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ELISA 

SANDWICH(ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT

 A SSAY)(ENSAYO DE INMUNOABSORCIÓN

LIGADO A ENZIMA )

MARTHA ISABEL DELGADO CORDOBA 

JOHAN ANDRES AMAYA ROMERO

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1959 Yalowy Berson, precursor de los

ensayos inmunoenzimáticos que fueron

descritos originalmente en 1971 por Engvall y

Perlmann, y Van Wemeny y Schuurs.

Se llama Elisa en sándwich porque el

antígeno queda en medio de anticuerpos.

La prueba de Elisa es una prueba de rastreo,

es la primera que debemos descartar frente a

la presencia de un agente infeccioso

HISTORIA 

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ELEMENTOS PARA LLEVAR A CABO

LA PRUEBA 

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PRIMER PASO Se coloca en un vaso con inmunoglobulina

La prueba se realiza en un laboratorio

certificado.

Los anticuerpos están en fase solida El anticuerpo debe tener memoria contra el

antígeno especifico

 ANTICUERPOS

MONOCLONALES

BIEN RECUBIERTOS

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Se agregará el suero que contenga el antígeno (o

no) que se quiera investigar. Si el antígeno está

presente se unirá al anticuerpo propio para él queestá anclado en la fase sólida.

De media hora a 1 hora el anticuerpo

interacciona con el antígeno (periodo deincubación)

SEGUNDO PASO

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Los anticuerpos específicos se unen a los

antígenos para los cuales están destinados, esto

permite ser precisos y seleccionar el antígeno o

anticuerpo que se está buscando. Pues, quedará

anclado al que se encuentre en la fase sólida.

El antígeno se

une al anticuerpo

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TERCER PASO Posteriormente se lava, pero los anticuerpos al estar fijos

no se quitan. Solo se elimina el suero y los otros

componentes.

Los anticuerpos específicos se unen a los antígenos para loscuales están destinados, esto permite ser precisos y

seleccionar el antígeno o anticuerpo que se está buscando.

Pues, quedará anclado al que se encuentre en la fase sólida.

Un segundo anticuerpo monoclonal,

se vincula a la enzima y se une

al antígeno inmovilizado

 

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CUARTO PASO Por lo tanto, si el antígeno estaba presente se

habría unido primeramente al anticuerpo fijado,

posteriormente otro anticuerpo contra ese

antígeno se uniría a él, se agrega el sustrato con

lo cual, la generación de color indica que el

antígeno sí está presente

Se añade el sustrato

y se convierte por las enzimas

en el producto de color,

la tasa de formación

de color es proporcional

a la cantidad de antígeno

 

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Si no hay presencia del agente infeccioso no voy a

ver color

Cuando hay color se demuestra la presencia del

agente infeccioso

La muestra debe ir por triplicado, se monta 3

veces.

La muestra debe ser igual en los 3 lados en la

microplaca

Los resultados deben ser iguales en ambos lados

Si da positivo en un extremo y negativo en otro la

prueba esta mala y debe repetirse la prueba

 

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RESUMEN DE LOS

PASOS

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