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フローサイトメトリーソリューション Discover MACSQuant® Best in class

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Page 1: フローサイトメトリーソリューション Discover …...MACSQuant® Analyzer 10 - シンプルで柔軟 超小型・高性能なフローサイトメーター 4 Figure2:オートラベリング機能やMACS抗体のバーコードによる認識機能などが実験を

フローサイトメトリーソリューション

Discover MACSQuant®

Best in class

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MACSQuant® - いつも実験の中心に スムーズな実験を実現するミルテニーバイオテク社の製品群

macsquant.com

細胞の絶対数測定

精密性、再現性、正確性 の高い測定 p.6

リアルタイム遠隔サポート

ボタンを押すだけで 簡単アクセス p.10

MACSQuant Analyzer 10 - シンプルで柔軟

高性能なフローサイトメーター p.4

MACSモレキュラー解析

MultiMACSTM Separator を用いた分子生物学的解析u multimacs.com

MACSサンプル調製

gentleMACSTM Dissociator を用いて迅速・簡単に単細胞懸 濁液調製u gentlemacs.com

試薬、キット、ソフトウェア

研究を充実させる多様な 製品群 p.9

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MACSQuant® - いつも実験の中心に スムーズな実験を実現するミルテニーバイオテク社の製品群

MACSQuant VYB - 蛍光タンパク質の検出

より質の高い研究のために p.5

希少細胞解析

信頼のMACSテクノロジーによる 迅速な解析 p.7

自動ラベリング・サンプリング

一度に最大96サンプルまで 処理可能 p.8

MACS細胞分離

autoMACS® Pro Separator を用いた自動細胞分離の標準的 な手法  u automacspro.com

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MACSQuant® Analyzer 10 - シンプルで柔軟 超小型・高性能なフローサイトメーター

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Figure2:オートラベリング機能やMACS抗体のバーコードによる認識機能などが実験をよりスムーズにします。

Figure1:MACSQuant® Analyzer 10 はクリーンベンチのような、限られた空間にも セットアップ可能です。

Figure3:光るボトルラックは機器の状態を示します。離れたところからも簡単に状態の確認が出来ます。

コンパクトボディーに集約された 革新的な技術

MACSQuant® Analyzer10は、分子相互作用、薬物動態学、システムバイオロジー、海洋生物学、および生物物理学などさまざまな分野の研究者にとって最適のフローサイトメトリー解析を実現します。

傑出した利便性- 使いやすさと高機能解析の融合

1サンプルでも96サンプルでも、実験のセットアップは簡単に行えます。

簡単操作 ・スタートアップから解析まで明快かつ簡単に実験が可能

・一度の操作で最大96サンプルまでを自動処理

・面倒なメンテナンス、キャリブレーション、コンペンセーションは全て自動化

パワフルパフォーマンス

・3レーザーを駆使し最大10パラメーターまでの解析が可能

・全血、細胞株、酵母などさまざまな細胞において、細胞周期、アポトーシス、細胞増殖解析といった表現型・機能解析を行うことが可能

弊社WEBサイト右上の検索ボックスに、下記の4文字を入力して、MACSQuant Analyzer 10の紹介ページをご覧ください。www.miltenyibiotec.co.jp

弊社WEBサイト右上の検索ボックスに、下記の4文字を入力して、細胞絶対数測定についてご覧ください。

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c c t qWEBCODE

弊社WEBサイト右上の検索ボックスに、下記の4文字を入力して、MACSQuant VYB紹介ページをご覧ください。www.miltenyibiotec.co.jp c c t rWEBCODE

WEBCODE

WEBCODE

c c t p

c c t p

弊社WEBサイト右上の検索ボックスに、下記の4文字を入力して、MACS抗体や、Vio® Dyes紹介ページをご覧ください。

www.miltenyibiotec.co.jp WEBCODE c c t z

Laser Channel Filter (nm) Dye or Parameter

Violet 405 nm V1V2

450/50 525/50

CFP, VioBlue® Pacific Orange™, VioGreenTM

Blue 488 nm B1B2B3

B4

525/50 585/40 655-730 750 LP

GFP, FITC, VioBrightTM FITC PEPI, PerCP, PE-Cy™ 5.5,PerCP-Vio700PE-Cy7, PE-Vio770TM

