fundamentos de la manipulación genética
TRANSCRIPT
![Page 1: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/1.jpg)
FUNDAMENTOS DE LA MANIPULACION GENETICA
Benjamín Paz Aliaga M.D.; MSci. DMS
Profesor Emérito de la UNSA
Profesor Principal de la UCSM
2009
![Page 2: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/2.jpg)
DESNATURALIZACION Y RENATURALIZACION DEL ADN
![Page 3: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/3.jpg)
REPLICACION DEL ADN BACTERIANO
![Page 4: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/4.jpg)
DNA RNA
PROTEINA
EL DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGIA MOLECULAR
![Page 5: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/5.jpg)
FUNCIONAMIENTO DE LOS GENES
![Page 6: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/6.jpg)
EXPRESION GENICA
![Page 7: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/7.jpg)
RIBOSOMA
SUBUNIDAD MENOR
SUBUNIDAD MAYOR
![Page 8: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/8.jpg)
PARTICIPACION DEL RIBOSOMA EN LA SINTESIS PROTEICA
![Page 9: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/9.jpg)
![Page 10: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/10.jpg)
![Page 11: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/11.jpg)
REGULACION DE LA EXPRESION GENICA ( OPERON LAC)
![Page 12: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/12.jpg)
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN Y LOS LUGARES DE CORTE DEL DNA
![Page 13: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/13.jpg)
ENZIMAS DE RESTRICCION
![Page 14: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/14.jpg)
![Page 15: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/15.jpg)
ACCION DE LA ENZIMA DE RESTRICCIÓN ECO R1 SOBRE UN PLASMIDO
![Page 16: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/16.jpg)
ACCION DE LA DNA LIGASA
![Page 17: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/17.jpg)
ACCION DE LA ENZIMA DE RESTRICCION Eco R 1
![Page 18: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/18.jpg)
ELECTROFORESIS DE UN FRAGMENTO DE DNA CORTADO Y SIN CORTAR CON UNA ENZIMA DE RESTRICCIÓN
![Page 19: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/19.jpg)
SEPARACION ELECTROFO-RETICA DE LOS FRAGMENTOS DE RESTRICCION
![Page 20: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/20.jpg)
PLASMIDO
![Page 21: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/21.jpg)
MICROGRAFIA ELECTRONICA DE UN PLASMIDO BACTERIANO
![Page 22: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/22.jpg)
PLASMIDO pBR322
![Page 23: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/23.jpg)
FORMACION DE LA MOLECULA DE DNA RECOMBINANTE
![Page 24: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/24.jpg)
DNA RECOMBINANTE
![Page 25: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/25.jpg)
VECTORES DE DNA
![Page 26: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/26.jpg)
VEHICULOS DE CLONAJE
• TIPOS:
1. Plásmidos
2. Fagos
3. Cósmidos
4. Cromosoma artificial de bacteria (BAC)
5. Cromosoma artificial de levadura (YAC)
![Page 27: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/27.jpg)
VEHICULOS DE CLONAJE
• TIPOS:
– Plásmidos, que son moléculas extracromo-
somales de DNA circular que se replican autónomamente en el interior de la célula bacteriana. Tamaño del inserto a clonar: de 100 a 10,000 bp ( 0.1kb -10kb)
![Page 28: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/28.jpg)
VEHICULOS DE CLONAJE
• TIPOS:
- Fagos, que son derivados del bacteriófago λ. Moléculas de DNA lineal que tienen un sector que no es útil para la replicación y que puede ser reemplazado por el DNA extraño.
Util para clonar fragmentos de 8 a 20 kb
![Page 29: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/29.jpg)
VEHICULOS DE CLONAJE
• Cósmidos,son moléculas de DNA circular extracromosomal que combinan las carácterísticas de los plásmidos y de los fagos.
