7/25/2019 El Reloj de Macrfagos Regula El Tiempo de Respuesta a Citosinas

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El reloj de macrfagos regula el tiempo de respuesta a citosinas.

En esta parte del estudio, se realizaron pruebas con macrfagos y la expresin

de sus diferentes genes del reloj circadiano y de citosinas frente a la reaccin

con el LPS. Los resultados fueron plasmados en diferentes grcas ue

permiten explicar ue el reloj de macrfagos tiene un profundo efecto

modulante en las c!lulas estudiadas en "i"o y en la acti"acin sist!mica de la

inmunidad innata in "i"o.

#rcas S$ % y &'

Las grcas A y Bdemuestran ue los ratones mostraron patrones normales

de comportamiento circardiano, en su comportamiento normal y en el n(cleo

suprauiasmtico )S*+ esto se debe a ue en el experimento se usaron

ratones modicados gen!ticamente, en su reloj de macrfagos y no en general,

es decir las oscilaciones y cambios ue se obser"ar-an no ser-an a ni"el del

n(cleo suprauiasmtico sino a ni"el celular, en especial, de macrfagos. %, es

un actograma, compara los ratones ue tienen bmal alterado, con wt, los

ratones normales, al comparar ambas grcas, se nota ue son iguales. Bes

una grca ue e"al(a oscilaciones de bioluminiscencia en el S*+, las

oscilaciones son de alrededor de $ /oras, esto es normal para el ciclo

circadiano. C, es una grca electrofor!tica ue muestra ue bmal /a sidoescindida de los ratones modicados, es decir es una comprobacin de ue /an

sido alterados los ratones en realidad.

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0iguras $1%, $1& y $1*

2esulta ue al examinar un exudado de c!lulas peritoneales )/a sido el m!todo

ue se /a lle"ado a cabo para estudiar la expresin de los distintos

componentes moleculares en estudio dentro de las c!lulas del sistema inmune

de los ratones WT, o sea, normales, se e"idencia oscilaciones circadianas

pronunciadas, ue al compararlas con los ratones con Bmalalterado no las /ay.

En la grca 2-B obser"amos ue los ratones modicados gen!ticamente

carecen de Bmal. *on respecto a las oscilaciones, esto se "e en la grca 2-A,

se "e una cur"a de bioluminiscencia por tiempo, numerosas ondas de color

ms oscuro representan WT, en cambio la l-nea ms gris, el ratn modicado.%/ora bien, la eliminacin, alteracin de bmal caus la expresin no r-tmica de

per2, cry1 y dbp y suprimi los transcriptos para rev-erb alfay rev-erb beta,

esto es e"idenciado en la grca 2-C, las cur"as son prcticamente lineales si

se les compara con el modelo WT.

Para conrmar ue las c!lulas mostraban este patrn in "i"o, se usaron PECs

)exudados de c!lulas peritoneales recolectados de ratones "-rgenes

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modicados gen!ticamente y WTcontrol, los cuales fueron comparados en los

tiempos circardianos 3$ y 4, )*54, *53$. El resultado, e"idenciado en la

grca S2-D fue ue los PE* de los ratones control mostraban grandes

oscilaciones en el d-a de la expresin de mRNAde dbp, cry1, per2, bmal1, rev-

erba, rev-erbb, en contraste, auellos pro"enientes de ratones modicados

gen!ticamente no.

#rca S$16'

7n "i"o, le fue suministrado a los ratones modicados y WT, P!y fue e"aluada

la expresin de las citosinas "-#, CC$, "-12 a CT% y CT12. 8na respuesta

circadiana, esperable, con una magnitud acorde al reloj no fue obser"ada en

los ratones modicados, indicando una p!rdida del mecanismo regulador

circadiano, de igual manera, esto fue obser"ado en PE* de los ratones

estudiados, /ay picos y decli"es notables de expresin de la citosina en eltiempo, ue son normales en los 95 pero no aparecen en los ratones

modicados. %bajo guras 2-D, S2-A, S2-By la gura 2E corresponden con lo

descrito en este prrafo.

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