Red 638 nm R1R2

655-730 750 LP

APCAPC-Cy7, APC-Vio770TM

Blue 488 nm FSCSSC

488/10 488/10

SizeGranularity

Table1:MACSQuant Analyzer 10の光学システム。

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MACSQuant® VYB - 蛍光タンパク質の検出 より質の高い研究のために

研究の視野を広げるマルチカラー解析

MACSQuant® VYBはMACSQuant Analyzer10のパフォーマンス、自動処理システム、コンパクト設計、簡便性を引き継ぎ、さらに新しい光学レイアウトを採用しました。

蛍光タンパク質の検出に最適

561nmレーザーの搭載と8つの蛍光検出チャンネルによって、 MACSQuant® VYBは、さまざまな蛍光色素の使用を可能にしました。

・GFP、CFP、DsRedやmCherryなどの様々な“fruit蛍光タンパク質”を 一度に解析可能

・PEの検出感度の向上による、PEdim細胞集団の検出感度の増強

・FITC、PE-Cy5、APC、PE-Cy7など、一般的に使用される蛍光色素の検出に最適な光学系の設定

短時間で質の高い解析を実現

MACSQuant VYBは何色もの色素を同時に検出することで、複雑な多重染色解析を可能にします。より有意義なデータを短時間に取得できます。

Figure5:MACSQuant VYBは多様な蛍光タンパク質を検出することが出来ます。 CFP、GFP、YFP(上段)、mCherry、mKate2(下段)をCHO細胞に遺伝子導入し、遺伝子未導入のCHO細胞(紫色)と比較すると、高感度に検出できることがわかります。また、GFPとYFPは蛍光波長が近いためフローサイトメーターでの染め分けが困難でした。しかしMACSQuant VYBのPI検出チャンネルでは、YFP(黄色)とGFP(緑色)を明らかに区別することができます(右下)。そのため1つのサンプルで5つの蛍光タンパク質を検出することができます。

5

Figure4: MACSQuant VYBは561nmのレーザーを搭載しており、様々な蛍光タンパク質や一般的な蛍光色素など様々な蛍光色素の解析を行うことが出来ます。

mCherry mKate 2

CFP eGFP YFP

PI

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Laser Channel Filter (nm) Dye or Parameter

Violet 405 nm V1V2

450/50525/50

CFP, VioBlue Pacific Orange, GFP, YFP, VioGreenTM

Blue 488 nm B1B2

525/50614/50

GFP, FITC, YFP, VioBrightTM FITCPI, Lss-mKate, YFP

Yellow 561 nm Y1Y2Y3Y4

586/15615/20661/ 20750 LP

PEmCherry, DsRed, Texas Red®Pe-Cy5, APC, mKate PE-Cy7, PE-Vio770, APC-Vio770

Yellow 561 nm FSCSSC

561/10561/10

SizeGranularity

Table2:MACSQuant VYBの光学システム

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細胞の絶対数測定精密性、再現性、正確性の高い測定

正確な細胞数の測定を実現

各MACSQuantには、定量的なピペッティングなど自動的で正確なサンプル量の吸引を可能にする精密なシリンジポンプが搭載されています。これは、一般的なフローサイトメーターとは異なるいくつかの利点をもたらします。

・スピード :1分以内で細胞絶対数測定が可能

・経済的 :高価な細胞数測定用ビーズや粒子は必要なし

・簡単な操作 :ボタンを押すだけ 細胞数測定は全ての自動細胞解析プログラムにおいて可能

細胞カウントのABCa.サンプルをラックにセット 一度の操作で最大96サンプルまで処理可能です。

b.MACSQuantifyTMSoftwareにサンプル吸引量を指定する 正確なピペッティングを可能にするシステム制御されたシリンジポンプが 搭載されています。

c.スタートボタンを押す 結果が1分以内に表示されます。

Figure6:正確な細胞数測定により、染色や解析を効率的に行えます。

6

Figure7:細胞の絶対数測定は正確に、再現性高く行えます。細胞数測定用の標準ビーズをMACSQuantで測定し、ビーズメーカーのデータシートに記載されているビーズ濃度と比較しました。記載されている1 mLあたりのビーズ数を(A)に示し、MACSQuantでのビーズの測定結果の平均値(n=5、±SD)を(B)に示します。MACSQuantによる測定結果はデータシートの値と差は認められませんでした。

