artemia
salina (Crustacea: Anacostraca) en bioensayos de letalidad con
extractos vegetales
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Karen Rebeca PÉREZ CIFUENTES;
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, USAC
Pablo MAYORGA SAGASTUME
Servicios y Productos Ambientales (SEPRA)
Guatemala
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Bioensayos con Artemia salina
• Usados desde hace décadas
• Bioensayo rutinario a nivel mundial para medir actividad biológica de extractos vegetales potencialmente medicinales (tamizaje)
¿Hay otras opciones?
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Objetivo
• Comparar la susceptibilidad de Thamnocephalus platyurus (crustáceo anacostraco de agua dulce) con la de Artemia salina (crustáceo anacostraco marino) en bioensayos de letalidad con 10 extractos vegetales y 5 fármacos
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Metodología
• Los bioensayos:– Thamnotoxkit F, con el crustáceo anacostraco
de agua dulce Thamnocephalus platyurus
– Artoxkit M, con el crustáceo anacostraco marino Artemia salina
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Thamnotoxkit F
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Artoxkit M
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Metodología
• 5 extractos (etanólicos) vegetales con actividad anti-Artemia conocida:– Solanum americanum (hojas)– Ocimum micranthum (aceite)– Petiveria alliacea (raíz)– Gliciridia sepium (corteza)– Neurolaena lobata (hoja)
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Metodología
• 5 extractos sin actividad anti-Artemia conocida:– Curatella americana (hoja)– Rhizophora mangle (corteza)– Prunus barbata (hoja)– Quercus crispifolia (hoja)– Smilax domingensis (rizoma)
Proporcionados por el Laboratorio de Citohistología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, USAC
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Metodología
• 5 fármacos:– Furosemida– Amoxicilina– Cefadroxilo– Secnidazol– Acetaminofén
Proporcionados por laboratorios farmacéuticos locales
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Metodología
• Extracto concentrado redisuelto con etanol o DMSO + aguas estándar:– agua de mar (ARC-test)
– agua dulce moderadamente dura (USEPA)
• Toxkits: Procedimientos Estándar Operacionales– Eclosión: medio preaereado, caja Petri
9 cm, 25º C, 3000-4000 lux, 20-22 h
– 5 diluciones y un control en placa multipozos
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O O O O O OO O O O O O O O O O O O O O O O O O
control C5 C4 C3 C1C2
ENJUAGUE<------------
•enjuague: 50 organismos / concentración•10 organismos en cada pozo
diluido concentrado
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Metodología
• Incubación– 25º C, oscuridad
• T. platyurus: 24h
• A. salina: 48h
• Cálculo de CL50– método USEPA/600/4-85/013, 1985
• manual y computarizado
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Resultados
CL50 de extractos vegetales con actividad anti-Artemia conocida
0
100
200
300
400
500
600
Sa Om Pa Gs Nl
CL
50 (
pp
m)
As 24hAs 48hTp 24h
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Resultados
CL50 de extractos vegetales sin actividad anti-Artemia conocida
0
50
100
150
200
250
300
350
Ca Rm Pb Qc Sd
CL
50 (
pp
m)
As 24hAs 48hTp 24h
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Resultados
CL50 de fármacos
0
100
200
300
400
500
600
Furo Amoxi Cefa Secni Aceta
CL
50 (
pp
m)
As 24hAs 48hTp 24h
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Conclusión
• Thamnocephalus platyurus es más susceptible que Artemia salina a extractos vegetales
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Recomendaciones• Estudios más extensos con T. platyurus y A.
salina• Estudios con otros Toxkits (protozoos,
algas verdes unicelulares, rotíferos y otros crustáceos)
• Bioensayos con organismos patógenos con extractos sin actividad anti-Artemia conocida letales a T. platyurus
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•Estos son resultados parciales de la tesis de Licenciatura en Química Farmacéutica de Karen R. Pérez C.
•Financiamiento: K. Pérez SEPRA Microbiotests, Inc.
(Deinze, Bélgica)
•Agradecimientos: Dra. Ana Lucía ValleDr. Armando Cáceres
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www.sepra-gt.com
info@ sepra-gt.com