ESTERILIZACION

TERMINOLOGIA- SEPTICO PRESENCIA DE GERMENES PATOGENOS.- ASEPSIA AUSENCIA DE GERMENES PATOGENOS.- ANTISEPSIA LUCHA CONTRA GERMENES PATOGENOS.- INFECCION PROLIFERACION DE GERMENES PATOGENOS Y RESPUESTA ORGANICA.- DESINFECCION MATAR Ó INACTIVAR GERMENES.- LIMPIO SIN SUSTANCIAS VISIBLES.

- ESTERIL AUSENCIA DE TODA CLASE DE GERMENES.- CONTAMINACION TRASLADO DE GERMENES PATOGENOS.

TERMINOLOGIA- SEPTICO PRESENCIA DE GERMENES PATOGENOS.- ASEPSIA AUSENCIA DE GERMENES PATOGENOS.- ANTISEPSIA LUCHA CONTRA GERMENES PATOGENOS.- INFECCION PROLIFERACION DE GERMENES PATOGENOS Y RESPUESTA ORGANICA.- DESINFECCION MATAR Ó INACTIVAR GERMENES.- LIMPIO SIN SUSTANCIAS VISIBLES.

- ESTERIL AUSENCIA DE TODA CLASE DE GERMENES.- CONTAMINACION TRASLADO DE GERMENES PATOGENOS.

ESTERILIZACIÓN

Es el exterminio de toda forma viva de un medio o material y para realizarlo utilizaremos métodos físicos o químicos.

ESTERILIZACION MÉTODOS• FÍSICOS: – CALOR SECO. – CALOR HÚMEDO. – FILTRACIÓN. – RADIACIONES.

• QUÍMICOS: – ANTISÉPTICOS. – DESINFECTANTES. – CONSERVANTES.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

CALOR • SECO DIRECTO: LLAMA• SECO INDIRECTO: CALIENTE (HORNO O ESTUFA)• HÚMEDO SIN PRESIÓN: EBULLICIÓN, BAÑO MARÍA, TINDALIZACIÓN, VAPOR FLUENTE.• HÚMEDO CON PRESIÓN: AUTOCLAVE.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

CALOR • Es el método más efectivo de esterilización.• Básicamente actúa por coagulación proteica. Éste fenómeno se produce después de originarse interrupciones en la cadena de DNA, ruptura de uniones disulfuro, desnaturalización proteica, alteraciones de la membrana celular, efectos tóxicos por concentración elevada de electrolitos, etc. . Aplicación: Esterilización de material de laboratorio, medios de

cultivo, material quirúrgico, sustancias biológicas varias, etc.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

CALOR• PUNTO TÉRMICO LETAL: es la temperatura más baja que mata la población microbiana en diez minutos.• TIEMPO TÉRMICO LETAL: es el menor tiempo necesario para que muera el 100% de las bacterias, bajo condiciones y temperatura adecuadas.• REDUCCIÓN DECIMAL DE TIEMPO: es una modificación del punto anterior, son los minutos necesarios para matar el 90% de las bacterias.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

PENETRACIÓN DEL CALOR• CALOR SECO: Secado paulatino por capas de afuera hacia adentro. La penetración es lenta por la sequedad de las capas más externas. Temperaturas y tiempos: de 150 a 180 ºC por 1 a 3 h.

• CALOR HÚMEDO: Penetración rápida permitida por la humectación de las capas más externas, lo que favorece una transmisión más veloz del calor. Temperatura y tiempo: 120 º C por 20 minutos.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓNFÍSICOS

• Calor húmedo: Ebullición, tindalización, pasterización y vapor a presión (autoclave).Ventajas:

- Rapidez. - Destrucción de bacterias y

esporas. - No residuos tóxicos. - Deterioro mínimo del material. - Económico.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

• Inconvenientes:

–Es corrosivo con ciertos instrumentos metálicos.

– No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua.

– No ciertos plásticos.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

• Ebullición:

Es la aplicación del calor. Se sumergen los objetos a esterilizar en agua hirviendo a presión atmosférica un mínimo de 25 minutos; no destruye las esporas.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

• Tindalización:- Proceso de esterilización por

medio de calor indirecto (baño maría aplicado en forma discontinua).

- Ideal para esterilizar sustancias que se afectan por altas temperaturas (leche, zumos etc.).

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

- Tindalización:- TEMPERATURA: 56 a 60 º C por 60 minutos.- PRIMER CALENTAMIENTO: mueren las formas vegetativas. Mantener en estufa por 24 h. para

inducir el pasaje de las esporas a formas vegetativas.