Figure8:MACSQuantによる正確な細胞の絶対数測定には、標準ビーズは必要ありません。細胞を連続希釈 (1、2、4、10、20倍 (Dilution factor: 1、0.5、0.25、0.1、0.05))しMACSQuantで測定しました。グラフはMACSQuantにより測定した各希釈倍率の細胞濃度を示しています。1 mLあたりの細胞数は直線上にプロットされました。

Cel

ls/m

L

Dilution factor

3,E+07

2,E+07

1,E+07

0.1 0.3 0.6 0.90.2 0.5 0.80.4 0.7 1

12.000

6.000

A B

Co

un

ts/m

L

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希少細胞の解析 信頼のMACSテクノロジーによる迅速な解析

短時間で希少細胞の解析

クオリティーや感度を損なうことなく希少細胞の解析を短時間に行えます。希少細胞解析の前に、MACSQuantカラムとMACSQuant Cell Enrichment Unitにより、簡単に細胞を濃縮することが出来ます。

MACSテクノロジーとフローサイトメトリーの融合細胞解析に先行した希少細胞の濃縮の利点。

・サンプル取り込み時間の大幅な短縮

・高感度な希少細胞解析

・大量または少量のバッファー中に懸濁された、 希少細胞サンプルの解析を容易にする

希少細胞解析のための試薬

キットや試薬の多くは、さまざまな細胞サブセットの効率的な同定および、解析に最適化されています。

・樹状細胞

・内皮前駆細胞

・癌幹細胞

・サイトカイン分泌細胞

・抗原特異的T細胞

・循環腫瘍細胞

Figure9:MACSQuantカラムにより、フローサイトメトリー解析に先行して、 すばやく希少細胞の濃縮を行えます。

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Figure10:MACSQuantに搭載された Cell Enrichment Unitにより、細胞解析直前に高感度な希少細胞濃縮を行えます。

Figure11:MACSQuantカラムとMACS MicroBeadsテクノロジーによる希少細胞解析のワークフロー

MicroBeadsと蛍光抗体でラベルする。

濃縮された細胞はフローセルに直接放出され、マルチパラメトリックなフローサイトメトリー解析を行う。

カスタマイズしたテンプレートまたはExpress Modeテンプレートを用いた自動解析。

Flow cell

Cells

Laser

MACSQuantカラムによる希少細胞の濃縮。

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自動ラベリング・自動サンプリングシンプルな操作で多検体同時処理

自動化で時間の有効活用が可能

MACSQuantは忙しい研究者のために設計されました。 他のさまざまな仕事を同時に取り組むために、自動で細胞を解析 できるよう開発されました。

自動染色によるスムーズな多検体処理サンプルの染色から吸引、さらにはデータ取り込みから解析まで、サンプル処理の完全自動化の利点をお試しください。

簡単な操作で多検体処理

1.バーコードリーダーで試薬情報を読み取る。 MACSQuantifyTM Softwareにより自動的に適した染色プロトコールが呼 び出され、ユーザーによるエラーを最少限にします。

2.試薬とサンプルをMACSMiniSamplerにセットする。 サンプルはMACS Chill Rackにより低温に保たれviabilityを維持します。

3.MACSQuantifySoftwareに希望の解析方法を入力し、 スタートボタンを押す。

一度の操作で最大96サンプルの処理が可能

・適正なインキュベーション時間と抗体濃度による完全サンプル自動染色 (例:PI、7AADおよび抗体の染色)

