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EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS
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EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS
• Enovelamento natural e assistido (Chaperonas e HSPs)
•Ubiquitinação e degradação via proteassomo de proteínas não enoveladas
•Endereçamento (peptídeo sinal e glicosilação)
•Digestão de pró-proteínas
•Hidroxilação
•Fosforilação
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O Paradoxo de Levinthal (1968)
• Uma proteína não pode experimentar todas as possíveis conformações
entre o estado desenovelado e o estado nativo.
• Imagine uma proteína com 150 aa que experimentam apenas as 3
conformações previstas no plote de Ramachandran. Cada conformação se
interconverteria na outra em picoseg (10-12s). Essa proteína, então, possuiria
3150 possíveis conformações (= 1068). Para experimentar todas essas
conformações seriam necessários
1068 x 10-12 seg = 1056 seg = 1048 anos !!!
• O enovelamento demora de 0.1 a 1000 seg in vivo e in vitro.
• O enovelamento é, portanto, dirigido passando por rotas cinéticas e
intermediários bem definidos escapando de conformações irrelevantes.
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Gráfico de Ramachandran
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Os três mecanismos clássicos de enovelamento
A. Fersht and V. Daggett, 2002, Cell
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Enovelamento co-Traducional
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Opções de Enovelamento
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Chaperoninas (HSP60): Caixa de Enovelamento
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HSP70ligação à áreas hidrofóbicas
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Caminhos de Enovelamento
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Degradação de Proteínas não EnoveladasUbiquitinação
Created by Roger B. Dodd
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Degradação de Proteínas não EnolveladasProteassomo
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Endereçamento e Peptídeo Sinal (eucariotos)
Via secretora
•CIT → RE H2N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-Gly-Ile-Leu-Phe-Trp-
Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-Gln-Leu-Thr-Lys-Cys-Glu-Val-Phe-Gln-Protein
•Golgi → RE Protein -Lys-Asp-Glu-Leu-COOH
Via Celular
•CIT → Nucleo H2N-(...)-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-Protein
•CIT → MIT H2N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-Phe-Phe-Lys-Pro-Ala-Thr-
Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg-Tyr-Leu-Leu-Protein
•CIT → Perox Protein -Ser-Lys-Leu-COOH
•CIT → Perox H2N-(...)-Arg-Leu-X5-His-Leu-Protein
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Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória – Retículo endoplasmático
As proteínas da via secretória
possuem uma sequência
sinal (peptídeo sinal) que
direciona os ribossomos que
as estão sintetizando para a
membrana do retículo
endoplasmático
Endereçamento de proteínas
sintetizadas em ribossomos
aderidos ao retículo
endoplasmático
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Endereçamento de ProteínasVia secretória –> Retículo endoplasmático
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Endereçamento de ProteínasVia secretória : Proteínas de Membrana
Proteína unipasso
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Endereçamento de ProteínasVia secretória : Proteínas de Membrana
Proteína multipasso
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Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória : 1ª destino : Proteínas do RE
Toda as proteínas residentes no
reticulo endoplasmático
possuem na região C-terminal uma
sequência sinal extra denominada KDEL(LYS-ASP-GLU-LEU).
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Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória : outros destinos
- reencaminhadas para o retículo endoplasmático (sinal extra KDEL)- retidas no Complexo de Golgi (sinal extra desconhecido)- enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato)- encaminhadas para vesículas de secreção (sinal extra desconhecido)- encaminhadas para membrana plasmática ou meio extracelular (SEM SINAL extra)
No Complexo de Golgi, as proteínas podem ser:
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Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória : Glicosilação no RE
- Após Golgi => Enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato)
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Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via celular – Citosol e organelas
Núcleo Peroxissomo
Cloroplasto
Mitocôndria
Ribossomos livresno citoplasma
Proteínacitosólicamadura
Proteínas citosólicas não possuem nenhum tipo de sinal de endereçamento
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Endereçamento de Proteínas em Eucariotos
Complexo de Golgi
Retículo endoplasmático
Membrana citoplasmáticoSuperfície celular
(secretada) LisossomosNúcleo Peroxissomo
Cloroplasto
Mitocôndria
Proteínacitosólicamadura
VIA SECRETORA
1) Ribossomos aderidos ao RE
2) Ribossomoslivres
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Endereçamento de Proteínas em Procariotos
Poteínas da membrana e espaço intermembranar são sintetizadas em ribossomos aderidos à membrana
- Citoplasma: sem sinal
- Membrana plasmática ou espaço intermembranar: com sinal
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Ativação Proteolítica de ProteínasDigestão da Insulina
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Hidroxilação de ProteínasExemplo do Colágeno
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Fosforilação de Proteínas
Enzimas responsáveis pela adição de um grupamento fosfato em radicais Ser, Thr e
Tyr de proteínas.
Proteína Proteína
PO4
-3
PO4
-3
Kinases
Fosfatases
ATP
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Fosforilação de ProteínasExemplo das Lipases