- SEGUNDO CALENTAMIENTO: mueren las nuevas formas vegetativas. Mantener en estufa por 24 h. para inducir el paso de alguna espora rezagada a forma vegetativa.

- TERCER CALENTAMIENTO: elimina las formas vegetativas formadas en último término.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

• Pasteurización:(Para alimentos). - No se trata de un proceso de esterilización

pues únicamente mata las formas bacterianas vegetativas. Se la considera un proceso de higienización.

- Pasteurización baja: 62 º C por 30 minutos.- Pasteurización alta: 72 º C por 15 segundos.

- Pasteurización ultra alta: 100 º C por 2 segundos.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

- Tapa- Manómetro- Espita- Válvula de seguridad- Corona de ganchos de- Cierre.- Burlete de caucho para cierre hermético.- Carcasa- Rejilla o plancha cribada (apoyo y separación del material con el agua)

Autoclave:

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

Autoclave:

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

CHOQUE CONTRAEL OBJETO FRÍO

CICLO DEL AUTOCLAVE

LIBERACIÓN DE CALORCONDENSACIÓN

RETRACCIÓN DEL VOLUMEN

VAPOR SATURADODE HUMEDAD

AGUA

RETORNO DE AGUAAL SISTEMA

VACÍO

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

ETAPAS DEL CICLO

• CALENTAMIENTO: la temperatura va de 20 a 121 ºC. Tiempo: 20 minutos.

• PENETRACIÓN: la temperatura se mantiene en 121 ºC. Tiempo: 20 minutos.

• ALOJAMIENTO O DE MUERTE: la temperatura se mantiene en 121 ºC. Tiempo: 10 minutos.

• ENFRIAMIENTO: la temperatura desciende lentamente de 121 ºC a 60 ºC. Tiempo: 40 minutos.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

CONTROLES O TESTIGOS

• FÍSICOS: tiras de papel que cambian su color con el calor.

• QUÍMICOS: cristales de urea o ácido benzoico que se funden al calentar.

• BIOLÓGICOS: esporas de Bacillus.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

FILTRACIÓN• Este método se emplea para esterilizar líquidos.• No produce elevación de la temperatura, por lo

cual es el sistema indicado para tratar sustancias que se degradan con el calor.

• Inconveniente: Tratamiento de larga duración, sobre todo

cuando hay que filtrar repetidas veces con filtros clarificantes antes de emplear los filtros esterilizantes.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

FILTRACIÓN

• FILTROS

- DE SUPERFICIE

- DE PROFUNDIDAD

• MÉTODOS

- POR PRESIÓN POSITIVA

- POR PRESIÓN NEGATIVA

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

FILTROS DE PROFUNDIDAD

• INTERCEPCIÓN DIRECTA O TAMIZ: Las bacterias quedan retenidas por tener mayor tamaño que los poros del filtro.

• INTERCEPCIÓN O IMPACTO INERCIAL: Las bacterias son partículas que poseen masa y velocidad. Por inercia, se desvían del flujo líquido e impactan contra el filtro.

• INTERCEPCIÓN POR DIFUSIÓN (MOV. BROWNIANO):Las partículas muy pequeñas chocan con las moléculasdel fluido y se desvían del curso de la vena líquida,chocando con el filtro y quedando retenidas en él.

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

RADIACIONES IONIZANTES• Son radiaciones electromagnéticas de alta energía. Desplazan electrones fuera de las moléculas y los

ionizan. Producen daño intracelular por liberación de H,

radicales OH y peróxidos. RAYOS α, β, γ y δ.• RAYOS X (buena acción bactericida pero de producción

muy costosa).

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN FÍSICOS

RADIACIONES NO IONIZANTES• RAYOS ULTRAVIOLETAS (UV)

Son radiaciones de 150 a 3900 Å. Las de mayor poder bactericida son las de 2650 Å.

Inhibe la replicación del DNA.• RAYOS INFRARROJOS (IR)

No produce grandes alteraciones en microorganismos ni en sustancias.

• RADIACIONES ACTÍNICAS

ESTERILIZACION

BIBLIOGRAFÍA• Stanchi N.O., Martino P.E., Gentilini E., Reinoso E.H.,

Echeverría• M.G., Leardini N.A., Copes J.A. - “Microbiología

Veterinaria” - Ed. Intermédica, Buenos Aires, 2007.-• Cátedra de Microbiología Aplicada - “Guías de Trabajos

Prácticos” - Facultad de Cs. Veterinarias UNLP – 1984.-• Tunes M. del L. - “Guías de Trabajos prácticos de

Microbiología” - Editorial de la UNLP - 1981.-