・プロセス全体が自動化されており、機器の側から離れても フローサイトメトリー解析が可能

シンプルな機器精度管理MACSQuantは日常的な精度管理手順を自動化しています。

自動キャリブレーションとコンペンセーション ・MACSQuant Calibration Beadsは、特にvoltageの自動セッティングの

ために開発され、高いパフォーマンスの維持に有用です。

・8×8マトリックスによる最大8色の自動コンペンセーションに、単染色細胞 またはコンペンセーション用ビーズを使用できます(Figure 13)。

自動化されたメンテナンス

・自動洗浄、スタートアップ、シャットダウン

・バッファー、試薬、廃液量のモニタリング

・タッチパネルで簡単に操作可能

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Figure13:ビーズまたは細胞を用いた自動コンペンセーションの結果です。MACSQuantの高度に自動化されたコンペンセーション機能により、時間の節約が可能です。

Figure12:MACS Chill 96 Rackは様々な形の96ウェルプレートに適しています。

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試薬、キット、ソフトウェア 研究を充実させる多様な製品群

試 薬

ミルテニーバイオテクはフローサイトメトリーのための総合的な製品を提供いたしております。最先端の細胞解析に最適なさまざまなキット、抗体、蛍光色素および機器をご用意いたしております。 すぐに使用できるキットやアイソタイプコントロール、そして弊社独自のユニークな抗体からスタンダードな抗体まで、ぜひご利用ください。

MACS 抗体

蛍光色素標識されたMACS抗体は、ヒト、マウス、ラットまたは霊長類の細胞の同定及び解析に非常に適しています。

・多様な分子に対する充実した抗体製品群・免疫細胞など様々な細胞の表現型解析に最適・様々な種類の蛍光色素でフレキシブルな解析

VioDyes – 多重染色のオプションに

Vio Dyesは、フローサイトメーターや、顕微鏡による細胞の解析のために開発された、ミルテニーバイオテク社オリジナル色素です。 Vio Dyesには、VioBlue®、VioGreen™、VioBright™FITC、PerCP-Vio700、PE-Vio770™、APC-Vio770™があります。 蛍光強度が強く、また蛍光補正を行いやすいのが特長で、多重染色解析に最適です。FITC、PE、PerCP、APCなど一般的な色素とVio Dyes標識抗体を組み合わせれば、より信頼性の高い高度な細胞解析が可能です。蛍光スペクトルなど、詳しい情報は、弊社WEBサイトをご覧ください。

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Figure14:MACSQuantとMACS Control CD19 B cell 抗体カクテル(ヒト)を 組み合わせた自動解析による、末梢血単核球の解析。

MACSQuantify Software - 直感的な操作で高度な解析を実現

MACSQuantify Softwareは、MACSQuantのユーザーインターフェースとしてだけでなく、個々のコンピューター上でのデータ解析にも使用可能な、直感的操作が行えるプログラムです。 日常的な解析や複雑な解析をタッチスクリーン上のメニューにより 簡単に行えます。

・自動コンペンセーション

・プリセットされたテンプレートにより、不慣れなユーザーでも複雑なゲーティングを可能にするExpress Mode

・FCSファイル形式でのデータエクスポートにより、他の解析ソフトも使用可能

MACS Control Antibody Cocktail で簡単に細胞解析

MACS Control Antibody Cocktail を用いれば、MACS細胞分離の効率や純度の評価は非常に簡単になります。これらのキットは、MACS Technology により分離された細胞を最適に染色するために、あらかじめタイトレーションをしたMACS抗体を含んでいます。染色手順は簡単かつ短時間であるため、フローサイトメトリー解析に最適です。カクテルになった抗体は、スムーズな細胞解析を実現します。この試薬とMACSQuant Express Mode を組み合わせることでワンクリック細胞解析が可能です。(Figure 14)

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VioBright™ FITCPE並みの蛍光強度を持つFITC 励起波長 488nm(Blueレーザー ) 、蛍光波長 522nm

APC-Vio770™APC-Cy™7の代替色素 励起波長 561/635nm(Yellow / Red レーザー ) 、 蛍光波長 775nm

PE-Vio770™PE-Cy™7の代替色素 励起波長 488/561nm(Blue / Yellowレーザー ) 、 蛍光波長 775nm

PerCP-Vio700PerCP-Cy™5.5の代替色素 励起波長 488nm(Blueレーザー ) 、蛍光波長 704nm

VioGreen™Pacific Orange™の代替色素 励起波長 405nm(Violetレーザー ) 、蛍光波長 520nm

VioBlue®Pacific Blue™の代替色素 励起波長 405nm(Violetレーザー ) 、蛍光波長 452nm

Table3:MACS抗体のオリジナル色素について ※( )内はMACS Quant のレーザー

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リアルタイム遠隔サポートいつでも、どこでも充実のサポート体制

