Equine embryo transfer and other techniques

Dr Jose LenDiplomate American College of Theriogenology

Hahndorf, South AustraliaJune 4, 2016

Applications

• Increased numbers of foals from selected mares • Foals from mares that are in training or competition • Foals from mares that are unable to foal because of reproductive or non‐reproductive problems 

• Investigation of embryo‐maternal interactions 

www.laestrella.com.pa

Recipient mares selection

• 2 – 3 per donor mare • Age: 3 – 12 years• Sound mare

• Free of disease• Free of musculoskeletal problems• Reproductively sound

• Breeding soundness examination• Good cervical and uterine tone

• Easy to handle

• Hire a recipient mare

Mare synchronization

• Donor synchronized with recipients

• Synchronization protocols• Prostaglandins (two injections 14 days apart)• Progesterone + estrogen

Donor OV

0

Recipient OV

+4 +8‐1

Breeding management

• Donor and recipients• Uterine oedema• Follicular development

• ≥ 35 mm• Inseminate donor

• Fresh• Fresh cooled• Frozen

• Induce ovulation in all mares

Breeding management

• Post‐breeding• Donor

• Fluid?• Treat

• Recipients• Fluid?• Consider removing• Ovulation• Cervical tone• Uterine tone

Embryo flush

• 7 – 9 days after donor mare ovulates• Embryo recovery: 50%

www.foxvalleyequine.com

Embryo transfer

• Non‐surgical• Fresh• Fresh cooled for 24 h

• Good quality embryos• 70 – 75% pregnancy at day 15• 65% pregnancy at day 50

Recipient management post embryo transfer

• Progesterone supplementation• Controversial immediately post‐transfer• Indicated if signs of low progesterone in subsequent examinations

• Antibiotics• May be indicated until first examination post‐transfer

• Examinations• Day 11 post‐OV (donor)• Day 15• Day 20• Day 25• Day 35

Donor mare management post‐flush

• Prostaglandin after flush• Re‐examine mare the day after flush

• If fluid present• Uterine lavage

• Re‐examine few days later• If fluid still present

• Endometritis??

Other assisted reproductive teachnique(ART’s)• Deep horn insemination

• Insemination of low number of sperm

Why low dose insemination?

• Drastically reduce the insemination dose• Sex sorted semen• Improve fertility of frozen semen• Improve fertility of subfertile stallions

Comparison of low dose insemination

Hysteroscopic‐guidedDose 

• 0.001 – 10 x 106 PMS Volume 

• 20 – 500 μL Pregnancy rates 

• 10 to 75% Cost $$$$ 

Ultrasound‐guided Dose 

• 5 ‐ 25 x 106 PMS Volume 

• 200 ‐ 1000 μL Pregnancy rates 

• 0 to 50% Cost $

Morris LHA, Allen WR. An overview of low dose insemination in the mare. Reprod Dom Anim, 2002;37:206‐210. 

Other assisted reproductive techniques (ART’s)• Oocyte transfer

• Infertile mares after breeding and/or embryo transfer• Damage to oviducts and endometrium• Ovulatory failure

• Oocyte from donor mare recovered• Transvaginal ultrasound guided aspiration

www.weatherfordequine.com

Other ART’s

• Oocyte transfer• Oocyte transfer into recipient mare • Recipient mare inseminated before transfer• Pregnancy rates

• Old mares: 30 – 40%• Young mares: 50 – 80% (Carnevale et al., 2004)

• Gamete intrafallopian transfer (GIFT)• Same as oocyte transfer• Small number of sperm inseminated into oviduct• Pregnancy rate: 27 – 82% (Carnevale et al., 2004)

Other ART’s

• Intracytoplasmic sperm injection (ICSI)• Production of multiple embryos from a mare• Salvage of mares genetic in case of sudden death• Sub‐fertile and infertile stallionsPre‐ovulatory or immature oocyte In vitromaturation

Other ART’s

• ICSI• Injection with one sperm• Culture for 7 – 8 days• Embryo transfer into recipient mare

• Embryos per collection: 0.4 – 1.3• Pregnancy: 60 – 65%