El tamaño del fragmento a clonar en estos vectores oscila entre 35 a 40 kb
![Page 30: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/30.jpg)
TAMAÑO DEL INSERTO EN DIFERENTES VEHICULOS
CLONADORES
YAC (Cromosoma artificial de levadura)100- 1000 kb
• BAC (Cromosoma artificial bacteriano)
75- 300 kb
• Cosmido 35 - 50 kb• Fago λ 8 - 20 kb• Plásmido 0.1- 10 kb
![Page 31: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/31.jpg)
MARCADORES DE PESO MOLECULAR
![Page 32: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/32.jpg)
DNA RECOMBINANTE
![Page 33: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/33.jpg)
Construcción de una molécula de ADN recombinante
![Page 34: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/34.jpg)
FORMACION DE LA MOLECULA DE ADN RECOMBINANTE
![Page 35: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/35.jpg)
PLASMIDO CON INSERTO CRECIENDO Y MULTIPLICANDOSE EN UN CULTIVO BACTERIANO
![Page 36: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/36.jpg)
CONSTRUCCION DE MOLECULAS DE ADN RECOMBINANTE
![Page 37: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/37.jpg)
CLONAJE DE FRAGMENTODE ADN EN UN PLASMIDO
![Page 38: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/38.jpg)
CLONAJE DE FRAGMENTOS DE ADN USANDO EL FAGO COMO VRECTOR
![Page 39: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/39.jpg)
DETECCION DE GENES RELACIONADOS CON LA EXPOSICIÓN DE NUTRIENTES
![Page 40: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/40.jpg)
INGENIERIA GENETICA
![Page 41: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/41.jpg)
CONSTRUCCION DE UNA BIBLIOTECA GENOMICA
![Page 42: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/42.jpg)
IDENTIFICACION DE LAS CLONAS QUE CONTIENEN LOS PLASMIDOS CON LOS FRAGMENTOS BUSCADOS
![Page 43: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/43.jpg)
TECNICA DEL SOUTHERN BLOTT
![Page 44: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/44.jpg)
IDENTIFICACION DE LOS FRAGMENTOS BUSCADOS MEDIANTE AUTORRADIOGRAFIA
![Page 45: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/45.jpg)
CLONAJE DE GENES DE DROSOPHILA
![Page 46: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/46.jpg)
COSMIDO RECOMBINANTE
![Page 47: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/47.jpg)
BIBLIOTECA GENOMICA
![Page 48: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/48.jpg)
OBTENCION DE UNA CLONA GENOMICA Y UNA CLONA cDNA
![Page 49: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/49.jpg)
FORMACION DE LA MOLECULA DE cDNA
![Page 50: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/50.jpg)
AISLAMIENTO DEL mRNA
![Page 51: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/51.jpg)
METODO PARA CONVERTIR EL mRNA en cDNA DE DOBLE HEBRA
![Page 52: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/52.jpg)
CONSTRUCCION DE UNA BIBLIOTECA GENOMICA Y UNA BIBLIOTECA cDNA
![Page 53: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/53.jpg)
CLONAJE DE UN cDNA DE DOBLE HEBRA EN UN FAGO VECTOR
![Page 54: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/54.jpg)
![Page 55: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/55.jpg)
SELECCIÓN DE UNA LIBRERÍA CON UNA SONDA DE ACIDO NUCLEICO PARA DETECTAR UN GEN
![Page 56: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/56.jpg)
EXPRESION DE UN GEN INSERTO EN UN PLASMIDO
![Page 57: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/57.jpg)
EXPRESION DE UN GEN NORMAL Y MUTADO
![Page 58: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/58.jpg)
EXPRESION DE LAS BIBLIOTECAS
![Page 59: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/59.jpg)
BIOLOGIA MOLECULAR: HACE POSIBLE EL DESPLAZAMIENTO DE LA PROTEÍNA AL GEN Y VICEVERSA PARA UN MEJOR ESTUDIO
![Page 60: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/60.jpg)
USO DE LA HIBRIDIZACION IN SITU PARA LA LOCALIZACION DE LOS GENES EN LOS CROMOSOMAS
(Cromosoma humano 5)
![Page 61: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/61.jpg)
MARCACION DE LAS CELULAS QUE EXPRESAN UN TIPO PARTICULAR DE RNA MENSAJERO
( Mensajero de la proteína ciclina)
![Page 62: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/62.jpg)
PCR
![Page 63: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/63.jpg)
PCR
![Page 64: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/64.jpg)
![Page 65: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/65.jpg)
![Page 66: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/66.jpg)
![Page 67: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/67.jpg)
USO DE PCR PARA LA DETECCION DEL HIV EN EL SUERO DE UN PACIENTE
![Page 68: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/68.jpg)
USO DE LA PCR EN MEDICINA FORENSE
![Page 69: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/69.jpg)
KNOCKOUT DE UN GEN
![Page 70: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/70.jpg)
PRODUCCION DE UN ANIMAL TRANSGENICO
![Page 71: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/71.jpg)
![Page 72: fundamentos de la manipulación genética](https://reader033.vdocuments.net/reader033/viewer/2022061214/549e332db4795951208b466b/html5/thumbnails/72.jpg)
SECUENCIACION DEL ADN POR EL METODO DE SANGER