MACSQuant Application Specialist にワンクリックで簡単アクセス

Live Support 機能により、ネットワークに接続したMACSQuantのユーザーは弊社のサポートチームにリアルタイムでアクセスできます。Live SupportサービスによりMACSQuant Application Specialistが直接対応することで、ご使用中のソフトウェアを確認し、また必要によっては遠隔操作により問題解決を試みます。 Live Support 機能は、世界中のお客様に1日24時間いつでもご使用いただけます*。

弊社Specialistは以下のようなお問い合わせにお答えします。

・MACSQuant使用中のトラブルシューティング

・MACSQuantおよびMACSQuantify Softwareの使用方法

・実験計画について

・プロトコールに関するトラブルシューティング

・必要に応じて実験に適したミルテニーバイオテク社製品の紹介

信頼のサポートチームによる的確な対応

ミルテニーバイオテクのサポートスタッフはライフサイエンスのバックグラウンドを持ち専門的なアドバイスが可能です。

サポートは様々な方法で受けられます。

・e-mailまたは電話:各国の窓口へお問い合わせください

・Live Supportサービス*

・オンライン相談フォーラム

・FAQリスト

・データシートやプロトコールのオンラインライブラリー

トレーニングセンター

個別トレーニングも実施いたします。

・各地域におけるミルテニーバイオテク社施設での丁寧なトレーニング

・オンラインマルチメディアプレゼンテーション

・弊社スペシャリストによるセミナーのライブ配信(Webinar)

* 使用言語:英語のみ対応。Live Support機能をご希望の場合はご相談ください。

10

Figure15:1日24時間、MACSQuant Application Specialistへのリアルタイムアクセスが可能です。細胞の解析や機器のオペレーションに関してのアドバイスを得られます。

Figure16:ミルテニーバイオテク社のトレーニングは弊社施設での対面式からオンライントレーニングまで様々な形式で行われています。

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機器仕様一覧

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MACSQuant® Analyzer 10 Table4 MACSQuant® VYB Table5

レーザー 405 nm, 488 nm, 638 nm

光学検出器 FSC, SSC及び8蛍光検出器

主な測定可能蛍光色素

Violet laser : VioBlue®, Hoechst dyes, Pacific Blue™, Pacific Orange™, VioGreen™

Blue laser : FITC, PE, PI, PE-Cy5.5, PE-Cy7, PerCP-Vio700™, VioBright FITC™,

Red laser : APC, APC-Cy7, APC-Vio770™

蛍光漏れこみ補正 8 × 8 マトリックス

測定速度最大 10,000 events / second

MACS® 細胞濃縮ユニット 磁気細胞分離技術を用いた希少細胞濃縮測定装置

細胞絶対数測定 精度+/- 5 %; 再現性 (CV) <5 %

蛍光表示スケール 5 decade logarithmic scales

蛍光感度及び分解能 MESFs: <200 FITC; <100 PE;<150 APC、CV: <5%

必要最小ボリューム 25 μL

システム管理 自動スタートアップ、洗浄、シャットダウン

多検体染色 最大4 種までのMACS 試薬の自動染色

多検体処理 1 本のチューブから96 well プレートまで対応の完全自動多検体処理

使用可能チューブタイプ エッペン、5mLチューブ、96wellプレート、サンプラーラック使用時 : 5 / 15 / 50mLチューブ

2次元バーコードリーダー 試薬情報入力および自動機器制御用 標準装備

サンプル吸引部 ロボティクスニードル(Y-Z 軸移動)自動洗浄 ステーションつき

シース液消費量 2 –10 mL / minute

オペレ-ティングシステム Microsoft® Windows® / MACSQuantify™

ポート 4× USB 2.0, 2× HDMI, VGA, LAN

モニター 12 インチタッチスクリーン

データファイル形式 MACSQuant Data (MQD), またはFlow Cytometry Standard (FCS) フォーマット(FCS3.0など)

消費電力 350 W 100 V

重量 50 kg

サイズ (W × D × H) 600 × 350 × 400 mm

レーザー 405 nm, 488 nm, 561 nm

光学検出器 FSC, SSC及び8蛍光検出器

主な測定可能蛍光色素

Violet laser : VioBlue®, Hoechst™, CFP, Pacific Orange™, GFP, YFP, VioGreen™

Blue laser : GFP, FITC, PI, Lss-Kate, VioBright FITC™

Yellow laser : PE, mCherry, dsRed, Texas Red®, PE-Cy5™, APC,mKate,PE-Cy7 PE-Vio770™, APC-Vio770™

蛍光漏れこみ補正 8 × 8 マトリックス

測定速度最大 10,000 events / second

MACS® 細胞濃縮ユニット 磁気細胞分離技術を用いた希少細胞濃縮測定装置

細胞絶対数測定 精度+/- 5 %; 再現性 (CV) <5 %

蛍光表示スケール 5 decade logarithmic scales

蛍光感度及び分解能 MESFs: <200 FITC; <100 PE;<150 APC、CV: <5%

必要最小ボリューム 25 μL

システム管理 自動スタートアップ、洗浄、シャットダウン

多検体染色 最大4 種までのMACS 試薬の自動染色

多検体処理 1 本のチューブから96 well プレートまで対応の完全自動多検体処理

使用可能チューブタイプ エッペン、5mLチューブ、96wellプレート、サンプラーラック使用時 : 5 / 15 / 50mLチューブ

2次元バーコードリーダー 試薬情報入力および自動機器制御用 標準装備

サンプル吸引部 ロボティクスニードル(Y-Z 軸移動)自動洗浄 ステーションつき

シース液消費量 2 –10 mL / minute

オペレ-ティングシステム Microsoft® Windows® / MACSQuantify™

ポート 4× USB 2.0, 2× HDMI, VGA, LAN

モニター 12 インチタッチスクリーン

データファイル形式 MACSQuant Data (MQD), またはFlow Cytometry Standard (FCS) フォーマット(FCS3.0など)

消費電力 350 W 100 V

重量 50 kg

サイズ (W × D × H) 600 × 350 × 400 mm

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関連製品

Product Order No.

Accessories

Chill 5 Rack 130-092-951

Chill 96 Rack 130-094-459

MACS Reagent Rack 4 130-094-574

MACSQuant Columns 130-094-458

MACS Calibration Beads 130-093-607

MACSQuant Running Buffer 130-092-747

MACSQuant Washing Solution 130-092-749

MACSQuant Storage Solution 130-092-748

MACSQuant Washing & Storage Solution Kit 130-092-801

MACS Bleach Solution 130-093-663

MACSQuant Starting Buffer Kit 130-094-190

Product Order No.

Antibodies, human

CD34-PE 130-081-002

CD45-VioBlue 130-092-880

CD133 / 1 (AC133)-APC 130-090-826

CD271 (LNGFR)-APC 130-091-884

CD326 (EpCAM)-FITC 130-080-301

Antibodies, mouse

Anti-mPDCA-1 pure 130-091-978

CD154 - APC 130-092-105

Anti-DCAR1-PE 130-095-317

Anti GITR pure 130-092-630

Anti-IL-17A-FITC 130-094-298

MACS Control Cocktails

MC CD34 / CD133 Stem Cell Cocktail, human 130-092-882

MC CD4 T Cell Cocktail, human 130-092-914

MC CD19 B Cell Cocktail, human 130-092-860

MC CD90.2 T Cell Cocktail, mouse 130-092-862

MC CD19 B Cell Cocktail, mouse 130-092-864

Kits for cell detection and enumeration

MSC Phenotyping Kit, human 130-095-198

EPC Enrichment and Enumeration Kit, human 130-093-477

Mo-DC Differentiation Inspector, human 130-093-567

Lineage Cell Detection Cocktail-Biotin, mouse 130-092-613

Treg Detection Kits (CD4 / CD25 / FoxP3), mouse 130-094-165

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